CN112203738A - 用于测定聚亚烷基醚或聚亚烷基胺中杂质的方法及其用途 - Google Patents

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Abstract

公开了聚亚烷基醚和聚亚烷基胺中杂质的测定方法，包括以下步骤i)将聚亚烷基醚或聚亚烷基胺作为分析物引入含有整料硅胶作为固定相的色谱柱中，ii)使用具有的极性使得在色谱法过程中分析物与固定相吸附平衡的液体洗脱剂来洗脱分析物，iii)在色谱柱的出口侧端检测分析物的成分，获得色谱图，其显示分析物的不同成分和它取决于单个成分的洗脱时间的定性量，和iv)鉴定色谱图中与具有最大高度或面积的谱带相比具有低高度或面积的谱带作为分析物中存在杂质的指示。方法允许以简单的方式鉴定样品中的杂质。方法可用于品质控制还用于样品的制备性纯化。

Description

用于测定聚亚烷基醚或聚亚烷基胺中杂质的方法及其用途
本发明涉及脂肪族聚亚烷基醚或脂肪族聚亚烷基胺中杂质的测定，特别是聚亚烷基二醇中多元醇杂质或聚
Figure BDA0002671238330000011
唑啉的合成中H-引发杂质的测定。
聚亚烷基二醇在许多技术领域中使用。聚亚烷基二醇的典型实例是聚乙二醇(PEG)。取决于链长度，这些是具有通式C2nH4n+2On+1的液体或固体的溶于水且无毒的聚合物。由于它们的性质，这些被使用在许多应用中，例如作为药剂学中的活性成分载体、作为化妆品的成分、在各种工业应用中或在细胞生物学研究中。
聚亚烷基二醇的另一实例是聚丙二醇。这些例如用在非离子洗涤剂和清洗剂中、合成树脂中、作为防冻剂、作为浮选剂或作为化学中间体。
其中使用聚亚烷基胺作为环氧树脂的固化剂用于生产聚酰胺并且作为阳离子絮凝剂。可通过与光气在伯胺基团上的反应将聚亚烷基胺转化为相应的聚异氰酸酯，其可用于例如生产聚氨酯。
聚亚烷基二醇经常含有多元醇杂质，并且聚亚烷基胺例如聚
Figure BDA0002671238330000012
唑啉经常含有H-引发物质，这是由合成途径决定的。这些杂质在一些应用中是不期望的。
最重要的药学相关的聚合物之一是充分确定的聚乙二醇单甲醚(mPEG)，这也已被联邦药物管理局(FDA)批准用于许多应用。最重要的已知问题是PEG-二元醇杂质(PEG-二元醇)的存在，其可导致蛋白质或其它感兴趣的药物成分的交联并因此导致并发症。
聚
Figure BDA0002671238330000013
唑啉分别作为mPEG的替代物或补充物是潜在感兴趣的。因此，在此也需要鉴定和去除不期望成分的简单可能性。
PEG-二元醇和mPEG具有非常类似的物理-化学性质(参阅图1a和1b)并因此难以鉴定PEG-二元醇杂质。
色谱法通常适合于杂质的分析测定并且适合于聚亚烷基二醇或聚亚烷基胺的制备再加工。
各种色谱法可用于通过色谱法的方式分离或净化聚合物。这些特别包括尺寸排阻色谱法(SEC)、临界条件下的色谱法(LCCC)和液相吸附色谱法(LAC)。
LCCC作为洗脱模式可提供独立于大分子链长度的洗脱，即这仅由端基决定。然而，基本上mPEG中的α-甲氧基端的影响，与未改性的PEG中的羟基基团相反，仅意味着在PEG大分子的亲水/疏水性质中非常有限的差异(参照图1a和1b)，这使基于液相色谱法的简单鉴定方法成为挑战并是迄今尚未解决的任务。
迄今为止，没有允许容易地鉴定在具有广泛范围摩尔质量的mPEG中的PEG-二元醇杂质的总体方法。原则上，可能存在色谱法。总是存在使用在非常有限的摩尔质量区域中(例如摩尔质量远小于1000g mol-1或个别摩尔质量)的模型。关于这一主题的专利文献提出通过用具有显著疏水特性的基团改性链端处的端部羟基基团，这导致官能化的ω链端或官能化的α和ω链端，其显示与特别选择的色谱法吸附剂的相互作用，从而能够鉴定。这样的标记反应的有效性也是待考虑的问题。
因此之前聚亚甲基二醇或聚亚甲基胺中杂质的测定在一些方面还有许多待改进之处。这样的测定包括例如通过SEC与适当的检测方法结合的方式分析检测杂质。这种分析方法可任选地与其它分析方法，例如与磁共振光谱法或与质谱法结合。
整料模制品(Monolithische
Figure BDA0002671238330000021
)被证明是生物聚合物的净化和分离中的固定相。EP 1 629 887 A1、WO 2006/013043 A1、DE 198 01 575 A1和DE 197 26 151A1描述了这样的方法。
在DE 102 58 491 A1中描述了生产具有均匀孔径的整料或微粒状吸附剂。
DE 197 26 164 A1公开了包覆的整料吸附剂。
WO 2005/075976 A2描述了其中毛细管分离方法与质谱法组合的分离方法。优选使用整料吸附剂进行该方法。
现在发现了色谱法极好地适合于测定聚亚烷基二醇和聚亚烷基胺中多元醇和多元胺杂质。使用本发明的方法可容易地测定商业产品中的多元醇或多元胺杂质。还可使用聚亚烷基二醇或使用聚亚烷基胺来进行该方法，聚亚烷基二醇或聚亚烷基胺的端基被完全或部分官能化，或含有官能化的多元醇或多元胺杂质，例如醚化的羟基端基或烷基化的氨基端基。本发明的方法还允许定量测定非常小量的多元醇或多元胺杂质，例如这些的量小于1重量％。
使用本发明的方法，可定量地测定聚亚烷基二醇或聚亚烷基胺中的杂质量。可测定和/或分离比期望产物具有更低分子量或更大分子量的杂质。还可测定和/或分离具有与期望产物相同分子量的杂质，条件是分子量不具有太大的值例如大于20000g/mol的值。
在某些分散性限制内(这是聚合物应用的先决条件)能够鉴定和定量测定杂质。可通过MALDl-MS测量支持杂质例如二元醇的鉴别。
本发明涉及聚亚烷基醚和聚亚烷基胺中杂质的测定方法，包括以下步骤
i)将聚亚烷基醚或聚亚烷基胺作为分析物引入含有整料硅胶作为固定相的色谱柱中，
ii)使用具有的极性使得在色谱法过程中分析物与固定相吸附平衡的液体洗脱剂来洗脱分析物，
iii)在色谱柱的出口侧端检测分析物的成分，接收色谱图，其显示分析物的不同成分和它们取决于单个成分的洗脱时间的定性量，和
iv)鉴定色谱图中与具有最大高度或面积的谱带相比具有低高度或面积的谱带作为分析物中存在杂质的指示。
