CN112876537B - 一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法 - Google Patents

一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是包括：制备纵条纹炭角菌上样液；对D101树脂进行预处理，将预处理后的D101树脂装柱，加入上样液动力学吸附；树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附。采用本发明，经D101树脂纯化后的环肽Xylastriamide A成分纯度有了较大的提高，富集、纯化效果明显，操作简便，分离步骤少、有机溶剂用量少、时间短，富集纯化的环肽Xylastriamide A具有显著的抗肿瘤和杀线虫活性，适用于相关药物中。

Description

一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的 方法
技术领域
本发明属于有机化合物的分离纯化，涉及一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，本发明富集纯化的环肽Xylastriamide A具有显著的抗肿瘤和杀线虫活性，适于作为中药活性成分用于药物中。
背景技术
纵条纹炭角菌(Xylaria striata Pat.1887)为子囊菌门(Ascomycota)炭角菌科(Xylariaceae)炭角菌属(Xylaria Hill ex Schrank)真菌，生长范围主要在腐朽树皮和活树根上。炭角菌属真菌具有很大的研究、药用、食用价值，如黑柄炭角菌(俗称乌灵参)具有除湿、镇静安神、造血以及提高机体免疫功能等功效，其养生效果极佳。纵条纹炭角菌作为一种被申请人发现的真菌，已经对该菌安全性及改善睡眠方面进行研究，并优化了该菌的子实体培养条件、检测了该菌的生物活性，发现其具有很好的抗肿瘤活性。现有技术中，雷传文2017年公开了“纵条纹炭角菌子实体化学成分及生物活性研究”，该文中公开了从纵条纹炭角菌中分离得到的一种新的式(Ⅰ)所示的环肽Xylastriamide A，作为一种新的环肽类物质，发现其具有显著的抗肿瘤活性，并且对秀丽隐杆线虫也有着一定的抗虫活性等。
现有技术中，环肽类化合物的分离方法一般是采用传统的分离方法，就是通过一系列的色谱技术进行纯化，从而获得单体物质，该法分离步骤多，效率低，会耗费大量的溶剂和时间，固相吸附严重，得率低。现有技术中，一般采用高效液相色谱(简称HPLC)来简单的判断化合物的纯度，将现有提取得到的纵条纹炭角菌上样液，用HPLC多次检测后，发现Xylastriamide A的峰面积占比平均为4.13％，即Xylastriamide A的纯度平均为4.13％。
本发明所述的环肽Xylastriamide A为白色针状细晶(该化合物可以在甲醇溶液内结晶)，分子式为C45H64N6O9，其化学结构式如下式(Ⅰ)所示：
Figure BDA0002923675000000021
目前，尚未见纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A在大孔吸附树脂上的吸附-解吸方法的文献报道。
发明内容
本发明的目的旨在克服现有技术中的不足，提供一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法。本发明通过对D101大孔树脂吸附动力学进行分析研究，获到一种成熟的工艺步骤和工艺参数，从而提供一种分离步骤少、有机溶剂用量少、时间短、得率较高的从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法。
本发明的内容是：一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为60～95％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为60～95％乙醇水溶液混合并在60～85℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1～4次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010～0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为80～95％乙醇水溶液浸泡15～30h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量可以是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量可以是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0010～0.0070g/mL的上样液50～300mL，以1～5BV/h的体积流量动态吸附；
所述BV即bed volume，代表树脂床体积，对于树脂来说，常采用BV作为单位，这样数据可以随着不同的树脂床体积而变化；1BV指1倍树脂床体积；所述1～5BV/h指每小时流过的溶液体积为树脂床体积的1～5倍；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：
待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为10～50％的乙醇水溶液洗脱1～5BV后，再用体积百分比浓度为60～100％的乙醇水溶液(也可以是体积百分比浓度为60～95％的乙醇水溶液)洗脱1～5BV，以1～5BV/h的速率洗脱并收集该次的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
所述泄漏点的定义是：当流出液中目标物(本发明内容中的目标物是环肽Xylastriamide A)浓度达到上样液中目标物浓度的10％时，此时达到了泄漏点。
经上述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法处理纵条纹炭角菌子实体后，可以去除大量的杂质，并保留目标成分，有效的提升目标成分(即环肽Xylastriamide A)的纯度；扔需进一步进行分离操作，方可得到纯的环肽XylastriamideA，采用本发明大孔树脂纯化法可以有效地简化分离步骤。
所述环肽Xylastriamide A的含量测定方法，其色谱条件的设定为：AgiLentZORBAX EcLipse XDB-C18(高效液相色谱柱)，4.6mm×250mm，5um；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为超纯水，等度洗脱，等度洗脱程序为：0～20min，65％A，35％B；检测波长：216nm；柱温35℃；流速：1.0mL/min；进样量：15uL；出峰时间为14.915min。
本发明内容中所述的1BV＝30mL。
本发明内容中所述D101树脂(或称D101大孔树脂)的生产提供企业有：西亚试剂、安徽三星树脂科技有限公司、天津允开树脂科技有限公司等。
本发明的内容中：步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液较好的是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为75～95％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为75～95％乙醇水溶液混合并在70～80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1～3次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010～0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用。
