CN112273657A - 用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物、制法和应用 - Google Patents

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李知洪
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Abstract

本发明涉及食品或保健食品技术领域，具体涉及一种用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物、制法和应用。本发明提供了一种用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物，按重量份计，所述组合物包含0.1‑9.9份嗜酸乳杆菌、0.1‑9.9份鼠李糖乳杆菌、0.1‑40份酵母益生菌或酵母抽提物、0.1‑50份益生元以及可选择性的益生菌。本发明所述的益生菌组合物对各类人群过敏性疾病具有良好的治疗效果，能够显著缩短过敏性症状持续的时间，缓解过敏症状，减少药物使用时带来的副反应。

Description

用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物、制法和应用
技术领域
本发明涉及食品或保健食品技术领域，具体涉及一种用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物、制法和应用。
背景技术
过敏性疾病已成为一种普遍的公共健康问题，据估计世界上有30％～40％的人口正遭受过敏性疾病的困扰，而且过敏性疾病的发生率正逐年增加，并已经成为人们关注的全球性健康问题。过敏性疾病是机体针对某些抗原初次应答后,再次接受相同的抗原刺激时,发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答,也称为超敏反应或者***反应。根据过敏性疾病中所参与的细胞、活性物质、损伤组织器官的机制和产生反应所需要的时间等要素,分为:Ⅰ型超敏反应(速发型)、Ⅱ型超敏反应(细胞毒性型)、Ⅲ型超敏反应(免疫复合物型)、Ⅳ型超敏反应(迟发型)。
目前对于过敏性疾病的治疗主要包括几种，也采用相关变应原疫苗进行脱敏治疗，而对于尚未研制出疫苗的过敏症状，最主要的治疗方式是采用药物治疗来控制，包括使用抗过敏剂、组胺受体拮抗剂(抗组胺剂)、类固醇剂等药物。但是，目前药物治疗并不能改变过敏性疾病的进程，因而也就不能从根本上达到治愈的效果，并且药物治疗容易导致胃出血、肥胖、浮肿等副作用。为此我们提出一种用于预防或治疗过敏性疾病的益生菌组合物。益生菌治疗过敏性疾病研究中所指的过敏反应属于Ⅰ型超敏反应，主要是由IgE介导的疾病，如特异性皮炎、过敏性鼻炎、过敏性哮喘、荨麻疹、花粉症等等。
随着生物技术的发展和生物药物研究的深入，以及益生菌相关产品的大量上市，消费者越来越认同益生菌在调理健康方面的作用，而服用益生菌食品也渐渐成为预防和治疗过敏性疾病的越来越重要的选择。
益生菌是一类在适当摄入量对宿主机体带来益处的活体微生物，包括乳酸杆菌属、双歧杆菌属、酵母属等。其中乳酸杆菌属和双歧杆菌属益生菌是肠道正常菌群中的优势菌株，通过粘附在肠道粘膜发挥对宿主有益的作用，调节肠道菌群平衡，抵抗病原微生物的损伤，通过分泌不同的细胞因子，抑制肠道免疫***的炎症反应等调节机体免疫***。通过口服益生菌来增加容易罹患过敏性疾病的人群肠道菌群中缺乏的微生物种类,使其获得口服耐受,从而有助于过敏性疾病的治疗。当再次有外来抗原进入肠道后,可以减少人体对于外来抗原产生过敏性反应的几率,降低过敏性疾病产生的风险。
CN 104093412 A涉及过敏性(allergy)疾病的治疗或预防用医药组合物，尤其涉及包含嗜酸乳杆菌LB的死菌作为有效成分的过敏性疾病的治疗或预防用医药组合物，用于特应性皮炎、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、荨麻疹、花粉症的治疗或预防，属于药物领域。
CN 108065400 A涉及食品或保健食品技术领域，具体涉及的是过敏免疫调控疗法，采用副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌，五菌超强合体，有效改善过敏体质，但是仅限于细菌益生菌，形成的是益生菌粉，产品形成过于单一。
CN 107114794 A属于食品科学技术领域，涉及一种用于增强抗过敏能力的益生菌组合物。该发明所述益生菌组合物包含乳杆菌干粉、长双歧杆菌干粉、低聚异麦芽糖、麦芽糊精、葡萄糖、维生素C，属于食品科学技术领域，仅限于细菌益生菌领域。
CN 107669706 A涉及一种用于治疗和预防过敏性疾病的复合益生菌及其制备方法以及食物组合物和药物组合物的型剂。该发明包含的益生菌包含格式乳杆菌、唾液乳杆菌、约氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌，发明通过动物实验证明益生菌组合物对过敏性疾病的预防和治疗作用，但动物肠道消化与人类有较大差异，同时不同人群也有较大差异。
CN 108029923 A涉及一种具有抗过敏效果的益生菌固体饮料生产配方，包括如下成分；副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、双歧杆菌、酵母β-葡聚糖，涉及的产品形式过于单一，不适合所有人群的推广应用。
发明内容
为此，本发明所解决的技术的问题是：现有技术中存在的益生菌制剂，产品形式过于单一，不适合所有人群的推广应用。
本发明提供了一种用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物，对于各类人群过敏性疾病具有良好的治疗效果，本发明所述的益生菌组合物可以显著缩短过敏症状持续的时间，缓解过敏症状，减少过敏症状，减少药物使用时带来的副反应。
本发明提供了一种用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物，按重量份计，所述组合物包含0.1-9.9份嗜酸乳杆菌、0.1-9.9份鼠李糖乳杆菌、0.1-40份酵母益生菌或酵母抽提物、0.1-50份益生元以及可选择性的益生菌。
本发明提供了一种所述益生菌组合物的制备方法，其将上述所述的嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、酵母益生菌或酵母抽提物、益生元以及可选择性的益生菌进行混合从而得到该益生菌组合物。
本发明提供了上述所述的益生菌组合物在预防或改善过敏性疾病中的应用。
本发明提供了一种具有预防或改善过敏性疾病的保健食品组合物，其包含上述所述的益生菌组合物。
本发明所述的益生菌组合物中的酵母抽提物能够提供氨基酸、核苷酸等必需的营养素，促进肠道上皮细胞成熟及供给营养，酵母β-葡聚糖促进体内免疫球蛋白M抗体的产生，提供体液的免疫能力，还可以调节肠道菌落结构。
