CN113336735A - 一种尿石素类化合物、制备方法、药物组合物及用途 - Google Patents

一种尿石素类化合物、制备方法、药物组合物及用途 Download PDF

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Abstract

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种尿石素类化合物、制备方法、药物组合物及用途。该尿石素类化合物为通式I所示的化合物或其旋光异构体、对映体、非对映体、外消旋体或外消旋混合物，或其药学上可接受的盐。本发明所提供的尿石素类化合物，具有较好的PDE2抑制活性，酶学水平IC50达到3.67μM，能够用于治疗中枢神经***疾病和大脑的神经变性过程疾病，作为活性成分制备抑制PDE2活性的药物。

Description

一种尿石素类化合物、制备方法、药物组合物及用途
技术领域
本发明属于药物化学领域，具体涉及一种尿石素类化合物、制备方法、药物组合物及用途。
背景技术
磷酸二酯酶(PDEs)有11个家族，其是体内唯一可以水解环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的超级酶家族，其中，磷酸二酯酶Ⅱ(PDE2)是双底物酶，能同时水解环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷，PDE2在人体内多个器官中分布，并且参与多种生理功能，可作为后续研究的潜在的药物靶标。磷酸二酯酶抑制剂是一种以抑制磷酸二酯酶活性的药物，其通过抑制PDEs的活性，调节细胞内环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的浓度水平，从而影响生理过程，达到治疗疾病的目的。PDE2抑制剂在阿尔兹海默症、血液病等领域有着广泛的应用。但是由于药理活性差、血脑屏障透过率低等原因，目前市面上没有PDE2抑制剂成品药，因此，如果能研究出效果好的PDE2抑制剂，将有着极大的社会效益和经济效益。
尿石素类化合物是鞣花单宁或鞣花酸及其衍生物的代谢产物。已有多篇文献报道尿石素类化合物在大脑神经保护中的作用，比如，Ravikanth Velagapudi(MolecularNutrition&Food Research,2019,63(10):1801237.)等人研究成果表明，尿石素A可以激活神经保护机制，例如在分化的ReNcell VM人类神经细胞中激活SIRT-1，起到保护作用；Verzelloni,E(Mol.Nutr.Food Res.2011,55(Suppl.1),S35.)和Liu,W(Food Funct.2014,5,2996.)等人研究成果表明，尿石素A和B可以减少晚期糖基化终产物形成的能力因而参与脑神经保护作用等。已证实，尿石素能够用于治疗人体的多种病症。但是，目前尚无尿石素及其衍生物作为PDE2抑制剂的研究报道。并且，现有的尿石素的合成主要采用微生物制药，具有周期长、成本高的缺点。
发明内容
为解决现有技术的不足，本发明提供一种尿石素类化合物、制备方法、药物组合物及用途。该尿石素类化合物具有较好的PDE2抑制活性，能够用于治疗中枢神经***疾病和大脑的神经变性过程疾病，作为活性成分制备抑制PDE2活性的药物。
为解决现有技术的不足，本发明提供的技术方案为：
本发明一方面提供一种尿石素类化合物，为化合物Ⅰ或其旋光异构体、对映体、非对映体、外消旋体或外消旋混合物，或其药学上可接受的盐：
Figure BDA0003105489390000021
其中，
R1为氢原子、甲氧基或甲基中的一种；
R2为C2～C9烷基、甲硫基取代的C2～C9烷基、环烷基取代的C1～C9烷基、乙基酯基取代的C1～C9烷基、杂环基取代的C1～C9烷基、羟基取代的C1～C9烷基、芳香基取代的C1～C9烷基或C2～C9杂环基中的一种。
优选的，所述化合物Ⅰ选自式1a～1q、2a～2u或3a～3j所示的化合物：
Figure BDA0003105489390000022
Figure BDA0003105489390000031
Figure BDA0003105489390000041
本发明的另一目的是提供一种尿石素类化合物的制备方法，包括：
