CN112409385A - 氮杂芳基化合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了氮杂芳基化合物、其药学上可接受的盐及其溶剂化物。本发明也提供了该类化合物的制备方法、含有该类化合物的组合物以及该类化合物用于制备治疗与EED蛋白和/或PRC2蛋白复合物作用机理相关疾病或障碍的药物用途。

Description

氮杂芳基化合物及其应用
技术领域
本发明涉及新颖的氮杂芳基化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体 或其溶剂化物及它们的同位素标记物。本发明也提供了该类化合物的制备方法、含有该类化 合物的组合物和作为治疗与EED蛋白和/或PRC2蛋白复合物作用机理相关疾病的药物用途。
背景技术
PcG(Polycomb Group)蛋白是一类重要的染色质修饰酶。它通过对染色质的修饰达到调控 基因的转录，从而对干细胞的生长、分化及长期的细胞记忆有重要作用。在哺乳动物细胞中， PcG蛋白主要分为两类转录抑制复合物，分别是PRC1(Polycomb RepressiveComplex 1)和 PRC2(Polycomb Repressive Complex 2)。其中，PRC2是通过对染色质中组蛋白3的27位赖 氨酸(H3K27)的甲基化修饰来抑制相关基因的表达。PRC2蛋白复合物主要由EZH2(Enhancer of Zeste Homolog 2)(或其非常类似的同源蛋白EZH1)，EED(Embryonicectoderm Development) 以及SUZ12(Suppressor of Zeste 12)等核心蛋白组成。其中，EZH2具有酶催化活性，通过SET (Su(var),E(Z)，and Trithorax)蛋白结构域能够把底物SAM(S-adenosyl-L-methionine)的 甲基转移到H3K27上，从而达到H3K27的一到三甲基化修饰。EZH2的酶催化活性也依赖 于PRC2其他组成部分，比如属于WD40重复结构蛋白家族的EED蛋白。EED与三甲基化 的H3K27Me3的结合作用一方面对EZH2的酶催化功能有很大的变构促进作用，另一方面也 能把PCR2复合物定位在需要修饰的染色质上。PRC2的功能异常，比如EZH2的过表达或功 能获得性突变，与临床上许多肿瘤疾病相关，包括肺癌，乳腺癌，直肠癌，***癌，膀胱 癌，胰腺癌，肉瘤以及淋巴癌等等。PRC2也与多种细胞免疫功能相关，比如EZH2参与调节 淋巴细胞活化，也能与糖酵解共同促进T细胞对肿瘤细胞的应答。因此，研发PRC2小分子 抑制剂有重要且广阔的药物开发价值。
围绕PRC2抑制剂的研发主要是开发EZH2抑制剂以及EED抑制剂两个策略。目前进入 临床的EZH2抑制剂有EPZ-6438(Epizyme，临床二期)，GSK2816126(GSK，临床一期)，以及CPI-1205(Constellation,临床一期)等等。尽管EZH2抑制剂研发有多个进入临床研究阶段， 但这些抑制剂都含有一个共同的2-吡啶酮的药效团。并且，在用已有EZH2抑制剂于临床治 疗中，已经开始出现二次突变。EED抑制剂对EZH2酶功能有变构抑制的作用，可以达到与 EZH2相同或类似的生物功能。而且一方面EED抑制剂很好的克服了EZH2的耐药性问题，另一方面EED抑制剂可以与EZH2抑制剂联用达到更好的协同作用效果，因此，开发新的 EED抑制剂具有非常重要的意义。
发明内容
本发明提供的氮杂芳基化合物是一类全新的EED抑制剂，表现出对肿瘤细胞很好的抑制 活性，具有广阔的药物开发前景。
本发明提供如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体 或其溶剂化物：
Figure BDA0002633742990000021
其中，
A为
Figure BDA0002633742990000022
R01、R02和R03分别独立地为氢或卤素(例如氟)；
n为0或1；
m为1或2；
X为C或N；
R1为双环结构且具有芳香性，优选
Figure BDA0002633742990000023
Figure BDA0002633742990000024
X1和X5独立地为C或N；
X2独立地为N或CR2；
X3独立地为N或CR3；
X4独立地为N或CR4；
X6独立地为CR6、N、NR6、O或S；
X7独立地为CR7、N、O或S；
X8独立地为CR8、N、O或S；
X9独立地为N或CR9；
R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地为H、卤素(例如 氟，氯或溴)、-CN、R5取代或未取代的氨基、R5取代或未取代的羟基、R5取代或未取代的 C1-4烷基(例如甲基)、R5取代或未取代的C1-4烷氧基、R5取代或未取代的C3-6的环烷基(例 如环丙基)、R5取代或未取代的C1-4卤代烷基(例如三氟甲基)、-(C＝O)R16、-CO2R16、 -C(＝O)NR16R17、-SO2R16、-SO2NR16R17、-POR16R17、R5取代或未取代的C3-6杂环烷基、或 C3-6杂螺环烷基；
R5独立地为C1-4烷氧基、-CN、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷氧基、C1-4烷基(例如 甲基)、C1-4卤代烷基(例如三氟甲基)、-NRa1Rb1、卤素、羟基、C3-6杂环烷基、C3-6杂环烷 基、被1、2或3个C1-4烷基取代的C3-6杂环烷基、被1、2或3个C3-6杂环烷基取代的C3-6杂环烷基、C6-18芳基、C1-15杂芳基、-C(＝O)NR16aR17a、-CO2R16a、-O(C＝O)R16a、-NH(C＝O)R16a或-(C＝O)R16a；Ra1和Rb1独立地为H、C1-4烷基、被1、2或3个-NRa2Rb2取代的C1-4烷基、 被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基或被1、2或3个羟基取代的C1-4烷氧基；Ra2和Rb2独立 地为H或C1-4烷基；每个R16a和每个R17a独立地为H、C1-4烷基或C3-6杂环烷基；
R5的个数为1、2、3、4、5或6；
R16和R17独立地为H、C1-4烷基(例如甲基)、C1-4卤代烷基(例如三氟甲基)或C3-6杂环烷基；
所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C3-6杂螺环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C1-15杂芳基中的 杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3、4、5或6个。
在一某些实施方案中，R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地优选为H、卤素、-CN、-OH、-NRaRb、C1-4烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4烷基、 C1-4卤代烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、被1、2或3个R5取代 的C1-4烷氧基、C3-6的杂环烷基、被1、2或3个R5取代的C3-6的杂环烷基、-(C＝O)R16、-CO2R16、 -C(＝O)NR16R17、-SO2R16、-SO2NR16R17、-POR16R17或C3-6杂螺环烷基；
其中，Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；R16和R17独立地为H、C14烷基、C14卤代烷基 或C3-6杂环烷基；
每个R5独立地为-OH、-CN、C1-4烷基、C1-4烷氧基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷 氧基、-NRa1Rb1、C3-6杂环烷基、被1、2或3个C1-4烷基取代的C3-6杂环烷基、被1、2或3 个C3-6杂环烷基取代的C3-6杂环烷基、C6-18芳基、C1-15杂芳基、-C(＝O)NR16aR17a、-CO2R16a、 -O(C＝O)R16a、-NH(C＝O)R16a或-(C＝O)R16a；Ra1和Rb1独立地为H、C1-4烷基、被1、2或3个 -NRa2Rb2取代的C1-4烷基或被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基；Ra2和Rb2独立地为H或C1-4烷基；每个R16a和R17a独立地为H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基或C3-6杂环烷基；
所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C3-6杂螺环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C1-15杂芳基中的 杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3、4、5或6个。
在某些实施方案中，R2优选为H、卤素、-CN、-NRaRb、C1-4烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、C3-6的杂环烷基、被1、2或3个R5取代的C3-6的杂环烷基、C3-6杂螺环烷基、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17或-NRaRb；
每个R16和R17独立地为H或C1-4烷基；
Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；
每个R5独立地为-OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷氧基、 -NRa1Rb1、C3-6杂环烷基、被1、2或3个C1-4烷基取代的C3-6杂环烷基、被1、2或3个C3-6杂环烷基取代的C3-6杂环烷基、或C1-15杂芳基；Ra1和Rb1独立地为H、C1-4烷基、被1、2 或3个-NRa2Rb2取代的C1-4烷基或被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基；Ra2和Rb2独立地为H 或C1-4烷基；
所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C3-6杂螺环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C1-15杂芳基中的 杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3、4、5或6个。
在某些实施方案中，R2进一步优选为H、-CH3、-CF3、-OCH3、
Figure BDA0002633742990000041
-N(CH3)2、
Figure BDA0002633742990000042
-CH2OCH2C(CH3)2OH、-CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002633742990000043
-CH2NHCH2C(CH3)2OH、
Figure BDA0002633742990000044
-CH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002633742990000045
-C(CH3)2OH、-CHF2、-CO2CH3、-CH2OH、-CON(CH3)2、-CH2N(CH3)2、 -CN或-Cl。
在某些实施方案中，R3优选为H、卤素、-CN、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基或 -C(＝O)NR16R17。R3进一步优选为H、-OCH3、-F、-CN、-Cl、-CH3、-CONH2、-CF3、-CONHCH3或-CON(CH3)2。
在某些实施方案中，R4优选为H、卤素或C1-4烷基；R4进一步优选为H、-F或-CH3。
在某些实施方案中，R6优选为H、卤素、-CN、C1-4烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4烷基、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17、-(C＝O)R16、SO2R16或-POR16R17；每个R16和每个R17独立 地为H、C1-4烷基或C3-6杂环烷基；每个R5独立地为-OH、-CN、-NRa1Rb1、C6-18芳基、 -C(＝O)NR16aR17a、-CO2R16a、-O(C＝O)R16a、-NH(C＝O)R16a、-(C＝O)R16a；Ra1和Rb1独立地为H 或C1-4烷基；每个R16a和R17a独立地为H、C1-4烷基或C3-6杂环烷基。
在某些实施方案中，R6进一步优选为H、-COOCH2CH3、-COOH、-CONH2、-CH3、-COCH3、
Figure BDA0002633742990000051
-CH2CH3、-F、-CN、-CH(CH3)2、-CH2CONH2、-CH2CH2OH、-CH2OH、-CH2NH2、 -CH2COOCH3、-CH2COOH、-CH2CON(CH3)2、-CH2CH2OCOCH3、-CH2NHCOCH3、-CON(CH3)2、 -CN、
Figure BDA0002633742990000052
-CONH2、-CH2CN、-SO2Me或-PO(CH3)2。
在某些实施方案中，R7优选为H、-OH、-NRaRb、C1-4烷基、被1、2或3个羟基取代的 C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-CO2R16或-C(＝O)NR16R17；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；R16和R17独立地为H、C1-4烷基或C1-4卤代烷基。R7进一步优选为H、-NH(CH3)、-N(CH3)2、-CH3、 -CF3、-OH、-CH2OH、-COOCH2CH3、-COOH、-CONH2、-CON(CH3)2或-NH2。
在某些实施方案中，R8优选为H或C1-4烷基。R8进一步优选为H。
在某些实施方案中，R9优选为H、卤素或C1-4烷基。R9进一步优选为H、-F、-Cl或-CH3。
在某些实施方案中，R10优选为H、卤素、C1-4烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4烷基； 每个R5独立地为-NRa1Rb1；Ra1和Rb1独立地为H或C1-4烷基。R10进一步优选为H、-CH3、 -CH2CH2NH2、-F或-Cl。
在某些实施方案中，R11优选为H、卤素或C1-4烷基；R11进一步优选为H、-CH3或-F。
在某些实施方案中，R12、R13、R14和R15优选为H。
在一优选实施方案中，R1为双环结构且具有芳香性，优选
Figure BDA0002633742990000053
Figure BDA0002633742990000061
其 余字母和基团定义均如本发明所定义。
在一优选实施方案中，所述如式(I)所示的化合物中，R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、 R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地为H、卤素(例如氟，氯或溴)、-CN、R5取代或未取 代的氨基、R5取代或未取代的羟基、R5取代或未取代的C1-4烷基(例如甲基)、R5取代或未 取代的C3-6的环烷基(例如环丙基)、R5取代或未取代的C1-4卤代烷基(例如三氟甲基)、 -(C＝O)R16、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17、-SO2R16或-SO2NR16R17；其余字母和基团定义均如本 发明所定义。
在一优选实施方案中，所述如式(I)所示的化合物中，R5独立地为C1-4烷氧基、C1-4烷 基(例如甲基)、C1-4卤代烷基(例如三氟甲基)、氨基、N保护基团保护的氨基(所述的保护基团可以为
Figure BDA0002633742990000062
R5a为C1-4烷基或C1-4烷氧基；例如
Figure BDA0002633742990000063
可以为叔丁氧羰基)、氟 或羟基；其余字母和基团定义均如本发明所定义。
在一优选实施方案中，所述如式(I)所示的化合物中，R16和R17独立地为H、C1-4烷基(例如甲基)或C1-4卤代烷基(例如三氟甲基)；其余字母和基团定义均如本发明所定义。
本发明中，“R5取代或未取代的氨基”优选-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基。
在某些实施方案中，所述如式(I)所示的化合物中，n为1，其余字母和基团定义均如 本发明所定义。
在某些实施方案中，所述如式(I)所示的化合物中，X为N，其余字母和基团定义均如 本发明所定义。
在某些实施方案中，所述如式(I)所示的化合物中，基团
Figure BDA0002633742990000064
为
Figure BDA0002633742990000065
Figure BDA0002633742990000066
其余字母和基团定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，所述如式(I)所示的化合物为如式I-A所示的化合物，
Figure BDA0002633742990000071
在某些实施方案中，所述A为：
Figure BDA0002633742990000072
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000073
可为
Figure BDA0002633742990000074
Figure BDA0002633742990000075
X1、X2、X3、X4、X6、X7和X8的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000076
可为
Figure BDA0002633742990000077
其中，X6独立地为CR6或N；X7独立地为CR7或N；X2、X3、X4、R6和R7的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000078
可为
Figure BDA0002633742990000079
X1、 X2、X3、X4、X6、X7和X8的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900000710
可为
Figure BDA00026337429900000711
X1、X2、X3、X4、X6和X7的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，所述R1为以下任一结构：
Figure BDA0002633742990000081
或者，R1为以下任一结构：
Figure BDA0002633742990000091
其中，X2、X3、X4、X6、X7、X8、R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10和R11的定义如上 所述。
在一优选实施方案中，R1为
Figure BDA0002633742990000092
Figure BDA0002633742990000101
Figure BDA0002633742990000111
Figure BDA0002633742990000121
Figure BDA0002633742990000131
Figure BDA0002633742990000141
Figure BDA0002633742990000151
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000152
优选
Figure BDA0002633742990000153
Figure BDA0002633742990000154
X2、X3、X4、R6和R7的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000155
优选
Figure BDA0002633742990000156
其中，X3为N或CR3；R2、R3和R7的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000157
中，R2的定义优选如下，其余字母和基团定义均 如本发明所定义：
R2为H、C1-4烷基、被1、2或3个R5-2-1取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、 C3-6杂环烷基、被1、2或3个C1-4烷基取代的C3-6杂环烷基、C3-6杂螺环烷基或-NRaRb；
Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；
每个R5-2-1独立地为-OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷氧基、-NRa1Rb1、C3-6杂环烷基或被1、2或3个R5-2-2取代的C3-6杂环烷基；Ra1和Rb1独立地为H、 C1-4烷基、被1、2或3个-NRa2Rb2取代的C1-4烷基或被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基； R5-2-2为C1-4烷基或C3-6杂环烷基；Ra2和Rb2独立地为H或C1-4烷基；
其中，所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所 述C3-6杂螺环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；
优选地，每个R5-2-1独立地为-OCH2C(CH3)2OH、-N(CH3)2、
Figure BDA0002633742990000161
-NHCH2C(CH3)2OH、
Figure BDA0002633742990000162
-N(CH3)CH2CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002633742990000163
或-OH；
进一步优选地，R2为H、-CH3、-CF3、-OCH3、
Figure BDA0002633742990000164
-N(CH3)2、
Figure BDA0002633742990000165
-CH2OCH2C(CH3)2OH、-CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002633742990000166
-CH2NHCH2C(CH3)2OH、
Figure BDA0002633742990000167
Figure BDA0002633742990000168
-CH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)2、
Figure BDA0002633742990000169
Figure BDA00026337429900001610
-C(CH3)2OH或-CHF2。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900001611
中，当X3为CR3时，R3的定义优选如下，其余字母和基团定义均如本发明所定义：
R3为H、卤素、C1-4烷氧基或-CN；进一步优选地，R3为H、-OCH3、-F或-CN。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900001612
中，R7的定义优选如下，其余字母和基团定义均 如本发明所定义：
R7为H、C1-4烷基或-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；进一步优选地，R7为H、 -NH(CH3)、-N(CH3)2或-CH3。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900001613
优选
Figure BDA00026337429900001614
Figure BDA0002633742990000171
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000172
优选
Figure BDA0002633742990000173
其中，R2和R3、R6和R7的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000181
中，R2的定义优选如下，其余字母和基团定义均如 本发明所定义：
R2为H、-CN、C1-4烷基、被1、2或3个R5-2-3取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17或-NRaRb；其中，每个R16和R17独立地为H或C1-4烷基； 每个R5-2-3独立地为-OH或-NRa1Rb1；Ra1和Rb1独立地为H或C1-4烷基；每个R5-2-3优选-OH 或-N(CH3)2；
进一步优选地，R2为H、-CH3、-CO2CH3、-CH2OH、-CON(CH3)2、-CF3、-CH2N(CH3)2、 -OCH3、-N(CH3)2、
Figure BDA0002633742990000182
或-CN。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000183
中，R3的定义优选如下，其余字母和基团定义均如 本发明所定义：
R3为H、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基或-C(＝O)NR16R17；R16和R17独立地为H或C1-4烷基；进一步优选地，R3为H、-F、-Cl、-CH3、-OCH3、-CONH2、-CONHCH3或-CON(CH3)2。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000184
中，R6的定义优选如下，其余字母和基团定义均如 本发明所定义：
R6为H、卤素、-CN、C1-4烷基、被1、2或3个R5-6-1取代的C1-4烷基、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17、 -(C＝O)R16-1、-SO2R16或-POR16R17；每个R16和每个R17独立地为H或C1-4烷基；R16-1为H、C1-4烷基或C3-6杂环烷基；每个R5-6-1独立地为C6-18芳基、-C(＝O)NR16aR17a、-OH、-CN、-CO2R16a、-O(C＝O)R16a、-NH(C＝O)R16a、-(C＝O)R16a1或-NRa1Rb1；Ra1和Rb1独立地为H或C1-4烷基；每 个R16a和每个R17a独立地为H或C1-4烷基；R16a1为C3-C6杂环烷基；R16-1和R16a1中，所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个(例如
Figure BDA0002633742990000191
)；
进一步优选地，R6为H、-COOCH2CH3、-COOH、-CONH2、-CH3、-COCH3、
Figure BDA0002633742990000192
-CH2CH3、-F、-CN、-CH(CH3)2、-CH2CONH2、-CH2CH2OH、-CH2OH、-CH2NH2、-CH2COOCH3、 -CH2COOH、-CH2CON(CH3)2、-CH2CH2OCOCH3、-CH2NHCOCH3、-CON(CH3)2、-CN、
Figure BDA0002633742990000193
-CONH2、-CH2CN、-SO2Me或-PO(CH3)2。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000194
中，R7的定义优选如下，其余字母和基团定义均如 本发明所定义：
R7为H、C1-4烷基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-OH、-CO2R16或-C(＝O)NR16R17；R16和R17独立地为H或C1-4烷基；
进一步优选地，R7为H、-CF3、-CH3、-OH、-CH2OH、-COOCH2CH3、-COOH、-CONH2或-CON(CH3)2。
在某些实施方案中，
Figure BDA0002633742990000195
优选
Figure BDA0002633742990000196
Figure BDA0002633742990000197
Figure BDA0002633742990000201
Figure BDA0002633742990000211
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000212
优选
Figure BDA0002633742990000213
其中，R2和R6的定义均如本发 明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000214
中，R2的定义优选如下，其余字母和基团定义均如 本发明所定义：
R2为H、卤素、C1-4烷基或-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；进一步优选地， R2为H、-Cl、-CH3或-N(CH3)2。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000215
中，R6的定义优选如下，其余字母和基团定义均如 本发明所定义：
R6为H或C1-4烷基；进一步优选地，R6为H或-CH3。
在某些实施方案中，
Figure BDA0002633742990000221
优选
Figure BDA0002633742990000222
Figure BDA0002633742990000223
在某些实施方案中，
Figure BDA0002633742990000224
优选
Figure BDA0002633742990000225
R2为C1-4烷基；例如
Figure BDA0002633742990000226
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000227
优选
Figure BDA0002633742990000228
其中，X6为N或CH；R7为H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基或-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000229
中，R7为H、-CH3、-NH2或-CF3。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900002210
优选
Figure BDA00026337429900002211
Figure BDA00026337429900002212
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900002213
优选
Figure BDA00026337429900002214
X6为NR6、O或S；R6为C1-4烷基；R7为H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基或-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000231
中，X6为-NCH3、O或S。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000232
中，R7为H、-CH3、-NH2或-CF3。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000233
优选
Figure BDA0002633742990000234
Figure BDA0002633742990000235
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000236
优选
Figure BDA0002633742990000237
R3为H或C1-4卤代烷基；例如
Figure BDA0002633742990000238
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000239
优选
Figure BDA00026337429900002310
X8为CR8或N；R8为H或C1-4烷 基；例如
Figure BDA00026337429900002311
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000241
优选
Figure BDA0002633742990000242
X2、X3、X4、R6和R7的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000243
优选
Figure BDA0002633742990000244
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000245
优选
Figure BDA0002633742990000246
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000247
优选
Figure BDA0002633742990000248
Figure BDA0002633742990000249
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900002410
优选
Figure BDA00026337429900002411
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900002412
优选
Figure BDA00026337429900002413
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900002414
优选
Figure BDA00026337429900002415
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000251
优选
Figure BDA0002633742990000252
例如
Figure BDA0002633742990000253
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000254
优选
Figure BDA0002633742990000255
例如
Figure BDA0002633742990000256
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000257
优选
Figure BDA0002633742990000258
进一步优选
Figure BDA0002633742990000259
R10和R11独立地为H或卤素(例如F)；例如
Figure BDA00026337429900002510
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900002511
优选
Figure BDA00026337429900002512
Figure BDA00026337429900002513
其中，X2、X3、X4、X9、R10和R11的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900002514
优选
Figure BDA00026337429900002515
其中，R2、R4、R9、 R10和R11的定义均如本发明所定义。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA00026337429900002516
中，R2的定义优选如下，其余字母和基团定 义均如本发明所定义：
R2为H或卤素；进一步优选地；R2为H或-F。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000261
中，R4的定义优选如下，其余字母和基团定 义均如本发明所定义：
R4为H、卤素或C1-4烷基；进一步优选地；R4为H、-F或-CH3。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000262
中，R9的定义优选如下，其余字母和基团定 义均如本发明所定义：
R9为H、卤素或C1-4烷基；进一步优选地；R9为H、-F、-Cl或-CH3。
在某些实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000263
中，R10的定义优选如下，其余字母和基团定 义均如本发明所定义：
R10为H、C1-4烷基、被1、2或3个氨基取代的C1-4烷基或卤素；进一步优选地，R10为H、-CH3、-CH2CH2NH2、-F或-Cl。
在一优选方案中，基团
Figure BDA0002633742990000264
中，R11的定义优选如下，其余字母和基团定义 均如本发明所定义：
R11为H、C1-4烷基或卤素；进一步优选地，R11为H、-CH3或-F。
在一优选方案中，基团
Figure BDA0002633742990000265
优选
Figure BDA0002633742990000266
Figure BDA0002633742990000267
Figure BDA0002633742990000271
在一优选实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000272
优选
Figure BDA0002633742990000273
R11为H或C1-4烷基(例 如-CH3)；例如
Figure BDA0002633742990000274
在一优选实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000275
优选
Figure BDA0002633742990000276
R11为H或C1-4烷 基(例如-CH3)；例如
Figure BDA0002633742990000277
在一优选实施方案中，基团
Figure BDA0002633742990000278
优选
Figure BDA0002633742990000279
在一优选实施方案中，所述R1为以下任一结构：
Figure BDA0002633742990000281
Figure BDA0002633742990000282
其中，各字母和基团 的定义均如本发明所定义。
在一优选实施方案中，所述R1为以下任一结构：
Figure BDA0002633742990000283
Figure BDA0002633742990000291
其中，各字母和基团的定义均如本发明所定义。
在另一优选例中，如式(I)所示的化合物为如式(Ia-1)、(Ia-2)、(Ia-3)、(Ia-4)、(Ia-5) 或(Ia-6)所示的化合物，
Figure BDA0002633742990000292
其中R1的定义如上所述。
在另一优选例中，如式(I)所示的化合物为如式(Ia-7)、(Ia-8)、(Ia-9)、(Ia-10)或 (Ia-11)所示的化合物，
Figure BDA0002633742990000293
Figure BDA0002633742990000301
其中，X3、R2、R3、R4、R6、R7、R9、R10和R11的定义如上所述。
在另一优选例中，如式(I)所示的化合物为如式(Ib)或(Ic)所示的化合物：
Figure BDA0002633742990000302
其中，X2、X3、X4、R6、R7和A的定义均如本发明所定义。
在进一步优选例中，所述如式(I)所述的的化合物选自下列表1所示的化合物：
表1
Figure BDA0002633742990000303
Figure BDA0002633742990000311
Figure BDA0002633742990000321
Figure BDA0002633742990000331
Figure BDA0002633742990000341
Figure BDA0002633742990000351
Figure BDA0002633742990000361
Figure BDA0002633742990000371
Figure BDA0002633742990000381
Figure BDA0002633742990000391
Figure BDA0002633742990000401
Figure BDA0002633742990000411
Figure BDA0002633742990000421
Figure BDA0002633742990000431
Figure BDA0002633742990000441
Figure BDA0002633742990000451
Figure BDA0002633742990000461
本发明还提供所述如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体 异构体或其溶剂化物的同位素标记化合物。所述同位素标记化合物中所述同位素选自2H、3H、 11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl和125I。式(I)化合物中能够被同位素标记的 原子包括但不局限于氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯和碘等，它们可分别被同位素2H、3H、11C、 13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl和125I等代替。
本发明还提供所述如式(I)所示的化合物的制备方法，其包含如下步骤：
将卤代中间体化合物B0进行偶联反应后得到如式(I)所示的化合物，
Figure BDA0002633742990000471
其中，W代表卤素，优选Br；A、R1、X、n的定义如上所述。
本发明中，将卤代中间体B0与中间体E0进行偶联反应得到如式(I)所示的化合物；
Figure BDA0002633742990000472
其中，W代表卤素，优选Br；Rx为-B(OH)2或
Figure BDA0002633742990000473
A、R1、X、n的定义如上所述。
其中一优选例中，将卤代中间体化合物B进行偶联反应后得到如式I-A所示的化合物，反 应方程式如下：
Figure BDA0002633742990000474
其中，W代表卤素，优选Br；A、R1的定义如上所述。
其中一优选例中，将卤代中间体化合物B与中间体E0进行如下所示的偶联反应后得到如 式I-A所示的化合物；
Figure BDA0002633742990000475
其中，W代表卤素，优选Br；Rx为-B(OH)2或
Figure BDA0002633742990000476
A、R1的定义如上所述。
本发明还提供如式(Ib)所示的化合物的制备方法，其包含如下步骤：中间体B-1进行 如下所示的关环反应后得到如式(Ib)所示的化合物；
Figure BDA0002633742990000481
其中，X2、X3、X4、R6、R7和A的定义均如本发明所定义。
所述如式(Ib)所示的化合物的制备方法还可进一步包含如下步骤：将卤代中间体化合 物B进行偶联反应后得到中间体B-1：
Figure BDA0002633742990000482
其中，W代表卤素，优选Br；Rx为-B(OH)2或
Figure BDA0002633742990000483
A、X2、X3和X4的定义如本 发明所定义。
本发明还提供如式(Ic)所示的化合物的制备方法，包含如下步骤：将卤代中间体化合物 B与中间体E01进行如下所示的偶联反应后得到如式(Ic)所示的化合物；
Figure BDA0002633742990000484
其中，W代表卤素，优选Br；Rx为-B(OH)2或
Figure BDA0002633742990000485
A、R1的定义如上所述。
所述如式(Ic)所示的化合物的制备方法，其还可进一步包含如下步骤制备中间体E01；
Figure BDA0002633742990000491
其中，W代表卤素，优选Br；Rx为-B(OH)2或
Figure BDA0002633742990000492
X2、X3、X4和R7的定义均如 本发明所定义。
本发明还提供一种中间体化合物C1-7、C1-a或C1-b的制备方法，包括以下步骤：
化合物C1-1与1,2二卤代乙烷(例如1,2二溴乙烷)反应得到化合物C1-2，C1-2经过消除反应后得到化合物C1-3，C1-3与对甲苯磺酰肼缩合得到磺酰腙C1-4，C1-4关呋喃并三元环反应得到化合物C1-5，C1-5的溴原子催化条件下被氰基取代得到化合物C1-6，氰基还原成胺基并原位Boc酸酐保护得到C1-7；
