CN113337442A

CN113337442A - 一株植物乳杆菌Lp goji及其在改善鲜枸杞果汁风味中的应用

Info

Publication number: CN113337442A
Application number: CN202110708508.7A
Authority: CN
Inventors: 顾盼; 朱保庆; 卫博; 刘雅冉; ***
Original assignee: Beijing Forestry University
Current assignee: Beijing Forestry University
Priority date: 2021-06-23
Filing date: 2021-06-23
Publication date: 2021-09-03

Abstract

本发明涉及食品微生物领域，特别涉及从鲜枸杞果汁中筛选乳酸菌以改善鲜枸杞果汁的风味。因此，本发明提供了在鲜枸杞果汁中乳酸菌筛选和乳酸菌改善鲜枸杞果汁口感，增强鲜枸杞果汁香气的应用。研究表明，植物乳杆菌Lp goji能够明显降低鲜枸杞果汁的还原糖和pH，显著增加果汁中挥发性成分的含量，提升鲜枸杞果汁的的花香、果香和甜香，改善了鲜枸杞果汁的风味。本发明具有风味改善效果显著、生产周期短、成本可控、操作快捷简单等优点。

Description

一株植物乳杆菌Lp goji及其在改善鲜枸杞果汁风味中的应用

技术领域

本发明涉及微生物领域，特别涉及一株能够改善鲜枸杞果汁风味的植物乳杆菌Lpgoji及其制剂和应用。

背景技术

枸杞是中国西北地区广泛种植的重要经济作物，具有抗氧化、增强免疫力和预防慢性疾病(如癌症，动脉粥样硬化和糖尿病)的功效。鲜枸杞果汁富含氨基酸和枸杞多糖等功能性成分，营养价值丰富，但是鲜枸杞果汁的糖酸比过高，口感不协调，且鲜枸杞果汁的的香气较弱，因此鲜枸杞果汁产品或以鲜枸杞果汁为原料的产品很少，且风味较难为大众所接受。

可以通过添加化学酸味剂和香精等手段来降低鲜枸杞果汁的pH值，增强果汁的香气，但是无法满足消费者追求天然的、无添加剂的消费需求。乳酸菌可以将糖类转化为乳酸，赋予原料适当的酸度，延长保质期的同时改善原料的风味。乳酸菌发酵菌种的选择是乳酸菌发酵工艺设置中的重要因素之一。商业乳酸菌菌种易于获得，便于研究人员快速掌握乳酸菌的发酵特点并进行实验。而原料自然发酵筛选乳酸菌的时间较长，但原料自然发酵筛选出的菌种可能具有合成细菌素或产生更好的风味，更适合该原料的发酵且在保藏期具有更高的存活率。

目前国内外关于乳酸菌发酵对果汁风味影响的研究很少，研究结果表明乳酸菌发酵可以减弱果汁令人不愉快的风味。但目前乳酸菌发酵鲜枸杞果汁的研究较少，利用乳酸菌发酵鲜枸杞果汁，或许对改善鲜枸杞果汁风味和口感有积极影响，也可以进一步指导枸杞酒发酵时的酸度调节。

有鉴于此，提出本发明。

发明内容

有鉴于此，本发明表明，筛选自自然发酵鲜枸杞果汁的乳酸菌能够通过代谢还原糖生成乳酸，降低果汁的还原糖含量和pH值，；生成β-大马士酮等挥发性香气成分，增强果汁的花香、果香和甜香，改善鲜枸杞果汁的风味。

本发明提供了乳酸菌在改善鲜枸杞果汁风味中的利用。

本发明提供一株植物乳杆菌Lp goji，其特征在于，所述植物乳杆菌Lp goji保藏编号为CGMCC NO.16221。

本发明中，所述改善包括降低还原糖含量和pH、增加挥发性成分和增强花香、果香和甜香。

本发明实施例中，所述鲜枸杞果汁的枸杞品种为‘宁杞6号’。

本发明实施例中，所述乳酸菌发酵的接种密度为10⁷CFU/mL。

本发明实施例中，所述乳酸菌发酵的温度为30℃，时间为24h。

研究表明，采用本发明中的方法进行乳酸菌发酵，鲜枸杞果汁的还原糖含量降低，pH降低，果汁中的挥发性成分含量显著上升，鲜枸杞果汁的花香、果香和甜香显著增强。因此本发明可以改善鲜枸杞果汁的风味。

生物保藏说明：

生物材料：植物乳杆菌Lp goji，已于2018年8月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC NO.16221。