步骤S1：将化合物Ⅱ、4-溴苯-1,3-二醇、催化剂、碱性水溶液和1,2-二甲氧基乙烷混合均匀后，在90～100℃下、密封条件下反应9～12h得到化合物Ⅲ，合成路线如下式所示：
Figure BDA0003105489390000042
其中，R1为氢原子、甲氧基或甲基中的一种；
步骤S2:室温下，将化合物Ⅲ溶于无水DMF中，加入K2CO3搅拌均匀后，加热，滴加通式为R2Br的卤代物，在80～120℃下反应3.5～30h得到前述的化合物Ⅰ，合成路线如下式所示：
Figure BDA0003105489390000043
其中，R2为C2～C9烷基、甲硫基取代的C2～C9烷基、环烷基取代的C1～C9烷基、乙基酯基取代的C1～C9烷基、杂环基取代的C1～C9烷基、羟基取代的C1～C9烷基、芳香基取代的C1～C9烷基或C2～C9杂环基中的一种。
优选的，所述步骤S1中，所述化合物Ⅱ与4-溴苯-1,3-二醇的摩尔比为1.5～1:1。
优选的，所述步骤S1中，
所述催化剂为四(三苯基膦)钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯或双三苯基磷二氯化钯中的一种或多种；
所述催化剂与化合物Ⅱ的摩尔比为1～5:100。
优选的，所述步骤S1中，所述催化剂为四(三苯基膦)钯。
优选的，所述步骤S1中，
所述碱性水溶液为Na2CO3水溶液、K2CO3水溶液或K3PO4水溶液中的一种；
所述碱性水溶液的浓度为3mol/L。
优选的，所述步骤S2中，所述化合物Ⅲ、K2CO3、R2Br的摩尔比为1:1～1.5:1～1.5。
本发明的又一目的是提供一种药物组合物，包括治疗有效量的前述的尿石素类化合物和药物上可接受的载体、佐剂或媒剂。
本发明的再一目的是提供一种前述的尿石素类化合物在制备抑制PDE2的药物中的应用。
本发明的有益效果：
本发明所提供的尿石素类化合物，具有较好的PDE2抑制活性，酶学水平IC50达到3.67μM，血脑屏障透过率高，体内吸收好，能够用于治疗中枢神经***疾病，比如老年痴呆和精神***症，也可用来治疗大脑的神经变性过程疾病，作为活性成分制备抑制PDE2活性的药物。
本发明提供了一种制备尿石素类化合物的新方法，方法简单，产率高，克服了尿石素类化合物来源方法单一的现状，为更好的利用尿石素类化合物奠定了基础。
具体实施方式
下面结合实施方式对本发明作进一步描述。以下实施方式仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。
本发明实施例提供一种尿石素类化合物，尿石素类化合物为化合物I或其旋光异构体、对映体、非对映体、外消旋体或外消旋混合物，或其药学上可接受的盐：
Figure BDA0003105489390000051
其中，R1为氢原子、甲氧基或甲基中的一种；
R2为C2～C9烷基、甲硫基取代的C2～C9烷基、环烷基取代的C1～C9烷基、乙基酯基取代的C1～C9烷基、杂环基取代的C1～C9烷基、羟基取代的C1～C9烷基、芳香基取代的C1～C9烷基或C2～C9杂环基中的一种。
在本发明的可选实施例中，化合物I选自式1a～1b、2a～2u或3a～3j所示的化合物：
Figure BDA0003105489390000061
Figure BDA0003105489390000071
Figure BDA0003105489390000081
本发明实施例还提供一种尿石素类化合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤S1：将化合物Ⅱ与4-溴苯-1,3-二醇、催化剂、碱性水溶液和1,2-二甲氧基乙烷混合均匀后，在90℃～100℃下、密封条件下反应9～12h得到化合物Ⅲ，合成路线如下式所示：
Figure BDA0003105489390000082
其中，R1为氢原子、甲氧基或甲基中的一种；
步骤S2:室温下，将化合物Ⅲ溶于无水DMF中，加入K2CO3搅拌均匀后，加热，滴加通式为R2Br的卤代物，在80～120℃下反应3.5～30h得到化合物I，合成路线如下式所示：
Figure BDA0003105489390000083
其中，R2为C2～C9烷基、甲硫基取代的C2～C9烷基、环烷基取代的C1～C9烷基、乙基酯基取代的C1～C9烷基、杂环基取代的C1～C9烷基、羟基取代的C1～C9烷基、芳香基取代的C1～C9烷基或C2～C9杂环基中的一种。
