CN113150995A - 一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基及其配制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基及其配制方法，该培养基包括如下组分：牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、甘油、硫酸铝钾、麦芽浸粉、酵母浸出粉、构椽酸铁按、乳酸钙、D‑环丝氨酸、毛子草酮、维生素、络蛋白磷酸肽、葡萄糖、硝酸镧、赤藓醇、无菌脱纤维绵羊血、蒸馏水，配制方法为：取相应的份数的培养基组分加入相应的蒸馏水中，溶解混匀、高压灭菌、分装，通过该培养基对转运过程中的细菌进行保藏转运，可以较好的维持待检测细菌样本的生理特性基本不变、还可以进一步达到增菌及防止杂菌污染的效果，且与传统培养基比较，检出率高，污染小，临床应用效果满意，转运效果好，大大提高了微生物样本的检测阳性率。
Description
技术领域
本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基及其配制方法。
背景技术
微生物样本的转运通常是指临床上对于微生物相关样本的采集和检测不在同一地点同一时间，从而就需要将微生物相关样本从样本的采集现场安全的运送到检测试验场所，并且需要保证微生物样本在这个转运过程中其生理特性基本不变的过程。
临床微生物检验，从采集样本到真正开始培养检测还需要一段时间，而这段时间对于微生物的后续培养繁殖是至关重要的，临床上往往由于样本保存不当，即使采用最好的培养基，也会导致阳性检出率大大降低，目前国内对微生物标本的运输保存条件研究得还比较少，关注度也还不高，而目前临床通过微生物样本的相关检测指标来辅助诊断相关疾病运用越来越多，对于微生物样本在转运过程中的菌种转运保藏方法也是相当的重要。
目前，对于目前常用的菌种保存方法有冷冻干燥法、半固体培养基法及单纯的甘油保存法等，冷冻干燥法，制备过程复杂，又需要较好的设备条件；半固体培养基保存法不能长时间保存菌种；单纯的甘油保存法其甘油只是为了防冻保湿，而某些特殊菌株在甘油原液中存活率低，且保存时间短，毒性下降。
显然，确保微生物样本转运过程中的生理特性基本不变、可以充分增菌及防止杂菌污染等都是很重要的，目前针对需将所采集的微生物样本从采集地点转运至检测试验地点的转运过程对于菌种的保藏还没有一种比较好的方法。
发明内容
本发明的目的在于：针对以上现有技术所述现有对于微生物样本的转运过程没有一种比较好的保存方法的技术问题，本发明提供了一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基及其配制方法，通过本发明提供的培养基对相应的微生物样本进行转运，可以较大程度保持微生物运送样本的生理特性基本不变、也可进一步提高微生物样本的阳性检出率。
本发明采用的技术方案如下：一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基及其配制方法，所述培养基通过以下组分及蒸馏水配制而成：牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、甘油、蒸馏水。
优选地，所述培养基通过以下组分及蒸馏水配制而成：牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、甘油、硫酸铝钾、麦芽浸粉、酵母浸出粉、构椽酸铁按、乳酸钙、D-环丝氨酸、毛子草酮、维生素、络蛋白磷酸肽、葡萄糖、硝酸镧、赤藓醇、无菌脱纤维绵羊血、蒸馏水。
进一步地，所述培养基通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏10-15份、蛋白胨10-15份、氯化钠3-6份、琼脂4-7份、甘油18-20份、蒸馏水80-100份。
进一步地，所述培养基优选以下重量份的组分与蒸馏水配制而成：牛肉浸膏12份、蛋白胨12份、氯化钠5份、琼脂5份、甘油19份、蒸馏水90份。
