CN112280814A - 一种高含量中、低分子量魔芋葡甘露聚糖及其制备方法和其功效组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高含量中、低分子量魔芋葡甘露聚糖及其制备方法和其功效组合物。故而本发明中采用酶降解法对葡甘露聚糖进行降解,并后续采用一系列分离、纯化方法,最终分离获得一种中分子量葡甘露聚糖(重均分子量15300‑17600)及一种低分子量葡甘露聚糖(重均分子量6800‑8500),以提高葡甘露聚糖的应用可能。
Description
技术领域
本发明涉及日用品技术领域,尤其涉及一种高含量中、低分子量魔芋葡甘露聚糖及其制备方法和其功效组合物。
背景技术
葡甘露聚糖是一种水溶性的天然高分子多糖,现广泛应用于环保、医药以及生物等领域。葡甘露聚糖是由甘露聚糖和葡萄糖以摩尔比为1.6:(1-4)通过β-1,4吡喃糖苷键键合形成的中分子量非离子型甘露聚糖,葡甘露聚糖平均分子量20万-200万,其每隔19个糖残基上就有一个有助于溶解的乙酰基。
由于天然的葡甘露聚糖分子量过大,造成其粘度过高、溶解度过小等难题,使得葡甘露聚糖的应用受到了严重的限制。
发明内容
针对上述问题,本发明提供了一种高含量中、低分子量魔芋葡甘露聚糖及其制备方法和其功效组合物,旨在通过酶解提高魔芋葡甘露聚糖的应用。
具体技术方案如下:
本发明的第一个方面是提供一种中分子量葡甘露聚糖的制备方法,具有这样的特征,包括如下步骤:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和300-500U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为200-300r/min、温度为60-65℃条件下酶解48-60h,沸水浴灭酶15-20min后加入解凝胶剂10-15份,搅拌3-5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入30-50份无水乙醇,强力搅拌3-5h,如上重复3-5次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种中分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:(30-50),线流速度为8-10L/min,分子筛粒径为0.3-0.7mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1.2:1混合形成。
上述的制备方法,还具有这样的特征,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
本发明的第二个方面是提供一种由上述制备方法制备获得的中分子量葡甘露聚糖。
本发明的第三个方面是提供一种低分子量葡甘露聚糖的制备方法,具有这样的特征,包括如下步骤:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和300-500U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为200-300r/min、温度为60-65℃条件下酶解72-75h,沸水浴灭酶15-20min后加入解凝胶剂7-10份,搅拌3-5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入30-50份无水乙醇,强力搅拌3-5h,如上重复3-5次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种低分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:(30-40),线流速度为8-10L/min,分子筛粒径为0.3-0.5mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1:1混合形成。
上述的制备方法,还具有这样的特征,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
本发明的第四个方面是提供一种由上述制备方法制备获得的低分子量葡甘露聚糖。
本发明的第五个方面是提供一种功效组合物,具有这样的特征,由如下重量份原料组成:低分子量葡甘露聚糖1份、中分子量葡甘露聚糖1份、玫瑰纯露2份。
上述的功效组合物,还具有这样的特征,玫瑰纯露由采用新鲜大马士革玫瑰通过蒸馏制得。
由于葡甘露聚糖平均分子量20万-200万,因而其粘度过高的同时溶解度也过小,极大的限制了其应用,故而本发明中采用酶降解法对葡甘露聚糖进行降解,并后续采用一系列分离、纯化方法,最终分离获得一种中分子量葡甘露聚糖(重均分子量15300-17600)及一种低分子量葡甘露聚糖(重均分子量6800-8500),以提高葡甘露聚糖的应用可能。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
需要说明的是,在不冲突的情况下,本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明,但不作为本发明的限定。
I.中分子量葡甘露聚糖
在本发明中提供了一种中分子量葡甘露聚糖,上述中分子量葡甘露聚糖由以下方法制备获得:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和300-500U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为200-300r/min、温度为60-65℃条件下酶解48-60h,沸水浴灭酶15-20min后加入解凝胶剂10-15份,搅拌3-5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入30-50份无水乙醇,强力搅拌3-5h,如上重复3-5次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种中分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:(30-50),线流速度为8-10L/min,分子筛粒径为0.3-0.7mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1.2:1混合形成;
其中,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
实施例
实施例1
一种中分子量葡甘露聚糖,其制备方法如下:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和300U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为300r/min、温度为60-65℃条件下酶解60h,沸水浴灭酶15min后加入解凝胶剂10份,搅拌5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入50份无水乙醇,强力搅拌3h,如上重复3次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种中分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:30,线流速度为10L/min,分子筛粒径为0.3-0.7mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1.2:1混合形成;
