CN112813006A - 植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用 - Google Patents
植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112813006A CN112813006A CN202110183227.4A CN202110183227A CN112813006A CN 112813006 A CN112813006 A CN 112813006A CN 202110183227 A CN202110183227 A CN 202110183227A CN 112813006 A CN112813006 A CN 112813006A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lactobacillus plantarum
- fruit
- fermentation
- juice
- lactobacillus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 title claims abstract description 70
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 title claims abstract description 70
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 title claims abstract description 70
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 66
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 66
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 title claims abstract description 51
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 title claims abstract description 44
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 33
- 241000191998 Pediococcus acidilactici Species 0.000 claims description 26
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 25
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 22
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims description 15
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 13
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000000369 enteropathogenic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 5
- 238000004321 preservation Methods 0.000 abstract description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 20
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 19
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 15
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 14
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 14
- 244000183278 Nephelium litchi Species 0.000 description 10
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 7
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 7
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 7
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 6
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 6
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 235000015193 tomato juice Nutrition 0.000 description 5
- 235000015192 vegetable juice Nutrition 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 4
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 4
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 4
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 4
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 4
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 235000019985 fermented beverage Nutrition 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 4
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 4
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 4
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 4
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 4
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 4
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 4
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 4
- NWCHELUCVWSRRS-SECBINFHSA-N (2r)-2-hydroxy-2-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@](O)(C)C1=CC=CC=C1 NWCHELUCVWSRRS-SECBINFHSA-N 0.000 description 3
- IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N Inositol-hexakisphosphate Chemical compound OP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 3
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 3
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 3
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 3
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 3
- 235000002949 phytic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 3
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 3
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186866 Lactobacillus thermophilus Species 0.000 description 2
- IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N Phytic acid Natural products OP(O)(=O)OC1C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C(OP(O)(O)=O)C1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000219000 Populus Species 0.000 description 2
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 2
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 2
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 2
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 229940068041 phytic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000000467 phytic acid Substances 0.000 description 2
- 235000021110 pickles Nutrition 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 240000007087 Apium graveolens Species 0.000 description 1
- 235000015849 Apium graveolens Dulce Group Nutrition 0.000 description 1
- 235000010591 Appio Nutrition 0.000 description 1
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 1
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 1
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 1
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 241000206594 Carnobacterium Species 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- 241001337994 Cryptococcus <scale insect> Species 0.000 description 1
- 240000004244 Cucurbita moschata Species 0.000 description 1
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 1
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 1
- KKUKTXOBAWVSHC-UHFFFAOYSA-N Dimethylphosphate Chemical compound COP(O)(=O)OC KKUKTXOBAWVSHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 206010061958 Food Intolerance Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 1
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 1
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 1
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 1
- 241001468157 Lactobacillus johnsonii Species 0.000 description 1
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 description 1
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 1
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 1
- 201000010538 Lactose Intolerance Diseases 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025476 Malabsorption Diseases 0.000 description 1
