CN112430215A - 一种依托咪酯乳状注射液杂质及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种依托咪酯乳状注射液杂质及其制备方法。新杂质为1‑((R)‑1‑苯乙基)‑1H‑咪唑‑5‑羧酸甘油酯。另外，本发明提供该杂质的制备方法，通过依托咪酸钠盐、丙酮缩甘油经缩合剂缩合，萃取，柱层析，得到中间体依托咪酸丙酮缩甘油酯，中间体随后经酸水解、柱层析、制备液相分离得到依托咪酯新杂质。

Description

一种依托咪酯乳状注射液杂质及其制备方法
技术领域
本发明属于药物化学领域，具体涉及一种依托咪酯乳状注射液杂质及其制备方法。
背景材料
依托咪酯的中文化学名为(+)-1-(α-甲苄基)咪唑-5-羧酸乙酯，其结构式如下所示：
Figure BDA0002804269380000011
依托咪酯为咪唑类衍生物，是短时间作用的非巴比妥类静脉***，具有起效快、麻醉平稳、恢复迅速、对心血管干扰轻微、有脑保护作用等优点，被广泛应用于麻醉诱导维持和危重患者的长期镇定。
依托咪酯的临床应用主要有两种剂型：(1)水剂：依托咪酯加入一定浓度的丙二醇中溶解制备而成的注射液。(2)脂肪乳剂：依托咪酯中加入一定大豆油、中链甘油三酯、甘油水等溶解而制备而成的注射液。
杂质研究是药品研发的主要内容，贯穿于药品研发的始终，直接影响药品的安全性、有效性及质量可控性。因此，开展依托咪酯中的杂质研究具有重要的意义。
发明内容
本发明旨在提供一种依托咪酯新杂质及其制备方法，该杂质可能为依托咪酯脂肪乳剂注射液中的降解产物依托咪酸与辅料甘油发生反应而产生的，该发明为依托咪酯乳状注射液的质量研究及质量控制提供了有力的支持。
本发明主要的目的是提供了一种依托咪酯乳状注射液中的新杂质，即1-((R)-1-苯乙基)-1H-咪唑-5-羧酸甘油酯，其具有如式I所示的化学结构：
Figure BDA0002804269380000012
本发明的另一个目的是提供制备如式I所示的依托咪酯新杂质的方法，式II化合物与丙酮缩甘油缩合得到式III化合物，式III化合物经酸水解得到式I依托咪酯新杂质，具体包括两个步骤：
Figure BDA0002804269380000021
步骤1：将依托咪酸钠盐(式II化合物)、丙酮缩甘油、缩合剂、缩合活化剂在溶剂中室温搅拌反应，反应结束后，加入水和乙酸乙酯萃取，得有机相，有机相先后用酸洗、碱洗、饱和食盐水洗涤，有机相减压浓缩至干，得到中间体依托咪酸丙酮缩甘油酯(式III化合物)。
步骤2：将依托咪酸丙酮缩甘油酯、溶剂、催化量的酸，加热回流反应，反应结束后，浓缩溶剂，经柱层析、制备型高效液相分色谱分离得到依托咪酯新杂质。
本发明进一步的技术方案是：
步骤1中所述的缩合剂选自二环己基碳二酰亚胺、二异丙基碳二亚胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的一种或几种，优选1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。
步骤1所述的缩合活化剂选自4-二甲氨基吡啶、1-羟基苯并***、1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑、4-吡咯烷基吡啶的一种或几种，优选4-二甲氨基吡啶。
步骤1中所述的溶剂选自二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈中的一种或几种。
步骤1中所述的缩合剂摩尔配比的为依托咪酸钠盐摩尔配比的1.0～1.5倍，缩合活化剂摩尔配比为依托咪酸钠盐摩尔配比的0.25～0.5倍。
本发明进一步的技术方案是：
步骤2中的催化量的酸选自盐酸、三氟乙酸、甲酸、对甲苯磺酸中的一种或几种，优选对甲苯磺酸。
步骤2中催化量的酸是式III化合物重量的0.2-0.5倍。
鉴于依托咪酯新杂质的发现对依托咪酯乳状注射液的质量研究及质量控制具有重要的意义，本发明人还请求保护将式I化合物的结构作为杂质对照品在依托托咪酯乳状注射液含量分析和质量控制当中的应用。
本发明有益的技术效果如下：
本发明提供了一种对依托咪酯乳状注射液质量研究和质量控制具有重要意义的依托咪酯新杂质及其制备方法。该制备方法操作简单，制得的依托咪酯新杂质可作为对照品供定性和定量分析使用，为依托咪酯乳状注射液的质量控制提供保障。
附图说明：