在本发明的可选实施例中，步骤S1还包括对化合物Ⅲ进行分离提纯的步骤，具体为：
薄层色谱监测到反应结束时，将反应溶液滴加到冰水混合物中，混合物用乙酸乙酯萃取，然后用水，饱和食盐水洗涤，并用无水MgSO4干燥。减压蒸发溶剂后，分别用甲醇和乙酸各重结晶1h，残余物用硅胶(200-300目)柱色谱处理，得到米黄色的化合物Ⅲ。
在本发明的可选实施例中，步骤S2还包括对化合物I进行分离提纯的步骤，具体为：
薄层色谱监测到反应结束时，将反应液倒入冰水中，有白色絮状固体生成。冷藏静置后，抽滤，干燥，得粗产品目标产物化合物I，经硅胶(200-300目)柱色谱处理后得到纯目标产物化合物I。
在本发明的可选实施例中，步骤S1中，化合物Ⅱ与4-溴苯-1,3-二醇的摩尔比为1.5～1:1。
在本发明的可选实施例中，步骤S1中，催化剂为四(三苯基膦)钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯或双三苯基磷二氯化钯中的一种或多种，优选四(三苯基膦)钯。
在本发明的可选实施例中，步骤S1中，催化剂与化合物Ⅱ的摩尔比为1～5:100。
在本发明的可选实施例中，步骤S1中，碱性水溶液为Na2CO3水溶液、K2CO3水溶液或K3PO4水溶液中的一种，碱性水溶液的浓度为3mol/L。
在本发明的可选实施例中，步骤S2中，化合物Ⅲ与K2CO3的摩尔比为1:1～1.5。
在本发明的可选实施例中，步骤S2中，化合物Ⅲ与R2Br的摩尔比为1:1～1.5。
本发明实施例还提供一种药物组合物，包括治疗有效量的前述的尿石素类化合物和药物上可接受的载体、佐剂或媒剂。该药物组合物具有良好的PDE2抑制活性。
本发明提供的尿石素类化合物可用于制备抑制PDE2的药物。
本发明测试了化合物I的酶水平IC50，以此表征化合物I的PDE2抑制活性。采用Alphascreen试剂盒法(许煌,许晓双,高英,等.以PDE2为靶标的抑制剂药物高通量筛选模型的建立[J].中国新药杂志,2020,29(10):1175-1180.)，BAY 60-7550(CAS No.:439083-90-6)被用作参考化合物，IC50为8.4nM。根据检测结果，实验体系稀释倍数及公式计算抑制率，计算化合物的IC50。
下述实施例中所用试剂均为市售，其中BAY 60-7550购自MCE公司，纯度大于98％。
实施例1：
中间体Ⅳ的制备：
Figure BDA0003105489390000101
将2-(甲氧基羰基)苯硼酸(60mmol)，4-溴苯-1,3-二醇(44mmol，8.3g)，四(三苯基膦)钯(2.4mmol，2.8g)，3M Na2CO3水溶液(100mL)和1,2-二甲氧基乙烷(200mL)混合后在100℃下封管搅拌反应12h。通过TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)监测反应进程。反应结束时，将反应溶液滴加到冰水混合物中，混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，然后用水，饱和食盐水洗涤，并用无水MgSO4干燥。减压蒸发溶剂后，分别用甲醇和乙酸各重结晶1h，残余物用硅胶(200-300目)柱色谱法处理(石油醚∶乙酸乙酯＝10:1)，得到中间体Ⅳ(2.8g，收率30.0％)。
中间体Ⅳ的表征数据：
m.p.250–251℃；
1H NMR：(300MHz,DMSO-d6)δ＝10.36(s,1H),8.27(dt,J＝8.0,3.0Hz,1H),8.21–8.15(m,2H),7.89(m,1H),7.57(m,1H),6.85(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),6.76(d,J＝3.0Hz,1H)；
13C NMR：(75MHz,DMSO-d6)δ＝161.06,160.32,152.57,135.65,135.52,130.11,128.04,125.21,122.02,119.39,113.60,109.82,103.40；
HRMS(ESI)m/z calcd for C13H9O3 +[M+H]+:213.0473；found:213.0470；
Chromatographic purity:98.0％(HPLC).