本发明的内容中：步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液较好的是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为90％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为90％乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1～2次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010～0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用。
本发明的内容中：步骤b所述树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附较好的是：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为95％乙醇水溶液浸泡24h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量可以是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量可以是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0030g/mL的上样液210mL，以2BV/h的体积流量动态吸附。
本发明的内容中：步骤c所述树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附较好的是：待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为40％的乙醇水溶液洗脱3BV后，再用无水乙醇洗脱3BV，以2BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入无水乙醇调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
与现有技术相比，本发明具有下列特点和有益效果：
(1)本发明采用D101树脂(或称D101大孔树脂)吸附纯化技术，优化环肽Xylastriamide A动态吸附与解吸纯化工艺参数，以HPLC(高效液相色谱)为检测手段，研究D101树脂对环肽Xylastriamide A纯化效果的影响，为纵条纹炭角菌的开发利用提供一条实用的技术方案；
(2)本发明以纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的吸附率、解析率为考察指标，采用单因素试验结合D101大孔树脂技术对纵条纹炭角菌药材进行分析，筛选出最佳的富集、纯化工艺条件；
(3)本发明通过对比环肽Xylastriamide A的HPLC(高效液相色谱)图谱，环肽Xylastriamide A的纯度(一般采用高效液相色谱来简单的判断化合物的纯度，在高效液相色谱中，根据环肽Xylastriamide A的峰面积比例可以看出其纯度)平均由现有技术中的4.13％提升到39.63％，证明经本发明D101大孔树脂纯化后的环肽Xylastriamide A成分纯度有了较大的提高，本发明方法富集、纯化效果明显；
(4)采用本发明方法稳定可行、操作简便，分离步骤少、有机溶剂用量少、时间短、得率较高，适用于纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的富集纯化，实用性强。
附图说明
图1是环肽Xylastriamide A纯化前的HPLC图；
图2是采用实施例3获得纯化后的环肽Xylastriamide A的HPLC图；该图可看出Xylastriamide A在纯化后的比例。根据纯化前后的HPLC图比较，可以看出纯化后Xylastriamide A的峰面积所占比例增大了。
具体实施方式
下面给出的实施例拟对本发明作进一步说明，但不能理解为是对本发明保护范围的限制，该领域的技术人员根据上述本发明的内容对本发明作出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
实施例1：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体100g(来自于西南科技大学微生物实验室，后同)，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为90％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为90％乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理2次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0030g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为95％乙醇水溶液浸泡24h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0030g/mL的上样液210mL，以2BV/h的体积流量动态吸附；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为40％的乙醇水溶液洗脱3BV后，再用无水乙醇洗脱3BV、以2BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入无水乙醇调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。经HPLC进行检测，Xylastriamide A的纯度为40.61％。
经D101树脂富集纯化后，可以显著的去除大量的杂质，并保留目标成分，有效的提升目标成分的纯度；随后再进行进一步的分离操作，即可得到纯的Xylastriamide A，D101树脂纯化法可以有效地简化分离步骤。
实施例2：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体100g，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为80％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为80％乙醇水溶液混合并在85℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理2次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0050g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为80％乙醇水溶液浸泡20h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0050g/mL的上样液100mL，以2BV/h的体积流量动态吸附；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：
待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为30％的乙醇水溶液洗脱5BV后，再用体积百分比浓度为90％的乙醇水溶液洗脱4BV，以2BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。经HPLC进行检测，Xylastriamide A的纯度为36.58％。
实施例3：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体100g，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为85％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为85％乙醇水溶液混合并在70℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理3次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为90％乙醇水溶液浸泡18h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0010g/mL的上样液300mL，以2BV/h的体积流量动态吸附；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：