- 208000004155 Malabsorption Syndromes Diseases 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 description 1
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 description 1
- 244000174681 Michelia champaca Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000031662 Noncommunicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 241000193804 Planococcus <bacterium> Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000002479 acid--base titration Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004099 anaerobic respiration Effects 0.000 description 1
- 229940040526 anhydrous sodium acetate Drugs 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 235000004458 antinutrient Nutrition 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 235000015197 apple juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000019568 aromas Nutrition 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 235000015190 carrot juice Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000020379 cucumber juice Nutrition 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000019601 food appearance Nutrition 0.000 description 1
- 235000010855 food raising agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000020510 functional beverage Nutrition 0.000 description 1
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 1
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000006486 human diet Nutrition 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007413 intestinal health Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000021109 kimchi Nutrition 0.000 description 1
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 1
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 1
- 229940001882 lactobacillus reuteri Drugs 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 description 1
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 1
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000003715 nutritional status Nutrition 0.000 description 1
- 235000015205 orange juice Nutrition 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 235000015206 pear juice Nutrition 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000013777 protein digestion Effects 0.000 description 1
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 235000013948 strawberry juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- 230000009967 tasteless effect Effects 0.000 description 1
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
- A23L2/382—Other non-alcoholic beverages fermented
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/169—Plantarum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/41—Pediococcus
- A23V2400/413—Acidilactici
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Obesity (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明涉及微生物领域,具体涉及一株植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用。所述植物乳杆菌的保藏编号为GDMCC No.61249。本发明提供的植物乳杆菌GDMCC No.61249发酵得到的果蔬汁的益生效果得到了有效提高。
Description
技术领域
本发明涉及微生物领域,具体涉及一株植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用。
背景技术