图1式I化合物作为杂质对照品在测定依托咪酯乳状注射液的有关物质中的应用图。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明的具体实施方式进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例：
本实施例提供一种制备依托咪酯新杂质(式I化合物)的制备方法，其制备方法包括两个步骤：
实施例1：
步骤1：
向500mL单口瓶中加入依托咪酸钠盐(20g)、二氯甲烷(300ml)，随后加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(19.20g)、4-二甲氨基吡啶(2.57g)、丙酮缩甘油(11.10g)，室温条件下搅拌20小时。反应结束后，向反应液中加入水(200ml)，分层，取有机层，随后用乙酸乙酯(300ml)萃取水相，合并有机相，随后用10％的柠檬酸水溶液(100ml/次)洗涤2次，水相用乙酸乙酯(100ml/次)萃取3次，合并有机层，有机层先后用200mL饱和碳酸氢钠水溶液、200mL饱和食盐水洗涤，取有机层，浓缩有机层至干，得到23.2g油状物。
步骤2：
向500ml单口瓶中加入上述油状物(23.2g)、甲醇(300ml)、对甲苯磺酸(4.64g)，加热到65℃回流反应58小时。反应结束后，减压浓缩掉溶剂，得到无色油状物，柱层析(硅胶，100-200目)，得到11.99g黄色油状物，黄色油状物经制备型高效液相分色谱分离得到依托咪酯新杂质。
核磁数据(QUNANTUM-I-500MHz核磁共振仪，内标：TMS溶剂：DMSO-d6)如下所示：
1H-NMRδ(ppm)：1.843(d,J＝7.1Hz,3H)、3.504(m,2H)、3.712(m,1H)、4.048(m,1H)、4.180(m,1H)、4.6359(s,1H)、4.9399(s,1H)、6.262(q,J＝7.1Hz,1H)、7.209(m,2H)、7.269(m,1H)、7.331(m,2H)、7.717(d,J＝1.0Hz,1H)、8.270(d,J＝1.1Hz,1H)；
13C-NMRδ(ppm)：δ(ppm)：21.727(CH3)，54.733(CH)，62.513(CH2)，65.676(CH2)，69.213(CH)，121.875(C)，125.859*2(CH)，127.513(CH)，128.546*2(CH)，137.644(CH)，140.811(CH)，142.094(C)，159.601(C)。
2D-NMR相关片段信号：δH 4.048(m,1H)、4.180(m,1H)与δH 3.712(m,1H)的质子1H-1H COSY相关；与δC65.676(CH2)的碳共振峰HSQC相关，与δC62.513(CH2)、δC 159.601(C)的碳共振峰HMBC相关。δH 3.712(m,1H)与δC 159.601(C)的碳共振峰无HMBC相关信号。
注：s单峰；d双峰；q四重峰；m多重峰；dd双二重峰；hept七重峰；
实施例2：
步骤1：
向500mL单口瓶中加入依托咪酸钠盐(20g)、二氯甲烷(300ml)，随后加入二环己基碳二酰亚胺(17.3g)、1-羟基苯并***(5.7g)、丙酮缩甘油(11.10g)，室温条件下搅拌20小时。反应结束后，向反应液中加入水(200ml)，分层，取有机层，随后用乙酸乙酯(300ml)萃取水相，合并有机相，随后用10％的柠檬酸水溶液(100ml/次)洗涤2次，水相用乙酸乙酯(100ml/次)萃取3次，合并有机层，有机层先后用200mL饱和碳酸氢钠水溶液、200mL饱和食盐水洗涤，取有机层，浓缩有机层至干，得到20.1g油状物。
步骤2：
向500ml单口瓶中加入上述油状物(20.1g)、甲醇(300ml)、三氟乙酸(4.02g)，加热到65℃回流反应58小时。反应结束后，减压浓缩掉溶剂，得到无色油状物，柱层析(硅胶，100-200目)，得到10.0g黄色油状物，黄色油状物经制备型高效液相分色谱分离得到依托咪酯新杂质。
实施例3：
步骤1：
向500mL单口瓶中加入依托咪酸钠盐(20g)、二氯甲烷(300ml)，随后加入二异丙基碳二亚胺(15.9g)、1-羟基苯并***(2.84g)、丙酮缩甘油(11.10g)，室温条件下搅拌20小时。反应结束后，向反应液中加入水(200ml)，分层，取有机层，随后用乙酸乙酯(300ml)萃取水相，合并有机相，随后用10％的柠檬酸水溶液(100ml/次)洗涤2次，水相用乙酸乙酯(100ml/次)萃取3次，合并有机层，有机层先后用200mL饱和碳酸氢钠水溶液、200mL饱和食盐水洗涤，取有机层，浓缩有机层至干，得到20.5g油状物。
步骤2：