待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为50％的乙醇水溶液洗脱4BV后，再用体积百分比浓度为90％的乙醇水溶液洗脱5BV，以2BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。经HPLC进行检测，Xylastriamide A的纯度为38.45％。
实施例4：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体100g，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为90％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为90％乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理3次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为90％乙醇水溶液浸泡20h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0070g/mL的上样液80mL，以2BV/h的体积流量动态吸附；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为40％的乙醇水溶液洗脱5BV后，再用体积百分比浓度为85％的乙醇水溶液洗脱5BV，以2BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
经HPLC进行检测，Xylastriamide A的纯度为35.81％。
实施例5：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体100g，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为80％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为80％乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理4次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0030g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为90％乙醇水溶液浸泡15h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0030g/mL的上样液210mL，以2BV/h的体积流量动态吸附；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：
待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为45％的乙醇水溶液洗脱4BV后，再用体积百分比浓度为90％的乙醇水溶液洗脱4BV，以2BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
经HPLC进行检测，Xylastriamide A的纯度为38.27％。
实施例6：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为60％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为60％乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理4次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为80％乙醇水溶液浸泡30h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0010g/mL的上样液300mL，以1BV/h的体积流量动态吸附；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：
待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为10％的乙醇水溶液洗脱1BV后，再用体积百分比浓度为60％的乙醇水溶液洗脱1BV，以1BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
实施例7：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为95％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为95％乙醇水溶液混合并在60℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为95％乙醇水溶液浸泡15h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0070g/mL的上样液50mL，以5BV/h的体积流量动态吸附；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：
待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为50％的乙醇水溶液洗脱5BV后，再用体积百分比浓度为95％的乙醇水溶液洗脱5BV，以5BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
实施例8：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为78％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为78％乙醇水溶液混合并在70℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理3次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0050g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为88％乙醇水溶液浸泡22h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0050g/mL的上样液190mL，以3BV/h的体积流量动态吸附；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：
待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为30％的乙醇水溶液洗脱3BV后，再用体积百分比浓度为80％的乙醇水溶液洗脱3BV，以3BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
实施例9：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为75％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为75％乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理3次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；其它同实施例6-8中任一，省略。
