CN112920115A - 喹啉-4-甲酰胺类骨架衍生物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种喹啉‑4‑甲酰胺类骨架衍生物及其用途，属于化学医药领域。本发明提供了式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐。本发明还提供了所述化合物的制备方法和用途。生物学实验表明，在体外分子水平上，这类化合物对SIRT6有很好的激动效果，同家族选择性良好，可明显改善与SIRT6相关的病变；特别是在体内外均显示了较好的抗癌，尤其是胰腺癌活性，为抗癌药物开发和应用提供了新的选择，具有良好的应用前景。
Figure DDA0002304622250000011

Description

喹啉-4-甲酰胺类骨架衍生物及其用途
技术领域
本发明属于化学医药领域，具体涉及一种喹啉-4-甲酰胺类骨架衍生物及其用途。
背景技术
表观遗传学是生命科学领域研究中最热门的。基因表达的表观遗传学调控主要涉及DNA 甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑及非编码RNA调控等方面。其中，组蛋白乙酰化修饰最早 被发现与基因转录调节有关，并且与很多疾病的发生密切相关，是目前研究的热点。参与去 乙酰化的酶类，除了经典的Ⅰ类和Ⅱ类组蛋白去乙酰化酶HDAC(Histonedeacetylase，HDAC) 外，还有Ⅲ类HDAC即Sir2(Silent information regulator 2，沉默信息调节蛋白2)相关酶类 (Sir2-related enzymes,Sirtuin)。第Ⅲ类组蛋白去乙酰化转移酶(ClassⅢhistone deacetylases， ClassⅢHDACs)，通常被称为长寿蛋白(Sirtuins，SIRTs)，是一类高度保守的蛋白，与啤酒 酵母中的Sir2同源。人类Sirtuin家族中公认的成员有7个：SIRT1～SIRT7。Sirtuin蛋白家族 具有不同的亚细胞定位，SIRT1、SIRT 6和SIRT7主要位于细胞核内，SIRT3、SIRT4和SIRT5 定位在线粒体中，而SIRT2主要分布在细胞浆中，这些蛋白的亚细胞定位还取决于细胞类型、 状态和分子间相互作用等，如SIRT1和SIRT2可在细胞核和细胞浆之间穿梭，并且与细胞核 和细胞浆中的蛋白相互作用。它们在不同的亚细胞中进行大量的蛋白质的翻译后修饰，从而 发挥不同的功能和作用。
SIRT6作为高度保守的NAD+依赖性脱乙酰酶家族的主要成员，参与调节许多生理过程， 如原核生物和真核生物的细胞周期、代谢、应激反应和衰老过程，并且具有多种催化功能， 包括去乙酰化(Deacetylation)2、单ADP-核糖基化(Mono adenosine diphosphateribosylation)3以 及去脂肪酰化(De-fatty-acylation)等。SIRT6与多种疾病，如心血管疾病、慢性阻塞性肺病、 糖尿病、骨骼相关疾病、视网膜病变、肝病等的发生及演进密切相关。因其在肿瘤发生发展 过程中扮演重要角色，尤其是对于癌细胞代谢的关键调节作用，靶向治疗理念逐步加强和药 物开发的发展加快的今天，SIRT6作为新的目标引发了新的调节剂的开发热潮。
染色质重塑蛋白在人类癌症中经常失调，但对它们如何控制肿瘤发生知之甚少。比如发 表在Cell上的文章里面(Cell 2016,165,1401-1415.)，作者揭示了由NAD+依赖的组蛋白去 乙酰化酶Sirtuin 6(SIRT6)介导的表观遗传程序，该程序对于抑制胰腺导管腺癌(PDAC) 至关重要，胰腺导管腺癌是最致命的恶性肿瘤之一。SIRT6失活后通过上调let-7microRNA 的负调节因子Lin28b来加速PDAC进展和转移。SIRT6缺失导致Lin28b启动子的组蛋白高 度乙酰化，Myc募集，以及Lin28b和下游let-7靶基因HMGA2，IGF2BP1和IGF2BP3的显 著诱导。该表观程序定义了预后不良的不同子集，占人PDAC的30％-40％，其特征在于SIRT6 表达降低和对肿瘤生长的Lin28b的精确依赖性。因此，将SIRT6鉴定为重要的PDAC肿瘤 抑制因子，并将Lin28b途径揭示为分子定义的PDAC子集中的潜在治疗靶点。因此，开发高 活性和选择性的SIRT6激动剂是非常必要的。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种具有高活性和高选择性的SIRT6激动剂。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是提供了式I所示的化合物或其药学上可接 受的盐：
Figure BDA0002304622230000021
其中，R1选自取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的烷基、取 代或未取代的环烷基、取代或未取代的桥环烷基；
所述R1中取代的芳基或取代的杂芳基中的取代基选自烷氧基、芳氧基、取代或未取代的 烷基、羟基、硝基、酯基、卤素，其中，所述取代的烷基的取代基为卤素或环烷基，所述环 烷基中含有0～3个N杂原子；
所述R1中取代的烷基、取代的环烷基或取代的桥环烷基的取代基选自芳基、杂芳基、酯 基、羟基；
R2选自取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、烷基、环烷基；
所述R2中取代的芳基或取代的杂芳基中的取代基选自烷氧基、烷基或卤素。
优选的，上述所述的化合物中，R1选自取代或未取代的6～10元芳基、取代或未取代的 5～10元杂芳基、取代或未取代的C1～C6烷基、取代或未取代的5～6元环烷基、取代或未取 代的桥环烷基，其中，所述杂芳基中杂原子为N、O或S，杂原子个数为1～2个。
优选的，上述所述的化合物中，所述R1中取代的6～10元芳基或取代的5～10元杂芳基中 的取代基选自C1～C6烷氧基、6～10元芳氧基、取代或未取代的C1～C6烷基、羟基、硝基、 酯基、卤素，所述取代的烷基的取代基为F或5～6元环烷基，所述环烷基中含有1～2个N杂 原子；
所述R1中取代的C1～C6烷基、取代的5～6元环烷基或取代的桥环烷基的取代基选自6～10 元芳基、5～10元杂芳基、酯基、羟基。
优选的，上述所述的化合物中，R2选自取代或未取代的6～10元芳基、取代或未取代的 5～10元杂芳基、5～6元环烷基，其中，所述杂芳基中杂原子为N、O或S，杂原子个数为1～2 个；所述环烷基中含有0～2个杂原子，杂原子为N、O或S。
优选的，上述所述的化合物中，所述R2中取代的6～10元芳基、取代的5～10元杂芳基中 的取代基选自C1～C6烷氧基、C1～C6烷基或卤素。
进一步优选的，上述所述的化合物中，R1选自：
Figure BDA0002304622230000031
Figure BDA0002304622230000032
进一步优选的，上述所述的化合物中，R2选自：
Figure BDA0002304622230000033
Figure BDA0002304622230000034
最优选的，上述所述的化合物选自：
Figure BDA0002304622230000041
Figure BDA0002304622230000051
SIRT6与多种疾病的发生发展密切相关，如神经退行性疾病(Cell Reports 2017,18, 3052-3062.)、糖尿病(Cell 2010,140,280-293.)、心血管疾病(Nature Medicine2012,18,1643.) 和癌症(如肝癌、胰腺癌)等。经生物学实验，本发明提供的上述喹啉-4-甲酰胺类骨架衍生 物对SIRT6具有优异的激动活性，因此本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐在 制备SIRT6激动剂中的用途。
进一步的，本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐在制备抗癌药物中的用途。
优选的，本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐在制备抗胰腺癌药物中的用 途。
本发明还提供了上述喹啉-4-甲酰胺类骨架衍生物的制备方法，具体的合成路线如下。
Figure BDA0002304622230000061
路线一化合物5和5a-n的合成路线
Figure BDA0002304622230000062
路线二化合物8a-p的合成路线
Figure BDA0002304622230000071
路线三化合物12a-u的合成路线
术语定义：
本发明提供的化合物和衍生物可以根据IUPAC(国际纯粹与应用化学联合会)或CAS(化 学文摘服务社，Columbus，OH)命名***命名。
术语“烷基”是直链或支链的饱和烃基的基团。C1～C6烷基的实例包括但不限于甲基 (C1)、乙基(C2)、正丙基(C3)、异丙基(C3)、正丁基(C4)、叔丁基(C4)、仲丁基(C4)、异丁基 (C4)、正戊基(C5)、3-戊基(C5)、戊基(C5)、新戊基(C5)、3-甲基-2-丁基(C5)、叔戊基(C5)和 正己基(C6)。
术语“烷氧基”是指基团-OR或-O(CH2)nO-，其中R是上文所定义的烷基，n为不小 于1的整数。C1～C6烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正 丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基和1,2-二甲基丁氧基。
术语“芳基”是指在芳族环系中不包含杂原子的4n+2芳族环系的基团；“杂芳基”是指 在芳族环系中包含杂原子的4n+2芳族环系的基团，其中，杂原子选自氮、氧和/或硫。
术语“环烷基”是指包含或不包含杂原子的饱和的环状烃基，其可以是单环结构，也可 以是两个以上的环，其中，杂原子选自磷、硫、氧和/或氮。
本发明的有益效果是：
本发明提供了一类结构新颖的喹啉-4-甲酰胺类骨架衍生物。生物学实验表明，在体外分 子水平上，这类化合物，特别是化合物12q对SIRT6有很好的激动效果，同家族选择性良好， 可明显改善与SIRT6相关的病变；特别是在体内外均显示了较好的抗癌，尤其是胰腺癌活性， 为抗癌药物开发和应用提供了新的选择，具有良好的应用前景。
附图说明
图1为实施例1中化合物12q的分子水平活性图：A为化合物12q和化合物MDL-800对SIRT6去乙酰化的活性图；B为化合物12q和化合物MDL-800对SIRT6去肉豆蔻酰化的活 性图；C为SIRT6和化合物12q的ITC结合曲线。
图2为实施例1中化合物12q的分子水平活性图：A为化合物12q与SIRT6结合后热力学稳定性的变化图；B为SIRT6和12q的SPR结合曲线和拟合稳态评估曲线。
图3为实施例3中化合物12q和MDL-800对胰腺癌细胞的体外抗增殖活性图：A为化合 物12q的MTT实验结果图；B为MDL-800的MTT实验结果图；C为化合物12q和MDL-800 的克隆形成实验结果图；D为化合物12q和MDL-800的EDU实验结果图。
图4为实施例3中细胞迁移实验和Western Blot实验结果图：A为化合物12q和MDL-800 抑制胰腺癌细胞迁移的能力结果图；B为化合物12q和MDL-800的Western blot实验结果图。
图5为实施例4中化合物12q体内抗肿瘤效果图：A为肿瘤体积图；B为肿瘤体积定量分析图；C为肿瘤组织切片染色图。
具体实施方式
以下通过实例形式对本发明喹啉-4-甲酰胺类骨架衍生物及其用途做进一步说明，但不应 将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均 属于本发明的范围。
具体涉及的部分合成方法如下所示：
化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)喹啉-4-羧酸(3)的制备
Figure BDA0002304622230000081
中间体化合物3
在搅拌的条件下，向100mL的圆底烧瓶中分别加入靛红(1.47g,20.0mmol)，3,4-二甲 氧基苯乙酮(2.16g,24.0mmol)和KOH(1.68g,60mmol)的乙醇(35mL)溶液。将所得 混合物在85℃下加热回流24h。反应完成后，减压除去溶剂，将混合物溶于水中并用乙酸 乙酯洗涤两次。浓缩水层并用浓HCl调节至pH＝2，得到黄色固体。过滤该固体，用水洗涤 至中性，干燥，并通过硅胶快速柱色谱法纯化，用乙酸乙酯和石油醚的混合溶液洗脱，得到 2-(3,4-二甲氧基苯基)喹啉-4-羧酸中间体，为黄色固体，收率76％，HPLC纯度95％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.95(s,1H),8.59(dd,J＝8.5,1.3Hz,1H),8.43(s,1H),8.17-8.09(m,1H),7.91(d,J＝2.1Hz,1H),7.87(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),7.83(ddd,J＝8.4,6.8,1.5Hz,1H), 7.66(ddd,J＝8.3,6.8,1.3Hz,1H),7.14(d,J＝8.4Hz,1H),3.92(s,3H),3.86(s,3H).13C NMR (101MHz,DMSO)δ168.23,155.98,151.18,149.59,148.76,138.06,131.00,130.54,130.03, 127.74,125.80,123.56,120.78,119.20,112.24,110.69,56.11,56.08.MS m/z(ESI):310.11 [M+H]+.
化合物2-(噻吩-2-基)喹啉酮-4-羧酸(7a)的制备
Figure BDA0002304622230000091
中间体化合物7a
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到淡黄色固体化合物7a，反应产率为70％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.03(s,1H),8.58(dd,J＝8.7,1.3Hz,1H),8.42(s, 1H),8.10(dd,J＝3.7,1.2Hz,1H),8.05(dt,J＝8.2,1.0Hz,1H),7.82(ddd,J＝8.4,6.9,1.4Hz, 1H),7.79(dd,J＝5.0,1.1Hz,1H),7.66(ddd,J＝8.4,6.9,1.3Hz,1H),7.25(dd,J＝5.0,3.7Hz, 1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ167.92,152.13,148.57,144.40,138.17,130.87,130.67, 129.53,129.19,128.23,127.89,125.95,123.79,118.54.MS m/z(ESI):256.05[M+H]+.
化合物2-(5-甲基噻吩-2-基)喹啉-4-羧酸(7b)的制备
Figure BDA0002304622230000092
中间体化合物7b
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到淡黄色固体化合物7b，反应产率为75％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.92(s,1H),8.56(dd,J＝8.5,1.3Hz,1H),8.34(s, 1H),8.00(dd,J＝8.5,1.2Hz,1H),7.88(d,J＝3.7Hz,1H),7.80(ddd,J＝8.4,6.9,1.4Hz,1H), 7.64(ddd,J＝8.3,6.9,1.3Hz,1H),6.94(dd,J＝3.6,1.2Hz,1H),2.53(brs,3H).13C NMR(101 MHz,DMSO)δ167.94,152.21,148.58,144.57,141.96,137.93,130.78,129.41,128.39,127.66, 127.62,125.91,123.59,118.21,15.86.MS m/z(ESI):270.06[M+H]+.