相比于现有技术，本发明的有益效果在于：

1、本发明所述植物乳杆菌Lp goji分离自枸杞汁中，具有高效的降低鲜枸杞果汁还原糖和pH值的能力，能够适应鲜枸杞果汁的环境。

2、本发明所述植物乳杆菌Lp goji接种鲜枸杞果汁发酵后，挥发性香气化合物的种类以及含量都明显增加，更有利于枸杞风味改善和后期贮藏的稳定性；

3、本发明所述植物乳杆菌Lp goji接种鲜枸杞果汁发酵后，显著增强鲜枸杞果汁的花香、果香和甜香。

附图说明

图1示乳酸菌发酵鲜枸杞果汁中的活菌数

图2示乳酸菌发酵鲜枸杞果汁pH的变化

图3示乳酸菌发酵鲜枸杞果汁还原糖的变化

图4示乳酸菌发酵鲜枸杞果汁β-大马士酮的变化

图5示乳酸菌发酵鲜枸杞果汁香气轮廓的变化

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市场购买获得的常规产品。

部分术语定义

除非在下文中另有定义，本发明具体实施方式中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。

如本发明中所使用，术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。术语“由…组成”被认为是术语“包含”的优选实施方案。如果在下文中某一组被定义为包含至少一定数目的实施方案，这也应被理解为揭示了一个优选地仅由这些实施方案组成的组。

在提及单数形式名词时使用的不定冠词或定冠词例如“一个”或“一种”，“所述”，包括该名词的复数形式。

本发明中的术语“大约”表示本领域技术人员能够理解的仍可保证论及特征的技术效果的准确度区间。该术语通常表示偏离指示数值的±10％，优选±5％。

此外，说明书和权利要求书中的术语第一、第二、第三、(a)、(b)、(c)以及诸如此类，是用于区分相似的元素，不是描述顺序或时间次序必须的。应理解，如此应用的术语在适当的环境下可互换，并且本发明描述的实施方案能以不同于本发明描述或举例说明的其它顺序实施。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1菌种分离鉴定

实验原料：枸杞鲜果，采自宁夏森淼科技集团股份有限公司的枸杞园。

实验试剂：牛肉膏、酵母浸粉、蛋白胨、碳酸钙、磷酸氢二钾、柠檬酸氢二铵、无水硫酸镁、一水合硫酸锰、吐温-80、放线菌酮、氯化钠购自上海麦克林生化科技有限公司；葡萄糖、乙酸钠购自北京化工厂；琼脂购自北京科百奥生物有限公司。

菌株分离：采摘成熟度适中且无霉变的枸杞鲜果，在无菌环境下轻微破碎后放入1L已灭菌的玻璃瓶中，瓶口加有液封装置，室温下自然发酵。采用平板涂布法每24h取自然发酵枸杞汁1mL，加入到装有9mL生理盐水的试管内，梯度稀释至10^-3，10^-4，10^-5，10^-6，10^-7倍后，分别吸取50μL稀释后的菌液，均匀涂布到添加1.5％琼脂、0.04％的溴甲酚紫和0.01％放线菌酮的MRS琼脂培养基上，在37℃的恒温培养箱中厌氧培养48h。挑取平板上培养基颜色为黄色的单菌落，在添加1.5％琼脂的MRS琼脂培养基上划线分离纯化3次。挑取纯化后的单菌落进行革兰氏染色和过氧化氢酶活性测定。得到3株革兰氏阳性且过氧化氢酶阴性的产酸杆状细菌。将其纯化后的单菌落接种于MRS斜面培养基上，4℃保藏。

菌株鉴定：将分离纯化后的3株产酸杆状细菌接种到液体MRS培养基中，37℃培养8～12h，吸取2mL菌液于无菌离心管中，6000rpm离心5min，倒掉上层培养基，保留菌体，用细菌基因组DNA提取试剂盒提取筛选菌株的基因组DNA。用所提取的基因组作为模板进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)扩增，选用细菌通用引物，正向引物为27F：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’，反向引物为1492R：5’-TACGGCTACCTTGTTACGACTT-3’，PCR扩增片段约为1500bp。测序工作由北京睿博兴科生物技术有限公司完成。