其中,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
测试表明,本实施例提供的中分子量葡甘露聚糖重均分子量为,15300-17600,且其纯度>96。
实施例2
一种中分子量葡甘露聚糖,其制备方法如下:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和500U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为200r/min、温度为60-65℃条件下酶解50h,沸水浴灭酶20min后加入解凝胶剂13份,搅拌4h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入40份无水乙醇,强力搅拌5h,如上重复5次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种中分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:50,线流速度为8L/min,分子筛粒径为0.3-0.7mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1.2:1混合形成;
其中,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
测试表明,本实施例提供的中分子量葡甘露聚糖重均分子量为,15300-17600,且其纯度>96。
实施例3
一种中分子量葡甘露聚糖,其制备方法如下:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和400U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为270r/min、温度为60-65℃条件下酶解48h,沸水浴灭酶15min后加入解凝胶剂10份,搅拌3-5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入30-50份无水乙醇,强力搅拌4h,如上重复4次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种中分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:40,线流速度为9L/min,分子筛粒径为0.3-0.7mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1.2:1混合形成;
其中,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
测试表明,本实施例提供的中分子量葡甘露聚糖重均分子量为,15300-17600,且其纯度>96。
II.低分子量葡甘露聚糖
在本发明中提供了一种低分子量葡甘露聚糖,上述低分子量葡甘露聚糖由如下方法制备获得:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和300-500U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为200-300r/min、温度为60-65℃条件下酶解72-75h,沸水浴灭酶15-20min后加入解凝胶剂7-10份,搅拌3-5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入30-50份无水乙醇,强力搅拌3-5h,如上重复3-5次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种低分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:(30-40),线流速度为8-10L/min,分子筛粒径为0.3-0.5mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1:1混合形成。
上述的制备方法,还具有这样的特征,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
实施例
实施例1
一种低分子量葡甘露聚糖,其制备方法如下:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和300U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为300r/min、温度为60-65℃条件下酶解72h,沸水浴灭酶15min后加入解凝胶剂7份,搅拌5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入50份无水乙醇,强力搅拌3h,如上重复5次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种低分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:34,线流速度为10L/min,分子筛粒径为0.3-0.5mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1:1混合形成。
上述的制备方法,还具有这样的特征,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
测试表明,本实施例提供的低分子量葡甘露聚糖重均分子量为,6800-8500,且其纯度>96。
实施例2
一种低分子量葡甘露聚糖,其制备方法如下:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和500U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为200r/min、温度为60-65℃条件下酶解75h,沸水浴灭酶17min后加入解凝胶剂10份,搅拌4h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入30份无水乙醇,强力搅拌4h,如上重复3次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种低分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:40,线流速度为9L/min,分子筛粒径为0.3-0.5mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1:1混合形成。