根据本发明使用的聚亚烷基二醇是多价醇或端基处被部分或完全醚化或酯化的相应衍生物。在这些中，羟基基团优选形成聚合物链的端基。
根据本发明使用的聚亚烷基二醇的实例是聚乙二醇、聚丙二醇或聚四氢呋喃。实例为：
Figure BDA0002671238330000041
其中m≥1。此外，具有数个分支例如具有3、4、6或8个分支的支化聚亚烷基二醇是可能的。
其它优选使用的聚亚烷基二醇是其中一些或所有羟基端基被醚化的那些，特别地代表烷基醚基团或尤其是甲氧基基团。
特别优选使用在1000至50000g*mol-1的摩尔质量范围的聚乙二醇，并且特别是具有1000至20000g*mol-1的典型药学相关的摩尔质量范围的那些。就本说明书的目的而言通过尺寸排阻色谱法测定摩尔质量。
根据本发明使用的聚亚烷基胺是多价胺或氨基基团处被部分或完全官能化的相应衍生物，特别是烷基化的衍生物。在这些中，氨基基团优选形成聚合物链的端基。聚亚烷基胺还可具有其它端基，例如羟基基团、烷基基团或芳香基团。聚亚烷基胺可具有不同的端基。
根据本发明使用的聚亚烷基胺的实例是聚乙烯胺、聚丙烯胺或聚丁烯胺。这些的实例是具有式-CnH2n-NR1-的重复结构单元的多元胺，其中n是2-4的整数和R1是氢或C1-C6-烷基，特别是氢或甲基。这些聚亚烷基胺的端基优选是式–NR2R3的残基，其中R2和R3彼此独立地是氢或C1-C6-烷基，特别是氢或甲基。
优选使用聚(2-
Figure BDA0002671238330000042
唑啉)。这些特别是在2-位含有取代基例如甲基或乙基。
根据本发明使用的聚
Figure BDA0002671238330000043
唑啉通常含有至少80重量％，特别是至少90重量％的具有式I和/或式II的重复结构单元，基于它们的总质量。
-NR4-CR5H-CR6H-(I)，-NR4-CR5H-CR6H–CR7H-(II)，
其中
R4表示式-CO-R8的残基，
R5、R6和R7彼此独立地表示氢、甲基、乙基、丙基或丁基，
R8选自下组：氢、甲基、乙基、-CmH2m-X或-(CnH2n-O)o-(CpH2p-O)q-R9，
R9是氢或C1-C6烷基，特别是甲基或特别优选是氢，
m是1-6的整数，
X选自下组：羟基、烷氧基、氨基、N-烷基氨基、N,N-二烷基氨基、羰基、羧酸酯、磺酰基、磺酸酯或氨基甲酸酯，
n和p彼此独立地表示2至4的整数，其中n不等于p，n优选是2和p优选表示3，和
o和q彼此独立地是0-60的整数，特别是1至20的整数和特别优选2至10的整数，其中o或q中至少一个不为0。
根据本发明使用的优选的聚(
Figure BDA0002671238330000051
唑啉)是其中R8是氢、甲基或乙基并且R5至R7表示氢或其中R8是氢、甲基或乙基和残基R5至R7中两个是氢并且残基R5至R7中一个是甲基或乙基的那些。
根据本发明使用的聚(
Figure BDA0002671238330000052
唑啉)的摩尔质量常为5000至500000g/mol，特别是5000至20000g/mol。就本说明书的目的而言通过尺寸排阻色谱法测定摩尔质量。
优选其中聚亚烷基醚是具有可被部分或完全醚化的羟基端基的聚乙二醇或聚丙二醇的方法。
还优选其中聚亚烷基醚是含有烷氧基端基特别是甲氧基端基的聚乙二醇或聚丙二醇的方法。
另外，优选其中聚亚烷基胺是具有可被部分或完全烷基化的氨基端基的脂肪族聚
Figure BDA0002671238330000053
唑啉的方法。
待分析或从聚亚烷基二醇分离的杂质可通常是有机化合物，例如质子有机化合物，其质子基团可被完全或部分官能化。典型的杂质是多元醇例如单价醇或二元醇，它们的羟基基团可被部分或完全醚化，例如作为烷氧基基团，特别是作为甲氧基基团存在。
待分析或从聚亚烷基胺分离的杂质通常还可为有机化合物，例如质子有机化合物，其质子基团可被完全或部分官能化。典型的杂质是多元胺例如单胺或二胺，它们的氨基基团可被部分或完全官能化，例如作为烷基氨基基团，特别是作为N-烷基氨基基团或作为N,N-二烷基氨基基团存在。
可使用梯度方法借助与电喷射离子化结合的液相色谱法将聚
Figure BDA0002671238330000061
唑啉分离成单个成分。
初始样品中杂质的量经常小于等于20重量％、优选小于5重量％并且特别小于1重量％，基于初始样品的总量。
优选其中聚亚烷基醚中的杂质是多元醇的方法，多元醇的平均摩尔质量在待分析的聚亚烷基醚的平均摩尔质量的相同范围内或小于待分析的聚亚烷基醚的平均摩尔质量，优选是亚烷基二醇和/或二亚烷基二醇或三亚烷基二醇。
还优选其中聚亚烷基胺中的杂质是多元胺的方法，多元胺的平均摩尔质量在待分析的聚亚烷基胺的平均摩尔质量的相同范围内或小于待分析的聚亚烷基胺的平均摩尔质量，优选是亚烷基二胺和/或二亚烷基亚胺二胺(Dialkylenimindiamine)或三亚烷基亚胺二胺(Trialkylenimindiamine)。
详细地，根据本发明的方法特征在于建立色谱法条件，其引起吸附方案的开始。在这些条件下，端基特有的吸附行为开始。在聚合物的色谱法中，技术人员区分三种方式操作，尺寸排阻色谱法，独立于链长度的洗脱和分配或吸附色谱法，其中发生洗脱液与固定相的相互作用。本发明的方法特征在于存在其中存在吸附色谱法的条件。
用本发明，解决了分析含有质子和/或羟基基团的杂质的问题的确定方法的固有问题。本发明的方法因此提供在限定的摩尔质量范围内进行定性而且定量测定杂质的可能性。特别地存在如下可能性，能够在没有对产物化学改性的情况下进行，并且能够在几分钟内进行分析。
另外，根据本发明的方法的优势由显而易见的测定简单性和快速提供的结果产生，例如可在几分钟内获得结果。
另外，可在几分钟内通过快速液相色谱法进行批次与批次间的定量和可重复的纯度分析。
作为固定相，在本发明的方法中使用整料硅胶。这样的产品是已知的并且已经使用在其它色谱法中。
根据本发明使用的高度多孔的硅酸基整料材料特征在于大孔且彼此结合流体连通的孔结构，其被连续的且永久的中孔骨架包围。这样的固定相证明是高效率的并且当分离小分析物时显示截留稳定性能。
优选使用的整料硅胶特征在于孔的连通网络的存在，即通过洗脱液的对流和/或扩散进入这些孔。洗脱液的对流可进入孔的优选尺寸在范围0.2-3μm变化。另外，整料硅胶仍可具有孔，其通过扩散可使洗脱液进入。这些孔的尺寸优选在范围3-200nm变化。