化合物2-(4-甲氧基苯基)喹啉酮-4-羧酸(7c)的制备
Figure BDA0002304622230000101
中间体化合物7c
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到白色固体化合物7c，反应产率为69％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.94(s,1H),8.62(d,J＝8.5Hz,1H),8.42(s,1H), 8.28(d,J＝8.4Hz,2H),8.13(d,J＝8.4Hz,1H),7.83(t,J＝7.7Hz,1H),7.67(t,J＝7.7Hz,1H), 7.13(d,J＝8.5Hz,2H),3.86(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ168.15,161.39,155.92, 148.87,137.92,130.81,130.55,130.02,129.16,127.74,125.82,123.56,119.14,114.83,55.80.MS m/z(ESI):280.10[M+H]+.
化合物2-(氧杂-4-基)喹啉酮-4-羧酸(7d)的制备
Figure BDA0002304622230000102
中间体化合物7d
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到无色油状化合物7d，反应产率为55％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(dd,J＝8.6,1.3Hz,1H),8.04(dd,J＝8.4,1.2 Hz,1H),7.85(s,1H),7.79(ddd,J＝8.4,6.9,1.5Hz,1H),7.64(ddd,J＝8.3,6.8,1.3Hz,1H),4.00 (dt,J＝11.2,3.3Hz,2H),3.50(ddd,J＝11.4,8.5,5.7Hz,2H),3.26-3.14(m,1H),1.91-1.86(m, 4H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ168.31,164.76,148.48,130.08,129.68,127.48,125.93, 123.74,121.11,67.50,43.31,32.13.MS m/z(ESI):258.11[M+H]+.
化合物2-(呋喃-2-基)喹啉-4-羧酸(7e)的制备
Figure BDA0002304622230000103
中间体化合物7e
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到淡黄色固体化合物7e，反应产率为70％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.02(s,1H),8.65(dd,J＝8.6,1.3Hz,1H),8.31(s, 1H),8.09(dd,J＝8.5,1.2Hz,1H),8.00-7.97(m,1H),7.84(ddd,J＝8.4,6.8,1.4Hz,1H),7.68 (ddd,J＝8.4,6.9,1.3Hz,1H),7.46(dd,J＝3.4,0.7Hz,1H),6.76(dd,J＝3.5,1.7Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ167.76,152.89,148.83,148.53,145.89,137.74,130.85,129.78,128.05, 125.99,123.78,118.43,113.23,111.76.MS m/z(ESI):240.01[M+H]+.
化合物2-(5-甲基呋喃-2-基)喹啉-4-羧酸(7f)的制备
Figure BDA0002304622230000111
中间体化合物7f
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到淡黄色固体化合物7f，反应产率为66％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),8.27(d,J＝2.2Hz,1H),8.20(d,J＝ 8.3Hz,1H),8.16(s,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.91-7.79(m,2H),7.73(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H), 7.64(dd,J＝8.4,6.9Hz,1H),7.36(d,J＝3.3Hz,1H),6.41(d,J＝3.2Hz,1H),2.46(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ167.83,155.21,151.41,148.87,148.53,137.59,130.74,129.64,127.70, 125.96,123.57,118.27,113.06,109.64,14.09.MS m/z(ESI):254.08[M+H]+.
化合物2-环戊基喹啉-4-羧酸(7g)的制备
Figure BDA0002304622230000112
中间体化合物7g
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到无色油状化合物7g，反应产率为61％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.79(s,1H),8.61(dd,J＝8.5,1.3Hz,1H),8.02 (dd,J＝8.5,1.2Hz,1H),7.84(s,1H),7.78(ddd,J＝8.3,6.8,1.4Hz,1H),7.64(ddd,J＝8.3,6.8, 1.3Hz,1H),3.44(p,J＝8.2Hz,1H),2.17-2.03(m,2H),1.95-1.77(m,4H),1.70(tt,J＝6.8,3.7Hz, 2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ168.15,165.75,148.43,136.90,130.07,129.63,127.42, 125.75,123.55,121.89,47.99,33.17,26.00.MS m/z(ESI):242.12[M+H]+.
化合物2-环己基喹啉-4-羧酸(7h)的制备
Figure BDA0002304622230000113
中间体化合物7h
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到无色油状化合物7h，反应产率为55％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.84(s,1H),8.63(dd,J＝8.5,1.4Hz,1H),8.03 (dd,J＝8.5,1.2Hz,1H),7.84(s,1H),7.78(ddd,J＝8.4,6.8,1.5Hz,1H),7.64(ddd,J＝8.4,6.9, 1.4Hz,1H),2.94(tt,J＝11.8,3.4Hz,1H),1.99-1.90(m,2H),1.84(dt,J＝12.7,3.4Hz,2H), 1.78-1.70(m,1H),1.64(qd,J＝12.5,3.2Hz,2H),1.43(qt,J＝12.4,3.2Hz,2H),1.31(tt,J＝12.6, 3.2Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ168.20,166.33,148.52,137.12,130.00,129.66, 127.40,125.78,123.64,121.29,46.57,32.48,26.39,26.01.MS m/z(ESI):256.13[M+H]+.
化合物2-(3-氟-4-甲氧基苯基)喹啉-4-羧酸(7i)的制备
Figure BDA0002304622230000121
中间体化合物7i
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到白色固体化合物7i，反应产率为67％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.98(s,1H),8.61(dd,J＝8.6,1.3Hz,1H),8.45(s, 1H),8.23-8.11(m,3H),7.84(ddd,J＝8.4,6.9,1.4Hz,1H),7.69(ddd,J＝8.3,6.8,1.3Hz,1H), 7.34(t,J＝8.7Hz,1H),3.95(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ168.08,154.77,153.50, 151.07,148.71,138.23,131.37,130.68,130.09,128.06,125.81,124.32,124.29,123.72,119.05, 114.41,56.64.MS m/z(ESI):298.08[M+H]+.
化合物2-(2-乙氧基吡啶-3-基)喹啉-4-羧酸(7j)的制备
Figure BDA0002304622230000122
中间体化合物7j
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到灰色固体化合物7j，反应产率为55％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.80(s,1H),8.74(dd,J＝8.6,1.4Hz,1H),8.62(s, 1H),8.40(dd,J＝7.4,2.0Hz,1H),8.33(dd,J＝4.9,2.0Hz,1H),8.16(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H), 7.86(ddd,J＝8.4,6.8,1.5Hz,1H),7.74(ddd,J＝8.3,6.9,1.3Hz,1H),7.22(dd,J＝7.5,4.9Hz, 1H),4.49(q,J＝7.0Hz,2H),1.38(t,J＝7.0Hz,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ168.05, 160.95,154.51,148.93,148.63,140.26,136.41,130.43,130.18,128.45,125.87,123.94,123.71, 122.06,118.07,62.24,14.90.MS m/z(ESI):295.11[M+H]+.
化合物2-(吡嗪-2-基)喹啉-4-羧酸(7k)的制备
Figure BDA0002304622230000123
中间体化合物7k
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到灰色固体化合物7k，反应产率为45％，HPLC 纯度为94％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.03(s,1H),9.77(d,J＝1.5Hz,1H),8.90(s,1H), 8.85(dd,J＝2.5,1.5Hz,1H),8.82(d,J＝2.5Hz,1H),8.81-8.77(m,1H),8.30-8.23(m,1H),7.93 (ddd,J＝8.4,6.8,1.4Hz,1H),7.80(ddd,J＝8.4,6.9,1.3Hz,1H).MS m/z(ESI):252.07[M+H]+. 化合物2-(吡啶-3-基)喹啉-4-羧酸(7l)的制备
Figure BDA0002304622230000131
中间体化合物7l
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到无色油状化合物7l，反应产率为43％，HPLC 纯度为93％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(d,J＝2.3Hz,1H),8.73(dd,J＝4.8,1.6Hz, 1H),8.66(dt,J＝7.9,1.8Hz,2H),8.52(s,1H),8.21(dd,J＝8.5,1.2Hz,1H),7.89(ddd,J＝8.4, 6.8,1.4Hz,1H),7.75(ddd,J＝8.4,6.8,1.3Hz,1H),7.61(ddd,J＝8.0,4.8,0.9Hz,1H).MS m/z (ESI):251.08[M+H]+.
化合物2-(2H-1,3-苯并二氧杂环戊烯-5-基)喹啉酮-4-羧酸(7m)的制备
Figure BDA0002304622230000132
中间体化合物7m
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到白色固体化合物7m，反应产率为72％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(dd,J＝8.5,1.3Hz,1H),8.39(s,1H),8.12 (dd,J＝8.5,1.2Hz,1H),7.90-7.79(m,3H),7.67(ddd,J＝8.3,6.8,1.4Hz,1H),7.10(d,J＝8.1Hz, 1H),6.14(s,2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ168.17,155.66,149.48,148.71,148.68,138.28, 132.73,130.59,130.05,127.85,125.83,123.66,122.30,119.22,109.06,107.51,102.04.MS m/z (ESI):294.05[M+H]+.
化合物2-(苯并呋喃-2-基)喹啉-4-羧酸(7n)的制备
Figure BDA0002304622230000133
中间体化合物7n
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到黄色固体化合物7n，反应产率为69％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.10(s,1H),8.71(dd,J＝8.6,1.3Hz,1H),8.51(s, 1H),8.19(dd,J＝8.5,1.1Hz,1H),7.94(d,J＝0.9Hz,1H),7.89(ddd,J＝8.4,6.8,1.5Hz,1H), 7.83-7.77(m,2H),7.74(ddd,J＝8.3,6.9,1.3Hz,1H),7.46(ddd,J＝8.5,7.2,1.3Hz,1H),7.35(td, J＝7.5,0.9Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ167.73,155.47,154.47,148.94,148.44, 138.09,131.03,130.03,128.75,128.64,126.60,126.10,124.32,124.12,122.67,119.16,112.17, 107.61.MS m/z(ESI):290.08[M+H]+.
化合物2-(2,3-二氢-1,4-苯并二恶英-6-基)喹啉-4-羧酸(7o)的制备
Figure BDA0002304622230000141
中间体化合物7o
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到白色固体化合物7o，反应产率为69％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(dd,J＝8.5,1.3Hz,1H),8.37(s,1H),8.12 (dd,J＝8.5,1.2Hz,1H),7.88-7.76(m,3H),7.67(ddd,J＝8.4,6.9,1.3Hz,1H),7.04(d,J＝8.3Hz, 1H),4.34(br s,4H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ168.14,155.58,148.78,145.81,144.26, 138.10,131.69,130.57,130.07,127.83,125.81,123.64,120.91,119.10,117.98,116.23,64.86, 64.57.MS m/z(ESI):308.09[M+H]+.
化合物2-(7-甲氧基-1-苯并呋喃-2-基)喹啉-4-羧酸(7p)的制备
Figure BDA0002304622230000142
中间体化合物7p
具体的合成方法同化合物3，反应处理得到白色国体化合物7p，反应产率为65％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(dd,J＝8.6,1.3Hz,1H),8.48(s,1H),8.19 (dd,J＝8.6,1.2Hz,1H),7.90(s,1H),7.89(ddd,J＝8.4,6.8,1.4Hz,1H),7.74(ddd,J＝8.4,6.9, 1.3Hz,1H),7.35(dd,J＝7.8,1.0Hz,1H),7.27(t,J＝7.8Hz,1H),7.07(dd,J＝7.9,1.0Hz,1H), 4.03(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ167.70,154.44,148.95,148.42,145.70,144.71, 138.03,131.05,130.29,130.03,128.66,126.11,124.91,124.33,119.09,114.53,108.62,107.83, 56.27.MS m/z(ESI):320.09[M+H]+.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(3,4-二甲氧基苯基)喹啉酮-4-羧酰胺(5)的制备
Figure BDA0002304622230000143
目标化合物5
在25mL的圆底烧瓶中，将中间体化合物3(155mg,0.5mmol)溶于6mL的三氯氧磷中，升温至107℃反应4h-5h。TLC监测，反应完成后，旋干反应溶液。用无水DMF溶解 所得的酰氯类化合物，加入3-氨基-4-氯三氟甲苯(117mg,0.6mmol)和DMAP(12.2mg,0.1 mmol)，在氮气保护条件下，常温反应过夜。TLC监测，反应完成后，加水稀释反应液，用 乙酸乙酯萃取，饱和NaCl水溶液洗涤三次，无水Na2SO4干燥，旋干，用乙酸乙酯和石油醚 混合溶剂过柱，得到目标产物5，即N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(3,4-二甲氧基苯基) 喹啉酮-4-羧酰胺，产率为79.1％，HPLC纯度95％。Mp 209.7-210.6℃.1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ10.84(s,1H),8.41(s,1H),8.30(d,J＝2.2Hz,1H),8.26(d,J＝8.2Hz,1H),8.15(d, J＝8.4Hz,1H),7.97(d,J＝1.8Hz,1H),7.94(dd,J＝8.4,2.5Hz,1H),7.88-7.81(m,2H),7.71 (dd,J＝7.6,2.1Hz,1H),7.65(t,J＝7.7Hz,1H),7.17(d,J＝8.5Hz,1H),3.94(s,3H),3.87(s, 3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.61,155.93,151.22,149.59,142.52,136.08,133.56,131.46,131.22,130.68,129.88,128.84,128.51,127.45,125.57,125.13,124.57,123.38,122.76, 120.90,117.39,112.24,110.83,56.19,56.11.HRMS m/z(ESI)calcd forC25H19ClF3N2O3[M+H]+ 487.1031 found:487.1027,calcd for C25H18ClF3N2O3Na[M+Na]+509.0850 found:509.0859.
