CN112587524B - 一种表观遗传因子抑制剂40569z在制备肝癌药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于药学领域，具体涉及一种新型表观遗传因子抑制剂40569Z在制备肝癌药物中的应用。本发明以sirt7为靶位点进行分子对接，其中对sirt7具有较强结合作用为抑制剂40569Z，并通过体外细胞实验和体内抑制实验证实了抑制剂40569Z特异性强，明显抑制肝癌细胞的生长，小鼠肿瘤模型中，明显抑制了肿瘤的生长，能够促进其肝癌细胞的凋亡并且不会杀伤正常肝脏细胞，可作为临床靶向治疗肝癌的小分子靶向药物。

Description

一种表观遗传因子抑制剂40569Z在制备肝癌药物中的应用

技术领域

本发明属于药学领域，具体涉及一种新型表观遗传因子抑制剂40569Z在制备肝癌药物中的应用。

背景技术

肝癌是临床常见的恶性肿瘤之一，具有恶性程度高、病情进展快，生存期短、难以治愈的特点，现阶段肝癌的发病率和死亡率呈上升趋势。

目前肝癌的主要治疗手段为手术治疗、放疗和化疗，其中针对于肝癌的化疗药物，近年来，随着恶性肿瘤发病机制的深入研究，针对于肿瘤的药物种类很多，针对于不同靶点比如EGFR、VEGF/VEGFR、Raf/MAPK、HGF等靶点研究了众多药物。其中Sirtuin蛋白家族在不同细胞过程如细胞凋亡、线粒体生物合成、脂质代谢、脂肪酸氧化、细胞应激反应和衰老都发挥着重要的作用，其中sirt7在连接染色质重塑复合物和PolⅠ中也具有关键作用，还能够使肿瘤基因脱乙酰化并且抑制基因转率过程，从而维持致癌转化，但是现有技术中并未对sirt7作为靶位点针对于肝癌治疗进行相应的研究，因此，以sirt7作为靶位点进行小分子药物的研究，可以获得具有高靶向性的肝癌药物。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明通过采用分子对接方法与sirt7靶位点进行分子对接，获得对接分数绝对值较高的化合物分子，筛选出特异性sirt7抑制剂，并进行了体外肝癌细胞的抑制实验，获得特异性sirt7抑制剂对肝癌细胞具有明显的抑制作用，且对正常的肝脏细胞抑制作用小，可以作为治疗肝癌的靶向药物。

本发明的目的提供了一种新型表观遗传因子抑制剂40569Z如式Ⅰ在制备肝癌药物中的应用。

基于同一发明构思的，本发明还提供了一种新型表观遗传因子抑制剂 40569Z如式Ⅰ在制备sirt7抑制剂中的应用。

基于同一发明构思的，本发明还提供了一种治疗肝癌的药物组合物，所述的药物组合物包含式Ⅰ所示的抑制剂40569Z。

进一步的，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅剂和媒介物中的至少一种。

基于同一发明构思的，本发明还提供了一种sirt7抑制剂，所述抑制剂包含如式Ⅰ所示的抑制剂40569Z。

有益效果：

(1)本发明第一次将如式Ⅰ所示的抑制剂40569Z与sirt7进行分子对接，其对接分数为-9.74399，具有较强的结合力。

(2)本发明将如式Ⅰ所示的抑制剂40569Z与肝癌细胞作用，其对肝癌细胞具有明显的抑制作用，而在低浓度时对正常干细胞无明显杀伤作用，因此其对肝癌治疗具有积极作用。

(3)本发明将如式Ⅰ所示的抑制剂40569Z应用至成瘤的小鼠，相较于 Oxaplatin，通过给药后肿瘤重量和给药期间肿瘤体积变化比较可知抑制剂 40569Z对肿瘤的抑制效果明显优于Oxaplatin。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明实施例sirt7靶位点虚拟结构图以及靶位点结构区域；