作为另一种实施方式，所述培养基通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏80-110份、蛋白胨40-60份、硫酸铝钾2-4份、麦芽浸粉30-50份、酵母浸出粉40-60份、氯化钠4-6份、琼脂130-160份、构椽酸铁按2-4份、乳酸钙0.2-0.4份、D-环丝氨酸0.2-0.4份、毛子草酮0.02-0.04份、维生素K1为0.1-0.3份、络蛋白磷酸肽0.5-2份、葡萄糖40-60份、硝酸镧10-30份、赤藓醇35-45份、甘油15-25份、无菌脱纤维绵羊血75-85份，蒸馏水800-1100份。
优选地，所述培养基通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏100份、蛋白胨50份、硫酸铝钾2.5份、麦芽浸粉40份、酵母浸出粉50份、氯化钠5份、琼脂150份、构椽酸铁按3份、乳酸钙0.3份、D-环丝氨酸0.3份、毛子草酮0.03份、维生素K1为0.1份、络蛋白磷酸肽1份、葡萄糖50份、硝酸镧20份、赤藓醇40份，所述组分甘油20份、无菌脱纤维绵羊血80份，蒸馏水1000份。
进一步地，以上所述培养基的配制方法如下：分别称取相应份数比例的组分加入至相应份数的蒸馏水中，溶解，高压灭菌、分装。
作为一种具体实施方式，以上所述培养基的配制方法如下：分别称取牛肉浸膏10-15份、蛋白胨10-15份、氯化钠3-6份、琼脂4-7份、甘油18-20份、至80-100份的蒸馏水中，溶解，高压灭菌、分装。
作为另一种具体实施方式，以上所述培养基的配制方法如下：分别称取牛肉浸膏80-110份、蛋白胨40-60份、硫酸铝钾2-4份、麦芽浸粉30-50份、酵母浸出粉40-60份、氯化钠4-6份、琼脂130-160份、构椽酸铁按2-4份、乳酸钙0.2-0.4份、D-环丝氨酸0.2-0.4份、毛子草酮0.02-0.04份、维生素K1为0.1-0.3份、络蛋白磷酸肽0.5-2份、葡萄糖40-60份、硝酸镧10-30份、赤藓醇35-45份、甘油15-25份、无菌脱纤维绵羊血75-85份加入至800-1100的蒸馏水中，溶解，高压灭菌、分装。
相较于现有技术，本发明的有益效果是：
(1)本发明针对微生物样本的转运过程提供了一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基及其配制方法，该培养基将常规的菌种保藏培养基进行配方升级，各配方组分的营养成分搭配均匀，通过该培养基对转运过程中的细菌进行保藏，可以较好的维持待检测细菌样本的生理特性基本不变、还可以进一步达到增菌及防止杂菌污染的效果；
(2)本发明提供细菌样本转运过程用的培养基，其组分将葡萄糖和酵母浸出粉进行组合应用，即保持糖含量的稳定，又使用了不同类型的糖类物质，培养基中甘油，具有活化与保湿作用，有利于细菌生长；
(3)本发明与现有技术相比较，微生物标本在常温转运过程中，不仅能保存活菌存活，还具有增菌的作用，用于微生物标本采集后运送到区域中心实验室进行集中化检验，且本发明所提供的培养基的配制简单，且与传统培养基比较，检出率高，污染小，临床应用效果满意，也大大提高了微生物样本的检测阳性率。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，对本发明进行进一步详细说明。
实施例1
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏10份、蛋白胨10份、氯化钠3份、琼脂4份、甘油18份、蒸馏水80份。
以固态组分一份为1g，液态组分一份为1ml，该细菌保藏培养基的组分如下：牛肉浸膏10g、蛋白胨10g、氯化钠3g、琼脂4g、甘油18ml、蒸馏水80ml。
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基的配制方法如下：称取牛肉浸膏10g、蛋白胨10g、氯化钠3g、琼脂4g加入80ml的蒸馏水中，再称取甘油18ml加入蒸馏水中，混匀溶解，将装有培养基的细菌保藏瓶在灭菌锅中升温至121℃下灭菌30-45min，自然冷却至50℃开锅即可。