向500ml单口瓶中加入上述油状物(20.5g)、甲醇(300ml)、盐酸(10.25g)，加热到65℃回流反应58小时。反应结束后，减压浓缩掉溶剂，得到无色油状物，柱层析(硅胶，100-200目)，得到11.0g黄色油状物，黄色油状物经制备型高效液相分色谱分离得到依托咪酯新杂质。
实施例4：式I化合物作为杂质对照品在测定依托咪酯乳状注射液的有关物质中的应用。
色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent Eclipse XDB C184.6×250mm，5μm，或效能相当的色谱柱)；以乙腈-磷酸二氢钾溶液(取磷酸二氢钾0.68g，加水溶解并稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至2.5)(20:80)为流动相A，以乙腈-水(90:10)为流动相B，以四氢呋喃-水(80:20)为流动相C，按下表进行梯度洗脱；流速为每分钟1.5ml；检测波长为220nm；柱温为50℃。
Figure BDA0002804269380000051
供试品溶液：取依托咪酯乳状注射液，作为供试品溶液。
杂质对照品溶液：取式I所示化合物适量，甲醇-水(60:40)稀释制成每1ml中约含4μg的溶液，作为杂质对照品溶液。
测定法：精密量取供试品溶液和杂质对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中如有杂质(式I)峰，按外标法以峰面积计算，含杂质不得过0.2％。
式I化合物作为杂质对照品测定不同批次依托咪酯乳状注射液的有关物质检测结果如下，色谱图见附图1。
批号 S20190802 S20190803 S20190804
结果 0.088％ 0.074％ 0.071％

Claims (10)

1.一种式I所示的化合物：
Figure FDA0002804269370000011
2.一种制备如权利要求1所示的式I化合物的方法，其特征在于，该方法是将式II化合物与丙酮缩甘油缩合得到式III化合物，式III化合物经酸水解得到式I依托咪酯新杂质，具体包括两个步骤：
Figure FDA0002804269370000012
步骤1：将式II化合物、丙酮缩甘油、缩合剂、缩合活化剂在溶剂中，室温搅拌反应，反应结束后加入水和乙酸乙酯萃取，得有机相，有机相先后用酸洗、碱洗、饱和食盐水洗涤，有机相减压浓缩至干，得到式III化合物；
步骤2：将式III化合物、溶剂、催化量的酸，加热反应，反应结束后，减压浓缩溶剂，经柱层析、分离得到式I化合物。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所用的缩合剂选自二环己基碳二酰亚胺、二异丙基碳二亚胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的一种或几种。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的缩合剂为1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的缩合活化剂选自4-二甲氨基吡啶、1-羟基苯并***、1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑、4-吡咯烷基吡啶的一种或几种，优选4-二甲氨基吡啶。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤1中溶剂选自二氯甲烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈中的一种或几种。
7.根据权利要求2所示的制备方法，其特征在于，所述的步骤1中缩合剂摩尔配比为依托咪酸钠盐摩尔配比的1.0～1.5倍，缩合活化剂摩尔配比为式II化合物的摩尔配比的0.25～0.5倍。
8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤2的催化量的酸选自盐酸、三氟乙酸、甲酸、对甲苯磺酸中的一种或几种，优选对甲苯磺酸。
9.根据权利要求2所示的制备方法，其特征在于，所述的步骤2中的催化量的酸的用量是式III化合物重量的0.2-0.5倍。
10.将权利要求1所要求的式I化合物作为杂质对照品在依托咪酯乳状注射液中的含量分析和质量控制当中的应用。
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