具体来说，本发明提出了如下技术方案。
本发明提供了一种用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物，按重量份计，所述组合物包含0.1-9.9份嗜酸乳杆菌、0.1-9.9份鼠李糖乳杆菌、0.1-40份酵母益生菌或酵母抽提物、0.1-50份益生元以及可选择性的益生菌。
优选的，对于上述所述的益生菌组合物，其中，所述组合物包含0.2-7份嗜酸乳杆菌、0.2-7份鼠李糖乳杆菌、2-35份酵母益生菌或酵母抽提物、0.3-35份益生元以及0.1-50份可选择性的益生菌；优选的，包含0.5-5份嗜酸乳杆菌、1-6份鼠李糖乳杆菌、5-30份酵母益生菌或酵母抽提物和1-30份益生元，以及1-40份可选择性的益生菌；较优选的，包含1-3份嗜酸乳杆菌，2-5份鼠李糖乳杆菌、10-20酵母益生菌或酵母抽提物和2-10份益生元，以及3-20份可选择性的益生菌。
优选的，对于上述所述的益生菌组合物，其中，所述酵母益生菌选自于啤酒酵母、德巴利氏酵母、假丝酵母、毕赤氏酵母、球拟酵母、布拉迪酵母和酿酒酵母的一种或两种以上。
优选的，对于上述所述的益生菌组合物，其中，所述可选择性的益生菌选自于副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、格氏乳杆菌、唾液乳杆菌、约氏乳杆菌、发酵乳杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、乳双歧杆菌和动物双歧杆菌中的一种或两种以上；优选的，所述可选择性的益生菌选自于乳双歧杆菌和动物双歧杆菌中的一种或两种，较优选的，所述益生菌为1.5-15份乳双歧杆菌和1.5-15份动物双歧杆菌。
优选的，对于上述所述的益生菌组合物，其中，所述益生元选自于低聚果糖、水苏糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖和酵母β-葡聚糖的一种或两种以上，优选为酵母β-葡聚糖。
优选的，对于上述所述的益生菌组合物，其中，所述组合物还包含辅料，优选的，所述辅料选自于无水葡萄糖、麦芽糊精、麦芽糖醇、木糖醇和水果粉中的一种或两种以上；优选的，所述水果粉选自于山楂粉、苹果粉、香蕉粉、樱桃粉或甜橙粉中的一种；优选的，以重量份计，所述辅料选自于2-80份无水葡萄糖、0.1-15份麦芽糊精和0-5份山楂粉中的一种或两种以上，较优选的，所述辅料选自于10-60份无水葡萄糖和/或5-10份麦芽糊精。
优选的，对于上述所述的益生菌组合物，其中，以干重计，所述益生菌组合物中的益生菌的含量为102-1012菌落形成单位，优选为107-1011菌落形成单位。
优选的，对于上述所述的益生菌组合物，其中，所述益生菌组合物以粉末、片剂、固体饮料、胶囊、汤或液体悬浮物的形式存在。
本发明提供了上述所述的益生菌组合物的制备方法，其将上述所述的嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、酵母益生菌或酵母抽提物、益生元以及可选择性的益生菌进行混合从而得到所述益生菌组合物。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，将所述益生元和辅料混合后，冷却至室温，然后加入酵母益生菌或酵母抽提物、嗜酸乳杆菌、鼠李糖杆菌以及可选择性的益生菌进行混合得到所述的益生菌混合物。
优选的，对于上述所述的制备方法，其中，在混合之后冷却至室温之前，还包含烘干步骤；优选的，所述烘干步骤为水分活度烘干至0.2以下。
本发明提供了上述所述的益生菌组合物或者上述制备方法制备得到的益生菌组合物在预防或改善过敏性疾病中的应用。
本发明提供了一种具有预防或改善过敏性疾病的保健品组合物，其包含上述所述的益生菌组合物或者上述的制备方法制备得到的益生菌组合物。
本发明所取得的有益效果是：
本发明所述的益生菌组合物对各类人群过敏性疾病具有良好的治疗效果，能够显著缩短过敏性症状持续的时间，缓解过敏症状，减少药物使用时带来的副反应。
菌株保藏信息
本发明所用的菌种酿酒酵母FX-2(Saccharomyces cerevisiae FX-2)于2016年08月01日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M2016418，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)-68754052，其在中国专利文献CN107788332A和CN107788238A中首次公开。
本发明所用的菌种酿酒酵母Z2.1(Saccharomyces cerevisiae Hansen Z2.1)于2005年10月25日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M205127，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)-68754052，其在中国专利文献CN101575579A中首次公开。
本发明所用的菌种啤酒酵母A3.12(Saccharomyces cerevisiae A3.12)于2017年12月11日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M2017781，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)-68754052。
该菌株从葡萄园土壤中分离得到，而且通过光学显微镜观察，该酿酒酵母菌株，呈现椭球形，以出芽方式无性繁殖；在固体培养基平板上28℃培养72h后，为乳白色，不透明，圆形菌落。
本发明所用的菌种布拉迪酵母安琪1.27(Saccharomyces boulardii安琪1.27)于2012年04月16日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M2012116，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072；电话：(027)-68754052。
该菌株从岭南荔枝皮上分离得到，通过光学显微镜观察，该布拉迪酵母，呈椭球形，以出芽方式无性繁殖；在固体培养基平板上28℃培养72h后，为浅黄色，光滑不透明的圆形菌落，菌落边缘完整。
具体实施方式
如上所述，本发明提供了一种用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物，按重量份计，所述组合物包含0.1-9.9份嗜酸乳杆菌、0.1-9.9份鼠李糖乳杆菌、0.1-40份酵母益生菌或酵母抽提物、0.1-50份益生元以及可选择性的益生菌。