优选的整料硅胶是用官能团在包括内表面的表面上改性的。这些可为亲水基团或疏水基团。亲水基团的实例是羟基基团。疏水基团的实例是烷基基团，例如具有4、8、12或18个碳原子的烷基基团。
或者，可以未改性的形式即作为极性材料使用整料硅胶。
因此，可作为极性材料或还以疏水形式即作为非极性材料使用整料硅胶。
优选地，使用采用长的烷基基团例如用C18-烷基衍生的整料硅胶棒。
在本发明的方法中，使用具有如下极性的洗脱剂，使得分析物在色谱法过程中与固定相处于吸附平衡。可例如通过混合不同极性的溶剂来进行洗脱强度的调节。在这种情况下，设定这样的洗脱强度，其中色谱法作为吸附/分配色谱法进行。技术人员可凭借简单的系列试验，通过稀释系列进行设定。
当使用极性整料硅胶时，考虑了具有低极性的洗脱剂。这些的实例是非极性溶剂，其优选是无水的。25℃下液态的脂肪族或芳族烃优选作为洗脱剂，例如己烷、庚烷、辛烷、癸烷、苯、甲苯或二甲苯，以及25℃下液态的卤化脂肪族烃例如二氯甲烷、氯仿或四氯甲烷，或25℃下液态的羧酸酯例如乙酸甲酯或乙酸乙酯，或25℃下液态的醚类例如二***或二硫化碳。还可作为混合物使用这些洗脱剂从而调节需要的洗脱强度。
非极性溶剂可与少量的水、醇类或质子惰性的极性溶剂混合从而调节洗脱剂的特定极性。
当使用非极性整料硅胶时(对应于作为反相形成的固定相)，考虑了具有高极性的洗脱剂。
极性洗脱剂的实例是水、水溶性醇类或质子惰性的极性溶剂。
水溶性醇类的实例是具有1至4个碳原子的脂肪族醇类。
质子惰性的极性溶剂的实例是酮类例如丙酮，内酯例如γ-丁内酯，内酰胺例如N-甲基-2-吡咯烷酮，腈例如乙腈，硝基化合物例如硝基甲烷，叔羧酸酰胺例如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，脲衍生物例如四甲基脲或二甲基亚丙基脲(DMPU)，亚砜例如二甲亚砜(DMSO)，砜例如环丁砜，碳酸酯例如碳酸二甲酯或碳酸亚乙酯。
特别优选使用水与质子惰性的极性溶剂的混合物。这些混合物的实例是甲醇和水、乙醇和水或丙酮和水的混合物，或者特别是水与乙腈的混合物。
根据水与质子惰性的极性溶剂例如水与乙腈的体积比为6:4的洗脱剂所需的极性是出色的初始值。分离参数的微调通过以上提到的系列测试以无限小的间隔进行。对于体系水/乙腈而言，优选寻求体积比为6.5:3.5至5.5:4.5。
优选如下的方法：其中整料硅胶形成为反相并且其中洗脱剂以这样的量含有水和有机溶剂使得分析物的洗脱作为吸附/分配色谱法进行。
可在常压下或优选在过压下进行本发明的方法。优选地，色谱柱中的压力为10至200巴。
在柱中的洗脱剂为液态这样的温度下进行根据本发明的方法。优选地，色谱柱中的温度为4至50℃。
可在宽的范围内选择柱长度和柱直径。典型的柱长度在范围1cm-1m变化。典型的柱直径在范围10μm-10cm变化。
可通过技术人员已知的所有方法进行在色谱柱的出口侧端检测分析物的成分。这些的实例是检测流动相的物理性质，例如光吸收、荧光、光散射或热导率，或检测流动相的化学性质，例如指示剂物质的使用。
优选其中通过光散射检测(ELSD)或通过UV/VIS光谱法进行在色谱柱的出口侧端检测分析物的成分的方法。
在色谱柱的出口侧端检测分析物的成分的结果是其中将具有不同洗脱时间的样品试样根据时间作图的色谱图。
可从色谱图的谱带的高度或面积确定所涉及成分的定性数量。还可通过使用适当的校准标准物进行定性测定。
与构成样品主要部分的聚合物相比，在样品中仅含有少量含于其中的杂质。
当与具有最大高度或面积的谱带相比色谱图中出现具有低高度或面积的谱带时，结论是样品中存在杂质。
优选其中具有低高度的谱带的高度小于10％，特别地小于5％的具有最高高度的谱带的高度的方法。在PEG-二元醇的情况下，例如能够检测至多具有最高高度的谱带高度的0.8％的谱带高度。
可分批或连续地进行根据本发明的方法。就这个目的而言可使用色谱法的标准仪器，例如配备有专用柱材料的常规的HPLC***。
本发明的方法适合于快速测试聚亚烷基二醇或聚亚烷基胺的杂质。因此可有利地用于这样的产物的品质控制。
本发明的方法还可用于从聚亚烷基二醇或从聚亚烷基胺分离杂质。因此还可有利地使用在这些化合物的制备性纯化中。
这些用途也是本发明的主题。
以下实施例解释本发明而不是限制本发明。
实施例
使用色谱法***(Agilent Technologies 1200系列，Polymer StandardsService GmbH(PSS，美因茨))来进行色谱法测量。该***由柱炉和光散射检测器(ELSD)组成，该光散射检测器以氮作为载气运行。在可商购得到的聚乙二醇二元醇(PEG-二元醇；PSS，德国美因茨和PL，英国什罗普郡)和在合成的聚乙二醇单甲醚(mPEG)上进行测量。使用高分辨率色谱柱(用RP-18端基封端的整料硅胶)。色谱柱从Merck KGaA(德国达姆施塔特)获得。柱的长度为100mm并且它的内径为4.6mm。柱材料具有大于80％的高孔隙率并具有尺寸为约1.1μm的大孔和约15nm的中孔。柱材料的内表面为250m2g-1。通过压汞仪或通过氮吸附/解吸附等温线来测定内表面。
合成mPEG样品的摩尔质量(数均Mn和重均Mw)通过尺寸排阻色谱法测定并且显示窄分散性
Figure BDA0002671238330000101
细节见以下表1中。
表1：聚乙二醇二元醇(PEG)和聚乙二醇单甲醚(mPEG)的性质概述
Figure BDA0002671238330000102
化学品和材料
使用的试剂和溶剂是从Aldrich或Linde购买的可商购得到的产品。在蒸馏前，在滴定管中在钠上搅拌环氧乙烷(EO)。在使用它们之前，在氢化钙上搅拌2-甲氧基乙醇和二苯甲烷并然后在真空下蒸馏。纯净的反应物用氩冲洗，储存在手套箱中的Schlenk管中，并在三天内使用。通过在新制备的苯甲酮钠上在回流下加热来干燥四氢呋喃直至出现深蓝色。干燥的四氢呋喃随后储存在惰性气体下的Schlenk管中，并在短时间内使用。