乳酸菌(LAB)作为人体正常菌群的主要构成之一,可以改善肠道健康,增强免疫***,降低某些癌症的风险,降低血清胆固醇浓度,降低血压在高血压患者,预防某些致病菌感染。
LAB由一组***组成,其特征在于其形态,代谢和生理特性。从实用的食品技术角度来看,以下属属LAB组:浮球菌,食肉杆菌,肠球菌,乳球菌,乳球菌,隐球菌,羊球菌,小球菌,链球菌,四氢球菌,***球菌和韦氏菌。该组中包括的细菌为革兰氏阳性,过氧化氢酶阴性,不运动,能进行无氧呼吸和非孢子形成球菌或杆,在生产过程中会产生乳酸作为主要终产物碳水化合物的发酵。它们具有很高的耐酸性,可以在pH5或更低的环境中生存使它们比其他细菌更具竞争优势。在人类社会中水果是饮食中最重要的营养来源,例如碳水化合物,蛋白质,维生素,矿物质和纤维。水果中包括膳食纤维,蛋白质,人类营养所需的能量,矿物质和维生素。但是,水果的营养状况通常会因抗营养素成分的存在而受到抵消。如肌醇六磷酸,蛋白酶抑制剂和多酚。植酸盐与微量营养素(例如钙,铁,钾,镁,锰和锌)形成复合物不溶的,因此无法在人体的肠道中吸收。蛋白质抑制剂(如胰蛋白酶抑制剂)会通过干扰蛋白质消化导致胰腺肥大胰腺酶过度分泌和硫氨酸利用中的代谢紊乱。单宁酸在消化道中也形成酶复合物,降低其利用率。据报道乳酸发酵可显着降低水果基中的植酸含量食物改善矿物溶解度,发酵会增加无味饮食的安全性,营养价值使产品具备不同风味。同时乳酸菌发酵是一种相对具有低成本高效益,低能量保存食物的过程,这对于确保产品的保质期和微生物安全性至关重要。发酵食品约占中国饮食的25%甚至更高,LAB之所以得名是因为它们在发酵过程中会产生有机酸。除了保鲜效果外还产生了天然的浓缩效应和增强食物营养(维生素和必需氨基酸合成),减少饮料的散装过程中的有害菌污染,如菌毒素,改善感官品质如味道,香气,质地,稠度和食物外观等。此外,这些因素有助于简化准备过程(减少烹饪时间并降低能耗)并增强产品安全性。
含有益生菌的乳制品的有益作用的认识已得到公认。但对乳制品的过敏,乳糖不耐症和胆固醇含量是与大部分消费者使用发酵乳制品有关的主要缺点。现代消费者对他们的个人健康越来越感兴趣,并期望他们食用的食物对健康有利或预防疾病的危害。加之现代社会非传染性疾病(心血管疾病,血压升高等)的升高导致了对非乳类功能性饮料代用品具有较高的接受度。在最近十年,消费者生活方式也在发生改变(素食主义,素食主义等),与饮食相关的不利因素增加如食物不耐受,吸收不良和过敏都倾向于更多的使用非乳制饮料。因此果蔬发酵饮料具有巨大的潜力填补消费市场中的这一空白,充当提供功能的潜在功能化合物,例如抗氧化剂,膳食纤维,矿物质,益生菌和维生素。LAB还可以用于生产功能性生物分子,对提高发酵水果饮料的质量性具有重要意义,因为它们提供并保存了水果的各种风味,香气,优良质地和丰富的营养,丰富了人类饮食。
目前国内乳酸菌饮品主要是以少数几种乳酸菌进行发酵,在益生菌制剂中使用的常见微生物主要是乳酸杆菌种,例如嗜酸乳杆菌,干酪乳杆菌,罗伊氏乳杆菌,鼠李糖乳杆菌,约翰逊氏乳杆菌和植物乳杆菌和双歧杆菌物种。但目前由这些菌种发酵得到的果蔬汁的益生效果还有待进一步提高。
发明内容
本发明的目的是为了提高由现有菌种发酵得到的果蔬汁的益生效果,从而提供一株植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用,本发明提供的植物乳杆菌GDMCC No.61249发酵得到的果蔬汁的益生效果得到了有效提高。
为了实现上述目的,第一方面,本发明提供了一种植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum),所述植物乳杆菌的保藏编号为GDMCC No.61249。
第二方面,本发明提供了一种发酵菌剂,该发酵菌剂含有如上所述的植物乳杆菌,优选还含有乳酸片球菌GDMCC No.61250。
第三方面,本发明提供了如上所述的植物乳杆菌或如上所述的发酵菌剂在制备用于抗肠道致病菌的产品中的应用。
第四方面,本发明提供了如上所述的植物乳杆菌或如上所述的发酵菌剂在制备用于降解胆固醇的产品中的应用。
第五方面,本发明提供了如上所述的植物乳杆菌或如上所述的发酵菌剂在制备用于抗氧化的产品中的应用。
第六方面,本发明提供了如上所述的植物乳杆菌或如上所述的发酵菌剂在制备果蔬饮料中的应用。
第七方面,本发明提供一种发酵果蔬饮料,所述发酵果蔬饮料含有如上1所述的植物乳杆菌,或者如上所述的发酵菌剂。
第八方面,本发明提供一种发酵果蔬饮料的制备方法,该方法包括:将如上所述的植物乳杆菌,或者如上所述的发酵菌剂接种至待发酵的果蔬汁中,并进行发酵。
本发明可取得如下的有益效果:
在本发明中,采用发酵成熟的泡菜为菌种来源解决了菌种的安全性问题,且还具有以下优点:
1、本发明提供的植物乳杆菌,优选提供的植物乳杆菌和乳酸片球菌的复合乳酸菌相比于普通乳酸菌发酵饮料,其益生效果可得到有效提高。而且,复合乳酸菌发酵饮品相对于单一饮品菌株间相互协调能更好的发挥作用具有更好的益生效果。
2、本发明提供的植物乳杆菌发酵后通过检测复合果蔬汁对常见致病菌的抑制作用,同常规乳酸菌发酵果汁相比最大抑菌活性提升27%,具有良好的抑菌效果。
3、本发明提供的植物乳杆菌发酵后通过测定其抗氧化活性,对胆固醇的降解能力均有很好的提升效果,即便是发酵果汁通过离心取出菌体后其仍然能降解掉36.7%的胆固醇。
4、本发明提供的乳酸菌,改变了传统菌种发酵造成的发酵风味不足,功能性差等进行优化,寻找到了安全有效的果蔬深加工方式,为其发酵在食品中的运用奠定基础,进促进岭南地区果蔬产业发展,增加国内发酵饮品种类具有良好的市场前景。
本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
生物保藏
植物乳杆菌
本发明的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),于2020年12月7日被保藏在广东省微生物菌种保藏中心(地址:广东省广州市越秀区先烈中路100号大院实验大楼5楼,邮政编码:510075)(保藏单位的缩写为GDMCC),保藏编号为GDMCC No.61249,简称W928。
乳酸片球菌
本发明的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici),于2020年12月7日被保藏在广东省微生物菌种保藏中心(地址:广东省广州市越秀区先烈中路100号大院实验大楼5楼,邮政编码:510075)(保藏单位的缩写为GDMCC),保藏编号为GDMCC No.61250,简称W929。
附图说明
图1为不同温度下培养本发明混合菌株12小时后以稀释涂布法计算活菌数目;
图2为不同温度下本发明混合菌株对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性;
图3为在37℃下发酵本发明混合菌株不同时间后,以稀释涂布法计数活菌数目;
图4为在最佳发酵温度37℃下测定不同发酵时间后发酵果汁对铜绿假单胞菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,沙门氏菌等常见致病菌的抑菌活;
图5为最佳发酵温度37℃下测定不同发酵时间后发酵果汁的有机酸含量;
图6为在37℃下发酵,每隔6小时测定发酵液的还原糖和总糖的含量;