其中，所述嗜酸乳杆菌L-92株是在长期的乳酸菌研究中精心挑选并发现的具有过敏缓解作用的乳酸菌，可以通过调节免疫细胞的平衡而缓解过敏症状。获得了中国、日本、美国等多国发明专利，并获得美国Self-Affirmed GRAS认证，荣获美国展览会Engredea第十八届NutrAward功能性原料领域最优秀奖。在正常的状态下，免疫功能通过Th1细胞、Th2细胞和Treg细胞这三种免疫细胞的均衡作用，保护我们的身体免受异物的伤害。但在过敏状态下，免疫平衡被打破，Th2细胞过度发生作用。“嗜酸乳杆菌L-92”通过增加进行免疫调整的Treg细胞，减少过剩的Th2细胞，起到调整被打破的免疫平衡的作用。通过上述作用，“嗜酸乳杆菌L-92”调整Th1细胞和Th2细胞的平衡，缓解过敏症状。可降低过敏患者血液中的IgE含量，对花粉症、常年性过敏性鼻炎、小儿和成人过敏性皮肤炎均有较好的缓解作用。
所述的鼠李糖乳杆菌LGG于1985年从健康成年人的粪便样品中分离，符合理想的益生菌菌株标准：耐胃酸和胆汁、能够粘附于人类肠道上皮细胞、定植在人类小肠维持肠道菌群未定、产生抗菌类物质、具有确切的健康益处。LGG是我国批准的可用于婴幼儿食品的9株益生菌之一，能吸附肠道黏膜糖蛋白和回肠糖蛋白、定殖于肠道内、改善受损肠道黏膜、平衡肠道内菌相、抑制病原菌的生长与抑制E.coli吸附肠道黏膜等多样生理功能。研究显示，口服鼠李糖乳杆菌(LGG)能够降低Th2免疫反应，如高反应性评分和血清中全牛奶蛋白(CMP)特异性IgG1抗体，而促进产生Th1免疫反应包括增加扰素-γ(IFN-γ)和CMP特异性IgG2a抗体。因此鼠李糖乳杆菌LGG对于婴幼儿食物过敏特别是牛奶蛋白过敏方面具有良好的预防和治疗作用。LGG通过刺激Th1细胞相关细胞因子IFN-γ分泌提高Th1细胞比例，同时抑制Th2细胞相关细胞因子IL-4的分泌从而降低Th1细胞/Th2细胞比值失调相关的过敏性疾病的发生几率。对食物过敏、气道过敏、皮肤过敏等具有良好的治疗作用。
所述鼠李糖乳杆菌能抑制许多病原体，包括多株大肠杆菌菌株、链球菌、假单胞菌、沙门氏菌、脆弱类杆菌和梭菌。
在本发明优选的一种具体实施方式中，所述组合物包含0.2-7份嗜酸乳杆菌、0.2-7份鼠李糖乳杆菌、2-35份酵母益生菌或酵母抽提物、0.3-35份益生元以及0.1-50份可选择性的益生菌；优选的，包含0.5-5份嗜酸乳杆菌、1-6份鼠李糖乳杆菌、5-30份酵母益生菌或酵母抽提物和1-30份益生元，以及1-40份可选择性的益生菌；较优选的，包含1-3份嗜酸乳杆菌，2-5份鼠李糖乳杆菌、10-20份酵母益生菌或酵母抽提物和2-10份益生元，以及3-20份可选择性的益生菌。
其中，所述酵母抽提物是以食品用酵母为主要原料，以酵母自身的酶或外加食品级酶的共同作用下，酶解自溶(可再经分离提取)后得到的产品，并富含核苷酸、氨基酸、肽、多肽等酵母细胞中的可溶性成分。
婴幼儿在发生食物过敏的情况下，不可避免会存在营养成分的缺失。其中，蛋白质是构成生命的最重要物质基础之一，因此，补充氨基酸和肽等营养物质可以弥补食物过敏所带来的营养成分不足或缺失。核苷酸也是人类生命早期的必需营养物质，虽然小儿本身可以在体内制造核苷酸，但如果膳食中能适量，婴幼儿的生长发育、胃肠道发育、免疫功能将会更好。此外，已有大量研究显示，在婴幼儿饮食中添加核苷酸有助于改善肠道微生物菌群，促进肠道内双歧杆菌生长。核苷酸还可通过降低粪便pH值来抑制致病菌，从而调整肠道微生态平衡。也就是说，酵母抽提物中的核苷酸一定程度上还能起到益生元的作用。
优选的，所述酵母益生菌选自于啤酒酵母、德巴利氏酵母、假丝酵母、毕赤氏酵母、球拟酵母、布拉迪酵母和酿酒酵母中的一种或两种以上。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述可选择性的益生菌选自于副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、格氏乳杆菌、唾液乳杆菌、约氏乳杆菌、发酵乳杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、乳双歧杆菌和动物双歧杆菌中的一种或两种以上；优选的，所述益生菌选自于乳双歧杆菌和动物双歧杆菌中的一种或两种，较优选的，所述益生菌为1.5-15份乳双歧杆菌和1.5-15份动物双歧杆菌。
其中，所述副干酪乳杆菌可以降低过敏患者血液中的IgE含量，并提升其TNF-γ浓度，有效抑制过敏反应。
所述罗伊氏乳杆菌可承受胃酸和胆汁的作用而到达小肠的上部并粘附于小肠壁，对宿主的黏膜黏液以及肠粘膜上皮细胞均表现较强的粘附能力，而且还具备产生广谱抗菌物质的特效。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述益生元选自于低聚果糖、水苏糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖和酵母β-葡聚糖的一种或两种以上，优选为酵母β-葡聚糖。
其中，所述酵母β-葡聚糖是一种多糖，来源于酵母细胞壁，酵母β-葡聚糖的活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖，酵母β-葡聚糖能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等，从而提高白细胞素、细胞***素和特殊抗体的含量，全面刺激机体的免疫***，大量实验表明，β-葡聚糖可促进体内免疫球蛋白M抗体的产生，以提高体液的免疫能力，同时作为益生元还可以调节肠道菌群结构。
所述低聚果糖又称蔗果低聚糖，是由1～3个果糖基通过β(2—1)糖苷键与蔗糖中的果糖基结合生成的蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖等的混合物。
所述低聚半乳糖是一种具有天然属性的功能性低聚糖，其分子结构一般是在半乳糖或葡萄糖分子上连接1～7个半乳糖基，即Gal-(Gal)n-Glc/Gal(n为0-6)。
所述低聚异麦芽糖又称为异麦芽低聚糖、异麦芽寡糖、分枝低聚糖，主要成分为葡萄糖分子间以α-1,6糖苷键结合的异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖及四糖以上的低聚糖。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述组合物还包含辅料，所述辅料选自于无水葡萄糖、麦芽糊精、麦芽糖醇、木糖醇和水果粉中的一种或两种以上；优选的，所述水果粉选自于山楂粉、苹果粉、香蕉粉、樱桃粉或甜橙粉中的一种；优选的，以重量份计，所述辅料选自于2-80份无水葡萄糖、0.1-15份麦芽糊精和0-5份山楂粉中的一种或两种以上，较优选的，所述辅料选自于10-60份无水葡萄糖和/或5-10份麦芽糊精；优选的，所述水果粉的作用在于提供不同的口感。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，以干重计，所述益生菌组合物中的益生菌的含量为102-1012菌落形成单位，优选为107-1011菌落形成单位。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述益生菌组合物以粉末、片剂、固体饮料、胶囊、汤或液体悬浮物的形式存在，优选的，所述益生菌组合物可以以婴儿配方、后续配方、成长奶、婴儿谷物、婴儿食品、酸奶、谷物棒、早餐谷物、甜点、冷冻食物、汤、液体悬浮物、粉末、片剂、固体饮料、胶囊、糖果、营养组合为或营养补充物的形式存在。