和/或，进一步，C1-7经过手性SFC分离得到C1-7 a和C1-7b，C1-7 a和C1-7b分别脱去保护基得到C1-a和C1-b。
Figure BDA0002633742990000501
其中Z为卤素(例如Cl、Br或I)，优选Br。
本发明还提供一种中间体化合物B的制备方法，包括以下步骤：
化合物D-1和水合肼反应得到化合物D-2，化合物D-2与原甲酸三甲酯在催化剂(例如 三氟乙酸)作用下关环得到中间体D，D与中间体C反应得到中间体B，反应方程式如下：
Figure BDA0002633742990000502
其中，W、A的定义如上所述。
本发明还提供中间体化合物：
Figure BDA0002633742990000511
其中，W代表卤素(例如Cl、Br或I)。
本发明所涉及到的溶剂例如可选自：甲醇、乙醇、异丙醇、甲苯、二甲苯、氯苯、水、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、二氧六环、DMF、乙腈、DMSO、NMP、THF 或其组合；例如选自二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、二氧六环、DMF、乙腈、DMSO、NMP、 THF或其组合。
本发明所涉及到的碱可包括有机碱和无机碱。
本发明所涉及到的有机碱例如可选自：TEA、DIPEA或其组合。
本发明所涉及到的无机碱例如可选自：氢化钠、甲醇钠、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、叔 丁醇钾、叔丁醇钠、叔丁醇锂、LiHMDS、LDA、丁基锂、氢氧化钾、醋酸钾、氢化铝锂或 其组合；例如选自氢化钠、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、叔丁醇钾、叔丁醇钠、LiHMDS、LDA、 丁基锂或其组合。
本发明所述的如式(I)所示化合物的同位素标记化合物可通过与未标记化合物类似的合 成方法来制备，所不同的是把未标记的起始原料和/或试剂换成同位素标记的起始原料和/或试 剂。
本发明还提供了一种药物组合物，其包含如上所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可 接受的盐、水合物、前药、立体异构体、其溶剂化物或它们的同位素标记化合物以及药学上 可接受的辅料。所述药学上可接受的辅料可以为稀释剂、吸收剂、润湿剂、粘合剂、崩解剂 和润滑剂中的一种或多种。
本发明还提供了如上所述的式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、 立体异构体、其溶剂化物或它们的同位素标记化合物，或如上所述的药物组合物在制备药物 中的用途。所述的药物优选治疗癌症的药物。
本发明还提供了如上所述的式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、 立体异构体、其溶剂化物或它们的同位素标记化合物，或如上所述的药物组合物在制备治疗 与EED蛋白和/或PRC2蛋白复合物作用机理相关的癌症药物方面的用途。
优选地，所述癌症包括但不局限于扩散大B细胞淋巴癌、滤泡性淋巴瘤、非霍奇金森淋 巴瘤等淋巴癌、白血病、多发性骨髓瘤、间皮瘤、胃癌、恶性横纹肌样瘤、肝癌、***癌、 乳腺癌、脑瘤包括神经母细胞瘤、胶质瘤、胶质母细胞瘤和星形细胞瘤、***、结肠癌、 黑色素瘤、子宫内膜癌、食管癌、头颈癌、肺癌、鼻咽癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、甲状旁腺肿瘤、子宫肿瘤和软组织肉瘤等等。
优选地，所述化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、其溶剂化物 或它们的同位素标记化合物与其他药物联合使用；更优选地，所述其他药物选自抗癌药、肿 瘤免疫药物、抗过敏药、止吐药、镇痛药或细胞保护药物。
本发明还提供了一种药物制剂，其包含如上所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可 接受的盐、水合物、前药、立体异构体、其溶剂化物或它们的同位素标记化合物，或如上所 述的药物组合物。所述药物制剂优选为片剂、胶囊(如持续释放或定时释放的胶囊)、药丸、 粉末、颗粒(如小颗粒)、酏剂、酊剂、悬浮液(如纳米混悬液、微悬浮液)和喷雾干燥的分 散体等形式的悬浮物、糖浆、乳液、溶液等形式。所述药物制剂优选的给药方式为口服、舌 下含服、包括皮下注射、静脉注射、肌肉注射、胸骨内注射、注入等形式的注射、鼻部服用(比如鼻膜吸入)、局部表面(如乳霜和药膏)给药、直肠给药(如栓剂)等等方式。本发明 公开的化合物可以单独服用也可以与适当的药物载体一起服用。
本发明还提供了前述的药物制剂可配方成适当的药物剂量以方便并控制药物的服用量。 本发明公开的化合物的剂量方案根据具体的因素有所不同，比如药效学及服用的方式、服用 对象、性别、年龄、健康状况以及服药对象的体重、病情特征、其它同时服药状况、服药的 频率、肝肾功能以及想达到的效果等等。本发明公开的化合物可以每天单剂量的服用，也可 以总剂量分多次服用(比如每天两至四次)。
本发明还提供了一种治疗癌症的方法，其包括向需要此治疗的患者给予治疗有效量的如 上所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体或其溶 剂化物或它们的同位素标记化合物，或如上所述的药物组合物。所述的癌症包括但不局限于 扩散大B细胞淋巴癌、滤泡性淋巴瘤、非霍奇金森淋巴瘤等淋巴癌、白血病、多发性骨髓瘤、 间皮瘤、胃癌、恶性横纹肌样瘤、肝癌、***癌、乳腺癌、脑瘤包括神经母细胞瘤、胶质 瘤、胶质母细胞瘤和星形细胞瘤、***、结肠癌、黑色素瘤、子宫内膜癌、食管癌、头颈 癌、肺癌、鼻咽癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、甲状旁腺肿瘤、子宫肿瘤和软组织肉瘤等等。
本发明还提供了式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构 体或其溶剂化物或前述同位素标记化合物与其他药物联合使用，所述其他药物选自：抗癌药、 肿瘤免疫药物、抗过敏药、止吐药、镇痛药、细胞保护药物等等，一起联用具有更好的效果。
本发明中，所述的癌症优选与EED蛋白和/或PRC2蛋白复合物相关的癌症。
本发明还提供了一种抑制EED蛋白和/或PRC2蛋白复合物活性的方法，其包括给予受试 者治疗有效量的如上所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、 立体异构体或其溶剂化物或它们的同位素标记化合物，或如上所述的药物组合物。
本发明还提供了一种阻断EED与H3K27(例如H3K27me3)结合的方法，其包括给予受试者治疗有效量的如上所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体或其溶剂化物或它们的同位素标记化合物，或如上所述的药物组合物。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述 的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再 一一累述。
术语说明
除非另外定义，否则本文中所用的全部技术与科学术语均具有如本发明所属领域的普通 技术人员通常理解的相同含义。
如本文所用，在提到具体列举的数值中使用时，术语“约”意指该值可以从列举的值变动 不多于1％。例如，如本文所用，表述“约100”包括99和101和之间的全部值(例如，99.1、 99.2、99.3、99.4等)。
如本文所用，术语“含有”或“包括(包含)”可以是开放式、半封闭式和封闭式的。换言之， 所述术语也包括“基本上由…构成”、或“由…构成”。
基团定义
可在参考文献(包括Carey and Sundberg"ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4THED." Vols.A(2000)and B(2001),Plenum Press,New York)中找到对标准化学术语的定义。除非另有 说明，否则采用本领域技术范围内的常规方法，如质谱、NMR、IR和UV/VIS光谱法和药理 学方法。除非提出具体定义，否则本文在分析化学、有机合成化学以及药物和药物化学的有 关描述中采用的术语是本领域已知的。可在化学合成、化学分析、药物制备、制剂和递送， 以及对患者的治疗中使用标准技术。例如，可利用厂商对试剂盒的使用说明，或者按照本领 域公知的方式或本发明的说明来实施反应和进行纯化。通常可根据本说明书中引用和讨论的 多个概要性和较具体的文献中的描述，按照本领域熟知的常规方法实施上述技术和方法。在 本说明书中，可由本领域技术人员选择基团及其取代基以提供稳定的结构部分和化合物。
当通过从左向右书写的常规化学式描述取代基时，该取代基也同样包括从右向左书写结 构式时所得到的在化学上等同的取代基。举例而言，-CH2O-等同于-OCH2-。
本文所用的章节标题仅用于组织文章的目的，而不应被解释为对所述主题的限制。本申 请中引用的所有文献或文献部分包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍、操作手册和论 文，均通过引用方式整体并入本文。
在本文中定义的某些化学基团前面通过简化符号来表示该基团中存在的碳原子总数。例 如，C1-6烷基是指具有总共1至6个碳原子(如1,2,3,4,5,6个碳原子)的如下文所定义的烷基。 简化符号中的碳原子总数不包括可能存在于所述基团的取代基中的碳。
除前述以外，当用于本申请的说明书及权利要求书中时，除非另外特别指明，否则以下 术语具有如下所示的含义。
在本申请中，术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
“羟基”是指-OH基团。
“羰基”是指-C(＝O)-基团。当
Figure BDA0002633742990000541
中的R为羰基时，
Figure BDA0002633742990000542
为
Figure BDA0002633742990000543
“氰基”是指-CN。
“氨基”是指-NH2。
“取代的氨基”是指被一个或两个如下文所定义的烷基、烷基羰基、芳烷基、杂芳烷基取 代的氨基，例如，单烷基氨基、二烷基氨基、烷基酰氨基、芳烷基氨基、杂芳烷基氨基。
“羧基”是指-COOH。
在本申请中，作为基团或是其它基团的一部分(例如用在卤素取代的烷基等基团中)，术 语“烷基”是指完全饱和的直链或支链的烃链基，仅由碳原子和氢原子组成、具有例如1至12 个(优选1至8个，更优选1至6个，更优选1至4个)碳原子，且通过单键与分子的其余部 分连接，例如包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、辛基、壬基和癸基等。
在本申请中，作为基团或是其它基团的一部分，术语“卤代烷基”是指烷基(如本发明中 所定义)中的一个或多个氢原子被卤素(如本发明中所定义)所取代，卤素的个数可以为一 个或多个；当卤素的个数为多个时，卤素相同或不同。例如，氟代烷基是指烷基被一个或多 个氟取代。卤代烷基的例子包括但不限于三氟甲基和二氟甲基。
本申请中，优选地，“杂环烷基”中碳原子数为3、4、5或6个，杂原子选自N、O和S， 杂原子数为1、2、3或4个，进一步优选地，碳原子数为4或5个，杂原子选自N和O，杂 原子数为1或2个；例如
Figure BDA0002633742990000551
本申请中，优选地，“杂螺环烷基”中碳原子数为4、5或6个，杂原子选自N、O和S， 杂原子数为1、2、3或4个，进一步优选地，杂原子选自N和O，杂原子数为1或2个；例 如
Figure BDA0002633742990000552
在本申请中，作为基团或是其它基团的一部分，术语“环烃基”意指仅由碳原子和氢原子 组成的稳定的非芳香族单环或多环烃基，其可包括稠合环体系、桥环体系或螺环体系，具有 3至15个碳原子，优选具有3至10个碳原子，更优选具有3至8个碳原子，且其为饱和或 不饱和并可经由任何适宜的碳原子通过单键与分子的其余部分连接。除非本说明书中另外特 别指明，环烃基中的碳原子可以任选地被氧化。环烃基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、 环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、1H-茚基、2,3-二氢 化茚基、1,2,3,4-四氢-萘基、5,6,7,8-四氢-萘基、8,9-二氢-7H-苯并环庚烯-6-基、6,7,8,9-四氢-5H- 苯并环庚烯基、5,6,7,8,9,10-六氢-苯并环辛烯基、芴基、二环[2.2.1]庚基、7,7-二甲基-二环[2.2.1] 庚基、二环[2.2.1]庚烯基、二环[2.2.2]辛基、二环[3.1.1]庚基、二环[3.2.1]辛基、二环[2.2.2] 辛烯基、二环[3.2.1]辛烯基、金刚烷基、八氢-4,7-亚甲基-1H-茚基和八氢-2,5-亚甲基-并环戊 二烯基等。
在本申请中，作为基团或是其它基团的一部分，术语“环烷基”意指饱和的环烃基。
在本申请中，作为基团或是其它基团的一部分，术语“环烯基”意指具有至少一个双键(如 碳碳双键)的环烃基。环烯基可以通过其中的双键的原子与分子的其余部分连接。
在本申请中，作为基团或是其它基团的一部分，术语“杂环基”意指由2至14个碳原子以 及1至6个选自氮、磷、氧和硫的杂原子组成的稳定的3元至20元非芳香族环状基团。除非 本说明书中另外特别指明，否则杂环基可以为单环、双环、三环或更多环的环体系，其可包 括稠合环体系、桥环体系或螺环体系；其杂环基中的氮、碳或硫原子可任选地被氧化；氮原 子可任选地被季铵化；且杂环基可为部分或完全饱和。杂环基可以经由碳原子或者杂原子并 通过单键与分子其余部分连接。在包含稠环的杂环基中，一个或多个环可以是下文所定义的 芳基或杂芳基，条件是与分子其余部分的连接点为非芳香族环原子。就本发明的目的而言， 杂环基优选包含1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的4元至11元非芳香性单环、双环、 桥环或螺环基团，更优选包含1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的4元至8元非芳香 性单环、双环、桥环或螺环基团。杂环基的实例包括但不限于：吡咯烷基、吗啉基、哌嗪基、 高哌嗪基、哌啶基、硫代吗啉基、2,7-二氮杂-螺[3.5]壬烷-7-基、2-氧杂-6-氮杂-螺[3.3]庚烷-6- 基、2,5-二氮杂-双环[2.2.1]庚烷-2-基、氮杂环丁烷基、吡喃基、四氢吡喃基、噻喃基、四氢 呋喃基、噁嗪基、二氧环戊基、四氢异喹啉基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、喹嗪 基、噻唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、二氢吲哚基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、吡咯 烷基、吡唑烷基、邻苯二甲酰亚氨基等。
在本申请中，作为基团或是其它基团的一部分，术语“芳基”意指具有6至18个碳原子(优 选具有6至10个碳原子)的共轭烃环体系基团。就本发明的目的而言，芳基可以为单环、双 环、三环或更多环的环体系，还可以与上文所定义的环烷基或杂环基稠合，条件是芳基经由 芳香环上的原子通过单键与分子的其余部分连接。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、蒽 基、菲基、芴基、2,3-二氢-1H-异吲哚基、2-苯并噁唑啉酮、2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮-7-基 等。
在本申请中，术语“芳基烷基”是指被上文所定义的芳基所取代的上文所定义的烷基。
在本申请中，作为基团或是其它基团的一部分，术语“杂芳基”意指环内具有1至15个碳 原子(优选具有1至10个碳原子)和1至6个选自氮、氧和硫的杂原子的5元至16元共轭环 系基团。除非本说明书中另外特别指明，否则杂芳基可为单环、双环、三环或更多环的环体 系，还可以与上文所定义的环烷基或杂环基稠合，条件是杂芳基经由芳香环上的原子通过单 键与分子的其余部分连接。杂芳基中的氮、碳或硫原子可任选地被氧化；氮原子可任选地被 季铵化。就本发明的目的而言，杂芳基优选包含1至5个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的 5元至12元芳香性基团，更优选包含1至4个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的5元至10 元芳香性基团或者包含1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的5元至6元芳香性基团(例如杂芳基为C1-C5的杂芳基，其中杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4)。杂芳基的 实例包括但不限于噻吩基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、噁二唑基、异噁唑基、吡啶 基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、吲哚基、呋喃基、吡咯基、*** 基、四唑基、三嗪基、吲嗪基、异吲哚基、吲唑基、异吲唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、 二氮萘基、萘啶基、喹噁啉基、蝶啶基、咔唑基、咔啉基、菲啶基、菲咯啉基、吖啶基、吩 嗪基、异噻唑基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、噁***基、噌啉基、喹唑啉基、苯硫基、中氮 茚基、邻二氮杂菲基、异噁唑基、吩噁嗪基、吩噻嗪基、4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩基、萘并吡 啶基、[1,2,4]***并[4,3-b]哒嗪、[1,2,4]***并[4,3-a]吡嗪、[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶、[1,2,4] ***并[4,3-a]吡啶、咪唑并[1,2-a]吡啶、咪唑并[1,2-b]哒嗪、咪唑并[1,2-a]吡嗪等。
在本申请中，“任选地”表示随后描述的事件或状况可能发生也可能不发生，且该描述同 时包括该事件或状况发生和不发生的情况。例如，“任选地被取代的芳基”表示芳基被取代或 未被取代，且该描述同时包括被取代的芳基与未被取代的芳基。本发明权利要求书和说明书 部分所述的“任选地”的取代基选自烷基、烯基、炔基、卤素、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔 基、氰基、硝基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的环烃基、任选取代的杂 环烃基。
在本发明中，术语“取代”或“取代基”是指一个或多个氢原子被指定的基团所代替。当没 有指明取代基的个数时，取代基可以为一个或多个；当没有指明取代位置时，取代可以在任 何位置，但是只有形成一个稳定的或者是化学意义上可行的化学物才是被允许的。
当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的 定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0-2个R所取代，则所述基团可以任选地至 多被两个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。例如，在
Figure BDA0002633742990000571
中，当n为 2时，表示苯环被2个R取代，并且每个R都有独立的选项，即2个R可以相同，也可以不 同。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被 允许的。
本文所用术语“部分”、“结构部分”、“化学部分”、“基团”、“化学基团”是指分子中的特定 片段或官能团。化学部分通常被认为是嵌入或附加到分子上的化学实体。
当本发明的化合物中含有烯双键时，除非另有说明，否则本发明的化合物旨在包含E-和 Z-几何异构体。
“互变异构体”是指质子从分子的一个原子转移至相同分子的另一个原子而形成的异构体。 本发明的化合物的所有互变异构形式也将包含在本发明的范围内。
本发明的化合物或其药学上可接受的盐可能含有一个或多个手性碳原子，且因此可产生 对映异构体、非对映异构体及其它立体异构形式。每个手性碳原子可以基于立体化学而被定 义为(R)-或(S)-。本发明旨在包括所有可能的异构体，以及其外消旋体和光学纯形式。本发明 的化合物的制备可以选择外消旋体、非对映异构体或对映异构体作为原料或中间体。光学活 性的异构体可以使用手性合成子或手性试剂来制备，或者使用常规技术进行拆分，例如采用 结晶以及手性色谱等方法。本发明的化合物的立体异构体可有为(R)-或(S)-异构体。
制备/分离个别异构体的常规技术包括由合适的光学纯前体的手性合成，或者使用例如手 性高效液相色谱法拆分外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)，例如可参见Gerald Gübitz and Martin G.Schmid(Eds.),Chiral Separations,Methods andProtocols,Methods in Molecular Biology,Vol.243,2004；A.M.Stalcup,ChiralSeparations,Annu.Rev.Anal.Chem.3:341-63,2010；Fumiss et al.(eds.),VOGEL’SENCYCLOPEDIA OF PRACTICAL ORGANIC CHEMISTRY 5.sup.TH ED.,Longman Scientificand Technical Ltd.,Essex,1991,809-816；Heller,Acc.Chem. Res.1990,23,128。
在本申请中，术语“药学上可接受的盐”包括药学上可接受的酸加成盐和药学上可接受的 碱加成盐。
“药学上可接受的酸加成盐”是指能够保留游离碱的生物有效性而无其它副作用的，与无 机酸或有机酸所形成的盐。无机酸盐包括但不限于盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷 酸盐等；有机酸盐包括但不限于甲酸盐、乙酸盐、2,2-二氯乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、己 酸盐、辛酸盐、癸酸盐、十一碳烯酸盐、乙醇酸盐、葡糖酸盐、乳酸盐、癸二酸盐、己二酸 盐、戊二酸盐、丙二酸盐、草酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、 棕榈酸盐、硬脂酸盐、油酸盐、肉桂酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、谷氨酸盐、焦谷氨酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、水 杨酸盐、4-氨基水杨酸盐、萘二磺酸盐等。这些盐可通过本专业已知的方法制备。
“药学上可接受的碱加成盐”是指能够保持游离酸的生物有效性而无其它副作用的、与无 机碱或有机碱所形成的盐。衍生自无机碱的盐包括但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、 镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。优选的无机盐为铵盐、钠盐、钾盐、钙盐及镁盐。 衍生自有机碱的盐包括但不限于以下的盐：伯胺类、仲胺类及叔胺类，被取代的胺类，包括 天然的被取代胺类、环状胺类及碱性离子交换树脂，例如氨、异丙胺、三甲胺、二乙胺、三 乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二甲基乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、2-二乙氨 基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡萄糖胺、甲基葡萄糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等。优选的 有机碱包括异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己基胺、胆碱及咖啡因。这些盐可通过 本专业已知的方法制备。
在本申请中，“药物组合物”是指本发明化合物与本领域通常接受的用于将生物活性化合 物输送至哺乳动物(例如人)的介质的制剂。该介质包括药学上可接受的载体。药物组合物的 目的是促进生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
本文所用术语“药学上可接受的”是指不影响本发明化合物的生物活性或性质的物质(如 载体或稀释剂)，并且相对无毒，即该物质可施用于个体而不造成不良的生物反应或以不良方 式与组合物中包含的任意组分相互作用。
在本申请中，“药学上可接受的辅料”包括但不限于任何被相关的政府管理部门许可为可 接受供人类或家畜使用的佐剂、载体、赋形剂、助流剂、增甜剂、稀释剂、防腐剂、染料/着 色剂、矫味剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、助悬剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂。
本文所用术语“预防的”、“预防”和“防止”包括使病患减少疾病或病症的发生或恶化的可 能性。
本文所用的术语“治疗”和其它类似的同义词包括以下含义：
(i)预防疾病或病症在哺乳动物中出现，特别是当这类哺乳动物易患有该疾病或病症，但 尚未被诊断为已患有该疾病或病症时；
(ii)抑制疾病或病症，即遏制其发展；
(iii)缓解疾病或病症，即，使该疾病或病症的状态消退；或者
(iv)减轻该疾病或病症所造成的症状。
本文所使用术语“有效量”、“治疗有效量”或“药学有效量”是指服用后足以在某种程度上 缓解所治疗的疾病或病症的一个或多个症状的至少一种药剂或化合物的量。其结果可以为迹 象、症状或病因的消减和/或缓解，或生物***的任何其它所需变化。例如，用于治疗的“有 效量”是在临床上提供显著的病症缓解效果所需的包含本文公开化合物的组合物的量。可使用 诸如剂量递增试验的技术测定适合于任意个体病例中的有效量。
本文所用术语“服用”、“施用”、“给药”等是指能够将化合物或组合物递送到进行生物作 用的所需位点的方法。这些方法包括但不限于口服途径、经十二指肠途径、胃肠外注射(包括 静脉内、皮下、腹膜内、肌内、动脉内注射或输注)、局部给药和经直肠给药。本领域技术人 员熟知可用于本文所述化合物和方法的施用技术，例如在Goodman and Gilman,The Pharmacological Basis of Therapeutics,current ed.；Pergamon；and Remington’s,Pharmaceutical Sciences(current edition),Mack Publishing Co.,Easton,Pa中讨论的那些。在优选的实施方案中， 本文讨论的化合物和组合物通过口服施用。
本文所使用术语“药物组合”、“药物联用”、“联合用药”、“施用其它治疗”、“施用其它治 疗剂”等是指通过混合或组合不止一种活性成分而获得的药物治疗，其包括活性成分的固定和 不固定组合。术语“固定组合”是指以单个实体或单个剂型的形式向患者同时施用至少一种本 文所述的化合物和至少一种协同药剂。术语“不固定组合”是指以单独实体的形式向患者同时 施用、合用或以可变的间隔时间顺次施用至少一种本文所述的化合物和至少一种协同制剂。 这些也应用到鸡尾酒疗法中，例如施用三种或更多种活性成分。
本领域技术人员还应当理解，在下文所述的方法中，中间体化合物官能团可能需要由适 当的保护基保护。这样的官能团包括羟基、氨基、巯基及羧酸。合适的羟基保护基包括三烷 基甲硅烷基或二芳基烷基甲硅烷基(例如叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基或三 甲基甲硅烷基)、四氢吡喃基、苄基等。合适的氨基、脒基及胍基的保护基包括叔丁氧羰基、 苄氧羰基等。合适的巯基保护基包括-C(O)-R”(其中R”为烷基、芳基或芳烷基)、对甲氧基苄 基、三苯甲基等。合适的羧基保护基包括烷基、芳基或芳烷基酯类。
保护基可根据本领域技术人员已知的和如本文所述的标准技术来引入和除去。保护基的 使用详述于Greene,T.W.与P.G.M.Wuts,Protective Groups in OrganiSynthesis,(1999),4th Ed., Wiley中。保护基还可为聚合物树脂。
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于：
与US20160176882A1，WO2017219948A1中的化合物N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基) 甲基)-8-(2-甲基吡啶-3-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺相对比，本发明的化合物抗细胞增殖 活性增加了约10倍。本发明公开的化合物在与EED蛋白的结合时，在结合的“口袋”外侧的 双环结构能使化合物具有更好的代谢稳定性。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范 围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明 书选择。
下述实施例中所用的起始物可由化学品销售商如Aldrich、TCI、Alfa Aesar、毕得、安耐 吉等处购得，或者可通过已知的方法来合成。
下述实施例中，冰浴是指-5摄氏度至0摄氏度，室温是指10摄氏度至30摄氏度，回流 温度一般是指常压下溶剂回流温度。反应过夜是指时间为8-15小时。下述实施例中，未限定 具体操作温度的，均在室温下进行。
下述实施例中，中间体和最终产物的分离提纯是通过正相或反相色谱柱分离或者其它合 适的方法。正相快速色谱柱是用乙酸乙酯和正己烷或甲醇和二氯甲烷等作为流动相。反相制 备性高压液相色谱(HPLC)是用C18柱并用UV 214nm和254nm来检测，其流动相为A(水 和0.1％甲酸)、B(乙腈)或者流动相A(水和0.1％碳酸氢铵)、B(乙腈)。
各实施例中：
LCMS仪器：Pump Agilent 1260 UV检测器：Agilent 1260 DAD
Mass Spectrometer API 3000
层析柱：Waters sunfire C18,4.6×50mm,5um
流动相：A-H2O(0.1％HCOOH)；B-乙腈
NMR仪器：Bruker Ascend 400M(1H NMR:400MHz；13C NMR:100MHz)。
实施例1：8-溴-5-氯-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶(D)
步骤一:5-溴-2-氯-4-肼基嘧啶(D-2)：
Figure BDA0002633742990000611
在50mL单口瓶中加入D-1(2g,8.78mmol)和乙醇(20mL)，冰浴中缓慢滴加水合肼(1.72g, 53.65mmol)，悬浊液于60℃搅拌3小时。反应结束后，降至室温，析出淡黄色固体，过滤收 集固体，滤饼用乙醇(5mL)洗，干燥得到淡黄色固体产物D-2(1.8g，收率92％)。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.06(s,1H),7.85(s,1H),4.34(s,2H)ppm.
步骤二:8-溴-5-氯-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶(D)：
Figure BDA0002633742990000612
在50mL单口瓶中加入D-2(1.2g，5.37mmol)，原甲酸三甲酯(12mL)，三氟乙酸(1滴)，升温至100℃反应10h。反应结束后，降温至室温，旋蒸除去原甲酸三甲酯，浓缩物用 硅胶柱(PE:EA＝20:1)纯化得到黄色固体产物D(960mg,收率77％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.03(s,1H),8.05(s,1H)ppm；LCMS:m/z 232.9[M+H]+.
实施例2：((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲胺(C1-a)和 ((1aS,6bS)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲胺(C1-b)
步骤一：中间体2-溴-6-(2-溴乙氧基)-3-氟苯甲醛(C1-2)：
Figure BDA0002633742990000613
在250mL单口瓶中加入C1-1(19g，86.7mmol)，加入无水DMF(90mL)搅拌溶解， 依次加入碳酸钾(24g，173.5mmol)，1,2-二溴乙烷(24g,130.1mmol)，升温至64℃，搅拌 18个小时。反应结束后，降至室温，加入乙酸乙酯(400mL)稀释，搅拌15分钟，过滤除 去不溶性盐，滤饼用乙酸乙酯(100mL)洗涤一次，滤液用饱和氯化钠(100mL)洗涤两次， 有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，再减压浓缩，粗品经短硅胶柱快速纯化(石油醚：乙酸乙 酯＝50：1)，得到中间体C1-2(25g，88％产率)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.52-10.27(m，1H)，7.40-7.09(m，1H)，7.02-6.78(m，1H)，4.53-4.05(m,2H),3.68(t,J＝6.0Hz,2H)ppm.
步骤二：中间体2-溴-3-氟-6-(乙烯氧基)苯甲醛(C1-3)：
Figure BDA0002633742990000621
在1L单口瓶中加入C1-2(10g，30.7mmol)，加入无水四氢呋喃(400mL)搅拌溶解，降温至-20℃，分批次缓慢加入叔丁醇钠(4.4g，46.0mmol)。加入结束后，升温至室温搅拌过夜。反应结束后，降温至-10℃，缓慢滴加水(60mL)淬灭，加入乙酸乙酯(100mL)萃 取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，粗品经硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝80:1 至30:1)得到C1-3(5g，66％产率)，为淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.32(d,J＝9.8Hz,1H),7.29(dt,J＝16.2,8.3Hz,1H),7.15-6.98(m,1H),6.68-6.46(m,1H),4.89-4.68(m,1H),4.68-4.42(m,1H)ppm.
步骤三：中间体(E)-N'-(2-溴-3-氟-6-(乙烯氧基)亚苄基)-4-甲基苯磺酰肼(C1-4)：
Figure BDA0002633742990000622
在250mL单口瓶中加入C1-3(5g，20.4mmol)，加入无水甲醇(100mL)搅拌溶解， 室温下缓慢加入对甲苯磺酰肼(4.2g，22.4mmol)，室温搅拌18个小时。反应结束后，析出 大量白色固体，降温至0℃，过滤收集固体产物，母液浓缩，固体粗品用混合溶剂石油醚和 乙酸乙酯(20:1)打浆，收集固体产物，减压干燥得到C1-4(7.5g，89％产率)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),7.97(s,1H),7.76(d,J＝7.6Hz,2H),7.42(t, J＝9.0Hz,2H),7.16(dd,J＝9.1,4.3Hz,1H),6.67(dd,J＝13.6,6.2Hz,1H),4.49(dd,J＝21.4, 9.8Hz,3H),2.35(s,3H)ppm；LCMS:m/z 414.1[M+H]+.
步骤四：中间体6-溴-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃(C1-5)：
Figure BDA0002633742990000631
在250mL单口瓶中加入C1-4(3g，7.3mmol)，加入甲苯(100mL)搅拌溶解，室温 下缓慢加入叔丁醇锂(639mg，7.9mmol)，锌铑酸二聚物(56mg，72.6μmol)氮气保护， 升温至100℃搅拌3个小时。反应结束后，降温至室温，过滤，滤饼用乙酸乙酯(50mL)洗 涤，滤液减压浓缩，得到C1-5(1.67g，100％产率)，为淡黄色油状物，直接投入下一步反应， 无需进一步纯化。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.03-6.81(m,2H),4.97(t,J＝5.2Hz,1H),2.84(dt,J＝9.0, 4.4Hz,1H),1.26(dt,J＝8.0,6.1Hz,1H),0.55-0.37(m,1H)ppm.
步骤五：中间体5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-甲腈(C1-6)：
Figure BDA0002633742990000632
在100mL单口瓶中加入C1-5(1.9g，8.30mmol)，氰化锌(1.46g，12.4mmol)，四三 苯基膦钯(1.44g,1.24mmol)，DMF(12mL)，氮气保护，升温至110℃搅拌18个小时。反 应结束后，降温至室温，加入乙酸乙酯(20mL)稀释，过滤，滤液用饱和食盐水(10mL) 洗涤二次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，粗品经由硅胶柱纯化(石油醚：乙 酸乙酯＝100:1至20:1)得到C1-6(1.35g，92％产率)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.03-6.84(m,2H),4.97(t,J＝5.2Hz,1H),2.84(dt,J＝9.0, 4.5Hz,1H),1.33-1.20(m,1H),0.52-0.40(m,1H)ppm.
步骤六：中间体叔-丁基((5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨基甲酸酯 (C1-7)：
Figure BDA0002633742990000641
在100mL单口瓶中加入C1-6(1.2g,6.8mmol)，加入甲醇(30mL)溶解，室温加入二 -叔-丁基二碳酸酯(2.2g，10.3mmol)，降温至-5℃，缓慢加入六水合氯化镍(1.95g，8.22mmol)， 分批次加入硼氢化钠固体(778mg，20.5mmol)，自然升温至室温搅拌2个小时。反应结束 后，用硅藻土过滤，滤饼用甲醇(10mL)洗涤，滤液降温至0℃，用水(5mL)淬灭，减压 浓缩，粗品加入乙酸乙酯(80mL),有机相用饱和食盐水(10mL)洗涤，有机相用无水硫 酸钠干燥，过滤，减压浓缩，粗品经由硅胶柱分离纯化(石油醚：乙酸乙酯＝100:1至40:1) 得到C1-7(1.2g，63％产率)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.76(t,J＝9.3Hz,1H),6.64(dd,J＝8.6,3.7Hz,1H),4.90(s, 1H),4.82(t,J＝5.3Hz,1H),4.48(d,J＝6.1Hz,1H),4.46-4.33(m,1H),2.85(d,J＝3.8Hz,1H), 1.44(s,9H),1.05(dd,J＝14.6,6.0Hz,1H),0.32(s,1H)ppm；LCMS:m/z 224.1[M-55]+.
步骤七：中间体叔-丁基((5-氟-1aR,6bR-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨基甲 酸酯(C1-7a)和((5-氟-1aS,6bS-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨基甲酸酯(C1-7b)：
Figure BDA0002633742990000642
将C1-7(1.2g，4.3mmol)通过如下的手性SFC进一步纯化:柱:AD-H 20x250 mm，10um (Daicel),流速:80g/min，流动相:13％(0.2％氨气甲醇/甲醇)在CO2中，检测:214nM，得到 C1-7a(0.52g，43.3％产率)，Rt:0.99min；和C1-7b(0.57g，47.5％产率)，Rt:0.71min.
C1-7a:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.76(t,J＝9.3Hz,1H),6.64(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H), 4.98-4.73(m,2H),4.45(ddd,J＝41.3,14.0,5.7Hz,2H),2.84(s,1H),1.45(d,J＝7.7Hz,9H), 1.05(dd,J＝14.8,6.0Hz,1H),0.31(d,J＝4.6Hz,1H)ppm；LCMS:m/z 224.1[M-55]+.
C1-7b:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.76(t,J＝9.3Hz,1H),6.64(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H), 4.98-4.73(m,2H),4.45(ddd,J＝41.3,14.0,5.7Hz,2H),2.84(s,1H),1.45(d,J＝7.7Hz,9H), 1.05(dd,J＝14.8,6.0Hz,1H),0.31(d,J＝4.6Hz,1H)ppm；LCMS:m/z 224.1[M-55]+.
步骤八：中间体((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲胺(C1-a)：
Figure BDA0002633742990000651
在100mL单口瓶中加入化合物C1-7a(1.2g,4.30mmol)，加入二氯甲烷(20mL)溶解，室温下加入三氟乙酸(4mL，52mmol)，并搅拌2小时，反应结束后，减压浓缩除去二氯甲 烷和三氟乙酸得到无色固体C1-a的三氟乙酸盐，1.26g，收率100％。产物可直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ6.95(t,J＝9.5Hz,1H),6.84(dd,J＝8.8,4.0Hz,1H),4.97(t, J＝5.4Hz,1H),4.31(q,J＝13.7Hz,2H),2.92-2.77(m,1H),1.26-1.11(m,1H),0.38-0.21(m,1H) ppm；LCMS:m/z 180.1[M+H]+.
用步骤八的方法用中间体C1-7b为原料得到C1-b的三氟乙酸盐。
Figure BDA0002633742990000652
实施例3：中间体4-(氨基甲基)-5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-3-醇(C2)：
步骤一：中间体2-溴-3,6-二氟苯甲醛(C2-2)：
Figure BDA0002633742990000653
在500mL干燥的三口烧瓶中加入C2-1(22g,114mmol)和干燥的THF(200mL)，冷却至–70℃。二异丙基氨基锂(2M,68.4mL)缓慢滴加入反应液中。反应液在相同温度下搅 拌45分钟后，加入DMF(17.8mL,228mmol)。反应液在相同温度下搅拌两小时后升至0℃。 饱和氯化铵(200mL)加入到反应液中。反应液用EtOAc(200mL X 2)萃取。合并的有机相 用盐水洗涤一次，经无水硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。残余物在硅胶上纯化(石油醚： 乙酸乙酯＝100：1)，得到C2-2(20g，79.4％产率)，为淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.34(s,1H),7.34(ddd,J＝9.2,7.4,4.5Hz,1H),7.16(td,J＝9.3,4.0Hz,1H)ppm.
步骤二：中间体2-溴-3-氟-6-甲氧基苯甲醛(C2-3)：
Figure BDA0002633742990000661
在2L的三口烧瓶中加入C2-2(20g，90.5mmol)，用无水THF(1000ml)和MeOH(200ml)搅拌溶解。加入甲醇钠(5.87g，108.6mmol)，反应液在60℃.搅拌18小时。减压浓缩除 去大部分溶剂，加入500mL水。悬浊液搅拌30分钟后过滤，收集固体。固体用石油醚和乙 酸乙酯(5:1)混合液打浆，过滤得到固体，减压干燥得到C2-3(18g,85％产率)，为黄色固 体。
LC-MS:m/z 233.1[M+H]+.
