CN112451539A - 芜菁中性多糖在制备抗氧化药物中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及芜菁中性多糖应用技术领域，具体公开了芜菁中性多糖在制备抗氧化药物中的用途，通过对D‑半乳糖致衰老小鼠模型和对照组分别测定小鼠血清以及全脑、肝脏匀浆中的各指标，发现所述芜菁中性多糖对D‑半乳糖致衰老小鼠模型具有抗氧化作用。本发明首次发现了芜菁中性多糖显著增高血清以及全脑、肝脏匀浆中的SOD、T‑AOC、CAT、GSH、GSH‑Px的活性，并显著降低MDA含量，从而提高抗氧化能力，延缓衰老。

Description

芜菁中性多糖在制备抗氧化药物中的用途
技术领域
本发明涉及芜菁中性多糖应用技术领域，具体涉及芜菁中性多糖在制备抗氧化药物中的用途。
背景技术
芜菁(Brassica rapa L.)，是药食兼用碱性植物，属十字花科芸蔓属(Brassica)芸蔓种芜菁，以块根入药。临床使用具有滋阴润肺、健胃消食、软便利尿、排除多余体液的功能，对肺部和胃病有保健和预防作用，增强体质等功效。近代药理研究还发现，芜菁具有抗氧化、抗辐射、预防心血管疾病等功效。
多糖具有装载丰富生物信息的能力，是天然产物中含量最丰富的物质。研究表明，多糖具有提高机体免疫力、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等作用，且多糖类药物副反应小，具有一定的靶向性，而且可以明显降低使用剂量，已被广泛用于基础医药和保健食品，在疾病研究以及新药研发等方面极具吸引力，具有广阔的发展空间。
目前并未有研究发现芜菁中性多糖(BRNP)在抗氧化、抗衰老中的作用。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供了芜菁中性多糖在制备抗氧化药物中的用途。
进一步地，所述芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中超氧化物歧化酶的活性。
进一步地，所述芜菁中性多糖能够通过提高血清、肝组织和脑组织中总抗氧化能力活性，增强细胞稳定性，进而增强机体稳定性延缓衰老。
进一步地，所述芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中过氧化氢酶的活性。
进一步地，所述芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中还原性谷脱甘肽(GSH)的活性。
进一步地，所述芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶的活性。
进一步地，所述芜菁中性多糖能够显著降低血清、肝组织和脑组织中丙二醛的含量。
本发明还提供了所述的芜菁中性多糖在制备小鼠抗氧化药物中的用途。
本发明还提供了所述的芜菁中性多糖在制备D-半乳糖致衰老小鼠模型抗氧化药物中的用途。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
1、本发明提供了芜菁中性多糖在制备抗氧化药物中的用途；
2、本发明中所述的芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中超氧化物歧化酶的活性；
3、本发明中所述的芜菁中性多糖能够通过提高血清、肝组织和脑组织中总抗氧化能力活性，增强细胞稳定性，进而增强机体稳定性延缓衰老；
4、本发明中所述的芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中过氧化氢酶的活性；
5、本发明中所述的芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中还原性谷脱甘肽的活性；
6、本发明中所述的芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶的活性；
7、本发明中所述的芜菁中性多糖能够显著降低血清、肝组织和脑组织中丙二醛的含量；
8、本发明还提供了所述的芜菁中性多糖在制备小鼠抗氧化药物中的用途；
9、本发明还提供了所述的芜菁中性多糖在制备D-半乳糖致衰老小鼠模型抗氧化药物中的用途。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1：
芜菁中性多糖(BRNP)在抗氧化、衰老中的作用观察。
一、材料与仪器
芜菁中性多糖(BRNP)通过实验室制备获得，具体制备方法见专利CN107011453A，需要说明的是芜菁的别名为维药恰麻；
实验小鼠为昆明小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g，购于新疆医科大学实验动物中心(批号:SCXK(新)2018-0002)，清洁级；
D-半乳糖(索莱宝，批号IG0540)水溶性维生素E(索莱宝，批号H8810)；
实验所用试剂盒：超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒、过氧化氢酶(CAT)试剂盒、还原性谷脱甘肽(GSH)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)试剂盒和丙二醛(MDA)试剂盒均购于武汉伊莱瑞特生物科技公司；其他试剂均为分析纯；