本发明提供了一种上述所述益生菌组合物的制备方法，其是将上述所述的嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、酵母益生菌或酵母抽提物、益生元以及可选择性的益生菌进行混合从而得到该益生菌组合物。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，所述制备方法包括将上述所述的益生元和辅料混合后，冷却至室温，然后加入酵母益生菌或酵母抽提物、嗜酸乳杆菌、鼠李糖杆菌以及可选择性的益生菌进行混合得到所述的益生菌混合物。
在本发明优选的一种具体实施方式中，其中，在混合之后冷却至室温之前，还包含烘干步骤；优选的，所述烘干步骤为水分活度烘干至0.2以下。
本发明提供了上述所述的益生菌组合物在预防或改善过敏性疾病中的应用。
本发明提供了一种具有预防或改善过敏性疾病的保健食品组合物，其包含上述所述的益生菌组合物。
下面对本实施例所用的原料及设备的生产厂家，以及产品分析使用的设备和分析方法进行说明如下，其中所述的化学物质没有标明的均为常规试剂的化学纯级别。实施例所用到的原料的信息及实验设备如表1和表2所示
表1实施例中所用到的原料的信息
原料信息 纯度 生产厂家
酵母抽提物 100％(KA02) 安琪酵母股份有限公司
低聚果糖 97.5％ 山东保龄宝生物股份有限公司
水苏糖 99％ 西安天美生物科技股份有限公司
低聚半乳糖 98％ 量子高科(中国)生物股份有限公司
低聚异麦芽糖 98％ 山东保龄宝生物股份有限公司
酵母β-葡聚糖 85％ 安琪酵母股份有限公司
无水葡萄糖 99％ 武汉卡福尔科技有限公司
麦芽糊精 99.5％ 山东百龙创园生物科技有限公司
山楂粉 99％ 廊坊市泽升荣一果蔬制品有限公司
甜橙粉 99％ 天津秀谷生物科技发展有限公司
表2实施例中所用到的实验设备的信息
设备名称 型号 生产厂家
沸腾制粒机(干燥设备) FL-300C 重庆佳玛机械制造有限公司
条状包装机 6列 广州珐玛珈智能设备股份有限公司
全自动硬胶囊充填机 NJP-2000B 北京翰林航宇科技发展股份公司
粉剂包装机 PW-129CO 武汉迈威机械有限公司
实施例中所用到干酪乳杆菌Zhang购自北京科拓恒通生物技术股份有限公司；
嗜酸乳杆菌L-92购自上海诚一食品原料有限公司；
鼠李糖乳杆菌GG(LGG)购自北京沐吉健康科技有限公司；
罗伊氏乳杆菌RC14购自北京沐吉健康科技有限公司
乳双歧杆菌HN019购自广州市康品新材料有限公司
鼠李糖乳杆菌HN001购自广州市康品新材料有限公司
动物双歧杆菌Bb-12购自北京沐吉健康科技有限公司
植物乳杆菌P-8购自北京科拓恒通生物技术股份有限公司
乳双歧杆菌V9购自北京科拓恒通生物技术股份有限公司
实施例一
将39.8g无水葡萄糖、0.2g麦芽糊精、0.1g低聚果糖混合均匀，烘干至水分活度为0.1，冷却至室温后将0.1g嗜酸乳杆菌L-92，0.1g鼠李糖乳杆菌GG，9.9g干酪乳杆菌Zhang，9.9g罗伊氏乳杆菌RC14，9.9g乳双歧杆菌HN019、30g酿酒酵母Z2.1加入并混合均匀，将此混合好的物料用条式包装机分包为2g一袋的益生菌固体饮料。
按照GB4789.35-2016中的方法测定每袋中益生菌的含量，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 2*109CFU，鼠李糖乳杆菌GG6*108CFU，干酪乳杆菌Zhang2*1011CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 2*1011CFU，乳双歧杆菌HN019 2*1011CFU，酿酒酵母Z2.1 1.2*1011CFU。
其中，乳酸菌的测定步骤如下：
1样品制备
1.1样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。
以无菌操作称取25g样品，置于装有225mL生理盐水的无菌均质杯内，于8000r/min～10000r/min均质1min～2min，制成1:10样品匀液；或置于225mL生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min制成1:10的样品匀液。
1.2步骤
1.2.1用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓慢注于装有9mL生理盐水的无菌试管中(注意吸管尖端不要触及稀释液)，振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。
1.2.2另取1mL无菌吸管或微量移液器吸头，按上述操作顺序，做10倍递增样品匀液，每递增稀释一次，即换用1次1mL灭菌吸管或吸头。
1.2.3乳酸菌计数
1.2.3.1乳酸菌总数
根据待检样品活菌总数的估计，选择2个～3个连续的适宜稀释度，每个稀释度吸取0.1mL样品匀液分别置于2个MRS琼脂平板，使用L形棒进行表面涂布。36℃±1℃，厌氧培养48h±2h后计数平板上的所有菌落数。从样品稀释到平板涂布要求在15min内完成。
1.2.3.2双歧杆菌计数
根据对待检样品双歧杆菌含量的估计，选择2个～3个连续的适宜稀释度，每个稀释度吸取0.1mL样品匀液于莫匹罗星锂盐(Li-Mupirocin)改良MRS琼脂平板，使用灭菌L形棒进行表面涂布，每个稀释度作两个平板。36℃±1℃，厌氧培养48h±2h后计数平板上的所有菌落数。从样品稀释到平板涂布要求在15min内完成。
1.2.3.4乳杆菌计数
1.2.3.1项乳酸菌总数结果减去1.2.3.2项双歧杆菌菌计数结果即得乳杆菌计数。
1.3菌落计数
可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units，CFU)表示。
1.3.1选取菌落数在30CFU～300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
1.3.2其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。
1.3.3当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。
1.4结果的表述
1.4.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g(mL)中菌落总数结果。
1.4.2若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按公式(1)计算N＝∑C/(n1+0.1n2)d……………………………(1)