实施例2
化合物3-仲丁氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮(式1b)的制备：
将无水DMF(30mL)加入250mL圆底烧瓶中，加入中间体Ⅳ(9.4mmol，2.00g)，无水K2CO3(12.2mmol，1.7g)和2-溴丁烷(12.2mmol)，并将温度控制在120℃下，反应6h。通过TLC(石油谜：乙酸乙酯＝3∶1)监测反应。反应结束后，将反应溶液加至冰水混合物中，得到棕色固体。抽滤并干燥后，通过柱色谱法(200-300目)纯化棕色固体，得到式1b化合物，收率71％。
3-仲丁氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮的表征数据：
M.p.73.2–75.8℃；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.36–8.19(m,3H),7.93–7.88(m,1H),7.62–7.57(m,1H),7.00–6.97(m,2H),4.60–4.53(m,1H),1.74–1.58(m,2H),1.28(d,J＝8.0Hz,3H),0.95(t,J＝4.0Hz,3H)；
13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ＝160.97,160.25,152.58,135.73,135.24,130.12,128.41,125.19,122.31,119.64,113.83,110.83,103.21,75.23,28.89,19.35,9.92；
HRMS(ESI)m/z calcd for C17H17O3 +[M+H]+:269.1099；found:269.1095；
Chromatographic purity:99.2％(HPLC).
实施例3
3-丁氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮(式1c)的制备：
将无水DMF(30mL)加入250mL圆底烧瓶中，加入中间体Ⅳ(9.4mmol，2.00g)，无水K2CO3(12.2mmol，1.7g)和溴丁烷(12.2mmol)，并将温度控制在120℃下，反应8h。通过TLC(石油谜：乙酸乙酯＝3∶1)监测反应。反应结束后，将反应溶液加至冰水混合物中，得到棕色固体。抽滤并干燥后，通过柱色谱法(200-300目)纯化棕色固体，得到式1c化合物，收率56％。
3-丁氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮的表征数据：
M.p.53.6–55.5℃.
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ＝8.34–8.20(m,3H),7.91(t,J＝9.0Hz,1H),7.60(t,J＝9.0Hz,1H),7.01–6.99(d,J＝6.0Hz,2H),4.09(t,J＝6.0Hz,2H),1.74(t,J＝9.0Hz,2H),1.50–1.42(m,2H),0.95(t,J＝9.0Hz,3H)；
13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ＝161.13,160.98,152.54,135.78,135.25,130.14,128.49,125.16,122.39,119.67,113.13,110.98,102.34,68.30,31.03,19.17,14.15；
HRMS(ESI)m/z calcd for C17H17O3 +[M+H]+:269.1099；found:269.1095.
Chromatographic purity:98.7％(HPLC).
实施例4
化合物3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲氧基)-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮(式1f)的制备：
将无水DMF(30mL)加入250mL圆底烧瓶中，加入中间体Ⅳ(9.4mmol，2.00g)，无水K2CO3(12.2mmol，1.7g)和4-溴甲基四氢吡喃(12.2mmol)，并将温度控制在120℃下，反应6h。通过TLC(石油谜：乙酸乙酯＝3∶1)监测反应。反应结束后，将反应溶液加至冰水混合物中，得到棕色固体。抽滤并干燥后，通过柱色谱法(200-300目)纯化棕色固体，得到式1f化合物，收率55％。
化合物3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲氧基)-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮的表征数据：
M.p.133.0–134.8℃.
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ＝8.34(d,J＝9.0Hz,1H),7.96(dd,J＝18.0,9.0Hz,2H),7.78(t,J＝7.5Hz,1H),7.50(t,J＝7.5Hz,1H),6.91–6.82(m,2H),4.04(dd,J＝12.0,9.0Hz,2H),3.87(t,J＝6.0Hz,2H),3.46(t,J＝12.0Hz,2H),2.17–2.06(m,1H),1.80(d,J＝3.0Hz,2H),1.57–4.13(m,2H)；
13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ＝161.09,160.97,152.53,135.79,135.22,130.15,128.53,125.19,122.41,119.69,113.13,111.08,102.44,73.00,67.06,34.77,29.60；
HRMS(ESI)m/z calcd for C19H19O4+[M+H]+:311.1205；found:311.1201.