主要仪器有：AB135-5型电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；酶标仪(美国赛默飞世尔科技公司)
二、具体实验操作过程如下：
(1)动物分组及给药：将70只健康的KM小鼠适应性饲养3d后随机分为正常组、模型组、阳性对照组(VE170mg/kg)、BRNP低剂量组(50mg/kg)、BRNP中剂量组(100mg/kg)、BRNP高剂量组(200mg/kg)；正常组和模型组灌胃生理盐水0.1mL/10g，其余各组按高、中、低连续灌胃BRNP 42d，各组在灌胃的同时，除正常组其他各组颈背部皮下注射D-半乳糖溶液(500mg/kg)，正常组注射等体积的生理盐水，灌胃期间每5天称重一次；
脏器指数测定：末次给药禁食不禁水24h后，眼球取血并分离血清，于冰上摘取肝脏、脾脏及脑组织，用预冷的生理盐水洗净各脏器组织，用吸水纸将水吸净，并称重各脏器组织重量，用于测定各脏器组织脏器指数。
脏器指数＝脏器重量(mg)/小鼠体重(g)
(2)指标检测：利用冰浴过的生理盐水制备10％的肝匀浆和脑匀浆2mL，将制备后的匀浆于12000r/min低温离心10min，将离心后的上清取出按需分装，按照试剂盒操作测定小鼠血清、肝脏和脑组织匀浆液中SOD、CAT、T-AOC、GSH、GSH-Px活性和MDA含量；
病理切片制作：取各组动物肝脏和脑组织用4％甲醛固定后，水洗、脱水和脱色，浸蜡和包埋，修块、切片、贴片和展片，脱蜡、HE染色与镜检。
(3)实验数据：实验数据用SPSS25.0统计学软件进行差异显著性统计分析，对差异显著性(P＝0.05)进行比较分析，P＜0.05认为具有显著差异性，P＜0.01认为具有极显著差异性，实验结果以-x±s形式表示。
上述实施例检测结果如下：
(1)小鼠体重与脏器指数的测定
表1 BRNP对衰老小鼠脏器指数的影响(-x±s,n＝10)
Figure BDA0002842063690000041
Figure BDA0002842063690000051
注:与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。
如表1所示，与正常组比较，模型组胸腺指数和脾脏指数降低(P＜0.05)，与模型组比较，BRNP各剂量组胸腺指数和脾脏指数显著性提高(P＜0.05或P＜0.01)。
(2)小鼠血清、肝组织及脑组织中GSH-Px活力的测定
表2BRNP对小鼠血清、肝脏、脑组织中GSH-Px活性的影响(-x±s,n＝10)
Figure BDA0002842063690000052
注:与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。
与正常组相比，模型组小鼠的血清、肝组织及脑组织的GSH-Px活力均极显著低于正常组(P＜0.01)，表明造模成功，与模型组相比，VE对照组血清、脑组织及肝匀浆中GSH-Px活性极显著增加(P＜0.01))，BRNP低剂量组血清、脑匀浆与肝匀浆中GSH-Px活性显著增加(P＜0.05)，BRNP中剂量组血清、脑匀浆及肝匀浆中的GSH-Px活性极显著提高(P＜0.01)，BRNP高剂量组血清、脑匀浆及肝匀浆中GSH-Px活性极显著提高(P＜0.01)；
GSH-Px通过特异性催化谷胱甘肽对过氧化氢的还原反应，发挥保护细胞膜的作用，本实验结果表明，BRNP作用于衰老模型动物后，动物血清、肝脏及脑组织中GSH-Px活性均提高，说明BRNP能够通过提高GSH-Px的活性来增强细胞稳定性，进而增强机体稳定性延缓衰老。
(3)小鼠血清、肝组织及脑组织中GSH活力的测定
表3 BRNP对小鼠血清、肝脏、及脑组织中GSH活性的影响(-x±s,n＝10)
Figure BDA0002842063690000061
注:与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。
与正常组相比，模型组小鼠的血清、肝组织及脑组织的GSH活力均极显著低于正常组(P＜0.01)，与模型组相比，VE对照组血清、肝组织及脑组织GSH活性极显著增加(P＜0.01)，BRNP低剂量组肝匀浆、血清与脑匀浆中GSH活性增加不显著(P＞0.05)，BRNP中剂量组肝、脑匀浆及血清中的GSH活性极显著提高(P＜0.01)，BRNP高剂量组血清、肝和脑组织GSH活性极显著提高(P＜0.01)。
(4)小鼠血清、肝组织及脑组织中SOD活力的测定
表4 BRNP对小鼠血清、肝脏、及脑组织中SOD活性的影响(-x±s,n＝10)
Figure BDA0002842063690000062
Figure BDA0002842063690000071
注:与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。
与正常组相比，模型组小鼠的血清、肝组织及脑组织的SOD活力均极显著低于正常组(P＜0.01)，与模型组相比，VE对照组脑组织、肝匀浆中及血清中SOD活性极显著增加(P＜0.01)，BRNP低剂量组血清、肝SOD活性增加不显著(P＞0.05)，脑组织中SOD活性显著增加(P＜0.05)，BRNP中剂量组肝、脑匀浆SOD活性极显著提高(P＜0.01)，血清中SOD活性显著增加(P＜0.05)，BRNP高剂量组血清、肝和脑组织SOD活性极显著提高(P＜0.01)。