步骤三：中间体2-溴-3-氟-6-羟基苯甲醛(C2-4)：
Figure BDA0002633742990000662
在1L的单口烧瓶中加入C2-3(16.8g，72.1mmol)和二氯甲烷(300mL)。在-78℃下缓慢滴加三溴化硼(21.7g,86.5mmol),反应液升至室温，并搅拌18小时。反应液用二氯 甲烷(300mL)稀释，缓慢加入饱和碳酸氢钠(300mL)。有机相用盐水洗涤两次，经无水 硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。残余物在硅胶上纯化(石油醚：乙酸乙酯＝50：1)，得到 C2-4(10g，63.3％产率)，为淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.77(s,1H),10.34(s,1H),7.29(dt,J＝12.7,6.3Hz,1H), 6.94(dd,J＝9.3,4.1Hz,1H)ppm.
步骤四：中间体4-溴-5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-3-醇(C2-5)：
Figure BDA0002633742990000663
在干燥的三口烧瓶中加入三甲基碘化亚砜(9.73g，44.2mmol)和DMSO(50ml)。在冰水浴下加入叔丁醇钠(4.25g，44.2mmol)。反应液在室温下搅拌2小时，加入C2-4(8.8g，40.2mmol)。反应液在室温下搅拌18小时后，加入乙酸乙酯(250ml)和水(250ml)，用乙酸乙酯萃取(250ml X 2)。有机相用水和盐水分别洗涤一次，经无水硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。残余物在硅胶上纯化(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)，得到C2-5(6.2g，66.2％产率)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.03(t,J＝8.7Hz,1H),6.76(dd,J＝8.8,3.5Hz,1H),5.51-5.40(m,1H),4.58(ddd,J＝13.4,10.8,4.6Hz,2H),2.33(d,J＝4.9Hz,1H)ppm.
步骤五：中间体5-氟-3-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-4-甲腈(C2-6)：
Figure BDA0002633742990000671
在干燥的单口烧瓶中依次加入C2-5(2.7g，11.6mmol)，氰化锌(2.04g，17.4mmol)，DMF(50 ml)和四三苯基膦钯(1.34g，1.16mmol)。反应液在氮气保护下加热至120℃，搅拌18小时。 反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(200mL X 3)和水(200ml)萃取。有机相用水和盐水分别洗 涤一次，经无水硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。残余物在硅胶上纯化(石油醚：乙酸乙酯 ＝5：1)，得到C2-6(1.6g，77％产率)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.20-6.99(m,2H),5.63(dd,J＝6.9,2.9Hz,1H),4.69(dd,J＝ 10.8,7.1Hz,1H),4.55(dd,J＝10.8,3.1Hz,1H),2.74(s,1H)ppm.
步骤六：中间体(5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲胺(C2)：
Figure BDA0002633742990000672
在100mL单口瓶中依次加入C2-6(1.55g，8.65mmol)，三氟乙酸(1.09g，8.65mmol)，甲 醇(20mL)和10％钯碳(2g，含50％水)。反应混合物用氢气鼓气5分钟，用氢气球换气三次，在氢气球下60℃搅拌48小时。混合物经硅藻土过滤，用甲醇(50mL X 2)洗涤，滤液减 压浓缩加入二氧六环(10mL)和10M氢氧化钠水溶液(1mL)，用二氧六环(10mL X 2)萃 取，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，在减压下浓缩。得到化合物C2(1.4g，90％纯度，87％ 产率)，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ3.27(t,2H),3.77(s,2H),4.56(t,2H),6.59(dd 1H),6.81(dd, 1H)ppm；LC-MS:m/z 168.1[M+H]+.
实施例4：中间体(6-氟苯并二氢吡喃-5-基)甲胺(C3)
步骤一：中间体2-溴-1-氟-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苯(C3-2)
Figure BDA0002633742990000681
在干燥的2L单口烧瓶瓶中室温下加入C3-1(87g，455.5mmol)，干燥的N,N-二甲基甲 酰胺(800mL)。用氮气置换体系空气三次,在冰水浴下历时30分钟分批次加入60％的氢化 钠(20g,501mmol)。反应液室温下搅拌15分钟后用冰水浴冷却，然后加入氯丙炔(50.9g,683.3mmol)。反应液室温下搅拌18小时。反应完毕后，加入水(1L)，用乙酸乙酯(1L) 萃取三次。有机相用饱和氯化钠水溶液(500mL)洗涤一次，有机相用硫酸钠干燥，过滤， 减压浓缩得到粗产品。通过硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝20:1)纯化得到产品黄色油状液体 C3-2(80g,76.7％产率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.17(dd,J＝5.5,3.0Hz,1H),7.05(dd,J＝9.0,8.1Hz,1H), 6.89(ddd,J＝9.1,3.7,3.2Hz,1H),4.66(d,J＝2.4Hz,2H),2.54(t,J＝2.4Hz,1H)ppm。
步骤二：中间体5-溴-6-氟-2H-色烯(C3-3)
Figure BDA0002633742990000682
在干燥的20mL微波管中加入C3-2(2g，8.7mmol)和N，N-二乙基苯胺(15mL)。 反应液在微波合成仪中加热至250℃反应2.5小时。反应完毕后，用乙酸乙酯(100mL)稀 释，用2N盐酸洗涤除去N，N-二乙基苯胺。有机相用饱和氯化钠水溶液(50mL)洗涤一次， 有机相用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。粗产品通过硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝ 20:1)纯化得到C3-3和C3-3b的棕色油状混合物(1.88g，94％产率)。
步骤三：中间体6-氟-2H-色烯-5-腈(C3-4)
Figure BDA0002633742990000683
在干燥的500mL三口瓶中依次加入C3-3和C3-3b的棕色油状混合物(20.2g，88.2mmol)， 氰化锌(13.5g，115mmol)，无水N,N二甲基甲酰胺(250mL)和四三苯基膦钯(10.2g， 8.8mmol)。反应液在氮气保护条件下110℃下搅拌18小时。反应完毕后，冷却到室温，加 入1L水，用乙酸乙酯(500mL)萃取三次。有机相用饱和氯化钠水溶液(500mL)洗涤一次，有机相用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。通过硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯 ＝50:1～10:1)纯化得到产品白色固体C3-4(8.12g，52.6％产率)。C3-3b的转化产物被分离除去。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.02-6.85(m,2H),6.70(dt,J＝10.0,1.8Hz,1H),6.07(dt,J＝ 10.0,3.6Hz,1H),4.88(dd,J＝3.6,2.0Hz,2H)ppm；LC-MS:m/z 176.1[M+H]+。
步骤四：中间体((6-氟苯并二氢吡喃-5-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(C3-5)
Figure BDA0002633742990000691
在500mL单口瓶中依次加入C3-4(4.6g，26.3mmol)，BOC酸酐(7.45g，34.1mmol)，甲醇(200mL)和10％钯碳(1.6g，50％)。反应液先用氢气鼓泡5分钟，然后装上氢气球换 气三次，在氢气中加热到60℃搅拌过夜。反应完毕后，冷却到室温，反应液过滤，减压浓缩 得到较纯的产品C3-5(7.4g，100％)，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.81(t,J＝9.1Hz,1H),6.70(dd,J＝9.0,4.9Hz,1H),4.75(s, 1H),4.32(d,J＝5.2Hz,2H),4.18-4.05(m,2H),3.49(d,J＝1.8Hz,2H),2.86(t,J＝6.4Hz,2H), 2.10-1.91(m,2H),1.45(d,J＝8.0Hz,9H)ppm；LC-MS:m/z 226.1[M-tBu+H]+。
步骤五：中间体(6-氟苯并二氢吡喃-5-基)甲胺(C3)：
Figure BDA0002633742990000692
在50mL单口瓶中依次加入C3-5(1.0g，3.55mmol)和10mL HCl/二噁烷溶液(4M)，室温搅拌4小时。反应完毕，混合物在减压下浓缩，得到化合物C3(612mg，95％产率)， 为白色固体。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.98(t,J＝9.2Hz,1H),6.86(dd,J＝9.1,5.1Hz,1H),4.28-4.07(m,4H),2.89(t,J＝6.4Hz,2H),2.14-2.01(m,2H)ppm；LC-MS:m/z 182.1[M+H]+。
实施例5：8-溴-N-(((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺(B1)
Figure BDA0002633742990000701
在100mL单口瓶中依次加入化合物C1-a的三氟乙酸盐(1.0g，3.41mmol)，化合物D(0.95g，4.09mmol)，三乙胺(0.69g，6.82mmol)，乙腈(20mL)，室温搅拌3小时，反应结 束后，加入乙酸乙酯(80mL)稀释溶解，有机相用饱和食盐水(10mL*2)洗，有机相经无 水硫酸钠干燥，减压浓缩，经硅胶柱层析纯化(流动相：PE:EA＝30:1至PE:EA＝10:1)得到 化合物B1(1.2g,收率94％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(s,1H),8.87(d,J＝4.5Hz,1H),7.85(s,1H),6.94(t,J ＝9.5Hz,1H),6.77(dd,J＝8.7,3.7Hz,1H),4.92(t,J＝5.2Hz,1H),4.79(p,J＝9.7Hz,1H), 2.88(dt,J＝8.7,4.5Hz,1H),0.97(dd,J＝14.4,5.7Hz,1H),0.10(s,1H)ppm；LCMS:m/z 376.0 [M+H]+.
使用实施例5的方法，用D分别和C1-b、C2和C3反应得到中间体B2、B3和B4，如 表2所示。
表2
Figure BDA0002633742990000702
Figure BDA0002633742990000711
实施例6：8-([1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基硼酸(E1)：
Figure BDA0002633742990000712
干燥的30mL封管中，依次加入8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶(200mg，1.01mmol)， 双联硼酸频那醇酯(513mg，2.02mmol)，加入1,1’-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(35mg，0.05 mmol)，醋酸钾(198mg，2.02mmol)溶于10ml干燥的1,4-二氧六环中。氮气鼓泡一分钟， 再将反应液升至120℃并搅拌12个小时。冷却至室温，LCMS检测原料基本转化成了E1， 反应未进行后处理，直接一锅法投入下一步反应。
LCMS:m/z 164.0[M+H]+
步骤二：8-([1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺：
Figure BDA0002633742990000713
上述中间体E1的反应液中，依次加入中间体B3(100mg，0.27mmol)，1,1’-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(21mg，0.03mmol)，碳酸钾(76mg，0.54mmol)和H2O(2mL)，氮 气鼓泡一分钟，将反应液升至85℃并搅拌2个小时。冷却至室温，将反应体系缓慢滴加进冰 水(30mL)中，再用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减 压浓缩。残余物用色谱柱以展开剂体系(乙酸乙酯:甲醇＝10:1)纯化所得粗产品，再通过高效液 相制备得到产物8-([1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺(39mg，产率35％)，白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(s,1H),9.51(s,1H),9.19(dd,J＝7.6,0.9Hz,1H),8.98(s,1H),8.93(dd,J＝6.7,1.0Hz,1H),8.63(s,1H),7.43–7.38(m,1H),7.01–6.95(m,1H), 6.73(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.79(s,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.33(d,J＝8.8Hz,2H)ppm； LCMS:m/z 403.1[M+H]+.
使用实施例6的方法，以8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶和中间体B1为原料可以合成以下 化合物：
实施例7：8-([1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-(((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯 并呋喃-6-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000721
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,1H),9.37(s,1H),9.05(d,J＝7.4Hz,1H),8.78(d, J＝6.6Hz,1H),8.48(s,1H),7.26(t,J＝7.2Hz,1H),6.85-6.79(m,1H),6.65(dd,J＝8.6,3.8Hz, 1H),4.82(d,J＝6.1Hz,1H),4.79(d,J＝3.4Hz,2H),3.04(d,J＝5.2Hz,1H),2.83(dd,J＝9.2, 4.3Hz,1H),1.10(s,1H),0.92-0.82(m,1H)ppm；LCMS:m/z 414.8[M+H]+.
使用实施例6的方法，以8-溴咪唑并[1,2-a]吡啶和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例8：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000722
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(s,1H),9.56(s,1H),8.90(s,1H),8.80(d,J＝6.7Hz, 1H),8.55(d,J＝5.8Hz,1H),8.05(d,J＝1.0Hz,1H),7.66(d,J＝0.9Hz,1H),7.08(t,J＝7.0Hz, 1H),7.02-6.93(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.78(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H)ppm； LCMS:m/z 401.7[M+H]+.
使用实施例6的方法，以8-溴咪唑并[1,2-a]吡啶和中间体B1为原料可以合成以下化合物：
实施例9：N-(((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)-8-(咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000731
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(s,1H),9.42(s,1H),8.86(s,1H),8.64(dd,J＝7.3,1.0 Hz,1H),8.42(dd,J＝6.7,1.1Hz,1H),7.92(d,J＝1.2Hz,1H),7.53(d,J＝1.2Hz,1H),6.95(t,J ＝7.0Hz,1H),6.83(dd,J＝10.3,8.8Hz,1H),6.66(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.82(dt,J＝5.3,2.7 Hz,1H),4.78(s,2H),2.85(dd,J＝9.3,4.5Hz,1H),0.88(dt,J＝8.9,6.0Hz,1H),0.00(ddd,J＝ 6.0,3.9,1.9Hz,1H)ppm；LCMS:m/z 413.8[M+H]+.
使用实施例6的方法，以8-溴-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶和中间体B1为原料可以合成以下 化合物：
实施例10：8-([1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-8-基)-N-(((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并 [b]苯并呋喃-6-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000732
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(s,1H),9.32(s,1H),9.00(d,J＝7.4Hz,1H),8.68(d,J ＝6.6Hz,1H),8.35(s,1H),7.25(t,J＝7.2Hz,1H),6.85-6.79(m,1H),6.63(dd,J＝8.6,3.8Hz, 1H),4.82(d,J＝6.1Hz,1H),4.79(d,J＝3.4Hz,2H),3.04(d,J＝5.2Hz,1H),2.83(dd,J＝9.2, 4.3Hz,1H),1.10(s,1H),0.23-0.18(m,1H)ppm；LCMS:m/z 414.8[M+H]+.
使用实施例6的方法，以7-溴咪唑并[1,2-a]吡啶和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例11：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000733
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,1H),8.84(s,1H),8.69(s,1H),8.59(d,J＝7.2Hz, 1H),8.32(s,1H),7.95(s,1H),7.66(dd,J＝7.3,1.7Hz,1H),7.60(d,J＝0.9Hz,1H),7.02-6.89 (m,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.75(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.31(t,J＝8.7Hz, 2H)ppm；LCMS:m/z 401.8[M+H]+.
使用实施例6的方法，以6-溴咪唑并[1,2-a]吡啶和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例12：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000741
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),9.52(s,1H),8.79(s,1H),8.21(s,1H),8.12(s, 1H),7.90(dd,J＝9.6,1.7Hz,1H),7.65(d,J＝9.5Hz,1H),7.60(s,1H),7.04-6.91(m,1H),6.71 (dd,J＝8.8,3.8Hz,1H),4.74(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.26(t,J＝8.7Hz,2H)ppm； LCMS:m/z 401.8[M+H]+.
使用实施例6的方法，以6-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例13：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000742
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.94(s,1H),9.55(s,1H),9.29(d,J＝2.0Hz,1H),8.91(s, 1H),8.40(s,1H),8.27(d,J＝2.3Hz,1H),7.02–6.92(m,1H),6.80(s,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.7 Hz,1H),4.76(s,2H),4.56(t,J＝8.6Hz,2H),2.06–1.90(m,2H)ppm；LCMS:m/z402.8 [M+H]+.
使用实施例6的方法，以6-溴-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶和中间体B1为原料可以合成以下 化合物：
实施例14：8-([1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-6-基)-N-(((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并 [b]苯并呋喃-6-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000743
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(s,1H),9.57(s,1H),9.46(s,1H),8.99(s,1H),8.30(s, 1H),8.07(dd,J＝9.8,1.3Hz,1H),7.87(d,J＝9.7Hz,1H),6.98-6.92(m,1H),6.78(dd,J＝8.7, 3.8Hz,1H),4.93(t,J＝4.5Hz,1H),4.88(t,J＝9.2Hz,2H),2.96-2.90(m,1H),1.23(s,1H), 1.02-0.97(m,1H)ppm；LCMS:m/z 415.1[M+H]+.
使用实施例6的方法，以7-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶和中间体B1为原料可以合成以下 化合物：
实施例15：8-([1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-7-基)-N-(((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并 [b]苯并呋喃-6-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000751
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,1H),9.06(s,1H),8.99(d,J＝7.3Hz,1H),8.88(s, 1H),8.50(s,1H),8.47(s,1H),8.01(dd,J＝7.4,1.7Hz,1H),7.02-6.92(m,1H),6.78(dd,J＝8.7, 3.9Hz,1H),4.94(dd,J＝5.4,1.7Hz,1H),4.91(d,J＝4.2Hz,2H),2.97-2.90(m,1H),1.23(s, 1H),1.00(dd,J＝5.7,3.1Hz,1H)ppm；LCMS:m/z 415.1[M+H]+.
使用实施例6的方法，以6-溴咪唑并[1,2-a]嘧啶和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例16：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000752
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.88(s,1H),9.52(s,1H),9.20(s,1H),8.89(s,1H),8.33(s, 1H),8.11(s,1H),7.75(s,1H),6.96(s,1H),6.72(s,1H),4.65(d,J＝77.8Hz,4H),3.57(s,2H) ppm；LCMS:m/z 402.8[M+H]+.
使用实施例6的方法，以6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例17：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000753
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.78(s,1H),9.54(s,1H),8.82(s,1H),8.29(s,1H),8.04 (d,J＝2.2Hz,1H),7.92(dd,J＝9.5,1.5Hz,1H),7.79(d,J＝9.3Hz,1H),7.01–6.92(m,1H), 6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),6.65(d,J＝1.4Hz,1H),4.75(s,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.31 (s,2H)ppm；LCMS:m/z 401.8[M+H]+.
使用实施例6的方法，以3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例18：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000761
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.25-9.19(m,2H),8.80(s,1H),8.71(dd,J＝ 4.0,1.7Hz,1H),8.64(s,1H),7.17(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),7.00-6.93(m,1H),6.72(s,1H),4.74 (s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.31(d,J＝8.8Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 402.8[M+H]+.
使用实施例6的方法，以7-溴苯并[d]噁唑和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例19：8-(苯并[d]噁唑-7-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并 [4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000762
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),8.86(s,1H),8.83(s,1H),8.49(d,J＝7.7Hz, 1H),8.41(s,1H),7.79(d,J＝7.8Hz,1H),7.54(t,J＝7.9Hz,1H),7.01-6.93(m,1H),6.72(dd,J ＝8.6,3.9Hz,1H),4.77(s,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.32-3.30(m,2H)ppm；LCMS:m/z 402.8[M+H]+.
使用实施例6的方法，以4-溴-2-甲基苯并[d]噁唑和中间体B3为原料可以合成以下化合 物：
实施例20：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(2-甲基苯并[d]噁唑-4-基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000771
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.97(s,1H),8.56(s,1H),8.24(d,J＝7.4Hz,1H),7.54-7.38 (m,2H),6.88-6.75(m,1H),6.61(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),6.47(s,1H),4.72(d,J＝5.3Hz,2H), 4.57(t,J＝8.7Hz,2H),3.37(t,J＝8.7Hz,2H),2.66(s,3H)ppm；LCMS:m/z416.8[M+H]+.
实施例21：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：(2-氨基-5-氟吡啶-3-基)硼酸(E2)
Figure BDA0002633742990000772
在25mL微波管中加入3-溴-5-氟吡啶-2-胺(0.3g，1.57mmol)，联硼酸频那醇酯(598mg， 2.36mmol)，1,1’-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(115mg,0.157mmol)，双二苯基膦二茂铁(87 mg,0.157mmol)，醋酸钾(385mg,3.93mmol)，1,4-二氧六环(10mL)，氮气保护，在微波 反应仪中升温至110℃反应4小时。反应结束后，直接用于下一步反应，无须纯化。LCMS:m/z 156.8[M+H]+.
步骤二:8-(2-氨基-5-氟吡啶-3-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并 [4,3-c]嘧啶-5-胺(E2-2)：
Figure BDA0002633742990000773
在上一步反应液中加入中间体B3(300mg，0.824mmol)，1,1’-双二苯基膦二茂铁二氯 化钯(121mg，0.165mmol)，碳酸钾(342mg，2.47mmol)，二氧六环-H2O(12mL 4:1)，氮 气保护，在微波反应仪中升温至80℃反应1小时。反应结束后，再用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用Flash纯化(甲醇：乙酸乙 酯＝1：20)得到E2-2(300mg，87％产率)，为黄褐色固体。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.49(s，1H)，8.80(s，1H)，7.99(d，J＝2.9Hz，1H)，7.68(s，1H),7.49(d,J＝9.0Hz,1H),7.00–6.92(m,1H),6.71(dd,J＝8.7,3.8Hz,1H),5.71(s,2H),4.71 (s,2H),4.55(s,2H),3.36(s,2H)，LCMS:m/z 395.8[M+H]+.
步骤三:N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]三 唑并[4,3-c]嘧啶-5-胺：
Figure BDA0002633742990000781
在25mL单口瓶中加入E2-2(80mg，0.2mmol)，2-氯乙醛(159mg，2.0mmol)，碳酸 钾(28mg，0.2mmol)，乙醇(5mL)，升温至90℃搅拌5个小时。反应结束后，用乙酸乙 酯(30mL×3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩。残余物用Flash(甲 醇：乙酸乙酯＝1:50)纯化得到N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟咪唑并[1,2-a]吡 啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺(8mg，9.4％产率)，为淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.85(s,1H),9.56(s,1H),9.00(s,1H),8.95(dd,J＝11.1, 2.3Hz,1H),8.78–8.74(m,1H),8.05(s,1H),7.72(s,1H),7.00–6.94(m,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.8 Hz,1H),4.79(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.35(s,2H)ppm；LCMS:m/z419.8[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以3-氯-1,1,1-三氟丙烷-2-酮和中间体E2-2为原料可以合 成以下化合物：
实施例22：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000782
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.66(s,1H),9.57(s,1H),9.09(dd,J＝11.1,2.3Hz,2H), 8.80(d,J＝3.0Hz,1H),8.63(s,1H),7.02–6.96(m,1H),6.73(dd,J＝8.7,3.8Hz,1H),4.82(s, 2H),4.54(s,2H),3.29(d,J＝8.8Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 487.7[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以2-氯-3-氧代丙酸乙酯和中间体E2-2为原料可以合成以 下化合物：
实施例23：乙基6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c] 嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯
Figure BDA0002633742990000791
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,1H),9.56(s,1H),9.26-9.19(m,1H),9.14-9.05(m, 2H),8.41(s,1H),7.01-6.93(m,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.80(d,J＝5.0Hz,2H),4.55 (t,J＝8.7Hz,2H),4.41(q,J＝7.1Hz,2H),3.30(s,2H),1.38(t,J＝7.1Hz,3H)ppm；LCMS: m/z 491.7[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以2-氯乙酰乙酸乙酯和中间体E2-2为原料可以合成以下 化合物：
实施例24：乙基6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c] 嘧啶-8-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯
Figure BDA0002633742990000792
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),9.58(s,1H),9.22(s,1H),9.08(d,J＝10.8Hz, 2H),7.03-6.94(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.8Hz,1H),4.80(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.40 (q,J＝7.1Hz,2H),3.27-3.29(m,2H)，2.68(s,3H),1.39(t,J＝7.1Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 505.8[M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-5-氯吡啶-2-胺、二氯乙醛和中间体B3为原料可以合成以 下化合物：
实施例25：8-(6-氯咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000793
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),9.55(s,1H),9.07-8.91(m,2H),8.83(d,J＝ 1.8Hz,1H),8.03(s,1H),7.72(s,1H),7.02-6.93(m,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.78(s, 2H)，4.55(t，J＝8.7Hz，2H)，3.31(s，2H)ppm；LCMS:m/z 435.8[M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-5-氟吡啶-2-胺、3-氯-1,1,1-三氟丙烷-2-酮和中间体B3为 原料可以合成以下化合物：
实施例26：8-(6-氯-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基) 甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000801
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.90(s,1H),9.60(s,1H),9.09(d,J＝2.0Hz,1H),8.91(s, 1H),8.66(s,1H),6.99-6.91(m,1H),6.70(dd,J＝8.7,3.8Hz,1H),4.80(s,2H),4.52(t,J＝8.7 Hz,2H),3.33(s,2H)ppm；LCMS:m/z 503.7[M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-5-氟吡啶-2-胺、氯丙酮和中间体B3为原料可以合成以下 化合物：
实施例27：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000802
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),9.55(s,1H),8.96(s,1H),8.89(dd,J＝11.1, 2.3Hz,1H),8.71-8.65(m,1H),7.78(s,1H),7.03-6.94(m,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H), 4.80(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.31(t,J＝8.9Hz,2H),2.41(s,3H)ppm；LCMS:m/z 433.8 [M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-5-甲基吡啶-2-胺、2-氯乙醛和中间体B3为原料可以合成 以下化合物：
实施例28：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000803
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.73(s,1H),9.62(s,1H),8.96(s,1H),8.75(s,1H),8.41(s, 1H),8.01(s,1H),7.66(s,1H),7.07-7.00(m,1H),6.78(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.84(s,2H),4.62 (t,J＝8.7Hz,2H),3.38(s,2H),2.44(s,3H)ppm；LCMS:m/z 415.8[M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-6-甲基吡啶-2-胺、2-氯丙醛和中间体B3为原料可以合成 以下化合物：
实施例29：8-(3,5-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000811
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.45(s,1H),8.78(s,1H),8.49(d,J＝7.3Hz, 1H),7.34(s,1H),7.00-6.93(m,1H),6.79-6.70(m,2H),4.76(d,J＝3.4Hz,2H),4.55(s,2H),3.31 (s,2H),2.93(s,3H),2.82(s,3H)ppm；LCMS:m/z 430.0[M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-5-甲基吡啶-2-胺、3-氯-1,1,1-三氟丙烷-2-酮和中间体B3 为原料可以合成以下化合物：
实施例30：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-甲基-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a] 吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000812
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),9.47(s,1H),8.99(s,1H),8.82(s,1H),8.56(s, 1H),8.39(s,1H),7.02-6.93(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.8Hz,1H),4.80(d,J＝4.0Hz,2H),4.54 (t,J＝8.7Hz,2H),3.30(d,J＝8.7Hz,2H),2.41(s,3H)ppm；LCMS:m/z483.7[M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-6-甲基吡啶-2-胺、2-氯丙醛和中间体B3为原料可以合成 以下化合物：
实施例31：8-(3,5-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000821
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.45(s,1H),8.78(s,1H),8.49(d,J＝7.3Hz, 1H),7.34(s,1H),7.00-6.93(m,1H),6.79-6.70(m,2H),4.76(d,J＝3.4Hz,2H),4.55(s,2H),3.31 (s,2H),2.93(s,3H),2.82(s,3H)ppm；LCMS:m/z 430.0[M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-5-氟吡啶-2-胺、2-氯丙醛和中间体B3为原料可以合成以 下化合物：
实施例32：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟-3-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000822
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),9.59(s,1H),8.93(dd,J＝11.1,2.4Hz,1H), 8.50(dd,J＝4.0,2.4Hz,1H),7.52(d,J＝1.0Hz,1H),6.96(dd,J＝10.3,8.7Hz,1H),6.71(dd,J ＝8.6,3.9Hz,1H),4.78(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.34(s,6H),3.32(s,4H)ppm；LCMS: m/z 434.1[M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-6-甲基吡啶-2-胺、2-氯丁醛和中间体B3为原料可以合成 以下化合物：
实施例33：8-(3-乙基-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000823
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝7.0Hz,1H),9.45(s,1H),8.77(t,J＝4.9Hz,1H),8.48(d,J＝7.4Hz,1H),7.38(s,1H),7.01-6.92(m,1H),6.78(s,1H),6.71(dd,J＝8.7,3.9 Hz,1H),4.76(d,J＝4.7Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.34(s,2H),3.30(d,J＝7.0Hz,2H), 2.92(s,3H),1.35(t,J＝7.4Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 444.0[M+H]+.
实施例34：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基硼酸(E3-2)：
Figure BDA0002633742990000831
在25mL微波管中加入E3(100mg，0.45mmol)，3-氯-1,1,1-三氟丙烷-2-酮(100mg，0.68mmol)，1,4-二氧六环(4mL)，升温至90℃搅拌2个小时。LCMS检测原料反应完全， 反应液冷却至室温后不经处理直接用于下一步。
LCMS:m/z 230.8[M+H]+.
步骤二：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000832
在上一步反应液中加入中间体B3(60mg，0.165mmol)，1,1’-双二苯基膦二茂铁二氯 化钯(12mg，0.0165mmol)，碳酸钾(45mg，0.33mmol)和H2O(1mL)，氮气保护，在微 波反应仪中升温至80℃反应1小时。反应结束后，反应液用乙酸乙酯萃取(10mL×3)萃取。合 并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用Flash纯化，(100％乙酸乙酯) 得到N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]三 唑并[4,3-c]嘧啶-5-胺(55mg，71％产率)，为棕色固体。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.31(s,1H),9.12(s,1H),8.43(d,J＝7.2Hz,1H),8.26(d,J＝ 6.6Hz,1H),8.09(s,1H),7.12(t,J＝7.0Hz,1H),6.85(t,J＝9.3Hz,1H),6.67(dd,J＝8.6,3.9 Hz,1H),4.63(t,J＝8.7Hz,2H),4.12(s,2H),3.42(t,J＝8.7Hz,2H)ppm；LCMS:m/z469.8 [M+H]+.
实施例35：中间体8-(2-氨基吡啶-3-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺(E3-3)：
Figure BDA0002633742990000841
在25mL微波管中加入3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡啶-2-胺(220mg，1 mmol)、中间体B3(300mg，0.824mmol)，1,1’-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(100mg，0.136mmol)，碳酸钾(342mg，2.47mmol)，二氧六环-H2O(12mL，V/V＝4:1)，氮气保护， 在微波反应仪中升温至80℃反应1小时。反应结束后，再用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。合并有 机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。残余物用Flash纯化(甲醇：乙酸乙酯＝1： 20)得到E3-3(262mg，84％产率)，为黄褐色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,1H),8.65(d,J＝4.7Hz,1H),8.00(dd,J＝4.9,1.6 Hz,1H),7.60(s,1H),7.49-7.40(m,1H),7.01-6.91(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.8Hz,1H),6.64 (dd,J＝7.3,4.9Hz,1H),5.71(s,2H),4.71(d,J＝4.8Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.32-3.26 (m,2H)ppm；LCMS:m/z 377.8[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以中间体E3-3和氯丙酮为原料可以合成以下化合物：
实施例36:N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000842
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(s,1H),9.55(s,1H),8.85(t,J＝5.2Hz,1H),8.73(d, J＝6.8Hz,1H),8.44(d,J＝5.8Hz,1H),7.77(s,1H),7.03-6.93(m,2H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz, 1H),4.79(d,J＝4.9Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.30(d,J＝8.8Hz,2H),2.40(s,3H)ppm； LCMS:m/z 415.8[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以中间体E3-3和2-氯丙醛为原料可以合成以下化合物：
实施例37:N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(3-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000851
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(s,1H),9.56(s,1H),8.89(s,1H),8.79(d,J＝7.2Hz, 1H),8.25(d,J＝6.7Hz,1H),7.45(s,1H),7.13(t,J＝7.0Hz,1H),7.01-6.93(m,1H),6.72(dd,J ＝8.6,3.9Hz,1H),4.78(s,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.33(d,J＝8.7Hz,2H),2.51(s,3H)ppm； LCMS:m/z 415.8[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以中间体E3-3和2-氯-3-氧代丙酸乙酯为原料可以合成以 下化合物：
实施例38：乙基8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯
Figure BDA0002633742990000852
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.34(d,J＝6.6Hz,1H),8.56(s,1H),8.26(d,J＝7.1Hz,1H), 8.16(s,1H),7.62(s,1H),7.20(t,J＝7.1Hz,1H),6.73(t,J＝9.4Hz,1H),6.59(dd,J＝8.6,3.9 Hz,1H),4.66(d,J＝4.6Hz,2H),4.53(t,J＝8.7Hz,2H),4.46(q,J＝7.1Hz,2H),3.35(t,J＝8.7 Hz,2H),1.46(t,J＝7.1Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 473.8[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以中间体E3-3和2-氯丁醛为原料可以合成以下化合物：
实施例39：8-(3-乙基咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000853
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),9.35(t,J＝5.2Hz,1H),8.83(d,J＝6.8Hz,1H),8.22(d,J＝7.3Hz,1H),8.12(s,1H),8.05(s,1H),7.63(t,J＝7.1Hz,1H),6.97(dd,J＝10.3, 8.7Hz,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.77(d,J＝5.0Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H), 3.10-2.98(m,2H),1.39(t,J＝7.4Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 430.0[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以中间体E3-3和2-氯-3-苯基丙醛为原料可以合成以下化 合物：
实施例40：8-(3-苯甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000861
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,1H),9.52(s,1H),8.84(t,J＝5.1Hz,1H),8.75(dd, J＝7.4,1.2Hz,1H),8.20(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.50(s,1H),7.39-7.16(m,5H),7.07(t,J＝7.0 Hz,1H),7.01-6.92(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.78(d,J＝5.1Hz,2H),4.55(t,J＝8.7 Hz,2H),4.36(s,2H),3.33(s,2H)ppm；LCMS:m/z 492.0[M+H]+.
实施例41：乙基8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯
Figure BDA0002633742990000862
在25mL密封管中一次加入中间体E3-3(60mg，0.16mmol)，2-溴-4,4,4-三氟-3-氧代丁 酸乙酯(315mg，1.59mmol)，无水乙醇(6mL)，反应升温至90℃搅拌16小时，反应结束，减压浓缩除去乙醇，粗品用硅胶柱纯化，得到8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨 基)-)[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-2-)三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸甲酯(15mg，17％ 收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.28(d,J＝6.1Hz,2H),9.02(d,J＝7.2Hz,1H),7.56(t,J＝7.2Hz,1H),6.97(d,J＝9.8Hz,1H),6.73(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.80(d,J＝ 4.8Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.45(q,J＝7.1Hz,2H),3.34(s,2H),3.30(s,3H),3.17(d,J ＝5.3Hz,1H),1.37(t,J＝7.1Hz,3H),1.23(s,2H)ppm；LCMS:m/z 541.9[M+H]+.