实施例2
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏15份、蛋白胨15份、氯化钠6份、琼脂7份、甘油20份、蒸馏水100份。
以固态组分一份为1g，液态组分一份为1ml，该细菌保藏培养基的组分如下：牛肉浸膏15g、蛋白胨15g、氯化钠6g、琼脂7g、甘油20ml、蒸馏水100ml。
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基的配制方法如下：称取牛肉浸膏15g、蛋白胨15g、氯化钠6g、琼脂7g加入100ml的蒸馏水中，再称取甘油20ml加入蒸馏水中，混匀溶解，将装有培养基的细菌保藏瓶在灭菌锅中升温至121℃下灭菌30-45min，自然冷却至50℃开锅即可。
实施例3
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏12份、蛋白胨12份、氯化钠5份、琼脂5份、甘油19份、蒸馏水90份。
以固态组分一份为1g，液态组分一份为1ml，该细菌保藏培养基的组分如下：牛肉浸膏12g、蛋白胨12g、氯化钠5g、琼脂5g、甘油19ml、蒸馏水90ml。
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基的配制方法如下：称取牛肉浸膏12g、蛋白胨12g、氯化钠5g、琼脂5g加入90ml的蒸馏水中，再称取19ml的甘油加入蒸馏水中，溶解混匀，将装有培养基的细菌保藏瓶在灭菌锅中升温至121℃下灭菌30-45min，自然冷却至50℃开锅即可。
实施例4
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏80份、蛋白胨40份、硫酸铝钾2份、麦芽浸粉30份、酵母浸出粉40份、氯化钠4份、琼脂130份、构椽酸铁按2份、乳酸钙0.2份、D-环丝氨酸0.2份、毛子草酮0.02份、维生素K1为0.1份、络蛋白磷酸肽0.5份、葡萄糖40份、硝酸镧10份、赤藓醇35份、甘油15份、无菌脱纤维绵羊血75份，蒸馏水800份。
以固态组分一份为1g，液态组分一份为1ml，该细菌转运保藏培养基的组分如下：牛肉浸膏80g、蛋白胨40g、硫酸铝钾2g、麦芽浸粉30g、酵母浸出粉40g、氯化钠4g、琼脂130g、构椽酸铁按2g、乳酸钙0.2g、D-环丝氨酸0.2g、毛子草酮0.02g、维生素K1为0.1g、络蛋白磷酸肽0.5g、葡萄糖40g、硝酸镧10g、赤藓醇35g、甘油15ml、无菌脱纤维绵羊血75ml，蒸馏水800ml.
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基的配制方法如下：称取牛肉浸膏80g、蛋白胨40g、硫酸铝钾2g、麦芽浸粉30g、酵母浸出粉40g、氯化钠4g、琼脂130g、构椽酸铁按2g、乳酸钙0.2g、D-环丝氨酸0.2g、毛子草酮0.02g、维生素K1为0.1g、络蛋白磷酸肽0.5g、葡萄糖40g、硝酸镧10g、赤藓醇35g、甘油15ml、无菌脱纤维绵羊血75ml，加入800ml的蒸馏水中，溶解混匀，将装有培养基的细菌保藏瓶在灭菌锅中升温至121℃下灭菌30-45min，自然冷却至50℃开锅即可。
实施例5
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏110份、蛋白胨60份、硫酸铝钾4份、麦芽浸粉50份、酵母浸出粉60份、氯化钠6份、琼脂160份、构椽酸铁按4份、乳酸钙0.4份、D-环丝氨酸0.4份、毛子草酮0.04份、维生素K1为0.3份、络蛋白磷酸肽2份、葡萄糖60份、硝酸镧30份、赤藓醇45份、甘油25份、无菌脱纤维绵羊血85份，蒸馏水1100份。
以固态组分一份为1g，液态组分一份为1ml，该细菌转运保藏培养基的组分如下：牛肉浸膏110g、蛋白胨60g、硫酸铝钾4g、麦芽浸粉50g、酵母浸出粉60g、氯化钠6g、琼脂160g、构椽酸铁按4g、乳酸钙0.4g、D-环丝氨酸0.4g、毛子草酮0.04g、维生素K1为0.3g、络蛋白磷酸肽2g、葡萄糖60g、硝酸镧30g、赤藓醇45g、甘油25ml、无菌脱纤维绵羊血85ml，蒸馏水1100ml。