(5)小鼠血清、肝组织及脑组织中T-AOC活力的测定
表5 BRNP对小鼠血清、肝脏、及脑组织中T-AOC活性的影响(-x±s,n＝10)
Figure BDA0002842063690000072
注:与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。
与正常组相比，模型组小鼠的血清、肝组织及脑组织的的T-AOC活力均极显著低于正常组(P＜0.01)，与模型组相比，VE对照组脑组织、肝匀浆中T-AOC活性极显著增加(P＜0.01)，血清中T-AOC活性显著增加(P＜0.05)，BRNP低剂量组血清、肝和脑组织T-AOC活性增加不显著(P＞0.05)，BRNP中剂量组肝、脑匀浆T-AOC活性极显著提高(P＜0.01)，血清中T-AOC活性增加不显著(P＞0.05)；BRNP高剂量组血清、肝和脑组织T-AOC活性极显著提高(P＜0.01)；
本实验结果表明，BRNP作用于衰老模型动物后，动物血清、肝脏及脑组织中T-AOC活性均提高，说明BRNP能够通过提高T-AOC的活性来增强细胞稳定性，进而增强机体稳定性延缓衰老。
(6)小鼠血清、肝组织及脑组织中CAT活力的测定
表6 BRNP对小鼠血清、肝脏、及脑组织中CAT活性的影响(-x±s,n＝10)
Figure BDA0002842063690000081
注:与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。
与正常组相比，模型组小鼠的血清、肝脏及脑组织中CAT活力均极显著低于正常组(P＜0.01)。与模型组相比，VE对照组血清中CAT活性极显著增加(P＜0.01)，肝脏、脑组织中CAT活性增加显著(P＜0.05)；BRNP中、低剂量组血清、脑组织CAT活性增加不显著(P＞0.05)，肝脏中活性显著增加(P＜0.05)；BRNP高剂量组血清、脑组织CAT活性极显著提高(P＜0.01)，肝脏中活性显著增加(P＜0.05)。
本实验结果表明，BRNP作用于衰老模型动物后，动物血清、肝脏及脑组织中CAT活性均提高，说明BRNP能够通过提高CAT的活性来增强细胞稳定性，进而增强机体稳定性延缓衰老。
(7)小鼠血清、肝组织及脑组织中MDA含量的测定
表7 BRNP对小鼠血清、肝脏、及脑组织中MDA含量的影响(-x±s,n＝10)
Figure BDA0002842063690000091
注:与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。
与正常组相比，模型组小鼠的血清、肝组织及脑组织的MDA含量均极显著高于正常组(P＜0.01)，与模型组相比，VE对照组血清、肝组织及脑组织中的MDA含量极显著降低(P＜0.01)，BRNP低剂量组血清、脑组织CAT活性增加不显著(P＞0.05)，肝组织中含量显著降低(P＜0.01)，BRNP中剂量组血清、肝组织及脑组织中的MDA含量极显著降低(P＜0.01)，BRNP高剂量组血清、肝组织及脑组织中的MDA含量极显著降低(P＜0.01)；
本实验结果表明，BRNP作用于衰老模型动物后，动物血清、肝脏及脑组织中MDA含量均降低。
综上所述，本发明研究表明芜菁中性多糖是通过提高机体抗氧化酶的活力，降低脂质过氧化带来的细胞损伤，抑制脑、肝脏、脾脏等重要脏器的细胞凋亡，维持机体正常防御能力发挥抗衰老功效。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (9)

1.芜菁中性多糖在制备抗氧化药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中超氧化物歧化酶的活性。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芜菁中性多糖能够通过提高血清、肝组织和脑组织中总抗氧化能力活性，增强细胞稳定性，进而增强机体稳定性延缓衰老。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中过氧化氢酶的活性。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中还原性谷脱甘肽的活性。
6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芜菁中性多糖能够显著提高血清、肝组织和脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶的活性。
7.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述芜菁中性多糖能够显著降低血清、肝组织和脑组织中丙二醛的含量。
8.根据权利要求1所述的芜菁中性多糖在制备小鼠抗氧化药物中的用途。
9.根据权利要求1所述的芜菁中性多糖在制备D-半乳糖致衰老小鼠模型抗氧化药物中的用途。
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