化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-(萘-1-基)喹啉酮-4-羧酰胺(5a)的制备
Figure BDA0002304622230000151
目标化合物5a
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到灰白色固体化合物5a，反应产率为73％，HPLC 纯度为95％。Mp 226.9-228.6℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),8.50(s,1H), 8.26(d,J＝8.2Hz,1H),8.22-8.16(m,2H),8.02-8.01(m,3H),7.93(dd,J＝12.5,7.8Hz,2H),7.84 (t,J＝7.5Hz,1H),7.69-7.56(m,4H),7.17(d,J＝7.1Hz,1H),3.95(s,3H),3.87(s,3H).13C NMR (101MHz,DMSO)δ166.91,153.09,151.19,149.59,148.38,143.38,134.29,133.54,131.39, 130.61,129.94,128.89,128.63,127.40,126.81,126.67,126.63,126.06,125.59,123.66,123.61, 123.60,121.05,117.17,112.24,110.97,56.21,56.12.HRMS m/z(ESI)calcd for C28H23N2O3 [M+H]+435.1703 found:435.1714,calcd for C28H22N2O3Na[M+Na]+457.1523 found:457.1532. 化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-(萘-2-基)喹诺酮-4-甲酰胺(5b)的制备
Figure BDA0002304622230000152
目标化合物5b
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到灰白色固体化合物5b，反应产率为71％，HPLC 纯度为95％。Mp 215.9-216.4℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.04(s,1H),8.60(d,J＝2.1 Hz,1H),8.41(s,1H),8.17(t,J＝8.3Hz,2H),8.00-7.89(m,5H),7.85-7.80(m,2H),7.64(t,J＝8.2 Hz,1H),7.53(t,J＝7.0Hz,1H),7.46(t,J＝7.1Hz,1H),7.15(d,J＝8.8Hz,1H),3.93(s,3H), 3.86(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.18,156.07,151.16,149.56,148.34,143.38, 136.97,133.83,131.25,130.66,129.93,128.94,128.02,128.01,127.99,127.41,127.04,125.51, 125.48,123.41,120.97,120.91,116.96,116.82,112.21,110.90,56.19,56.09.HRMS m/z(ESI) calcd for C28H23N2O3[M+H]+435.1703 found:435.1718,calcd for C28H22N2O3Na[M+Na]+ 457.1523 found:457.1548.
化合物甲基(2S，3S)-3-[2-(3,4-二甲氧基苯基)喹啉-4-酰氨基]二环[2.2.2]辛烷-2-羧酸甲酯 (5c)的制备
Figure BDA0002304622230000161
目标化合物5c
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到白色固体化合物5c，反应产率为68％，HPLC 纯度为95％。Mp 185.9-187.2℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(d,J＝7.0Hz,1H),8.09 (d,J＝8.4Hz,1H),8.06(s,1H),8.03(d,J＝7.6Hz,1H),7.93(d,J＝2.0Hz,1H),7.88(dd,J＝8.4, 2.0Hz,1H),7.81-7.76(m,1H),7.62-7.58(m,1H),7.14(d,J＝8.5Hz,1H),4.50(t,J＝6.7Hz,1H), 3.91(s,3H),3.85(s,3H),3.68(s,3H),2.66(d,J＝6.5Hz,1H),1.93-1.90(m,2H),1.82-1.75(m, 1H),1.67-1.57(m,3H),1.54-1.39(m,4H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ174.71,166.92,155.91, 151.11,149.54,148.20,143.87,131.31,130.49,129.80,127.12,125.49,123.62,120.88,116.58, 112.20,110.82,53.16,53.09,52.22,50.15,48.54,29.47,28.45,25.67,24.26,21.21,19.49.HRMS m/z(ESI)calcd forC28H31N2O5[M+H]+475.2227 found:475.2240,calcd for C28H30N2O5Na [M+Na]+497.2047found:497.2059.
化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-[(1R，3S，5R，7S)-3-羟基金刚烷-1-基]喹啉-4-甲酰胺 (5d)的制备
Figure BDA0002304622230000162
目标化合物5d
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到白色固体化合物5d，反应产率为66％，HPLC 纯度为95％。Mp 167.3-168.5℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),8.08(d,J＝8.4 Hz,1H),8.01(d,J＝8.7Hz,1H),7.99(s,1H),7.92(d,J＝1.5Hz,1H),7.88(dd,J＝8.3,1.9Hz, 1H),7.77(t,J＝7.6Hz,1H),7.60(t,J＝6.8Hz,1H),7.12(d,J＝8.5Hz,1H),4.56(s,1H),3.91(s, 3H),3.85(s,3H),2.21(br s,2H),2.06-1.98(m,6H),1.65-1.48(m,6H).13C NMR(101MHz, DMSO)δ166.82,155.95,151.05,149.51,148.18,144.69,144.68,131.44,129.75,127.00,125.49, 123.66,120.91,116.12,112.14,110.85,67.83,56.19,56.08,55.07,55.08,49.38,44.72,44.71, 40.72,35.37,30.62,30.61.HRMS m/z(ESI)calcd for C28H31N2O4[M+H]+459.2278 found: 459.2295,calcd for C28H30N2O4Na[M+Na]+481.2098 found:481.2123.
化合物N-[3,5-二(三氟甲基)苯基]-2-(3,4-二甲氧基苯基)喹啉-4-甲酰胺(5e)的制备
Figure BDA0002304622230000171
目标化合物5e
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到灰白色固体化合物5e，反应产率为69％，HPLC 纯度为96％。Mp 215.1-216.5℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.44(s,1H),8.59-8.50(m, 2H),8.46(s,1H),8.18(dd,J＝15.6,8.4Hz,2H),7.98-7.95(m,2H),7.91(s,1H),7.88-7.81(m, 1H),7.65(t,J＝7.6Hz,1H),7.16(d,J＝8.5Hz,1H),3.93(s,3H),3.87(s,3H).13C NMR(101 MHz,DMSO)δ166.74,156.00,151.27,149.59,148.35,142.22,141.19,131.50,131.17,131.06, 130.82,129.93,127.60,125.47,125.06,123.03,122.34,120.96,120.28,120.26,117.48,117.24, 112.23,110.85,56.20,56.10.HRMS m/z(ESI)calcd for C26H19F6N2O3[M+H]+521.1294 found: 521.1286,calcd for C26H18F6N2O3Na[M+Na]+543.1114 found:543.1125.
化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-(3-甲氧基苯基)喹啉-4-甲酰胺(5f)的制备
Figure BDA0002304622230000172
目标化合物5f
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到白色固体化合物5f，反应产率为65％，HPLC 纯度为95％。Mp 171.6-172.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),8.33(s,1H), 8.12(dd,J＝11.6,8.5Hz,2H),7.98-7.95(m,2H),7.84-7.80(m,1H),7.67-7.59(m,1H),7.56-7.52 (m,1H),7.39(d,J＝8.2Hz,1H),7.31(d,J＝6.5Hz,1H),7.15(d,J＝8.5Hz,1H),6.76(dd,J＝ 11.6,6.5Hz,1H),3.93(s,3H),3.86(s,3H),3.78(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.95, 160.03,156.03,151.15,149.55,148.30,143.43,140.52,131.24,130.63,130.11,129.90,127.38, 125.46,123.33,120.94,116.85,112.70,112.22,110.88,110.05,106.24,56.19,56.09,55.56.HRMS m/z(ESI)calcd for C25H23N2O4[M+H]+415.1652 found:415.1654,calcd for C25H22N2O4Na [M+Na]+437.1472 found:437.1482.
化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-(3-氟苯基)喹啉-4-甲酰胺(5g)的制备
Figure BDA0002304622230000181
目标化合物5g
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到白色固体化合物5g，反应产率为63％，HPLC 纯度为95％。Mp 203.9-205.6℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.02(s,1H),8.37(s,1H), 8.17-8.08(m,2H),8.01-7.95(m,2H),7.86-7.79(m,2H),7.64(ddd,J＝8.2,6.8,1.3Hz,1H), 7.59-7.54(m,1H),7.50-7.42(m,1H),7.15(d,J＝9.0Hz,1H),7.01(td,J＝8.4,2.6Hz,1H),3.93 (s,3H),3.86(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.19,156.02,151.18,149.56,148.30, 143.06,131.17,131.05,130.95,130.70,129.92,127.47,125.41,123.23,120.95,116.95,116.23, 116.20,112.22,110.88,56.19,56.10.HRMS m/z(ESI)calcd for C24H20FN2O3[M+H]+403.1452 found:403.1460,calcd for C24H19FN2O3Na[M+Na]+425.1272 found:525.1276.
化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-(4-乙氧基苯基)喹啉-4-甲酰胺(5h)的制备
Figure BDA0002304622230000182
目标化合物5h
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到白色固体化合物5h，反应产率为60％，HPLC 纯度为95％。Mp 169.3-170.1℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.66(s,1H),8.32(s,1H), 8.16-8.10(m,2H),7.97(d,J＝6.9Hz,2H),7.81(ddd,J＝8.3,6.9,1.4Hz,1H),7.77-7.71(m,2H), 7.62(ddd,J＝8.3,6.8,1.2Hz,1H),7.18-7.11(m,1H),6.97(d,J＝9.0Hz,2H),4.03(q,J＝6.9Hz, 2H),3.93(s,3H),3.86(s,3H),1.34(t,J＝6.9Hz,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.43, 156.03,155.54,151.13,149.55,148.31,143.61,132.41,131.28,130.58,129.87,127.30,125.57, 123.46,121.96,116.83,114.94,112.21,110.88,63.64,56.18,56.09,15.16.HRMS m/z(ESI)calcd for C26H25N2O4[M+H]+429.1809found:429.1813,calcd for C26H24N2O4Na[M+Na]+451.1628 found:451.1633.
化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-(4-氟-2-硝基苯基)喹啉-4-甲酰胺(5i)的制备
Figure BDA0002304622230000183
目标化合物5i
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到淡黄色固体化合物5i，反应产率为45％，HPLC 纯度为95％。Mp 203.9-205.3℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.23(s,1H),8.35(s,1H), 8.23(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),8.19-8.13(m,1H),8.04(dd,J＝8.5,2.9Hz,1H),7.97(d,J＝2.1Hz, 1H),7.92(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),7.88-7.72(m,3H),7.67(ddd,J＝8.2,6.8,1.3Hz,1H),7.18(d, J＝8.5Hz,1H),3.94(s,3H),3.87(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.08,160.31,157.86, 155.94,151.28,149.62,148.40,144.55,141.85,131.08,130.85,129.95,127.55,125.40,123.32, 121.79,121.57,120.87,117.23,113.09,112.28,110.80,56.18,56.13.HRMS m/z(ESI)calcd for C24H19FN3O5[M+H]+448.1303found:448.1309,calcd for C24H18FN3O5Na[M+Na]+470.1123 found:470.1134.
化合物N-[2-氯-4-(三氟甲基)苯基]-2-(3,4-二甲氧基苯基)喹啉-4-甲酰胺(5j)的制备
Figure BDA0002304622230000191
目标化合物5j
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到白色固体化合物5j，反应产率为70％，HPLC 纯度为95％。Mp 186.8-187.5℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),8.38(s,1H), 8.22(dd,J＝8.4,1.3Hz,1H),8.15(d,J＝8.4Hz,2H),8.04(d,J＝2.1Hz,1H),7.99-7.92(m,2H), 7.90-7.81(m,2H),7.66(ddd,J＝8.2,6.9,1.3Hz,1H),7.17(d,J＝8.4Hz,1H),3.93(s,3H),3.87 (s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.47,155.95,151.23,149.60,148.33,142.33,138.85, 131.20,130.71,129.93,129.31,128.53,127.50,127.34,127.30,125.44,125.18,123.35,120.94, 117.35,112.25,110.85,56.18,56.11.HRMS m/z(ESI)calcd for C25H19ClF3N2O3[M+H]+ 487.1031 found:487.1037,calcd forC25H18ClF3N2O3Na[M+Na]+509.0850 found:509.0862.
化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-[4-(三氟甲基)苯基]喹啉-4-甲酰胺(5k)的制备
Figure BDA0002304622230000192
目标化合物5k
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到白色固体化合物5k，反应产率为67％，HPLC 纯度为95％。Mp 211.3-212.6℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.17(s,1H),8.40(s,1H), 8.19-8.09(m,2H),8.05(d,J＝8.5Hz,2H),7.98(dq,J＝4.5,2.1Hz,2H),7.88-7.76(m,3H),7.64 (ddd,J＝8.2,6.9,1.3Hz,1H),7.15(d,J＝9.0Hz,1H),3.92(s,3H),3.86(s,3H).13C NMR(101 MHz,DMSO)δ166.44,156.02,151.19,149.56,148.30,142.90,131.14,130.73,129.94,127.52, 126.66,126.62,125.35,124.75,123.18,120.96,120.39,117.03,112.23,110.88,56.19,56.10. HRMS m/z(ESI)calcd for C25H20F3N2O3[M+H]+453.1421 found:453.1423,calcd for C25H19F3N2O3Na[M+Na]+475.1240 found:475.1252.
化合物N-(4-叔丁基苯基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)喹啉-4-甲酰胺(5l)的制备
Figure BDA0002304622230000201
目标化合物5l
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到白色固体化合物5l，反应产率为61％，HPLC 纯度为95％。Mp 228.4-229.3℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.74(s,1H),8.31(s,1H), 8.17-8.08(m,2H),7.96(d,J＝7.3Hz,2H),7.82(ddd,J＝8.4,6.9,1.4Hz,1H),7.75(d,J＝8.7Hz, 1H),7.62(ddd,J＝8.1,6.8,1.3Hz,1H),7.42(d,J＝8.7Hz,2H),7.14(d,J＝8.9Hz,1H),3.92(s, 3H),3.86(s,3H),1.30(s,9H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.72,156.01,151.14,149.55, 148.31,146.98,143.54,136.82,131.26,130.60,129.89,127.33,125.88,125.51,123.43,120.91, 120.20,116.85,112.22,110.88,56.18,56.09,34.60,31.68.HRMS m/z(ESI)calcd for C28H29N2O3 [M+H]+441.2173 found:441.2180,calcd for C28H28N2O3Na[M+Na]+463.1992 found:463.1995. 化合物2-(3,4-二甲氧基苯基)-N-(2,4,6-三甲基苯基)喹啉-4-甲酰胺(5m)的制备
Figure BDA0002304622230000202
目标化合物5m
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到灰白色固体化合物5m，反应产率为59％，HPLC 纯度为95％。Mp 222.8-223.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.12(s,1H),8.26(d,J＝6.7 Hz,2H),8.15(d,J＝8.4Hz,1H),7.97(s,1H),7.91(d,J＝8.4Hz,1H),7.83(t,J＝7.7Hz,1H), 7.66(t,J＝7.7Hz,1H),7.18(d,J＝8.4Hz,1H),6.99(s,2H),3.93(s,3H),3.87(s,3H),2.33(s, 6H),2.28(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.90,156.06,151.19,149.61,148.44,143.32, 136.49,135.57,132.30,131.38,130.65,129.94,128.99,127.40,125.60,123.67,120.95,116.95, 112.30,110.91,56.17,56.12,21.03,18.74.HRMS m/z(ESI)calcd for C27H27N2O3[M+H]+ 427.2016 found:427.2021,calcd forC27H26N2O3Na[M+Na]+449.1836 found:449.1845.