实施例10：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为95％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为95％乙醇水溶液混合并在75℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；其它同实施例6-8中任一，省略。
实施例11：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为90％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为90％乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0020g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；其它同实施例6-8中任一，省略。
实施例12：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20mL体积百分比浓度为90％乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为90％乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理2次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0060g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；其它同实施例6-8中任一，省略。
实施例13：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，步骤b所述树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附是：
1)D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为95％乙醇水溶液浸泡24h，使其充分溶胀，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊(为止)，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5％的盐酸水溶液(用量可以是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2％的氢氧化钠水溶液(用量可以是2BV)浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2)动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0030g/mL的上样液210mL，以2BV/h的体积流量动态吸附。
其它同实施例6-12中任一，省略。
实施例14：
一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，步骤c所述树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附是：待动态吸附平衡后(即步骤b所述动力学吸附达到泄漏点时)，停止加入上样液，用体积百分比浓度为40％的乙醇水溶液洗脱3BV后，再用无水乙醇洗脱3BV，以2BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入无水乙醇调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
其它同实施例6-13中任一，省略。
上述实施例中：所述BV即bed volume，代表树脂床体积，对于树脂来说，常采用BV作为单位，这样数据可以随着不同的树脂床体积而变化；1BV指1倍树脂床体积；所述1～5BV/h指每小时流过的溶液体积为树脂床体积的1～5倍；
上述实施例中：所述泄漏点的定义是：当流出液中目标物(本发明内容中的目标物是环肽Xylastriamide A)浓度达到上样液中目标物浓度的10％时，此时达到了泄漏点。
上述实施例中：所述环肽Xylastriamide A的含量测定方法，其色谱条件的设定为：AgiLent ZORBAX EcLipse XDB-C18(高效液相色谱柱)，4.6mm×250mm，5um；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为超纯水，等度洗脱，等度洗脱程序为：0～20min，65％A，35％B；检测波长：216nm；柱温35℃；流速：1.0mL/min；进样量：15uL；出峰时间为14.915min。
上述实施例中：所述的1BV＝30mL。
上述实施例中：所述D101树脂(或称D101大孔树脂)的生产提供企业有：西亚试剂、安徽三星树脂科技有限公司、天津允开树脂科技有限公司等。
上述实施例中：所采用的各原料均为市售产品。
上述实施例中：所采用的百分比例中，未特别注明的，均为质量(重量)百分比例或本领域技术人员公知的百分比例；所述质量(重量)份可以均是克或千克。
上述实施例中：各步骤中的工艺参数(温度、时间、浓度等)和各组分用量数值等为范围的，任一点均可适用。
本发明内容及上述实施例中未具体叙述的技术内容同现有技术。
经上述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法处理纵条纹炭角菌子实体后，可以去除大量的杂质，并保留目标成分，有效的提升目标成分(即环肽Xylastriamide A)的纯度；再进一步进行分离操作，即可得到纯的环肽Xylastriamide A，采用本发明大孔树脂纯化法可以有效地简化分离步骤。
本发明不限于上述实施例，本发明内容所述均可实施并具有所述良好效果。

Claims (6)

1.一种从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是包括下列步骤：
a、制备纵条纹炭角菌上样液：
取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20 mL体积百分比浓度为60～95%乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为60～95%乙醇水溶液混合并在60～85℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1～4次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010～0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用；
b、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附：
1）D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为80～95%乙醇水溶液浸泡15～30h，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5%的盐酸水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2%的氢氧化钠水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2）动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0010～0.0070g/mL的上样液50～300mL，以1～5BV/h的体积流量动态吸附；
c、树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附：