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基的配制方法如下：称取牛肉浸膏110g、蛋白胨60g、硫酸铝钾4g、麦芽浸粉50g、酵母浸出粉60g、氯化钠6g、琼脂160g、构椽酸铁按4g、乳酸钙0.4g、D-环丝氨酸0.4g、毛子草酮0.04g、维生素K1为0.3g、络蛋白磷酸肽2g、葡萄糖60g、硝酸镧30g、赤藓醇45g、甘油25ml及无菌脱纤维绵羊血85ml加入1100ml的蒸馏水中，溶解混匀，将装有培养基的细菌保藏瓶在灭菌锅中升温至121℃下灭菌30-45min，自然冷却至50℃开锅即可。
实施例6
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏100份、蛋白胨50份、硫酸铝钾2.5份、麦芽浸粉40份、酵母浸出粉50份、氯化钠5份、琼脂150份、构椽酸铁按3份、乳酸钙0.3份、D-环丝氨酸0.3份、毛子草酮0.03份、维生素K1为0.1份、络蛋白磷酸肽1份、葡萄糖50份、硝酸镧20份、赤藓醇40份，所述组分甘油20份、无菌脱纤维绵羊血80份，蒸馏水1000份。
以固态组分一份为1g，液态组分一份为1ml，该细菌转运保藏培养基的组分如下：牛肉浸膏100g、蛋白胨50g、硫酸铝钾2.5g、麦芽浸粉40g、酵母浸出粉50g、氯化钠5g、琼脂150g、构椽酸铁按3g、乳酸钙0.3g、D-环丝氨酸0.3g、毛子草酮0.03g、维生素K1为0.1g、络蛋白磷酸肽1g、葡萄糖50g、硝酸镧20g、赤藓醇40g，所述组分甘油20ml、无菌脱纤维绵羊血80ml，蒸馏水1000ml。
一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基的配制方法如下：称取牛肉浸膏100g、蛋白胨50g、硫酸铝钾2.5g、麦芽浸粉40g、酵母浸出粉50g、氯化钠5g、琼脂150g、构椽酸铁按3g、乳酸钙0.3g、D-环丝氨酸0.3g、毛子草酮0.03g、维生素K1为0.1g、络蛋白磷酸肽1g、葡萄糖50g、硝酸镧20g、赤藓醇40g，所述组分甘油20ml及无菌脱纤维绵羊血80ml加入到1000ml的蒸馏水溶解混匀，将装有培养基的细菌保藏瓶在灭菌锅中升温至121℃下灭菌30-45min，自然冷却至50℃开锅即可。
对比实施例
为了进一步验证本发明所提供的一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基的可行性和有效性，使用本发明提供的实施例1-6中的转运培养基与临床使用的一般培养基保存临床新采集的待检测细菌样本各100例，具体实验对比结果如下：
表1本发明提供的细菌转运保藏培养基与一般培养基对比实验结果表
| 组别 | 样本数 | 阳性检出数 | 阳性检出率 |
| 实施例1 | 100 | 85 | 85％ |
| 实施例2 | 100 | 90 | 90％ |
| 实施例3 | 100 | 95 | 95％ |
| 实施例4 | 100 | 86 | 86％ |
| 实施例5 | 100 | 92 | 92％ |
| 实施例6 | 100 | 89 | 89％ |
| 一般培养基 | 100 | 55 | 65％ |
| 未使用准运培养基保存 | 100 | 12 | 12％ |
从以上对比试验结果可以看出，使用本发明提供的转运培养基对待检测的细菌样本进行转运，配送，可以更大程度上保持细菌本身的生理特性及活性，且与一般转运培养基相比较，本发明提供的转运培养基的阳性检出率在85％以上，大大提高了微生物样本的检测阳性率。
以上所述实施例仅表达了本申请的具体实施方式，应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请技术方案构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本申请的保护范围。
Claims (8)