化合物N-(2,4-二叔丁基-5-羟基苯基)-2-(3,4-二甲氧基苯基)喹啉-4-甲酰胺(5n)的制备
Figure BDA0002304622230000211
目标化合物5n
具体的合成方法同化合物5，反应处理得到白色固体化合物5n，反应产率为58％，HPLC 纯度为95％。Mp 254.1-255.5℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.08(s,1H),9.33(s,1H), 8.27(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),8.16(d,J＝8.1Hz,2H),7.92(d,J＝2.1Hz,1H),7.88-7.81(m,2H), 7.67(ddd,J＝8.3,6.8,1.3Hz,1H),7.25(s,1H),7.20(d,J＝8.5Hz,1H),6.79(s,1H),3.93(s,3H), 3.87(s,3H),1.40(br s,18H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.85,155.92,154.26,151.21, 149.64,148.53,143.08,136.66,134.40,133.67,131.35,130.67,130.01,127.31,125.53,125.01, 123.64,120.68,119.41,116.66,112.39,110.74,56.14,56.10,34.92,31.66,29.82.HRMS m/z(ESI) calcd for C32H37N2O4[M+H]+513.2748 found:513.2754,calcd for C32H36N2O4Na[M+Na]+ 535.2567 found:535.2565.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]喹诺酮-4-甲酰胺(8n)的制备
Figure BDA0002304622230000212
目标化合物8n
在25mL的圆底烧瓶中，将中间体化合物7(144.5mg,0.5mmol)溶于6mL的三氯氧磷中，升温至107℃反应4h-5h。TLC监测，反应完成后，旋干反应溶液。用无水DMF溶解 所得的酰氯类化合物，加入3-氨基-4-氯三氟甲苯(4,117mg,0.6mmol)和DMAP(12.2mg,0.1 mmol)，在氮气保护条件下，常温反应过夜。TLC监测，反应完成后，加水稀释反应液，用 乙酸乙酯萃取，饱和NaCl水溶液洗涤三次，无水Na2SO4干燥，旋干，用乙酸乙酯和石油醚 混合溶剂过柱，得到目标产物8n，即2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基] 喹诺酮-4-甲酰胺，反应产率为55.2％，HPLC纯度96％。Mp 245.1-246.9℃.1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ10.94(s,1H),8.46(s,1H),8.32(s,1H),8.29(d,J＝8.4Hz,1H),8.21(d,J＝8.40Hz, 1H),7.95(s,1H),7.93-7.88(m,2H),7.82(dd,J＝7.7Hz,1.1Hz,1H),7.78(d,J＝8.3Hz,1H),7.77-7.72(m,2H),7.49-7.45(m,1H),7,36(t,J＝9.5Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.12,155.50,154.87,148.40,148.35,142.81,135.77,133.68,131.50,131.31,129.91,128.92, 128.75,128.60,128.44,126.69,125.80,125.33,124.85,124.81,123.96,122.74,117.05,112.15, 107.08.HRMS m/z(ESI)calcd for C25H15ClF3N2O2[M+H]+467.0769found:467.0782,calcd for C25H14ClF3N2O2Na[M+Na]+489.0583 found:489.0616.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(噻吩-2-基)喹啉-4-甲酰胺(8a)的制备
Figure BDA0002304622230000221
目标化合物8a
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8a，反应产率为51％，HPLC 纯度为96％。Mp 252.2-253.6℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),8.39(s,1H), 8.28(d,J＝1.2Hz,1H),8.21(d,J＝6.9Hz,1H),8.08(dd,J＝11.5,5.7Hz,2H),7.89-7.79(m,3H), 7.73(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.68-7.64(m,1H),7.28(dd,J＝4.9,3.7Hz,1H).13C NMR(101 MHz,DMSO)δ166.27,152.09,148.11,144.62,142.67,135.79,133.53,131.52,131.06,130.71, 129.39,129.14,128.87,128.55,128.21,127.66,125.66,125.07,124.74,123.57,116.63.HRMS m/z(ESI)calcd for C21H13ClF3N2OS[M+H]+433.0384found:433.0391,calcd for C21H12ClF3N2OSNa[M+Na]+455.0203 found:455.0217.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(5-甲基噻吩-2-基)喹诺酮-4-甲酰胺(8b)的制备
Figure BDA0002304622230000222
目标化合物8b
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8b，反应产率为46％，HPLC 纯度为96％。Mp 216.1-217.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.84(s,1H),8.31(s,1H), 8.27(s,1H),8.20(d,J＝8.1Hz,1H),8.02(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(t,J＝6.9Hz,2H),7.83-7.78 (m,1H),7.72(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),7.63(t,J＝8.1Hz,1H),6.97(dd,J＝3.6,1.0Hz,1H),2.54 (s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.33,152.17,148.13,144.58,142.52,142.22,135.90, 131.49,130.93,129.27,128.87,128.54,128.38,127.59,127.37,125.66,125.45,125.03,124.69, 123.40,116.25,15.89.HRMS m/z(ESI)calcd forC22H15ClF3N2OS[M+H]+447.0540 found: 447.0541,calcd for C22H14ClF3N2OSNa[M+Na]+469.0360 found:469.0440.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(4-甲氧基苯基)喹啉-4-甲酰胺(8c)的制备
Figure BDA0002304622230000231
目标化合物8c
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8c，反应产率为56％，HPLC 纯度为96％。Mp 205.7-207.1℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),8.39(s,1H), 8.33(d,J＝8.8Hz,2H),8.28(d,J＝1.2Hz,1H),8.25(d,J＝8.0Hz,1H),8.14(d,J＝8.3Hz,1H), 7.89-7.82(m,2H),7.73(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.68-7.64(m,1H),7.16(d,J＝8.9Hz,2H),3.87 (s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.54,161.42,155.90,148.39,142.37,135.85,133.72, 131.48,131.01,130.75,129.86,129.25,128.87,128.55,127.49,125.54,125.32,125.28,124.79, 124.76,123.30,117.26,114.83,55.84.HRMS m/z(ESI)calcd for C24H17ClF3N2O2[M+H]+ 457.0925 found:457.0951,calcd forC24H16ClF3N2O2Na[M+Na]+479.0745 found:479.0740.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(四氢吡喃-4-基)喹诺酮-4-甲酰胺(8d)的制备
Figure BDA0002304622230000232
目标化合物8d
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到油状半固体化合物8d，反应产率为27％， HPLC纯度为96％。Mp 169.4-168.5℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.75(s,1H),8.23(t,J ＝3.8Hz,2H),8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.87-7.79(m,3H),7.72(dd,J＝8.3,1.2Hz,1H),7.65(t,J ＝8.0Hz,1H),4.04(t,J＝3.0Hz,1H),4.01(t,J＝2.3Hz,1H),3.56-3.50(m,2H),3.26-3.19(m, 1H),2.01-1.91(m,4H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.54,164.72,147.98,142.08,135.82, 133.75,131.46,130.37,129.57,128.89,128.56,127.36,125.55,125.28,124.78,123.36,119.04, 67.51,67.51,43.64,32.15,32.15.HRMS m/z(ESI)calcd for C22H19ClF3N2O2[M+H]+435.1082 found:435.1068,calcd forC22H18ClF3N2O2Na[M+Na]+457.0901 found:457.0890.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(呋喃-2-基)喹啉-4-甲酰胺(8e)的制备
Figure BDA0002304622230000233
目标化合物8e
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8e，反应产率为49％，HPLC 纯度为96％。Mp 189.9-190.5℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),8.29-8.23(m, 3H),8.10(d,J＝8.3Hz,1H),8.00(d,J＝1.0Hz,1H),7.88-7.83(m,2H),7.73(dd,J＝8.9,2.0Hz, 1H),7.69-7.65(m,1H),7.46(d,J＝3.3Hz,1H),6.79(dd,J＝5.5,1.8Hz,1H).13C NMR(101 MHz,DMSO)δ166.21,153.10,148.46,148.30,145.89,142.62,135.76,133.67,131.48,131.08, 129.62,128.90.128.58,127.78,125.73,125.31,124.78,123.46,116.23,113.25,111.82.HRMS m/z(ESI)calcd for C21H13ClF3N2O2[M+H]+417.0612found:417.0589,calcd for C21H12ClF3N2O2Na[M+Na]+439.0432 found:439.0428.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(5-甲基呋喃-2-基)喹啉-4-甲酰胺(8f)的制备
Figure BDA0002304622230000241
目标化合物8f
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8f，反应产率为55％，HPLC 纯度为96％。Mp 208.9-209.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),8.27(s,1H), 8.21(d,J＝8.2Hz,1H),8.16(s,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.88-7.80(m,2H),7.72(d,J＝8.8 Hz,1H),7.64(t,J＝7.4Hz,1H),7.36(d,J＝3.2Hz,1H),6.40(d,J＝2.6Hz,1H),2.45(s,3H). 13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.27,155.19,151.63,148.45,148.33,142.49,135.79,133.65, 131.47,130.96,129.50,128.89,128.57,127.43,125.68,125.23,124.78,123.25,116.05,113.21, 109.64,14.14.HRMS m/z(ESI)calcd for C22H15ClF3N2O2[M+H]+431.0769 found:431.0791, calcd for C22H14ClF3N2O2Na[M+Na]+453.0588 found:455.0627.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-环戊基喹啉-4-甲酰胺(8g)的制备
Figure BDA0002304622230000242
目标化合物8g
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到无色油状半固体化合物8g，反应产率为23％， HPLC纯度为96％。Mp 187.9-189.6℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),8.25(s, 1H),8.21(d,J＝8.4Hz,1H),8.14(s,1H),8.08-8.01(m,1H),7.90-7.85(m,1H),7.79(ddd,J＝8.3, 6.8,1.4Hz,1H),7.75-7.70(m,1H),7.64(ddd,J＝8.2,6.9,1.3Hz,1H),3.01-2.88(m,2H), 2.70-2.55(m,3H),2.11-1.91(m,3H),0.84(q,J＝5.3,4.4Hz,1H).HRMSm/z(ESI)calcd for C22H19ClF3N2O[M+H]+419.1133 found:419.0959,calcd forC22H18ClF3N2ONa[M+Na]+ 441.0952 found:441.0790.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-环己基喹啉-4-甲酰胺(8h)的制备
Figure BDA0002304622230000251
目标化合物8h
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到无色油状半固体化合物8h，反应产率为25％， HPLC纯度为96％。Mp 126.6-128.3℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.74(s,1H),8.23-8.21 (m,2H),8.04(d,J＝8.4Hz,1H),7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.81-7.70(m,3H),7.63(t,J＝7.30Hz, 1H),2.95(t,J＝11.6Hz,1H),1.99(d,J＝11.9Hz,2H),1.86(d,J＝12.8Hz,2H),1.77-1.65(m, 3H),1.49-1.40(m,2H),1.34(d,J＝12.4Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.63,166.30, 148.00,141.90,135.90,133.78,131.44,130.23,129.51,128.88,128.56,127.14,125.51,125.43, 125.29,124.72,123.29,122.72,119.08,46.87,32.52,26.43,26.09.HRMS m/z(ESI)calcd for C23H21ClF3N2O[M+H]+433.1289 found:433.1251,calcd for C23H20ClF3N2ONa[M+Na]+ 455.1108 found:455.1088.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(3-氟-4-甲氧基苯基)喹啉酮-4-羧酰胺(8i)的制备
Figure BDA0002304622230000252
目标化合物8i
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8i，反应产率为48％，HPLC 纯度为96％。Mp 205.1-205.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),8.44(s,1H), 8.28-8.15(m,5H),7.89-7.83(m,2H),7.73(dd,J＝8.3,1.3Hz,1H),7.68(t,J＝8.0Hz,1H),7.39 (t,J＝8.6Hz,1H),3.96(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.42,154.70,153.51,151.08, 149.35,148.20,142.57,135.86,133.66,131.50,130.88,129.95,128.88,128.55,127.81,125.56, 125.22,124.81,124.38,123.50,117.26,114.99,114.49,56.68.HRMS m/z(ESI)calcd for C24H16ClF4N2O2[M+H]+475.0831 found:475.0845,calcd for C24H15ClF4N2O2Na[M+Na]+ 497.0650 found:497.0658.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(2-乙氧基吡啶-3-基)喹啉酮-4-羧酰胺(8j)的制 备
Figure BDA0002304622230000261
目标化合物8j
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8j，反应产率为28％，HPLC 纯度为96％。Mp 163.6-165.4℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),8.43-8.40(m, 2H),8.34(dd,J＝4.9,1.9Hz,1H),8.31(s,1H),8.24(s,1H),8.18(d,J＝8.4Hz,1H),7.90-7.86(m, 2H),7.73(t,J＝7.2Hz,2H),7.23(dd,J＝7.4,4.9Hz,1H),4.51(q,J＝8.6Hz,2H),1.39(t,J＝7.0 Hz,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ160.95,154.46,148.65,148.42,145.02,140.41,135.73, 133.68,131.51,130.80,129.98,126.13,125.66,125.09,124.87,123.49,122.68,122.66,122.18, 120.97,118.09,116.20,62.30,14.91.HRMS m/z(ESI)calcd for C24H18ClF3N3O2[M+H]+ 472.1034 found:472.1032,calcdfor C24H17ClF3N3O2Na[M+Na]+494.0854 found:494.0868.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(吡嗪-2-基)喹啉酮-4-羧酰胺(8k)的制备
Figure BDA0002304622230000262
目标化合物8k
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到灰色固体化合物8k，反应产率为29％，HPLC 纯度为96％。Mp 222.7-223.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),9.81(d,J＝1.9 Hz,1H),8.88-8.84(m,2H),8.77(s,1H),8.35(d,J＝8.1Hz,1H),8.30-8.27(m,2H),7.94(t,J＝ 7.2Hz,1H),7.88(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(t,J＝7.3Hz,1H),7.73(d,J＝7.7Hz,1H).13C NMR (101MHz,DMSO)δ166.25,153.90,150.11,148.06,146.19,144.65,143.48,143.18,135.75, 133.83,131.45,131.31,130.36,129.10,128.95,128.62,125.92,125.52,124.91,124.74,117.14. HRMS m/z(ESI)calcd for C21H13ClF3N4O[M+H]+429.0724found:429.0715,calcd for C21H12ClF3N4ONa[M+Na]+451.0544 found:451.0543.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(吡啶-3-基)喹啉酮-4-羧酰胺(8l)的制备
Figure BDA0002304622230000263
目标化合物8l
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8l，反应产率为28％，HPLC 纯度为96％。Mp 251.3-252.4℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.53(s,1H), 8.75(d,J＝3.8Hz,1H),8.70(d,J＝7.9Hz,1H),8.54(s,1H),8.31(t,J＝6.5Hz,2H),8.22(d,J＝ 8.3Hz,1H),7.92-7.87(m,2H),7.74(t,J＝7.5Hz,2H),7.64(q,J＝7.7,4.8Hz,1H).13C NMR (101MHz,DMSO)δ166.29,154.20,151.19,148.93,148.42,142.87,135.91,135.12,134.06, 133.67,131.49,131.07,130.16,128.88,128.56,128.38,125.67,125.17,124.75,124.46,123.86, 117.80.HRMS m/z(ESI)calcd for C22H14ClF3N3O[M+H]+428.0772 found:428.0764,calcd for C22H13ClF3N3ONa[M+Na]+450.0591 found:450.0600.