实施例42：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基) 咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸
Figure BDA0002633742990000871
在25mL单口瓶中加入乙基8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯(47mg，0.1mmol)，甲醇(10mL)和水(5mL)， 搅拌下加入氢氧化钾(56mg，1.0mmol)。反应搅拌过夜，TLC板监测原料反应完全，加入 2N盐酸调PH值至6。溶液旋干后Flash纯化(洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝3:1)得到白色固 体物8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并 [1,2-a]吡啶-3-羧酸(35mg，79％产率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),9.47(d,J＝7.8Hz,1H),9.36(s,1H),8.78(d, J＝7.3Hz,1H),8.20(s,1H),7.21(t,J＝7.1Hz,1H),6.92-6.83(m,1H),6.66(dd,J＝8.6,3.8Hz, 1H),4.79(s,2H),4.58(t,J＝8.7Hz,2H),3.39(t,J＝8.7Hz,2H)ppm；LCMS:m/z446.4 [M+H]+.
实施例43：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(3-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000872
25ml单口瓶中依次加入化合物8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸(55mg，0.123mmol)，氟化钾(36.5mg，0.628mmol)， 1-(氯甲基)-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-1,4-2四氟硼酸盐(111mg，0.314mmol)，二氯乙 烷(3mL)，水(1mL)。氮气保护下70℃回流16小时。检测反应结束，降温至室温。加入冰 水(3ml)淬灭，乙酸乙酯(3*5ml)萃取三次，萃取液用饱和食盐水和纯净水分别洗涤两次。 有机相用无水硫酸钠干燥，减压条件下去除有机溶剂。粗产品用反相柱纯化处理(0.05％甲酸 水溶液：乙腈＝2:3，体积比)，得到灰白色固体化合物N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-8-(3-氟咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺(5mg，收率9.7％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64–9.62(m,1H),9.57(s,1H),9.13(s,1H),8.80(dd,J＝ 7.3,1.1Hz,1H),8.28(dd,J＝6.8,1.1Hz,1H),7.45(d,J＝7.2Hz,1H),7.19(t,J＝7.0Hz,1H), 6.96(dd,J＝10.3,8.7Hz,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.77(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H), 3.32(d,J＝8.Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 419.9[M+H]+.
按照实施例42的方法，以8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并 [4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸乙酯为原料水解可以得到如下化合物：
实施例44：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸
Figure BDA0002633742990000881
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,1H),9.32(s,1H),8.74(d,J＝7.3Hz,1H),8.10(s, 1H),7.21(t,J＝7.1Hz,1H),6.90-6.81(m,1H),6.62(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.75(s,2H),4.52(t, J＝8.7Hz,2H),3.35(t,J＝8.7Hz,2H),2.79(d,J＝6.8Hz,3H)ppm；LCMS:m/z460.0[M+H]+.
按照实施例43的方法，以中间体8-5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸为原料可以得到如下化合物：
实施例45：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(3-氟-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000882
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(s,1H),9.44(s,1H),9.02(s,1H),8.60(d,J＝7.4Hz, 1H),7.42(d,J＝7.0Hz,1H),6.96(dd,J＝10.3,8.7Hz,1H),6.89(d,J＝7.5Hz,1H),6.71(dd,J＝ 8.6,3.9Hz,1H),4.76(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.32(d,J＝8.8Hz,2H),2.77(d,J＝6.8Hz, 3H)ppm；LCMS:m/z 434.0[M+H]+.
按照实施例43的方法，以中间体6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸为原料可以得到如下化合物：
实施例46：8-(3,6-二氟咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000891
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),9.56(s,1H),9.05(s,1H),8.93(dd,J＝11.3, 2.4Hz,1H),8.58(t,J＝2.9Hz,1H),7.53(d,J＝7.2Hz,1H),7.07-6.88(m,1H),6.72(dd,J＝8.7, 3.9Hz,1H),4.79(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.30(s,1H)ppm；LCMS:m/z438.0[M+H]+.
实施例47：乙基8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)-2-羟基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯
Figure BDA0002633742990000892
在25mL密封管中一次加入E3-3(150mg，0.40mmol)，2-溴丙二酸二乙酯(475mg，1.99mmol)，无水乙醇(6mL)，反应升温至90℃搅拌16小时，反应结束，减压浓缩除去乙 醇，粗品用HPLC纯化得到8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c] 嘧啶-8-基)-2-羟基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸甲酯(8mg，4％收率)。
1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ9.59(d,J＝6.3Hz,1H),9.38(s,1H),8.03(s,1H),7.87(d,J ＝7.6Hz,1H),7.44-7.36(m,1H),6.93-6.85(m,1H),6.67(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.87(s,2H), 4.61(t,J＝8.7Hz,2H),4.40(q,J＝7.1Hz,2H),3.44(t,J＝8.7Hz,2H),1.41(t,J＝7.1Hz,3H) ppm；LCMS:m/z 490.0[M+H]+.
按照实施例47的方法，以中间体E2-2和2-溴丙二酸二乙酯为原料可以得到如下化合物：
实施例48：乙基6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c] 嘧啶-8-基)-2-羟基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯
Figure BDA0002633742990000893
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(t,J＝12.0Hz,1H),8.96(d,J＝11.4Hz,0H),8.67(s, 0H),6.96(t,J＝9.5Hz,1H),6.70(s,1H),6.06(s,5H),4.77(s,1H),4.53(d,J＝8.7Hz,1H), 4.47-4.27(m,1H),3.30(s,3H)ppm；LCMS:m/z 508.0[M+H]+.
实施例49：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基) 咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
Figure BDA0002633742990000901
将甲氧基丙烯腈(110mg，1.32mmol)溶于二氧六环(6mL)和水(2mL)的混合溶剂中。在0℃搅拌下，加入N-溴代琥珀酰亚胺(235mg，1.32mmol)。反应液在0℃下继续搅拌30 分钟，然后加入E3-3(100mg，0.26mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时，然后加热至90℃ 并在该温度下继续搅拌16小时。反应结束，减压浓缩除去溶剂。残余物经快速色谱柱(二 氯甲烷：甲醇＝9：1，体积比)纯化，得到化合物8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈(12mg，11％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.41(s,1H),9.03-8.99(m,1H),8.97(t,J＝5.2 Hz,1H),8.64(dd,J＝6.6,1.0Hz,1H),8.54(s,1H),7.47-7.41(m,1H),7.00-6.93(m,1H),6.72(dd, J＝8.7,3.9Hz,1H),4.78(d,J＝5.0Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.31(s,2H)ppm；LCMS: m/z 427.0[M+H]+.
实施例50：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(三氟甲基)苯并[c][1,2,5]噻二唑-4- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：使用实施例21的方法，以3-溴-4-(三氟甲基)苯-1,2-二胺和中间体B3为原料可 以合成中间体E4-2：
Figure BDA0002633742990000902
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(d,J＝16.9Hz,1H),8.60(dd,J＝9.1,4.5Hz,1H),7.56(s,1H),7.50(d,J＝5.6Hz,1H),6.98(d,J＝8.9Hz,1H),6.73(d,J＝4.4Hz,1H),5.03(s, 1H),4.87(s,1H),4.70(dd,J＝11.4,4.8Hz,2H),4.55(q,J＝8.9Hz,2H),3.29(dd,J＝18.8,10.2 Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 459.7[M+H]+.
步骤二：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(三氟甲基)苯并[c][1,2,5]噻二唑-4- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000911
在25mL单口瓶中依次加入化合物E4-2(20mg，0.043mmol)，氯化亚砜(13.78mg，0.14mmol)，三乙胺(24.26mg，0.188mmol)，二氯甲烷(3mL)，0℃反应2h。反应结束，反应 液减压浓缩，残余物用硅胶柱层析纯化(流动相：乙酸乙酯：甲醇＝15:1)得到化合物N-((5-氟-2,3- 二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(三氟甲基)苯并[c][1,2,5]噻二唑-4-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -5-胺(6mg，28.2％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(s,1H),9.26(d,J＝1.7Hz,1H),9.20(s,1H),9.07(s,1H),8.56(d,J＝3.7Hz,1H),6.98(t,J＝9.5Hz,1H),6.73(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.81(s,2H), 4.56(t,J＝8.7Hz,2H),2.10-1.91(m,2H)ppm；LCMS:m/z 487.4[M+H]+.
实施例51：1-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙烷-1-酮
Figure BDA0002633742990000912
在25mL密封管中一次加入中间体E3-3(50mg，0.13mmol)，3-氯戊烷-2,4-二酮(89mg， 0.66mmol)，无水乙醇(6mL)，反应升温至90℃搅拌4小时，反应结束后，减压浓缩得到的 残余物用快速硅胶柱纯化(洗脱剂为甲醇：乙酸乙酯＝1：20)得到化合物1-(8-(5–(((5-氟-2,3- 二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3- 基)乙-1-酮(4.8mg，8％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.19(s,1H),8.53(s,1H),8.27(s,1H),7.94(s,1H),7.46(s, 1H),6.99(s,1H),6.74(d,J＝8.0Hz,1H),6.58(s,1H),4.87(d,J＝6.3Hz,1H),4.71(s,2H),4.53 (d,J＝7.7Hz,2H),3.33(d,J＝7.0Hz,2H),1.97(d,J＝6.7Hz,2H)ppm；LCMS:m/z431.9 [M+H]+.
按照实施例51的方法，以中间体E2-2为原料可以得到如下化合物：
实施例52：1-(6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧 啶-8-基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙烷-1-酮
Figure BDA0002633742990000921
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(dd,J＝4.7,2.6Hz,1H),9.63(s,1H),9.56(s,1H),9.11(dd,J＝10.6,2.5Hz,1H),9.04(s,1H),6.98(t,J＝9.4Hz,1H),6.73(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H), 4.81(d,J＝4.7Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.31(s,0H),2.81(s,3H),2.65(s,3H)ppm； LCMS:m/z 476.1[M+H]+.
实施例53：8-(2,3-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：2-((3-溴吡啶-2-基)氨基)乙-1-醇E4-3
Figure BDA0002633742990000922
将3-溴-2-氯吡啶(3.00g，15.6mmol)，2-氨基乙-1-醇(3.81g，62.4mmol)溶于吡啶(6mL) 中。将混合物在180℃下搅拌90分钟，反应结束后冷却至室温，向反应液加入饱和碳酸氢钠 溶液，然后二氯甲烷萃取。混合有机相，干燥，浓缩，硅胶柱纯化得到中间体E4-3(3.18g， 94％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.03(dd,J＝4.8,1.6Hz,1H),7.73(dq,J＝7.7,1.6Hz,1H), 6.57–6.45(m,1H),6.12(t,J＝5.6Hz,1H),4.80(t,J＝5.1Hz,1H),3.57(q,J＝5.6,4.5Hz,2H), 3.50–3.38(m,2H)ppm.LCMS:m/z 218.0[M+H]+.
步骤二：(2-((2-羟乙基)氨基)吡啶-3-基)硼酸E4-4
Figure BDA0002633742990000923
在25mL单口瓶中依次加入E4-3(300mg，1.38mmol)，双(频哪醇合)二硼(306mg，1.21mmol)，醋酸钾(118mg，1.21mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(35mg，0.05mmol)，1,4-二氧六环(6mL)，反应升温至90℃于氮气氛围下反应16小时，TLC检测原 料基本转化为E4-4，反应液不处理直接用于下一步。
步骤三：2–((3-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)吡啶-2-基)氨基)乙-1-醇E4-5
Figure BDA0002633742990000931
向上一步反应液中加入B3(302mg，0.83mmol)，碳酸钾(573mg，4.15mmol)，[1,1'-双 (二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(100mg，0.14mmol)和水(3mL)。反应于氮气氛围下升温至 80℃反应5小时，LCMS监测反应结束，降温至室温，加入乙酸乙酯(30mL)稀释溶解，有 机相用水(5mL*2)洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化(流动相：乙 酸乙酯：甲醇＝10:1，体积比)得到化合物E4-5(130mg，收率22％)。
LCMS:m/z 422.0[M+H]+.
步骤四：8-(2,3-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990000932
向25mL茄形瓶中加入E4-5(80mg，0.19mmol)，二甲苯(5mL)。在搅拌状态下滴加二氯亚砜(1.5mL)，反应液在100℃下搅拌16小时。反应结束，过滤，得到固体，溶于二氯 甲烷，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗，浓缩有机相，粗品用HPLC纯化得到8-(2,3-二氢咪唑并 [1,2-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺(4mg， 5％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.99(s,1H),7.98(s,1H),7.52(d,J＝6.8Hz,1H),7.14(d,J＝ 6.3Hz,1H),6.78-6.71(m,1H),6.60(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),6.00(t,J＝6.7Hz,1H),4.61-4.50 (m,4H),4.15(t,J＝10.3Hz,2H),3.78(t,J＝10.4Hz,2H),3.36(t,J＝8.7Hz,2H)ppm；LCMS: m/z 404.0[M+H]+.
实施例54：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(喹啉-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -5-胺
Figure BDA0002633742990000941
在10mL密封管中依次加入B3(50mg，0.14mmol)，喹啉-8-基硼酸(24mg，0.20mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(10.1mg，0.014mmol)，碳酸钾(58.5mg，0.423mmol)， 无水二氧六环(2mL)和水(0.5mL)。氮气保护下封管，在80℃油浴中搅拌2小时。反应结 束后，反应液过滤后旋干。残余物用3ml DMF溶解产物，通过HPLC制备(0.05％三氟乙酸 水溶液：乙腈＝3:7)得到产物N-((5-氟-1,3-二氢异苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(喹啉-8-基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺(21mg，37.5％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(s,1H),8.84(dd,J＝4.1,1.8Hz,1H),8.79(s,1H),8.45 (dd,J＝8.3,1.8Hz,1H),8.11(dd,J＝7.2,1.5Hz,1H),8.04(dd,J＝8.3,1.5Hz,1H),7.97(s,1H), 7.72(dd,J＝8.2,7.2Hz,1H),7.58(dd,J＝8.3,4.1Hz,1H),7.02-6.92(m,1H),6.73(dd,J＝8.6, 3.9Hz,1H),4.76(d,J＝4.7Hz,2H),4.57(t,J＝8.7Hz,2H),3.39(s,5H)ppm；LCMS:m/z 413.0 [M+H]+.
实施例55：5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
步骤一：5-溴苯并[b]噻吩1,1-二氧化物(E5-2)
Figure BDA0002633742990000942
在500mL圆底烧瓶中加入E5-1(10g，46.9mmol)，二氯甲烷(120mL)，和甲酸(85％水溶液，10mL)，室温下缓慢加入双氧水(35％水溶液，16.7mL，141mmol)。反应液在室温 搅拌过夜。反应结束后加入200mL饱和食盐水，用二氯甲烷萃取(200mL*3)。有机层合并 后用无水硫酸钠干燥，过滤旋干得到的残余物用Flash纯化(石油醚：乙酸乙酯＝10:1)得到 白色固体E5-2(9.9g,收率86％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(d,J＝8.0Hz,1H),7.59(d,J＝8.0Hz,1H),7.53(s,1H), 7.18(d,J＝6.9Hz,1H),6.77(d,J＝6.9Hz,1H)ppm；LCMS:m/z 244.9[M+H]+.
步骤二：(1,1-二羟基苯并[b]噻吩-5-基)硼酸(E5-3)
Figure BDA0002633742990000951
干燥的30mL封管中，依次加入E5-2(130mg，0.53mmol)，双联硼酸频那醇酯(188mg，0.74mmol)，加入1,1’-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(23mg，0.032mmol)，醋酸钾(156mg，1.59mmol)溶于5ml干燥的1,4-二氧六环中。氮气鼓泡一分钟，再将反应升至90℃并搅拌 12个小时。冷却至室温，LCMS检测原料基本转化成E5-3，反应未进行后处理，直接一锅法 投入下一步反应。
LCMS:m/z 210.7[M+H]+.
步骤三：5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990000952
上述E5-3的反应液中，依次加入中间体B1(100mg，0.26mmol)，1,1’-双二苯基膦二茂 铁二氯化钯(21mg，0.03mmol)，碳酸钾(76mg，0.54mmol)和H2O(2mL)，氮气鼓泡 一分钟，将反应液升至85℃并搅拌2个小时。冷却至室温，将反应体系缓慢滴加进冰水(30 mL)中，再用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压 浓缩。残余物用Flash纯化(纯乙酸乙酯)得到产物5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环 丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[b]噻吩1,1-二氧化物 (64mg，产率52％)，白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(s,1H),8.36-8.23(m,2H),8.11(s,1H),7.80(d,J＝ 7.9Hz,1H),7.58(d,J＝6.8Hz,1H),7.29(d,J＝6.6Hz,1H),6.82(t,J＝9.4Hz,1H),6.65(d,J ＝6.3Hz,1H),4.86-4.62(m,3H),2.86-2.75(m,1H),0.93-0.81(m,1H),0.05-0.04(m,1H)ppm； LCMS:m/z 461.7[M+H]+.
使用实施例55的方法，以中间体B3和5-溴苯并[b]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例56：5-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基) 苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990000961
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,1H),9.11(s,1H),8.47-8.36(m,2H),8.25(s,1H), 7.93(d,J＝8.0Hz,1H),7.72(d,J＝6.9Hz,1H),7.42(d,J＝6.9Hz,1H),7.00-6.92(m,1H),6.71 (dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.75(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.33-3.29(m,2H)ppm；LCMS: m/z 449.8[M+H]+.
使用实施例55的方法，以中间体B2和5-溴苯并[b]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例57：5-(5-((((1aS,6bS)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990000962
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(s,1H),8.36-8.23(m,2H),8.11(s,1H),7.80(d,J＝ 7.9Hz,1H),7.58(d,J＝6.8Hz,1H),7.29(d,J＝6.6Hz,1H),6.82(t,J＝9.4Hz,1H),6.65(d,J ＝6.3Hz,1H),4.86-4.62(m,3H),2.86-2.75(m,1H),0.93-0.81(m,1H),0.05-0.04(m,1H)ppm； LCMS:m/z 461.7[M+H]+.
使用实施例55的方法，以中间体B3和4-溴苯并[b]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例58：4-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基) 苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990000963
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(s,1H),8.87(s,1H),7.96-7.66(m,4H),7.44(d,J＝ 7.1Hz,1H),7.34(d,J＝7.1Hz,1H),6.97(t,J＝9.4Hz,1H),6.73(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.74 (d,J＝4.5Hz,2H),4.57(t,J＝8.7Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 449.8[M+H]+.
使用实施例55的方法，以中间体B1和4-溴苯并[b]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例59：4-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990000971
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.34(s,1H),8.82(s,1H),7.76-7.51(m,4H),7.26(d,J＝ 7.1Hz,1H),7.17(d,J＝7.1Hz,1H),6.85-6.74(m,1H),6.62(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.84-4.67 (m,3H),0.96-0.80(m,1H),0.00(s,1H)ppm；LCMS:m/z 461.7[M+H]+.
使用实施例55的方法，以中间体B3和5-溴-6-甲基苯并[b]噻吩为原料可以合成以下化合 物：
实施例60：5-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-6-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990000972
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(s,1H),8.78(s,1H),7.85(s,1H),7.69(s,1H),7.62(d, J＝6.9Hz,1H),7.58(s,1H),7.34(d,J＝6.8Hz,1H),6.97(t,J＝9.4Hz,1H),6.72(dd,J＝8.6, 3.9Hz,1H),4.73(d,J＝4.0Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.35(s,2H),2.31(s,3H)ppm； LCMS:m/z 463.7[M+H]+.
使用实施例55的方法，以中间体B3和5-溴-7-氟苯并[b]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例61：7-氟-5-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990000973
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(s,1H),9.07(s,1H),8.44-8.31(m,3H),7.75(dd,J＝ 6.8,2.4Hz,1H),7.50(d,J＝6.7Hz,1H),7.02-6.89(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.76(s, 2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.55(s,2H)ppm；LCMS:m/z 467.7[M+H]+.
使用实施例55的方法，以中间体B2和2-(5-溴苯并[b]噻吩-3-基)乙胺盐酸盐为原料可以 合成以下化合物：
实施例62：3-(2-氨基乙基)-5-(5-((((1aS,6bS)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6- 基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990000981
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(s,1H),9.29(t,J＝5.2Hz,1H),8.56-8.40(m,2H),8.35(s,1H),8.10(s,3H),7.96(d,J＝8.0Hz,1H),7.32(s,1H),6.94(dd,J＝10.3,8.7Hz,1H), 6.77(dd,J＝8.7,3.8Hz,1H),5.01-4.82(m,3H),3.22(q,J＝6.8Hz,2H),3.08(t,J＝7.4Hz,2H), 2.98(dt,J＝9.1,4.5Hz,1H),0.95(dt,J＝9.1,5.8Hz,1H),0.09(ddd,J＝6.1,4.0,1.9Hz,1H) ppm；LCMS:m/z 504.7[M+H]+.
使用实施例55的方法，以中间体B3和5-溴苯并[c]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例63：5-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基) 苯并[c]噻吩2,2-二氧化物
Figure BDA0002633742990000982
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.89(s,1H),8.28(s,1H),8.08(d,J＝6.8Hz,1H),8.01(s,1H), 7.78(d,J＝7.9Hz,1H),7.31(d,J＝6.9Hz,1H),6.90–6.82(m,1H),6.75(d,J＝6.9Hz,1H), 6.68(dd,J＝8.6,4.0Hz,1H),6.17(s,1H),4.84(d,J＝5.4Hz,2H),4.64(t,J＝8.7Hz,2H),3.42(t, J＝8.7Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 449.7[M+H]+
使用实施例55的方法，以中间体B1和5-溴苯并[c]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例64：5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[c]噻吩2,2-二氧化物
Figure BDA0002633742990000983
1H NMR(DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.06(s,1H),8.45–8.36(m,2H),8.25(s,1H),7.93(d,J＝ 8.1Hz,1H),7.71(d,J＝6.9Hz,1H),7.41(d,J＝6.8Hz,1H),6.98–6.90(m,1H),6.78(dd,J＝ 8.7,3.9Hz,1H),4.93(dd,J＝12.5,8.8Hz,2H),2.98–2.89(m,1H),2.03–1.93(m,1H),0.99(dt,J ＝9.0,5.9Hz,1H),0.13(s,1H).
使用实施例55的方法，以中间体B4和5-溴苯并[c]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例65：5-(5-(((6-氟色烷-5-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[c]噻吩 2,2-二氧化物
Figure BDA0002633742990000991
1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.50(s,1H),7.38(d,J＝9.7Hz,1H),7.34-7.26(m,1H),7.22 (d,J＝6.1Hz,1H),7.00(t,J＝7.1Hz,1H),6.58(dd,J＝6.9,2.9Hz,1H),6.06(t,J＝8.1Hz,1H), 6.03-5.90(m,2H),4.51(d,J＝5.5Hz,1H),4.04-3.91(m,2H),3.38-3.28(m,2H),2.17-2.04(m, 2H),1.27-1.14(m,2H)ppm；LCMS:m/z 463.7[M+H]+.
实施例66：6-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-2-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
步骤一：6-溴-2-甲基苯并[b]噻吩E6-2
Figure BDA0002633742990000992
在25mL三口瓶中加入E6-1(1g，4.69mmol)和无水四氢呋喃(10mL)，氮气保护，降温至-70℃，缓慢加入二异丙基氨基锂(2M in THF，3.52mL，7.04mmol)，维持温度继续反应40分钟，缓慢加入碘甲烷(1.33g，9.39mmol)，后升室温反应2小时，反应结束后，加入冰 水(5mL)淬灭，用HCl(1N)调节pH至中性，用乙酸乙酯(10mL)稀释，有机相用饱和 氯化钠溶液(5mL)洗，并用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到粗品E6-2(960mg)，淡黄色 固体，直接用于下一步。
步骤二：6-溴-2-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物(E6-3)
Figure BDA0002633742990000993
在25mL单口瓶中加入中间体E6-2(960mg，4.23mmol)，加入乙酸(10mL)搅拌溶解，加入双氧水(30％水溶液，4.8g，42.27mmol)，升温至100℃反应3h，反应结束后，降温至 室温，加入冰水(8mL)搅拌5-10分钟，用乙酸乙酯(8mL)萃取2次，有机相分别用水(5mL)， 饱和食盐水(5mL)洗1次，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经柱层析(流动 相：石油醚至10％石油醚/乙酸乙酯)得到E6-3(800mg，产率为66％)为白色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.83(s,1H),7.65(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),7.16(d,J＝8.0Hz, 1H),6.75(s,1H),2.21(d,J＝1.7Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 278.7[M+H]+.
步骤三：使用实施例55的方法，以中间体B3和E6-3为原料可以合成以下化合物：
Figure BDA0002633742990001001
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,1H),8.91(s,1H),8.72(s,1H),8.50(dd,J＝8.0,1.4 Hz,1H),8.32(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.28(s,1H),7.01-6.92(m,1H),6.71(dd,J＝8.6, 3.9Hz,1H),4.74(s,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.32(s,2H),2.24-2.09(m,3H)ppm；LCMS: m/z 463.7[M+H]+.
使用实施例66的方法，以中间体B1和5-溴-苯并噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例67：5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-2-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990001002
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),9.06(s,1H),8.34(d,J＝6.6Hz,2H),8.24(s, 1H),7.94(d,J＝8.5Hz,1H),7.31(s,1H),7.07-6.89(m,1H),6.78(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.93 (td,J＝5.3,1.8Hz,1H),4.89(d,J＝3.2Hz,2H),3.00-2.87(m,1H),2.16(d,J＝1.5Hz,3H),0.99 (dt,J＝8.9,6.0Hz,1H),0.13(ddd,J＝5.9,3.9,1.9Hz,1H)ppm；LCMS:m/z475.7[M+H]+
使用实施例66的方法，以中间体B3和4-溴-苯并噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例68：4-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-2-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990001003
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,1H),8.91(s,1H),8.72(s,1H),8.50(dd,J＝8.0,1.4 Hz,1H),8.32(s,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.28(s,1H),7.00-6.90(m,1H),6.71(dd,J＝8.6, 3.9Hz,1H),4.74(s,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.32(s,2H),2.27-2.08(m,3H)ppm；LCMS: m/z 463.7[M+H]+.
使用实施例66的方法，以中间体B3和5-溴-7-氯苯并噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例69：7-氯-5-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)-2-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990001011
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.58(s,1H),8.81(s,1H),8.12(s,1H),8.03(d,J＝11.7Hz, 2H),6.91–6.75(m,2H),6.71(d,J＝4.7Hz,1H),4.93(s,2H),4.85(s,1H),2.93(s,1H),2.59(s, 1H),2.25(s,3H),1.04(s,1H).
使用实施例66的方法，以中间体B3和5-溴-7-氟苯并噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例70：7-氟-5-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)-23-二甲基苯并[b]噻吩11-二氧化物
Figure BDA0002633742990001012
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,1H),9.00(t,J＝4.9Hz,1H),7.72(s,1H),7.45(s, 1H),7.28(s,1H),7.03-6.90(m,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.74(d,J＝4.8Hz,2H),4.55 (t,J＝8.7Hz,2H),3.33(d,J＝8.9Hz,2H),2.17(dd,J＝7.2,1.6Hz,6H)ppm；LCMS:m/z 495.7 [M+H]+.
实施例71：5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-3-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
步骤一：1-((4-溴苯基)硫代)丙烷-2-酮(E7-2)
Figure BDA0002633742990001013
在50mL单口瓶中依次加入化合物E7-1(800mg，4.23mmol)，溴丙酮(638mg，4.65mmol) 和碳酸钾(1.75g，12.7mmol)，乙腈(15mL)，反应升温至75℃搅拌3小时，降温至室温， 加入水(30mL)，用乙酸乙酯(50mL*2)萃取，有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩，粗品用 硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯：甲醇＝5:1)得到化合物E7-2(960mg，收率92％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.55-7.45(m,2H),7.32-7.20(m,2H),4.05(s,2H),2.21(s, 3H).ppm；LCMS:m/z 244.8[M+H]+.
步骤二：5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩(E7-3)
Figure BDA0002633742990001021
在50mL茄形瓶中依次加入E7-2(260mg，1.06mmol)，氯苯(20mL)，多聚磷酸(5mL)，反应升温至135℃搅拌20小时，TLC监测反应结束，将反应液倒入冰水(30mL)中，然后 用二氯甲烷萃取(40mL*3)，合并有机相，减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化纯化(洗脱剂： 乙酸乙酯：甲醇＝5:1)得到化合物E7-3(200mg，83％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(d,J＝1.6Hz,1H),7.61(d,J＝8.5Hz,1H),7.36(s,1H), 7.02(s,1H),2.33(d,J＝1.0Hz,3H)ppm.
步骤三：5-溴-3-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物(E7-4)
Figure BDA0002633742990001022
在50mL单口瓶中依次加入化合物E7-3(200mg，0.88mmol)，二氯甲烷(4mL)，甲酸(1mL，85％水溶液)，双氧水(0.5mL，35％水溶液)，反应于室温下搅拌过夜，反应结束后 向反应液中加水(10mL)，用二氯甲烷(20mL*2)萃取，有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩， 得到化合物E7-4(210mg，收率92％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.89(s,1H),7.87-7.76(m,2H),7.21-7.16(m,1H),2.37-2.19(m,3H)ppm；LCMS:m/z 260.7[M+H]+.
步骤四：使用实施例55的方法，以中间体B1和E7-4为原料可以合成以下化合物：
Figure BDA0002633742990001023
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(s,1H),8.96(s,1H),8.41(d,J＝8.4Hz,1H),8.23(s, 2H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.03(d,J＝1.3Hz,1H),6.86-6.80(m,1H),6.66(dd,J＝8.7,3.9Hz, 1H),4.85-4.74(m,3H),2.85-2.79(m,1H),2.23(s,3H),0.89-0.83(m,1H),-0.00(s,1H)ppm； LCMS:m/z 475.7[M+H]+.
实施例72：2-氟-5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基) 氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
步骤一：5-溴-2-氟苯并[b]噻吩(E8-2)
Figure BDA0002633742990001031
在25mL三口瓶中加入E8-1(500mg，2.35mmol)和无水四氢呋喃(10mL)，氮气保护，降温至-70℃，缓慢加入二异丙基氨基锂(2M in THF，1.5mL，3mmol)，维持温度继续反应 40分钟，缓慢加入N-氟代双苯磺酰胺(2.2g，2.35mmol)，升至室温反应过夜，反应结束 后，加入冰水(30mL)淬灭，用乙酸乙酯(20mL X2)萃取，有机相用饱和氯化钠溶液(5mL) 洗，并用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物用Flash纯化(洗脱剂：100％石油醚)，得到淡 黄色固体E8-2(170mg，收率31％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69(d,J＝1.8Hz,1H),7.44(d,J＝8.6Hz,1H),7.33(dd,J＝ 8.6,1.9Hz,1H),6.58(d,J＝2.3Hz,1H).
使用实施例55的方法，以中间体B1和E8-2为原料可以合成以下化合物：
Figure BDA0002633742990001032
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.27(s,1H),8.19(s,1H),8.00(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),7.94(s, 1H),7.80(s,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),6.74(d,J＝10.0Hz,1H),6.65(d,J＝4.0Hz,1H),6.59 (d,J＝2.0Hz,1H),4.92-4.84(m,2H),4.81-4.77(m,1H),2.87(dd,J＝9.2,4.7Hz,1H),1.01-0.99 (m,1H),0.32-0.26(m,1H)ppm；LCMS:m/z 479.7[M+H]+.
实施例73：2-氟-5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基) 氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-3-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
使用实施例72的方法，以中间体B1和E7-3为原料可以合成以下化合物：
Figure BDA0002633742990001041
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.88(s,1H),8.21(s,1H),8.11-8.03(m,1H),8.02(s,1H),7.69 (d,J＝8.0Hz,1H),6.87-6.77(m,1H),6.71(dd,J＝8.7,4.0Hz,1H),6.18(s,1H),5.00(ddd,J＝ 51.2,14.3,5.5Hz,2H),4.88(td,J＝5.4,1.9Hz,1H),3.04-2.86(m,1H),2.21(d,J＝3.2Hz,3H), 1.16-1.06(m,1H),0.41-0.30(m,1H)ppm；LCMS:m/z 493.7[M+H]+.
使用实施例55的方法，以中间体B1和5-溴-3-氟苯并[b]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例74：3-氟-5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基) 氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990001042
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.13(s,1H),8.56-8.38(m,2H),8.26(s,1H), 7.97(dd,J＝8.2,2.4Hz,1H),7.43(d,J＝3.1Hz,1H),6.91-6.77(m,1H),6.66(dd,J＝8.7,3.9 Hz,1H),4.85-4.80(m,1H),4.78(d,J＝4.6Hz,2H),2.94-2.79(m,1H),0.92-0.80(m,1H),0.00(t, J＝4.1Hz,1H)ppm；LCMS:m/z 479.6[M+H]+.