使用NCBI Blast程序将3株菌株的16S rDNA序列与GenBank数据库中的已知细菌16SrRNA进行序列比较，其中1株细菌与植物乳杆菌的同源性为99.9％，另外2株细菌分别与食物魏斯氏菌和果糖嗜果糖乳酸细菌同源性为99.9％。因此，结合菌落形态和生理生化特征，这3株菌株分别为植物乳杆菌、食物魏斯氏菌(Weissella cibaria)和果糖嗜果糖乳酸细菌(Fructobacillus fructosus)，分别命名为植物乳杆菌Lp goji、食物魏斯氏菌goji和果糖嗜果糖乳酸细菌goji，其中植物乳杆菌Lp goji的16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示：

GTGCTATAATGCAAGTCGAACGAACTCTGGTATTGATTGGTGCTTGCATCATGATTTACATTTGAGTGAGTGGCGAACTGGTGAGTAACACGTGGGAAACCTGCCCAGAAGCGGGGGATAACACCTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAACAACTTGGACCGCATGGTCCGAGCTTGAAAGATGGCTTCGGCTATCACTTTTGGATGGTCCCGCGGCGTATTAGCTAGATGGTGGGGTAACGGCTCACCATGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGGTAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAACTCTGTTGTTAAAGAAGAACATATCTGAGAGTAACTGTTCAGGTATTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAAGAAGTGCATCGGAAACTGGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGTATGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATACCGTAAACGATGAATGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATACTATGCAAATCTAAGAGATTAGACGTTCCCTTCGGGGACATGGATACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATTATCAGTTGCCAGCATTAAGTTGGGCACTCTGGTGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAACGAGTTGCGAACTCGCGAGAGTAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCAAAGTCGGTGGGGTAACCTTTTAGGAACCAGCCGCCTAAGGTGCAC

将从自然发酵鲜枸杞果汁中分离得到的3株乳酸菌制成冻干菌粉，植物乳杆菌Lpgoji现保藏于CGMCC和北京林业大学食品生物工程创新研究室；食物魏斯氏菌goji和果糖嗜果糖乳酸细菌goji现保藏于北京林业大学食品生物工程创新研究室。

实施例2接种乳酸菌发酵

鉴于乳酸菌在鲜枸杞果汁中发酵的案例较少，探究植物乳杆菌Lp goji在鲜枸杞果汁乳酸菌发酵中的作用是非常重要的。本发明具体实验组别设置如下：枸杞果汁组、植物乳杆菌Lp goji组、食物魏斯氏菌goji组和果糖嗜果糖乳酸细菌goji组，所述枸杞果汁组为鲜枸杞果汁不接种乳酸菌；所述各乳酸菌组分别为各种乳酸菌发酵的鲜枸杞果汁。

样品接种前处理：挑取保存于MRS斜面的乳酸菌接种至MRS液体培养基中活化2次，于37℃传代培养10～12h后将活化后的乳酸菌以5000r/min转速离心10min收集，使用生理盐水润洗菌体2次后，以10⁷CFU/mL接种于鲜枸杞果汁中，

样品发酵：发酵装置液封以隔绝空气，30℃恒温发酵24h。取发酵后的鲜枸杞果汁于4℃下储藏21d，以测定发酵后果汁冷储之后风味的稳定性。

实施例3乳酸菌发酵鲜枸杞果汁中的活菌数

活性乳酸菌是乳酸菌发酵果蔬汁中重要的功能性成分，具有维持肠道微生物菌群平衡，促进新陈代新，增强免疫调节的重要功能。GB7101-2015中规定，活性乳酸菌饮料中活性乳酸菌数目应大于或等于10⁶CFU/mL。同时，发酵果汁中活菌数越高，乳酸菌对基质的适应性越好，生长代谢越旺盛，对果汁风味的改善作用越明显。

用倾注法测定各组果汁中活性乳酸菌的数量。将待测果汁摇匀后按照一系列10倍梯度稀释，选取10^-6，10^-7，10^-8的菌悬液1mL加入无菌培养皿中，再倒入15～20mL的45℃熔化的MRS琼脂培养基，在培养基凝固前混匀。待培养基凝固后，倒置放入37℃培养箱中培养48h。3株乳酸菌发酵鲜枸杞果汁的活菌数如图1所示，由图1可知，植物乳杆菌Lp goji发酵果汁中的活菌数最高，其次的果糖嗜果糖乳酸细菌goji，这两种乳酸菌发酵后活菌数均高于10⁹CFU/mL。而食物魏斯氏菌goji的活菌数最低，但3种乳酸菌均满足GB7101-2015中对于活性乳酸菌饮料活菌数的规定(≥10⁶CFU/mL)。结果表明活性乳酸菌果汁中的植物乳杆菌Lp goji代谢最旺盛，对基质的适应性最好，对鲜枸杞果汁风味的潜在改善作用最明显。

