CN113181342B - 一种治疗抑郁的凝结芽孢杆菌制剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于治疗抑郁的药物组合物，组合物中包含一种凝结芽孢杆菌和一种营养多肽；本发明的药物组合物能够上调脑源性神经营养因子水平，改善抑郁症模型动物的抑郁症状。本发明的药物组合物可作为临床抑郁症治疗的有效候选治疗药物，具有潜在的药物开发价值。

Description

一种治疗抑郁的凝结芽孢杆菌制剂

技术领域：

本发明涉及凝结芽孢杆菌和多肽在制备预防或治疗抑郁症制剂中的应用，具体是用凝结芽孢杆菌及抗抑郁多肽减少抑郁症状。

背景技术：

抑郁症是最常见的抑郁障碍，以显著而持久的心境低落为主要临床特征，是心境障碍的主要类型。临床可见心境低落与其处境不相称，情绪的消沉可以从闷闷不乐到悲痛欲绝，自卑抑郁，甚至悲观厌世，可有***企图或行为；甚至发生木僵；部分病例有明显的焦虑和运动性激越；严重者可出现幻觉、妄想等精神病性症状。每次发作持续至少2周以上、长者甚或数年，多数病例有反复发作的倾向，每次发作大多数可以缓解，部分可有残留症状或转为慢性。

目前，高速发展的现代社会中，在喧嚣热闹的繁华之下，随着生活节奏加快，人们的生活压力越来越大，睡眠障碍、焦虑及抑郁人群呈现逐渐年轻化趋势，年轻人中抑郁症也呈现逐渐增高的发病率，重度抑郁症也导致***事件高发。自世界卫生组织的数据显示，全球每年大约有80万人死于***。这是一个严肃且令人心痛的话题。***行为无论对个人健康、家庭幸福还是社会发展，都有着巨大而深远的影响。

近年来，我国患有心理疾病的人数逐年增加，抑郁症患病率也呈现出上升的趋势。巨大生活工作压力导致的多为中、重度抑郁症，单纯的心理疗法已不能达到理想的临床疗效。因此临床除给予患者必要的安慰、疏导、指导外，药物控制也是当前抑郁症治疗的一大方向，目前主要的抗抑郁药主要为5-羟色胺再摄取抑制剂、5-羟色胺及去甲肾上腺素再摄取抑制剂等，单胺氧化酶抑制剂由于严重的不良反应已经被淘汰，传统的三环类、四环类药物因其较严重的不良反应，已经较少应用。即使如此，这些药仍存在毒副作用大、且多数具有成瘾性等缺陷，在治疗精神疾病的同时，给人体带来严重的健康问题。

近年，研究发现，地凝结芽孢杆菌能产生乙酸、丙酸、丁酸等短链脂肪酸成分，可达到抑制外周TNF-α，海马IFN-Y，TNF-α的表达，改善人体焦虑，抑郁等负面情绪，并提高BNDF(脑源性神经营业因子)分泌，使患者的负面情绪得到有效缓解。但仅仅使用益生菌制剂难以达到传统抗抑郁剂相同效果。

因此，开发能够有效治疗抑郁症，且安全没有任何毒副作用的药物仍是临床迫切需要的。

发明内容

本发明人经过研究发现一种短肽，所述短肽与凝结芽孢杆菌联合使用能够有效治疗抑郁症，降低抑郁症状；并且在动物模型研究中发现，本发明的组合能够有效上调脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor，BDNF)的表达水平。最主要的是，本发明的凝结芽孢杆菌制剂安全且无毒副作用，临床应用潜力巨大。

本发明的多肽序列如SEQ ID NO：1所示，是一种能够BDNF表达激动剂，其与凝结芽孢杆菌联合使用，能显著提高BDNF表达量，显著改善抑郁症状。

因此，本发明提供一种用于治疗抑郁的凝结芽孢杆菌制剂，所述制剂包含凝结芽孢杆菌和SEQ ID NO：1所示营养多肽。所述营养多肽可以通过固相合成法化学合成，也可以通过构建重组细胞工程菌表达发酵制备。

优选地，本发明的凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌BC30。

进一步地，本发明是以有效剂量凝结芽孢杆菌和所述营养多肽作为主要活性成份，按照一定的制剂工艺制备成任何一种适合于使用的活菌剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂、粉剂。

进一步地，本发明活菌制剂中凝结芽孢杆菌的含量为，当制剂为固体制剂中，其含量为1×10⁶CFU/g以上，优选在1×10⁷CFU/g；当制剂为液体制剂时，其含量为1×10⁵CFU/ml以上，优选在1×10⁶CFU/ml。