化合物2-(2H-1,3-苯并二氧戊-5-基)-N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]喹诺酮-4-甲酰胺(8m) 的制备
Figure BDA0002304622230000271
目标化合物8m
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8m，反应产率为56％，HPLC 纯度为96％。Mp 196.5-197.7℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),8.39(s,1H), 8.27-8.24(m,2H),8.14(d,J＝8.4Hz,1H),7.94-7.92(m,2H),7.85(dd,J＝17.9,7.8Hz,2H),7.73 (dd,J＝8.3,1.3Hz,1H),7.66(t,J＝8.1Hz,1H),7.14(d,J＝8.6Hz,1H),6.15(s,2H).13C NMR (101MHz,DMSO)δ166.46,155.61,149.51,148.68,148.28,142.37,135.88,133.73,132.91, 131.48,130.77,129.92,128.88,128.55,127.63,125.54,125.32,124.74,123.43,122.38,117.47, 109.09,107.58,102.09.HRMS m/z(ESI)calcdfor C24H15ClF3N2O3[M+H]+471.0718 found: 471.0711,calcd for C24H14ClF3N2O3Na[M+Na]+493.0537 found:493.0538.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(2,3-二氢-1,4-苯并二恶英-6-基)喹诺酮-4-甲酰胺(8o) 的制备
Figure BDA0002304622230000272
目标化合物8o
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物80，反应产率为55％，HPLC 纯度为96％。Mp 201.7-203.2℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),8.38(s,1H), 8.26(t,J＝7.9Hz,2H),8.13(d,J＝8.4Hz,1H),7.90-7.81(m,4H),7.73(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H), 7.66(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(d,J＝8.4Hz,1H),4.34(s,4H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ 166.47,155.56,148.34,145.82,144.25,142.30,135.90,133.77,131.89,131.45,130.73,129.92, 128.88,128.55,127.56,125.54,124.74,123.41,122.75,120.99,117.97,117.34,116.39,64.88, 64.60.HRMS m/z(ESI)calcd for C25H17ClF3N2O3[M+H]+485.0874 found:485.0866,calcd for C25H16ClF3N2O3Na[M+Na]+507.0694 found:507.0700.
化合物N-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2-(7-甲氧基-1-苯并呋喃-2-基)喹啉酮-4-羧酰胺(8p) 的制备
Figure BDA0002304622230000281
目标化合物8p
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物8p，反应产率为41％，HPLC 纯度为96％。Mp 254.6-255.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),8.43(s,1H), 8.31(t,J＝8.8Hz,2H),8.21(d,J＝8.4Hz,1H),7.95-7.87(m,3H),7.76-7.71(m,2H),7.37(d,J＝ 7.3Hz,1H),7.27(t,J＝7.9Hz,1H),7.07(d,J＝7.6Hz,1H),4.02(s,3H).13CNMR(101MHz, DMSO)δ166.12,154.68,148.39,148.32,145.73,144.76,142,87,135.90,133.58,131.47,131.29, 130.29,129.89,128.58,128.41,125.81,125.31,124.95,124.74,123.97,122.75,116.99,114.56, 108.71,108.05,56.29.HRMS m/z(ESI)calcdfor C26H17ClF3N2O3[M+H]+497.0874 found: 497.0833,calcd for C26H16ClF3N2O3Na[M+Na]+519.0694 found:519.0660.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(吡啶-3-基)喹啉酮-4-羧酰胺(12a)的制备
Figure BDA0002304622230000282
目标化合物12a
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12a，反应产率为32％，HPLC 纯度为96％。Mp 270.7-271.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.13(s,1H),8.97(d,J＝2.3 Hz,1H),8.42-8.40(m,2H),8.28(d,J＝8.2Hz,1H),8.20(d,J＝8.8Hz,2H),7.98(s,1H),7.90(t, J＝7.2Hz,1H),7.80(dd,J＝14.7,7.7Hz,2H),7.71(t,J＝7.8Hz,1H),7.52-7.44(m,2H),7.36(t, J＝7.4Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.86,155.50,154.61,148.43,145.65,143.01, 142.11,135.91,131.33,129.95,128.73,128.47,127.56,126.71,125.73,124.26,124.17,123.81, 122.73,116.90,112.18,108.00.HRMSm/z(ESI)calcd for C23H16N3O2[M+H]+366.1237 found: 366.1242,calcd for C23H15N3O2Na[M+Na]+388.1056 found:388.1080.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(吡啶-4-基)喹啉酮-4-羧酰胺(12b)的制备
Figure BDA0002304622230000291
目标化合物12b
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12b，反应产率为30％，HPLC 纯度为96％。Mp 263.9-264.6℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.29(s,1H),8.57(d,J＝5.3 Hz,2H),8.40(d,J＝5.7Hz,1H),8.14-8.24(m,2H),7.98(s,1H),7.92(dd,J＝14.3,7.2Hz,1H), 7.85-7.76(m,4H),7.72(t,J＝8.0Hz,1H),7.46(t,J＝7.5Hz,1H),7.36(t,J＝7.4Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.40,155.51,154.57,151.06,148.39,145.88,142.79,131.36,129.98, 128.72,128.55,126.72,125.59,124.17,123.66,122.73,116.92,114.51,114.44,112.18,108.06. HRMS m/z(ESI)calcd for C23H16N3O2[M+H]+366.1237 found:366.1240,calcd for C23H15N3O2Na[M+Na]+388.1056 found:388.1066.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(1-甲基哌啶-4-基)喹啉-4-甲酰胺(12c)的制备
Figure BDA0002304622230000292
目标化合物12c
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12c，反应产率为29％，HPLC 纯度为96％。Mp 242.4-246.3℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.99(d,J＝7.4Hz,1H), 8.23-8.09(m,3H),7.97-7.85(m,2H),7.80(dd,J＝14.4,8.0Hz,2H),7.70(t,J＝7.7Hz,1H),7.47 (t,J＝7.8Hz,1H),7.36(t,J＝7.5Hz,1H),4.17(d,J＝10.1Hz,1H),3.39(d,J＝12.2Hz,2H), 3.09(d,J＝12.3Hz,2H),2.74(s,3H),2.25-2.08(m,2H),1.82(q,J＝6.2Hz,2H).13C NMR(101 MHz,DMSO)δ166.38,155.45,154.68,148.35,148.32,143.78,131.17,129.84,128.74,128.16, 126.64,125.81,124.17,124.07,122.70,116.31,112.15,107.69,53.05,44.74,43.71,29.53.HRMS m/z(ESI)calcd for C24H24N3O2[M+H]+386.1863 found:386.1864,calcd for C24H23N3O2Na [M+Na]+408.1682 found:408.1740.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(5-溴-4-氟-2-甲基苯基)喹啉酮-4-羧酰胺(12d)的制备
Figure BDA0002304622230000301
目标化合物12d
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12d，反应产率为25％，HPLC 纯度为96％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),8.42(s,1H),8.29-8.18(m,2H), 8.00-7.97(m,1H),7.90(t,J＝7.0Hz,1H),7.80(dd,J＝16.4,7.9Hz,1H),7.73(t,J＝8.1Hz,1H), 7.73(t,J＝8.1Hz,1H),7.67(s,1H),7.49-7.30(m,2H),7.10(d,J＝9.6Hz,1H),7.05(d,J＝6.6 Hz,1H),2.14(s,3H).HRMS m/z(ESI)calcd for C25H17BrFN2O2[M+H]+475.0452 found: 475.0499,calcd for C25H16BrFN2O2Na[M+Na]+497.0271 found:497.0323.
化合物(2S，3S)-3-[2-(1-苯并呋喃-2-基)喹诺酮-4-酰氨基]双环[2.2.2]辛烷-2-羧酸甲酯(12e) 的制备
Figure BDA0002304622230000302
目标化合物12e
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12e，反应产率为44％，HPLC 纯度为96％。Mp 201.3-202.8℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.97(d,J＝6.7Hz,1H),8.15 (d,J＝8.4Hz,1H),8.12(s,1H),8.07(d,J＝8.2Hz,1H),7.94(s,1H),7.86(t,J＝7.4Hz,1H), 7.79(t,J＝8.4Hz,2H),7.69(t,J＝7.4Hz,1H),7.46(t,J＝7.5Hz,1H),7.35(t,J＝7.3Hz,1H), 4.54(t,J＝6.9Hz,1H),3.71(s,3H),2.68(d,J＝5.6Hz,1H),1.94(d,J＝10.9Hz,2H),1.81(t,J＝ 11.7Hz,1H),1.68-1.39(m,7H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ174.68,166.44,155.46,154.71, 148.31,144.16,131.09,129.82,128.76,128.09,126.58,125.73,124.20,124.12,122.67,116.20, 112.16,107.73,52.26,50.21,48.53,29.56,28.43,25.67,24.28,21.23,19.52.HRMS m/z(ESI) calcd for C28H27N2O4[M+H]+455.1965 found:455.1983,calcd for C28H26N2O4Na[M+Na]+ 477.1785 found:477.1803.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[(1R，3S，5R，7S)-3-羟基金刚烷-1-基]喹诺酮-4-甲酰 胺(12f)的制备
Figure BDA0002304622230000311
目标化合物12f
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12f，反应产率为41％，HPLC 纯度为96％。Mp 262.5-263.8℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46(s,1H),8.13(d,J＝8.5 Hz,1H),8.05(d,J＝8.2Hz,2H),7.93(s,1H),7.84(t,J＝7.5Hz,1H),7.80(t,J＝7.4Hz,2H), 7.69(t,J＝7.5Hz,1H),7.45(t,J＝7.7Hz,1H),7.35(t,J＝7.5Hz,1H),4.59(s,1H),2.23(s,2H), 2.07-2.05(m,6H),1.65-1.48(m,6H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.35,155.43,154.80, 148.30,144.91,130.97,129.76,128.78,127.98,126.54,125.70,124.22,124.11,122.64,115.89, 112.16,107.57,67.83,55.16,49.36,44.70,35.35,30.63.HRMS m/z(ESI)calcd for C28H27N2O3 [M+H]+439.2016 found:439.2039,calcd for C28H26N2O3Na[M+Na]+461.1836 found:461.1871.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[3,5-双(三氟甲基)苯基]喹诺酮-4-甲酰胺(12g)的制备
Figure BDA0002304622230000312
目标化合物12g
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12g，反应产率为26％，HPLC 纯度为96％。Mp 271.2-272.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.52(s,1H),8.51(d,J＝17.0 Hz,3H),8.25(dt,J＝21.1,8.0Hz,2H),8.04-7.89(m,3H),7.80(dd,J＝18.1,7.9Hz,2H),7.73(t, J＝7.7Hz,1H),7.53-7.44(m,1H),7.36(t,J＝7.5Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.17, 155.52,154.56,148.47,148.39,142.35,141.06,131.42,131.19,129.96,128.71,128.57,126.74, 125.79,124.18,122.75,120.42,117.08,112.16,108.02.HRMS m/z(ESI)calcd for C26H15F6N2O2 [M+H]+501.1032 found:501.1031,calcd for C26H14F6N2O2Na[M+Na]+523.0852 found: 523.0868.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(2,4,6-三甲基苯基)喹啉酮-4-羧酰胺(12h)的制备
Figure BDA0002304622230000313
目标化合物12h
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12h，反应产率为21％，HPLC 纯度为96％。Mp 266.8-268.1℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.21(s,1H),8.30(s,1H), 8.25(dd,J＝8.4,1.3Hz,1H),8.20(d,J＝8.4Hz,1H),7.99(d,J＝0.9Hz,1H),7.90(ddd,J＝8.4, 6.9,1.4Hz,1H),7.85-7.78(m,2H),7.74(ddd,J＝8.3,6.9,1.2Hz,1H),7.50-7.44(m,1H), 7.40-7.33(m,1H),7.00(s,2H),2.34(s,6H),2.29(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.53, 155.51,154.64,148.46,148.36,143.89,136.55,135.50,132.20,131.27,129.96,129.02,128.77, 128.37,126.66,125.75,124.21,124.17,122.71,116.38,112.22,107.91,21.03,18.76.HRMS m/z (ESI)calcd for C27H23N2O2[M+H]+407.1754 found:407.1760,calcd for C27H22N2O2Na[M+Na]+ 429.1573 found:429.1572.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(3-甲氧基苯基)喹啉酮-4-羧酰胺(12i)的制备
Figure BDA0002304622230000321
目标化合物12i
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12i，反应产率为42％，HPLC 纯度为96％。Mp 245.1-246.3℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.91(s,1H),8.36(s,1H), 8.23-8.14(m,2H),7.98(s,1H),7.93-7.86(m,1H),7.80(dd,J＝12.4,8.0Hz,2H),7.71(t,J＝7.6 Hz,1H),7.54(t,J＝2.2Hz,1H),7.46(t,J＝7.7Hz,1H),7.43-7.30(m,3H),6.78(dd,J＝8.2,2.5 Hz,1H),3.79(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.43,160.06,155.49,154.66,148.41, 143.57,140.39,131.24,130.16,129.93,128.75,128.37,126.66,125.73,124.15,123.92,122.70, 116.71,112.75,112.18,110.20,107.94,106.31,55.58.HRMS m/z(ESI)calcd for C25H19N2O3 [M+H]+395.1390 found:395.1404,calcd for C25H18N2O3Na[M+Na]+417.1210 found:417.1212.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(3-溴苯基)喹诺酮-4-甲酰胺(12j)的制备