Chromatographic purity:97.3％(HPLC).
实施例5
化合物3-环戊基甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮(式1o)的制备:
将无水DMF(30mL)加入250mL圆底烧瓶中，加入中间体Ⅳ(9.4mmol，2.00g)，无水K2CO3(12.2mmol，1.7g)和溴甲基环戊烷(12.2mmol)，并将温度控制在120℃下，反应6h。通过TLC(石油谜：乙酸乙酯＝3∶1)监测反应。反应结束后，将反应溶液加至冰水混合物中，得到棕色固体。抽滤并干燥后，通过柱色谱法(200-300目)纯化棕色固体，得到式1o化合物，收率77％。
3-环戊基甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮的表征数据:
M.p.90.6–91.2℃.
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ＝8.34(dd,J＝9.0,1.5Hz,1H),7.98(dd,J＝6.0,1.2Hz,1H),7.91(d,J＝9.0Hz,1H),7.79–7.74(m,1H),7.51–7.45(m,1H),6.90(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),6.83(d,J＝3.0Hz,1H),3.89(d,J＝6.0Hz,2H),2.47(m,1H),1.96–1.79(m,2H),1.752–1.55(m,4H),1.44–1.32(m,2H)；
13C NMR(75MHz,CDCl3)δ＝161.61,161.19,152.56,135.25,134.85,130.52,127.61,123.67,121.05,119.89,112.87,110.87,102.12,72.67,38.90,29.48,25.45；
HRMS(ESI)m/z calcd for C19H19O3 +[M+H]+:295.1256；found:295.1251.
Chromatographic purity:98.4％(HPLC).
实施例6
中间体Ⅴ的制备：
Figure BDA0003105489390000121
2-甲氧基羰基-4-甲氧基苯硼酸(60mmol)，4-溴苯-1,3-二醇(44mmol，8.3g)，四(三苯基膦)钯(2.4mmol，2.8g)，3M Na2CO3水溶液(100mL)和1,2-二甲氧基乙烷(200mL)混合后，在100℃下封管搅拌反应12h。通过TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)监测反应进程。反应结束时，将反应溶液滴加到冰水混合物中，混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，然后用水，饱和食盐水洗涤，并用无水MgSO4干燥。减压蒸发溶剂后，分别用甲醇和乙酸各重结晶1h，残余物用硅胶(200-300目)柱色谱法处理(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得到中间体Ⅴ(2.66g,收率25.0％)。
中间体Ⅴ的表征参数：
m.p.276.2～278.8℃.
1H NMR：(300MHz,DMSO-d6)δ＝10.22(s,1H),8.21(d,J＝9.0Hz,1H),8.09(d,J＝8.0Hz,1H),7.60(d,J＝3.0Hz,1H),7.49(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),6.83(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),6.75(d,J＝3.0Hz,1H),3.89(s,3H).
13C NMR：(75MHz,DMSO-d6)δ＝160.97,159.41,158.94,151.62,128.97,124.57,124.36,123.99,120.48,113.55,111.27,109.96,103.30,56.01.
HRMS(ESI)m/z calcd for C14H10O4 +[M+H]+:243.0579；found:243.0575.
Chromatographic purity:97.2％(HPLC).
实施例7
化合物3-丁氧基-8-甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮(2d)的制备
将无水DMF(30mL)加入250mL圆底烧瓶中，加入中间体Ⅴ(9.4mmol，2.28g)，无水K2CO3(12.2mmol，1.7g)和溴丁烷(12.2mmol)，并将温度控制在80℃下，将反应搅拌12h。通过TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)监测反应。反应结束后，将反应溶液加至冰水混合物中，得到棕色固体。抽滤并干燥后，通过硅胶(200-300目)柱色谱法纯化棕色固体，得到化合物2d，收率65％。
3-丁氧基-8-甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮的表征数据：
M.p.102.5–104.4℃.