图2为本发明实施例sirt7靶位点与抑制剂40569Z对接作用图；

图3为本发明实施例提供的抑制剂40569Z对肝癌细胞和正常肝细胞的抑制作用图；

图4为本发明实施例提供的成瘤小鼠给不同药两周期间肿瘤体积变化图；

图5为本发明实施例提供的成瘤小鼠给不同药两周后肿瘤重量比较图。

具体实施方式

为使本发明要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图及具体实施例进行详细描述，但本发明的保护范围并不限于以下具体实施例。

除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。

除非另有特别说明，本发明中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。

实施例1

本发明以sirt7为切入点，根据sirt7的分子结构以及其结构进行同源建模，获得如图1所述sirt7靶位点虚拟结构图以及靶位点结合区域，并采用大量小分子化合物与该结构进行分子对接，其中化合物40569Z(如式Ⅰ所示)与sirt7 靶位点的对接图如图2所示，其中化合物40569Z能够完全装入sirt7靶位点作用口袋，且存在多重作用，比如氢键作用、疏水作用，极化作用等，其分子对接分数为-9.74399，具有较强的较强的结合力，可以作为sirt7的抑制剂。

实施例2

抑制剂40569Z对肝癌细胞的体外抑制活性

在DMEM培养基中加入10％的胎牛血清溶液，接种HEPG2细胞，在温度为37℃，5％CO₂条件下培养一天，并将培养后的HEPG2细胞以3× 10⁴cells/ml的密度接种至96孔板上，培养24h后加入一定浓度梯度的抑制剂 40569Z，继续培养48h后进行CCK8实验分析细胞的活性，以正常肝细胞为对照组，按照同样的方法处理分析，获得如图3所示细胞活性图，其中图A 为抑制剂40569Z对肝癌细胞的抑制效果、图B为抑制剂40569Z对正常肝细胞的抑制效果，由图3可知，抑制剂40569Z对肝癌细胞的生长抑制的IC₅₀值＝12uM，而在浓度为12uM的条件下对正常肝细胞无明显的抑制作用，毒性较低，即本发明提供的抑制剂40569Z对肝癌细胞的抑制具有较强的特异性，能够明显抑制肝癌细胞的生长。

实施例3

抑制剂40569Z对体内成瘤小鼠中肿瘤的抑制活性

取成年小鼠10只，皮下注射1×10⁶/HEPG2细胞于裸鼠体内，在SPF级环境下饲养小鼠2周，诱导成瘤，随机均分成两组，两组分别给不同的药物，一组为抑制剂40569Z，另一组为Oxaplatin(奥沙利铂)，每周采用腹腔注射的方式给药两次，每次给药量为5mg/kg，给药期间定时测定肿瘤体积，其结果如图4所示，给药两周后取出肿瘤组织，并称量肿瘤组织的重量，其结果如图 5所示。由图4可知采用抑制剂40569Z给药的小鼠，肿瘤体积基本无变化，而采用Oxaplatin给药的小鼠，肿瘤体积随着时间的推移，肿瘤体积逐渐增大，比初始状态的肿瘤体积增大了4-5倍，由图5可知，采用抑制剂40569Z给药的小鼠体内的肿瘤组织的重量平均值在0.1g左右，而采用Oxaplatin给药的小鼠体内的肿瘤组织的重量平均值为0.5g左右，即采用抑制剂40569Z和 Oxaplatin对体内肿瘤的抑制作用具有明显统计学差异，本发明提供的抑制剂 40569Z抗肿瘤效果明显优于Oxaplatin。

以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种新型表观遗传因子抑制剂40569Z如式Ⅰ在制备肝癌药物中的应用：

式 Ⅰ。

2.一种新型表观遗传因子抑制剂40569Z如式Ⅰ在制备sirt7抑制剂中的应用:

式 Ⅰ。

3.一种治疗肝癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含如式Ⅰ所示的抑制剂40569Z：

式 Ⅰ。

4.根据权利要求3所述的治疗肝癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体、赋形剂中的至少一种。

5.一种sirt7抑制剂，其特征在于，所述抑制剂包含如式Ⅰ所示的抑制剂40569Z：

式 Ⅰ。

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