Figure BDA0002304622230000322
目标化合物12j
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12j，反应产率为21％，HPLC 纯度为96％。Mp 287.1-288.2℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),8.39(s,1H), 8.18(t,J＝7.6Hz,3H),7.98(s,1H),7.90(ddd,J＝8.3,6.8,1.4Hz,1H),7.84-7.69(m,4H),7.46(t, J＝8.4Hz,1H),7.41-7.33(m,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.64,155.50,154.61,148.41, 143.13,140.75,131.37,131.32,129.94,128.73,128.46,127.37,126.70,125.71,124.16,123.81, 122.89,122.72,122.09,119.32,116.83,112.18,108.00.HRMS m/z(ESI)calcd for C24H16BrN2O2 [M+H]+443.0309 found:443.0393,calcd for C24H15BrN2O2Na[M+Na]+465.0209 found: 465.0213.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(3-氟苯基)喹诺酮-4-甲酰胺(12k)的制备
Figure BDA0002304622230000331
目标化合物12k
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12k，反应产率为20％，HPLC 纯度为96％。Mp 295.3-296.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.10(s,1H),8.38(s,1H), 8.18(dd,J＝14.9,8.3Hz,2H),8.05-7.66(m,6H),7.62-7.30(m,4H),7.03(t,J＝8.6Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.66,155.50,154.61,148.41,143.20,131.32,129.95,128.73,128.46, 126.69,125.68,124.16,123.81,122.72,116.80,116.30,116.28,112.18,108.00.HRMS m/z(ESI) calcd for C24H16FN2O2[M+H]+383.1190 found:383.1194,calcd for C24H15FN2O2Na[M+Na]+ 405.1010 found:405.1017.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(4-叔丁基苯基)喹啉酮-4-羧酰胺(12l)的制备
Figure BDA0002304622230000332
目标化合物12l
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12l，反应产率为19％，HPLC 纯度为96％。Mp 247.6-248.8℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.86(s,1H),8.34(s,1H), 8.23-8.13(m,2H),7.97(br s,1H),7.89(ddd,J＝8.4,6.8,1.4Hz,1H),7.83-7.73(m,4H),7.70 (ddd,J＝8.2,6.9,1.3Hz,1H),7.49-7.41(m,3H),7.35(t,J＝8.4Hz,1H),1.31(s,9H).13C NMR (101MHz,DMSO)δ165.21,155.48,154.68,148.42,148.40,147.12,143.74,136.68,131.21, 129.91,128.75,128.31,126.64,125.94,125.76,124.14,124.01,122.70,120.29,116.65,112.16, 107.88,34.62,31.68.HRMS m/z(ESI)calcd forC28H25N2O2[M+H]+421.1911 found:421.1923, calcd for C28H24N2O2Na[M+Na]+443.1730found:443.1721.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[2-氯-4-(三氟甲基)苯基]喹诺酮-4-甲酰胺(12m)的制备
Figure BDA0002304622230000341
目标化合物12m
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12m，反应产率为44％，HPLC 纯度为96％。Mp 249.1-249.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),8.44(s,1H), 8.22(tdd,J＝21.0,12.5,6.0Hz,3H),8.06(d,J＝2.2Hz,1H),7.98-7.69(m,6H),7.49(dt,J＝15.0, 7.6Hz,1H),7.36(t,J＝7.4Hz,1H).HRMS m/z(ESI)calcd forC25H15ClF3N2O2[M+H]+ 467.0769 found:467.0774,calcd for C25H14ClF3N2O2Na[M+Na]+489.0588 found:489.0929.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[4-(三氟甲基)苯基]喹诺酮-4-甲酰胺(12n)的制备
Figure BDA0002304622230000342
目标化合物12n
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12n，反应产率为35％，HPLC 纯度为96％。Mp 294.8-296.1℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.26(s,1H),8.42(s,1H), 8.19(dd,J＝16.9,8.4Hz,2H),8.05(d,J＝8.4Hz,2H),7.99(s,1H),7.90(ddd,J＝8.4,6.8,1.5 Hz,1H),7.82-7.77(m,4H),7.72(ddd,J＝8.3,6.9,1.3Hz,1H),7.49-7.44(m,1H),7.36(t,J＝7.5 Hz,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.91,155.51,154.61,148.42,143.06,142.77,131.32, 129.97,128.73,128.48,126.69,126.65,126.15,125.64,124.90,124.58,124.15,123.78,123.46, 122.72,120.49,116.88,112.17,108.01.HRMSm/z(ESI)calcd for C25H16F3N2O2[M+H]+ 433.1158 found:433.1166,calcd forC25H15F3N2O2Na[M+Na]+455.0978 found:455.0982.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(2,4-二叔丁基-5-羟基苯基)喹诺酮-4-甲酰胺(12o)的制 备
Figure BDA0002304622230000343
目标化合物12o
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12o，反应产率为19％，HPLC 纯度为96％。Mp 285.9-286.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.17(s,1H),9.35(s,1H), 8.32-8.15(m,3H),7.96-7.88(m,2H),7.86-7.70(m,3H),7.47(ddd,J＝8.4,7.2,1.4Hz,1H), 7.40-7.33(m,1H),7.26(s,1H),6.81(s,1H),1.40(d,J＝4.0Hz,18H).HRMS m/z(ESI)calcd for C32H33N2O3[M+H]+493.2486 found:493.2488,calcd for C32H32N2O3Na[M+Na]+515.2305 found: 515.2313.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(萘-1-基)喹啉酮-4-羧酰胺(12p)的制备
Figure BDA0002304622230000351
目标化合物12p
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12p，反应产率为38％，HPLC 纯度为96％。Mp 286.9-288.3℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),8.52(s,1H), 8.30(d,J＝8.4Hz,1H),8.21(s,2H),8.03(t,J＝4.3Hz,2H),7.92(br s,3H),7.82(t,J＝9.6Hz, 2H),7.74(t,J＝7.1Hz,1H),7.65-7.57(m,3H),7.47(t,J＝7.3Hz,1H),7.36(t,J＝7.0Hz,1H). HRMS m/z(ESI)calcd for C28H19N2O2[M+H]+415.1441 found:415.1451,calcd for C28H18N2O2Na[M+Na]+437.1260 found:437.1272.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(二苯甲基)喹诺酮-4-甲酰胺(12q)的制备
Figure BDA0002304622230000352
目标化合物12q
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12q，反应产率为53.9％， HPLC纯度为96％。Mp 248.5-249.3℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.92(d,J＝8.6Hz,1H), 8.18(s,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,1H),7.98(d,J＝8.3Hz,1H),7.95(s,1H),7.87-7.83(m,1H), 7.79(t,J＝9.1Hz,2H),7.65-7.61(m,1H),7.49-7.28(m,12H),6.54(d,J＝8.6Hz,1H).13C NMR (101MHz,DMSO)δ166.31,155.45,154.68,148.29,143.65,142.49,131.09,129.87,129.00, 128.75,128.11,127.91,127.67,126.59,125.61,124.24,124.13,122.68,116.44,112.19,107.83, 57.21.HRMS m/z(ESI)calcd for C31H23N2O3[M+H]+455.1573 found:455.1768,calcd for C31H22N2O2Na[M+Na]+477.1573 found:477.1593.
化合物2-[2-(1-苯并呋喃-2-基)喹诺酮-4-酰氨基]-5-硝基苯甲酸甲酯(12r)的制备
Figure BDA0002304622230000361
目标化合物12r
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到淡黄色固体化合物12r，反应产率为19％， HPLC纯度为96％。Mp 237.8-239.3℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),8.69(d,J ＝2.8Hz,1H),8.60(dd,J＝9.1,2.8Hz,1H),8.52-8.48(m,2H),8.32(d,J＝8.4Hz,1H),8.22(d,J ＝8.5Hz,1H),7.96-7.90(m,2H),7.83-7.73(m,3H),7.49-7.44(m,1H),7.36(t,J＝7.1Hz,1H), 3.91(s,3H).HRMS m/z(ESI)calcd for C26H18N3O6[M+H]+468.1190found:468.1195,calcd for C26H17N3O6Na[M+Na]+490.1010 found:490.1033.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[苯基(吡啶-2-基)甲基]喹啉酮-4-甲酰胺(12s)的制备
Figure BDA0002304622230000362
目标化合物12s
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12s，反应产率为33％，HPLC 纯度为96％。Mp 222.5-223.4℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.87(d,J＝8.2Hz,1H), 8.66-8.55(m,1H),8.19(s,1H),8.18-8.13(m,1H),8.06(d,J＝8.1Hz,1H),7.94(s,1H),7.85(t,J ＝7.7Hz,2H),7.79(t,J＝8.3Hz,2H),7.64(t,J＝7.6Hz,1H),7.58(d,J＝7.9Hz,1H),7.50(d,J ＝7.4Hz,2H),7.45(t,J＝7.2Hz,1H),7.41-7.27(m,5H),6.55(d,J＝8.2Hz,1H).13C NMR(101 MHz,DMSO)δ166.50,160.75,155.45,154.72,149.55,148.30,148.27,143.66,141.50,137.60, 131.05,129.82,128.96,128.75,128.20,128.05,127.84,126.57,125.79,124.28,124.12,123.02, 122.66,122.23,116.54,112.18,107.74,59.08.HRMS m/z(ESI)calcd for C30H22N3O2[M+H]+ 456.1707 found:456.1714,calcd for C30H21N3O2Na[M+Na]+478.1526 found:478.1530.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基}喹诺 酮-4-甲酰胺(12t)的制备
Figure BDA0002304622230000363
目标化合物12t
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12t，反应产率为39％，HPLC 纯度为96％。Mp 214.9-215.8℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.85(s,1H),8.41(s,1H), 8.28(d,J＝1.8Hz,1H),8.20(dd,J＝8.4,1.3Hz,2H),8.04(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.97(d,J＝ 1.4Hz,1H),7.90(t,J＝7.1Hz,1H),7.83-7.76(m,3H),7.71(t,J＝8.1Hz,1H),7.49-7.44(m,1H), 7.36(t,J＝7.5Hz,1H),3.61(s,3H),2.42-2.38(m,8H),2.19(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO) δ165.69,155.50,154.62,148.44,148.39,143.03,138.26,133.21,131.98,131.30,129.94,128.73, 128.44,128.26,127.96,126.69,125.74,124.16,123.83,122.72,117.53,116.88,112.16,107.95, 57.91,55.14,53.07,46.08.HRMS m/z(ESI)calcd for C31H28F3N4O2[M+H]+545.2159 found: 545.2188,calcdfor C31H27F3N4O2Na[M+Na]+567.1978 found:567.2033.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(4-苯氧基苯基)喹啉酮-4-羧酰胺(12u)的制备
Figure BDA0002304622230000371
目标化合物12u
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12u，反应产率为38％，HPLC 纯度为96％。Mp 264.5-265.8℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),8.37(s,1H), 8.20(dd,J＝8.2,3.5Hz,2H),7.98(s,1H),7.91-7.86(m,3H),7.80(dd,J＝12.8,8.0Hz,2H), 7.73-7.69(m,1H),7.48-7.33(m,4H),7.16-7.10(m,3H),7.03(d,J＝7.8Hz,2H).13C NMR(101 MHz,DMSO)δ165.21,157.73,155.49,154.67,153.03,148.43,148.41,143.55,135.09,131.24, 130.49,129.93,128.75,128.35,126.66,125.77,124.15,123.98,123.59,122.71,122.25,120.00, 118.47,116.77,112.17,107.93.HRMS m/z(ESI)calcd for C30H21N2O3[M+H]+457.1547 found: 457.1548,calcd for C30H20N2O3Na[M+Na]+479.1366 found:479.1370.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(3,4-二氯苯基)喹诺酮-4-羧酰胺(12v)的制备
Figure BDA0002304622230000372
目标化合物12v
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12v，反应产率为37％，HPLC 纯度为96％。Mp>290℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.19(s,1H),8.40(s,1H),8.28-8.14 (m,3H),8.01-7.95(m,1H),7.90(ddd,J＝8.4,6.8,1.5Hz,1H),7.84-7.67(m,5H),7.46(ddd,J＝8.4,7.2,1.4Hz,1H),7.41-7.33(m,1H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.71,155.50,154.58, 148.42,148.39,142.88,139.25,131.60,131.36,131.32,129.96,128.72,128.50,126.71,126.27, 125.69,124.17,123.74,122.73,121.81,120.60,116.88,112.18,108.02.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(2,3-二氯苯基)喹啉-4-羧酰胺(12w)的制备
Figure BDA0002304622230000381
目标化合物12w
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12w，反应产率为37％，HPLC 纯度为96％。Mp>290℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),8.39(s,1H),8.27(d,J ＝8.3Hz,1H),8.20(d,J＝8.4Hz,1H),7.96(s,1H),7.91(ddd,J＝8.4,6.9,1.4Hz,1H),7.81(dd, J＝12.8,8.1Hz,3H),7.74(ddd,J＝8.2,6.9,1.3Hz,1H),7.65(dd,J＝8.1,1.5Hz,1H),7.55-7.44 (m,2H),7.39-7.33(m,1H).