HPLC级的乙腈从Sigma(Taufkirchen，德国)获得并且超纯水在ThermoScientificTM BarnstaedtTM GenPureTM-xCAD水净化***(Thermo Electron LED GmbH，Langenselbold，德国)中新制备。合成使用的甲氧基聚乙二醇样品(mPEG样品)。PEG样品从PSS(Polymer Standards Service GmbH，德国美因茨)和PL(Polymer Laboratories，英国什罗普郡)购买作为SEC标准物。
mPEG样品的制造
在惰性条件下进行引发剂2-甲氧基乙醇钾的生产。将2-甲氧基乙醇溶解在四氢呋喃中并逐滴添加二苯甲基钾直至可观察到产物的沉淀和形成浅橙色混合物。用四氢呋喃冲洗产物四次直至橙色完全消失。然后在真空下干燥产物并收集为灰色粉末。
在排除水和空气(惰性)的情况下进行制备引发剂溶液用于通过活性阴离子开环聚合反应(AROP)将EO聚合为mPEG。首先，在惰性条件下将四氢呋喃和2-甲氧基乙醇钾添加至GL45瓶。为了能够在惰性条件下进行整个方法，然后通过PTFE软管将细微的悬浮液转移至PicoClave玻璃高压釜反应器(Bü chiGlasUster，瑞士乌斯特)并通过搅拌冷却至-20℃。随后，使用mini-CORl-FLOW质量流动控制设备(Bronkhorst High-Tech B.B.，Ruurlo，荷兰)将相应量的EO添加至反应混合物，由此随后在120min内加热至45℃并搅拌另外的48小时。通过添加乙醇/乙酸(95/5％，v/v)的混合物中止聚合反应。为了分离和纯化，将聚合物在冷的二***中过滤并在真空下干燥。产物收集为白色粉末。
合成mPEG样品的分子量测定
在Shimadzu SEC***(控制单元：CBM-20A VP，脱气器：DGU-20A5，泵：LC-10ADVP，自动进样机：SlL-10AD VP，炉：TechLab，RI检测器：RlD-10A)上进行尺寸排阻色谱法测量(SEC)，其使用由氯仿/异丙醇/三乙胺(94/2/4％，v/v/v)组成的三元流动相作为洗脱剂工作。在40℃的温度下以1mL min-1的体积流量操作PS5 SDV线性S柱(5微米粒径)。使用由(i)Polymer Standards Service GmbH(PSS，德国美因茨)(PEO 106000、55800、42700、26100gmol-1)和(ii)Polymer Laboratories(PL，英国什罗普郡)(PEG 12600、7100、4100、1470、960、600、440、194g mol-1)建立的PEG/PEO标准物将***校准在194g mol-1至106000g mol-1的范围内。
液相色谱法
使用来自PSS(Polymer Standards Service GmbH，美因茨)的AgilentTechnologies 1200系列的改进***进行色谱法测量。通过使用130μm ID软管减小柱的死体积，该软管从注射器延伸至柱头并从柱出口延伸至检测器。在所有实验中将注射体积设定为10μl，即0.6％的柱体积。将柱放置于来自PSS(Polymer Standards Service GmbH，美因茨)的TCC 6000柱炉中并在30℃下回火。将来自PSS(Polymer Standards Service GmbH，美因茨)的光散射检测器(ELSD)(Softa Model 400)连接至柱的出口管线。使用氮作为ELSD检测器的载气。腔室和漂移管的温度分别设定为45和70℃。检测器在10Hz的最大数据速率下工作。在高分辨率色谱柱(用RP-18端基封端的整料硅胶)上进行洗脱。色谱柱由MerckKGaA(德国达姆施塔特)获得。柱长度为100mm其中直径为4.6mm。通过用死体积为零的软管连接器代替柱并且注射最小和最大的PEG样品来测定***的总死体积。计算了死体积为总柱体积的约2％。
通过将所有样品溶解在用于色谱法实验的各个流动相中，提供浓度在0.1和2.0mgmL-1之间的所有样品。在分析之前，使用具有孔尺寸为0.45μm的PTFE过滤器来过滤样品。
基质辅助激光去吸附离子化飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)的实验
在收集的洗脱级分上使用配备有Nd-YAG激光器的UltraFlex TOF/TOF质谱仪(Bruker Daltonics，德国不莱梅)进行MALDI-TOF-MS实验。以正反射器模式测量所有光谱。在每次测量之前，使用来自PSS(Polymer Standards Services GmbH，美因茨)的外部PMMA标准物将仪器校准在需要的质量测量范围内。使用Flex Analysis 3.4软件分析MS数据并且使用软件(Bruker Daltonics的Isotope Pattern Calculator)产生同位素模式。对于MALDl-MS样品的样品制备而言，使用收集的洗脱级分，以30mg mL-1的浓度在氯仿中的反式-2-[3-(4-叔丁基苯基)-2-甲基-2-亚丙烯基]丙二酸二腈(DCTB，Sigma-Aldrich)和以60mgmL-1的浓度溶解在氯仿中的掺杂盐碘化钠的溶液。将具有样品的洗脱级分首先放在样品盘上并然后使样品干燥。在干燥之后，将基质和盐的溶液施加于样品盘上的对应位置。对于每种样品而言，使用0.5μl的样品溶液，之后0.5μl的基质-盐混合物溶液。
实施例1：根据洗脱液的组成确定洗脱时间
图1a)和1b)显示根据洗脱液的组成用于不同mPEG样品(实心符号)和PEG二元醇样品(空心符号)的洗脱时间。使用乙腈与水的混合物作为洗脱液。
图1a)显示具有不同分子量的mPEG样品的结果(Mn＝2300g/mol、Mn＝5600g/mol、Mn＝7500g/mol、Mn＝12000g/mol、Mn＝21800g/mol、Mn＝34900g/mol、Mn＝46200g/mol)。
图1b)显示具有不同分子量的PEG-二元醇样品的结果(Mn＝1840g/mol、Mn＝2800g/mol、Mn＝7500g/mol、Mn＝22100g/mol、Mn＝34000g/mol)。