式中：
N——样品中菌落数；
ΣC——平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和；
n1——第一稀释度(低稀释倍数)平板个数；
n2——第二稀释度(高稀释倍数)平板个数；
d——稀释因子(第一稀释度)。
1.4.3若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
1.4.4若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
1.4.5若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。
1.4.6若所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU～300CFU之间，其中一部分小于30CFU或大于300CFU时，则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
1.5菌落数的报告
1.5.1菌落数小于100CFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。
1.5.2菌落数大于或等于100CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。
1.5.3称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。
2结果与报告
根据菌落计数结果出具报告，报告单位以CFU/g(mL)表示。
实施例二
将30.3g无水葡萄糖、9g麦芽糊精、30g低聚异麦芽糖混合均匀，烘干至水分活度为0.12，冷却至室温后将9.9g嗜酸乳杆菌L-92，9.9g鼠李糖乳杆菌HN001，9.9g动物双歧杆菌Bb-12、0.2g布拉氏酵母安琪1.27和0.8g酵母抽提物加入并混合均匀，将此混合好的物料用胶囊填充机填充为0.3g净含量的胶囊。
按照实施例一的测定方法测定每粒胶囊中益生菌的含量，经测定，每粒胶囊含有嗜酸乳杆菌L-92 3*1010CFU，鼠李糖乳杆菌HN001 8.9*109CFU，动物双歧杆菌Bb-12 8.9*109CFU，布拉氏酵母安琪1.27 1.2*108CFU。
实施例三
将40g无水葡萄糖、4.9g山楂粉、7份麦芽糊精、0.1g酵母β-葡聚糖混合均匀，烘干至水分活度为0.08，冷却至室温后将8g嗜酸乳杆菌L-92，5g鼠李糖乳杆菌GG，5g植物乳杆菌P-8，5g干酪乳杆菌Zhang，5g乳双歧杆菌V9、5g动物双歧杆菌Bb12和15g啤酒酵母A3.12加入并混合均匀，将此混合好的物料用条式包装机分包为1g一袋的益生菌固体饮料。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋含有含有嗜酸乳杆菌L-92 8*1010CFU,鼠李糖乳杆菌GG 1.5*1010CFU，植物乳杆菌P-8 5*1010CFU，干酪乳杆菌Zhang 5*1010CFU，乳双歧杆菌V9 5*1010CFU、动物双歧杆菌Bb12 1.5*1010CFU、啤酒酵母为A3.12 3*1010CFU。
实施例四
将15g无水葡萄糖、15g麦芽糊精、48g酵母β-葡聚糖混合均匀，烘干至水分活度为0.15，冷却至室温后将8g嗜酸乳杆菌L-92，5g鼠李糖乳杆菌HN001，7g动物双歧杆菌Bb-12加入并混合均匀，将此混合好的物料用胶囊填充机填充为0.3g净含量的胶囊。
按实施例一所述的方法对每粒胶囊的益生菌含量进行测定，经测定，每粒胶囊含有嗜酸乳杆菌L-92 2.4*1010CFU，鼠李糖乳杆菌HN001 4.5*109CFU，动物双歧杆菌Bb-126.3*109CFU。
实施例五
将25.2g无水葡萄糖、5g低聚半乳糖混合均匀，烘干至水分活度为0.1，冷却至室温后将9.9g嗜酸乳杆菌L-92，9.9g鼠李糖乳杆菌GG，5g植物乳杆菌P-8、5g罗伊氏乳杆菌RC14和40g酵母抽提物加入并混合均匀，将此混合好的物料用条式包装机分包为1g一袋的益生菌固体饮料。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋含有嗜酸乳杆菌L-92 9.9*1010CFU,鼠李糖乳杆菌GG 3*1010CFU，罗伊氏乳杆菌P-8 5*1010CFU，植物乳杆菌RC14 5*1010CFU。
实施例六
将0.1g甜橙粉、1.9g麦芽糊精、58g无水葡萄糖、20g水苏糖混合均匀，烘干至水分活度为0.12，冷却至室温后将9.9g嗜酸乳杆菌L-92，0.1g鼠李糖乳杆菌HN001，5g干酪乳杆菌Zhang和5g酿酒酵母FX-2加入并混合均匀，将此混合好的物料用包装机填充为1g净含量的婴幼儿辅食。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 9.9*1010CFU,鼠李糖乳杆菌HN001 3*108CFU，干酪乳杆菌Zhang 5*1010CFU，酿酒酵母FX-2 1*1010CFU。
实施例七
将77g无水葡萄糖、2g酵母β-葡聚糖混合均匀，烘干至水分活度为0.18，冷却至室温后将1g嗜酸乳杆菌L-92，5g鼠李糖乳杆菌GG，3g乳双歧杆菌HN019、2g动物双歧杆菌Bb-12和10g酵母抽提物加入并混合均匀，将此混合好的物料用包装机填充为1g净含量的婴幼儿辅食。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 1*1010CFU,鼠李糖乳杆菌GG 1.5*1010CFU，乳双歧杆菌HN019 3*1010CFU，动物双歧杆菌Bb-12 6*109CFU。
实施例八
将55g无水葡萄糖、3.5g麦芽糊精、10g酵母β-葡聚糖混合均匀，烘干至水分活度为0.06，冷却至室温后将3g嗜酸乳杆菌L-92，2g鼠李糖乳杆菌HN001，6g乳双歧杆菌HN019、0.5g动物双歧杆菌Bb-12、10g啤酒酵母A3.12和10g酵母抽提物加入并混合均匀，将此混合好的物料用包装机填充为1g净含量的婴幼儿辅食。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 3*1010CFU,鼠李糖乳杆菌HN001 6*109CFU，乳双歧杆菌HN019 6*1010CFU，动物双歧杆菌Bb-12 6*109CFU，啤酒酵母A3.12 2*1010CFU。
实施例九
将70g无水葡萄糖，7.5g麦芽糊精、1g低聚半乳糖混合均匀，烘干至水分活度为0.15，冷却至室温后将0.5g嗜酸乳杆菌L-92，6g鼠李糖乳杆菌GG，0.1g乳双歧杆菌V9、9.9g动物双歧杆菌Bb-12和5g啤酒酵母A3.12加入并混合均匀，将此混合好的物料用包装机填充为1g净含量的婴幼儿辅食。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 5*109CFU,鼠李糖乳杆菌GG 1.8*1010CFU，乳双歧杆菌V9 1*109CFU，动物双歧杆菌Bb-12 3*1010CFU，啤酒酵母A3.12 1*1010CFU。