图7为无细胞液对超氧自由基和DPPH的清除率。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明,并不用于限制本发明。
一方面,本发明提供了一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),其中,所述植物乳杆菌的保藏编号为GDMCC No.61249。
本发明的植物乳杆菌从发酵成熟的泡菜中分离得到的。
本发明提供的植物乳杆菌经过液体培养能够产生大量植物乳杆菌的活菌体,所述培养的方法没有特别的要求,只要是能使所述植物乳杆菌增殖即可,例如可以按照107CFU/mL的接种量将所述植物乳杆菌的活菌体接种于乳杆菌培养基中,并且在厌氧或好氧的条件下,在15-38℃的温度下培养8-72小时后,得到培养液。所述乳杆菌的培养基可以为本领域公知的各种适合乳杆菌培养的培养基,例如可以为乳汁和/或《乳酸菌——生物学基础及应用》(杨洁彬,轻工业出版社,1996年出版)中所述的乳酸菌(MRS)培养基。
本发明可以进一步分离上述培养液中的植物乳杆菌的活菌体,所述分离的方法没有特别的限制,只要是能从培养液中富集菌体即可,例如可以通过离心和/或过滤的方法实现,所述离心和所述过滤的条件可以为公知的条件,本发明在此不再赘述。
第二方面,本发明提供了发酵菌剂,该发酵菌剂含有如上所述的植物乳杆菌GDMCCNo.61249。
根据本发明,为了进一步提高所述植物乳杆菌在果蔬汁中的发酵性能,优选的,所述发酵剂中还含有乳酸片球菌,更优选为乳酸片球菌GDMCC No.61250。
本发明的乳酸片球菌从发酵成熟的泡菜中分离得到的。
本发明提供的乳酸片球菌经过液体培养能够产生大量乳酸片球菌的活菌体,所述培养的方法没有特别的要求,只要是能使所述乳酸片球菌增殖即可,例如可以按照107CFU/mL的接种量将所述乳酸片球菌的活菌体接种于乳杆菌培养基中,并且在厌氧或好氧的条件下,在15-38℃的温度下培养8-72小时后,得到培养液。所述乳杆菌的培养基可以为本领域公知的各种适合乳杆菌培养的培养基,例如可以为乳汁和/或《乳酸菌——生物学基础及应用》(杨洁彬,轻工业出版社,1996年出版)中所述的乳酸菌(MRS)培养基。
本发明可以进一步分离上述培养液中的乳酸片球菌的活菌体,所述分离的方法没有特别的限制,只要是能从培养液中富集菌体即可,例如可以通过离心和/或过滤的方法实现,所述离心和所述过滤的条件可以为公知的条件,本发明在此不再赘述。
根据本发明,该发酵菌剂可以由所述植物乳杆菌和乳酸片球菌在发酵培养基中进行发酵培养后制得,其中,可以将两种菌株进行混合培养,也可以独立培养后再进行混合。所述发酵培养基可以为本领域常规的各种用于发酵乳酸菌,例如,可以为如上所述的MRS培养基,也可以为在MRS培养基的基础上优化的各种适合于发酵乳酸菌的培养基。
根据本发明,所述发酵的条件可以为本领域公知的常规的用于乳酸菌发酵培养的条件,例如,所述发酵培养的温度可以为30-40℃。
根据本发明,所述发酵菌剂的制备方法可以按照本领域常规的方法进行制备,在本发明的一种优选实施方式中,可以按以下方法制备得到:培养植物乳杆菌GDMCCNo.61249至活菌数达到108cfu/mL以上,培养乳酸片球菌GDMCC No.61250至活菌数达到108cfu/mL以上,混合均匀后进行真空冷冻干燥制得。
第三方面,本发明提供了如上所述的植物乳杆菌或如上所述的发酵菌剂在制备用于抗肠道致病菌的产品中的应用。
第四方面,本发明提供了如上所述的植物乳杆菌或如上所述的发酵菌剂在制备用于降解胆固醇的产品中的应用。
第五方面,本发明提供了如上所述的植物乳杆菌或如上所述的发酵菌剂在制备用于抗氧化的产品中的应用。
第六方面,本发明提供了如上所述的植物乳杆菌或如上所述的发酵菌剂在制备果蔬饮料中的应用。
第七方面,本发明提供一种发酵果蔬饮料,所述发酵果蔬饮料含有如上1所述的植物乳杆菌,或者如上所述的发酵菌剂。
第八方面,本发明提供一种发酵果蔬饮料的制备方法,该方法包括:将如上所述的植物乳杆菌,或者如上所述的发酵菌剂接种至待发酵的果蔬汁中,并进行发酵。
根据本发明,接种至待发酵的果蔬汁中的植物乳杆菌,或者植物乳杆菌和乳酸片球菌为活菌。但本领域技术人员公知的是,在菌体培养的过程中,其通常也伴随着菌体的死亡,所述活菌体并不指严格意义上的全部为活菌体。
本发明对接种的植物乳杆菌、乳酸片球菌的菌体的数量并没有特别的限定,可以根据不同的用途进行具体的调整。优选的,以每毫升或每克的待发酵的原料为基准,以所述植物乳杆菌计的植物乳杆菌接种量为106-108CFU,以乳酸片球菌计的乳酸片球菌接种量为106-108CFU。
CFU(Colony-Forming Units,菌落形成单位)指活菌个数。在活菌培养计数时,由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落,称为菌落形成单位,以其表达活菌的数量。
根据本发明,所述发酵的条件可以按照本领域常规的条件进行,例如,所述发酵的温度为35-37℃,时间为24-48小时,初始pH为4-6。
根据本发明,需要说明的是,所述果蔬汁可以为果汁,可以为蔬菜汁,还可以为果汁和蔬菜汁的混合果汁。
其中,所述果汁可以为常规的各种果汁,例如,苹果汁、梨汁、荔枝汁、橙汁、草莓汁、芒果汁等等。
其中,所述蔬菜汁可以为常规的各种蔬菜汁,例如,西红柿汁、芹菜汁、胡萝卜汁、黄瓜汁、南瓜汁、圆白菜汁等等。
根据本发明一种优选的实施方式,所述发酵果蔬汁为发酵西红柿汁和荔枝汁的混合果汁。其中,西红柿汁和荔枝汁的比例可以为1:0.1-10,优选为1:0.5-5。
具体的,可以将购买新鲜的荔枝去核去皮后进行破碎榨汁。西红柿和荔枝汁用4层纱布过滤,对收集的果汁进行50%稀释后将荔枝和西红柿汁进行1:1复合,得到果蔬汁。
以下的制备例、实施例和对比例将对本发明作进一步的说明,但并不因此限制本发明。
在下述制备例、实施例和对比例中:
实验菌株:本发明的植物乳杆菌(该菌株于2020年12月7日被保藏在广东省微生物菌种保藏中心(地址:广东省广州市越秀区先烈中路100号大院实验大楼5楼,邮政编码:510075)(保藏单位的缩写为GDMCC),保藏编号为GDMCC No.61249),以下简称菌株W928;
本发明的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici),于2020年12月7日被保藏在广东省微生物菌种保藏中心(地址:广东省广州市越秀区先烈中路100号大院实验大楼5楼,邮政编码:510075)(保藏单位的缩写为GDMCC),保藏编号为GDMCC No.61250,简称W929
对比的菌株为保加利亚乳杆菌、嗜热乳杆菌
MRS液体培养基配方:磷酸氢二甲2g,无水乙酸钠5g,酵母浸粉5g,七水合硫酸镁0.5g,牛肉膏10g,柠檬酸铵2g,葡萄糖20g,胰蛋白胨10g,硫酸锰0.25g,吐温801mL,蒸馏水1000mL(固体培养基加20g琼脂),pH6.5,115℃灭菌15min后备用,以上试剂均购自科百奥生物技术公司;
活菌数的测定方法:取1ml的发酵果蔬汁加入9ml 0.85%的生理盐水管中依次进行10倍梯度稀释,选择3个合适的稀释梯度从中取1ml稀释液加入至90mm培养皿中,倾注加入55℃、15mlMRS固体培养基,轻轻混匀后静置待凝固后倒置放入37℃恒温培养箱,培养48h后计菌落总数。