图2显示PEG-二元醇样品、mPEG样品和两种样品的混合物的梯度洗脱的结果。上方曲线显示具有平均分子量Mn＝1840g/mol的PEG-二元醇样品的洗脱。中间的曲线显示具有平均摩尔质量Mn＝2300g/mol的mPEG样品的洗脱和下方曲线显示这两种样品的50/50(％，v/v)混合物的洗脱。
条件：具有在水中10％乙腈的流动相的二元组成保持等度3分钟然后在50分钟内线性提高至含量为水中50％乙腈(％，v/v)。
图3显示平均摩尔重量Mn＝12 000g/mol的mPEG样品(中间曲线)和这种mPEG样品与平均摩尔重量Mn＝2800g/mol的PEG-二元醇(上方曲线)或与平均摩尔重量Mn＝22100g/mol的PEG-二元醇(下方曲线)的50/50(％，v/v)混合物的洗脱图(elugramme)。水/乙腈的流动相组成为60/40(％，v/v)。流动相的流速为1mL/min。
图4(a)显示具有不同PEG-二元醇含量的m-PEG的混合物的洗脱图。平均分子量Mn＝2300g/mol的mPEG的含量保持恒定为1mg/mL并且使用不断提高的平均分子量Mn＝1840g/mol的PEG-二元醇含量。
图4(b)显示洗脱信号的谱带高度相对于混合物中的PEG-二元醇含量的双对数曲线(其中从分别三次重复注射和色谱法分析获得误差限)。次日使用相同的样品重复测量(空心符号)。
图5a和5b显示mPEG和PEG-二元醇的洗脱结果。使用的mPEG和PEG-二元醇的平均摩尔质量Mn在范围1500-50000g/mol变化。上图显示使用50/50至40/60乙腈/水(％，v/v)作为洗脱剂获得的结果。下图显示图5a的明显放大的部分。
在上图5a中，PEG-二元醇(空心符号)和mPEG(实心符号)的摩尔质量(Mn)对以50/50乙腈/水(％，v/v)时的洗脱时间做图，由此表明在尺寸排阻模式(方形)和吸附/分配模式(菱形和五边形)之间的过渡。后者首先对于较大摩尔质量实现。使用较低浓度的乙腈作为洗脱剂的下图5b显示洗脱剂中40％的乙腈含量时，具有较低摩尔质量的mPEG比PEG-二元醇显著更晚地洗脱。流动相的组成为40/60乙腈/水(％，v/v)。对于图5a和5b的流动相的流速都为1mL min-1。
图5a和5b显示50/50乙腈/水(％，v/v)的流动相组成导致被尺寸排阻效应影响的洗脱模式，即最大的mPEG和PEG-二元醇首先被洗脱。流动相的洗脱剂的极性提高至42％乙腈显示具有较大摩尔质量的PEG的洗脱时间增加，使得所有PEG在类似的洗脱时间洗脱，对所有摩尔质量几乎没有选择性(圆圈)。这些结果说明在临界条件(LCCC洗脱模式)下液相色谱法区分mPEG和PEG-二元醇的有限能力，因为在α-羟基与α-甲氧基相比之间的差异简直太小，以至不能基于端基特征(图1)给予清楚的临界吸附条件。
在洗脱剂含有仅40至41％乙腈的情况下，较大PEG比较小的显著更晚地洗脱，即在摩尔质量大于10000g mol-1时(图5a中的菱形和五边形)进入聚合物骨架的分配/吸附，即在分子量大于10000g mol-1时，清楚地发生分配/吸附模式(图5a上部分中的菱形和五边形)。大于10000g mol-1，结果仅由依赖于聚合物骨架的吸附/分配的摩尔质量确定，源自α基团特性的贡献逐渐降低。这在图5a的下部中显示，其涉及较小的分子量(＜10000g mol-1，五边形)。
在这点上，分配和吸附开始在洗脱中占主要地位。还应注意在mPEG和PEG-二元醇的物质总体的洗脱时间中，开始产生在洗脱时间中小但明显的差异。图5a和5b因此描述分离具有非常类似分子量的mPEG和PEG-二元醇物质即以40％的乙腈含量采用分配/吸附模式分离的独特可能性。虽然在1000和10000g mol-1之间的PEG-二元醇仍然非常类似地洗脱，但是mPEG显示延迟的洗脱(图5a和5b中的五边形)。这在例如以下在具有类似摩尔质量的mPEG/PEG-二元醇对的混合物的分离中证明(图6a)。
图6a显示PEG-二元醇(Mn＝1840g mol-1，上方曲线)、mPEG(Mn＝2300g mol-1，中间曲线)和它们的50/50(％，v/v)混合物(下方曲线)的洗脱图。
图6b显示mPEG(Mn＝2300g mol-1，中间曲线)、这种m-PEG与PEG-二元醇的混合物(Mn＝375g mol-1，上方曲线)和这种m-PEG与PEG-二元醇的混合物(Mn＝2800g mol-1，下方曲线)的洗脱图。
在图6a和6b中显示的实验中，流动相的流动速度为1mL min-1并且流动相具有60/40水/乙腈(％，v/v)的组成。
这些结果显示图6a的实施例的mPEG洗脱为窄的谱带，不同于具有类似摩尔质量的PEG-二元醇的谱带。具有摩尔质量为20000g mol-1的较大mPEG与具有相当摩尔质量的典型二元醇洗脱类似(图1)。这个情况不令人惊讶并且是由于在摩尔质量大于20000g mol-1时关于端基特性失去选择性所致，其中聚合物链的吸附强烈主导洗脱。
注意当使用具有显著不同摩尔质量和摩尔质量分布的二元醇时，甚至具有较大摩尔质量也能够分离mPEG和PEG-二元醇。
为了支持在mPEG和PEG-二元醇之间的显著选择性，借助梯度液相色谱法分析图6a和6b中使用的mPEG(图2)。由于在PEG-二元醇和mPEG中各种谱带的出现，实验显示PEG标准物和mPEG标准物的预期分散性。梯度洗脱没有改进mPEG和PEG-二元醇之间的区分度(图2)。
由于聚合的不同引发气氛和反应动力学以及实施，不能预计PEG-二元醇杂质具有与mPEG样品相同的摩尔质量值。需要注意生长具有两个可能的单体连接点的聚合物链的不同的引发可能性和动力学。因此期望检测mPEG产物中是否存在较小的和特别是较大量的PEG-二元醇杂质。为了模拟这样的条件，检查在摩尔质量范围的下限和上限含有受控含量的PEG-二元醇的mPEG样品，所述PEG-二元醇具有较低或较大的摩尔质量。在图6b和3中显示所选择的洗脱图。
清楚的是具有较低摩尔质量的二元醇明显不同于各个mPEG(图6b和3，最上面的曲线)，但是随着二元醇的摩尔质量变大也越来越难以鉴定(图6b和3，最下面的曲线)，但是可在洗脱图中鉴定两种物质。具有较大摩尔质量的PEG-二元醇的实例(图3，最下面的曲线)在来自双峰分布摩尔质量的两种不同的级分中洗脱。然而，这些洗脱在mPEG级分之后。这是洗脱PEG-二元醇的内在结果，这基于具有较大摩尔质量的大分子的聚合物链的吸附/分配(图5)。较小的洗脱级分还显示与mPEG级分的一些重叠。尽管如此并与纯的mPEG(图6a和6b，中间曲线)相反，通过如色谱图中显示的清楚的洗脱模式显示PEG-二元醇(图S3，与中间曲线相比最下面的曲线)。