实施例十
将10g低聚果糖、20g酵母β-葡聚糖、10g麦芽糊精，4g香蕉粉，10g无水葡萄糖混合均匀，烘干至水分活度为0.11，冷却至室温后将5g嗜酸乳杆菌L-92，1g鼠李糖乳杆菌HN001，9.9g乳双歧杆菌HN019、0.1g动物双歧杆菌Bb-12、20g酵母抽提物和10g酿酒酵母FX-2加入并混合均匀，将此混合好的物料用胶囊填充机填充为0.3g净含量的胶囊。
按实施例一所述的方法对每粒胶囊的益生菌含量进行测定，经测定，每粒胶囊含有嗜酸乳杆菌L-92 1.5*1010CFU，鼠李糖乳杆菌HN001 9*108CFU，乳双歧杆菌HN019 3*1010CFU，动物双歧杆菌Bb-12 9*107CFU，酿酒酵母FX-2 6*109CFU。
实施例十一
将80g无水葡萄糖，4.4g麦芽糊精、5g山楂粉和0.3g水苏糖混合均匀，烘干至水分活度为0.1，冷却至室温后将7g嗜酸乳杆菌L-92，0.2g鼠李糖乳杆菌GG，3g干酪乳杆菌Zhang和0.1g布拉氏酵母安琪1.27加入并混合均匀，将此混合好的物料用包装机填充为1g净含量的婴幼儿辅食。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 7*1010FU,鼠李糖乳杆菌GG 6*108CFU，干酪乳杆菌Zhang 3*1010CFU，布拉氏酵母安琪1.27 2*108CFU。
实施例十二
将35g低聚半乳糖、2g无水葡萄糖、0.8g苹果粉混合均匀，烘干至水分活度为0.1，冷却至室温后将0.2g嗜酸乳杆菌L-92，7g鼠李糖乳杆菌HN001，5g罗伊氏乳杆菌RC14、10g干酪乳杆菌Zhang、5g植物乳杆菌P-8、30g酿酒酵母Z2.1和5g酵母抽提物加入并混合均匀，将此混合好的物料用包装机填充为1g净含量的婴幼儿辅食。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 2*109FU,鼠李糖乳杆菌HN001 2*1010CFU，干酪乳杆菌Zhang 1*1011CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 5*1010CFU，酿酒酵母Z2.1 6*1010CFU，植物乳杆菌P-85*1010CFU。
实施例十三
将5g麦芽糊精、39g无水葡萄糖和10g酵母β-葡聚糖混合均匀，烘干至水分活度为0.15，冷却至室温后将3g嗜酸乳杆菌L-92，2g鼠李糖乳杆菌HN001，1g动物双歧杆菌Bb-12和40g酵母粉加入并混合均匀，将此混合好的物料用包装机填充为1g净含量的婴幼儿辅食。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 3*1010FU,鼠李糖乳杆菌HN001 6*109CFU，动物双歧杆菌Bb-12 3*109CFU。
实施例十四
将5g低聚半乳糖和48g无水葡萄糖混合均匀，烘干至水分活度为0.18，冷却至室温后将5g嗜酸乳杆菌L-92，1g鼠李糖乳杆菌GG，20g罗伊氏乳杆菌RC14、20g植物乳杆菌P-8和1g酵母抽提物加入并混合均匀，将此混合好的物料用包装机填充为1g净含量的婴幼儿辅食。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 5*1010FU,鼠李糖乳杆菌GG 3*109CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 2*1011CFU，植物乳杆菌P-8 2*1011CFU。
实施例十五
将2g酵母β-葡聚糖，60g无水葡萄糖和8.2g麦芽糊精混合均匀，烘干至水分活度为0.09，冷却至室温后将9.9g嗜酸乳杆菌L-92，9.9g鼠李糖乳杆菌GG和10g酵母抽提物加入并混合均匀，将此混合好的物料用包装机填充为0.5g净含量的婴幼儿辅食。
按实施例一所述的方法对每袋的益生菌含量进行测定，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 5*1010FU,鼠李糖乳杆菌GG 1.5*1010CFU。
对比例一
将69.8g无水葡萄糖、0.2g麦芽糊精、0.1g低聚果糖混合均匀，烘干至水分活度为0.1，冷却至室温后将0.1g嗜酸乳杆菌L-92，0.1g鼠李糖乳杆菌GG，9.9g干酪乳杆菌Zhang，9.9g罗伊氏乳杆菌RC14，9.9g乳双歧杆菌HN019加入并混合均匀，将此混合好的物料用条式包装机分包为0.5g一袋的益生菌固体饮料。
按照实施例一所述的方法测定每袋中益生菌的含量，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 1*109CFU，鼠李糖乳杆菌GG 3*108CFU，干酪乳杆菌Zhang 9.9*1010CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 9.9*1010CFU，乳双歧杆菌HN019 9.9*1010CFU。
对比例二
将24.8g无水葡萄糖、0.2g麦芽糊精、0.1g低聚果糖混合均匀，烘干至水分活度为0.1，冷却至室温后将0.1g嗜酸乳杆菌L-92，0.1g鼠李糖乳杆菌HN001，9.9g干酪乳杆菌Zhang，9.9g罗伊氏乳杆菌RC14，9.9g乳双歧杆菌V9和45g酿酒酵母FX-2加入并混合均匀，将此混合好的物料用条式包装机分包为1g一袋的益生菌固体饮料。
按照实施例一所述的方法测定每袋中益生菌的含量，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 1*109CFU，鼠李糖乳杆菌HN001 3*108CFU，干酪乳杆菌Zhang 9.9*1010CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 9.9*1010CFU，乳双歧杆菌V9 9.9*1010CFU，酿酒酵母FX-2 9*1010CFU。
对比例三
将39.9g无水葡萄糖、0.2g麦芽糊精混合均匀，烘干至水分活度为0.15，冷却至室温后将0.1g嗜酸乳杆菌L-92，0.1g鼠李糖乳杆菌GG，9.9g干酪乳杆菌Zhang，9.9g罗伊氏乳杆菌RC14，9.9g乳双歧杆菌HN019和30g酿酒酵母Z2.1加入并混合均匀，将此混合好的物料用条式包装机分包为1g一袋的益生菌固体饮料。
按照实施例一所述的方法测定每袋中益生菌的含量，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 1*109CFU，鼠李糖乳杆菌GG 3*108CFU，干酪乳杆菌Zhang 9.9*1010CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 9.9*1010CFU，乳双歧杆菌HN019 9.9*1010CFU，酿酒酵母Z2.1 6*1010CFU。