使用实施例66的方法，以中间体B1和5-溴-3-氟苯并[b]噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例75：3-氟-5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基) 氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-2-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990001043
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.09(s,1H),8.26-8.19(m,1H),8.16(s,1H),8.02(s,1H),7.79 (dd,J＝8.0,2.3Hz,1H),6.91(s,1H),6.76(d,J＝8.8Hz,1H),6.69-6.57(m,1H),4.97(ddd,J＝ 42.7,14.3,5.3Hz,2H),4.84(td,J＝5.4,1.8Hz,1H),3.03-2.85(m,1H),2.15(s,3H),1.08(dt,J＝ 8.8,6.2Hz,1H),0.33(ddd,J＝6.1,4.0,1.9Hz,1H)ppm；LCMS:m/z 493.7[M+H]+.
使用实施例66的方法，以中间体B1和5-溴-7-氯苯并噻吩为原料可以合成以下化合物：
实施例76：3-氯-5-(5-((((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基) 氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-2-甲基苯并[b]噻吩1,1-二氧化物
Figure BDA0002633742990001051
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.96(s,1H),8.34-8.19(m,2H),8.05(s,1H),7.82(d,J＝7.9 Hz,1H),6.89-6.75(m,1H),6.70(dd,J＝8.7,4.0Hz,1H),6.45(s,1H),5.12-4.91(m,2H), 4.91-4.82(m,1H),3.02-2.89(m,1H),2.26(s,3H),1.15-1.08(m,1H),0.45-0.28(m,1H)ppm； LCMS:m/z 509.6[M+H]+.
实施例77：甲基8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-5-羧酸酯
步骤一：中间体(2-氨基-6-(甲氧羰基)吡啶-3-基)硼酸E9-2
Figure BDA0002633742990001052
在25mL单口瓶中依次加入化合物E9-1(200mg,0.87mmol)，双(频哪醇合)二硼(439mg,1.73mmol)，醋酸钾(212mg,2.16mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(63mg,0.09mmol)，1,4-二氧六环(10mL)，反应升温至90℃于氮气氛围下反应16小时，LCMS监测反应结束，直接用于下一步。
LCMS:m/z 196.9[M+H]+.
步骤二：中间体甲基6-氨基-5-(5-((((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)氨基]-[1,2,4] ***[4,3-c]嘧啶-8-吡啶基吡啶甲酸E9-3
Figure BDA0002633742990001053
向上一步反应液中加入中间体B3(315mg,0.87mmol)，碳酸钾(359mg,2.60mmol)，[1,1'-双 (二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(63mg,0.09mmol)，水(3mL)，反应升温至80℃于氮气氛围下反 应5h，检测反应结束，降温至室温，加入乙酸乙酯(30mL)稀释溶解，有机相用水(5mL*2)洗， 有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩，粗品用硅胶柱层析纯化(流动相：乙酸乙酯：甲醇＝10:1) 得到化合物E9-3(260mg，收率69％)。
LCMS:m/z 436.1[M+H]+.
步骤三：使用实施例21步骤三的方法，以中间体E9-2和2-氯乙醛为原料可以合成甲基 8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡 啶-5-羧酸酯：
Figure BDA0002633742990001061
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.79(s,1H),9.55(s,1H),9.05(s,1H),8.93(d,J＝7.9Hz, 1H),8.90(d,J＝1.3Hz,1H),8.01(d,J＝7.9Hz,1H),7.86(d,J＝1.3Hz,1H),6.98–6.94(m,1H), 6.72(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.80(s,2H),4.56(t,J＝8.6Hz,2H),3.99(s,3H),3.33(s,2H)ppm； LCMS:m/z 459.9[M+H]+.
实施例78：(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)咪唑并[1,2-a]吡啶-5-基)甲醇
步骤一：中间体(6-氨基-5-(5-((((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基]氨基)氨基]-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-8-基)吡啶-2-基)甲醇E9-4
Figure BDA0002633742990001062
将E9-3(50mg，0.11mmol)溶于四氢呋喃(10mL)中，在0℃下加入氢化铝锂(22mg,0.57mmol)。反应在室温下搅拌16h。反应结束，加入水(10mL)淬灭，用乙酸乙酯萃取(30mL x2)，有机相干燥，浓缩，得到目标化合物E9-4(35mg，收率76％)。
LCMS:m/z 408.1[M+H]+.
步骤二：使用实施例21步骤三的方法，以中间体E9-4和2-氯乙醛为原料可以合成(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡 啶-5-基)甲醇
Figure BDA0002633742990001063
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝1.1Hz,2H),8.98(s,1H),8.79(d,J＝7.4Hz,1H),7.99(d,J＝1.3Hz,1H),7.72(d,J＝1.3Hz,1H),7.10(d,J＝7.5Hz,1H),7.01–6.93(m,1H), 6.71(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),5.78(t,J＝5.7Hz,1H),4.82(d,J＝5.7Hz,2H),4.77(s,2H),4.55(t, J＝8.7Hz,2H),3.28(s,2H)ppm；LCMS:m/z 432.0[M+H]+.
使用实施例21步骤一和步骤二的方法，以3-溴-6-甲基吡啶-2-胺和中间体B3为原料可以 合成中间体E10-1:
Figure BDA0002633742990001071
1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.28(s,1H),7.73(s,1H),7.50(d,J＝7.5Hz,1H),7.39(d,J＝ 2.5Hz,1H),6.85(t,J＝9.3Hz,1H),6.71–6.62(m,2H),4.77(s,2H),4.63(t,J＝8.7Hz,2H),4.00 (s,2H),3.38(d,J＝8.2Hz,2H),2.43(s,3H)ppm；LCMS:m/z 392.1[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以中间体E10-1和2-氯-3-甲基丁醛为原料可以合成如下 化合物：
实施例79：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(3-异丙基-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶 -8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001072
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.85(s,1H),9.56(s,1H),9.00(s,1H),8.95(dd,J＝11.1, 2.3Hz,1H),8.78–8.74(m,1H),8.05(s,1H),7.72(s,1H),7.00–6.94(m,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.8 Hz,1H),4.79(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.35(s,2H)ppm；LCMS:m/z420.0[M+H]+.
实施例80：甲基2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c] 嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酸酯
步骤一：甲基3-氯-4-羰基丁酸酯E11-2
Figure BDA0002633742990001073
在干燥的100mL单口瓶中依次加入E11-1(290mg,2.5mmol)和的氯仿(9mL)，在冰浴下搅拌加入L-脯氨酸(57.57mL,0.5mmol)和N-氯代丁二酰亚胺(400mg，3mmol)。反 应温度升到室温并在室温搅拌反应3小时，得到粗品E11-2的氯仿溶液。反应液不做处理直 接用于下一步。
步骤二：使用实施例21的方法，以E11-2和中间体E10-1为原料可以合成如下化合物 E11-3：
Figure BDA0002633742990001081
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.40(s,1H),8.79(t,J＝4.9Hz,1H),8.52(d,J ＝7.4Hz,1H),7.52(s,1H),7.01–6.91(m,1H),6.84(d,J＝7.8Hz,1H),6.71(dd,J＝8.7,3.9Hz, 1H),4.77(d,J＝4.6Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.42(s,2H),3.69(s,3H),3.31(s,2H),2.78 (s,3H)ppm；LCMS:m/z 488.0[M+H]+.
实施例81：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙烷-1-醇E11-4
Figure BDA0002633742990001082
在干燥的25mL单口瓶中依次加入E11-3(30mg，0.06mmol)和的四氢呋喃(5mL)， 在冰浴下搅拌加入氢化铝锂(11.39mg，0.3mmol)。反应温度升到室温并在室温搅拌反应1 小时。反应完毕后,反应液冷却到0摄氏度，用水淬灭。用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并有 机相,无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，最后用制备高效液相纯化获得化合物E11-4(15mg，54.4％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(s,1H),9.42(s,1H),8.76(t,J＝5.0Hz,1H),8.47(d,J ＝7.4Hz,1H),7.43(s,1H),6.95(d,J＝9.7Hz,1H),6.79(d,J＝7.6Hz,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.9 Hz,1H),4.88(t,J＝5.2Hz,1H),4.76(d,J＝4.9Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.79–3.75(m, 2H),3.41(d,J＝6.8Hz,2H),3.31(s,2H),2.91(s,3H)ppm；LCMS:m/z 460.0[M+H]+.
实施例82：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙基乙酸酯
Figure BDA0002633742990001083
将E11-4(20mg)溶于吡啶(1mL)，加入4-二甲氨基吡啶(2mg)和乙酸酐(10mg)，室温搅拌过夜。反应液加入二氯甲烷(10mL)和水(10mL)，用二氯甲烷(10mL*3)萃取。 有机层用硫酸钠干燥后旋干。黄色固体用乙酸乙酯(2mL)搅拌洗涤得到白色固体2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶 -3-基)乙基乙酸酯(13mg，收率59.5％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.41(s,1H),8.78(s,1H),8.50(d,J＝7.3Hz, 1H),7.44(s,1H),6.96(t,J＝9.4Hz,1H),6.82(d,J＝7.5Hz,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H), 4.76(d,J＝3.6Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.39(t,J＝6.7Hz,2H),3.61(t,J＝6.7Hz,2H), 3.32–3.28(m,2H),2.91(s,3H),2.03(s,3H)ppm；LCMS:m/z 502.0[M+H]+.
实施例83：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酰胺
Figure BDA0002633742990001091
在20mL密封管中加入E11-3(40mg，0.082mmol)，氨甲醇饱和溶液(8mL)。混合物在85℃下搅拌16小时。反应结束后冷却，析出白色固体，过滤并用乙酸乙酯洗涤，得到目标 化合物2-(8-(5-((((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)氨基]-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酰胺(26mg，收率67％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(d,J＝1.4Hz,1H),9.41(d,J＝13.3Hz,1H),8.50(d, J＝7.4Hz,1H),7.52(s,1H),7.46(s,1H),7.10(s,2H),7.01–6.91(m,1H),6.80(d,J＝7.3Hz,1H), 6.71(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.77(d,J＝3.9Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.07(s,2H),3.32 (d,J＝8.8Hz,2H),2.85(s,3H).ppm；LCMS:m/z 473.1[M+H]+.
实施例84：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-N,N-二甲基乙酰胺
步骤一：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酸E11-5
Figure BDA0002633742990001092
在25mL单口瓶中依次加入E11-3(30mg,0.06mmol)和甲醇(3mL)，加入氢氧化钠(24mg,0.6mmol)的水(1mL)溶液。在室温搅拌反应1小时。反应完毕后，用1M的HCl 调PH到7，析出白色固体。白色固体用水和甲醇洗涤，真空干燥后得到纯品E11-5(12mg， 42.2％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.43(s,1H),8.79(s,1H),8.49(d,J＝7.4Hz, 1H),7.42(s,1H),7.01–6.92(m,1H),6.78(d,J＝7.5Hz,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.76 (s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.10(s,2H),3.27–3.14(m,2H),2.86(s,3H)ppm；LCMS:m/z 474.1[M+H]+.
步骤二：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[12-a]吡啶-3-基)-NN-二甲基乙酰胺
Figure BDA0002633742990001101
在干燥的25mL单口瓶中依次加入E11-5(20mg,0.04mmol)和的二甲基甲酰胺(2mL)， 依次加入盐酸二甲胺(2.16mg,0.05mmol)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷 酸酯(20mg，0.05mmol)和三乙胺(12.14mg，0.12mmol)。在室温搅拌反应1小时。反应 结束后缓慢滴加水(10mL)析出白色固体。白色固体用水和甲醇洗涤得到纯品2-(8-(5-(((5- 氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶 -3-基)-N,N-二甲基乙酰胺(5mg，收率25.7％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(s,1H),9.44(s,1H),8.77(s,1H),8.50(d,J＝7.4Hz, 1H),7.38(s,1H),6.96(t,J＝9.4Hz,1H),6.77(d,J＝7.6Hz,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.7Hz,1H), 4.76(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.36(s,2H),3.31–3.25(m,2H),3.13(s,3H),2.88(d,J＝9.9 Hz,3H),2.75(s,3H)ppm；LCMS:m/z 501.1[M+H]+.
使用实施例6的方法，以8-溴-5-甲基[1,2,4]-***并[1,5-a]吡啶和中间体B1为原料可以合 成以下化合物：
实施例85：N-(((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)-8-(5-甲基 -[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001102
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,1H),9.45(s,1H),9.11(d,J＝7.7Hz,1H),9.04(s, 1H),8.63(s,1H),7.29(dd,J＝7.7,1.1Hz,1H),6.96(dd,J＝10.3,8.7Hz,1H),6.78(dd,J＝8.7, 3.9Hz，1H)，5.00–4.85(m，3H)，2.97(dt，J＝9.1，4.5Hz，1H)，2.79(s，3H)，1.02(dt，J＝9.0，5.9Hz，1H),0.14(ddd,J＝6.1,4.0,1.9Hz,1H)ppm；LCMS:m/z 429.0[M+H]+.
使用实施例6的方法，以8-溴-5-甲基[1,2,4]-***并[1,5-a]吡啶和中间体B3为原料可以合 成以下化合物：
实施例86：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001111
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(s,1H),9.45(s,1H),9.11(d,J＝7.7Hz,1H),8.90(t,J ＝5.0Hz,1H),8.64(d,J＝9.7Hz,1H),7.28(d,J＝7.8Hz,1H),7.02–6.92(m,1H),6.72(dd,J＝ 8.6,3.9Hz,1H),4.78(d,J＝4.9Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.35(s,2H),2.79(s,3H)ppm； LCMS:m/z 417.0[M+H]+.
使用实施例6的方法，以8-溴-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶和中间体B1为原料可以合成以下 化合物：
实施例87：N-(((1aR,6bR)-5-氟-1a,6b-二氢-1H-环丙烯并[b]苯并呋喃-6-基)甲基)-8-(5-甲基 咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001112
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.99(d,J＝7.0Hz,1H),8.87(d,J＝6.1Hz,1H),8.58(d,J＝ 7.5Hz,1H),8.31(d,J＝3.7Hz,1H),7.52(t,J＝5.2Hz,1H),7.01(d,J＝7.5Hz,1H),6.73(dd,J ＝10.0,8.8Hz,1H),6.64(dd,J＝8.7,4.0Hz,1H),4.95(dd,J＝14.2,5.5Hz,1H),4.89–4.74(m, 2H),3.08–2.96(m,1H),2.83(s,3H),1.08–1.00(m,1H),0.28(ddd,J＝6.2,4.0,1.9Hz,1H) ppm；LCMS:m/z 428.1[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以2-氯乙醛和中间体E10-1为原料可以合成以下化合物：
实施例88：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001113
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,1H),9.52(s,1H),8.81(s,1H),8.75(d,J＝7.4Hz, 1H),7.93(s,1H),7.73(s,1H),6.97(dd,J＝13.0,5.9Hz,2H),6.71(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.77 (s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),2.67(s,3H),2.33(s,2H)ppm；LCMS:m/z416.0[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以3-乙酰氨基丙醛和中间体E10-1为原料可以合成以下化 合物：
实施例89：N-((8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)甲基)乙酰胺
Figure BDA0002633742990001121
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.51(s,1H),9.40(s,1H),8.78(s,1H),8.55(d,J＝7.4Hz,1H), 8.38(s,1H),7.57(s,1H),7.00–6.94(m,1H),6.87(d,J＝7.7Hz,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.9Hz, 1H),4.86–4.71(m,4H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.31(s,2H),2.86(s,3H),1.86(s,3H)ppm； LCMS:m/z 487.0[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以3-乙酰氨基丙醛和中间体E10-1为原料可以合成化合物 甲基8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪 唑并[1,2-a]吡啶-2-羧酸酯E12-1：
Figure BDA0002633742990001122
1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.74(s,1H),8.51(s,1H),8.26(s,1H),8.05(d,J＝7.4Hz,1H), 7.35(d,J＝7.2Hz,1H),6.83(t,J＝9.4Hz,1H),6.66(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.65(d,J＝8.7Hz, 2H),4.16(s,3H),3.46(t,J＝8.7Hz,2H),2.89(s,3H)ppm；LCMS:m/z 428.1[M+H]+.
使用实施例81的方法，以E12-1为原料用氢化铝锂还原得到以下化合物：
实施例90：(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)甲醇
Figure BDA0002633742990001123
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),9.53(s,1H),8.81(s,1H),8.73(d,J＝7.4Hz, 1H),7.75(s,1H),6.96(dd,J＝20.7,8.6Hz,2H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),5.27(t,J＝5.6Hz, 1H),4.78(s,2H),4.69(d,J＝5.7Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.29(s,2H),2.64(s,3H)ppm； LCMS:m/z 446.0[M+H]+.
实施例91：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-N,N,5-三甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰胺
Figure BDA0002633742990001131
在干燥的25mL的三口瓶中加入干燥的四氢呋喃(2mL)和二甲胺的四氢呋喃溶液(0.1 mL,0.2mmol)，冰水浴下加入三甲基铝的甲苯溶液(0.07mL,0.14mmol)。冰水浴中搅拌10 分钟后加入E12-1(47mg,0.1mmol，溶于2mL四氢呋喃)。反应液回流2小时，降至室温，缓慢加入冰水(5mL)，用二氯甲烷(10mL*3)萃取。有机层用盐水(10mL)洗，用无水硫酸 钠干燥后旋干得到黄色固体。黄色固体用乙酸乙酯洗涤，得到白色纯品8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-N,N,5-三甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-2- 甲酰胺(33mg，0.068mmol)，68％收率。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.22(s,1H),9.07(s,1H),8.27(s,1H),7.86(d,J＝7.2Hz,1H), 7.57(s,2H),6.89(d,J＝7.3Hz,1H),6.77–6.66(m,1H),6.62(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.83(d,J ＝14.2Hz,1H),4.74(dd,J＝11.1,5.7Hz,2H),3.11–3.02(m,1H),2.69(s,3H),1.00(dt,J＝8.9, 6.1Hz,1H),0.24–0.15(m,1H)ppm；LCMS:m/z 487.1[M+H]+.
使用实施例21步骤三的方法，以2-氯-3-氧代丙酸乙酯和中间体E10-1为原料可以合成 以下化合物：
实施例92：乙基8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯
Figure BDA0002633742990001132
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),9.21(s,1H),8.87(t,J＝5.1Hz,1H),8.76(d,J ＝7.6Hz,1H),8.32(s,1H),7.21(d,J＝7.7Hz,1H),7.03–6.92(m,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz, 1H),4.77(d,J＝5.0Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.35(q,J＝7.1Hz,2H),3.17(d,J＝5.3Hz, 2H),2.77(s,3H),1.36(t,J＝7.1Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 488.1[M+H]+.
使用实施例92的方法，以二甲胺的四氢呋喃溶液和乙基8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃 -4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯(实施例92) 为原料可以合成以下化合物：
实施例93：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-N,N,5-三甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0002633742990001141
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.96(s,1H),8.92(s,1H),8.41(s,1H),7.93(d,J＝7.3Hz,1H), 7.64(s,1H),6.76(d,J＝7.5Hz,1H),6.64(t,J＝9.3Hz,1H),6.52(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.60 (d,J＝4.7Hz,2H),4.54(t,J＝8.7Hz,2H),3.37(t,J＝8.6Hz,2H),3.24(d,J＝18.8Hz,6H),2.58 (s,3H)ppm；LCMS:m/z 487.1[M+H]+.
使用实施例6的方法，以4-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑和中间体B3为原料可以合成以下 化合物：
实施例94：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001142
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,1H),9.27(s,1H),8.58(d,J＝7.5Hz,1H),8.30(s, 1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(t,J＝7.8Hz,1H),7.03–6.92(m,1H),6.73(dd,J＝8.6,3.8Hz, 1H),4.79(s,2H),4.57(t,J＝8.7Hz,2H),3.92(s,3H),3.35(d,J＝8.7Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 416.0[M+H]+.
实施例95：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-N,N-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲酰胺
步骤一：6-氨基-5-溴-N,N-二甲基甲基吡啶酰胺E13-1
Figure BDA0002633742990001151
在25mL圆底烧瓶中加入甲基6-氨基-5-溴吡啶-2-羧酸酯(100mg,0.43mmol)和二氯甲 烷(5mL)，搅拌溶解后冰水浴下加入二氯化镁(49mg,0.52mmol)。所得的混悬液冰水浴下 继续搅拌5分钟后加入二甲胺的二氯甲烷溶液(2M,0.35mL)。常温搅拌6小时后，LCMS 监测原料基本全都转化成所需产物。反应液旋干，得到白色固体，用水洗涤除去无机物。过 滤得到的白色固体在高真空下干燥后得到E13-1(88mg，收率83.8％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.73(d,J＝7.9Hz,1H),6.80(d,J＝7.9Hz,1H),5.02(s,2H), 3.09(s,3H),3.04(s,3H)ppm；LCMS:m/z 244.0[M+1]+.
步骤二：使用实施例21的方法，以E13-1和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-N,N-二甲 基咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲酰胺
Figure BDA0002633742990001152
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.14(s,1H),8.86(s,1H),8.58(s,1H),8.00(d,J＝7.3Hz,1H), 7.80(s,1H),7.50(s,1H),7.00(d,J＝7.3Hz,1H),6.73(t,J＝9.3Hz,1H),6.60(dd,J＝8.6,3.7 Hz,1H),4.70(s,2H),4.56(t,J＝8.6Hz,2H),3.39(t,J＝8.6Hz,2H),3.19(d,J＝35.5Hz,6H) ppm；LCMS:m/z 473.1[M+H]+.
实施例96：6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
步骤一：(Z)-2-溴-3-甲氧基丙烯腈E14-1
Figure BDA0002633742990001153
在25mL圆底烧瓶中加入3-甲氧基丙烯腈(2.0g,24.4mmol)，1，4二氧六环(30mL)和水(10mL)。冰水浴下，N-溴代琥珀酰亚胺(980mg,24.4mmol)在15分钟内分批加入。反 应液在冰水浴下搅拌半小时后撤去冰水浴。反应继续在常温下搅拌过夜得到E14-1的二氧六 环液体，不做处理直接用于下一步。
步骤二：6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
Figure BDA0002633742990001161
在上一步的反应液中加入8-(2-氨基-5-氟吡啶-3-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺E2-2(780mg,2.0mmol)，反应液回流10小时。冷却静置5 小时，有褐色固体析出。过滤后得到褐色固体，用少量的冷甲醇搅拌洗涤并过滤得到黄色固 体，经过真空干燥后得到6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并 [4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈(490mg，55％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),9.57(s,1H),9.17(dd,J＝11.0,2.2Hz,1H), 9.10(t,J＝4.9Hz,1H),8.96-8.83(m,1H),8.53(s,1H),6.99-6.86(m,1H),6.70(dd,J＝8.6,3.8 Hz,1H),4.80(d,J＝4.8Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.35(d,J＝9.0Hz,2H)ppm；LCMS: m/z 445.1[M+H]+.
使用实施例84步骤二的方法，以甲基2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酸酯E11-3和***啉为原 料可以合成以下化合物：
实施例97：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-1-吗啉代乙烷-1-酮
Figure BDA0002633742990001162
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.43(s,1H),8.77(t,J＝5.0Hz,1H),8.51(d,J ＝7.4Hz,1H),7.40(s,1H),7.01-6.93(m,1H),6.78(d,J＝7.6Hz,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.9Hz, 1H),4.77(d,J＝5.0Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.40(s,2H),3.65(s,2H),3.60(dd,J＝9.5, 5.2Hz,4H),3.50(d,J＝4.8Hz,2H),3.31(s,2H),2.75(d,J＝14.2Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 544.0[M+H]+.
使用实施例21的方法，以3-溴-6-(三氟甲基)吡啶-2-胺和中间体B3为原料可以合成以下 化合物：
实施例98：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001171
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.74(s,1H),9.56(s,1H),9.06(s,1H),8.95(d,J＝7.8Hz,1H),8.14(s,1H),7.90(d,J＝1.3Hz,1H),7.78(d,J＝7.9Hz,1H),6.98(s,1H),6.74(d,J＝ 3.9Hz,1H),4.80(s,2H),4.56(t,J＝8.8Hz,2H),3.37(s,2H)ppm；LCMS:m/z 470.1[M+H]+.
使用实施例84步骤二的方法，以***啉和8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸(实施例44)为原料可以 合成以下化合物：
实施例99：(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)(吗啉代)甲酮
Figure BDA0002633742990001172
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.25(s,1H),8.62(s,1H),8.23(s,1H),7.71(s,1H),7.55-7.41 (m,1H),6.89-6.67(m,2H),6.60(dd,J＝8.5,3.7Hz,1H),4.71(s,2H),4.59(t,J＝8.7Hz,2H), 3.78(d,J＝31.2Hz,8H),3.40(t,J＝7.8Hz,2H),2.62(s,3H)ppm；LCMS:m/z529.2[M+H]+.
使用实施例6的方法，以8-溴-5-氯-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶和中间体B3为原料可以合成 以下化合物：
实施例100：8-(5-氯-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001173
1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.40-9.30(m,1H),9.25-9.19(m,1H),8.88(dd,J＝9.3,7.4Hz, 1H),8.53-8.47(m,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,2H),6.84(dd,J＝17.3,7.3Hz,1H),6.70-6.64(m,1H), 4.82(d,J＝18.0Hz,1H),4.63(dd,J＝20.5,11.7Hz,1H),3.45(d,J＝17.4Hz,2H)ppm；LCMS: m/z 437.0[M+H]+.
使用实施例84步骤二的方法，以氯化氨和8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸(实施例44)为原料缩合 可以合成以下化合物：
实施例101：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0002633742990001181
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),9.33(s,1H),8.83(d,J＝4.9Hz,1H),8.71(d, J＝7.5Hz,1H),8.19(s,1H),8.00(s,1H),7.59(s,1H),7.07(d,J＝8.2Hz,1H),7.01-6.92(m,1H), 6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.77(d,J＝5.0Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.35(s,2H),2.69 (d,J＝14.5Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 459.1[M+H]+.
实施例102：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
Figure BDA0002633742990001182
在25mL圆底烧瓶中加入8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺(实施例101)(30mg,0.07mmol)和无 水四氢呋喃(2ml)，在冰水浴下加入三氟乙酸酐(29mg，0.14mmol)和三乙胺(14mg，0.14mmol)。 反应常温下搅拌过夜，反应液旋干后得到黄色固体，用甲醇洗涤过滤得到白色固体。真空干 燥后得到纯的8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈(24mg,80％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),9.23(s,1H),8.91(t,J＝4.9Hz,1H),8.81(d,J ＝7.6Hz,1H),8.56(s,1H),7.21(d,J＝7.7Hz,1H),7.00-6.92(m,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.8Hz, 1H),4.77(d,J＝4.9Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.35(s,2H),2.99(s,3H)ppm；LCMS:m/z 441.1[M+H]+.
实施例103：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(三氟甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a] 吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：N-(3-溴-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-N'-羟基甲酰亚胺E15-1
Figure BDA0002633742990001191
向3-溴-6-(三氟甲基)吡啶-2-胺(400mg，1.46mmol)的异丙醇(10mL)混合物溶液中 加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(300mg，2.49mmol)，氮气下将混合物在80℃搅拌3小时。LCMS显示全部转化为中间体。冷却至50℃，然后加入羟胺盐酸盐(173mg，2.49mmol)，并将所得混合物在该温度下搅拌5小时。冷却至室温，旋蒸除去溶剂后加入水，然后用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，将合并的有机层浓缩并纯化，得到黄色油状物E15-1(450mg，收率97％)。
LCMS:m/z 284.1[M+H]+.
步骤二：8-溴-5-(三氟甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶E15-2
Figure BDA0002633742990001192
向E15-1(450mg，1.59mmol)的四氢呋喃溶液中加入三氟乙酸酐(0.66g，3.18mmol)。 混合物在100℃搅拌16小时。LCMS显示反应结束，浓缩并纯化，得到无色油状物E15-2(400 mg，95％收率)。
LCMS:m/z 266.1[M+H]+.
步骤三：使用实施例6的方法，以E15-2和中间体B3为原料得到N-((5-氟-2,3-二氢苯并 呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(三氟甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001193
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.66(d,J＝2.6Hz,1H),9.58(s,1H),9.36(d,J＝7.9Hz,1H),9.18(t,J＝4.9Hz,1H),8.82(d,J＝2.4Hz,1H),8.03(d,J＝8.0Hz,1H),6.97(t,J＝9.4Hz, 1H),6.72(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.81(d,J＝4.8Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.32(s,2H) ppm；LCMS:m/z 471.1[M+H]+.
实施例104：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酰腈
步骤一：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酰胺E16-1
Figure BDA0002633742990001201
在25mL圆底烧瓶中加入2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)氨基]-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酸(实施例84)(100mg，0.21mmol)， 二甲基甲酰胺(2mL)。室温下，分别加入碳酸氢铵(83mg，1.05mmol)和O-(7-氮杂苯并三 唑-1-基)-N，N，N'，N'-四甲基尿嘧啶六氟磷酸盐(103mg，0.27mmol)。反应在常温下搅拌 过夜得到黄色浑浊液体，反应液用水(10ml)淬灭，用乙酸乙酯(10ml*3)萃取。合并有机 层后用饱和食盐水(10ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥并浓缩。粗产品用快速层析柱纯化，以 乙酸乙酯：二氯甲烷：甲醇＝(1:1:1)为流动相，洗脱得到纯的目标产物E16-1(90mg，90.7％ 收率)
步骤二：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酰腈
Figure BDA0002633742990001202
在25mL圆底烧瓶中加入E16-1(90mg，0.19mmol)和无水四氢呋喃(2ml)，在冰水浴下加入三氟乙酸酐(80mg，0.38mmol)和三乙胺(29mg，0.29mmol)。反应常温下搅拌过夜， 反应液旋干后得到黄色固体，用甲醇洗涤过滤得到白色固体。真空干燥后得到纯的2-(8-(5-(((5- 氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶 -3-基)乙酰腈(30mg，35％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝6.4Hz,1H),9.36(d,J＝1.8Hz,1H),8.86(d,J ＝16.3Hz,1H),8.56(d,J＝7.4Hz,1H),7.62(s,1H),6.96(t,J＝9.5Hz,1H),6.90(d,J＝7.6Hz, 1H),6.71(dd,J＝8.7,3.8Hz,1H),4.81(s,2H),4.77(d,J＝5.1Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H), 3.32(d,J＝8.9Hz,2H),2.96(s,3H)ppm；LCMS:m/z 455.1[M+H]+
实施例105：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲氧基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶 -8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：8-溴-5-甲氧基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶E17-1
Figure BDA0002633742990001211
在25mL圆底烧瓶中加入8-溴-5-氯-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶(150mg,0.65mmol)和无水 甲醇(5ml)，加入甲醇钠(175.58mg，3.25mmol)。反应80℃下搅拌3小时，反应液旋干 后用快速硅胶柱纯化(洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯＝5：1)后得到纯的E17-1(0.11g,74.2％)。 LCMS:m/z 227.9,229.9[M+H]+.
步骤二：采用实施例6的方法，以8-溴-5-甲氧基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶E17-1和中间 体B3为原料可以得到N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲氧基-[1,2,4]***并[1,5-a] 吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001212
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(s,1H),9.33(s,1H),9.17(d,J＝8.4Hz,1H),8.83(s, 1H),8.59(s,1H),6.99-6.93(m,1H),6.91(d,J＝8.5Hz,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.77 (s,2H),4.55(s,2H),4.20(s,3H),3.30(t,J＝6.4Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 433.1[M+H]+.
采用实施例6的方法，以4-溴苯并[c][1,2,5]噻二唑和中间体B3为原料可以合成以下化合 物：
实施例106：8-(苯并[c][1,2,5]噻二唑-4-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001213
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,J＝3.1Hz,1H),8.95(s,1H),8.92(t,J＝5.1Hz,1H),8.83(dd,J＝7.1,0.9Hz,1H),8.08(dd,J＝8.7,1.0Hz,1H),7.88(dd,J＝8.7,7.2Hz,1H), 7.00-6.94(m,1H),6.73(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.79(d,J＝5.0Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H), 3.32(s,2H)ppm；LCMS:m/z 420.0[M+H]+.
使用实施例84的方法，以乙基6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯(实施例23)为原料水解后与盐酸二甲胺 缩合得到以下化合物：
实施例107：6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)-N,N-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0002633742990001221
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(s,1H),9.56(s,1H),9.14-8.95(m,3H),8.21(s,1H), 7.01-6.94(m,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.79(d,J＝4.9Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H), 3.34(s,2H),3.20(s,6H)ppm；LCMS:m/z 491.0[M+H]+.
使用实施例84的方法，以乙基6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-羧酸酯(实施例23)为原料水解后与氯化铵缩合 得到以下化合物：
实施例108：6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0002633742990001222
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.66(d,J＝6.7Hz,1H),9.59-9.48(m,2H),9.04(dd,J＝10.6,2.6Hz,2H),8.47(d,J＝4.3Hz,1H),8.14(s,1H),7.55(s,1H),7.02-6.94(m,1H),6.72(dd,J ＝8.6,3.9Hz,1H),4.80(d,J＝4.9Hz,2H),4.56(t,J＝8.8Hz,2H),3.32(d,J＝9.0Hz,2H)ppm； LCMS:m/z 463.0[M+H]+.
实施例109：8-(5-(二甲氨基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4- 基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：8-碘-N,N-二甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-胺E18-1
Figure BDA0002633742990001223
向二甲胺的四氢呋喃溶液(4mL，2M/L)中加入5-氯-8-碘-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶(200 mg，0.72mmol)。混合物在90℃搅拌16h。LCMS显示反应结束，浓缩并纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)，得到E18-1(190mg，90％)。
LCMS:m/z 288.9[M+H]+.
步骤二：采用实施例6的方法，以E18-1和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
Figure BDA0002633742990001231
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.34(s,1H),8.63(s,1H),8.31(d,J＝8.4Hz,2H),6.85-6.72 (m,1H),6.61(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),6.48(d,J＝8.1Hz,1H),4.77(s,2H),4.57(t,J＝8.7Hz, 2H),3.41(t,J＝8.7Hz,2H),3.24(s,6H)ppm；LCMS:m/z 446.1[M+H]+.