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ＝8.26(d,J＝9.0Hz,1H),8.19–8.15(m,1H),7.62(d,J＝3.0Hz,1H),7.51(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),6.98(s,1H),6.96(t,J＝4.5Hz,1H),4.07(t,J＝6.0Hz,2H),3.90(s,3H),1.78–1.68(m,2H),1.52–1.3840(m,2H),0.95(t,J＝7.5Hz,3H)；
13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ＝160.84,160.25,159.20,151.52,128.58,124.43,124.29,124.24,120.75,112.99,111.31,111.08,102.21,68.21,56.02,31.06,19.17,14.14；
HRMS(ESI)m/z calcd for C18H19O4 +[M+H]+:299.1205；found:299.1201.
Chromatographic purity:99.1％(HPLC).
实施例8
化合物8-甲氧基-3-(2-(甲硫基)乙氧基)-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮(式2h)的制备：
将无水DMF(30mL)加入250mL圆底烧瓶中，加入中间体Ⅴ(9.4mmol，2.28g)，无水K2CO3(12.2mmol，1.7g)和2-溴乙基甲基硫醚(12.2mmol)，并将温度控制在120℃下，将反应搅拌22h。通过TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)监测反应。反应结束后，将反应溶液加至冰水混合物中，得到棕色固体。抽滤并干燥后，通过硅胶(200-300目)柱色谱法纯化棕色固体，得到化合物2h，收率40％。
8-甲氧基-3-(2-(甲硫基)乙氧基)-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮的表征数据：
M.p.110.1–111.8℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ＝8.27(d,J＝9Hz,1H),8.19(d,J＝9.0Hz,1H),7.62(d,J＝3.0Hz,1H),7.52(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),7.03–6.98(m,2H),4.26(t,J＝6.0Hz,2H),3.90(s,3H),2.89(t,J＝7.5Hz,2H),2.18(s,3H)；
13C NMR(75MHz,CDCl3)δ＝165.60,164.53,164.05,156.28,133.29,129.33,129.13,125.61,117.84,116.16,116.12,107.21,72.70,60.82,37.28,20.45；
HRMS(ESI)m/z calcd for C17H17O4S+[M+H]+:317.0769；found:317.0765.
Chromatographic purity:97.8％(HPLC).
实施例9
化合物8-甲氧基-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲氧基)-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮(式2o)的制备:
将无水DMF(30mL)加入250mL圆底烧瓶中，加入中间体Ⅴ(9.4mmol，2.28g)，无水K2CO3(12.2mmol，1.7g)和4-溴甲基四氢吡喃(12.2mmol)，并将温度控制在80℃下，将反应搅拌24h。通过TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)监测反应。反应结束后，将反应溶液加至冰水混合物中，得到棕色固体。抽滤并干燥后，通过硅胶(200-300目)柱色谱法纯化棕色固体，得到化合物2o，收率36％。
化合物8-甲氧基-3-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲氧基)-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮的表征数据：
M.p.168.1–168.5℃.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.87(d,J＝8.0Hz,1H),7.78(d,J＝4.0Hz,1H),7.39(dd,J＝8.0,4.0Hz,1H),6.91(dd,J＝8.0,4.0Hz,1H),6.86(d,J＝4.0Hz,1H),4.06(dd,J＝12.0,4.0Hz,2H),3.94(s,3H),3.88(d,J＝8.0Hz,2H),3.51–3.45(m,2H),2.19–2.0(m,1H),1.82–1.78(m,2H),1.56–1.46(m,2H)；
13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ＝160.91,160.29,159.31,151.59,128.64,124.60,124.45,124.41,120.86,113.14,111.41,111.25,102.42,72.99,67.06,56.10,34.79,29.62；
HRMS(ESI)m/z calcd for C20H21O5 +[M+H]+:341.1311；found:341.1307.
Chromatographic purity:97.4％(HPLC).