对比例四
将将39.8g无水葡萄糖、0.2g麦芽糊精、0.1g低聚果糖混合均匀、0.1g嗜酸乳杆菌L-92，0.1g鼠李糖乳杆菌GG，9.9g干酪乳杆菌Zhang，9.9g罗伊氏乳杆菌RC14，9.9g乳双歧杆菌HN019、30g酿酒酵母Z2.1混合均匀，烘干至水分活度为0.1，将此混合好的物料用条式包装机分包为2g一袋的益生菌固体饮料。
按照实施例一所述的方法测定每袋中益生菌的含量，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 1*108CFU，鼠李糖乳杆菌GG 2.5*107CFU，干酪乳杆菌Zhang 5*108CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 2.5*1010CFU，乳双歧杆菌HN019 1.2*1010CFU，酿酒酵母Z2.1 2*1010CFU。
对比例四和实施例一的区别在于操作步骤不同，实施例一是采用先加入辅料、益生元进行烘干，然后加入益生菌，而对比例四是将所有组分混合之后，然后进行烘干得到，从每袋中所得到的益生菌的含量来看，对比例四所得到的益生菌含量大大降低，原因是益生菌不耐高温，与辅料和益生元混合后烘干会导致一部分益生菌死亡。
对比例五
将39.8g无水葡萄糖、0.2g麦芽糊精、0.1g低聚果糖、0.1g嗜酸乳杆菌L-92，0.1g鼠李糖乳杆菌GG，9.9g干酪乳杆菌Zhang，9.9g罗伊氏乳杆菌RC14，9.9g乳双歧杆菌HN019、30g酿酒酵母Z2.1混合均匀，烘干至水分活度为0.295，将此混合好的物料用条式包装机分包为2g一袋的益生菌固体饮料。
按照实施例一所述的方法测定每袋中益生菌的含量，经测定，每袋中含有嗜酸乳杆菌L-92 1.5*109CFU，鼠李糖杆菌GG 5*108CFU，干酪乳杆菌Zhang 1.6*1011CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 1.8*1011CFU，乳双歧杆菌HN019 2*1011CFU，酿酒酵母Z2.1 1.2*1011CFU。
将实施例一与对比例五进行对比，其区别在于，水分活度不同，实施例一所述的水分活度在0.1，而对比例五的水分活度为0.295，所得到的每粒胶囊中所含的益生菌的含量，从所得到的结果可以看出，实施例二中所得到的益生菌的含量较高，而对比例五所得到的益生菌的含量相对较低。
将实施例一以及对比例五所得到的每袋益生菌在1周后检测，实施例一中的每袋含有嗜酸乳杆菌L-92 2*109CFU，鼠李糖乳杆菌GG 6*108CFU，干酪乳杆菌Zhang 2*1011CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 2*1011CFU，乳双歧杆菌HN019 2*1011CFU，酿酒酵母Z2.1 1.2*1011CFU；而对比例五中的每袋含有嗜酸乳杆菌L-92 1.5*109CFU，鼠李糖乳杆菌GG 4*108CFU，干酪乳杆菌Zhang 1.2*1010CFU，罗伊氏乳杆菌RC14 5*1010CFU，乳双歧杆菌HN019 9.2*1010CFU，酿酒酵母Z2.1 3.5*1010CFU。
从上述对比结果可以看出，实施例一中的益生菌数相对稳定，而对比例五中的益生菌有一定程度损失，说明益生菌对水分活度要求较高，水分活度一般在0.2以下较稳定，水分活度越高，菌的衰减越快。
效果实施例一
1.治疗对象：发明人选取宜昌市第一人民医院2017年1月-2017年5月临床收治的过敏性鼻炎患者(年龄18-60岁)54例，患者症见：流鼻涕、鼻塞、鼻痒、打喷嚏等鼻炎症状，眼睛发痒、眼睛流泪、眼睛红肿、耳朵发痒、咳嗽等鼻炎外症状。
2.治疗方法：服用本发明实施例一所制备得到的益生菌组合物，每次2g，每日2次，实施例二所制备得到的益生菌组合物，每次2粒，每日2次，连续服用2周；对比例一所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日2次；对比例二所制备得到的益生菌组合物，每次2g，每日2次；对比例三所制备得到的益生菌组合物，每次2g，每日2次；每组9例。分别于治疗当天、2周观察患者临床表现及治疗反应，其治疗结果如下表3所示，其中，疗效标准为：
痊愈：鼻炎症状消失，鼻炎外症状消失；
有效：鼻炎症状缓解，鼻炎外症状消失；
无效：所以症状都没缓解。
表3治疗结果
组别 痊愈/例 有效/例 无效/例 有效率/％
实施例一 5 2 2 78％
实施例二 4 3 2 78％
对比例一 0 5 4 55％
对比例二 0 4 5 44％
对比例三 0 4 5 44％
其中，有效率为痊愈和有效例数占该组的总比例
结论：从上表可以看出，本发明实施例一和实施例二所得到的益生菌组合物对于过敏性鼻炎有效率达78％左右，能有效缓解过敏性鼻炎的症状，而对比例一至对比例三效果在60％以下，明显差于实施例。
效果实施例二
1.治疗对象：发明人选取宜昌市五峰县人民医院2017年1月-2018年1月临床收治的特异性皮炎患者(年龄12岁-45岁)42例，武汉市儿童医院2017年7月-2018年5月临床收治的过敏性儿童(年龄1岁-14岁)178例。症状：皮肤瘙痒、红斑、丘疹、浸润肥厚及苔藓样变。
2.治疗方法：服用本发明实施例一所制备得到的益生菌组合物，每次2g，每日1次；实施例二所制备得到的益生菌组合物，每次2粒，每日1次；服用本发明实施例三所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例四所制备得到的益生菌组合物，每次2粒，每日1次；服用实施例五所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例六所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例七所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例八所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例九所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例十所制备得到的益生菌组合物，每次3粒，每日1次；服用实施例十一所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例十二所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例十三所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例十四所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；服用实施例十五所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日1次；对比例一所制备得到的益生菌组合物，每次1g，每日2次；对比例二所制备得到的益生菌组合物，每次2g，每日2次；对比例三所制备得到的益生菌组合物，每次2g，每日2次；对比例四所制备得到的益生菌组合物，每次1袋，每日1次；对比例五所制备得到的益生菌组合物，每次1袋，每日1次；每组11例，所有组均连续服用2周。分别于治疗当天、2周、4周观察患者临床表现及治疗反应，其治疗结果如表4所示，其中，疗效标准为：