上述的制备方法,还具有这样的特征,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
测试表明,本实施例提供的低分子量葡甘露聚糖重均分子量为,6800-8500,且其纯度>96。
实施例3
一种低分子量葡甘露聚糖,其制备方法如下:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和400U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为270r/min、温度为60-65℃条件下酶解73h,沸水浴灭酶20min后加入解凝胶剂8份,搅拌5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入40份无水乙醇,强力搅拌5h,如上重复4次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种低分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:30,线流速度为8L/min,分子筛粒径为0.3-0.5mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1:1混合形成。
上述的制备方法,还具有这样的特征,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
测试表明,本实施例提供的低分子量葡甘露聚糖重均分子量为,6800-8500,且其纯度>96。
Ⅲ.功效组合物
在本发明中提供了一种功效组合物,由如下重量份原料组成:低分子量葡甘露聚糖1份、中分子量葡甘露聚糖1份、玫瑰纯露2份。
本发明中利用低分子量葡甘露聚糖易透皮吸收、中分子量葡甘露聚糖易成膜保水的特效,辅以即亲水又亲油的纳米级小分子,即玫瑰纯露复配形成一种具有易吸收且具有补水保湿、抗衰老特性的功效化合物,上述功效化合物利用玫瑰纯露的易吸收特性打开皮肤水通道,从而能够结合养分一起向肌肤底层渗透,以让角质瞬间饱满、软化,产生渗透能力。
保湿性能测试
称取功效组合物,分别以纯玫瑰纯露、蒸馏水、15wt%甘油水溶液、对比样1及对比样2分别作为空白对照样,溶液分别置于称量皿中,于温度为25℃、相对湿度30%的恒温保湿箱中敞口放置,计算保湿率,保湿率=m/m0*100%,上式中m为放置前称量皿的总质量,m0为放置后称量皿的总质量;
其中,对比样1由本发明中提供的中分子量葡甘露聚糖与玫瑰纯露按重量比1:1复配形成,对比样1由本发明中提供的低分子量葡甘露聚糖与玫瑰纯露按重量比1:1复配形成。
本发明中功效组合物、空白对照样即对比样的保湿性能测试如下表所示:
由上表可知,本发明中提供的由高分子量葡甘露聚糖、低分子量葡甘露聚糖及玫瑰纯露复配形成的功效组合物经过24h后仍具有较好的保湿效果。
Ⅳ.自由基清除试验
本发明中利用Fenton反应产生氢氧自由基后再测定体系在波长536nm处的吸光度值Df;以等体积蒸馏水代替如上反应中双氧水并重复试验,测定体系在波长536nm处的吸光度值D0;以等体积、浓度不同的功效组合物代替如上反应中双氧水并重复试验,测定体系在波长536nm处的吸光度值Dx;以等体积功效组合物代替如上反应中双氧水并重复试验,测定体系在波长536nm处的吸光度值Ds,并计算得到自由基清除率(%),自由基清除率计算公式如下所示:
清除率=[1-(Ds-Dx)/(D0-Df)]*100%
由上式计算得到本发明中提供的功效组合物自由基清除率如下表所示:
清除率/% | |
功效组合物 | 87.33 |
Vc | 45 |
由上表可知,本发明提供的功效组合物对氢氧自由基的清除能力强于维生素C(即上表中Vc),这主要是因为本发明中分子量葡甘露聚糖分子链中引入了生物功能多糖,故而使得本发明提供的功效组合物可有效清除人体内自由基,以有效减缓人体衰老。
以上仅为本发明较佳的实施例,并非因此限制本发明的实施方式及保护范围,对于本领域技术人员而言,应当能够意识到凡运用本发明说明书内容所作出的等同替换和显而易见的变化所得到的方案,均应当包含在本发明的保护范围内。
Claims (8)
1.一种中分子量葡甘露聚糖的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和300-500U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为200-300r/min、温度为60-65℃条件下酶解48-60h,沸水浴灭酶15-20min后加入解凝胶剂10-15份,搅拌3-5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入30-50份无水乙醇,强力搅拌3-5h,如上重复3-5次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种中分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:(30-50),线流速度为8-10L/min,分子筛粒径为0.3-0.7mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1.2:1混合形成。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
3.一种中分子量葡甘露聚糖,其特征在于,根据权利要求1或2所述制备方法制备获得。
4.一种低分子量葡甘露聚糖的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:在搅拌状态下将10份魔芋精粉加入至由30份pH=5.7的缓释液和300-500U纤维素酶配置形成的酶解液中,再于搅拌转速为200-300r/min、温度为60-65℃条件下酶解72-75h,沸水浴灭酶15-20min后加入解凝胶剂7-10份,搅拌3-5h,离心分离,分离获得的离心液通过分子筛分离设备分离,向分离后的分离液中加入30-50份无水乙醇,强力搅拌3-5h,如上重复3-5次反复沉淀-离心-搅拌,取最后一次离心得到的沉淀物于干燥器中干燥,得一种低分子量葡甘露聚糖;
其中,分子筛设备的分离柱径高比为1:(30-40),线流速度为8-10L/min,分子筛粒径为0.3-0.5mm,分子筛材料为分离转型前树脂;
其中,解凝胶剂由柠檬酸钠及水杨酸钠按质量比1:1混合形成。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,缓释液由浓度均为0.1mol/L的柠檬酸溶液及柠檬酸钠溶液配制形成。
6.一种低分子量葡甘露聚糖,其特征在于,根据权利要求5或6所述制备方法制备获得。
7.一种功效组合物,其特征在于,由如下重量份原料组成:低分子量葡甘露聚糖1份、中分子量葡甘露聚糖1份、玫瑰纯露2份。
8.根据权利要求7所述的功效组合物,其特征在于,所述玫瑰纯露由采用新鲜大马士革玫瑰通过蒸馏制得。
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