制备例1
本制备例用于说明菌株的活化
将冻存于-80℃超低温冰箱内的植物乳杆菌W928、乳酸片球菌W929、保加利亚乳杆菌,嗜热乳杆菌,油管保藏的菌种,按2体积%的接种量分别接种至MRS液体培养基中,然后在37℃,180r/min条件下,培养12h,连续活化3代后进行后续试验。
制备例2
本制备例用于说明果蔬汁的制备
购买新鲜的荔枝,西红柿,荔枝去核去皮后进行破碎榨汁。西红柿和荔枝汁用4层纱布过滤,对收集的果汁进行50%稀释后将荔枝和西红柿汁进行1:1复合,调节初始pH值为5,得到果蔬汁。
实施例1
对植物乳杆菌GDMCC No.61249和乳酸片球菌GDMCC No.61250(1:1比例使用)混合发酵(总接种量2体积%)的最佳条件的确定
1.对最佳发酵温度的确定
分别在35℃,37℃,39℃,41℃,43℃条件下对混合菌进行培养,培养12小时后以稀释涂布法计算活菌数目,以活菌数最多的为最佳发酵温度,结果如图1所示。同时测定不同温度下对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性,以抑菌圈大小为判断指标,结果如图2所示。
2.最佳发酵时间的确定
由1得出最佳发酵温度为37℃,在该温度下对发酵时间进行测定,以稀释涂布法计数活菌数目确定最佳发酵时间,结果如图3所示。
3.不同发酵时间对抑菌活性的影响
在最佳发酵温度37℃下测定不同发酵时间后发酵果汁对铜绿假单胞菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,沙门氏菌等常见致病菌的抑菌活性,以抑菌圈大小为判断指标,结果如图4所示。
4.不同发酵时间对有机酸积累的影响
乳酸作为乳酸菌发酵的重要产物,同时赋予发酵食品的特殊风味,有机酸含量对发酵食品的风味具有重要的意义,有机酸的检测方法以酸碱滴定计算有机酸的含量。即在最佳发酵温度37℃下测定不同发酵时间后发酵果汁的有机酸含量,结果如图5所示。
5.不同发酵时间发酵果汁中总糖和还原糖积累的影响
在37℃下发酵,每隔6小时测定发酵液的还原糖和总糖的含量,结果如图6所示。
实验结果表明,该复合菌系发酵果汁的最佳优化发酵条件为温度为37℃,发酵时间按为30小时,该条件下,混合菌系活菌数达到峰值,对致病菌的抗菌效果明显,经30h的发酵后,果汁中的总糖和还原糖达到最高,有机酸含量有明显提升。
实施例2
按照表1中的方式将各组菌以2体积%总接种量接种至制备例2制备的果蔬汁中,在温度为37℃,初始pH值为5的条件下发酵30小时,收集以上各组的无细胞上清液(CFS)。
表1
菌株 | |
实验组1 | 植物乳杆菌GDMCC No.61249 |
实验组2 | 乳酸片球菌GDMCC No.61250 |
实验组3 | 植物乳杆菌GDMCC No.61249+乳酸片球菌GDMCC No.61250以1:1混合 |
实验组4 | 植物乳杆菌GDMCC No.61249+保加利亚乳杆菌以1:1混合 |
对照组1 | 嗜热乳杆菌 |
对照组2 | 乳酸片球菌GDMCC No.61250+保加利亚乳杆菌以1:1混合 |
(1)大肠杆菌,肠炎沙门氏菌,索状芽孢杆菌,金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌在营养肉汤中孵育24小时,在600nm下稀释至0.06,这相当于McFarland标准0.5,取200微升涂布于固体LB平板。然后,将牛津杯放于固体培养基上分别加入发酵后果蔬汁每只牛津杯加入量为150微升,并在37℃下孵育24小时。空白对照为等体积的果蔬汁,培养24小时后用游标卡尺测定抑菌圈大小评估抗菌活性。其中,以上各组上清液在使用前还用过氧化氢酶,脂肪酶和蛋白酶K(0.1mg/mL)在37℃处理1小。结果如表2所示。
为了检查有机酸如乳酸,琥珀酸和氨基酸代谢物如苯基乳酸是否有助于上清液的拮抗活性,将购自的乳酸,琥珀酸和苯基乳酸稀释在果蔬汁中后加入牛津杯中。大肠杆菌35150,肠炎沙门氏菌梭状芽孢杆菌,金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌混合后过夜培养在600nm下调节至0.06,并在存在或不存在乳酸,琥珀酸或苯基乳酸的情况下于37℃温育24小时。测定致病菌生长评估其抗菌活性,结果如表2所示。
表2
单位:mm
(2)探究发酵后果蔬汁对胆固醇的降解能力
称取500μg胆固醇与发酵后各组果蔬汁混合,每组果蔬汁分为2小组,一小组为上清液,另一组为离心破碎后的细胞液。在37度下孵育4小时后加入无水乙醇和50%氢氧化钾溶液在65℃下进行充分皂化。冷却后加入3ml 5%氯化钠、10ml石油醚,盖紧玻璃塞,振摇2分钟,静置分层。取上层石油醚2ml,置于10ml具玻璃塞的试管内,在65℃恒温水浴中用氮气吹干,加入4ml冰乙酸,2ml铁矾显色液,混匀,放置15分钟后560-575nm下比色。
标准曲线:准确吸取胆固醇工作液0;0.5;1.0;1.5;2.0ml分别置于10ml试管内,在各管内加入冰乙酸,使总体积达4ml。沿管壁加2ml铁矾显色液,混匀,在15-90分钟内,560-575nm下比色。计算胆固醇的降解量评估其胆固醇降解能力,结果如表3所示。
(3)探究复合乳酸菌群在胃酸,胆盐,肠胰蛋白酶和胰蛋白酶作用下的存活率评估其定植肠道能力。
将3g/升胃蛋白酶悬浮于无菌果蔬汁(0.5%NaCl,w/v)中并通过加入1M HCl调节至pH2.5,pH3.5,pH4.5来模拟胃液环境。然后使用膜过滤器(0.2μm)过滤。
通过将1g每升胰酶与0.2%,0.3%,0.4%胆汁盐(w/v)一起悬浮在无菌复合果汁中并通过加入1M NaOH调节至pH8.0来制备模拟肠液环境。然后使用膜过滤器(0.2μm)过滤。
为了确定以上各组菌是否耐受模拟胃环境,果蔬汁接种表1所示各组菌后过夜培养,然后将每组细菌悬浮液(200μL)与1mL模拟胃液和300μL无菌果蔬汁混合。然后将混合物在37℃下孵育每过30分钟测定一次OD600的吸光度,连续测定6次。模拟肠液环境与上述相同,同时将菌种接种到无菌果蔬汁作为空白对照,以第6次结果次来评估以上各组菌对肠道环境的耐受能力,每组实验重复三次。结果如表3所示。
表3
进一步研究还发现,本发明的菌株,特别是本发明的原始菌株、复合菌株发酵果汁后的无细胞液对超氧自由基和DPPH的清除率较高,如图7所示。
此外,为本发明的原始菌株,复合菌株发酵果汁后的果汁有机酸和还原性糖对比,发酵时间为最佳发酵时间28小时。
由以上可见,使用本发明的植物乳杆菌,相比于现有乳酸菌,对果蔬汁进行发酵,一方面同风味层次更加多样口感更加醇厚,另一方面能其抗氧化活性,胆固醇降解能力,对人工胃液和胆盐的抗性均有所提升。且优选使用本发明的复合乳酸菌发酵果蔬汁,和单一的乳酸菌相比复合乳酸菌具有较好的优势。