实施例10
化合物3-((4-(羟基甲基)苯基)甲氧基)-8-甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮(式2p)的制备：
将无水DMF(30mL)加入250mL圆底烧瓶中，加入中间体Ⅴ(9.4mmol，2.28g)，无水K2CO3(12.2mmol，1.7g)和4-溴甲基苄基醇(12.2mmol)，并将温度控制在120℃下，将反应搅拌4h。通过TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)监测反应。反应结束后，将反应溶液加至冰水混合物中，得到棕色固体。抽滤并干燥后，通过硅胶(200-300目)柱色谱法纯化棕色固体，得到化合物2p，收率37％。
化合物3-((4-(羟基甲基)苯基)甲氧基)-8-甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮的表征数据：
M.p.192.4–194.6℃.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ＝8.27(d,J＝9.0Hz,1H),8.19(d,J＝9.0Hz,1H),7.62(d,J＝3.0Hz,1H),7.51(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),7.44(dd,J＝6.0,3.0Hz,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),7.08–7.03(m,2H),5.20(t,J＝6.0Hz,3H),4.51(d,J＝3.0Hz,2H),3.90(s,3H)；
13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ＝160.86,159.87,159.32,151.49,142.91,135.27,128.55,128.18,127.01,124.57,124.40,120.88,113.43,111.44,111.39,102.84,70.11,63.11,56.08；
HRMS(ESI)m/z calcd for C22H19O5 +[M+H]+:363.1154；found:363.1150.
Chromatographic purity:98.6％(HPLC).
实施例11
中间体Ⅵ的制备：
Figure BDA0003105489390000151
2-硼酸-5-甲基苯甲酸甲酯(60mmol)，4-溴苯-1,3-二醇(44mmol，8.3g)，四(三苯基膦)钯(2.4mmol，2.8g)，3M Na2CO3水溶液(100mL)和1,2-二甲氧基乙烷(200mL)混合后，在100℃下封管搅拌反应12h。通过TLC(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1)监测反应进程。反应结束时，将反应溶液滴加到冰水混合物中，混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，然后用水，饱和食盐水洗涤，并用无水MgSO4干燥。减压蒸发溶剂后，分别用甲醇和乙酸各重结晶1h，残余物用硅胶(200-300目)柱色谱法处理(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得到中间体Ⅵ(2.89g，收率28.9％)。
中间体Ⅵ的表征参数：
m.p.266.8～267.5℃。
1H NMR：(300MHz,DMSO-d6)δ＝10.27(s,1H),8.13(dd,J＝9.0,6.0Hz,2H),7.98(s,1H),7.70(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),6.83(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),6.74(d,J＝2.4Hz,1H),2.44(s,3H).
13C NMR：(75MHz,DMSO-d6)δ＝165.87,164.68,157.02,142.60,141.62,137.86,134.50,129.77,126.90,124.05,118.30,114.72,108.11,25.87。
HRMS(ESI)m/z calcd for C14H10O4 +[M+H]+:227.00630；found:227.0626。
Chromatographic purity:98.6％(HPLC)。
实施例12
化合物8-甲基-3-戊氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮(式3a)的制备：
将无水DMF(30mL)加入250mL圆底烧瓶中，加入中间体Ⅵ(9.4mmol)，无水K2CO3(12.2mmol，1.7g)和溴戊烷(12.2mmol)，并将温度控制在120℃，将反应搅拌12h。通过TLC(石油谜：乙酸乙酯＝3∶1)监测反应。反应结束后，将反应溶液加至冰水混合物中，得到棕色固体。抽滤并干燥后，通过硅胶(200-300目)柱色谱法纯化棕色固体，得到式3a所示化合物。
化合物8-甲基-3-戊氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-6-酮的表征数据：
M.p.90.3-91.6℃；
1H NMR：(300MHz,DMSO-d6)δ＝8.23(d,J＝3.0Hz,1H),8.21(d,J＝6.0Hz,1H),8.02(s,1H),7.74(dd,J＝6.0,2.1Hz,1H),6.99-6.97(m,2H),4.07(t,J＝4.5Hz,2H),2.46(s,3H),1.79-1.72(m,2H),1.46–1.32(m,4H),0.91(t,J＝6.0Hz,3H)；
13C NMR：(75MHz,DMSO-d6)δ＝161.04,160.78,152.24,138.31,136.92,132.80,129.78,124.92,122.45,119.57,113.08,111.13,102.34,68.57,28.69,28.13,22.35,21.15,14.39；
HRMS(ESI)m/z calcd for C18H19O3 +[M+H]+:296.1412found:296.1410.