采用实施例6的方法，以4-溴苯并噻唑和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例110：8-(苯并[d]噻唑-4-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并 [4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001232
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.43(s,1H),8.78(t,J＝4.9Hz,1H),8.49(s, 1H),8.32(d,J＝6.8Hz,1H),8.18(d,J＝8.0Hz,1H),7.61(t,J＝7.8Hz,1H),7.04-6.93(m,1H), 6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.77(d,J＝4.8Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.34(s,2H)ppm； LCMS:m/z 419.1[M+H]+.
采用实施例109的方法，以5-氯-8-碘-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶，***啉和中间体B3为原 料可以合成以下化合物：
实施例111：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-吗啉代-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶 -8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001233
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),9.32(s,1H),9.10(d,J＝8.3Hz,1H),8.81(s, 1H),8.59(s,1H),6.99-6.94(m,1H),6.81(d,J＝8.3Hz,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.77 (s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.92-3.81(m,4H),3.56-3.46(m,4H),3.35(s,2H)ppm；LCMS: m/z 488.1[M+H]+.
采用实施例109的方法，以8-溴-5-氯-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶，N-甲基哌嗪和中间体B3 为原料可以合成以下化合物：
实施例112：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(4-甲基哌嗪-1-基)-[1,2,4]***并 [1,5-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001241
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,1H),9.31(s,1H),9.08(d,J＝8.3Hz,1H),8.80(d, J＝4.7Hz,1H),8.58(s,1H),6.99-6.92(m,1H),6.78(d,J＝8.3Hz,1H),6.71(dd,J＝8.7,3.9Hz, 1H),4.77(d,J＝4.3Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.51(s,4H),3.34(d,J＝7.4Hz,2H),2.58(s, 4H),2.28(s,3H)ppm；LCMS:m/z 501.2[M+H]+.
实施例113：8-(2,5-二甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4- 基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一:(E)-N-(3-溴-6-甲基吡啶-2-基)-N'-羟基乙酰脒E19-1
Figure BDA0002633742990001242
向3-溴-6-甲基吡啶-2-胺(5.0g,26.7mmol)的异丙醇(60mL)混合物溶液中加入1,1- 二甲氧基-N，N-二甲基乙-1-胺(5.3g,40.1mmol)，氮气下将混合物在80℃搅拌3小时。冷却 至50至，然后加入羟胺盐酸盐(3.7g，53.5mmol)，并将所得混合物在该温度下搅拌5小时。 LCMS显示反应基本结束，蒸发溶剂并加入水，然后用乙酸乙酯(50mL基本)萃取，将合并的有机层浓缩并用快速柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)，得到E19-1(5.3g,88％)。
LCMS:m/z 244.1[M+H]+.
步骤二：8-溴-2,5-二甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶E19-2
Figure BDA0002633742990001251
向E19-1(5.3g，21.7mmol)的四氢呋喃溶液中加入三氟乙酸酐(6.84g，32.6mmol)。混合物在100℃搅拌16小时。LCMS显示反应结束，浓缩并用快速柱层析纯化(石油醚：乙 酸乙酯＝2:1)，得到E19-2(2.9g，59％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.88(d,J＝7.7Hz,1H),7.07-6.88(m,1H),2.66(s,3H),2.52(s,3H)ppm；LCMS:m/z 226.0[M+H]+.
步骤三：使用实施例6的方法，以E19-2和中间体B3为原料可以得到8-(2,5-二甲基-[1,2,4] ***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001252
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),9.44(s,1H),9.05(d,J＝7.7Hz,1H),8.88(t,J ＝5.1Hz,1H),7.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.03-6.92(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.79(d,J ＝4.9Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.30(d,J＝8.8Hz,2H),2.74(s,3H),2.58(s,3H)ppm； LCMS:m/z 431.1[M+H]+.
实施例114：1-((8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-基)甲氧基)-2-甲基丙烷-2-醇
步骤一：8-溴-5-(溴甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶E20-1
Figure BDA0002633742990001253
在100mL圆底烧瓶中加入8-溴-5-甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶(2g，9.43mmol)和四氯 化碳(20ml)，在冰水浴下加入溴代丁二酰亚胺(2g，11.3mmol)和偶氮二异丁腈(310mg， 0.2mmol)。加料完成后，将反应常温升至80℃，保持反应16小时。反应液用亚硫酸钠水溶 液洗涤后旋干后得到红褐色固体，用快速分离柱(洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯＝3:1)纯化得 到红褐色固体。真空干燥后得到纯的E20-1(1.7g，62％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(s,1H),7.77(d,J＝7.7Hz,1H),7.07(d,J＝7.7Hz,1H), 4.90(s,2H)ppm；LCMS:m/z 291.9[M+H]+.
步骤二：1-((8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-基)甲氧基)-2-甲基丙烷-2-醇E20-2
Figure BDA0002633742990001261
在50mL圆底烧瓶中加入2-甲基丙烷-1,2-二醇(60mg，0.67mmol)和无水四氢呋喃(4ml)， 在冰水浴中搅拌5分钟后加入叔丁醇钾(90mg，0.80mmol)。反应液在冰水浴中继续搅拌30 分钟，升温至室温搅拌2小时，加入E20-1(97mg，0.34mmol)，继续搅拌过夜。加入10mL 水，用乙酸乙酯(10ml*3)萃取。合并有机层后用饱和食盐水(10ml)洗涤，用无水硫酸钠 干燥并浓缩。粗产品用快速层析柱纯化(洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯＝2:1)，得到纯的E20-2 (40mg,20％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42(s,1H),7.80(d,J＝7.7Hz,1H),7.05(d,J＝7.7Hz,1H), 5.04(s,2H),3.55(s,2H),1.72(s,1H),1.27(s,6H)ppm；LCMS:m/z 300.0,302.0[M+H]+.
步骤三：使用实施例6的方法，以E20-2和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
Figure BDA0002633742990001262
1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.35(d,J＝2.7Hz,1H),9.08(d,J＝3.4Hz,1H),8.78(d,J＝ 7.6Hz,1H),8.44(s,1H),7.44(s,1H),7.40(d,J＝7.8Hz,1H),6.89-6.81(m,1H),6.67(dd,J＝ 8.6,3.9Hz,1H),5.35(t,J＝4.6Hz,1H),5.13(s,2H),4.84(s,2H),4.64(t,J＝8.7Hz,2H),3.93(s, 2H),3.22(s,2H),1.28(s,6H)ppm；LCMS:m/z 460.2[M+H]+.
实施例115：8-(5-((二甲氨基)甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并 呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：1-(8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-基)-N,N-二甲基甲胺E20-3
Figure BDA0002633742990001263
在100mL圆底烧瓶中加入E20-1(1g，3.44mmol)和四氢呋喃(15ml)，在冰水浴下加入1M的二甲胺四氢呋喃溶液(17ml，17.2mmol)和碳酸钾(0.59g，1.43mmol)。加料完成 后，将反应常温升至80℃，保持反应3小时。反应完成后，液旋干后得到黄褐色固体，用快 速分离柱(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)洗脱纯化后得到黄色固体E20-3,(0.6g，68.3％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74-8.38(m,1H),8.14-7.85(m,1H),7.31-6.90(m,1H), 4.03-3.78(m,2H),2.38-2.20(m,6H)ppm；LCMS:m/z 255.0,257.0[M+H]+.
步骤二：使用实施例6的方法，以E20-3和中间体B3为原料可以得到8-(5-((二甲氨基) 甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并 [4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001271
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.46(s,1H),9.18(d,J＝7.7Hz,1H),8.93(s, 1H),8.63(s,1H),7.38(d,J＝7.7Hz,1H),6.97(dd,J＝10.3,8.7Hz,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz, 1H),4.78(d,J＝4.9Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),4.01(s,2H),3.36(t,2H),2.35(s,6H)ppm； LCMS:m/z 460.2[M+H]+.
使用实施例115的方法，以E20-1，N-甲基***啉和中间体B3为原料可以得到以下化合 物：
实施例116：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-[1,2,4] ***并[1,5-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001272
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.45(s,1H),9.16(d,J＝7.7Hz,1H),8.93(s, 1H),8.63(s,1H),7.38(d,J＝7.8Hz,1H),7.02-6.92(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.78 (d,J＝4.7Hz,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),4.07(s,2H),3.30(s,2H),2.61(s,4H),2.40(s,4H), 2.19(s,3H)ppm；LCMS:m/z 515.2[M+H]+.
使用实施例115的方法，以E20-1，1-氨基-2-甲基-2-丙醇和中间体B3为原料可以得到以 下化合物：
实施例117：1-(((8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-基)甲基)氨基)-2-甲基丙烷-2-醇
Figure BDA0002633742990001281
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.45(s,1H),9.16(d,J＝7.7Hz,1H),8.92(s, 1H),8.65(s,1H),7.42(d,J＝7.7Hz,1H),6.96(d,J＝10.1Hz,1H),6.72(dd,J＝8.6,4.0Hz,1H), 4.79(d,J＝4.9Hz,2H),4.56(s,2H),4.28(s,3H),3.37(s,1H),3.30(s,2H),2.07(s,2H),1.12(s, 6H)ppm；LCMS:m/z 504.1[M+H]+.
使用实施例115的方法，以E20-1，***啉和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
实施例118：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(吗啉代甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a] 吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001282
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.45(s,1H),9.17(d,J＝7.7Hz,1H),8.94(s, 1H),8.64(s,1H),7.42(d,J＝7.8Hz,1H),6.97(t,J＝9.4Hz,1H),6.72(dd,J＝8.4,3.6Hz,1H), 4.79(s,2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),4.08(s,2H),3.65(s,4H),3.33(s,2H),2.60(s,4H)ppm； LCMS:m/z 502.1[M+H]+.
使用实施例6步骤二的方法，以7-频哪醇硼酸酯基-2H-吲唑和中间体B3为原料可以得到 以下化合物：
实施例119：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(1H-吲唑-7-基)-[1,2,4]***并[4,3-c] 嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001283
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H)9.52(s,1H)8.78(t,J＝5.0Hz,1H)8.15(d,J＝1.3Hz,1H)7.94(s,1H)7.81(d,J＝8.0Hz,1H)7.69(d,J＝7.1Hz 1H)7.22(t,J＝7.6Hz,1H)7.04-6.90(m,1H)6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H)4.76(d,J＝4.8Hz,2H)4.57(t,J＝8.8Hz,2H)3.38(m,2H)ppm；LCMS:m/z 402.1[M+H]+.
实施例120：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基四唑并[1,5-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：8-溴-5-甲基四唑并[1,5-a]吡啶E21-1
Figure BDA0002633742990001291
将3-溴-2-氯-6-甲基吡啶(1.00g，4.84mmol)，叠氮基三甲基硅烷(1.12g，9.69mmol)， 四丁基氟化铵三水化合物(3.06g，9.69mmol)的混合物在85℃下搅拌16小时，反应结束后 冷却至室温，向混合物中加入二氯甲烷(50mL)进行稀释，然后分别用水(10mL*4)和饱 和食盐水(10mL*2)进行洗涤。混合有机相，干燥，浓缩，硅胶柱纯化得到E21-1(0.50g， 48％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.80(d,J＝7.6Hz,1H),6.91(dd,J＝7.6,0.8Hz,1H),2.92(d, J＝0.8Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 214.9[M+H]+.
步骤二：使用实施例6的方法，以E21-1和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基四唑并[1,5-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并 [4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001292
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(s,1H),9.40(s,1H),9.29(d,J＝7.5Hz,1H),9.06(br s, 1H),7.52-7.48(m,1H),7.01-6.95(m,1H),6.73(dd,J＝3.9,8.7Hz,1H),4.81(brs,2H),4.57(t, J＝8.8Hz,2H),3.32-3.32(m,2H),2.93(s,3H)ppm；LCMS:m/z 418.1[M+H]+.
实施例121：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
步骤一：5-氯-8-碘咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈E22-1
Figure BDA0002633742990001293
在50mL圆底烧瓶中加入3-乙氧基丙烯腈(1.14g，11.79mmol)，二氧六环(12ml)和水 (4ml)。冰浴下，分批次加入N-溴代琥珀酰亚胺(2.1g，11.79mmol)，搅拌30分钟后室温继续搅拌2小时后，然后向反应液中加入5-氯-8-碘咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈(1g，3.93mmol)。 LCMS检测反应结束后，加入水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL*3)萃取，收集有机层，用 无水硫酸钠干燥后旋干。粗品用快速层析柱(洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝10:1)纯化得到黄色 固体E22-1(800mg，67％收率)。
LCMS:m/z 303.9[M+H]+.
步骤二：5-羟基-8-碘咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈E22-2
Figure BDA0002633742990001301
25mL圆底烧瓶中加入E22-1(500mg，1.65mmol)，甲醇(5ml)，在冰浴下，加入甲醇钠溶液(0.5ml)。反应升温80℃，保持反应1小时。LCMS检测反应结束后，加入水(10ml) 并用乙酸乙酯(20ml*3)萃取。有机相合并后用无水硫酸钠干燥，旋干，得到的粗品用快速 层析柱(洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化得到白色固体E22-2(300mg，60％收率)。
LCMS:m/z 299.9[M+H]+.
步骤三：使用实施例6的方法，以E22-2和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-5-甲氧基 咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
Figure BDA0002633742990001302
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,1H),9.18(s,1H),8.96(d,J＝8.3Hz,1H),8.83(s, 1H),8.51(s,1H),6.96(s,1H),6.90(d,J＝8.4Hz,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.76(s,2H), 4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.21(s,3H),3.27-3.23(m,2H)ppm；LCMS:m/z 457.1[M+H]+.
采用实施例109的方法，以8-碘-5-氯-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶，四氢吡咯和中间体B3 为原料可以合成以下化合物：
实施例122：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(吡咯烷-1-基)-[1,2,4]***并[1,5-a] 吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001303
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.24(s,1H),9.02(d,J＝8.4Hz,1H),8.68(s, 1H),8.46(s,1H),7.00-6.91(m,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),6.41(d,J＝8.5Hz,1H),4.75 (s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.82(s,4H),3.31(s,2H),2.00(s,4H)ppm；LCMS:m/z 472.1 [M+H]+.
采用实施例109的方法，以8-碘-5-氯-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶，4-(哌啶-4-基)吗啉和中间 体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例123：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(4-吗啉代哌啶-1-基)-[1,2,4]*** 并[1,5-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001311
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,1H),9.31(s,1H),9.07(d,J＝8.3Hz,1H),8.78(s, 1H),8.58(s,1H),7.01-6.92(m,1H),6.78(d,J＝8.3Hz,1H),6.71(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.76 (s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),4.12(d,J＝11.9Hz,2H),3.72-3.50(m,4H),3.32-3.28(m,2H), 2.91(t,J＝11.1Hz,2H),2.58-2.51(m,4H),2.43(d,J＝9.8Hz,1H),1.96(d,J＝12.3Hz,2H), 1.66(dd,J＝20.5,11.4Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 571.2[M+H]+.
采用实施例109的方法，以8-碘-5-氯-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶，2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚 烷和中间体B3为原料可以合成以下化合物：
实施例124：8-(5-(2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5- 氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001312
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.25(s,1H),9.05(d,J＝8.3Hz,1H),8.70(s, 1H),8.50(s,1H),7.02-6.91(m,1H),6.71(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),6.26(d,J＝8.4Hz,1H),4.76 (d,J＝11.0Hz,6H),4.62-4.44(m,6H),3.31(d,J＝8.8Hz,2H)ppm；LCMS:m/z500.2[M+H]+.
实施例125：5-(二甲氨基)-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并 [4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
步骤一：5-(二甲氨基)-8-碘咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈E22-3
Figure BDA0002633742990001321
25mL圆底烧瓶中加入E22-1(100mg，0.329mmol)，N,N-二甲基甲酰胺(3ml)。冰浴下加入盐酸二甲基胺固体(80mg，0.99mmol)和碳酸钾(140mg，0.99mmol)。反应升温至110℃，保持温度搅拌过夜。LCMS检测反应结束后，加入水(5mL)，并用乙酸乙酯(10mL*3)萃 取，收集有机层，用无水硫酸钠干燥后旋干。粗品用快速层析柱(洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯 ＝12:1)纯化得到白色固体E22-3(80mg，77.6％收率)。
LCMS:m/z 313.0[M+H]+.
步骤二：使用实施例6的方法，以E22-3和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
Figure BDA0002633742990001322
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,1H),9.19(s,1H),8.87(d,J＝8.0Hz,1H),8.86(s, 1H),8.53(s,1H),7.06(d,J＝8.1Hz,1H),7.02-6.92(m,1H),6.72(dd,J＝8.6,3.9Hz,1H),4.77 (d,J＝4.3Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.31(s,2H),2.86(s,6H)ppm；LCMS:m/z 470.1 [M+H]+.
采用实施例125的方法，以E22-1，***啉和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
实施例126：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-5-吗啉代咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
Figure BDA0002633742990001323
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,1H),9.19(s,1H),8.88(d,J＝8.0Hz,2H),8.54(s, 1H),7.14(d,J＝8.1Hz,1H),7.01-6.93(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.76(s,2H),4.56(t, J＝8.7Hz,2H),3.93(d,J＝12.5Hz,4H),3.33(s,2H),3.28(s,2H),3.04(dd,J＝16.6,5.9Hz,2H) ppm；LCMS:m/z 512.2[M+H]+.
采用实施例6的方法，以4-溴-2H-苯并[d][1,2,3]***和中间体B3为原料可以合成以下化 合物：
实施例127：8-(1H-苯并[d][1,2,3]***-7-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4] ***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001331
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(s,1H)9.11(br s,1H)8.99(br s,1H)8.47(d,J＝7.1 Hz,1H)7.84(d,J＝8.3Hz,1H)7.55-7.65(m,1H)6.95-7.00(m,1H)6.71(dd,J＝8.6,3.9Hz, 1H)4.79(br s,2H)4.55(t,J＝8.7Hz,2H)3.36(t,J＝8.7Hz,2H)ppm；LCMS:m/z403.1 [M+H]+.
使用实施例115的方法，以E20-1，N1,N1,N2-三甲基乙烷-1,2-二胺和中间体B3为原料 可以得到以下化合物：
实施例128：N1-((8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶 -8-基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-基)甲基)-N1,N2,N2-三甲基乙烷-1,2-二胺
Figure BDA0002633742990001332
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(s,1H),9.43(s,1H),9.14(d,J＝7.7Hz,1H),8.94(s, 1H),8.62(s,1H),7.40(d,J＝7.7Hz,1H),6.97(t,J＝9.5Hz,1H),6.72(dd,J＝8.5,3.7Hz,1H), 4.78(s,2H),4.56(s,2H),4.11(s,2H),3.35(d,J＝8.6Hz,2H),2.64(d,J＝7.0Hz,2H),2.46(d,J ＝6.9Hz,2H),2.36(s,3H),2.15(s,6H)ppm；LCMS:m/z 517.2[M+H]+.
采用实施例109的方法，以8-溴-5-氯-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶，2-甲基吗啉和中间体B3 为原料可以合成以下化合物：
实施例129：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(2-甲基吗啉代)-[1,2,4]***并 [1,5-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001333
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),9.32(s,1H),9.09(d,J＝8.2Hz,1H),8.81(s, 1H),8.60(s,1H),6.97(s,1H),6.80(d,J＝8.3Hz,1H),6.76-6.67(m,1H),4.77(d,J＝4.0Hz,2H), 4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.99(d,J＝11.3Hz,3H),3.82(dd,J＝19.0,9.7Hz,2H),3.31(s,2H), 2.96(dd,J＝11.6,8.7Hz,1H),2.70(d,J＝10.6Hz,1H),1.19(d,J＝6.2Hz,3H)ppm；LCMS: m/z 502.2[M+H]+.
实施例130：5-((二甲氨基)甲基)-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]三 唑并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
步骤一：8-溴-5-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈E23-1
Figure BDA0002633742990001341
在02下向3-乙氧基丙-2-烯腈(2.6g，25.7mmol)在1,4二氧六环(30mL)和水(10mL)中的溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(3.81g,16.1mmol)，将混合物在0，下搅拌2小时，然后将化合物3-溴-6-甲基吡啶-2-胺(1g,5.35mmol)加入混合物中，将反应温热至室温并搅拌2h。 然后将反应在90℃搅拌16小时。LCMS检测反应结束，向反应中加入水(30mL)，并用乙酸乙酯萃取(30mL*3)，合并有机层并浓缩，粗产物用快速层析柱纯化(洗脱剂为石油醚： 乙酸乙酯＝1：1)，得到E23-1(600mg，47％收率)。
LCMS:m/z 236.1[M+H]+.
步骤二：8-溴-5-(溴甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈E23-2
Figure BDA0002633742990001342
向化合物E23-1(450mg,1.91mmol)四氯化碳溶液(10mL)中，加入N-溴代琥珀酰亚胺(407mg,2.29mmol)和偶氮二异丁腈(47mg,0.29mmol)，将混合物在氮气下于80℃搅 拌16h。LCMS显示反应成功，将混合物浓缩，通过快速层析柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)，得到E23-2(350mg，58％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66(s,1H),8.00(d,J＝7.7Hz,1H),7.39(d,J＝7.7Hz,1H),5.28(s,2H).LCMS:m/z 313.9[M+H]+.
步骤三：8-溴-5-((二甲氨基)甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈E23-3
Figure BDA0002633742990001351
在25mL反应瓶中加入E23-2(100mg,0.32mmol)和二甲胺的四氢呋喃溶液(2M，10ml)。反应70℃下搅拌15小时，反应液旋干后用乙酸乙酯和水萃取，有机层旋干后，用 快速层析柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝2：1)得到E23-3(70mg,78.4％收率)。
LCMS:m/z 279.0,281.0[M+H]+.
步骤四：使用实施例6的方法，以E23-3和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-(2-甲基吗啉代)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001352
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(s,1H),9.19(s,1H),8.89(s,1H),8.76(d,J＝7.6Hz, 1H),8.47(s,1H),7.25(d,J＝7.7Hz,1H),6.93-6.87(m,1H),6.65(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.71 (s,2H),4.50(d,J＝8.7Hz,2H),3.86(s,2H),3.24(s,2H),2.14(s,6H)ppm；LCMS:m/z 484.1 [M+H]+.
实施例131：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟-5-甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡 啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：3-溴-5-氟-6-甲基吡啶-2-胺E24-1
Figure BDA0002633742990001353
在0℃向5-氟-6-甲基吡啶-2-胺(4.50g，35.7mmol)的乙腈(50mL)溶液中分批加入N- 溴代琥珀酰亚胺(7.62g，42.8mmol)，缓慢升至室温，并在室温下搅拌反应12小时。反应结 束后，向混合物中加入乙酸乙酯(100mL)进行稀释，然后分别用饱和的碳酸钠水溶液(50mL*3) 和饱和食盐水(80mL)进行洗涤。有机相干燥，浓缩，得到粗品E24-1(7.40g，60％收率)， 直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(d,J＝8.0Hz,1H),4.76(br s,2H),2.31(d,J＝2.8Hz,3H) ppm；LCMS:m/z 204.9[M+H]+.
步骤二：(E)-N'-(3-溴-5-氟-6-甲基吡啶-2-基)-N,N-二甲基甲脒E24-2
Figure BDA0002633742990001361
在250mL单口瓶中依次加入E24-1(3.00g，14.6mmol)，N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(3.49g，29.3mmol)，甲苯(100mL)，反应升温至110℃下反应12小时，LCMS检测无原料 剩余，反应液浓缩得到粗品E24-2(3.80g)，直接用于下一步。
LCMS:m/z 261.9[M+H]+.
步骤三：(E)-N-(3-溴-5-氟-6-甲基吡啶-2-基)-N'-羟基甲脒E24-3
Figure BDA0002633742990001362
在250mL单口瓶中依次加入E24-2(3.80g，14.6mmol)，盐酸羟胺(2.03g，29.2mmol)， 乙酸钠(2.40g，29.2mmol)，乙醇(60mL)。反应于氮气氛围下升温至55℃反应12小时，LCMS 监测反应结束，降至室温，减压浓缩除去乙醇，得到粗品(E)-N-(3-溴-5-氟-6-甲基吡啶-2-基)-N'- 羟基甲脒，用水(50mL)打浆，收集固体，干燥得到棕色固体产物E24-3(3.08g，85.0％收 率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.26(br s,1H),8.08(s,2H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),2.39(d,J ＝2.8Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 247.9[M+H]+.
步骤四：8-溴-6-氟-5-甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶E24-4
Figure BDA0002633742990001363
在0℃下往E24-3(3.08g，12.4mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中逐滴加入三氟乙酸酐 (7.82g，37.3mmol)。然后缓慢升至室温，并在室温下搅拌反应12小时。反应结束后，在0℃ 向混合物中加入饱和的碳酸氢钠水溶液(50mL)进行淬灭，向混合物中加入水(50mL)进行稀释，用二氯甲烷(100mL*3)进行萃取，合并的有机相用饱和食盐水(30mL*2)进行洗 涤，干燥，浓缩。浓缩物用硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝10:1)纯化得到黄色固体产物E24-4(2.10g,73.5％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(s,1H),7.74(d,J＝8.0Hz,1H),2.74(d,J＝2.8Hz,3H) ppm；LCMS:m/z 229.8[M+H]+.
步骤五：使用实施例6的方法，以E24-4和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟-5-甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001371
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,1H),9.57(s,1H),9.32(d,J＝11.5Hz,1H),9.09- 9.04(m,1H),8.70(s,1H),6.98(t,J＝9.5Hz,1H),6.73(dd,J＝3.9,8.6Hz,1H),4.80(d,J＝3.4Hz, 2H),4.56(t,J＝8.7Hz,2H),3.64-3.58(m,1H),3.32-3.30(m,2H),2.76(d,J＝2.5Hz,3H)ppm； LCMS:m/z 435.1[M+H]+.
使用实施例115的方法，以E20-1，咪唑和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
实施例132：8-(5-((1H-咪唑-1-基)甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢 苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001372
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54-9.51(m,1H),9.44(s,1H),9.12(d,J＝7.8Hz,1H),8.72(s,1H),7.90(s,1H),7.35(s,1H),7.07(d,J＝7.9Hz,1H),6.96(s,1H),6.72(s,1H),5.81(s, 2H),4.78(s,2H),4.55(s,2H),3.17-3.15(m,2H)ppm；LCMS:m/z 483.1[M+H]+.
实施例133：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：3-溴-2-肼基-6-甲基吡啶E25-1
Figure BDA0002633742990001381
将3-溴-2-氯-6-甲基吡啶(4.50g，21.80mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(12mL)中。在25℃下 往混合物加入水合肼(4.32mL，87.18mmol)，闷罐的条件下110℃反应16小时。结束后向反 应液加入水100mL，然后乙酸乙酯萃取。混合有机相，干燥，浓缩，得到粗品E25-1(3.50g,79.5％ 收率)，粗品直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.59(d,J＝7.8Hz,1H)7.24(s,1H)6.43(d,J＝7.6Hz,1H)4.21(s,2H)2.32(s,3H)ppm；LCMS:m/z 203.9[M+H]+.
步骤二：8-溴-5-甲基-[1,2,4]***[4,3-a]吡啶E25-2
Figure BDA0002633742990001382
在100mL单口瓶中依次加入E25-1(3.5g,17.0mmol)，原甲酸三甲酯(33.0g,311mmol)， 三氟乙酸(39.5mg，0.35mmol)，反应升温至100℃于氮气氛围下反应10小时，TLC检测无 原料剩余，反应液旋干后，粗品用甲基叔丁基醚(20mL)打浆后过滤，固体真空干燥后得到 E25-2(3g，81.6％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.84(s,1H)7.48(d,J＝7.1Hz,1H)6.57(dd,J＝7.2,0.8Hz, 1H)2.66(d,J＝0.6Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 211.8[M+H]+.
步骤三：使用实施例6的方法，以E25-2和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]三 唑并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001383
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,1H),9.55(s,1H),9.39(s,1H),8.96(d,J＝7.3Hz, 1H),8.92(s,1H),7.02(d,J＝7.3Hz,1H),6.97(t,J＝9.4Hz,1H),6.72(dd,J＝3.8,8.8Hz,1H), 4.79(br d，J＝4.4Hz，2H)，4.56(t，J＝8.8Hz，2H)，3.37-3.40(m，2H)，2.72(s，3H)ppm；LCMS: m/z 417.0[M+H]+.
实施例134：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基-[1,2,4]***并[1,5-c]嘧啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：5-溴-4-胺基-2-甲基嘧啶E26-1
Figure BDA0002633742990001391
将5-溴-4-氯-2-甲基嘧啶(1.9g,9.16mmol)，氨水(7.28g,58.16mmol,28％纯度)溶于N- 甲基吡咯烷酮(12mL)中。闷罐的条件下110℃反应4小时。结束后向反应液加入水20mL， 然后乙酸乙酯萃取。混合有机相，干燥，浓缩，粗品通过柱层析分离(流动相:石油醚/乙酸乙 酯＝1:1)得到E26-1(800mg,46.4％收率)
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.27(s,1H)5.56(br s,2H)2.47(s,3H)ppm；LCMS:m/z187.8[M+H]+.
步骤二：(E)-N'-(5-溴-2-甲基嘧啶-4-基)-N,N-二甲基甲脒E26-2
Figure BDA0002633742990001392
将E26-1(0.5g,2.66mmol)和1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(633mg，5.32mmol)溶于甲 苯(10mL)中，反应液在100℃下于氮气氛围中反应10小时，LCMS监测反应完毕。反应液浓缩干后得到E26-2(0.65g,100％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61(s,1H)8.45(s,1H)3.20(s,3H),3.18(s,3H),2.53(s,3H) ppm；LCMS:m/z 243.1[M+H]+.
步骤三：(E)-N-(5-溴-2-甲基嘧啶-4-基)-N'-羟基甲脒E26-3
Figure BDA0002633742990001393
将E26-2(0.646g,2.66mmol)，羟胺盐酸盐(369mg,5.31mmol)和无水醋酸钠(479mg, 5.85mmol)溶于无水乙醇(10mL)中，反应液在50℃下于氮气氛围中反应4小时，TLC检测反 应完毕。反应液过滤，滤饼用水冲洗，干燥后得到E26-3(400mg,65.1％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(br s,1H)8.59(s,1H)8.24(br s,1H)7.96(s,1H)2.47(s,3H)ppm；LCMS:m/z 231.0[M+H]+.
步骤四：8-溴-5-甲基-[1,2,4]***[1,5-c]嘧啶E26-4
Figure BDA0002633742990001401
在0℃下，向E26-3((750mg,3.25mmol)的无水四氢呋喃(25mL)溶液中滴加三氟乙酸酐 (2.05g,9.74mmol)。反应自然升温至25℃反应12小时，TLC检测反应完毕。反应液旋干后加 入饱和碳酸氢钠溶液(20mL)，用二氯甲烷/甲醇(100mL，V/V＝10:1)萃取，有机相干燥浓 缩后粗品用快速硅胶柱分离得到E26-4(320mg,46.2％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(s,1H)8.47(s,1H)2.86(s,3H)ppm；LCMS:m/z212.8[M+H]+.
步骤五：使用实施例6的方法，以E26-4和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基-[1,2,4]***并[1,5-c]嘧啶-8-基)-[1,2,4]三 唑并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001402
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.68(s,1H),9.55(s,1H),9.38(s,1H),9.02(br t,J＝5.1Hz, 1H),8.78(s,1H),7.00-6.93(m,1H),6.72(dd,J＝3.9,8.6Hz,1H),4.78(d,J＝4.9Hz,2H),4.55 (t,J＝8.8Hz,2H),3.32-3.30(m,2H),2.96(s,3H)ppm；LCMS:m/z 418.0[M+H]+.
实施例135：2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-基)丙烷-2-醇
步骤一：(E)-5-溴-6-(((二甲胺基)亚甲基)氨基)-吡啶-2-甲酸甲酯E27-1
Figure BDA0002633742990001411
将(E)-5-溴-6-(((二甲胺基)亚甲基)氨基)-吡啶-2-甲酸甲酯(5.0g,21.6mmol)，1,1-二甲氧基 -N,N-二甲基甲胺(5.16g，43.3mmol)溶于甲苯(100mL)，反应液升温至110℃下反应4小时， TLC检测无原料剩余，反应液浓缩得到粗品E27-1(6.00g)。
LCMS:m/z 285.7[M+H]+.
步骤二：(E)-5-溴-6-(((羟胺基)亚甲基)氨基)-吡啶-2-甲酸甲酯E27-2
Figure BDA0002633742990001412
在反应瓶中依次加入E27-1(6.0g,20.97mmol),盐酸羟胺(2.91g,41.94mmol),乙酸钠 (3.44g，41.9mmol)，乙醇(60mL)。反应液于氮气氛围下升温至50℃反4小时，LCMS监测反 应结束，降至室温，过滤得到E27-2(5.9g，85.0％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41-8.29(m,1H),8.26-8.19(m,1H),7.93(d,J＝7.9Hz,1H), 7.57(d,J＝7.9Hz,1H),3.97(s,3H)ppm；LCMS:m/z 273.7[M+H]+.
步骤三：8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-甲酸甲酯E27-3
Figure BDA0002633742990001413
在室温下往E27-2(10g,36.49mmol)的四氢呋喃(100mL)溶液中逐滴加入三氟乙酸酐 (23.0g，109mmol)。然后缓慢升至75℃，并搅拌反应3小时。反应结束后，在0℃向混合物中加入饱和的碳酸氢钠水溶液(100mL)进行淬灭，用乙酸乙酯(100mL*3)进行萃取，合并的有 机相干燥，浓缩。浓缩物用硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝5:1到4:1)纯化得到白色固体E27-3(5.00 g,收率53.5％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(s,1H),7.85(d,J＝7.8Hz,1H),7.68(d,J＝7.9Hz,1H), 4.08(s,3H)ppm；LCMS:m/z 256.0[M+H]+.