进一步地，本发明的活菌制剂中，SEQ ID NO：1所示营养多肽的浓度为，当制剂为固体制剂时，其含量为10-50mg/g，优选为20mg/g或40mg/g；当制剂为液体制剂，其含量为1-5mg/ml，优选为2mg/ml或4mg/ml。

本发明多肽具有全新的序列，其与凝结芽孢杆菌组合能够显著升高慢性不可预测应激模型大鼠脑组织中BDNF含量，改善急性和慢性抑郁症模型动物的抑郁症状，可作为临床抑郁症有效的候选治疗方法。

具体实施方式

以下实施方式进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制，在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明的方法、步骤和条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。

实施例1：对慢性不可预测应激模型大鼠脑组织中BDNF含量的影响实验

本发明所述营养多肽，由实验室采用固相合成法化学合成，并验证其序列。

以SD大鼠作为受试动物，取84只大鼠，雌雄各半，体重为200-220g，随机分为6组，分为模型组和实验组1-5。各组给予相同的和饲料，并在相同饲养条件下开展实验；凝结芽孢杆菌、氟西汀和多肽均使用0.9％生理盐水配置成溶液。

参照专利方法，建立大鼠慢性不可预测应激模型：禁食24h、禁水24h、夹尾5min、昼夜颠倒24h、4℃冷水游泳5min、45℃环境5min、潮湿垫料24h、倾斜45度24h、行为束缚4h、水平震荡60次/min 45min。上述方法在4周内进行随机处理，每天采取一种方法，相同的刺激不能连续出现且至少间隔7天以上，建立大鼠抑郁症模型。最后一次刺激后给药。

给药方案：按照下表所示配制相应浓度药物，每天每只大鼠灌服1ml药物，空白组给予生理盐水；均连续给药7天。第7天给药后1h，大鼠断头处死，去脑组织，匀浆、离心，取上清，采用ELISA法检测BDNF含量，实验方案及结果见下表：

实验结果如表所示，凝结芽孢杆菌对大鼠脑中BDNF含量几乎无影响，而本发明多肽能够取得与氟西汀类似的升高BDNF含量效果，但凝结芽孢杆菌与多肽组合物组能够显著升高模型大鼠脑组织中BDNF含量。

实施例2：抑郁症模型大鼠行为变化观察

按照与实施例1相同的方法建立动物模型，并开展治疗实验。

给药方案：按照下表所示配制相应浓度药物，每天每只大鼠灌服1ml药物，空白组给予生理盐水；均连续给药7天。第7天给药后1h后，进行行为学评估，包括强迫游泳实验和糖水偏爱实验。数据使用SPSS 21.0进行统计学分析。

实验方案及结果见下表：

实验结果如表所示，凝结芽孢杆菌对大鼠强迫游泳时间几乎没有影响，而本发明多肽虽然能起到与氟西汀相似效果；但凝结芽孢杆菌与本发明多肽的组合却能取得显著优于氟西汀的减少大鼠强迫游泳时间的效果。

而糖水偏爱实验结果相似，凝结芽孢杆菌对大鼠几乎无影响，但其与本发明多肽的组合却能显著提高大鼠糖水实验中对糖水的摄取。

序列表

<110> 天津市宝恒生物科技有限公司

<120> 一种治疗抑郁的凝结芽孢杆菌制剂

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 21

<212> PRT

<213> Synthetic sequences

<400> 1

Leu Ser Asp Met Glu Leu Gln Asn Ala Ala Gly Cys Ile Ile Gly Phe

1 5 10 15

Trp Val Phe Val Trp

20

Claims (3)

1.一种用于治疗抑郁的凝结芽孢杆菌药物组合物，其特征在于，所述组合物包含凝结芽孢杆菌BC30和SEQ ID NO：1所示营养多肽；

所述药物组合物剂型选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂；

当所述药物组合物选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂时，凝结芽孢杆菌BC30含量为1×10⁶CFU/g以上，营养多肽的含量为10-50mg/g；

当所述药物组合物为液体制剂时，凝结芽孢杆菌BC30含量为1×10⁵CFU/ml以上，营养多肽的含量为1-5mg/ml。

2.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，当所述药物组合物选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂时，凝结芽孢杆菌BC30含量为1×10⁷CFU/g；

当所述药物组合物为液体制剂时，凝结芽孢杆菌BC30含量为1×10⁶CFU/ml。

3.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，当所述药物组合物选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂时，所述营养多肽的含量为20mg/g或40mg/g；

当所述药物组合物为液体制剂时，所述营养多肽的含量为2mg/ml或4mg/ml。