实施例4乳酸菌发酵鲜枸杞果汁pH值和还原糖的变化

鲜枸杞果汁含糖量高，酸度低，口感不协调。果汁中乳酸菌可以将还原糖经乳酸发酵转化为乳酸，从而降低果汁的还原糖含量，提高果汁的酸度，降低果汁的pH值，改善鲜枸杞果汁的口感。同时发酵果汁pH值和还原糖含量的变化也可以体现乳酸菌的生长代谢情况。pH值和还原糖含量下降越多，乳酸菌在果汁中的生长代谢越旺盛，对基质的适应性越强。采用pH计测定果汁发酵前后的pH变化，结果如图2所示。鲜枸杞果汁的pH为5.92，经植物乳杆菌Lp goji发酵后，果汁pH下降至3.90，变化最大。而经食物魏斯氏菌goji和果糖嗜果糖乳酸细菌goji发酵后，果汁pH分别为4.48和4.53。采用高效液相色谱法测定果汁中的还原糖含量。结果如图3所示。鲜枸杞果汁中的还原糖为141.44g/L，经植物乳杆菌goji发酵后，果汁的还原糖含量下降至128.81g/L，而食物魏斯氏菌goji和果糖嗜果糖乳酸细菌goji发酵后果汁的还原糖含量分别为134.40g/L和135.52g/L。3种乳酸菌发酵后，植物乳杆菌goji消耗利用还原糖最多。由此可知，植物乳杆菌Lp goji对基质的适应性更强，生长代谢更旺盛，果汁pH值和还原糖含量下降最多，对鲜枸杞果汁口感的改善(协调糖酸比)最明显。

实施例5乳酸菌发酵鲜枸杞果汁β-大马士酮的变化

鲜枸杞果汁具有明显的中草药气味，但花香果香较弱，严重影响了人们引用鲜枸杞果汁的感官体验。先前的研究表明，乳酸菌发酵可以赋予基质更丰富的香气。先前研究发现，乳酸菌发酵鲜枸杞果汁可以产生β-大马士酮。β-大马士酮是乳酸菌发酵鲜枸杞果汁中重要的呈香物质。β-大马士酮的含量采用顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气相质谱(GC-MS)法测定。β-大马士酮在水溶液中具有甜香、花香和果香的愉快气味。鲜枸杞果汁中不含有β-大马士酮，3种乳酸菌发酵后枸杞果汁中的β-大马士酮含量测定结果如图4所示。结果表明植物乳杆菌Lp goji发酵果汁中的β-大马士酮含量(2.17μg/L)是食物魏斯氏菌goji(0.88μg/L)和果糖嗜果糖乳酸细菌goji(0.90μg/L)发酵果汁中β-大马士酮含量的2倍以上。

实施例6乳酸菌发酵鲜枸杞果汁香气轮廓的变化

先前研究表明，乳酸菌发酵产生的挥发性成分可以增强基质的香气，改善基质的风味。果汁发酵前后香气检测采用顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气相质谱(GC-MS)法测定。鲜枸杞果汁经乳酸菌发酵后，新增了25种挥发物，其中包括1种酮、9种醇、3种酯、3种苯环类化合物、3种酚、1种酸、2种醚、1种降异戊二烯类化合物和2种萜。计算挥发物的浓度并根据其在水溶液中的香气感知阈值，可以得到挥发物的香气值，香气值的大小反映了化合物对果汁香气的贡献。根据挥发物的呈香特点绘制果汁发酵前后的香气轮廓图，结果如图5所示。

果汁的香气被分为青草香、花香、化学香、脂肪香、果香和甜香6个香气类型。鲜枸杞果汁中主要的香气类型为化学香、脂肪香和果香。经乳酸菌发酵后，果汁的花香、果香和甜香显著增强，成为发酵鲜枸杞果汁主要的香气类型。植物乳杆菌Lp goji发酵果汁的青草香显著高于鲜果汁，而食物魏斯氏菌goji和果糖嗜果糖乳酸细菌goji发酵果汁的青草香与鲜果汁相比未发现显著性差异。3种乳酸菌发酵果汁的花香、果香和甜香明显高于鲜果汁，且植物乳杆菌Lp goji发酵果汁的花香、果香和甜香香气值显著高于食物魏斯氏菌goji和果糖嗜果糖乳酸细菌goji发酵果汁。食物魏斯氏菌goji和果糖嗜果糖乳酸细菌goji发酵果汁的花香、果香和甜香香气值相近，没有显著性差异。乳酸菌发酵后果汁的化学香也显著升高，果糖嗜果糖乳酸细菌goji发酵果汁的化学香香气值是其它两种乳酸菌发酵果汁的2倍以上，果糖嗜果糖乳酸细菌goji发酵果汁过高的化学香造成了其果汁香气的不协调。果汁发酵后，脂肪香为发生显著性变化。综合果汁的6个香气类型，植物乳杆菌Lp goji发酵鲜枸杞果汁的花香、果香和甜香最高，且6种香气较平衡，显著增强了果汁的整体香气。