为了说明用于估计存在的PEG-二元醇数量的方法的基本适用性，使用不同浓度的PEG-二元醇(Mn＝1840g mol-1)与固定浓度的mPEG(Mn＝2300g mol-1)的混合物进行实验(图4a)。
虽然甚至在带高度相对溶液浓度的双对数图中ELSD的典型非线性依赖性是明显的(图4)，但是在不同日期测量的可重复性允许估计在mPEG为1mg mL-1的固定浓度下小于1％的PEG-二元醇的浓度和含量。
为了说明本文描述的方法途径的性能，分析了mPEG样品，其是在例如水的质子杂质存在下产生的。在活性阴离子开环聚合开始时添加水。在这种情况下，由色谱图中谱带的明显肩台显示二元醇杂质(图7a)。
图7a显示所述方法的应用实例。使用与图6中描述的相同色谱法条件。
图7a显示1mg mL-1的含有二元醇杂质的阴离子聚合产物的洗脱曲线。图7a右侧上呈现的是在这个图左侧上的谱带的放大。
图7b在左半边显示收集的被鉴定为PEG-二元醇(以黑色显示)的小洗脱级分和被鉴定为mPEG(以灰色显示)的较大洗脱级分的MALDI-TOF-MS谱图。图7b的右半边显示PEG-二元醇和mPEG的同位素***模式。显示了质谱图的截段，其中虚线是PEG-二元醇的计算同位素***模式。
通过使用MALDI-TOF-MS将从色谱图(图7a)收集的洗脱级分鉴定为具有小于1000m/z直至3000m/z的宽摩尔质量分布的PEG-二元醇杂质(图7b，左边部分，黑色质谱图)。PEG-二元醇的量估计为约8％。
从这些实施例的数据可推断在实验条件下，这没有导致物质基于摩尔质量分布的选择性洗脱(例如图3)，但是在相当窄的洗脱带中出现mPEG和PEG-二元醇的群组(例如图3)，能够快速鉴定在药物相关的摩尔范围中mPEG中的PEG-二元醇杂质。
借助与电喷射离子化(ESI)结合的梯度液相色谱法，研究了聚
Figure BDA0002671238330000171
唑啉(图8)。图8显示在聚
Figure BDA0002671238330000172
唑啉的色谱图中单个低聚物，其具有OH和CH3端基。在色谱图下方，显示待研究物质的ESI谱图。框出了质谱法中检查的单个低聚物。这些在不同时间洗脱，在色谱图中由相应框表示。可质谱法检测并借助梯度方法色谱法分离CH3-和H-引发的聚
Figure BDA0002671238330000173
唑啉。以0.5mL/min的流速用含水乙腈作为洗脱剂进行测量。在70分钟内乙腈含量从20％提高至40％。在另外的10min之后，乙腈含量提高至80％。在此使用含有整料硅胶作为固定相的色谱柱。

Claims (12)

1.聚亚烷基醚和聚亚烷基胺中杂质的测定方法，包括以下步骤
i)将聚亚烷基醚或聚亚烷基胺作为分析物引入含有整料硅胶作为固定相的色谱柱中，
ii)使用具有的极性使得在色谱法过程中分析物与固定相吸附平衡的液体洗脱剂洗脱分析物，
iii)在色谱柱的出口侧端检测分析物的成分，获得色谱图，该色谱图显示分析物的不同成分和它取决于单个成分的洗脱时间的定性量，和
iv)鉴定色谱图中与具有最大高度或面积的谱带相比具有低高度或面积的谱带作为分析物中存在杂质的指示。
2.根据权利要求1所述的方法，特征在于聚亚烷基醚是具有可部分或完全醚化的羟基端基的聚乙二醇或聚丙二醇。
3.根据权利要求2所述的方法，特征在于聚亚烷基醚是含有烷氧基端基特别是甲氧基端基的聚乙二醇或聚丙二醇。
4.根据权利要求1所述的方法，特征在于聚亚烷基胺是具有氨基、羟基、烷基和/或芳基端基的脂肪族聚
Figure FDA0002671238320000011
唑啉，其中氨基端基可为部分或完全烷基化的。
5.根据权利要求1至3中至少一项所述的方法，特征在于聚亚烷基醚中的杂质是多元醇，多元醇的平均摩尔质量在待分析的聚亚烷基醚的平均摩尔质量的相同范围内或小于待分析的聚亚烷基醚的平均摩尔质量，优选是亚烷基二元醇和/或二亚烷基二醇或三亚烷基二醇。
6.根据权利要求1或4中至少一项所述的方法，特征在于聚亚烷基胺中的杂质是多元胺，多元胺的平均摩尔质量在待分析的聚亚烷基胺的平均摩尔质量的相同范围内或小于待分析的聚亚烷基胺的平均摩尔质量，优选是亚烷基二胺和/或二亚烷基亚胺二胺或三亚烷基亚胺二胺。
7.根据权利要求1至6中至少一项所述的方法，特征在于整料硅胶被设计为反相并且洗脱剂以这样的量含有水和有机溶剂使得分析物的洗脱作为吸附色谱法进行。
8.根据权利要求7所述的方法，特征在于洗脱剂含有水和乙腈。
9.根据权利要求1至8中至少一项所述的方法，特征在于色谱法是高压液相色谱法。
10.根据权利要求1至9中至少一项所述的方法，特征在于通过光散射检测(ELSD)或通过UV/VIS光谱法进行在色谱柱的出口侧端检测分析物的成分。
11.根据权利要求1至10中至少一项所述的方法，特征在于具有低高度的谱带的高度小于10％，特别是小于5％的具有最高高度的谱带的高度。
12.根据权利要求1至11中至少一项所述的方法的用途，用于聚亚烷基二醇或聚亚烷基胺的品质控制或用于聚亚烷基二醇或聚亚烷基胺的制备性纯化。
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Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006096535A1 (en) * 2005-03-04 2006-09-14 Dow Global Technologies Inc. Method for analyzing activated polyethylene glycol compounds
US20070107499A1 (en) * 2005-10-28 2007-05-17 Shimadzu Corporation Flow path switching valve and high performance liquid chromatograph using the same