1.一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，其特征在于，所述培养基通过以下组分配制而成：牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、甘油、蒸馏水。
2.根据权利要求1所述的一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，其特征在于，所述培养基通过以下组分配制而成：牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、甘油、硫酸铝钾、麦芽浸粉、酵母浸出粉、构椽酸铁按、乳酸钙、D-环丝氨酸、毛子草酮、维生素、络蛋白磷酸肽、葡萄糖、硝酸镧、赤藓醇、无菌脱纤维绵羊血、蒸馏水。
3.根据权利要求1所述的一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，其特征在于，所述培养基通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏10-15份、蛋白胨10-15份、氯化钠3-6份、琼脂4-7份、甘油18-20份、蒸馏水80-100份。
4.根据权利要求3所述的一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，其特征在于，所述培养基优选以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏12份、蛋白胨12份、氯化钠5份、琼脂5份、甘油19份、蒸馏水90份。
5.根据权利要求2所述的一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，其特征在于，所述培养基通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏80-110份、蛋白胨40-60份、硫酸铝钾2-4份、麦芽浸粉30-50份、酵母浸出粉40-60份、氯化钠4-6份、琼脂130-160份、构椽酸铁按2-4份、乳酸钙0.2-0.4份、D-环丝氨酸0.2-0.4份、毛子草酮0.02-0.04份、维生素K1为0.1-0.3份、络蛋白磷酸肽0.5-2份、葡萄糖40-60份、硝酸镧10-30份、赤藓醇35-45份、甘油15-25份、无菌脱纤维绵羊血75-85份，蒸馏水800-1100份。
6.根据权利要求5所述的一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基，其特征在于，所述培养基通过以下重量份的组分配制而成：牛肉浸膏100份、蛋白胨50份、硫酸铝钾2.5份、麦芽浸粉40份、酵母浸出粉50份、氯化钠5份、琼脂150份、构椽酸铁按3份、乳酸钙0.3份、D-环丝氨酸0.3份、毛子草酮0.03份、维生素K1为0.1份、络蛋白磷酸肽1份、葡萄糖50份、硝酸镧20份、赤藓醇40份，所述组分甘油20份、无菌脱纤维绵羊血80份，蒸馏水1000份。
7.一种如权利要求3所述的用于转运过程中的细菌转运保藏培养基的配制方法，其特征在于，所述配制方法步骤如下：分别称取牛肉浸膏10-15份、蛋白胨10-15份、氯化钠3-6份、琼脂4-7份、甘油18-20份、至80-100份的蒸馏水中，溶解，高压灭菌、分装。
8.一种如权利要求5所述的用于转运过程中的细菌转运保藏培养基的配制方法，其特征在于，所述配制方法步骤如下：分别称取牛肉浸膏80-110份、蛋白胨40-60份、硫酸铝钾2-4份、麦芽浸粉30-50份、酵母浸出粉40-60份、氯化钠4-6份、琼脂130-160份、构椽酸铁按2-4份、乳酸钙0.2-0.4份、D-环丝氨酸0.2-0.4份、毛子草酮0.02-0.04份、维生素K1为0.1-0.3份、络蛋白磷酸肽0.5-2份、葡萄糖40-60份、硝酸镧10-30份、赤藓醇35-45份、甘油15-25份、无菌脱纤维绵羊血75-85份加入至800-1100份的蒸馏水中，溶解，高压灭菌、分装。
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