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(3-氯-2-甲基苯基)喹啉-4-羧酰胺(12x)的制备
Figure BDA0002304622230000382
目标化合物12x
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12x，反应产率为36％，HPLC 纯度为96％。Mp>290℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.65(s,1H),8.41(s,1H),8.22 (dd,J＝13.7,8.4Hz,2H),7.99(s,1H),7.90(ddd,J＝8.4,6.8,1.4Hz,1H),7.81(dd,J＝13.5,8.0 Hz,2H),7.73(ddd,J＝8.2,6.8,1.3Hz,1H),7.59(d,J＝7.8Hz,1H),7.51-7.41(m,2H),7.35(q,J ＝8.1Hz,2H),2.40(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ165.85,155.50,154.67,148.42,148.39, 143.35,137.68,134.43,132.09,131.27,129.95,128.75,128.41,127.55,126.68,126.03,125.74, 124.17,124.08,122.72,116.79,112.19,107.93,15.91.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(2,5-二甲基苯基)喹啉-4-羧酰胺(12y)的制备
Figure BDA0002304622230000383
目标化合物12y
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12y，反应产率为19％，HPLC 纯度为96％。Mp>290℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.33(s,1H),8.36(s,1H),8.27-8.16(m,2H),7.98(d,J＝1.0Hz,1H),7.90(ddd,J＝8.4,6.8,1.4Hz,1H),7.81(dd,J＝12.2, 8.0Hz,2H),7.73(ddd,J＝8.2,6.9,1.3Hz,1H),7.47(ddd,J＝8.3,7.2,1.3Hz,1H),7.44-7.40(m, 1H),7.40-7.32(m,1H),7.21(d,J＝7.7Hz,1H),7.05(dd,J＝7.7,1.8Hz,1H),2.35(s,3H),2.32 (s,3H).
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-(4-乙氧基苯基)喹啉-4-羧酰胺(12z)的制备
Figure BDA0002304622230000391
目标化合物12z
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12z，反应产率为36％，HPLC 纯度为96％。Mp>290℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.74(s,1H),8.34(s,1H),8.18(t,J ＝7.6Hz,2H),7.98(s,1H),7.93-7.85(m,1H),7.79(dd,J＝12.2,8.1Hz,2H),7.74-7.68(m,3H), 7.46(t,J＝7.9Hz,1H),7.35(t,J＝7.5Hz,1H),6.98(d,J＝8.9Hz,2H),4.04(q,J＝6.9Hz,2H), 1.35(t,J＝7.0Hz,3H).
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[(3,4-二氯苯基)甲基]喹啉-4-羧酰胺(12aa)的制备
Figure BDA0002304622230000392
目标化合物12aa
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12aa，反应产率为49％， HPLC纯度为96％。Mp 229.8-231.2℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(t,J＝6.0Hz,1H), 8.23(s,1H),8.20-8.12(m,2H),7.94(s,1H),7.87(ddd,J＝8.3,6.8,1.4Hz,1H),7.79(dd,J＝13.6, 8.0Hz,2H),7.74-7.64(m,3H),7.51-7.41(m,2H),7.35(t,J＝7.5Hz,1H),4.61(d,J＝6.0Hz, 2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ166.98,155.46,154.66,148.43,148.35,143.17,140.68, 131.46,131.15,130.06,129.88,128.74,128.36,128.19,126.62,125.79,124.14,124.11,122.69, 116.56,112.15,107.77,42.27.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[(4-甲基苯基)甲基]喹啉-4-羧酰胺(12ab)的制备
Figure BDA0002304622230000401
目标化合物12ab
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12ab，反应产率为58％， HPLC纯度为96％。Mp 235.8-236.9℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(t,J＝6.0Hz,1H), 8.18(s,1H),8.16(dt,J＝8.2,1.6Hz,2H),7.92(d,J＝0.9Hz,1H),7.86(ddd,J＝8.5,6.8,1.4Hz, 1H),7.83-7.74(m,2H),7.68(ddd,J＝8.2,6.9,1.3Hz,1H),7.45(ddd,J＝8.4,7.2,1.4Hz,1H), 7.37-7.32(m,3H),7.22(s,1H),7.20(s,1H),4.57(d,J＝5.9Hz,2H),2.32(s,3H).13C NMR(101 MHz,DMSO)δ166.75,155.45,154.70,148.41,148.33,143.64,136.57,136.40,131.10,129.84, 129.49,128.75,128.12,127.96,126.59,125.88,124.19,124.13,122.67,116.40,112.16,107.67, 43.01,21.19.
化合物2-(1-苯并呋喃-2-基)-N-[(4-氟苯基)甲基]喹啉-4-羧酰胺(12ac)的制备
Figure BDA0002304622230000402
目标化合物12ac
具体的合成方法同化合物8n，反应处理得到白色固体化合物12ac，反应产率为53％， HPLC纯度为96％。Mp 225.6-226.7℃.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(t,J＝5.9Hz,1H), 8.21(s,1H),8.16(dd,J＝8.3,1.3Hz,2H),7.93(d,J＝1.0Hz,1H),7.86(ddd,J＝8.2,6.8,1.4Hz, 1H),7.83-7.74(m,2H),7.68(ddd,J＝8.2,6.9,1.2Hz,1H),7.53-7.42(m,3H),7.35(td,J＝7.5, 1.0Hz,1H),7.23(t,J＝8.9Hz,2H),4.60(d,J＝5.8Hz,2H).13C NMR(101MHz,DMSO)δ 166.82,162.99,160.58,155.45,154.68,148.41,148.33,143.43,135.68,131.11,130.04,129.96, 129.85,128.74,128.14,126.60,125.86,124.16,122.68,116.49,115.77,115.56,112.16,107.75, 42.56.
药效学实验部分
实施例1化合物的酶活性激动实验
本实验的目的是检测化合物在体外对去乙酰化酶的激动活性。本实验采用荧光强度检测 方法，对SIRT6进行体外活性激动测试。MDL-800为参考分子(或称为阳性对照)。受试化 合物的去乙酰化酶激动活性用EC50(半数激动浓度或受试化合物在20μM浓度下对去乙酰化 酶SIRT6活性的激活率)来表示。EC50值可通过受试化合物在一系列不同浓度下对去乙酰化 酶活性的激活率计算获得。
1.1实验材料
人源SIRT6酶(用载体pQE80L.1在大肠杆菌M15[pREP4]中构建)、缓冲液为改进的Buffer、100％DMSO(二甲基亚砜)、NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)、乙酰化的多肽底物、 胰蛋白酶和酶标仪(Synergy MX)，CM5传感器芯片，Biacore X100仪器(GE Healthcare)， RT-PCR检测***(BIO-RAD CFX96)，MicroCal iTC200仪器，以上实验仪器均为四川大学 生物治疗国家重点实验室提供。
所有的受试2-取代喹啉-4-甲酰胺类骨架衍生物以及阳性化合物MDL-800为本发明合成。 12q和MDL-800的结构式为：
Figure BDA0002304622230000411
体外实验时用100％DMSO配制成10mM储存液，置-20℃冰箱避光保存备用，临用时用 完全培养液稀释至所需浓度。
1.2测试方法
1.2.1蛋白的表达和纯化
在大肠杆菌M15[pREP4]中使用载体pQE80L.1表达N末端his标记的人SIRT6构建体。 按现有技术(参考文献You,W.；Rotili,D.；Li,T.M.；Kambach,C.；Meleshin,M.；Schutkowski, M.；Chua,K.F.；Mai,A.；Steegborn,C.Structural basis of sirtuin 6activation by synthetic small molecules.Angewandte Chemie InternationalEdition 2017,56,1007-1011.)表达和纯化蛋白质。 将纯化的SIRT6蛋白质储存在缓冲液中，温度-80℃。
1.2.2体外测试化合物对SIRT6的激动活性
SIRT6去乙酰化，在黑色半体积96孔板中，将内部重组SIRT6与测定缓冲液在37℃保 持15分钟。向混合物中加入底物S5(Ac-RYQK(Ac)-AMC)。然后加入NAD，开始反应 并在37℃下孵育120分钟。接下来，添加含有胰蛋白酶，烟酰胺的显影剂溶液，并在室温下 孵育30分钟，并使用Bio-Tek(Bio-Tek)分别测量激发和发射波长380和440nm的荧光。 对于SIRT6去肉豆蔻酰化，将内部重组SIRT6与缓冲液和二硫苏糖醇混合物置于黑色半体积 96孔板中于37℃保持20分钟。该混合物含有MAcALPK(MyrK)-AMC肽，加入NAD。开 始反应并在37℃下孵育120分钟。接下来，添加含有胰蛋白酶，烟酰胺的显影剂溶液，并在 37℃下孵育120分钟，并使用Bio-Tek(Bio，激发和发射波长分别为380和440nm测量荧光)。 将实验数据拟合在GraphPad Prism中以使用以下等式获得抑制或活性值：抑制％＝(max-信 号)/(max-min)*100或活性％＝信号/(max-min)*100。
1.2.3表面等离子体共振(SPR)测定
基于SPR技术的结合是在室温条件下，通过Biacore X100仪器(GE Healthcare)测定。 首先，通过标准的酰胺偶联程序在乙酸钠中将SIRT6蛋白固定在CM5传感器芯片上；然后， 活化的表面与蛋白质溶液接触；将芯片用PBS缓冲溶液平衡4小时；将化合物连续稀释注射 60秒，然后缓冲液流120秒。通过BIA评估软件(GE Healthcare)测定测试化合物的KD值。
1.2.4差示扫描荧光测定(DSF)测定
在RT-PCR检测***(BIO-RAD CFX96)上进行DSF实验。使用FRET的波长为492nm 的滤光片监测SYPRO橙。激发在610nm波长处的ROX用于发射。将含有SIRT6蛋白的缓 冲液，SYPRO橙，测试化合物的每种反应溶液从25℃加热至95℃。每1℃/min记录荧光强 度，并作为温度的函数作图。通过将Boltzmann方程拟合到Graph Pad Prism中的S形曲线 来计算转变曲线(Tm)的拐点。
1.2.5等温滴定量热法(ITC)测定
在25℃条件下，等温滴定量热法的实验在MicroCal iTC200仪器中进行。将蛋白质注射 到含有活化剂的反应池中进行滴定。通过结合等温线的非线性回归分析提取热力学结合参数 (MicroCal Origin软件)。应用单点结合模型产生焓变，反应熵变，化学计量和平衡解离常 数(Kd)。
1.3化合物的激动能力测试结果
1.3.1所有化合物的激动能力测试结果
所有化合物的激动能力测试是用肉豆蔻酰肽底物(Ac-EALPKK(Myr)-AMC)通过荧光测试 方法Fluor de Lys(FDL)进行的(参考文献1、You,W.；Rotili,D.；Li,T.M.；Kambach,C.； Meleshin,M.；Schutkowski,M.；Chua,K.F.；Mai,A.；Steegborn,C.Structural basis of sirtuin 6 activation by synthetic smallmolecules.Angewandte Chemie International Edition 2017,56, 1007-1011；2、Huang,Z.；Zhao,J.；Deng,W.；Chen,Y.；Shang,J.；Song,K.；Zhang,L.；Wang,C.； Lu,S.；Yang,X.Identification of a cellularly active SIRT6 allosteric activator.Naturechemical biology 2018,14,1118.)。
表1化合物5～5d、5f～5n对SIRT6的激动活性
Figure BDA0002304622230000421
Figure BDA0002304622230000422
Figure BDA0002304622230000431
表2化合物8a～8p对SIRT6的激动活性
Figure BDA0002304622230000432
Figure BDA0002304622230000433
Figure BDA0002304622230000441
表3化合物12a～12ac对SIRT6的激动活性
Figure RE-GDA0002425460900000442
Figure RE-GDA0002425460900000443
Figure BDA0002304622230000451
1.3.2化合物12q的分子水平活性
为了进一步确定化合物12q对SIRT6的激动活性，本研究采用了正交试验，包括不同底 物肽的荧光(FDL)法、差示扫描荧光(DSF)法、表面等离子体共振(SPR)法和等温滴定量热法 (ITC)。其中，在荧光(FDL)法中，使用了Ac-RYQK(Ac)-AMC)和Ac-EALPKK(Myr)-AMC两种底物进行验证。
在酶催化实验中，化合物12q可以显著增强SIRT6的去乙酰化和去长链肉豆蔻酰化活性， 其EC1.5值分别为0.58μM和0.65μM(见图1A和B)。在DSF实验中，化合物12q对SIRT6 蛋白的解裂温度增加值(ΔTm)为1.01°С(图2A)。SPR实验表明，其解离速率常数(KD) 值为0.99μM(图2B)。