WO2009089542A2 (en) * 2008-01-11 2009-07-16 Serina Therapeutics, Inc. Multifunctional forms of polyoxazoline copolymers and drug compositions comprising the same
CN101657479A (zh) * 2007-04-05 2010-02-24 株式会社日本触媒 不饱和（聚）亚烷基二醇醚单体的制造方法和含有（聚）亚烷基二醇链的聚合物的制造方法
CN101778859A (zh) * 2007-06-12 2010-07-14 诺和诺德公司 改良的用于生产核苷酸糖的方法
US20100292515A1 (en) * 2009-03-31 2010-11-18 Nof Corporation Purification method of high-molecular-weight polyethylene glycol compound
US20130276519A1 (en) * 2012-04-20 2013-10-24 Dmitry V. Uborsky Methods of Separating Compounds
CN103974766A (zh) * 2011-09-15 2014-08-06 因思特艾克申有限公司 用于有机分子提纯、表面上具有正离子或质子化脂族残基的吸附剂
US20150044311A1 (en) * 2012-04-23 2015-02-12 Chengdu Baiyu Technology Pharmacy Co., Ltd. Method for extracting and separating ginkgolides
CN104422743A (zh) * 2013-09-04 2015-03-18 广东东阳光药业有限公司 一种抗凝血药物的分离检测方法
US20150177199A1 (en) * 2013-12-19 2015-06-25 Bbs Nanotechnology Ltd. Method and apparatus for characterizing impurity profile of organic materials
CN105092754A (zh) * 2014-05-21 2015-11-25 天津市汉康医药生物技术有限公司 一种利用hplc测定磺酸酯类基因毒性杂质的方法
WO2016149815A1 (en) * 2015-03-20 2016-09-29 Queen's University At Kingston Switchable polysaccharides, methods and uses thereof
CN106970177A (zh) * 2017-06-06 2017-07-21 北京元延医药科技股份有限公司 帕博西尼中间体及其杂质的分析检测方法

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19726151B4 (de) 1997-06-20 2010-02-04 Merck Patent Gmbh Verwendung monolithischer Sorbentien für "Simulated Moving Bed" Trennverfahren
DE19801575A1 (de) 1998-01-19 1999-07-22 Merck Patent Gmbh Verwendung monolithischer Sorbentien für präparative chromatographische Trennverfahren
DE19726164A1 (de) 1997-06-20 1998-12-24 Merck Patent Gmbh Halterung für monolithische Sorbentien
US6372130B1 (en) * 1997-12-05 2002-04-16 Transgenomic, Inc. Non-polar media for polynucleotide separations
EP0985697B1 (en) 1998-03-24 2006-01-04 Nof Corporation Oxirane derivatives and process for producing the same
EP1310789A3 (en) * 1998-04-03 2004-08-04 Symyx Technologies, Inc. Rapid characterization of polymers with temperature control in a mixing zone
CA2643162C (en) * 1999-04-23 2018-01-02 Massachusetts Institute Of Technology Polymer identification, compositional analysis and sequencing, based on property comparison
DE10258491A1 (de) 2002-12-14 2004-07-01 Merck Patent Gmbh Sorbenzien mit einheitlicher Porengröße
DE102004005888A1 (de) 2004-02-05 2005-08-25 Merck Patent Gmbh Vorrichtung und Verfahren zur Kopplung von kapillaren Trennverfahren und Massenspektrometrie
DE502004003480D1 (de) 2004-07-29 2007-05-24 Qiagen Gmbh Monolithische Formkörper zur Aufreinigung und Trennung von Biopolymeren