痊愈：临床症状消失,原发皮疹消退,无新发皮疹；
显效：症状明显缓解,显效为症状消退≥70％；
好转：症状明显缓解,皮疹消退≥30％；
无效：所以症状都没缓解，皮疹消退＜30％。
表4治疗结果
Figure BDA0002138913250000221
Figure BDA0002138913250000231
其中，有效率为痊愈+显效+好转占该组总例数的比例。
将实施例一与对比例一相对比，其区别在于，实施例一种含有酵母益生菌，而对比例一中不含有酵母益生菌或者酵母抽提物，经过相同的制备方法制备得到的益生菌组合物，从表格中的数据可以看出，实施例一中的有效率为73％，而对比例一中的有效率为36％，说明含有酵母或者酵母抽提物的益生菌组合物对于过敏性疾病的改善具有一定的效果。
将实施例一和对比例二相比，其区别在于，实施例一含有一定量的酵母，而对比例二中所含的酵母的量为45g，进而得到相应的益生菌组合物。从表格中的数据可以看出，实施例一中的有效率为73％，而对比例一中的有效率为45％，说明含有特定含量的酵母或者酵母抽提物的益生菌组合物对于过敏性疾病的改善具有一定的效果。
将实施例一和对比例三相比，其区别在于，实施例一含有益生元，而对比例三中不含有益生元，进而得到相应的益生菌组合物。从表格中的数据可以看出，实施例一中的有效率为73％，而对比例一中的有效率为27％，说明含有益生元的益生菌组合物对于过敏性疾病的改善具有一定的效果。
综上所述，本发明所制备得到的益生菌组合物对于过敏性鼻炎患者以及特异性皮炎患者，均具有一定的改善，从表3可以看出，使用本发明所述的益生菌组合物对于过敏性鼻炎具有一定的改善效果，其有效率达78％，能有效缓解过敏性鼻炎患者的症状；从表4可以看出，使用本发明所述的益生菌组合物对于特异性皮炎患者具有一定治疗效果，其有效率在64％以上，最高达91％，说明本发明所述的益生菌组合物能有效缓解特异性皮炎患者的症状，从而说明了本发明所述的益生菌组合物对于过敏性疾病具有一定的预防或改善效果。
以上所述，仅是本发明实施的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡在本发明的精神和原则之内所做的修改、等同替换和改进等，均需要包含在本发明的保护范围之内。

Claims (13)

1.一种用于预防或改善过敏性疾病的益生菌组合物，按重量份计，所述组合物包含0.1-9.9份嗜酸乳杆菌、0.1-9.9份鼠李糖乳杆菌、0.1-40份酵母益生菌或酵母抽提物、0.1-50份益生元以及可选择性的益生菌。
2.根据权利要求1所述的益生菌组合物，其中，所述组合物包含0.2-7份嗜酸乳杆菌、0.2-7份鼠李糖乳杆菌、2-35份酵母益生菌或酵母抽提物、0.3-35份益生元以及0.1-50份可选择性的益生菌；优选的，包含0.5-5份嗜酸乳杆菌、1-6份鼠李糖乳杆菌、5-30份酵母益生菌或酵母抽提物和1-30份益生元，以及1-40份可选择性的益生菌；较优选的，包含1-3份嗜酸乳杆菌，2-5份鼠李糖乳杆菌、10-20酵母益生菌或酵母抽提物和2-10份益生元，以及3-20份可选择性的益生菌。
3.根据权利要求1或2所述的益生菌组合物，其中，所述酵母益生菌选自于啤酒酵母、德巴利氏酵母、假丝酵母、毕赤氏酵母、球拟酵母、布拉迪酵母和酿酒酵母的一种或两种以上。
4.根据权利要求1-3任一项所述的益生菌组合物，其中，所述可选择性的益生菌选自于副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、格氏乳杆菌、唾液乳杆菌、约氏乳杆菌、发酵乳杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、乳双歧杆菌和动物双歧杆菌中的一种或两种以上；优选的，所述可选择性的益生菌选自于乳双歧杆菌和动物双歧杆菌中的一种或两种，较优选的，所述益生菌为1.5-15份乳双歧杆菌和1.5-15份动物双歧杆菌。
5.根据权利要求1-4任一项所述的益生菌组合物，其中，所述益生元选自于低聚果糖、水苏糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖和酵母β-葡聚糖的一种或两种以上，优选为酵母β-葡聚糖。
6.根据权利要求1-5任一项所述的益生菌组合物，其中，所述组合物还包含辅料，优选的，所述辅料选自于无水葡萄糖、麦芽糊精、麦芽糖醇、木糖醇和水果粉中的一种或两种以上；优选的，所述水果粉选自于山楂粉、苹果粉、香蕉粉、樱桃粉或甜橙粉中的一种；优选的，以重量份计，所述辅料选自于2-80份无水葡萄糖、0.1-15份麦芽糊精和0-5份山楂粉中的一种或两种以上，较优选的，所述辅料选自于10-60份无水葡萄糖和/或5-10份麦芽糊精。
7.根据权利要求1-6任一项所述的益生菌组合物，其中，以干重计，所述益生菌组合物中的益生菌的含量为102-1012菌落形成单位，优选为107-1011菌落形成单位。
8.根据权利要求1-7任一项所述的益生菌组合物，其中，所述益生菌组合物以粉末、片剂、固体饮料、胶囊、汤或液体悬浮物的形式存在。
9.权利要求1-8任一项所述的益生菌组合物的制备方法，其将权利要求1-8任一项所述的嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、酵母益生菌或酵母抽提物、益生元以及可选择性的益生菌进行混合从而得到所述益生菌组合物。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其中，将所述益生元和辅料混合后，冷却至室温，然后加入酵母益生菌或酵母抽提物、嗜酸乳杆菌、鼠李糖杆菌以及可选择性的益生菌进行混合得到所述的益生菌混合物。
11.根据权利要求10所述的制备方法，其中，在混合之后冷却至室温之前，还包含烘干步骤；优选的，所述烘干步骤为水分活度烘干至0.2以下。
12.权利要求1-8任一项所述的益生菌组合物或权利要求9-11任一项所述的制备方法制备得到的益生菌组合物在预防或改善过敏性疾病中的应用。
13.一种具有预防或改善过敏性疾病的保健食品组合物，其包含权利要求1-8任一项所述的益生菌组合物或权利要求9-11任一项所述的制备方法制备得到的益生菌组合物。
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