待动态吸附平衡后，停止加入上样液，用体积百分比浓度为10～50%的乙醇水溶液洗脱1～5BV后，再用体积百分比浓度为60～100%的乙醇水溶液洗脱1～5BV，以1～5BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入同体积百分比浓度的乙醇水溶液调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
2.按权利要求1所述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是：步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20 mL体积百分比浓度为75～95%乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为75～95%乙醇水溶液混合并在70～80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1～3次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010～0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用。
3.按权利要求2所述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是：步骤a所述制备纵条纹炭角菌上样液是：取纵条纹炭角菌子实体，粉碎后过40目筛；按1g纵条纹炭角菌子实体加20 mL体积百分比浓度为90%乙醇水溶液的比例，将纵条纹炭角菌子实体与体积百分比浓度为90%乙醇水溶液混合并在80℃温度下浸泡2h，过滤，固体物再经该浸泡过程处理1～2次，合并滤液；滤液经旋转蒸发浓缩至浸膏后，再将浸膏加入蒸馏水中溶解，制备成浓度为0.0010～0.0070g/mL的溶液，即为制得的纵条纹炭角菌上样液，备用。
4.按权利要求1、2或3所述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是：步骤b所述树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学吸附是：
1）D101树脂的预处理：将D101树脂用体积百分比浓度为95%乙醇水溶液浸泡24h，再湿法装柱，用乙醇洗至流出液不浑浊，再用蒸馏水冲洗至无醇味；再经酸洗：即用质量百分比浓度为5%的盐酸水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性；再经碱洗：即用质量百分比浓度为2%的氢氧化钠水溶液浸泡4小时，再用蒸馏水洗至中性，即制得预处理后的D101树脂，备用；
2）动力学吸附：取预处理后的D101树脂18g装柱，树脂床柱体积为30mL，加入浓度为0.0030g/mL的上样液210mL，以2BV/h的体积流量动态吸附。
5.按权利要求1、2或3所述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是：步骤c所述树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附是：待动态吸附平衡后，停止加入上样液，用体积百分比浓度为40%的乙醇水溶液洗脱3BV后，再用无水乙醇洗脱3BV，以2BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入无水乙醇调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
6.按权利要求4所述从纵条纹炭角菌中富集纯化环肽Xylastriamide A的方法，其特征是：步骤c所述树脂对纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A的动力学解吸附是：待动态吸附平衡后，停止加入上样液，用体积百分比浓度为40%的乙醇水溶液洗脱3BV后，再用无水乙醇洗脱3BV，以2BV/h的速率洗脱并收集该部分的洗脱液、并加入无水乙醇调整洗脱液体积为150mL，即得到富集纯化环肽Xylastriamide A后的解吸液。
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Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101395173A (zh) * 2006-01-16 2009-03-25 波利弗尔有限公司 具有抗微生物活性的模板固定的肽模拟物
CN103304635A (zh) * 2013-06-05 2013-09-18 西安交通大学 一种环肽类化合物抗肿瘤的应用及其制备方法
CN105250337A (zh) * 2015-10-14 2016-01-20 西南科技大学 一种纵条纹炭角菌的应用
CN106421286A (zh) * 2016-10-25 2017-02-22 西安交通大学 一种用大孔吸附树脂分离纯化延龄草甾体皂苷的工艺
CN107875183A (zh) * 2017-11-28 2018-04-06 张夏洋 基于大孔吸附树脂提取茵陈总黄酮的方法
WO2018227053A1 (en) * 2017-06-09 2018-12-13 Bristol-Myers Squibb Company Non-chromatographic purification of macrocyclic peptides by a resin catch and release
CN109699394A (zh) * 2019-03-11 2019-05-03 西南科技大学 一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101395173A (zh) * 2006-01-16 2009-03-25 波利弗尔有限公司 具有抗微生物活性的模板固定的肽模拟物
CN103304635A (zh) * 2013-06-05 2013-09-18 西安交通大学 一种环肽类化合物抗肿瘤的应用及其制备方法
CN105250337A (zh) * 2015-10-14 2016-01-20 西南科技大学 一种纵条纹炭角菌的应用
CN106421286A (zh) * 2016-10-25 2017-02-22 西安交通大学 一种用大孔吸附树脂分离纯化延龄草甾体皂苷的工艺
WO2018227053A1 (en) * 2017-06-09 2018-12-13 Bristol-Myers Squibb Company Non-chromatographic purification of macrocyclic peptides by a resin catch and release
CN107875183A (zh) * 2017-11-28 2018-04-06 张夏洋 基于大孔吸附树脂提取茵陈总黄酮的方法
CN109699394A (zh) * 2019-03-11 2019-05-03 西南科技大学 一种利用液体培养基生产纵条纹炭角菌子实体的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Xylastriasan A, a new cytochalasan from the fungus Xylaria striata;Chuan-Wen Lei;《ormerly Natural Product Letters》;20170510;第32卷;第7-13页 *
大孔树脂纯化纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A工艺;任志洋等;《食品工业》;20210531;第42卷(第5期);第33-37页 *
纵条纹炭角菌中环肽 xylastriamideA 的制备工艺优化及生物活性研究;任志洋;《万方学位论文数据库》;20210823;全文 *
纵条纹炭角菌中环肽Xylastriamide A 培养条件的优化;苟欢等;《食药用菌》;20201031;第28卷(第5期);第309-313页 *

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