WO2010006282A2 (en) * 2008-07-10 2010-01-14 Serina Therapeutics, Inc. Polyoxazolines with inert terminating groups, polyoxazolines prepared from protected initiating groups and related compounds

Patent Citations (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006096535A1 (en) * 2005-03-04 2006-09-14 Dow Global Technologies Inc. Method for analyzing activated polyethylene glycol compounds
US20070107499A1 (en) * 2005-10-28 2007-05-17 Shimadzu Corporation Flow path switching valve and high performance liquid chromatograph using the same
CN101657479A (zh) * 2007-04-05 2010-02-24 株式会社日本触媒 不饱和（聚）亚烷基二醇醚单体的制造方法和含有（聚）亚烷基二醇链的聚合物的制造方法
CN101778859A (zh) * 2007-06-12 2010-07-14 诺和诺德公司 改良的用于生产核苷酸糖的方法
US20110009594A1 (en) * 2008-01-11 2011-01-13 Serina Therapeutics, Inc. Multifunctional forms of polyoxazoline copolymers and drug compositions comprising the same
WO2009089542A2 (en) * 2008-01-11 2009-07-16 Serina Therapeutics, Inc. Multifunctional forms of polyoxazoline copolymers and drug compositions comprising the same
US20100292515A1 (en) * 2009-03-31 2010-11-18 Nof Corporation Purification method of high-molecular-weight polyethylene glycol compound
CN103974766A (zh) * 2011-09-15 2014-08-06 因思特艾克申有限公司 用于有机分子提纯、表面上具有正离子或质子化脂族残基的吸附剂
US20130276519A1 (en) * 2012-04-20 2013-10-24 Dmitry V. Uborsky Methods of Separating Compounds
US20150044311A1 (en) * 2012-04-23 2015-02-12 Chengdu Baiyu Technology Pharmacy Co., Ltd. Method for extracting and separating ginkgolides
CN104422743A (zh) * 2013-09-04 2015-03-18 广东东阳光药业有限公司 一种抗凝血药物的分离检测方法
US20150177199A1 (en) * 2013-12-19 2015-06-25 Bbs Nanotechnology Ltd. Method and apparatus for characterizing impurity profile of organic materials
CN105092754A (zh) * 2014-05-21 2015-11-25 天津市汉康医药生物技术有限公司 一种利用hplc测定磺酸酯类基因毒性杂质的方法
WO2016149815A1 (en) * 2015-03-20 2016-09-29 Queen's University At Kingston Switchable polysaccharides, methods and uses thereof
CN106970177A (zh) * 2017-06-06 2017-07-21 北京元延医药科技股份有限公司 帕博西尼中间体及其杂质的分析检测方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ANJA BAUMGAERTEL: ""Characterization of poly(2-oxazoline) homo- and copolymers by liquid chromatography at critical conditions"", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A》 *
BHAJENDRA N. BARMAN: ""Identification and quantification of polyethylene glycol types in polyethylene glycol methyl ether and polyethylene glycol vinyl ether"", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A》 *
DEAN LEE: ""Identification and quantitation of trace impurities in fatty alcohol ethoxylates using HPLC and MALDI-TOF mass spectrometry"", 《ANALYTICA CHIMICA ACTA》 *

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