Chromatographic purity:98.5％(HPLC)。
按照实施例2的步骤，仅改变R2Br的种类和反应时间，制备式1a、式1d、式1e、式1g～1n、式1p、和式1q表示的化合物；按照实施例8的步骤，仅改变R2Br的种类和反应时间，制备式2a～2c、式2e～2g、式2i～2n和式2q～2u表示的化合物；按照实施例12的步骤，仅改变R2Br的种类，制备式3a～3j表示的化合物；制备这些化合物所用的R2Br和反应时间以及化合物的收率见下表所示。
表1尿石素类化合物的制备条件及收率
Figure BDA0003105489390000161
Figure BDA0003105489390000171
式1a～1q、2a～2u和3a～3j化合物的酶水平IC50测试结果见下表：
表2尿石素类化合物抑制PDE2的酶水平IC50
Figure BDA0003105489390000172
Figure BDA0003105489390000181
表2表明，本发明提供的尿石素类化合物具有良好的PDE2抑制活性。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变形，这些改进和变形也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种尿石素类化合物，其特征在于，为化合物Ⅰ或其旋光异构体、对映体、非对映体、外消旋体或外消旋混合物，或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0003105489380000011
其中，
R1为氢原子、甲氧基或甲基中的一种；
R2为C2～C9烷基、甲硫基取代的C2～C9烷基、环烷基取代的C1～C9烷基、乙基酯基取代的C1～C9烷基、杂环基取代的C1～C9烷基、羟基取代的C1～C9烷基、芳香基取代的C1～C9烷基或C2～C9杂环基中的一种。
2.根据权利要求1所述的一种尿石素类化合物，其特征在于，所述化合物Ⅰ选自式1a～1q、2a～2u或3a～3j所示的化合物：
Figure FDA0003105489380000021
Figure FDA0003105489380000031
Figure FDA0003105489380000041
3.一种尿石素类化合物的制备方法，其特征在于，包括：
步骤S1：将化合物Ⅱ、4-溴苯-1,3-二醇、催化剂、碱性水溶液和1,2-二甲氧基乙烷混合均匀后，在90～100℃下、密封条件下反应9～12h得到化合物Ⅲ，合成路线如下式所示：
Figure FDA0003105489380000042
其中，R1为氢原子、甲氧基或甲基中的一种；
步骤S2:室温下，将化合物Ⅲ溶于无水DMF中，加入K2CO3搅拌均匀后，加热，滴加通式为R2Br的卤代物，在80～120℃下反应3.5～30h得到权利要求1～2中任意一项权利要求所述的化合物Ⅰ，合成路线如下式所示：
Figure FDA0003105489380000043
其中，R2为C2～C9烷基、甲硫基取代的C2～C9烷基、环烷基取代的C1～C9烷基、乙基酯基取代的C1～C9烷基、杂环基取代的C1～C9烷基、羟基取代的C1～C9烷基、芳香基取代的C1～C9烷基或C2～C9杂环基中的一种。
4.根据权利要求3所述的一种尿石素类化合物的制备方法，其特征在于，
所述步骤S1中，所述化合物Ⅱ与4-溴苯-1,3-二醇的摩尔比为1.5～1:1。
5.根据权利要求3所述的一种尿石素类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，
所述催化剂为四(三苯基膦)钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯或双三苯基磷二氯化钯中的一种或多种；
所述催化剂与化合物Ⅱ的摩尔比为1～5:100。
6.根据权利要求5所述的一种尿石素类化合物的制备方法，其特征在于，
所述步骤S1中，所述催化剂为四(三苯基膦)钯。
7.根据权利要求3所述的一种尿石素类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，
所述碱性水溶液为Na2CO3水溶液、K2CO3水溶液或K3PO4水溶液中的一种；
所述碱性水溶液的浓度为3mol/L。
8.根据权利要求3所述的一种尿石素类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述化合物Ⅲ、K2CO3、R2Br的摩尔比为1:1～1.5:1～1.5。
9.一种药物组合物，其特征在于，包括治疗有效量的权利要求1～2中任意一项权利要求所述的尿石素类化合物和药物上可接受的载体、佐剂或媒剂。
10.权利要求1～2中任意一项权利要求所述的尿石素类化合物在制备抑制PDE2的药物中的应用。
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