以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。

序列表

<110> 北京林业大学

<120> 一株植物乳杆菌Lp goji及其在改善鲜枸杞果汁风味中的应用

<130> 12

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1455

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 1

gtgctataat gcaagtcgaa cgaactctgg tattgattgg tgcttgcatc atgatttaca 60

tttgagtgag tggcgaactg gtgagtaaca cgtgggaaac ctgcccagaa gcgggggata 120

acacctggaa acagatgcta ataccgcata acaacttgga ccgcatggtc cgagcttgaa 180

agatggcttc ggctatcact tttggatggt cccgcggcgt attagctaga tggtggggta 240

acggctcacc atggcaatga tacgtagccg acctgagagg gtaatcggcc acattgggac 300

tgagacacgg cccaaactcc tacgggaggc agcagtaggg aatcttccac aatggacgaa 360

agtctgatgg agcaacgccg cgtgagtgaa gaagggtttc ggctcgtaaa actctgttgt 420

taaagaagaa catatctgag agtaactgtt caggtattga cggtatttaa ccagaaagcc 480

acggctaact acgtgccagc agccgcggta atacgtaggt ggcaagcgtt gtccggattt 540

attgggcgta aagcgagcgc aggcggtttt ttaagtctga tgtgaaagcc ttcggctcaa 600

ccgaagaagt gcatcggaaa ctgggaaact tgagtgcaga agaggacagt ggaactccat 660

gtgtagcggt gaaatgcgta gatatatgga agaacaccag tggcgaaggc ggctgtctgg 720

tctgtaactg acgctgaggc tcgaaagtat gggtagcaaa caggattaga taccctggta 780

gtccataccg taaacgatga atgctaagtg ttggagggtt tccgcccttc agtgctgcag 840

ctaacgcatt aagcattccg cctggggagt acggccgcaa ggctgaaact caaaggaatt 900

gacgggggcc cgcacaagcg gtggagcatg tggtttaatt cgaagctacg cgaagaacct 960

taccaggtct tgacatacta tgcaaatcta agagattaga cgttcccttc ggggacatgg 1020

atacaggtgg tgcatggttg tcgtcagctc gtgtcgtgag atgttgggtt aagtcccgca 1080

acgagcgcaa cccttattat cagttgccag cattaagttg ggcactctgg tgagactgcc 1140

ggtgacaaac cggaggaagg tggggatgac gtcaaatcat catgcccctt atgacctggg 1200

ctacacacgt gctacaatgg atggtacaac gagttgcgaa ctcgcgagag taagctaatc 1260

tcttaaagcc attctcagtt cggattgtag gctgcaactc gcctacatga agtcggaatc 1320

gctagtaatc gcggatcagc atgccgcggt gaatacgttc ccgggccttg tacacaccgc 1380

ccgtcacacc atgagagttt gtaacaccca aagtcggtgg ggtaaccttt taggaaccag 1440

ccgcctaagg tgcac 1455

Claims

1.一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Lp goji，其特征在于，其保藏编号为CGMCC No.16221。

2.一种发酵菌剂或组合物，其特征在于，包含权利要求1所述的植物乳杆菌Lp goji。

3.权利要求1所述的植物乳杆菌Lp goji在果汁发酵中的应用。

4.权利要求1所述的植物乳杆菌Lp goji在降低果汁还原糖含量的应用。

5.权利要求1所述的植物乳杆菌Lp goji在降低果汁pH值的应用。

6.权利要求1所述的植物乳杆菌Lp goji在增加果汁挥发性香气成分β-大马士酮中的应用。

7.权利要求3-6中所述果汁为鲜枸杞果汁。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述乳酸菌发酵中，乳酸菌的接种密度为10⁷CFU/mL，温度为30℃，发酵时间为24h。