步骤四：2-(8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-基)丙烷-2-醇E27-4
Figure BDA0002633742990001421
在-30℃下，往E27-3(500mg,1.95mmol)的四氢呋喃溶液中(10mL)滴加甲基溴化镁(3M, 2.60mL)并在此温度下搅拌三小时。反应结束后，向反应液中加入水(10mL)进行淬灭，用乙 酸乙酯(10mL*3)进行萃取，合并的有机相用干燥，浓缩后用快速硅胶柱纯化得到E27-4(400mg， 80.0％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(s,1H),8.05(d,J＝8.0Hz,1H),7.28(d,J＝8.0Hz,1H), 5.91(s,1H),1.72(s,6H)ppm；LCMS:m/z 255.9[M+H]+.
步骤五：使用实施例6的方法，以E27-4和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
2-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-[1,2,4] ***并[1,5-a]吡啶-5-基)丙烷-2-醇
Figure BDA0002633742990001422
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.39(s,1H),9.12(d,J＝7.9Hz,1H),8.96-8.90(m,1H),8.66(s,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),6.99-6.94(m,1H),6.73-6.70(m,1H),5.87 (s,1H),4.78(d J＝4.4Hz,2H),4.58-4.53(m,2H),3.40-3.35(m,2H)1.78(s,6H)ppm；LCMS: m/z 461.2[M+H]+.
采用实施例96的方法，以3-溴-5-甲氧基吡啶-2-胺和中间体B3为原料可以得到以下化 合物：
实施例136：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-6-甲氧基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲腈
Figure BDA0002633742990001423
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(s,1H),9.50(s,1H),9.40(s,1H),8.88(d,J＝2.3Hz, 1H),8.46(s,1H),8.13(d,J＝2.2Hz,1H),7.00-6.91(m,1H),6.70(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.77 (d,J＝5.0Hz,2H),4.54(t,J＝8.7Hz,2H),3.97(s,3H),3.17(d,J＝5.3Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 456.0[M+H]+.
使用实施例103的方法，以3-溴-5-甲氧基吡啶-2-胺和中间体B3为原料可以合成以下化 合物：
实施例137：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-甲氧基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶 -8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001431
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(s,1H),9.55(s,1H),9.05(d,J＝2.3Hz,1H),9.01(s, 1H),8.65(d,J＝2.3Hz,1H),8.53(s,1H),7.00-6.94(m,1H),6.72(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.79 (s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.93(s,3H),3.31(s,2H)ppm；LCMS:m/z 433.1[M+H]+.
实施例138：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲腈
步骤一：6-氨基-5-溴-吡啶-2-甲酰胺E28-1
Figure BDA0002633742990001432
闷罐中依次加入甲基-6-溴-5-吡啶-2-甲酸酯(5.00g，21.6mmol)，氨水(18.20g,145.41 mmol)和N-甲基吡咯烷酮(20mL)，在110℃搅拌3小时。LCMS监测反应结束后，向混合物中加入100mL饱和食盐水，然后过滤，滤饼用100mL水进行洗涤，得到白色固体，真空 干燥得到纯的E28-1(3.00g，64.2％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(br s,1H),7.44(d,J＝8.0Hz, 1H),5.64(br s,1H),4.99(br s,2H)ppm；LCMS:m/z 215.9[M+H]+.
步骤二：6-氨基-5-溴-吡啶-2-甲腈E28-2
Figure BDA0002633742990001441
在氮气氛围0℃条件下，向E28-1(2.00g，9.26mmol)和吡啶(3.66g，46.3mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中滴加三氟甲磺酸酐(7.84g,27.77mmol)。反应液升温至25℃搅拌12 小时，LCMS监测反应结束，在冰浴下加入100mL饱和的碳酸氢钠进行淬灭。然后用二氯甲 烷(50mL*3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水50mL进行洗涤，干燥，浓缩。浓缩物用 硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝1:0)纯化得到黄色固体E28-2(1.00g,收率54.5％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.75(d,J＝8.0Hz,1H),6.92(d,J＝8.0Hz,1H),5.27(brs,2H) ppm；LCMS:m/z 294.0[M+H]+.
步骤三：8-溴-咪唑并[1,2-a]吡啶-5-甲腈E28-3
Figure BDA0002633742990001442
将E28-2(1.00g，5.05mmol)，2-氯乙醛(5.44g，69.3mmol)，碳酸氢钠(458mg，5.45mmol) 溶于叔戊醇(20mL)。反应于氮气氛围下升温至140℃微波反应2小时，LCMS监测反应结束， 加入二氯甲烷(100mL)进行稀释，用饱和食盐水(100mL*3)进行洗涤，干燥，浓缩。浓 缩物用硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝10:1到3:1)纯化得到黄色固体E28-3(400mg,收率35.7％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04(d,J＝1.1Hz,1H),7.92(d,J＝1.1Hz,1H),7.55(d,J＝7.6 Hz,1H),7.28(d,J＝7.6Hz,1H)ppm；LCMS:m/z 222.0[M+H]+.
步骤四：使用实施例6的方法，以E28-3和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并 [1,2-a]吡啶-5-甲腈
Figure BDA0002633742990001443
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.88(s,1H),9.42(br s,1H),9.13(br s,1H),8.96(d,J＝7.9 Hz，1H)，8.20(s，1H)，7.94(d，J＝8.0Hz，1H)，7.88(d，J＝1.0Hz，1H)，6.95(t，J＝9.5Hz，1H)，6.70 (dd,J＝3.9,8.6Hz,1H),4.79(s,2H),4.54(t,J＝8.8Hz,2H),3.32-3.31(m,2H)ppm；LCMS:m/z 427.3[M+H]+.
实施例139：8-(2-(二甲氨基)-6-氟-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋 喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：N-[(3-溴-5氟-2吡啶基)胺基硫酰基]胺基甲酸乙酯E29-1
Figure BDA0002633742990001451
将3-溴-5-氟吡啶-2-胺(2.30g，12.0mmol)，异硫氰酰甲酸乙酯(1.66g，12.6mmol)溶于 1,4-二氧六环(25mL)中，抽换氮气3次后于20℃下搅拌反应4小时。TLC监测反应完毕后， 反应液浓缩后得到粗品E29-1(4.0g，11.9mmol，收率98.7％)。
LCMS:m/z 321.9/323.9[M+H]+.
步骤二：8-溴-6-氟-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-2-胺E29-2
Figure BDA0002633742990001452
将E29-1(4.0g，11.9mmol)，盐酸羟胺(4.31g，62.1mmol)和N,N-二异丙基乙胺(4.81g， 37.2mmol)溶于甲醇(30mL)和乙醇(30mL)中，抽换氮气3次后于70℃反应12小时。LCMS监测反应完毕。反应液加水(50mL)稀释，有白色固体析出。过滤收集固体，真空干 燥后得E29-2(1.50g，6.49mmol，收率52.3％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.98(dd,J＝2.3,4.1Hz,1H),8.00(dd,J＝2.3,8.5Hz,1H), 6.30(s,2H)ppm；LCMS:m/z 231.7/233.7[M+H]+.
步骤三：8-溴-6-氟-N,N-二甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-2-胺E29-3
Figure BDA0002633742990001453
在0℃下，向E29-2(1.50g，6.49mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液加入钠氢(779mg， 19.5mmol，60％含量)。反应液在20℃下反应0.5小时。将碘甲烷(3.69g，26.0mmol)加入 到反应液中，继续在20℃下反应4小时。TLC监测反应完毕后，加入饱和氯化铵溶液淬灭反 应，再用二氯甲烷萃取。有机相干燥，浓缩，硅胶柱纯化得到E29-3(720mg，2.78mmol，42.8％ 收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(dd,J＝2.4,4.0Hz,1H),8.06(dd,J＝2.4,8.4Hz,1H), 3.04(s,6H)ppm；LCMS:m/z 258.7/260.7[M+H]+
步骤四：使用实施例6的方法，以E29-3和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
8-(2-(二甲氨基)-6-氟-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001461
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,1H),9.55(s,1H),9.18(dd,J＝2.3,11.3Hz,1H), 8.98-8.90(m,2H),6.98(t,J＝9.5Hz,1H),6.73(dd,J＝3.9,8.6Hz,1H),4.80(d,J＝4.8Hz,2H), 4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.31-3.28(m,2H),3.10(s,6H)ppm；LCMS:m/z 464.3[M+H]+.
实施例140：8-(2-(二甲氨基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4- 基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：使用实施例139步骤三的方法，以8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-2-胺为原料可 以得到中间体E30-1。
Figure BDA0002633742990001462
LCMS:m/z 243.0,229.0[M+H]+.
步骤二：使用实施例6的方法，以E30-1和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
8-(2-(二甲氨基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001463
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),9.50(s,1H),9.07(dd,J＝7.7,1.2Hz,1H),8.82(s,1H),8.61(dd,J＝6.6,1.2Hz,1H),7.10(dd,J＝7.7,6.6Hz,1H),6.98(dd,J＝10.3,8.7 Hz,1H),6.73(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.79(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.30(d,J＝8.8Hz, 2H),3.10(s,6H)ppm；LCMS:m/z 446.1[M+H]+.
实施例141：8-(5-(二氟甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4- 基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-甲醇E31-1
Figure BDA0002633742990001471
在0℃下往E27-3(3.5g,13.6mmo)的四氢呋喃(30mL)溶液中缓慢加入硼氢化锂(893 mg,41.0mmol)和氯化钙(4.55g，14.0mmol)并在此温度下搅拌2小时。反应结束后，将反应液滴入冰水中进行淬灭，用乙酸乙酯(100mL*3)进行萃取，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩物用硅胶柱纯化得到白色固体E31-1(1.3g,5.70mmol,41.7％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,1H),8.05(d,J＝7.8Hz,1H),7.16(d,J＝7.8Hz,1H),5.93(br t,J＝5.6Hz,1H),4.90(br d,J＝5.0Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 228.1[M+H]+。
步骤二：8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-甲醛E31-2
Figure BDA0002633742990001472
在0℃下往E31-1(400mg,1.75mmol)的二氯甲烷(16mL)和N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液中缓慢加入戴斯-马丁氧化剂(1.12g,2.63mmol)并在25℃下搅拌2小时。反应结束后，将反应液滴入饱和碳酸氢钠水溶液进行淬灭，用二氯甲烷(60mL*3)进行萃取，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得到白色固体E31-2(300mg,粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.51(s,1H),8.75(s,1H),8.18(d,J＝7.8Hz,1H),7.67(d, J＝7.8Hz,1H)ppm.
步骤三：8-溴-5-(二氟甲基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶E31-3
Figure BDA0002633742990001481
在0℃下往E31-2(280mg,1.24mmol)的二氯甲烷溶液中(40mL)缓慢加入二乙胺基三氟化硫(399mg,2.48mmol)并在25℃下搅拌12小时。反应结束后，将反应液滴入饱和 碳酸氢钠水溶液淬灭，用二氯甲烷(20mL*3)萃取，合并的有机相用干燥，浓缩。浓缩物用 硅胶柱纯化得到白色固体E31-3(270mg,1.09mmol,87.8％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,1H),8.16(d,J＝7.8Hz,1H),7.57(t,J＝52.4Hz), 7.50(d,J＝7.8Hz,1H)；LCMS:m/z 249.7[M+H]+.
步骤四：使用实施例6的方法，以E31-3和中间体B3为原料可以得到以下两个化合物：
Figure BDA0002633742990001482
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),9.57(s,1H),9.33(br d,J＝7.6Hz,1H),9.09(br s,1H),8.77(s,1H),7.78(br s,1H),7.65(t,J＝52.8Hz,1H),6.98(br t,J＝9.5Hz,1H),6.73 (br dd,J＝3.4,8.5Hz,1H),4.81(br d,J＝3.4Hz,2H),4.56(t,J＝8.5Hz,2H),3.31-3.23(m,2H) ppm；LCMS:m/z 453.3[M+H]+.
实施例142：8-(5-(二甲氨基)-[1,2,4]***并[1,5-c]嘧啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4- 基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：5-溴-N2,N2-二甲基嘧啶-2,4-二胺E32-1
Figure BDA0002633742990001483
在闷罐中，将5-溴-2氯嘧啶-4-胺(3.0g，14.4mmol)加入到二甲胺水溶液(70mL，40％) 中，反应液在100℃下反应12小时。LCMS监测发现反应完毕。反应液用乙酸乙酯(100mL*3) 萃取，有机相再用食盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，浓缩后得到E32-1(3.33g，粗品)， 直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.96(s,1H),6.70(br s,2H),3.07(s,6H)ppm；LCMS:m/z217.1[M+H]+.
步骤二：(E)-N'-(5-溴-2-(二甲胺基)嘧啶-4-基)-N,N-二甲基甲脒E32-2
Figure BDA0002633742990001491
将E32-1(2.5g，11.5mmol)溶于甲苯(30mL)中，向溶液中加入N,N-二甲基甲酰胺二甲缩醛(2.74g，23.0mmol)。将混合物在110℃下搅拌8小时，LCMS监测发现反应完毕。 向反应液中加水淬灭，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，干燥浓缩后得到E32-2(3.0g，粗品)，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.58(s,1H),8.18(s,1H),3.18(s,3H),3.15(s,3H),3.13(s,6H) ppm；LCMS:m/z 272.2[M+H]+.
步骤三：(E)-N-(5-溴-2-(二甲胺基)嘧啶-4-基)-N'-羟基甲脒E32-3
Figure BDA0002633742990001492
将E32-2(3g，11.0mmol)溶于乙醇(40mL)中，向反应液中加入盐酸羟胺(1.53g，22.0mmol)， 乙酸钠(1.81g，22.0mmol)，将混合好的反应液在60度下反应4小时。LCMS检测发现反应 完毕。将反应液浓缩，所得残渣加水打浆，过滤并收集固体，干燥后得到E32-3(2.8g，94.5％ 收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.92(s,1H),8.21(s,1H),8.09-8.02(m,1H),8.01-7.94(m, 1H),3.08(s,6H)ppm；LCMS:m/z 262.1[M+H]+.
步骤四：8-溴-N,N-二甲基-[1,2,4]***并[1,5-c]嘧啶-5-胺E32-4
Figure BDA0002633742990001493
’将E32-3(2.8g，10.8mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中。在0℃时向反应液中滴加三氟乙酸酐(11.3g，53.8mmol)。滴完后在25度下反应14小时。LCMS监测发现反应完毕。向 反应液中加入冰水淬灭后用乙酸乙酯(150mL*3)萃取。有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液和 饱和食盐水洗涤，干燥，浓缩。粗品用快速硅胶柱分离得到E32-4(2.0g，76.7％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.25(s,1H),7.99(s,1H),3.49(s,6H)ppm；LCMS:m/z244.1 [M+H]+.
步骤五：8-(5-(二甲胺基)-[1,2,4]***并[1,5-c]嘧啶-8-基)-N-((5-氟-2,3,-二氢苯并呋喃-4-基) 甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001501
将E32-4(600mg，1.65mmol)，8-溴-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并 [4,3-c]嘧啶-5-胺B3(800mg，3.30mmol)，六丁基二锡(1.49g，2.57mmol)和三(二亚苄基茚 丙酮)二钯(473mg，517umol)溶于二氧六环(4mL)和N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中。反 应于氮气氛围下升温至100℃，搅拌12小时。LCMS检测有产物生成。将反应液过滤后浓缩， 粗品通过快速硅胶柱分离后，得到的粗产品再用HPLC分离后碱化得到8-(5-(二甲胺基)-[1,2,4] ***并[1,5-c]嘧啶-8-基)-N-((5-氟-2,3,-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺 (20mg，3.12％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(br s,1H),9.35(s,1H),9.07(s,1H),8.59(s,1H),6.93 (t,J＝9.2Hz,1H),6.68(dd,J＝4.0,8.8Hz,1H),4.73(s,2H),4.53(t,J＝8.8Hz,2H),3.44(s,6H), 3.32-3.28(m,2H)ppm；LCMS:m/z 447.3[M+H]+.
实施例143：1-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-基)乙烷-1-醇
步骤一：1-(8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-5-基)乙醇E31-7
Figure BDA0002633742990001502
在-30℃下，往E31-2(300mg,1.33mmol)的四氢呋喃溶液中(10mL)滴加甲基溴化镁(3M,1.33mL)溶液并在此温度下搅拌2小时。反应结束后，用饱和氯化铵水溶液进行淬灭，用乙酸乙酯(50mL*3)进行萃取，合并的有机相干燥，浓缩后用快速硅胶柱纯化得到E31-7(270 mg,84.0％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.43(s,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),6.97(d,J＝7.8Hz,1H), 5.40-5.37(m,1H),4.01(d,J＝5.4Hz,1H),1.74(d,J＝6.5Hz,3H)ppm；LCMS:242.1m/z[M+H]+.
步骤二：使用实施例6的方法，以E31-7和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
1-(8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)-[1,2,4] ***并[1,5-a]吡啶-5-基)乙烷-1-醇
Figure BDA0002633742990001511
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.43(s,1H),9.19-9.17(d,J＝8.0Hz,1H),8.93(s,1H),8.64(s,1H),7.44-7.42(d,J＝8.0Hz,1H),6.99-6.94(m,1H),6.73-6.70(m,1H), 5.90-5.89(d,J＝4.0Hz,1H),5.43-5.40(m,1H),4.78(s,2H),4.55(t,J＝8.8Hz,2H),3.34-3.27 (m,2H),1.56-1.54(d,J＝8.0Hz,3H)ppm；LCMS:447.3m/z[M+H]+.
实施例144：8-(5-(二甲氨基)-6-氟-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋 喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：(6-氯-5-氟吡啶-2-基)-氨基甲酸叔丁基酯E33-1
Figure BDA0002633742990001512
将6-氯-5-氟吡啶-2-甲酸(9.5g，54.1mmol)，叔丁醇(44.2g，596mmol)，4A分子筛(5g)， 叠氮磷酸二苯酯(19.4g，70.4mmol)，N,N-二异丙基乙胺(21.0g，162mmol)溶于甲苯(150mL) 中。将混合物在85℃下搅拌2小时，LCMS检测反应结束，反应结束后冷却至室温，将反应 液减压旋蒸，得到固体，然后乙酸乙酯(250mL*3)萃取。混合有机相，干燥，浓缩，硅胶柱纯化得到E33-1(6.0g，45％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.20(s,1H),7.91-7.85(m,1H),7.82-7.77(m,1H),1.46(s, 9H)ppm；LCMS:m/z 190.8[M-55]+.
步骤二：6-氯-5-氟吡啶-2-胺E33-2
Figure BDA0002633742990001521
将E33-1(6g，24.3mmol)溶于盐酸/乙酸乙酯(35mL)中，在25℃下反应12小时LCMS检测反应结束，加入水稀释，过滤，固体打浆，干燥得到E33-2(3.5g，98％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.49(t,J＝8.6Hz,1H),6.42(dd,J＝2.7,8.8Hz,1H)ppm； LCMS:m/z 147.2[M+H]+.
步骤三：3-溴-6-氯-5-氟吡啶-2-胺E33-3
Figure BDA0002633742990001522
将E33-2(3.50g，24.0mmol)，N-溴代丁二酰亚胺(4.70g，26.3mmol)，碳酸钾(3.63g， 26.3mmol)溶于二氯甲烷(20ml)和N,N-二甲基甲酰胺(2ml)中，在25℃下反应30分钟， TLC检测无原料剩余，加入亚硫酸钠溶液淬灭，然后用乙酸乙酯萃取。混合有机相，干燥， 浓缩，得到粗品E33-3(5.3g，98％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.05(d,J＝7.6Hz,1H),6.59(s,2H)ppm；LCMS:m/z227.0 [M+H]+.
步骤四：(E)-N’-(3-溴-6-氯-5-氟吡啶-2-基)-N,N-二甲基甲脒E33-4
Figure BDA0002633742990001523
将E33-3(5.30g，24mmol)，N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(14.0g，118mmol)溶于甲苯(45ml)，反应升温至100℃反应5小时，LCMS监测反应结束，降温至室温，减压浓缩， 得到粗品E33-4(5.80g，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(s,1H),8.19(d,J＝7.8Hz,1H),3.14(s,3H),3.04(s,3H) ppm；LCMS:m/z 282.0[M+H]+.
步骤五：(E)-N-(3-溴-6-氯-5-氟吡啶-2-基)-N’-羟基甲脒E33-5
Figure BDA0002633742990001531
将E33-4(5.80g，粗品)，盐酸羟胺(2.90g，41.4mmol),乙酸钠(3.70g，45.5mmol)溶于乙酸乙酯(50ml)中，混合物升温至50℃反应1小时。LCMS监测反应结束，降温至室温， 加入水，过滤，收集固体得到E33-5(7.88g，粗品)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(br s,1H),8.42(d,J＝7.6Hz,1H),8.30-7.83(m,1H), 7.75(s,1H)ppm；LCMS:m/z 270.0[M+H]+.
步骤六：8-溴-5-氯-6-氟-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶E33-6
Figure BDA0002633742990001532
将E33-5(7.0，粗品)溶于多聚磷酸(70ml)中，温度升温至80℃反应2小时，LCMS 监测反应结束，降温至室温，加入碳酸氢钠饱和溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取，有机相干燥， 浓缩，得到E33-6(3.80g，58％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(s,1H),8.52(d,J＝8.6Hz,1H)ppm；LCMS:m/z251.8[M+H]+.
步骤七：8-溴-6-氟-NN-二甲基-[124]***并[15-a]吡啶-5-胺E33-7
Figure BDA0002633742990001533
将E33-6(500mg，2.0mmol)，二甲胺盐酸盐(814mg，10mmol)，N,N-二异丙基乙胺(3.60g，28mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3ml)，混合物升温至100℃反应6小时，LCMS 监测反应完毕，加入水稀释，用乙酸乙酯萃取，有机相洗涤，干燥，浓缩，粗品用快速硅胶 柱纯化，得到E33-7(420mg，81.2％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(s,1H),8.18(d,J＝11.5Hz,1H),3.09(d,J＝3.0Hz, 6H)ppm；LCMS:m/z 258.9[M+H]+.
步骤八：使用实施例6的方法，以E33-7和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
8-(5-(二甲氨基)-6-氟-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001541
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(s,1H),9.49(s,1H),9.25(d,J＝14.4Hz,1H),8.95-8.90(m,1H),8.62(s,1H),6.97(t,J＝9.5Hz,1H),6.72(dd,J＝4.1,8.7Hz,1H),4.77(br d,J＝ 4.0Hz,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.27(br d,J＝5.1Hz,2H),3.15(d,J＝2.8Hz,6H)ppm；LCMS m/z 464.1[M+H]+.
实施例145：8-(5-(二甲氨基)-2-甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并 呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：(E)-N'-(3-溴-6-氯吡啶-2-基)-N,N-二甲基乙脒E34-1
Figure BDA0002633742990001542
将2-胺-3-溴-6-氯吡啶(2.30g，11.1mmol)加入到甲苯25mL)中，反应液在100℃下反 应12小时。LCMS监测发现反应完毕。反应液直接浓缩后得到E34-1(3.00g，粗品)。
LCMS:m/z 277.7[M+H]+.
步骤二：(E)-N'-(3-溴-6-氯吡啶-2-基)-N-羟基乙脒E34-2
Figure BDA0002633742990001543
将E34-1(3.00g，10.8mmol)溶于乙醇(40mL)中，向溶液中加入盐酸羟胺(1.51g，21.7mmol)和乙酸钠(1.78g，21.7mmol)。将混合物在60℃下搅拌5小时，LCMS监测发现 反应完毕。将反应液干燥浓缩后得到粗品。粗品在25℃下用水(20mL)中打浆2小时。过滤 混合物，收集并干燥固体得到产物E34-2(2.60g，87.1％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.58(s,1H),8.50(s,1H),8.05(d,J＝8.0Hz,1H),6.97(d, J＝8.0Hz 1H)2.29(s 3H)ppm；LCMS:m/z 265.9[M+H]+.
步骤三：8-溴-5-氯-2-甲基-[,2,4]***并[1,5-a]吡啶E34-3
Figure BDA0002633742990001551
将E34-2(2.25g，8.51mmol)加入多聚磷酸(40g)中，将混合好的反应液在95℃下反应4小时。LCMS检测发现反应完毕。将反应液倒入冰水(200mL)混合物中，向混合物中 直接加入碳酸钠至混合物pH到7，向该混合物中加入乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤，再 用无水硫酸钠干燥，最后浓缩后得到E34-3(2.00g，粗品)，直接用于下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69(d,J＝8.0Hz,1H),6.98(d,J＝8.0Hz,1H),2.69(S,3H) ppm；LCMS:m/z 248.1[M+H]+.
步骤四：8-溴-5-二甲胺-2-甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶E34-4
Figure BDA0002633742990001552
将E34-3(2.15g，8.72mmol)溶于N,N-二异丙基乙胺(20mL)中，加入盐酸二甲胺盐。反应液在80℃反应5小时。LCMS监测发现反应完毕。向反应液中加入饱和食盐水淬灭，后 用乙酸乙酯萃取。有机相再次用饱和食盐水洗涤，后干燥，浓缩。粗品用快速硅胶柱分离得 到E34-4(2.00g，76.7％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.61(d,J＝8.0Hz,1H),6.17(d,J＝8.0Hz,1H),3.12(s,6H), 2.65(s,3H)ppm；LCMS:m/z 257.2[M+H]+.
步骤五：使用实施例6的方法，以E34-4和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
8-(5-(二甲氨基)-2-甲基-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基) 甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001553
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50(s,1H),9.28(s,1H),9.00(d,J＝8.4Hz,1H),8.74(d,J ＝1.2Hz,1H),6.96(t,J＝9.6Hz,1H),6.71(dd,J＝3.9,8.8Hz,1H),6.61(d,J＝8.4Hz,1H),4.76 (s,2H),4.54(t,J＝8.8Hz,2H),3.31-3.27(m,2H),3.13(s,6H),2.55(s,3H)ppm；LCMS:m/z 460.3[M+H]+。
实施例146：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8- 基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-6-甲腈
步骤一：6-氨基-5-溴烟酸甲酯E35-1
Figure BDA0002633742990001561
将6-氨基烟酸甲酯(4.0g，26.3mmol)，N-溴代丁二酰亚胺(5.15g，28.9mmol)溶于二 氯甲烷(100mL)，在20℃氮气气氛下反应1小时，LCMS监测反应结束，反应液依次用亚硫酸钠溶液，碳酸钠溶液和水洗涤。有机相干燥，浓缩得到E35-1(6.1g，粗品)。
LCMS:m/z 231.0[M+H]+.
步骤二：(E)5-溴-6-(((二甲胺基)亚甲基)氨基)烟酸甲酯E35-2
Figure BDA0002633742990001562
将E35-1(6.1g，26.4mmol)，N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(6.3g，53mmol)溶于甲苯 (50ml)，升温至100℃在氮气气氛下反应12小时，LCMS监测反应结束，反应液减压浓缩得到E35-2(7.6g，粗品)。
LCMS:m/z 285.7/287.7[M+H]+.
步骤三：(E)5-溴-6-(N’-羟基甲脒基)烟酸甲酯E35-3
Figure BDA0002633742990001563
将E35-2(5.0g，17.5mmol)，乙酸钠(3.2g，39mmol)，盐酸羟胺(2.4g，25mmol)溶 于乙醇(50mL)中，升温至50℃反应4小时，LCMS监测反应结束，加入水，过滤收集固体 得到E35-3(4.0g，84％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),8.71(d,J＝1.9Hz,1H),8.45(d,J＝9.4Hz,1H), 8.38(d,J＝1.9Hz,1H),8.00(s,1H),3.84(s,3H)ppm；LCMS:m/z 276.0[M+H]+.
步骤四：8-溴-[1,2,4]***并[1,5,a]吡啶-6-甲酸甲酯E35-4
Figure BDA0002633742990001571
将E35-3(4.0g，15mmol)溶于多聚磷酸(20mL)中，升温至100℃反应2小时，LCMS 监测反应结束，降温至室温，加入碳酸氢钠饱和溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取，有机相干燥， 浓缩，得到E35-4(2.8g，75％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(d,J＝1.4Hz,1H),8.74(s,1H),8.29(d,J＝1.3Hz,1H), 3.92(s,3H)ppm；LCMS:m/z 257.7[M+H]+.
步骤五：8-溴-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-6-甲酰胺E35-5
Figure BDA0002633742990001572
将E35-4(2.4g，9.4mmol)，氨水(15g，103mmol)溶于乙醇(5mL)中，反应升温至 80℃于氮气气氛中反应2小时，TLC监测无原料剩余，冷却至室温，加入水，用乙酸乙酯萃 取。混合有机相，干燥，浓缩，用快速硅胶柱纯化得到E35-5(830mg，37％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝1.3Hz,1H),8.68(s,1H),8.35(d,J＝1.3Hz,1H), 8.25(br s,1H),7.79(br s,1H).
步骤六：8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-6-甲酰胺 E35-6
Figure BDA0002633742990001573
将E35-5(400mg，1.7mmol)，联硼酸频那醇酯(506mg，2.0mmol)，醋酸钾(489mg，5.0mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(271mg，0.33mmol)，溶于 1,4-二氧六环(10mL)，温度升温至120℃于氮气气氛下反应5小时，TLC检测无原料剩余，反应液含E35-6，不处理直接用于下一步。
步骤七：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)胺基)-[1,2,4]***并[4,3-c]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-6-甲酰胺E35-7
Figure BDA0002633742990001581
向上一步反应液中加入B3(302mg，0.83mmol)，碳酸钠(528mg，4.98mmol)，[1,1'-双 (二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(136mg，0.17mmol)和水(2mL)。反应于氮气氛围下升温至 100℃反应2小时，LCMS监测反应结束，降温至室温，加入乙酸乙酯稀释溶解，有机相用水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，粗品用快速硅胶柱纯化，再用HPLC纯化得到E35-7(34mg，4.6％收率)。
LCMS:m/z 446.1[M+H]+.
步骤八：8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)胺基)-[1,2,4]***并[4,3-c]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-6-氰
Figure BDA0002633742990001582
在0℃下，向E35-7(34mg，0.76mmol)，三乙胺(31mg，0.31mmol)的四氢呋喃(1.5)溶液中加入三氟乙酸酐(48.1mg，0.23mmol)，混合物在25℃反应12小时，LCMS监测反应 结束，向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液和水，用乙酸乙酯萃取，混合有机相，干燥，浓缩， 粗品用快速硅胶柱纯化，再用HPLC纯化得到最终化合物8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基) 甲基)胺基)-[1,2,4]***并[4,3-c]吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[1,5-a]吡啶-6-氰(7.5mg，23％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.81(s,1H),9.59(s,1H),9.57(br s,1H),9.40(s,1H),9.14 (br d,J＝1.1Hz,1H),8.86(s,1H),6.97(t,J＝9.6Hz,1H),6.72(dd,J＝3.9,8.6Hz,1H),4.80(s,2H), 4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.25-3.22(m,2H)ppm；LCMS:m/z 428.0[M+H]+.
实施例147：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟-3-(甲磺酰)咪唑并[1,2-a]吡啶 -8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001591
步骤一：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟-3-碘咪唑并[1,2-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺E36-1
Figure BDA0002633742990001592
在25mL圆底烧瓶中加入N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟咪唑并[1,2-a]吡啶 -8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺(实施例21)(600mg,1.43mmol)，无水二氯甲烷(10ml) 和冰醋酸(2ml)，冰浴下加入碘代丁二酰亚胺(353.9mg，1.57mmol)。然后室温下搅拌1 小时，反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取(50mL*3)，食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后过硅 胶柱(洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝20：1)真空干燥后得到纯的E36-1(0.39g，50.0％收率)。
LCMS:m/z 546.1[M+H]+.
步骤二：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟-3-(甲磺酰)咪唑并[1,2-a]吡啶-8- 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001593
在封管中加入E36-1(100mg,0.18mmol)和无水二甲亚砜(3ml)，依次加入甲烷亚磺酸钠(55.13mg，0.54mmol)，碘化亚铜(102.84mg，0.54mmol)。鼓吹氮气五分钟，密封后 在微波反应器中120℃反应20分钟，然后100℃继续微波反应3小时。冷却后加入二氯甲烷(50mL)，用水(30mL)和饱和食盐水(30mL)洗涤。有机层旋干后用制备液相制备得到 N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(6-氟-3-(甲磺酰)咪唑并[1,2-a]吡啶-8-基)-[1,2,4]*** 并[4,3-c]嘧啶-5-胺(17mg，19.0％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.70(s,1H),9.26-9.21(m,1H),8.97(dd,J＝10.7,2.4Hz, 1H),8.86-8.83(m,1H),8.72(s,1H),8.33(s,1H),6.90(d,J＝10.2Hz,1H),6.69-6.65(m,1H), 4.81(s,2H),4.52(t,J＝8.8Hz,2H),3.50(s,3H),3.31-3.29(m,2H)ppm；LCMS:m/z 498.1 [M+H]+.