实施例2化合物12q体外酶水平针对同一家族的选择性测试实验
本实验的目的是检测化合物12q对体外去乙酰化酶SIRT1、SIRT2和SIRT3以及其他HDAC家族的激动活性。受试化合物的去乙酰化酶激动活性用EC50(半数激动浓度)来表示。EC50值可通过受试化合物在一系列不同浓度下对去乙酰化酶活性的激动率计算获得。
2.1实验材料
人源SIRT1酶(BPS生物科技有限公司，货号50012)、人源SIRT2酶(BPS生物科技有限公司，货号50013)、人源SIRT3酶(Cayman公司，货号10011194)、缓冲液为改进的 Tris-Buffer(Tris标记的缓冲液)、100％DMSO(二甲基亚砜)、NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷 酸)、乙酰化的多肽底物、胰蛋白酶和酶标仪(Synergy MX)，以上原料及仪器由上海睿智化 学有限公司(中国)提供。
所受试12q化合物为本专利合成。体外实验时用100％DMSO配制成10mM储存液，置-20℃冰箱避光保存备用，临用时用完全培养液稀释至所需浓度。
2.2测试方法
人源SIRT1、SIRT2和SIRT3分别与测试缓冲溶液混合，并加入用100％DMSO溶解的不同浓度的小分子化合物，振荡，混匀。然后，把上述混合物在室温下孵育15分钟。然后加入含有NAD和乙酰化的多肽底物促使反应进行。在室温孵育240分钟后，加入胰蛋白酶溶 液后在室温继续孵育90分钟。然后用酶标仪在激发波长(λex)为360nm，发射波长(λem) 为460nm检测荧光强度。通过以下公式进行计算：
Figure BDA0002304622230000461
Figure BDA0002304622230000462
其中，Y是抑制率，X是化合物的浓度，Max是阴性对照信号值(完全没有抑制)，Min是阳性对照信号值(完全抑制)，Signal是相应孔的信号值，Inh％是抑制百分率，公式中的IC50是抑制率为50％时对应的化合物的浓度(以摩尔浓度M来表示，为了与X单位一致，公式中计算为LogIC50)，公式2中Bottom是浓度最小值，Top是浓度最大值，Hill Slope指的是 曲线最大斜率的绝对值(即曲线中点)。
2.3测试结果
表4的结果表明，化合物12q可以很强地激活SIRT6。活性测试结果表明，化合物12q几乎没有靶向SIRT2、SIRT3以及其他HDAC家族的活性(IC50>200μM)，对SIRT1有很弱的 激动效果。
表4化合物12q对同家族的选择性
Target IC<sub>50</sub>μM Target IC<sub>50</sub>μM
SIRT1 171.20 HDAC5 >200
SIRT2 >200 HDAC6 >200
SIRT3 >200 HDAC7 >200
SIRT6 0.58(EC<sub>1.5</sub>)<sup>a</sup> HDAC8 >200
HDAC1 >200 HDAC9 >200
HDAC2 >200 HDAC10 >200
HDAC3 >200 HDAC11 >200
HDAC4 >200
注：a化合物12q的选择性测试是用乙酰化底物(Ac-RYQK(Ac)-AMC))通过FDL实验测试。
实施例3化合物12q对人胰腺癌细胞株PANC-1和BxPC-3细胞的体外活性
本实验的目的是检测化合物12q在体外细胞上的抗恶性细胞增殖性能的水平。本实验采 用实验室培养的人胰腺癌PANC-1细胞和BxPC-3细胞，加药处理一定时间后，用MTT(四 甲基偶氮唑盐)比色法、细胞克隆形成、EDU掺入试验、细胞迁移实验、细胞周期和凋亡实 验和Western Blot的方法检测。
3.1实验材料
Figure BDA0002304622230000471
Figure BDA0002304622230000481
3.2实验方法
3.2.1细胞系及培养
人胰腺癌细胞系BxPC-3，PANC-1，AsPC-1和MIAPaCa-2购自American TypeCulture Collection(ATCC，Rockville，MD，USA)。将其在补充有10％FBS(Gibco，Eggenstein， Germany)，100单位/mL青霉素(Sigma-Aldrich)和链霉素(Sigma)的DMEM中培养，并 在具有湿润的5％CO2气氛的37℃培养箱中维持。
3.2.2 MTT法
将多种人胰腺癌细胞一式三份接种在96孔板中(26003000,6300和2200细胞/孔，用于 人BxPC-3，PANC-1，AsPC-1，MIAPaCa-2细胞)，用指定浓度的12q(浓度分别为50,16.67, 5.56,1.85,0.62,0.21,0.07,0.02μM)处理72小时，用MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5- 二苯基四唑溴化物)测定细胞存活率(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)测定。通过Graph Pad Prism软件计算IC50值。
3.2.3克隆形成
将细胞以每孔750,500,20000和500的密度接种在6孔板中，用于BxPC-3，PANC-1，AsPC-1和MIAPaCa-2。24小时后，加入不同浓度的12q(浓度分别为10,5,2.5μM)，孵育14 至18天后，用多聚甲醛固定细胞并用结晶紫染色。在倒置显微镜下计数具有>50个细胞的集落。
3.2.4 EDU掺入试验
以每孔4×103～1×105细胞接种于96孔板中，进行所需要的药物处理或者其他刺激处理。 准备一份2×的EdU工作液：以完全培养基稀释10mM的储液至合适的工作浓度。预热2×的 EdU工作液，加入等体积的培养基，使浓度变为1×。合适时间合适条件孵育细胞。孵育完成 后，去除培养基加入50μL4％中性多聚甲醛至各个孔的玻片上，室温孵育15-30分钟后，去除 固定液。每孔加入50μl 2mg/ml的甘氨酸溶液，室温孵育5分钟，中和残留的固定液。以每 孔0.1ml 3％BSAin PBS的洗涤液洗涤细胞2次。去除洗涤液，加入0.1ml 0.5％Triton X-100 in PBS到每个孔中，室温孵育20分钟。准备1×Click-iT EdU反应缓冲液。制备一份5×的 Click-iT EdU反应添加物储液。准备1×Click-iT EdU缓冲液添加物。准备Click-iT反应混合物。 去除促渗液，以每孔0.1mL的3％BSAin PBS的洗涤液洗涤2次，去除洗涤液。加入0.1mL Click-iT反应混合物至每个孔，简短摇晃培养板以确保反应混合物可以均匀覆盖细胞。室温 避光孵育30min。除去反应混合物，每孔以0.1mL 3％BSAin PBS洗涤2次，去除洗涤液。 对于核染色，可以进行DNA复染。如其他无特别要求，即可进行拍照分析。以0.1mL PBS 洗涤每孔1次，去掉洗涤液。以PBS稀释Hoechst33342(组份F)储液1：2000至1×Hoechst33342 溶液，终浓度为5μg/mL。每孔加0.1mL 1×Hoechst33342溶液，室温避光孵育15-30min。除 去Hoechst33342溶液。0.1mLPBS洗涤每孔2次，去除洗涤液。最后进行成像及分析。
3.2.5细胞迁移实验
BxPC-3，PANC-1，AsPC-1或MIAPaCa-2细胞接种于12孔板中，37℃，5％CO2，并允 许它们成长为单层汇合。用无菌的200μM移液枪枪尖尖端刮下细胞单层的中心，以产生恒 定宽度的裸露区(间隙)。随后，用甾体PBS洗涤细胞碎片，并将细胞暴露于各种浓度的12q (浓度分别为10,5,2.5μM)或其他试剂。在37℃，5％CO2下孵育24小时后，通过Olympus 倒置显微镜拍摄图像。通过人工计数定量迁移的细胞，并使用100％的未处理孔来表达抑制 百分比。
3.2.6 Western Blot
将BxPC-3和PANC-1在含有不同浓度的12q或其他试剂的培养基中孵育72小时，用RIPA 缓冲液提取全细胞裂解物，补充蛋白酶抑制剂混合物和PMSF。使用BCA蛋白质测定试剂盒 来测定蛋白质浓度。通过在聚丙烯酰胺Tris-甘氨酸凝胶上的SDS-PAGE分离蛋白质提取物， 并转移到PVDF膜(Millipore)上。将PVDF膜在含有脱脂奶粉和TBS中温和振荡2小时。然后洗涤并与TBS-T和特异性抗体一起孵育，包括抗SIRT6，抗组蛋白H3(乙酰基K9)，抗 组蛋白H3(乙酰基K18)，抗组蛋白H3(乙酰基K56)，抗组蛋白H3，抗Lin28b，抗Myc， 抗IGF2BP3，抗HMGA2，anti-β-actin在4℃下保持10小时。将抗体在封闭缓冲液中稀释。 将印迹与相应的辣根过氧化物酶连接的二抗一起在封闭缓冲液中以1：10000稀释孵育1小时。 用辣根过氧化物酶的底物进行曝光检测蛋白的表达。
3.2.7药代动力学研究
以6～8周龄的Sprague-Dawley大鼠为实验对象，将12q溶解在DMSO、Solutol和生理 盐水混合溶液中，制备给药溶液pH调整为7，给予PO或IV给药。在给药后，时间点0.083h，0.25h，0.5h，1h，2h，4h，6h，8h和24h或0.25h，0.5h，1h，2h，4h，6h，8h， 10小时和24小时，通过心脏穿刺从每只动物收集用于PO或IV的血液样品，并使用LC-MS /MS分析测定血浆浓度。使用DAS软件(Enterprise，version 2.0，Mathematical Pharmacology ProfessionalCommittee of China)拟合非房室药代动力学参数。
3.3实验结果
MTT实验显示12q对胰腺癌细胞PANC-1，BxPC-3，MIAPaCa-2和AsPC-1的IC50值分 别为4.13μM，8.27μM，7.10μM和9.66μM(见图3A)。在克隆形成实验和EdU实验中， 12q显示了较好的抑制胰腺癌细胞增殖的能力(见图3C和3D)。在划痕实验中，12q显示了 较好的抑制胰腺癌细胞迁移的能力(见图4A)。在蛋白质免疫印迹实验中，化合物12q可以 剂量依赖性降低Lin28b和c-Myc的含量，使下游蛋白IGF2BP3和HMGA2的表达量增 加(见图4B)。
在雄性Sprague-Dawley大鼠体内的药代动力学(PK)特征显示，浓度-时间曲线AUC(0-∞)面积为755.57h·ng/mL，最大血药浓度(Cmax)为98.45ng/mL，半衰期(T1/2)是7.52h(见表5)。
表5化合物12q药代动力学研究结果
药代动力学参数 10mg/kg口服<sup>a</sup> 2mg/kg静脉注射<sup>a</sup>
清除率CL(L/h/kg) — 0.6±0.08
稳态表观分布容积Vss(L/kg) — 1112.8±322.84
半衰期T<sub>1/2</sub>(h) 7.52±1.44 9.06±0.21
达峰时间T<sub>max</sub>(h) 2.00±0.00 0.08±0.00
药峰浓度C<sub>max</sub>(ng/mL) 98.45±3.62 5123.70±905.5
药时曲线下面积AUC<sub>(0-t)</sub>(h·ng/mL) 704.67±80.47 3326.13±476.4
药时曲线下面积AUC<sub>(0-∞)</sub>(h·ng/mL) 755.57±80.74 3381.49±468.48
生物利用度F(％) 4.24±0.48 —
a表示±SD,n＝3。
实施例4化合物12q在人胰腺癌细胞株PANC-1细胞的体内模型
本实验的目的是检测化合物12q在体内模型上的抗恶性肿瘤的水平。本实验采用实验室 培养的人胰腺癌PANC-1细胞，培养一定时间后，接种在裸鼠上，边给药边测量肿瘤体积， 给药一定时间后，解剖裸鼠，进行后续其他水平的检测。
4.1实验方法
为了建立PANC-1异种移植物模型，将PANC-1细胞悬浮液皮下注射到6周龄雌性裸鼠 的右胁腹区域。在肿瘤生长至一定体积后，将小鼠随机分成4组，并给予不同剂量的化合物。 将化合物溶于DMSO，蓖麻油，乙醇和蒸馏水的混合溶液中。使用卡尺每3天监测肿瘤体积。 使用以下公式计算肿瘤体积(TV)：TV＝长度×宽2×0.5。
4.2实验结果
在小鼠皮下肿瘤PANC-1移植模型中，给药剂量150mg/kg时，12q剂量依赖性地抑制肿瘤生长，抑制率为90.25％(见图5A和5B)。PANC-1肿瘤组织免疫组化实验结果显示，与 对照组相比，12q可有效抑制Lin28b和c-Myc的蛋白水平，显著降低肿瘤细胞增殖(ki-67 阳性细胞)(见图5C)。

Claims (10)

1.式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0002304622220000011
其中，R1选自取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的桥环烷基；
所述R1中取代的芳基或取代的杂芳基中的取代基选自烷氧基、芳氧基、取代或未取代的烷基、羟基、硝基、酯基、卤素，其中，所述取代的烷基的取代基为卤素或环烷基，所述环烷基中含有0～3个N杂原子；
所述R1中取代的烷基、取代的环烷基或取代的桥环烷基的取代基选自芳基、杂芳基、酯基、羟基；
R2选自取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、烷基、环烷基；
所述R2中取代的芳基或取代的杂芳基中的取代基选自烷氧基、烷基或卤素。
2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于：
R1选自取代或未取代的6～10元芳基、取代或未取代的5～10元杂芳基、取代或未取代的C1～C6烷基、取代或未取代的5～6元环烷基、取代或未取代的桥环烷基，其中，所述杂芳基中杂原子为N、O或S，杂原子个数为1～2个。
3.如权利要求2所述的化合物，其特征在于：
所述R1中取代的6～10元芳基或取代的5～10元杂芳基中的取代基选自C1～C6烷氧基、6～10元芳氧基、取代或未取代的C1～C6烷基、羟基、硝基、酯基、卤素，所述取代的烷基的取代基为F或5～6元环烷基，所述环烷基中含有1～2个N杂原子；
所述R1中取代的C1～C6烷基、取代的5～6元环烷基或取代的桥环烷基的取代基选自6～10元芳基、5～10元杂芳基、酯基、羟基。
4.如权利要求1～3任一项所述的化合物，其特征在于：
R2选自取代或未取代的6～10元芳基、取代或未取代的5～10元杂芳基、5～6元环烷基，其中，所述杂芳基中杂原子为N、O或S，杂原子个数为1～2个；所述环烷基中含有0～2个杂原子，杂原子为N、O或S。
5.如权利要求4所述的化合物，其特征在于：
所述R2中取代的6～10元芳基、取代的5～10元杂芳基中的取代基选自C1～C6烷氧基、C1～C6烷基或卤素。
6.如权利要求1～5任一项所述的化合物，其特征在于：R1选自：
Figure FDA0002304622220000021
Figure FDA0002304622220000022
7.如权利要求1～6任一项所述的化合物，其特征在于：R2选自：
Figure FDA0002304622220000023
Figure FDA0002304622220000024
8.如权利要求1～7任一项所述的化合物，其特征在于：所述化合物选自：
Figure FDA0002304622220000025
Figure FDA0002304622220000031
Figure FDA0002304622220000041
9.权利要求1～8任意一项所述化合物或其药学上可接受的盐在制备SIRT6激动剂中的用途。
10.权利要求1～8任意一项所述化合物或其药学上可接受的盐在制备抗癌药物中的用途；优选的，所述癌为胰腺癌。
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