以上结合附图详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于上述实施方式中的具体细节,在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是,在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征,在不矛盾的情况下,可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复,本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外,本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合,只要其不违背本发明的思想,其同样应当视为本发明所公开的内容。
Claims (10)
1.一株植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum),其特征在于,所述植物乳杆菌的保藏编号为GDMCC No.61249。
2.一种发酵菌剂,其特征在于,该发酵菌剂含有权利要求1所述的植物乳杆菌GDMCCNo.61249。
3.根据权利要求2所述的发酵菌剂,其中,该发酵菌剂还含有乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici),所述乳酸片球菌的保藏编号为GDMCC No.61250。
4.权利要求1所述的植物乳杆菌,或者权利要求2或3所述的发酵菌剂在制备用于抗肠道致病菌的产品中的应用。
5.权利要求1所述的植物乳杆菌,或者权利要求2或3所述的发酵菌剂在制备用于降解胆固醇的产品中的应用。
6.权利要求1所述的植物乳杆菌,或者权利要求2或3所述的发酵菌剂在制备用于抗氧化的产品中的应用。
7.权利要求1所述的植物乳杆菌,或者权利要求2或3所述的发酵菌剂在制备果蔬饮料中的应用。
8.一种发酵果蔬饮料,其特征在于,所述发酵果蔬饮料含有权利要求1所述的植物乳杆菌,或者权利要求2或3所述的发酵菌剂。
9.一种发酵果蔬饮料的制备方法,其特征在于,该方法包括:将权利要求1所述的植物乳杆菌,或者权利要求2或3所述的发酵菌剂接种至待发酵的果蔬汁中,并进行发酵。
10.根据权利要求9项所述的方法,其中,所述发酵的温度为35-37℃,时间为24-48小时,初始pH为4-6。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110183227.4A CN112813006B (zh) | 2021-02-08 | 2021-02-08 | 植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110183227.4A CN112813006B (zh) | 2021-02-08 | 2021-02-08 | 植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN112813006A true CN112813006A (zh) | 2021-05-18 |
CN112813006B CN112813006B (zh) | 2023-08-18 |
Family
ID=75865078
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110183227.4A Active CN112813006B (zh) | 2021-02-08 | 2021-02-08 | 植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN112813006B (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN117187141A (zh) * | 2023-10-07 | 2023-12-08 | 四川大学 | 一株用于果蔬浅发酵的植物乳杆菌及发酵果蔬的制备方法 |
CN117866844A (zh) * | 2024-01-18 | 2024-04-12 | 朗恒科技集团有限公司 | 一株乳酸片球菌lh01及其应用 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20130064928A1 (en) * | 2010-03-19 | 2013-03-14 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Novel lactobacillus classified as lactobacillus plantarum, and use thereof |
CN104357353A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-02-18 | 郑州大学 | 一株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用 |
CN108102959A (zh) * | 2017-12-23 | 2018-06-01 | 浙江大学 | 人源性降胆固醇植物乳杆菌zy08及其应用 |
CN109628354A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-04-16 | 江南大学 | 一株高抑菌活性的植物乳杆菌及应用 |
CN110218681A (zh) * | 2019-06-25 | 2019-09-10 | 吉林农业大学 | 一株发酵乳杆菌kp101及其应用 |
CN110272842A (zh) * | 2019-06-25 | 2019-09-24 | 吉林农业大学 | 一株具有减肥降脂功能的植物乳杆菌lp104 |
CN111436203A (zh) * | 2018-11-12 | 2020-07-21 | 中粮营养健康研究院有限公司 | 一株发酵植物乳杆菌及其用途 |
CN112111433A (zh) * | 2020-09-30 | 2020-12-22 | 兰州大学 | 一株具有耐酸耐胆盐活性的植物乳杆菌lzu-j-qa85及其应用 |
-
2021
- 2021-02-08 CN CN202110183227.4A patent/CN112813006B/zh active Active
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20130064928A1 (en) * | 2010-03-19 | 2013-03-14 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Novel lactobacillus classified as lactobacillus plantarum, and use thereof |
CN104357353A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-02-18 | 郑州大学 | 一株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用 |
CN108102959A (zh) * | 2017-12-23 | 2018-06-01 | 浙江大学 | 人源性降胆固醇植物乳杆菌zy08及其应用 |