实施例148：(6-氟-8-(5-(((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧 啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)二甲基膦氧化物
Figure BDA0002633742990001601
在封管中加入E36-1(100mg,0.18mmol)和无水1,4-二氧六环(4ml)，依次加入二甲基 氧化膦(42.15mg，0.54mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(16.48mg,0.02mmol)，4,5-双(二苯 基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(10.42mg,0.02mmol)，和三乙胺(0.05mL)。鼓吹氮气五分钟，密封后 在100℃搅拌15小时。冷却后加入二氯甲烷(50mL)，用水(30mL)和饱和食盐水(30mL) 洗涤。有机层旋干后用快速层析柱纯化(洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝4:1)得到(6-氟-8-(5-(((5- 氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)氨基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-8-基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基) 二甲基膦氧化物(55mg，61.68％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.70(s,1H),9.55(s,1H),9.12-8.97(m,3H),8.12(s,1H), 7.02-6.92(m,1H),6.73(s,1H),4.79(s,2H),4.55(t,J＝8.7Hz,2H),3.32(d,J＝8.9Hz,2H),1.92 (s,3H),1.89(s,3H)ppm；LCMS:m/z 496.1[M+H]+.
使用实施例148的方法，以N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基咪唑并[1,2-a] 吡啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺(实施例88)为原料可以得到以下化合物：
实施例149：N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(5-甲基-3-(甲磺酰)咪唑并[1,2-a]吡 啶-8-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001602
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),9.00(t,J＝5.7Hz,1H),8.64(s,1H),8.53(d,J＝7.6Hz,1H),8.33(s,1H),7.24(d,J＝7.9Hz,1H),6.95–6.87(m,1H),6.66(dd,J＝8.6, 3.8Hz,1H),4.79(d,J＝5.6Hz,2H),4.52(t,J＝8.7Hz,2H),3.65(s,3H),3.30(d,J＝8.7Hz,2H), 3.07(s,3H)ppm；LCMS:m/z 494.1[M+H]+.
实施例150：8-(5-(二甲氨基)-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4- 基)甲基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：3-溴-6-氯-2-肼基吡啶E37-1
Figure BDA0002633742990001611
3-溴-6-氯-2-氟-吡啶(1.00g，4.75mmol)，水合肼(4.10mL)的N,N-二甲基甲酰胺溶液 在80℃下搅拌反应2小时。LCMS监测反应结束后，浓缩，得到粗品然后用水在25℃下打浆 30分钟，过滤，真空干燥，得到棕色固体E37-1(1.00g，94.6％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55(d,J＝8.0Hz,1H),6.58(d,J＝7.6Hz,1H),6.32(brs, 1H),3.95(br d,J＝2.8Hz,2H)ppm；LCMS:m/z 224.0[M+H]+.
步骤二：8-溴-5-氯-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶E37-2
Figure BDA0002633742990001612
将E37-1(1.00g，4.49mmol)，原甲酸三甲酯(9.68g，91.2mmol)，三氟乙酸(20mg，0.175 mmol)的混合物在氮气氛围100℃下反应12小时。LCMS监测无原料剩余，反应液浓缩得到 粗品，然后用甲基叔丁基醚打浆得到E37-2(960mg，91.9％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.03(s,1H),7.53(d,J＝7.6Hz,1H),6.84(d,J＝7.6Hz,1H) ppm；LCMS:m/z 234.0[M+H]+.
步骤三：8-溴-N,N-甲基-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-5-胺E37-3
Figure BDA0002633742990001613
将E37-2(960mg，4.13mmol)和40％的二甲胺水溶液(30mL)混合，在100℃反应12小时，LCMS和TLC监测反应结束，降至室温，用乙酸乙酯进行萃取，合并的有机相用饱和 食盐水洗涤，干燥，浓缩，得到粗品，之后用乙酸乙酯打浆，收集固体，得到灰白色固体E37-3(620mg，623％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.89(s,1H),7.46(d,J＝7.6Hz,1H),6.12(d,J＝7.6Hz,1H), 2.92(s,6H)ppm；LCMS:m/z 241.1[M+H]+.
步骤四：使用实施例6的方法，以E37-3和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
8-(5-(二甲基胺)-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-8-基)-N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲 基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001621
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(d,J＝8.0Hz,2H),9.35(s,1H),8.96(d,J＝8.0Hz,1H),8.83(br s,1H),7.01-6.92(m,1H),6.71(dd,J＝8.4,3.6Hz,1H),6.60(d,J＝8.0Hz,1H), 4.77(br d,J＝3.6Hz,2H),4.56(t,J＝8.8Hz,2H),3.33-3.32(m,2H),2.93(s,6H)ppm；LCMS: m/z 446.3[M+H]+.
实施例151：8-(3,5-二甲基-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-8-基)-N-(5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4- 基)甲基)-[1,2,4]***[4,3-c]嘧啶-5-胺
步骤一：8-溴-3,5-二甲基-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶E38-1
Figure BDA0002633742990001622
将E25-1(700mg，3.46mmoL)，三氟乙酸(7.9mg，0.07mmoL)和原乙酸三乙酯(10.1g，63.4mmoL)混合，升温至100℃在氮气气氛下反应10小时，LCMS监测反应结束，降至室温， 将反应液浓缩，然后用甲基叔丁基醚打浆后得到8-溴-3,5-二甲基-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶 E38-1(600mg，收率76.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.52(d,J＝7.1Hz,1H),6.58(dd,J＝1.0,7.3Hz,1H),2.94 (s,3H),2.80(s,3H)ppm；LCMS:m/z 228.0[M+H]+.
步骤二：使用实施例6的方法，以E38-1和中间体B3为原料可以得到以下化合物：
8-(3,5-二甲基-[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-8-基)-N-(5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-[1,2,4] ***[4,3-c]嘧啶-5-胺
Figure BDA0002633742990001631
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.43(s,1H),9.18(d,J＝7.9Hz,1H),8.94(br s, 1H),8.65(s,1H),7.44(d,J＝7.9Hz,1H),6.97(t,J＝9.6Hz,1H),6.72(dd,J＝3.8,8.6Hz,1H), 5.90(d,J＝4.9Hz,1H),5.47-5.38(m,1H),4.78(br s,2H),4.55(t,J＝8.8Hz,2H),3.31-3.30(m, 2H),1.55(d,J＝6.4Hz,3H)ppm；LCMS:m/z 431.3[M+H]+.
药理学及应用
EED作为PRC2蛋白复合物的主要组成部分之一，虽然并不具有酶催化的活性，但是它 对PRC2的整体功能具有重要的作用。EED对PRC2的作用具体表现为两个方面：1)EED 直接与三甲基化的H3K27Me3结合，这样能够把PCR2复合物定位在需要修饰的染色质上； 2)EED对EZH2的酶催化功能有很大的变构促进作用。因此，开发作为变构蛋白EED的靶 点化合物为提供抑制EZH2酶活性提供了新策略。而且这样的抑制剂具有比EZH2酶催化位 点抑制剂具有更好或互补的优势，比如当病人对于EZH2酶抑制剂产生耐药性时，EED抑制 剂同样可以起到抑制EZH2酶活性的作用。本发明公开了化合物可以作为EED靶点抑制剂， 并对与EED和/或PRC2作用机理相关的疾病有治疗作用。
本发明公开化合物的生物学功能在生化以及细胞水平的测试中得到了证明。比如在生化 测试中，本发明公开的化合物能够与和EED蛋白结合的H3K27Me3多肽有很强的竞争结合 作用(IC50可达<0.2nM)。在细胞水平上，本发明公开化合物不仅可以抑制组蛋白H3K27的 甲基化水平而且也可以通过这一作用抑制癌细胞的增殖(IC50可达<1nM)。与US20160176882A1，WO2017219948A1中的化合物N-((5-氟-2,3-二氢苯并呋喃-4-基)甲基)-8-(2-甲基吡啶-3-基)-[1,2,4]***并[4,3-c]嘧啶-5-胺相对比，本发明的化合物抗细胞增殖活 性增加了约10倍。本发明公开的化合物在与EED蛋白的结合时，在结合的“口袋”外侧的双 环结构能使化合物具有更好的代谢稳定性。
实施例152：通过AlphaScreen(a-筛选)方法评价化合物在阻断EED与H3K27me3结合的 效果
首先配置不同浓度梯度的化合物溶液。化合物粉末用DMSO溶解成母液。取1.5μl化合物母液至198.5μl反应缓冲液(25mM HEPES(pH 8.0)，50mM NaCl，0.015％Tween 20，0.5％BSA)中混匀，再用含有0.75％DMSO的上述缓冲液进行3-倍梯度稀释，同一化合物设置9个不同的测试浓度。取5μL不同浓度梯度的化合物至ProxiPlate-384 Plus，White检测板 (PerkinElmer，6008280)中，每个浓度梯度设置2个平行重复。
其次进行结合阻断反应。用上述缓冲液稀释带有His6标签的全长EED蛋白(441个氨基 酸)至60nM，以及生物素标记的多肽片段H3K27me3(第19-33位氨基酸)(Biotinylated- H3K27me3)至75nM。分别转移5μl浓度为75nM多肽片段以及5μl的60nM蛋白至含有化 合物的检测孔内，薄膜封住检测板，室温孵育30分钟。
最后AlphaScreen方法检测。临用前，镍螯合受体珠与链霉抗生物素供体珠以1:1的比例 (Perkin Elmer，产品号6760619M)混入上述反应缓冲液中，再向各检测孔中加入5μl上述预 混的检测液，供体珠和受体珠终浓度均为5μg/mL。锡箔遮封住检测板，室温避光放置1小 时。使用Spectra max i3上的AlphaScreen检测器读取信号。根据阳性对照(最大信号对照) 和阴性对照(最小信号对照)获得的读数对AlphaScreen信号进行标准化，以给出不同浓度 化合物的抑制率,之后用GraphPad Prism 5进行非线性回归分析，通过Y＝Bottom+ (Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))剂量响应方程做出抑制曲线，得到各化合物的 IC50值。
为了排除由于化合物干扰AlphaScreen检测***而产生的假阳性，以同样的方法稀释化 合物，用生物素标记的多肽Biotinylated-(His)6代替检测体系中的EED和多肽H3K27me3，孵 育同等时间后，在Spectra max i3上读取信号值。以同样的方法处理数据。
下表3显示了本发明部分化合物的IC50值。
表3
Figure BDA0002633742990001641
Figure BDA0002633742990001651
Figure BDA0002633742990001661
Figure BDA0002633742990001671
Figure BDA0002633742990001681
实施例153：ELISA(H3K27三甲基化)分析
将代表性的本公开内容的化合物用DMSO中进行3-倍梯度稀释，每化合物检测10个浓 度梯度，最高测定浓度为10μM。化合物200-倍稀释到在96-孔板中培养的G401细胞中(DMSO 终浓度为0.5％)。给药细胞培养72小时后，ELISA方法检测组蛋白H3K27三甲基化水平。
组蛋白提取:96-孔板中化合物处理的细胞用1x PBS(10x PBS缓冲液(80g NaCl(Sigma, 产品号S3014),2g KCl(Sigma,产品号60128),14.4g Na2HP04(Sigma,产品号S5136),2.4g KH2P04(Sigma,产品号P9791)至1L水中，pH至7.4)洗涤三次，每孔加入100μL0.4N HCl， 置于4℃，温和振摇2小时裂解细胞。细胞裂解液再用80μL中和缓冲液(0.5M磷酸氢二钠， pH 12.5,2.5mM DTT；1％cocktail(Sigma，产品号P8340)中和(充分混匀细胞裂解液与 中和缓冲液)。
ELISA检测方法:将细胞裂解液平行转移至2个384-孔检测板(PerkinElmer，OptiPlate-384HB,产品号6007290)中，一块板用于检测H3K27三甲基化水平，另一块板用于测定H3的水平，PBS调至终体积为50μL/孔，4℃包被过夜。次日，弃去孔内溶液，用TBST 缓冲液(l xTBS(10x TBS:24.2g Tris(Sigma,产品号T6066),80g NaCl(Sigma，产品号S3014)至1L水中，HCl调pH至7.6),0.1％Tween-20)洗涤5次，于吸水纸上扣干水分。将70μL 封闭缓冲液(TBST,5％BSA)加入已包被之反应孔中，于室温孵育1小时。弃去封闭缓冲液， 加入一级抗体(30μL/孔)。所需一级抗体均用封闭缓冲液稀释，稀释倍数如下：抗H3K27me3 抗体(Cell Signaling Technology,产品号9733)，1:2000稀释；抗H3抗体(Cell SignalingTechnology,产品号4499),1：10000稀释。加入一抗后，置室温孵育1小时。TBST洗涤5 次后，扣干水分，各反应孔加入二级抗体(30μL/孔)，室温孵育1小时。二级抗体(抗兔 抗体(Jackson ImmunoResearch,产品号111-035-003))用封闭缓冲液稀释2000倍后使用。1小时后，TBST洗涤，扣干水分。于各孔中加入30μL的ECL底物(Pierce，产品号34080)，2000rpm离心30秒。利用Molecular Devices，SpectraMax检测各样品信号。数据处理：H3K27甲基 化读数先用H3信号进行标准化，0.5％DMSO处理的样品作为对照，计算出化合物的抑制百 分率。采用GraphPad prisim5程序将数据拟合为剂量响应曲线，得到测试化合物的IC50值。
下表4显示了本发明部分化合物的IC50值。
表4
Figure BDA0002633742990001691
Figure BDA0002633742990001701
Figure BDA0002633742990001711
Figure BDA0002633742990001721
Figure BDA0002633742990001731
Figure BDA0002633742990001741
Figure BDA0002633742990001751
Figure BDA0002633742990001761
实施例154：细胞增殖分析
采用标准细胞培养条件，人类B细胞非霍奇金淋巴瘤细胞KARPAS-422S培养在培养瓶 中。培养基为含15％胎牛血清(FBS，Invitrogen，产品号10099-141)，1％青霉素/链霉素溶液 (P/S)RPMI-1640(Invitrogen，产品号11875)，培养瓶置于温度37℃，相对湿度95％，5％CO2的无菌培养箱中培养。为了检测PRC2抑制剂对细胞增殖的影响，取指数生长期的细胞，以 1x104细胞/孔的密度接种到96孔板(Corning，产品号3904)中，每孔加入100μL培养基。随 后，将本文公开内容的、不同浓度的化合物加入到已接种细胞的孔中(每个化合物设置9个 浓度梯度，最高检测浓度为10μM,3-倍梯度稀释)，每个处理浓度设置2个平行重复，DMSO 终浓度为0.5％。之后每隔3～4天用Vi-CELL(Beckman Coulter)测定存活细胞数。每次计过数 的细胞以同等密度(1X 104个细胞/孔)接种到新的96-孔板中，补充新鲜培养基至100μL， 同时加入不同浓度的化合物。培养至第13天，每孔加入100μL的CellTiter-Glo(CTG) (Promega,产品号G7573),室温避光放置10～20分钟，利用Molecular Devices,SpectraMax i3X 读取发光信号。采用GraphPad prisim5将数据拟合为剂量响应曲线，从而得到测试化合物的 IC50值。
下表5显示了本发明部分化合物的IC50值。
表5
Figure BDA0002633742990001762
Figure BDA0002633742990001771
Figure BDA0002633742990001781
Figure BDA0002633742990001791
Figure BDA0002633742990001801
Figure BDA0002633742990001811
Figure BDA0002633742990001821
本发明公开的化合物可用于治疗与EED蛋白和/或PRC2蛋白复合物作用机理相关的癌症， 包括但不局限于扩散大B细胞淋巴癌、滤泡性淋巴瘤、非霍奇金森淋巴瘤等等淋巴癌、白血 病、多发性骨髓瘤、间皮瘤、胃癌、恶性横纹肌样瘤、肝癌、***癌、乳腺癌、脑瘤包括 神经母细胞瘤、胶质瘤、胶质母细胞瘤和星形细胞瘤、***、结肠癌、黑色素瘤、子宫内 膜癌、食管癌、头颈癌、肺癌、鼻咽癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、甲状 旁腺肿瘤、子宫肿瘤和软组织肉瘤等等。

Claims (20)

1.一种如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物：
Figure FDA0002633742980000011
其中，
A为
Figure FDA0002633742980000012
R01、R02和R03分别独立地为氢或卤素；
n为0或1；
m为1或2；
X为C或N；
R1为双环结构且具有芳香性，优选
Figure FDA0002633742980000013
Figure FDA0002633742980000014
X1和X5独立地为C或N；
X2独立地为N或CR2；
X3独立地为N或CR3；
X4独立地为N或CR4；
X6独立地为CR6、N、NR6、O或S；
X7独立地为CR7、N、O或S；
X8独立地为CR8、N、O或S；
X9独立地为N或CR9；
R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地为H、卤素、-CN、R5取代或未取代的氨基、R5取代或未取代的羟基、R5取代或未取代的C1-4烷基、R5取代或未取代的C1-4烷氧基、R5取代或未取代的C3-6的环烷基、R5取代或未取代的C1-4卤代烷基、-(C＝O)R16、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17、-SO2R16、-SO2NR16R17、-POR16R17、R5取代或未取代的C3-6杂环烷基、或C3-6杂螺环烷基；
R5独立地为C1-4烷氧基、-CN、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷氧基、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-NRa1Rb1、卤素、羟基、C3-6杂环烷基、C3-6杂环烷基、被1、2或3个C1-4烷基取代的C3-6杂环烷基、被1、2或3个C3-6杂环烷基取代的C3-6杂环烷基、C6-18芳基、C1-15杂芳基、-C(＝O)NR16aR17a、-CO2R16a、-O(C＝O)R16a、-NH(C＝O)R16a或-(C＝O)R16a；Ra1和Rb1独立地为H、C1-4烷基、被1、2或3个-NRa2Rb2取代的C1-4烷基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基或被1、2或3个羟基取代的C1-4烷氧基；Ra2和Rb2独立地为H或C1-4烷基；每个R16a和每个R17a独立地为H、C1-4烷基或C3-6杂环烷基；
R5的个数为1、2、3、4、5或6；
R16和R17独立地为H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基或C3-6杂环烷基；
所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C3-6杂螺环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C1-15杂芳基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3、4、5或6个。
2.如权利要求1所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物：
n为1；
和/或，X为N；
和/或，A为
Figure FDA0002633742980000021
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000031
为
Figure FDA0002633742980000032
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000033
为
Figure FDA0002633742980000034
其中，X6独立地为CR6或N；X7独立地为CR7或N；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000035
为
Figure FDA0002633742980000036
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000037
为
Figure FDA0002633742980000038
和/或，R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14和R15独立地为H、卤素、-CN、-OH、-NRaRb、C1-4烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、被1、2或3个R5取代的C1-4烷氧基、C3-6的杂环烷基、被1、2或3个R5取代的C3-6的杂环烷基、-(C＝O)R16、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17、-SO2R16、-SO2NR16R17、-POR16R17或C3-6杂螺环烷基；
其中，Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；R16和R17独立地为H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基或C3-6杂环烷基；
每个R5独立地为-OH、-CN、C1-4烷基、C1-4烷氧基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷氧基、-NRa1Rb1、C3-6杂环烷基、被1、2或3个C1-4烷基取代的C3-6杂环烷基、被1、2或3个C3-6杂环烷基取代的C3-6杂环烷基、C6-18芳基、C1-15杂芳基、-C(＝O)NR16aR17a、-CO2R16a、-O(C＝O)R16a、-NH(C＝O)R16a或-(C＝O)R16a；Ra1和Rb1独立地为H、C1-4烷基、被1、2或3个-NRa2Rb2取代的C1-4烷基或被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基；Ra2和Rb2独立地为H或C1-4烷基；每个R16a和R17a独立地为H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基或C3-6杂环烷基；
所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C3-6杂螺环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C1-15杂芳基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3、4、5或6个；
和/或，所述同位素标记化合物中所述同位素选自2H、3H、11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl和125I。
3.如权利要求1或2所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，
R1为以下任一结构：
Figure FDA0002633742980000041
和/或，R2为H、卤素、-CN、-NRaRb、C1-4烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、C3-6的杂环烷基、被1、2或3个R5取代的C3-6的杂环烷基、C3-6杂螺环烷基、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17或-NRaRb；每个R16和R17独立地为H或C1-4烷基；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；每个R5独立地为-OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷氧基、-NRa1Rb1、C3-6杂环烷基、被1、2或3个C1-4烷基取代的C3-6杂环烷基、被1、2或3个C3-6杂环烷基取代的C3-6杂环烷基、或C1-15杂芳基；Ra1和Rb1独立地为H、C1-4烷基、被1、2或3个-NRa2Rb2取代的C1-4烷基或被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基；Ra2和Rb2独立地为H或C1-4烷基；所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C3-6杂螺环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C1-15杂芳基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3、4、5或6个；
和/或，R3为H、卤素、-CN、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基或-C(＝O)NR16R17；
和/或，R4为H、卤素或C1-4烷基；
和/或，R6为H、卤素、-CN、C1-4烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4烷基、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17、-(C＝O)R16、SO2R16或-POR16R17；每个R16和每个R17独立地为H、C1-4烷基或C3-6杂环烷基；每个R5独立地为-OH、-CN、-NRa1Rb1、C6-18芳基、-C(＝O)NR16aR17a、-CO2R16a、-O(C＝O)R16a、-NH(C＝O)R16a、-(C＝O)R16a；Ra1和Rb1独立地为H或C1-4烷基；每个R16a和R17a独立地为H、C1-4烷基或C3-6杂环烷基；
和/或，R7为H、-OH、-NRaRb、C1-4烷基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-CO2R16或-C(＝O)NR16R17；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；R16和R17独立地为H、C1-4烷基或C1-4卤代烷基；
和/或，R8为H或C1-4烷基；
和/或，R9为H、卤素或C1-4烷基；
和/或，R10为H、卤素、C1-4烷基、被1、2或3个R5取代的C1-4烷基；每个R5独立地为-NRa1Rb1；Ra1和Rb1独立地为H或C1-4烷基；
和/或，R11为H、卤素或C1-4烷基；
和/或，R12、R13、R14和R15为H。
4.如权利要求1-3中至少一项所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，
R1为以下任一结构：
Figure FDA0002633742980000061
5.如权利要求4所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，基团
Figure FDA0002633742980000062
中：
(i)R2为H、C1-4烷基、被1、2或3个R5-2-1取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、C3-6杂环烷基、被1、2或3个C1-4烷基取代的C3-6杂环烷基、C3-6杂螺环烷基或-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；
每个R5-2-1独立地为-OH、C1-4烷基、C1-4烷氧基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷氧基、-NRa1Rb1、C3-6杂环烷基或被1、2或3个R5-2-2取代的C3-6杂环烷基；Ra1和Rb1独立地为H、C1-4烷基、被1、2或3个-NRa2Rb2取代的C1-4烷基或被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基；R5-2-2为C1-4烷基或C3-6杂环烷基；Ra2和Rb2独立地为H或C1-4烷基；
其中，所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；所述C3-6杂螺环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；
和/或，(ii)当X3为CR3时，R3为H、卤素、C1-4烷氧基或-CN；
和/或，(iii)R7为H、C1-4烷基或-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基。
6.如权利要求5所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，基团
Figure FDA0002633742980000071
中：
(i)R2为H、-CH3、-CF3、-OCH3、
Figure FDA0002633742980000072
-N(CH3)2、
Figure FDA0002633742980000073
-CH2OCH2C(CH3)2OH、-CH2N(CH3)2、
Figure FDA0002633742980000074
-CH2NHCH2C(CH3)2OH、
Figure FDA0002633742980000075
Figure FDA0002633742980000076
-CH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)2、
Figure FDA0002633742980000077
-C(CH3)2OH或-CHF2；
和/或，(ii)当X3为CR3时，R3为H、-OCH3、-F或-CN；
和/或，(iii)R7为H、-NH(CH3)、-N(CH3)2或-CH3。
7.如权利要求4所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，基团
Figure FDA0002633742980000078
中：
(i)R2为H、-CN、C1-4烷基、被1、2或3个R5-2-3取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17或-NRaRb；其中，每个R16和R17独立地为H或C1-4烷基；每个R5-2-3独立地为-OH或-NRa1Rb1；Ra1和Rb1独立地为H或C1-4烷基；每个R5-2-3优选-OH或-N(CH3)2；
和/或，(ii)R3为H、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基或-C(＝O)NR16R17；R16和R17独立地为H或C1-4烷基；
和/或，(iii)R6为H、卤素、-CN、C1-4烷基、被1、2或3个R5-6-1取代的C1-4烷基、-CO2R16、-C(＝O)NR16R17、-(C＝O)R16-1、-SO2R16或-POR16R17；每个R16和每个R17独立地为H或C1-4烷基；R16-1为H、C1-4烷基或C3-6杂环烷基；每个R5-6-1独立地为C6-18芳基、-C(＝O)NR16aR17a、-OH、-CN、-CO2R16a、-O(C＝O)R16a、-NH(C＝O)R16a、-(C＝O)R16a1或-NRa1Rb1；Ra1和Rb1独立地为H或C1-4烷基；每个R16a和每个R17a独立地为H或C1-4烷基；R16a1为C3-C6杂环烷基；R16-1和R16a1中，所述C3-6杂环烷基中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1、2、3或4个；
和/或，(iv)R7为H、C1-4烷基、被1、2或3个羟基取代的C1-4烷基、C1-4卤代烷基、-OH、-CO2R16或-C(＝O)NR16R17；R16和R17独立地为H或C1-4烷基。
8.如权利要求7所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，基团
Figure FDA0002633742980000081
中：
(i)R2为H、-CH3、-CO2CH3、-CH2OH、-CON(CH3)2、-CF3、-CH2N(CH3)2、-OCH3、-N(CH3)2、
Figure FDA0002633742980000082
或-CN；
和/或，(ii)R3为H、-F、-Cl、-CH3、-OCH3、-CONH2、-CONHCH3或-CON(CH3)2；
和/或，(iii)R6为H、-COOCH2CH3、-COOH、-CONH2、-CH3、-COCH3、
Figure FDA0002633742980000083
-CH2CH3、-F、-CN、-CH(CH3)2、-CH2CONH2、-CH2CH2OH、-CH2OH、-CH2NH2、-CH2COOCH3、-CH2COOH、-CH2CON(CH3)2、-CH2CH2OCOCH3、-CH2NHCOCH3、-CON(CH3)2、-CN、
Figure FDA0002633742980000084
-CONH2、-CH2CN、-SO2Me或-PO(CH3)2；
和/或，(iv)R7为H、-CF3、-CH3、-OH、-CH2OH、-COOCH2CH3、-COOH、-CONH2或-CON(CH3)2。
9.如权利要求4所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，
基团
Figure FDA0002633742980000085
中，R2为H、卤素、C1-4烷基或-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；R6为H或C1-4烷基；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000086
中，R2为C1-4烷基；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000091
中，X6为N或CH；R7为H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基或-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000092
中，X6为NR6、O或S；R6为C1-4烷基；R7为H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基或-NRaRb；Ra和Rb独立地为H或C1-4烷基；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000093
中，R3为H或C1-4卤代烷基；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000094
中，X8为CR8或N；R8为H或C1-4烷基；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000095
中，R10和R11独立地为H或卤素；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000096
中，R2为H或卤素；R4为H、卤素或C1-4烷基；R9为H、卤素或C1-4烷基；R10为H、C1-4烷基、被1、2或3个氨基取代的C1-4烷基或卤素；R11为H、C1-4烷基或卤素；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000097
中，R11独立地为H或C1-4烷基。
10.如权利要求9所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，
基团
Figure FDA0002633742980000101
中，R2为H、-Cl、-CH3或-N(CH3)2；R6为H或-CH3；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000102
中，R2为-CH3；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000103
中，X6为N或CH；R7为H、-CH3、-NH2或-CF3；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000104
中，X6为-NCH3、O或S；R7为H、-CH3、-NH2或-CF3；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000105
中，R3为H或-CF3；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000106
中，X8为CH或N；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000107
中，R10和R11独立地为H或-F；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000108
中，R2为H或-F；R4为H、-F或-CH3；R9为H、-F、-Cl或-CH3；R10为H、-CH3、-CH2CH2NH2、-F或-Cl；R11为H、-CH3或-F；
和/或，基团
Figure FDA0002633742980000109
中，R11独立地为H或-CH3。
11.如权利要求1-10中至少一项所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，
R1为
Figure FDA0002633742980000111
Figure FDA0002633742980000112
Figure FDA0002633742980000121
Figure FDA0002633742980000131
Figure FDA0002633742980000141
和/或，R2为H、-CH3、-CF3、-OCH3、
Figure FDA0002633742980000142
-N(CH3)2、
Figure FDA0002633742980000143
-CH2OCH2C(CH3)2OH、-CH2N(CH3)2、
Figure FDA0002633742980000144
-CH2NHCH2C(CH3)2OH、
Figure FDA0002633742980000145
Figure FDA0002633742980000146
-CH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)2、
Figure FDA0002633742980000147
-C(CH3)2OH、-CHF2、-CO2CH3、-CH2OH、-CON(CH3)2、-CH2N(CH3)2、-CN或-Cl；
和/或，R3为H、-OCH3、-F、-CN、-Cl、-CH3、-CONH2、-CF3、-CONHCH3或-CON(CH3)2；
和/或，R4为H、-F或-CH3；
和/或，R6为H、-COOCH2CH3、-COOH、-CONH2、-CH3、-COCH3、
Figure FDA0002633742980000151
-CH2CH3、-F、-CN、-CH(CH3)2、-CH2CONH2、-CH2CH2OH、-CH2OH、-CH2NH2、-CH2COOCH3、-CH2COOH、-CH2CON(CH3)2、-CH2CH2OCOCH3、-CH2NHCOCH3、-CON(CH3)2、-CN、
Figure FDA0002633742980000152
Figure FDA0002633742980000153
-CONH2、-CH2CN、-SO2Me或-PO(CH3)2；
和/或，R7为H、-NH(CH3)、-N(CH3)2、-CH3、-CF3、-OH、-CH2OH、-COOCH2CH3、-COOH、-CONH2、-CON(CH3)2或-NH2；
和/或，R8为H；
和/或，R9为H、-F、-Cl或-CH3；
和/或，R10为H、-CH3、-CH2CH2NH2、-F或-Cl；
和/或，R11为H、-CH3或-F；
和/或，R12、R13、R14和R15为H。
12.如权利要求1-11中至少一项所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，所述如式(I)所述的的化合物选自如下所示的化合物：
Figure FDA0002633742980000154
Figure FDA0002633742980000161
上述化合物中，各字母和基团定义如权利要求1所述。
13.如权利要求1-12中至少一项所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物，其中，所述如式(I)所述的的化合物选自下列任一化合物：
Figure FDA0002633742980000162
Figure FDA0002633742980000171
Figure FDA0002633742980000181
Figure FDA0002633742980000191
Figure FDA0002633742980000201
Figure FDA0002633742980000211
Figure FDA0002633742980000221
Figure FDA0002633742980000231
14.一种如权利要求1-13中至少一项所述的如式(I)所示的化合物的制备方法，其包含如下步骤：
将卤代中间体B0与中间体E0进行偶联反应得到如式(I)所示的化合物；
Figure FDA0002633742980000232
其中，W代表卤素；Rx为-B(OH)2或
Figure FDA0002633742980000233
A、R1、X、n的定义如权利要求1所述。
15.一种如式I-A、(Ib)或(Ic)所示的化合物的制备方法，其中，
所述如式I-A所示的化合物的制备方法包括下列步骤：将卤代中间体化合物B与中间体E0进行如下所示的偶联反应后得到如式I-A所示的化合物；
Figure FDA0002633742980000234
或者，所述如式I-A所示的化合物的制备方法包括下列步骤：中间体B-1进行如下所示的关环反应后得到如式(Ib)所示的化合物；
Figure FDA0002633742980000241
或者，所述如式(Ic)所示的化合物的制备方法，包含如下步骤：将卤代中间体化合物B与中间体E01进行如下所示的偶联反应后得到如式(Ic)所示的化合物；
Figure FDA0002633742980000242
其中，上述化合物中，W代表卤素；Rx为-B(OH)2或
Figure FDA0002633742980000243
A、R1、X2、X3、X4、R6、和R7的定义如权利要求1-13任一项所述。
16.如下所示的化合物：
Figure FDA0002633742980000244
Figure FDA0002633742980000251
其中，W代表卤素。
17.一种如权利要求1-13中至少一项所述的式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物在制备药物中的用途；所述的药物优选治疗癌症的药物；所述的式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、溶剂化物或它们的同位素标记化合物可单独使用，也可与其他药物联合使用；所述其他药物优选为抗癌药、肿瘤免疫药物、抗过敏药、止吐药、镇痛药或细胞保护药物。
18.如权利要求17所述的用途，其中，所述癌症选自淋巴癌、白血病、多发性骨髓瘤、间皮瘤、胃癌、恶性横纹肌样瘤、肝癌、***癌、乳腺癌、脑瘤包括神经母细胞瘤、胶质瘤、胶质母细胞瘤和星形细胞瘤、***、结肠癌、黑色素瘤、子宫内膜癌、食管癌、头颈癌、肺癌、鼻咽癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、直肠癌、甲状腺癌、甲状旁腺肿瘤、子宫肿瘤和软组织肉瘤，所述淋巴瘤优选扩散大B细胞淋巴癌、滤泡性淋巴瘤或非霍奇金森淋巴瘤。
19.一种药物组合物，其包含如权利要求1-13中至少一项所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、其溶剂化物或它们的同位素标记化合物以及药学上可接受的辅料。
20.一种药物制剂，其包含如权利要求1-13中至少一项所述的如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、水合物、前药、立体异构体、其溶剂化物或它们的同位素标记化合物，或如权利要求19所述的药物组合物；所述药物制剂优选片剂、胶囊、药丸、粉末、颗粒、酏剂、酊剂、悬浮物、糖浆、乳液或溶液；所述的药物制剂的给药方式优选口服、舌下含服、皮下注射、静脉注射、肌肉注射、胸骨内注射、鼻部服用、局部表面给药或直肠给药。
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