CN111436203A (zh) * | 2018-11-12 | 2020-07-21 | 中粮营养健康研究院有限公司 | 一株发酵植物乳杆菌及其用途 |
CN109628354A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-04-16 | 江南大学 | 一株高抑菌活性的植物乳杆菌及应用 |
CN110218681A (zh) * | 2019-06-25 | 2019-09-10 | 吉林农业大学 | 一株发酵乳杆菌kp101及其应用 |
CN110272842A (zh) * | 2019-06-25 | 2019-09-24 | 吉林农业大学 | 一株具有减肥降脂功能的植物乳杆菌lp104 |
CN112111433A (zh) * | 2020-09-30 | 2020-12-22 | 兰州大学 | 一株具有耐酸耐胆盐活性的植物乳杆菌lzu-j-qa85及其应用 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
CONOR SLATTERY等: "Analysis of Health Benefits Conferred by Lactobacillus Species from Kefir", 《NUTRIENTS》 * |
侯颖等: "自然发酵泡菜汁中植物乳杆菌的分离鉴定与体外益生特性研究", 《动物营养学报》 * |
熊强等: "植物乳杆菌的功能评价", 《生物加工过程》 * |
罗建波: "《公共卫生实验室质量技术与安全》", 31 December 2004, 中山大学出版社 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN117187141A (zh) * | 2023-10-07 | 2023-12-08 | 四川大学 | 一株用于果蔬浅发酵的植物乳杆菌及发酵果蔬的制备方法 |
CN117866844A (zh) * | 2024-01-18 | 2024-04-12 | 朗恒科技集团有限公司 | 一株乳酸片球菌lh01及其应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN112813006B (zh) | 2023-08-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Lavermicocca et al. | Study of adhesion and survival of lactobacilli and bifidobacteria on table olives with the aim of formulating a new probiotic food | |
CN109182207B (zh) | 一株具有调节血糖和胆固醇水平等益生功能的嗜酸乳杆菌La-SJLH001及其应用 | |
CN101139557B (zh) | 一种干酪乳杆菌及其在改善血脂代谢和免疫调节中的应用 | |
CN105255752A (zh) | 高耐酸植物乳杆菌zdy2013 | |
CN110106119B (zh) | 一株分离自母乳的鼠李糖乳杆菌m9及其应用 | |
CN109504617B (zh) | 一种哈尔滨乳杆菌及其应用 | |
CN105400727A (zh) | 一株具有抗氧化活性的副干酪乳杆菌及其应用 | |
CN101338283A (zh) | 一种干酪乳杆菌及其在固态发酵中的应用 | |
CN104651268A (zh) | 一种植物乳杆菌及其应用 | |
CN116286468A (zh) | 一株具有抗氧化功能的发酵粘液乳杆菌lf-onlly及其在发酵食品中的应用 | |
CN112813006B (zh) | 植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用 | |
CN115340965A (zh) | 一株副干酪乳酪杆菌pc724及其应用 | |
CN116676225B (zh) | 一株具有安神助眠功效的鼠李糖乳杆菌lr-28菌株、发酵产物、嘉眠菌群组合剂及应用 | |
CN115261264A (zh) | 一株副干酪乳酪杆菌pc804及其应用 | |
Kuerman et al. | Effects of prebiotic carbohydrates on the growth promotion and cholesterol-lowering abilities of compound probiotics in vitro | |
CN116814481A (zh) | 一株源自酸马奶的益生副干酪乳酪杆菌pc646及其人工智能筛选方法 | |
CN104663871B (zh) | 利用真空法制备益生菌鲜切水果的方法 | |
CN115851535A (zh) | 具有调节免疫力作用的鼠李糖乳酪杆菌wfp52及应用 | |
Mishra et al. | Evaluation of probiotic potentials of Lactobacillus isolated from traditional fermented foods of Garo Hills, Meghalaya, India | |
CN114317334A (zh) | 一株能够与幽门螺杆菌共聚集的清酒乳杆菌及其应用 | |
Zielińska et al. | Development of tofu production method with probiotic bacteria addition. | |
CN105670959A (zh) | 一株益生菌菌株及其应用 | |
CN113881592B (zh) | 一株罗伊氏乳杆菌及其应用 | |
KR20100076540A (ko) | 식물성 배지, 식물성 부형제 조성물 및 이를 이용한 식물성유산균 발효 분말의 제조방법 | |
KR20140134021A (ko) | 김치 유래 기능성 유산균 및 이를 이용한 식품 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
CB03 | Change of inventor or designer information | ||
CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Qiu Hulin Inventor after: Xu Bo Inventor before: Qiu Hulin |
|
CB03 | Change of inventor or designer information | ||
CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Xu Bo Inventor after: Qiu Hulin Inventor before: Qiu Hulin Inventor before: Xu Bo |
|
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |