CN112159405B - 吡啶并嘧啶酮类化合物及其应用 - Google Patents

吡啶并嘧啶酮类化合物及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了具有通式(II)所示结构的吡啶并嘧啶酮类化合物及其应用。研究证明，本发明提供的化合物可以有效抑制KRAS G12C突变。KRAS突变在肿瘤中占比很大，且目前没有获得批准药物对其进行治疗，本发明提供的化合物有潜力成为携带KRAS G12C突变的恶性肿瘤(尤其是非小细胞肺癌(NSCLC)和直结肠癌)的治疗药物，有较大的应用价值。
Figure DDA0002750625880000011

Description

吡啶并嘧啶酮类化合物及其应用
技术领域
本发明涉及化学医药技术领域，具体涉及一种吡啶并嘧啶酮类化合物及其应用。
背景技术
Ras蛋白属于小GTP酶(small GTPase)蛋白家族的一员，其在调节细胞生长、增殖和分化中起着至关重要的作用。在细胞内，RAS蛋白在失活和激活状态之间转变，当RAS与鸟苷二磷酸(GDP)结合时，处于失活状态，当它与鸟苷三磷酸(GTP)结合时，处于激活状态(Cell 170:17-33,2017)，并且可以激活多条下游信号通路，其中包括RAF-MEK-ERK(RAF-MAPK/ERK kinase-extracellular signal-regulated kinase)(Cell 74:205–214,1993)，PI3K-AKT-mTOR(phosphoinositide 3-kinase-AKT-mechanistic target ofrapamycin)(Nature 370:527–532,1994)和RALGDS-RAL(RAL guanine nucleotide-dissociationstimulator-RAL)(EMBO J 15:5256–5267,1996)。RAS在失活与激活状态之间的转换受到两类因子的调节，一类是鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)，这类蛋白催化RAS与GTP的结合，从而促进RAS的激活。另一类是GTP酶激活蛋白(GAP)，这类蛋白能够促进与RAS结合的GTP水解成为GDP，从而抑制RAS的活性(Nature 575：217–223，2019)。
RAS蛋白家族由KRAS，HRAS和NRAS 3个成员组成。约25％的人类恶性肿瘤与RAS基因突变有关，全球每年因此而死亡的人数达到数百万人。在RAS蛋白家族中，KRAS是最常见的突变体，占总突变的85％左右，特别在实体肿瘤中尤其常见，其次是NRAS(12％)和HRAS(3％)(Cell 170:17-33,2017)。
在人类癌症中，KRAS基因突变出现在接近95％的胰腺癌中，45％的结肠癌中和35％的肺癌中。它也会在胆管癌、***、膀胱癌、肝癌和乳腺癌等癌症类型中出现(C&EN94.23:28-33,2016)。KRAS基因突变大多数出现在密码子(codon)12、13和61上。结构学研究表明，这些基因突变大多干扰KRAS水解GTP的能力。例如，最常见的KRAS G12C突变会导致蛋白质第12位从甘氨酸转换为半胱氨酸，影响GAP蛋白与KRAS的结合，从而抑制GAP刺激的GTP水解。由于GTP酶水解能力的下降，更多的KRAS蛋白与GTP结合，导致处于激活状态的KRAS逐渐积累，与肿瘤不良预后和治疗抗药性有关。(Nat.Rev.Drug Discov 13:828–851,2014)。
KRAS G12C的特定突变约占非小细胞肺癌的13％(美国每年约14，000例新病例)，结直肠癌的3％至5％(美国每年约5，000例新病例)，以及众多其他实体肿瘤的1％至2％。
在美国，每年约有30，000名患者被诊断为KRAS G12C驱动的癌症。KRAS G12C突变构成了全球年发病率超过10万人的患者群体。
鉴于此，开发以KRAS为靶点的药物对于治疗癌症具有非常重要的意义。
靶向KRAS的药物大概有以下5种策略(Nat Rev Drug Discov 15:771-785,2016)：第一种为直接结合KRAS分子，破坏其与鸟嘌呤核苷酸交换因子的相互作用(如化合物SML-8-73-1和ARS-853等)或者破坏其与RAF丝氨酸苏氨酸激酶效应分子的相互作用(如化合物ARS-1620等)；第二种为调控KRAS蛋白在细胞膜的定位(farnesyltransferas inhibitors和PDEd等)；第三种为靶向KRAS效应分子(RAF和PI3K等)；第四种为鉴定合成致死靶点(TBK1、WT1和CDK4等)；第五种为靶向癌细胞中KRAS调控的代谢及免疫过程。
目前至少有5种KRAS调节剂处于临床开发阶段，其中AMG 510(ClinicalTrials.gov Identifier:NCT03600883)、MRTX84(ClinicalTrials.govIdentifier:NCT03785249)以及ARS-324(ClinicalTrials.gov Identifier:NCT04006301)这三种候选药物仅靶向KRAS G12C突变体，而抑制剂BI1701963(ClinicalTrials.govIdentifier:NCT04111458)是首个泛KRAS(pan-KRAS)抑制剂。BI1701963靶向的是SOS1蛋白，该蛋白可促进KRAS的激活。mRNA-5671(ClinicalTrials.gov Identifier:NCT03948763)是一种mRNA癌症疫苗，其能够在体内制造抗原，以启动T细胞寻找和破坏表达四种关键KRAS突变体(G12C、G12D、G12V和G13C)的细胞。
AMG 510的一期临床试验结果显示，在可评估的23例非小细胞肺癌(NSCLC)患者中有11例(48％)获得部分缓解(PR)、11例(48％)疾病稳定(SD)、1例(4％)病情进展(PD)，即客观缓解率(ORR)为48％、疾病控制率(DCR)为96％。此外，在13例接受最高剂量960mg治疗的可评估患者中，有7例(54％)获得PR、6例(46％)为SD，即ORR为54％、DCR达到100％。安全性方面，AMG 510耐受性良好，主要不良反应为食欲下降、腹泻、乏力、头痛、咳嗽、潮热和恶心，没有发现剂量限制毒性(DLT)和与药物有关的4级以上不良反应(WCLC 2019Congress)。
MRTX849一期临床研究中，12例既往接受过全身治疗的KRAS G12C突变晚期实体瘤患者(6例NSCLC，4例结直肠癌，2例阑尾癌)。在NSCLC患者中，ORR为50％，DCR为100％。结直肠癌患者中，ORR为25％，DCR为75％。2例阑尾癌患者都达到了SD。从安全性数据来看，接受MRTX849的最常见不良反应为腹泻、恶心、呕吐、AST升高等，且不良反应大多温和可控(AACR-NCI-EORTC 2019Congress)。
除了单药治疗，KRAS G12C抑制剂也可以和其它药物联合使用(Nature 575：217–223，2019)。据报导，在小鼠试验中单独使用AMG 510或者单独使用PD-1抗体pembrolizumab，只有10％的小鼠可以让肿瘤完全消失并且长期生存；而AMG 510联合pembrolizumab，可以让90％的小鼠肿瘤完全消失且疗效长久维持。此外，被AMG 510联合pembrolizumab治愈的小鼠还拥有了排斥KRAS G12D肿瘤的能力，表明这种联合治疗可能会驱动一种获得性免疫反应。除PD-1抗体，AMG 510与SHP2磷酸酶抑制剂(与KRAS的激活-失活机制有关)联合治疗也即将开展临床。临床前研究还证实，KRAS G12C抑制剂在体外跟MAPK和AKT信号通路抑制剂及化疗药物carboplatin联合使用可以达到增强肿瘤杀伤和克服耐药等作用。
发明内容
本发明提供了一类新的吡啶并嘧啶酮类化合物，该类化合物能够有效抑制KRASG12C突变，有潜力成为用作携带KRAS G12C突变的恶性肿瘤的治疗药物。
具技术方案如下：
具有式(Ⅰ)所示结构的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子：
Figure BDA0002750625860000031
其中：
Q选自：O，S，S(O)，S(O)2，N(R12)，C(O)，(CR13R14)n，C3-C8环烷基，乙烯基，乙炔基；
W选自：O，S，S(O)，S(O)2，N(R12)，或不存在；
G选自：H，卤素，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基，C6-C10芳基，3-8元杂环基，-C(O)N(R)2，-C(O)R；
并且，当W为不存在，Q为O或N(R12)时，G不为H；
Q和W不能同时为杂原子直接相互连接；
n选自：1，2或3；
X1，X2分别独立选自：N或CH；
X3，X4分别独立选自：N或CR11；
R1选自：卤素；
R2选自：H，卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基；
R3，各R11分别独立选自：H，卤素，-OR，-SR，-N(R)2，硝基，氰基，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基；或者，当Q选自：O，S，N(R12)时，R3与-Q-W-G和与其相连的C原子一起组成5-7元杂环基或者杂芳基；
R4，R5分别独立选自：H，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C8环烷基，氰基，羟基取代的C1-C6烷基；
R6选自：H，卤素，-OR，硝基，氰基，-N(R)2，C1-C6烷基，-C(O)N(R)2，-C(O)R；
R7，R8分别独立选自：H，C1-C6烷基，氰基取代的C1-C6烷基；
R9选自：H，卤素；
R10选自：H，卤素，C1-C4烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷基，氨基取代的C1-C4烷基,C1-C3烷基胺基取代的C1-C4烷基，3-8元杂环基取代的C1-C4烷基；或者，R9与R10相连形成一个碳碳键；
各R12分别独立选自：H，C1-C6烷基；
R13，R14分别独立选自：H，卤素，C1-C6烷基；
各R分别独立选自：H，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基,C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基。
在其中一些实施例中，Q选自：S，S(O)，S(O)2，
W选自：不存在；
G选自：H、C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基，C6-C10芳基，3-8元杂环基，-C(O)N(R)2，-C(O)R。
在其中一些实施例中，Q选自：S，S(O)，S(O)2，
W选自：不存在；
G选自：C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基,C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基，C6-C10芳基，3-8元杂环基，-C(O)N(R)2，-C(O)R。
在其中一些实施例中，Q选自：S，S(O)，S(O)2，
W选自：不存在；
G选自：C1-C6烷基，环丙基，环丙基取代的C1-C3烷基，3-6元杂环基，C6-C10芳基，-C(O)R；其中，R选自：C1-C6烷基。
在其中一些实施例中，Q选自：C(O)，(CR13R14)n，C3-C8环烷基，乙烯基，乙炔基；
n选自：1，2或3；
W选自：O，S，S(O)，S(O)2，N(R12)，或不存在；
G选自：H，卤素，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基，C6-C10芳基，3-8元杂环基，-C(O)N(R)2，-C(O)R。
在其中一些实施例中，Q选自：C(O)，(CR13R14)n,C3-C8环烷基，乙烯基，乙炔基；
n选自：1或2；
W选自：O，S，S(O)，S(O)2，N(R12)，或不存在；
G选自：H,卤素，C1-C6烷基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基取代的C1-C3烷基，卤素取代的C1-C3烷基，羟基取代的C1-C3烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C3烷基，氨基取代的C1-C3烷基，C1-C3烷基胺基取代的C1-C3烷基，C6-C10芳基，3-6元杂环基，-C(O)N(R)2，-C(O)R；其中，R选自：H，C1-C6烷基。
在其中一些实施例中，Q选自：O，N(R12)；
W选自：不存在；
G选自：C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基,C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基，C6-C10芳基，3-8元杂环基，-C(O)N(R)2，-C(O)R。
在其中一些实施例中，Q选自：O，N(R12)；
W选自：不存在；
G选自：C1-C6烷基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基取代的C1-C3烷基，卤素取代的C1-C3烷基，羟基取代的C1-C3烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C3烷基，氨基取代的C1-C3烷基,C6-C10芳基，3-6元杂环基，-C(O)N(R)2，-C(O)R；其中，R选自：H，C1-C6烷基。
具有式(ⅠI)所示结构的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子：
Figure BDA0002750625860000061
其中：
Q和R3之间的虚线表示Q与R3之间的化学键可选单键或双键；
Q选自：O，S；
R3选自：N，CR15，O，S，NR15，CHR15，C(R15)2；
Q，R3和与其相连的C原子一起组成5-7元杂环基或者杂芳基；
X1，X2分别独立选自：N或CH；
X3，X4分别独立选自：N或CR11；
R1选自：卤素；
R2选自：H，卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基；
R4，R5分别独立选自：H，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C8环烷基，氰基，羟基取代的C1-C6烷基；
R6选自：H，卤素，-OR，硝基，氰基，-N(R)2，C1-C6烷基，-C(O)N(R)2，-C(O)R；
R7，R8分别独立选自：H，C1-C6烷基，氰基取代的C1-C6烷基；
R9选自：H，卤素；
R10选自：H，卤素，C1-C4烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷基，氨基取代的C1-C4烷基，C1-C3烷基胺基取代的C1-C4烷基，3-8元杂环基取代的C1-C4烷基；或者，R9与R10相连形成一个碳碳键；
各R11分别独立选自：H，卤素，-OR，-SR，-N(R)2，硝基，氰基，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基；
各R15分别独立选自：H，卤素，OR，-SR，-N(R)2，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基,C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基；
各R分别独立选自：H，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基。
在其中一些实施例中，所述吡啶并嘧啶酮类化合物具有式(ⅠII)所示结构：
Figure BDA0002750625860000071
其中，Q选自：O，S；
R3选自：N，CR15。
在其中一些实施例中，R3选自：CH。
在其中一些实施例中，所述吡啶并嘧啶酮类化合物具有式(ⅠV)所示结构：
Figure BDA0002750625860000072
其中，Q选自：O，S；
R3选自：O，S，NR15，CHR15，C(R15)2；
n选自：1或者2。
在其中一些实施例中，R3选自：O，S，CH2。
在其中一些实施例中，Q、R3和与其相连的C原子一起组成5-6元杂环基或者杂芳基；所述5-6元杂环基或者杂芳基和与其相并的六元芳基共同组成如下结构：
Figure BDA0002750625860000081
在其中一些实施例中，所述5-6元杂环基或者杂芳基和与其相并的六元芳基共同组成如下结构：
Figure BDA0002750625860000082
在其中一些实施例中，X1为N，X2为CH。
在其中一些实施例中，X1为CH，X2为CH，R4为氰基，R5为C1-C6烷基。
在其中一些实施例中，X1为N，X2为N，R4为异丙基，R5为C1-C6烷基。
在其中一些实施例中，X3，X4都为CR11；其中，R11选自：H，卤素，OR，R选自：H，C1-C3烷基。
在其中一些实施例中，X3选自：CH，COH，CF；X4选自：CH，CF。
在其中一些实施例中，R1选自：F，Cl。
在其中一些实施例中，R2选自：F，Cl。
在其中一些实施例中，R4，R5分别独立选自：H，C1-C3烷基，C3-C6环烷基，氰基，羟基取代的C1-C3烷基。
在其中一些实施例中，R4选自：甲基，异丙基，氰基；R5选自：异丙基。
在其中一些实施例中，R6选自：H，C1-C3烷基。
在其中一些实施例中，R7，R8分别独立选自：H，C1-C3烷基，氰基取代的C1-C3烷基。
在其中一些实施例中，R7选自：甲基；R8选自：H，甲基，氰基甲基。
在其中一些实施例中，R9，R10分别独立选自：H，卤素。
在其中一些实施例中，R15选自：H。
在其中一些实施例中，X1，X2分别独立选自：N或CH；
X3，X4分别独立选自：N或CR11；
R1，R2分别独立选自：F，Cl；
R4，R5分别独立选自：C1-C6烷基，C2-C6烯基，C3-C8环烷基，氰基；
R6选自：H，卤素，OR，C1-C6烷基；
R7选自：C1-C6烷基；
R8选自：H，C1-C6烷基，氰基取代的C1-C6烷基；
R9选自：H；
R10选自：H；
各R11分别独立选自：H，卤素，OR，-SR，-N(R)2，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基；
各R分别独立选自：H，C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基。
在其中一些实施例中，所述吡啶并嘧啶酮类化合物选自如下化合物：
Figure BDA0002750625860000091
Figure BDA0002750625860000101
Figure BDA0002750625860000111
Figure BDA0002750625860000121
Figure BDA0002750625860000131
Figure BDA0002750625860000141
Figure BDA0002750625860000151
Figure BDA0002750625860000161
Figure BDA0002750625860000171
本发明还提供了上述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子的应用。
具体技术方案如下：
上述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子在制备突变型KRAS抑制剂中的应用。
上述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子在制备KRAS G12C抑制剂中的应用。
上述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子在制备预防和/或***的药物中的应用。
在其中一些实施例中，所述肿瘤为携带KRAS G12C基因突变的血液肿瘤或实体肿瘤。
在其中一些实施例中，所述肿瘤为：非小细胞肺癌、小细胞肺癌、淋巴癌、食管癌、卵巢癌、黑色素瘤、子***、尿路上皮癌、胰腺癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、胆管癌、白血病、黑色素瘤、结肠癌、直肠癌、子宫内膜癌或脑胶质瘤。
本发明还提供了一种突变型KRAS抑制剂。
具体技术方案如下：
一种突变型KRAS抑制剂，其活性成分包括有上述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子。
本发明还提供了一种预防和/或***的药用组合物。
具体技术方案如下：
一种预防和/或***的药物组合物，包括活性成分以及药学上可接受的载体，所述活性成分包括有上述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子。
本发明提供的吡啶并嘧啶酮类化合物能够有效抑制KRAS G12C突变，对KRAS G12C突变的肿瘤有很强的抗细胞增殖活性，有潜力用于预防或者治疗携带KRAS G12C突变的恶性肿瘤，尤其是非小细胞肺癌(NSCLC)和直结肠癌等的治疗，有较大的应用价值。
说明书附图
图1为化合物69、70-1、73、73-1、74-1、89、89-1、90和90-1的大鼠灌胃给药(20mg/kg)的平均药时曲线图。
图2为化合物AMG510，91-1、97、102、103、103-1、104、104-1和122的大鼠灌胃给药(20mg/kg)的平均药时曲线图。
图3为化合物73-1和化合物90-1在H358移植肿瘤模型中的抗肿瘤活性。
图4为化合物73-1在H358移植肿瘤模型中抗肿瘤的量效活性。
图5为化合物73-1在MIAPaca2 T2移植肿瘤模型中的抗肿瘤活性。
具体实施方式
本发明所述化合物中，当任何变量(例如R等)在任何组分中出现超过一次，则其每次出现的定义独立于其它每次出现的定义。同样，允许取代基及变量的组合，只要这种组合使化合物稳定。自取代基划入环***的线表示所指的键可连接到任何能取代的环原子上。如果环***为多环，其意味着这种键仅连接到邻近环的任何适当的碳原子上。要理解本领域普通技术人员可选择本发明化合物的取代基及取代型式而提供化学上稳定的并可通过本领域技术和下列提出的方法自可容易获得的原料容易的合成的化合物。如果取代基自身被超过一个基团取代，应理解这些基团可在相同碳原子上或不同碳原子上，只要使结构稳定。
本文所用术语“烷基”意指包括具有特定碳原子数目的支链的和直链的饱和脂肪烃基。例如，“C1-C6烷基”中“C1-C6”的定义包括以直链或支链排列的具有1、2、3、4、5或6个碳原子的基团。例如，“C1-C6烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基。
术语“环烷基”指具有特定碳原子数目的单环饱和脂肪烃基。例如“环烷基”包括环丙基、环丁基、环戊基或环己基等。
术语“烷氧基”指烷基与氧直接连接的基团，即具有-O-烷基结构的基团，如-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-O-CH2CH(CH3)2、-OCH2CH2CH2CH3、-O-CH(CH3)2等。
术语“杂环基”为饱和或部分不饱和的单环或多环环状取代基，其中一个或多个环原子选自N、O或S(O)m(其中m是0-2的整数)的杂原子，其余环原子为碳，例如：吗啉基、哌啶基、四氢吡咯基、吡咯烷基、二氢咪唑基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢***基、二氢氮杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基等，及其N-氧化物，杂环取代基的连接可通过碳原子或通过杂原子实现。
术语“杂芳基”指含有1个或多个选自O、N或S的杂原子的芳香环，本发明范围内的杂芳基包括但不限于：喹啉基、吡唑基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三氮唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、哒嗪基；“杂芳基”也理解为包括任何含有氮的杂芳基的N-氧化物衍生物。
术语“取代的”是指用指定取代基的基团置换特定结构中的氢基。
正如本领域技术人员所理解的，本文中所用“卤素”(“halo”)或“卤”意指氯、氟、溴和碘。
除非另有定义，烷基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基取代基可为未被取代的或取代的。例如，C1-C6烷基可被一个、两个或三个选自OH、卤素、烷氧基、二烷基氨基或杂环基例如吗啉基、哌啶基等的取代基取代。
本发明包括式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物的游离形式，也包括其药学上可接受的盐及立体异构体。本文中一些特定的示例性化合物为胺类化合物的质子化了的盐。术语“游离形式”指以非盐形式的胺类化合物。包括在内的药学上可接受盐不仅包括本文所述特定化合物的示例性盐，也包括所有式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物游离形式的典型的药学上可接受的盐。可使用本领域已知技术分离所述化合物特定盐的游离形式。例如，可通过用适当的碱稀水溶液例如NaOH稀水溶液、碳酸钾稀水溶液、稀氨水及碳酸氢钠稀水溶液处理该盐使游离形式再生。游离形式在某些物理性质例如在极性溶剂中溶解度上与其各自盐形式多少有些区别，但是为发明的目的这种酸盐及碱盐在其它药学方面与其各自游离形式相当。
可通过常规化学方法自含有碱性部分或酸性部分的本发明化合物合成本发明的药学上可接受的盐。通常，通过离子交换色谱或通过游离碱和化学计算量或过量的所需盐形式的无机或有机酸在适当溶剂或多种溶剂的组合中反应制备碱性化合物的盐。类似的，通过和适当的无机或有机碱反应形成酸性化合物的盐。
因此，本发明化合物的药学上可接受的盐包括通过碱性本发明化合物和无机或有机酸反应形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规的无毒盐包括得自无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的盐，也包括自有机酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2一乙酰氧基一苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸等制备的盐。
如果本发明化合物为酸性的，则适当的“药学上可接受的盐”指通过药学上可接受的无毒碱包括无机碱及有机碱制备的盐.得自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。得自药学上可接受的有机无毒碱的盐，所述碱包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，取代的胺包括天然存在的取代胺、环状胺及碱性离子交换树脂例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N'－二苄基乙二胺、二乙胺、2一二乙基氨基乙醇、2一二甲基氨基乙醇、氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N一乙基吗啉、N一乙基哌啶、葡萄糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、羟钴胺、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪,哌啶、呱咤、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。
Berg等，“Pharmaceutical Salts，”J.Pharm.Sci.’1977：66：1－19更详细描述了上文所述药学上可接受的盐及其它典型的药学上可接受的盐的制备。
由于在生理条件下化合物中脱质子化的酸性部分例如羧基可为阴离子的，而这种带有的电荷然后可被内部带有阳离子的质子化了的或烷基化的碱性部分例如四价氮原子平衡抵消，所以应注意本发明化合物是潜在的内盐或两性离子。
在一个实施方案中，本申请提供了一种利用具有式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)所示结构的化合物及其药学可接受的盐治疗人或其它哺乳动物肿瘤等过渡增殖性疾病或症状。
在一个实施方案中，本申请的化合物及其药学可接受的盐可以用于治疗或控制非小细胞肺癌、小细胞肺癌、淋巴癌、食管癌、卵巢癌、黑色素瘤、子***、尿路上皮癌、胰腺癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、胆管癌、白血病、黑色素瘤、结肠癌、直肠癌、子宫内膜癌或脑胶质瘤。
药物代谢物及前药：本申请所涉及的化合物及其药学可接受的盐的代谢产物，以及可以在体内转变为本申请所涉及的化合物及其药学可接受的盐的结构的前药，也包含在本申请的权利要求中。
联合用药：式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物可以与已知的治疗或改进相似病状的其它药物联用。联合给药时，原来药物的给药方式&剂量保持不变，而同时或随后服用式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物。当式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物与其它一种或几种药物同时服用时，优选使用同时含有一种或几种已知药物和式I、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物的药用组合物。药物联用也包括在重叠的时间段服用式Ⅰ化合物与其它一种或几种已知药物。当式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物与其它一种或几种药物进行药物联用时，式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物或已知药物的剂量可能比它们单独用药时的剂量较低。
可以与式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物进行药物联用的药物或活性成分包括但不局限为：
***受体调节剂、雄激素受体调节剂、视网膜样受体调节剂、细胞毒素/细胞抑制剂、抗增殖剂、蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白激酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、血管生成抑制剂、细胞增殖及生存信号抑制剂、干扰细胞周期关卡的药物和细胞凋亡诱导剂，细胞毒类药物、酪氨酸蛋白抑制剂、EGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、丝氨酸/苏氨酸蛋白抑制剂、Bcr-Abl抑制剂，c-Kit抑制剂,Met抑制剂,Raf抑制剂,MEK抑制剂,MMP抑制剂,拓扑异构酶抑制剂、组氨酸去乙酰化酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂、CDK抑制剂，Bcl-2家族蛋白抑制剂，MDM2家族蛋白抑制剂、IAP家族蛋白抑制剂、STAT家族蛋白抑制剂、PI3K抑制剂、AKT抑制剂、整联蛋白阻滞剂、干扰素-α、白介素-12、COX-2抑制剂、p53、p53激活剂、VEGF抗体、EGF抗体、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)抗体、程序性细胞死亡1(PD-1)抗体，细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)抗体等。
在一个实施方案中，可以与式Ⅰ、式(II)、式(III)或者式(IV)化合物进行药物联用的药物或活性成分包括但不局限为：阿地白介素、阿仑膦酸、干扰素、阿曲诺英、别嘌醇、别嘌醇钠、帕洛诺司琼盐酸盐、六甲蜜胺、氨基格鲁米特、氨磷汀、氨柔比星、安丫啶、阿纳托唑、多拉司琼、aranesp、arglabin、三氧化二砷、阿诺新、5-氮胞苷、硫唑嘌呤、卡介苗或tice卡介苗、贝他定、醋酸倍他米松、倍他米松磷酸钠制剂、贝沙罗汀、硫酸博来霉素、溴尿甘、bortezomib、白消安、降钙素、阿来佐单抗注射剂、卡培他滨、卡铂、康士得、cefesone、西莫白介素、柔红霉素、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、克拉屈滨、氯屈磷酸、环磷酰胺、阿糖胞昔、达卡巴嗪、放线菌素D、柔红霉素脂质体、***、磷酸***、戊酸***、地尼白介素2、狄波美、地洛瑞林、地拉佐生、己烯雌酚、大扶康、多西他奇、去氧氟尿苷、阿霉素、屈***酚、钦-166-壳聚糖复合物、eligard、拉布立酶、盐酸表柔比星、阿瑞吡坦、表阿霉素、阿法依伯汀、红细胞生成素、依铂、左旋咪唑片、***制剂、17-β-***、雌莫司汀磷酸钠、炔雌醇、氨磷汀、羟磷酸、凡毕复、依托泊甙、法倔唑、他莫昔芬制剂、非格司亭、非那司提、非雷司替、氟尿苷、氟康唑、氟达拉滨、5-氟脱氧尿嘧啶核苷一磷酸盐、5-氟尿嘧啶、氟***、氟他胺、福麦斯坦、1-β-D-阿糖呋喃糖胞噻啶-5’-硬脂酰磷酸酯、福莫司汀、氟维司群、丙种球蛋白、吉西他滨、吉妥单抗、甲磺酸伊马替尼、卡氮芥糯米纸胶囊剂、戈舍瑞林、盐酸格拉尼西隆、组氨瑞林、和美新、氢化可的松、赤型-羟基壬基腺嘌呤、羟基脲、替坦异贝莫单抗、伊达比星、异环磷酰胺、干扰素α、干扰素-α2、干扰素α-2A、干扰素α-2B、干扰素α-nl、干扰素α-n3、干扰素β、干扰素γ-la、白细胞介素-2、内含子A、易瑞沙、依立替康、凯特瑞、硫酸香菇多糖、来曲唑、甲酰四氢叶酸、亮丙瑞林、亮丙瑞林醋酸盐、左旋四咪唑、左旋亚叶酸钙盐、左甲状腺素钠、左甲状腺素钠制剂、洛莫司汀、氯尼达明、屈***酚、氮芥、甲钴胺、甲羟孕酮醋酸酯、醋酸甲地孕酮、美法仑、酯化***、6-琉基嘌呤、美司钠、氨甲蝶呤、氨基乙酰丙酸甲酯、米替福新、美满霉素、丝裂霉素C、米托坦、米托葱醌、曲洛司坦、柠檬酸阿霉素脂质体、奈达铂、聚乙二醇化非格司亭、奥普瑞白介素、neupogen、尼鲁米特、三苯氧胺、NSC-631570、重组人白细胞介素1-β、奥曲肽、盐酸奥丹西隆、去氢氢化可的松口服溶液剂、奥沙利铂、紫杉醇、***磷酸钠制剂、培门冬酶、派罗欣、喷司他丁、溶链菌制剂、盐酸匹鲁卡品、毗柔比星、普卡霉素、卟吩姆钠、泼尼莫司汀、司替***龙、***、倍美力、丙卡巴脐、重组人类红细胞生成素、雷替曲塞、利比、依替膦酸铼-186、美罗华、力度伸-A、罗莫肽、盐酸毛果芸香碱片剂、奥曲肽、沙莫司亭、司莫司汀、西佐喃、索布佐生、唬钠甲强龙、帕福斯酸、干细胞治疗、链佐星、氯化锶-89、左旋甲状腺素钠、他莫昔芬、坦舒洛辛、他索那明、tastolactone、泰索帝、替西硫津、替莫唑胺、替尼泊苷、丙酸睾酮、***、硫鸟嘌呤、噻替哌、促甲状腺激素、替鲁膦酸、拓扑替康、托瑞米芬、托西莫单抗、曲妥珠单抗、曲奥舒凡、维A酸、甲氨喋呤片剂、三甲基密胺、三甲曲沙、乙酸曲普瑞林、双羟萘酸曲普瑞林、优福定、尿苷、戊柔比星、维司力农、长春碱、长春新碱、长春酰胺、长春瑞滨、维鲁利秦、右旋丙亚胺、净司他丁斯酯、枢复宁、紫杉醇蛋白质稳定制剂、acolbifene、干扰素r-lb、affinitak、氨基喋呤、阿佐昔芬、asoprisnil、阿他美坦、阿曲生坦、BAY43-9006、阿瓦斯丁、CCI-779、CDC-501、西乐葆、西妥昔单抗、克立那托、环丙孕酮醋酸酯、地西他滨、DN-101、阿霉素-MTC、dSLIM、度他雄胺、edotecarin、依氟鸟氨酸、依喜替康、芬维A胺、组胺二盐酸盐、组氨瑞林水凝胶植入物、钬-166DOTMP、伊班膦酸、干扰素γ、内含子-PEG、ixabepilone、匙孔形血蓝蛋白、L-651582、兰乐肽、拉索昔芬、libra、lonafamib、米泼昔芬、米诺屈酸酯、MS-209、脂质体MTP-PE、MX-6、那法瑞林、奈莫柔比星、新伐司他、诺拉曲特、奥利默森、onco-TCS、osidem、紫杉醇聚谷氨酸酯、帛米酸钠、PN-401、QS-21、夸西洋、R-1549、雷洛昔芬、豹蛙酶、13-顺维A酸、沙铂、西奥骨化醇、T-138067、tarceva、二十二碳六烯酸紫杉醇、胸腺素αl、嘎唑呋林、tipifarnib、替拉扎明、TLK-286、托瑞米芬、反式MID-lo7R、伐司朴达、伐普肽、vatalanib、维替泊芬、长春氟宁、Z-100和唑来麟酸或它们的组合。
合成方法：除在文献中已知的或在实验程序中例证的标准方法外，可采用如下合成方案(方案1-10)中的方法制备本发明化合物。结合下述的合成方案，能够对本发明中所述的化合物以及合成方法进行更好的理解。所述的合成方案描述了可以用于制备本发明中所述的化合物的方法，所述的方法仅仅是为说明目的的说明性方案描述，并不构成对本发明所具有的范围的限制。
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Figure BDA0002750625860000251
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Figure BDA0002750625860000321
以下为具体实施例：
实施例1：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物1)的制备(按照方案一线路制备)
步骤1a:4-甲基-3-硝基-2-异丙烯基吡啶(化合物0102-1)的制备:氮气保护下，2-氯-4-甲基-3-硝基吡啶(10.0克，58.0毫摩尔，1.0当量)，异丙烯基硼酸频那醇酯(10.7克，64.0毫摩尔，1.1当量)，碳酸钾(16.0克，116.0毫摩尔，2.0当量)和二(三苯基膦)二氯化钯(1.0克，1.45毫摩尔，0.025当量)的N,N-二甲基甲酰胺/水＝10/1(150毫升)的混合物92℃下搅拌过夜。冷却到室温后，混合物倒入水中，加入乙酸乙酯萃取。有机相用2摩尔每升的盐酸洗涤，往水相中加入氢氧化钠调节pH>8，加入乙酸乙酯萃取。有机相用无水硫酸钠干燥、减压浓缩得到黄色油状物4-甲基-3-硝基-2-异丙烯基吡啶(9.0克，收率：90.0％)。MS(ES+):m/z＝179(M+H)+。
步骤1b:2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺(化合物0103-1)的制备:氢气条件下，4-甲基-3-硝基-2-异丙烯基吡啶(0102-1)(9.0克，50.6毫摩尔，1.0当量)和氢氧化钯碳(900毫克，10％质量比)的甲醇(80毫升)混合物室温搅拌过夜。将反应液过滤，滤液减压浓缩得到黄色油状物2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺(8.5克，收率：94.4％)。MS(ES+):m/z＝151(M+H)+。
步骤1c:2,6-二氯-5-氟烟酰胺(化合物0108-1)的制备:干燥条件下，2,6-二氯-5-氟烟酸(0107-1)(10.0克，48.0毫摩尔，1.0当量)的氯化亚砜(30毫升)溶液回流3小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(50毫升)，冰水浴下，将溶液滴加到氨水溶液中。加完后，将混合物搅拌30分钟。加入水，将混合物过滤，滤饼用水洗，真空干燥得白色固体2,6-二氯-5-氟烟酰胺(6.1克，收率：61.0％)。MS(ES+):m/z＝209(M+H)+。
步骤1d:2,6-二氯-5-氟-N-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酰基)烟酰胺(化合物0109-1)的制备:氮气保护下，2,6-二氯-5-氟烟酰胺(0108-1)(2.0克，10.0毫摩尔，1.0当量)和草酰氯(2.5克，20.0毫摩尔，2.0当量)的四氢呋喃(40毫升)混合物75℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，冰水浴下，滴加2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺(0103-1)(1.8克，12.0毫摩尔，1.2当量)的四氢呋喃溶液(15毫升)。加完后，混合物搅拌30分钟。加入乙酸乙酯，将混合物过滤，滤液用碳酸钠水溶液洗、水洗、饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗产品2,6-二氯-5-氟-N-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酰基)烟酰胺，该产品不需要进一步纯化直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝385(M+H)+。
步骤1e:7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物0110-1)的制备:在氮气保护，冰水浴下，向2,6-二氯-5-氟-N-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酰基)烟酰胺(化合物0109-1)(3.2克，8.3毫摩尔，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50毫升)溶液分批加入60％氢化钠(1.0克，24.9毫摩尔，3.0当量)，混合物搅拌1小时。反应液用饱和氯化铵水溶液淬灭，并搅拌10分钟，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝10/1到4/1)得到白色固体7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(2.0克，收率：69.0％)。MS(ES+):m/z＝349(M+H)+。
步骤1f:(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-1)的制备:氮气保护下，7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0110-1)(1.6克，4.6毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(3.0克，23.0毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(1.0克，6.9毫摩尔，1.5当量)的乙腈(30毫升)混合物85℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，冰水浴下，加入N,N-二异丙基乙胺(1.8克，13.8毫摩尔，3.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-1)(1.1克，5.5毫摩尔，1.2当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物用水洗、饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到80/1)得到黄色固体(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.2克，收率：50.0％)。MS(ES+):m/z＝531(M+H)+。
步骤1g:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0113-1)的制备:在氮气保护下，将2-氟-6-甲氧基苯硼酸(0105-1)(80毫克，047毫摩尔，1.7当量)，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(150毫克，0.28毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(33毫克，0.028毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(90毫克，0.85毫摩尔，3.0当量)加入到25毫升乙腈和5毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下搅拌6小时。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝30/1到15/1)得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(170毫克，收率：96％)。MS(ES+):m/z＝621(M+H)+。
步骤1h:6-氟-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0114-1)的制备:将(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0113-1)(170毫克，0.27毫摩尔，1.0当量)溶解于50毫升二氯甲烷中，滴加5毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌1小时。混合物减压浓缩至干，残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝521(M+H)+。
步骤1i:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物1)的制备:将6-氟-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0114-1)的粗品溶解于20毫升四氢呋喃中，加入4毫升二异丙基二胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(37毫克，0.41毫摩尔，1.5当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。混合物搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过饱和食盐水洗涤，减压浓缩，残留物用制备薄层色谱(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝30/1)纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(50毫克，收率：32％)。MS(ES+):m/z＝575(M+H)+.熔点：158～160℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.38(d,J＝4.8Hz,1H),8.32(m,1H),7.46(dd,J＝15.6,8.0Hz,1H),7.18(d,J＝4.8Hz,1H),6.97(d,J＝8.5Hz,1H),6.86(m,2H),6.21(d,J＝16.3Hz,1H),5.76(d,J＝10.9Hz,1H),4.93(d,J＝29.1Hz,1H),4.34(dd,J＝34.0,18.7Hz,2H),4.08(dd,J＝58.7,11.0Hz,1H),3.65(m,5H),3.13(m,1H),2.72(m,1H),1.90(s,3H),1.34(dd,J＝15.3,6.7Hz,3H),1.08(d,J＝6.6Hz,3H),0.92(d,J＝5.7Hz,3H)。
实施例2：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-异丙氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物3)的制备(按照方案一线路制备)
步骤2a:2-氟-6-异丙氧基苯硼酸(化合物0105-3)的制备:在氮气保护下，将1-氟-2-溴-3-异丙氧基苯(0104-3)(300毫克，1.29毫摩尔，1.0当量)溶解于20毫升无水四氢呋喃，该溶液冷却至-70℃，滴加正丁基锂(1.6M的正己烷溶液，1.45毫升，2.32毫摩尔，1.8当量)。混合物在-70℃下搅拌30分钟。硼酸三甲酯(201毫克，1.93毫摩尔，1.5当量)溶解于1毫升无水四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。混合物在-70℃下搅拌1小时，加入氯化铵水溶液淬灭反应，加入乙酸乙酯和水萃取。有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物无需纯化，直接用于下一步。
步骤2b:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-异丙氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0113-3)的制备:合成方法如实施例1步骤1g，仅是将其中化合物0105-1替换为2-氟-6-异丙氧基苯硼酸(0105-3)，制备得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-异丙氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(125毫克，收率：83％)。MS(ES+):m/z＝649(M+H)+.
步骤2c:6-氟-7-(2-氟-6-异丙氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0114-3)的制备:合成方法如实施例1步骤1h，仅是将其中化合物0113-1替换为(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-异丙氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0113-3)(125毫克，0.19毫摩尔，1.0当量)，制备得到化合物6-氟-7-(2-氟-6-异丙氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮，不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝549(M+H)+.
步骤2d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-异丙氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物3)的制备:合成方法如实施例1步骤1i，仅是将其中化合物0114-1替换为6-氟-7-(2-氟-6-异丙氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0114-3)，制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-异丙氧基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(58毫克，收率：50％)。MS(ES+):m/z＝603(M+H)+.熔点：138℃到140℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.35(t,J＝14.2Hz,2H),7.41(dd,J＝15.6,8.1Hz,1H),7.17(m,1H),6.96(d,J＝8.4Hz,1H),6.84(dd,J＝17.2,9.2Hz,2H),6.20(d,J＝16.2Hz,1H),5.76(m,1H),4.90(s,1H),4.59(s,1H),4.34(m,2H),4.08(dd,J＝58.0,11.7Hz,1H),3.64(m,2H),3.16(s,1H),2.66(m,1H),1.90(m,3H),1.34(m,3H),1.12(dd,J＝21.0,5.4Hz,3H),1.06(d,J＝6.2Hz,3H),0.99(dd,J＝28.3,5.2Hz,3H),0.87(dd,J＝33.6,5.8Hz,3H).
实施例3：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2-羟基乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物6)的制备(按照方案一线路制备)
步骤3a:2-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0106-6)的制备:2-(2-溴-3-氟苯氧基)乙-1-醇(700毫克，3.0毫摩尔，1.0当量)，溴甲醚(563毫克，4.5毫摩尔，1.5当量)和N,N-二异丙基乙胺(1.2克，9.0毫摩尔，3.0当量)的二氯甲烷(20毫升)混合物在室温下搅拌过夜。反应液用饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝20/1到10/1)得到无色油状物2-溴-1-氟-3-(2-(甲氧基甲氧基)乙氧基)苯(460毫克，收率：55.4％)。氮气保护下，将上述得到的2-溴-1-氟-3-(2-(甲氧基甲氧基)乙氧基)苯(280毫克，1.0毫摩尔，1.0当量)，双联硼酸频那醇酯(381克，1.5毫摩尔，1.5当量)，醋酸钾(294毫克，3.0毫摩尔，3.0当量)和四三苯基膦钯(58毫克，0.05毫摩尔，0.05当量)的甲苯(10毫升)混合物回流过夜。冷却到室温后，将反应液过滤，滤液减压浓缩得到粗产品2-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷，该产品不需要进一步纯化直接用于下一步。
步骤3b:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0113-6)的制备:氮气保护下，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(81毫克，0.15毫摩尔，1.0当量)，2-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0106-6)(147毫克，0.45毫摩尔，3.0当量)，碳酸钠(48毫克，0.45毫摩尔，3.0当量)和四三苯基膦钯(17毫克，0.015毫摩尔，0.1当量)的乙腈/水＝10/1(11毫升)混合物在82℃下搅拌过夜。冷却到室温后，混合物倒入水中，加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：乙酸乙酯/甲醇＝100/1)得黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100毫克，收率：94.3％)。MS(ES+):m/z＝695(M+H)+.
步骤3c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2-羟基乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物6)的制备:合成方法如实施例1步骤1h和1i，仅是将其中化合物0113-1替换为(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0113-6)(100毫克，0.14毫摩尔，1.0当量),制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2-羟基乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(45毫克，收率：51.7％)。MS(ES+):m/z＝605(M+H)+；熔点：150～155℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.33(dd,J＝37.4,6.4Hz,2H),7.43(dd,J＝15.4,8.4Hz,1H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),6.98(d,J＝8.5Hz,1H),6.85(dd,J＝19.2,10.4Hz,2H),6.20(d,J＝16.3Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.95(s,1H),4.62(t,J＝5.1Hz,1H),4.36(m,2H),4.05(m,3H),3.70(d,J＝31.2Hz,2H),3.50(d,J＝7.8Hz,2H),3.14(s,1H),2.70(s,1H),1.90(s,3H),1.32(dd,J＝14.6,8.6Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.88(m,3H).
实施例4：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物7)的制备(按照方案一线路制备)
步骤4a:2-氟-6-(2-甲基乙氧基)苯硼酸(化合物0105-7)的制备:氮气保护下，在-70℃向2-溴-1-氟-3-(2-甲氧乙氧基)苯(250毫克，1.0毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(6毫升)溶液滴加1.6摩尔每升正丁基锂(1毫升，1.5毫摩尔，1.5当量)。滴加完后，混合物搅拌30分钟。往混合物中滴加硼酸三甲酯(166毫克，1.6毫摩尔，1.6当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液，混合物继续搅拌30分钟。反应液用氯化铵水溶液淬灭，加入乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到黄色固体2-氟-6-(2-甲基乙氧基)苯硼酸(180毫克，收率：84.1％)。
步骤4b:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2-甲氧乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0113-7)的制备:合成方法如实施例1步骤1g，仅是将其中化合物0105-1替换为2-氟-6-(2-甲基乙氧基)苯硼酸(0105-7)(81毫克，0.38毫摩尔，2.0当量)，制备得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2-甲氧乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(84毫克，收率：67.2％)。MS(ES+):m/z＝665(M+H)+.
步骤4c:6-氟-7-(2-氟-6-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0114-7)的制备:合成方法如实施例1步骤1h，仅是将其中化合物0113-1替换为(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2-甲氧乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0113-7)(80毫克，0.12毫摩尔，1.0当量)，制备得到黄色固体6-氟-7-(2-氟-6-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(43毫克，收率：63.2％)。MS(ES+):m/z＝565(M+H)+.
步骤4d：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物7)的制备:合成方法如实施例1步骤1i，仅是将其中化合物0114-1替换为6-氟-7-(2-氟-6-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0114-7)(43毫克，0.08毫摩尔，1.0当量)，制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(23毫克，收率：48.9％)。MS(ES+):m/z＝619(M+H)+；熔点：110～115℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.35(dd,J＝27.6,7.3Hz,2H),7.44(dd,J＝15.5,7.2Hz,1H),7.18(s,1H),6.99(d,J＝8.5Hz,1H),6.87(t,J＝8.6Hz,2H),6.20(d,J＝15.9Hz,1H),5.76(d,J＝10.5Hz,1H),4.89(s,1H),4.32(m,2H),4.06(s,3H),3.67(s,2H),3.44(s,2H),3.11(s,4H),2.69(s,1H),1.89(s,3H),1.32(dd,J＝11.7,6.4Hz,3H),1.07(d,J＝6.5Hz,3H),0.90(m,3H).
实施例5：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物8)的制备(按照方案一线路制备)
步骤5a:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2,2,2-三氟甲乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0113-8)的制备：在氮气保护下，将(2-氟-6-羟基苯基)硼酸(0105-8)(522毫克，3.0毫摩尔，18.0当量)，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(120毫克，0.226毫摩尔，1.0当量)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(16.5毫克，0.0226毫摩尔，0.1当量)和碳酸钾(93毫克，0.678毫摩尔，3.0当量)加入到10毫升二氧六环和1毫升水的混合溶剂中，混合物在90℃下搅拌3小时。反应体系冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取。有机相用水洗，并减压浓缩，残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝150/1至30/1)纯化得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(112毫克，收率：81.7％)。MS(ES+):m/z＝607(M+H)+。将上述(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(40毫克，0.058毫摩尔，1.0当量)，2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酰基(382毫克，1.65毫摩尔，10.0当量)和碳酸钾(45.5毫克，0.33毫摩尔，3.0当量)的乙腈(10毫升)混合物在85℃下搅拌3.0小时。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取，有机相干燥并浓缩。残留物用薄层色谱纯化(二氯甲烷/甲醇＝30/1)得黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2,2,2-三氟甲乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(40毫克，收率：35.1％)。MS(ES+):m/z＝689(M+H)+.
步骤5b:6-氟-7-(2-氟-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0114-8)的制备：合成方法如实施例1步骤1h，仅是将其中化合物0113-1替换为(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0113-8)(40毫克，0.058毫摩尔，1.0当量)，制备得到6-氟-7-(2-氟-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮，不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝589(M+H)+.
步骤5c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物8)的制备：合成方法如实施例1步骤1i，仅是将其中化合物0114-1替换为6-氟-7-(2-氟-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0114-8)，制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(20毫克，收率：53.7％)。MS(ES+):m/z＝643(M+H)+.熔点：118～122℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.37(d,J＝4.7Hz,2H),7.52(dd,J＝15.5,7.9Hz,1H),7.14(dd,J＝32.8,12.5Hz,2H),7.01(t,J＝8.0Hz,1H),6.85(m,1H),6.21(d,J＝16.6Hz,1H),5.76(d,J＝10.9Hz,1H),4.92(d,J＝41.5Hz,1H),4.72(d,J＝7.8Hz,2H),4.35(m,2H),4.09(dd,J＝56.9,12.8Hz,1H),3.65(dd,J＝66.8,54.3Hz,2H),3.16(d,J＝46.2Hz,1H),2.67(d,J＝62.2Hz,1H),1.89(d,J＝60.3Hz,3H),1.33(s,3H),1.08(t,J＝16.2Hz,3H),0.89(dd,J＝52.6,11.7Hz,3H).
实施例6：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-巯基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物13)的制备(按照方案二线路制备)
步骤6a：(2-氟-6-((甲氧基甲基)硫基)苯硼酸(化合物0202-13)的制备:将3-氟-2-溴苯胺(950毫克，5.0毫摩尔，1.0当量)加入到稀释盐酸溶液(19毫升浓盐酸和19毫升水)中，在90℃下搅拌，直到固体消失。混合物冷却到5℃。亚硝酸钠(380毫克，5.0毫摩尔，1.1当量)溶解于1.0毫升水中，滴加到上述混合物中。混合物在5℃下搅拌一小时，然后在5℃下滴加到乙基黄原酸钾(960毫克，6.0毫摩尔，1.2当量)和氢氧化钾(336毫克，6.0毫摩尔，1.2当量)混合的20毫升水溶液中。混合物搅拌一个小时。加入二氯甲烷萃取，用水和饱和食盐水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物在室温下在氢氧化钾(560毫克，10.0毫摩尔，2.0当量)的20毫升乙醇溶液中搅拌一个小时。混合物用二氯甲烷萃取，经过水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物无需进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES-):m/z＝205(M-H)-。将上述得到的3-氟-2-溴苯硫酚溶解于32毫升二氯甲烷中，加入二异丙基乙胺(1.03毫升，8.0毫摩尔，1.6当量)。混合物冷却到0℃，滴加溴甲基甲基醚(750毫克，6.0毫摩尔，1.2毫摩尔)。混合物在0℃下搅拌一小时。加水，分层，有机相经无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1到5/1)得到黄色油状物(2-溴-3-氟苯基)(甲氧基甲基)硫烷(382毫克，收率：30％)。在氮气保护下，将上述得到的(2-溴-3-氟苯基)(甲氧基甲基)硫烷(150毫克，0.60毫摩尔，1.0当量)溶解于8毫升无水四氢呋喃，该溶液冷却至-70℃，滴加正丁基锂的正己烷溶液(1.6M，0.68毫升，1.08毫摩尔，1.8当量)。混合物在-70℃下搅拌30分钟。硼酸三甲酯(113毫克，1.08毫摩尔，1.8当量)溶解于1毫升无水四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。混合物在-70℃下搅拌一小时，加入氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯和水萃取，经饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物无需纯化，直接用于下一步。
步骤6b：(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-((甲氧基甲基)硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0204-13)的制备:在氮气保护下，将(2-氟-6-((甲氧基甲基)硫基)苯硼酸粗品(0202-13)，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(100毫克，0.19毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(50毫克，0.048毫摩尔，0.4当量)和碳酸钠(101毫克，0.95毫摩尔，5.0当量)加入到15毫升乙腈和1.5毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下加热并搅拌12小时。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，减压浓缩，残留物用制备薄层色谱纯化(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝30/1)得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-((甲氧基甲基)硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(25毫克，收率：19％)。MS(ES+):m/z＝667(M+H)+.
步骤6c：6-氟-7-(2-氟-6-巯基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0205-13)的制备:将3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-((甲氧基甲基)硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0204-13)(25毫克，0.038毫摩尔，1.0当量)溶解于10毫升二氯甲烷中，滴加1.0毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌1小时。将混合物减压浓缩至干，所得残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝523(M+H)+.
步骤6d：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-巯基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物13)的制备:将6-氟-7-(2-氟-6-巯基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0205-13)的粗品溶解于8毫升四氢呋喃中，加入1.5毫升二异丙基乙胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(4.0毫克，0.042毫摩尔，1.1当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。将混合物搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过水洗，减压浓缩，残留物用制备液相色谱纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-巯基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(8毫克，收率：36％)。MS(ES+):m/z＝577(M+H)+；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.29(d,J＝4.8Hz,1H),8.12(d,J＝10.4Hz,1H),7.16(m,2H),7.00(m,3H),6.84(d,J＝10.1Hz,1H),6.19(d,J＝16.9Hz,1H),5.74(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.81(d,J＝22.1Hz,1H),4.25(m,2H),4.04(dd,J＝63.2,11.9Hz,1H),3.61(s,2H),3.07(d,J＝11.5Hz,1H),2.45(m,1H),1.73(s,3H),1.28(dd,J＝11.1,4.4Hz,3H),0.97(d,J＝6.0Hz,3H),0.71(d,J＝6.6Hz,3H).
实施例7：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(甲硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物14)的制备(按照方案二线路制备)
步骤7a:(2-氟-6-(甲硫基)苯基)硼酸(化合物0202-14)的制备：在50℃下，将亚硝酸叔丁酯(8.24克,80毫摩尔，8当量)缓慢滴加到2-溴-3-氟苯胺(1.9克，10毫摩尔，1当量)的二甲基二硫醚(10毫升)溶液中。混合物加热至95℃并在95℃下搅拌3小时。混合物冷却至室温。混合物用石油醚萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩并用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚)得到黄色油状物(2-溴-3-氟苯基)(甲基)硫烷(1.982克，粗品)。MS(ESI):m/z 221(M+H)+。在氮气保护下，在-70℃下将正丁基锂(3.3毫升，1.6摩尔/升的正己烷溶液,5.34毫摩尔，1.2当量)滴加至上述(2-溴-3-氟苯基)(甲基)硫烷(980毫克，4.45毫摩尔，1当量)的5毫升四氢呋喃溶液中。混合物在-70℃下搅拌30分钟。将硼酸三甲酯(601毫克，5.78毫摩尔，1.3当量)滴加至混合物中。混合物在-70℃下额外搅拌30分钟。然后，反应用2摩尔/升的氢氧化钠水溶液淬灭。混合物用石油醚萃取。水相的pH值用2摩尔/升盐酸调节至2。混合物用乙酸乙酯和水萃取。有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩，得到黄色固体(2-氟-6-(甲硫基)苯基)硼酸(580毫克，收率：70.05％)。MS(ESI):m/z 187(M+H)+。
步骤7b:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(甲硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0204-14)的制备。将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(150毫克，0.283毫摩尔，1当量),(2-氟-6-(甲硫基)苯基)硼酸(0202-14)(78毫克，0.424毫摩尔，1.5当量),四三苯基磷钯(33毫克，0.0283毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(90毫克，0.849毫摩尔，3当量)加入至10毫升乙腈和1毫升水的混合溶液中。混合物在82℃下搅拌16小时。然后，将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过薄层厚制备板纯化残留物(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝15/1)，得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(甲硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(152毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 637(M+H)+。
步骤7c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(甲硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物14)的制备。将(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(甲硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0204-14)(152毫克，0.239毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷中。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N,N-二异丙基乙胺(92.5毫克，0.717毫摩尔，3.0当量)加入至混合物中。将丙烯酰氯(21.6毫克，0.239毫摩尔，1.0当量)加入至混合物中。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，将有机相减压浓缩，并用高效液相色谱纯化，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(甲硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(69.4毫克，收率：49.22％)。MS(ESI):m/z 591(M+H)+.熔点：135～135℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.37(d,J＝4.8Hz,2H),7.49(td,J＝8.2,6.2Hz,1H),7.22(d,J＝8.0Hz,1H),7.18(d,J＝4.8Hz,1H),7.11(t,J＝8.8Hz,1H),6.84(s,1H),6.21(d,J＝15.8Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.1Hz,1H),4.94(d,J＝32.7Hz,1H),4.34(dd,J＝35.9,22.0Hz,2H),4.07(d,J＝58.3Hz,1H),3.67(dd,J＝80.0,46.7Hz,2H),3.16(m,1H),2.71(s,1H),2.35(s,3H),1.92(s,3H),1.33(m,3H),1.07(d,J＝6.6Hz,3H),0.89(d,J＝20.3Hz,3H).
实施例8：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-(乙硫基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物15)的制备(按照方案二线路制备)
步骤8a:(2-(乙硫基)-6-氟苯基)硼酸(化合物0202-15)的制备：在50℃下，向2-溴-3-氟苯胺(1克，5.26毫摩尔，1.0当量)的1,2-二乙基二硫烷(1.3克，10.63毫摩尔，2.0当量)溶液滴加亚硝酸叔丁酯(1.15克，9.22毫摩尔，1.2当量)，混合物在50℃下搅拌1.0小时。然后将反应体系温度升至95℃，并使混合物在95℃下搅拌2.0小时。反应液冷却至室温，用水和乙酸乙酯萃取，将有机相干燥并减压浓缩。残留物用硅胶柱(石油醚)纯化，得到黄色油状产物(2-溴-3-氟苯基)(乙基)硫烷(800毫克，收率：64.7％)。在氮气保护下，在-70℃下，向上述(2-溴-3-氟苯基)(乙基)硫烷(740毫克，3.15毫摩尔，1.0当量)的甲苯(10毫升)溶液中滴加正丁基锂(1.6摩尔，2.36毫升，3.73毫摩尔，1.2当量)，混合物在-70℃下搅拌0.5小时。然后在-70℃下滴加硼酸三甲酯(425毫克，4.09毫摩尔，1.3当量)的甲苯(1毫升)溶液，混合物搅拌1小时。反应液用水和乙酸乙酯萃取，将有机相干燥并减压浓缩。残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。
步骤8b:(3S)-4-(7-(2-(乙硫基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0204-15)的制备：合成方法如实施例7步骤7b，仅是将其中化合物0202-14替换为(2-(乙硫基)-6-氟苯基)硼酸(0202-15)(522毫克，3.0毫摩尔，18.0当量)，制备得到黄色固体(3S)-4-(7-(2-(乙硫基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(92毫克，收率：83.6％)。MS(ES+):m/z＝651(M+H)+.
步骤8c:7-(2-(乙硫基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0205-15)的制备：将((3S)-4-(7-(2-(乙硫基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0204-15)(92毫克，0.14毫摩尔，1.0当量)溶解于6毫升二氯甲烷中，滴加1毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌1.0小时。反应液减压浓缩至干，所得残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝551(M+H)+.
步骤8d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-(乙硫基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物15)的制备：将7-(2-(乙硫基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0205-15)的粗品溶解于10毫升四氢呋喃中，加入2.0毫升N，N-二异丙基乙胺。反应体系置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(25.3毫克，0.28毫摩尔，2.0当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中，混合物搅拌0.5小时。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过食饱和盐水洗涤，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱(展开剂：二氯甲烷/甲醇＝13/1)纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-(乙硫基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(42毫克，收率：49.7％)。MS(ES+):m/z＝605(M+H)+.熔点：132～136℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.37(d,J＝3.9Hz,2H),7.47(d,J＝6.7Hz,1H),7.28(d,J＝7.7Hz,1H),7.14(m,2H),6.84(s,1H),6.20(d,J＝15.6Hz,1H),5.76(d,J＝10.2Hz,1H),4.94(d,J＝36.4Hz,1H),4.32(m,2H),4.08(d,J＝62.3Hz,1H),3.65(m,2H),3.17(s,1H),2.84(d,J＝5.6Hz,2H),2.71(s,1H),1.94(s,3H),1.33(dd,J＝18.2,5.7Hz,3H),1.07(d,J＝6.2Hz,6H),0.88(s,3H).
实施例9：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物16)的制备(按照方案二线路制备)
步骤9a:2-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0203-16)的制备:50℃下往2-溴-3-氟苯胺(0.7克，3.68毫摩尔，1.0当量)在1，2-二异丙基二硫醚(1.5毫升，9.41毫摩尔，2.56当量)的混合物中滴加亚硝酸叔丁酯(2.63毫升，22.10毫摩尔，6.0当量)。混合物在50℃搅拌1小时，然后再加热到75℃并搅拌2小时。减压除去溶剂。将残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚)，得到浅黄色油状物(2-溴-3-氟苯基)(异丙基)硫烷(0.426克，收率：46％)。在-78℃氮气氛围下，往上述(2-溴-3-氟苯基)(异丙基)硫烷(0.426克，1.711毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(9毫升)溶液中加入正丁基锂(1.6M己烷溶液，1.18毫升，1.882毫摩尔，1.1当量)。混合物搅拌1小时。加入2-甲氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0.56毫升，3.422毫摩尔，2.0当量)，然后反应在-78℃下搅拌1小时。加入饱和氯化铵溶液(20毫升)淬灭反应。水层用乙酸乙酯(20毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到浅黄色油状物2-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0.607克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 297[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝60:1)。
步骤9b:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯((化合物0204-16)的制备:往(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(80毫克，0.151毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(17.4毫克，0.0151毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(32毫克，0.302毫摩尔，2.0当量)在乙腈(8毫升)和水(0.8毫升)的混合物中加入2-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0203-16)(67.1毫克，0.227毫摩尔，1.5当量)。混合物在氮气氛围下加热至82℃并搅拌过夜。减压下除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(二氯甲烷∶甲醇＝40∶1)，得到淡黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(88毫克，收率：88％)。LCMS(ESI)：m/z 665[M+1]+。
步骤9c:6-氟-7-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0205-16)的制备:合成方法如实施例8步骤8c，仅是将其中化合物0204-15替换为(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0204-16)(88毫克，0.132毫摩尔，1.0当量)，制备得到浅黄色油状物6-氟-7-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(95毫克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 565[M+1]+。
步骤9d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物16)的制备:合成方法如实施例8步骤8d，仅是将其中化合物0205-15替换为6-氟-7-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0205-16)(75毫克，0.132毫摩尔，1.0当量)，制备得到淡黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(异丙硫基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(30毫克，收率：37％)。LCMS(ESI)：m/z 619[M+1]+；熔点：142-146℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.37(d,J＝4.8Hz,2H),7.49(dd,J＝14.3,8.0Hz,1H),7.36(d,J＝7.7Hz,1H),7.17(t,J＝6.0Hz,2H),6.86(d,J＝13.4Hz,1H),6.21(d,J＝16.5Hz,1H),5.77(d,J＝12.0Hz,1H),4.95(d,J＝40.6Hz,1H),4.33(m,2H),4.11(m,1H),3.66(m,2H),3.40(m,1H),3.17(dd,J＝22.9,17.6Hz,1H),2.75(d,J＝38.9Hz,1H),1.92(m,3H),1.32(m,3H),1.09(m,9H),0.94(dd,J＝60.2,5.7Hz,3H).
实施例10：(S)-4-(4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(2-(甲基磺酰基)苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物31)的制备(按照方案二线路制备)
步骤10a：(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(甲基磺酰基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0204-31)的制备：将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(100毫克，0.188毫摩尔，1当量),(2-(甲基磺酰基)苯基)硼酸(0202-31)(45.3毫克，0.226毫摩尔，1.2当量),四三苯基磷钯(22毫克，0.018毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(40毫克，0.378毫摩尔，2当量)加入至10毫升乙腈和1毫升水的混合溶液中。混合物在82℃下搅拌16小时。然后，将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过薄层厚制备板纯化残留物(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝15/1)，得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(甲基磺酰基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(60毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 651(M+H)+.
步骤10b：(S)-4-(4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(2-(甲基磺酰基)苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物31)的制备:将(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(甲基磺酰基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0204-31)(60毫克，0.092毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N,N-二异丙基乙胺(35.7毫克，0.277毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(8.3毫克，0.092毫摩尔，1.0当量)加入至混合物不。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用高效液相色谱纯化，得到黄色固体(S)-4-(4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(2-(甲基磺酰基)苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮为(9.3毫克，收率：16.68％).MS(ESI):m/z 605(M+H)+；熔点：160～161℃；1HNMR(500MHz,DMSO)δ8.35(d,J＝4.7Hz,2H),8.01(d,J＝7.8Hz,1H),7.79(dt,J＝29.9,7.5Hz,2H),7.45(d,J＝7.5Hz,1H),7.15(d,J＝4.8Hz,1H),6.85(s,1H),6.20(d,J＝15.9Hz,1H),5.76(d,J＝10.8Hz,1H),4.93(s,1H),4.34(d,J＝64.7Hz,2H),4.08(m,1H),3.64(m,2H),3.15(m,1H),2.66(d,J＝27.1Hz,4H),1.95(s,3H),1.30(dd,J＝30.2,12.6Hz,3H),1.04(d,J＝5.4Hz,3H),0.85(s,3H).
实施例11：N-(2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苯基)乙酰胺(化合物33)的制备(按照方案三线路制备)
步骤11a:3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯胺(化合物0303-33)的制备:氮气保护下，将2-溴-3-氟苯胺(1.00克，5.26毫摩尔，1.0当量),双联硼酸频那醇酯(2.00克，7.89毫摩尔，2.0当量)，乙酸钾(1.55克，15.8毫摩尔，3.0当量)和四(三苯基膦)钯(150毫克，0.027毫摩尔，0.05当量)的甲苯(10毫升)混合物在115℃搅拌过夜。冷却到室温后，将混合物过滤，滤液减压浓缩得到无色油状物3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯胺(920毫克，收率73.8％)。
步骤11b:(3S)-4-(7-(2-乙酰氨基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0304-33)的制备:氮气保护下，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(150毫克，0.283毫摩尔，1.00当量)，3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯胺(0303-33)(135毫克，0.566毫摩尔，2.00当量)，碳酸钠(90毫克，0.849毫摩尔，3.00当量)和四(三苯基膦)钯(32毫克，0.028毫摩尔，0.10当量)的乙腈(10毫升)和水(1毫升)的混合物在80℃下搅拌过夜。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和盐水洗涤，减压除去溶剂。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝12/1)得淡黄色固体(3S)-4-(7-(2-氨基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(102毫克，收率：59.6％)。MS(ES+):m/z＝606(M+H)+。向制备得到的(3S)-4-(7-(2-氨基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150毫克，0.247毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(10毫升)混合物中滴加乙酰氯(58.1毫克，0.741毫摩尔，1.0当量)，反应在室温搅拌2小时。加入水和二氯甲烷萃取，有机层用饱和盐水洗涤并减压浓缩，得到黄色固体(3S)-4-(7-(2-乙酰氨基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯为(130毫克，收率:81.2％)。MS(ES+):m/z＝648(M+H)+。
步骤11c:N-(3-氟-2-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)苯基)乙酰胺(化合物0305-33)的制备:向(3S)-4-(7-(2-乙酰氨基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0304-33)(130毫克，0.201毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升)，反应在常温下搅拌30分钟。将混合物减压浓缩得黄色油状物N-(3-氟-2-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)苯基)乙酰胺(110毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝548(M+H)+。
步骤11d:N-(2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苯基)乙酰胺(化合物33)的制备:向N-(3-氟-2-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)苯基)乙酰胺(0305-33)(110毫克，粗品)和N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升)的乙腈(5毫升)混合物中滴加丙烯酰氯(27.2毫克，0.301毫摩尔，1.5当量)，反应在常温下搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得黄色固体N-(2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苯基)乙酰胺(66毫克，收率：54.6％)。MS(ES+):m/z＝602(M+H)+；熔点:143-154℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.40(d,J＝4.8Hz,1H),8.31(dd,J＝20.3,9.8Hz,1H),7.31(dd,J＝14.8,7.4Hz,1H),7.14(dd,J＝26.3,18.5Hz,2H),6.85(t,J＝10.4Hz,3H),6.19(d,J＝15.8Hz,1H),5.75(d,J＝10.6Hz,1H),4.88(d,J＝40.1Hz,1H),4.28(m,2H),4.06(m,1H),3.58(m,2H),3.14(m,1H),2.60(dd,J＝13.0,6.9Hz,1H),1.91(s,3H),1.70(s,3H),1.30(dd,J＝19.5,6.6Hz,3H),1.02(d,J＝6.6Hz,3H),0.70(d,J＝6.0Hz,3H)。
实施例12：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-甲基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物34)的制备(按照方案四线路制备)
步骤12a：2-氟-6-甲基苯硼酸((2-fluoro-6-methylphenyl)boronic acid)(化合物0402-34)的制备:氮气保护下，在-70℃向2-溴-1-氟-3-甲基苯(500毫克，2.6毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液滴加1.6摩尔每升正丁基锂(2.3毫升，3.6毫摩尔，1.4当量)。滴加完后，混合物搅拌30分钟。往混合物中滴加硼酸三甲酯(406毫克，3.9毫摩尔，1.5当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液，混合物继续搅拌30分钟。反应液用氯化铵水溶液淬灭，加入乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到黄色固体2-氟-6-甲基苯硼酸(300毫克，收率：73.7％)。
步骤12b：(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-甲基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0404-34)的制备:氮气保护下，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100毫克，0.19毫摩尔，1.0当量)，2-氟-6-甲基苯硼酸(58毫克，0.38毫摩尔，2.0当量)，碳酸钠(60毫克，0.57毫摩尔，3.0当量)和四三苯基膦钯(22毫克，0.019毫摩尔，0.1当量)的乙腈/水＝10/1(11毫升)混合物在82℃下搅拌过夜。冷却到室温后，混合物倒入水中，加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝2/1到乙酸乙酯)得黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-甲基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(120毫克，收率：106％)。MS(ES+):m/z＝605(M+H)+.
步骤12c：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-甲基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物34)的制备:向(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-甲基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0404-34)(120毫克，0.2毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(8毫升)溶液加入三氟乙酸(4毫升)，混合物室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(10毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(77毫克，0.6毫摩尔，3.0当量)。冰水浴下，在混合物中滴加丙烯酰氯(22毫克，0.24毫摩尔，1.2当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液。混合物搅拌30分钟。加入水，再加入二氯甲烷萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝12/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-甲基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(75毫克，收率：67.6％)。MS(ES+):m/z＝559(M+H)+；熔点：140～145℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.38(t,J＝7.6Hz,2H),7.39(dd,J＝14.2,7.8Hz,1H),7.19(m,1H),7.11(m,2H),6.86(d,J＝12.5Hz,1H),6.21(d,J＝15.9Hz,1H),5.76(m,1H),4.94(d,J＝34.1Hz,1H),4.33(dd,J＝26.7,12.9Hz,2H),4.10(m,1H),3.67(dd,J＝74.6,58.9Hz,2H),3.15(m,1H),2.72(s,1H),1.93(d,J＝17.0Hz,6H),1.33(dt,J＝15.1,7.6Hz,3H),1.07(d,J＝6.3Hz,3H),0.90(m,3H).
实施例13：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-异丙基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物35)的制备(按照方案四线路制备)
步骤13a:(2-氟-6-异丙基)苯硼酸(17-096-5)(化合物0402-35)的制备:在45℃，氮气氛围下往2-氟-6-异丙基苯胺(0.55克，3.59毫摩尔，1.0当量)和溴化铜(0.96克，4.31毫摩尔，1.2当量)的乙腈(10毫升)混合液中加入亚硝酸叔丁酯(1.48克，14.36毫摩尔，4.0当量)。混合物搅拌20分钟。减压除去溶剂。残余物经硅胶柱色谱纯化(石油醚)，得到浅黄色油状物2-溴-1-氟-3-异丙基苯(0.526克，收率：68％)。MS(ESI+)：m/z 217[M+1]+。在-78℃氮气氛围下往上述2-溴-1-氟-3-异丙基苯(0.526克，2.42毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(10毫升)的溶液中滴加正丁基锂(1.6M己烷溶液，1.82毫升，2.91毫摩尔，1.2当量)。混合物搅拌1小时。加入硼酸三甲酯(0.67毫升，6.05毫摩尔，2.5当量)然后在-78℃下再搅拌1小时。加入饱和氯化铵溶液(20毫升)淬灭反应。水层用乙酸乙酯(20毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到(2-氟-6-异丙基)苯硼酸淡黄色油状混合物(0.405克，粗品)。
步骤13b:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-异丙基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0404-35)的制备:合成方法如实施例12步骤12b，仅是将其中化合物0402-34替换为(2-氟-6-异丙基)苯硼酸(0402-35)(123毫克，0.678毫摩尔，6.0当量)，制备得到(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-异丙基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯浅黄色油状物(60毫克，粗品)。MS(ESI+)：m/z 633[M+1]+。
步骤13c:氟-7-(2-氟-6-异丙基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0405-35)的制备:往(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-异丙基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0404-35)(60毫克，0.095毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(7.5毫升)的溶液中加入三氟乙酸(2毫升)。混合物在室温下搅拌0.5小时。减压除去溶剂。将残余物在真空下干燥，得到6-氟-7-(2-氟-6-异丙基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮淡黄色油状物(55毫克，粗品)。MS(ESI+)：m/z 533[M+1]+；TLC：Rf0.3(二氯甲烷：甲醇＝10：1).
步骤13d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-异丙基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物35)的制备:在0℃下往6-氟-7-(2-氟-6-异丙基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶基[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0405-35)(55毫克，0.103毫摩尔，1.0当量)以及二异丙基乙胺(27毫克，0.207毫摩尔，2.0当量)的二氯甲烷(6毫升)混合液中加入丙烯酰氯(19毫克，0.207毫摩尔，2.0当量)的二氯甲烷(1毫升)溶液。混合物搅拌20分钟。混合物用水(20毫升)稀释，然后用二氯甲烷(10毫升×2)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过Pre-HPLC(乙腈-0.1％甲酸溶液体系)纯化，得到白色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-异丙基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(第一个峰，13毫克，收率：22％)。MS(ESI+)：m/z 587[M+1]+；TLC：Rf0.5(二氯甲烷：甲醇＝10：1)；熔点：113-116℃。1HNMR(DMSO-d6，500MHz)：δ8.36-8.34(m,2H),7.46-7.42(m,1H),7.24-7.22(m,1H),7.18-7.15(m,1H),7.12-7.07(m,1H),6.88-6.81(m,1H),6.21-6.17(m,1H),5.76-5.74(m,1H),4.590-4.85(m,1H),4.39-4.26(m,2H),4.14-3.99(m,1H),3.75-3.50(m,2H),3.17-3.12(m,1H),2.82-2.78(m,1H),2.66-2.62(m,1H),1.94-1.83(m,3H),1.28-1.24(m,3H),1.09-0.99(m,6H),0.85-0.74(m,6H)。
实施例14：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-二氟甲基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物37)的制备(按照方案四线路制备)
步骤14a:2-(2-(二氟甲基)-6-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷(化合物0403-37)的制备：氮气保护下，0℃下往2-溴-3-氟苯甲醛(1.5克，7.39摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(50毫升)溶液中滴加二乙氨基三氟化硫(2.97克，18.5毫摩尔，2.5当量)，混合物在室温下搅拌过夜。混合物倒入冰水中，并用二氯甲烷萃取。将有机相干燥并减压浓缩。残留物用硅胶柱纯化(纯石油醚)得无色油状化合物2-溴-1-(二氟甲基)-3-氟苯(1.4克，收率：84.2％)。在氮气保护下，在-70℃下，向上述的2-溴-1-(二氟甲基)-3-氟苯(1.2克，5.33毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液中滴加正丁基锂(1.6摩尔，4.33毫升，6.93毫摩尔，1.3当量)，混合物在-70℃下搅拌40分钟。然后在-70℃下滴加甲醇频哪醇硼酸酯(1.35克，8.5毫摩尔，1.6当量)的四氢呋喃(2.5毫升)溶液，混合物搅拌1小时。加入氯化铵水溶液淬灭反应液，混合物用水和乙酸乙酯萃取，将有机相干燥并减压浓缩。残留物(1.3克，粗品)不经过进一步纯化，直接用于下一步。
步骤14b:(3S)-4-(7-(2-二氟甲基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0404-37)的制备：在氮气保护下，将2-(2-(二氟甲基)-6-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷(0403-37)(1.3克，粗品)，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(150毫克，0.282毫摩尔，1.0当量)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(20.6毫克，0.0282毫摩尔，0.1当量)和碳酸钾(78毫克，0.564毫摩尔，2.0当量)加入到10毫升二氧六环和1毫升水的混合溶剂中，混合物在90℃下搅拌5小时。反应液冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，减压浓缩，残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝100/1至40/1)得到黄色液体(3S)-4-(7-(2-二氟甲基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100毫克，收率：55.3％)。MS(ES+):m/z＝641(M+H)+.
步骤14c:7-(2-二氟甲基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0405-37)的制备：将(3S)-4-(7-(2-二氟甲基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0404-37)(100毫克，0.156毫摩尔，1.0当量)溶解于10毫升二氯甲烷中，滴加2毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌1.0小时。反应液减压浓缩，将残留物溶于二氯甲烷和水，加入2摩尔氢氧化钠调节pH到8。混合物用二氯甲烷萃取，将有机相干燥、浓缩，制备板纯化(二氯甲烷/甲醇＝10/1)得7-(2-二氟甲基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(55毫克，收率：65.2％)。MS(ES+):m/z＝541(M+H)+.
步骤14d：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-二氟甲基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物37)的制备：将化合物7-(2-二氟甲基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0405-37)(55毫克，0.102毫摩尔，1.0当量)溶解于10毫升四氢呋喃中，加入N，N-二异丙基乙胺(39毫克，0.306毫摩尔，3.0当量)。反应体系置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(13.8毫克，0.153毫摩尔，1.5当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中，混合物搅拌0.5小时。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱(二氯甲烷/甲醇＝12/1)纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-二氟甲基-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(38毫克，收率：62.5％)。MS(ES+):m/z＝595(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.40(dd,J＝18.7,8.8Hz,2H),7.70(dd,J＝13.6,8.0Hz,1H),7.55(t,J＝9.9Hz,2H),7.18(d,J＝4.8Hz,1H),6.85(s,1H),6.59(t,J＝54.4Hz,1H),6.21(d,J＝16.1Hz,1H),5.76(m,1H),4.94(d,J＝46.0Hz,1H),4.33(m,2H),4.11(m,1H),3.63(m,2H),3.17(dd,J＝31.8,21.7Hz,1H),2.68(d,J＝48.7Hz,1H),1.96(d,J＝44.0Hz,3H),1.34(dd,J＝20.8,6.6Hz,3H),1.06(d,J＝6.4Hz,3H),0.88(s,3H).
实施例15：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-(氟甲基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物38)的制备(按照方案四线路制备)
步骤15a:2-(2-氟-6-(氟甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷)(化合物0403-38)的制备：氮气保护下，0℃下往2-溴-3-氟苯甲醇(0.9克，4.39毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(50毫升)溶液中滴加二乙氨基三氟化硫(1.06克，6.58毫摩尔，1.5当量)，混合物在室温下搅拌过夜。混合物倒入冰水中，并用二氯甲烷萃取。将有机相干燥并减压浓缩。残留物用硅胶柱纯化(纯石油醚)得无色油状2-溴-1-氟-3-氟甲基苯(0.55克，收率：60.5％)。在氮气保护下，在-70℃下，向上述2-溴-1-氟-3-氟甲基苯(0.55克，2.66毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液中滴加正丁基锂(1.6摩尔，2.2毫升，3.45毫摩尔，1.3当量)，混合物在-70℃下搅拌40分钟。然后在-70℃下滴加甲醇频哪醇硼酸酯(0.67克，4.26毫摩尔，1.6当量)的四氢呋喃(1.5毫升)溶液，混合物搅拌1小时。加入氯化铵水溶液淬灭反应液，混合物用水和乙酸乙酯萃取，将有机相干燥并减压浓缩。残留物(0.5克，粗品)不经过进一步纯化，直接用于下一步。
步骤15b:(3S)-4-(7-(2-氟-6-(氟甲基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0404-38)的制备：合成方法如实施例14步骤14b，仅是将其中化合物0403-37替换为2-(2-氟-6-(氟甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷(0403-38)(1.3克，粗品)，制备得到黄色液体(3S)-4-(7-(2-氟-6-(氟甲基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(80毫克，收率：85.6％)。MS(ES+):m/z＝623(M+H)+.
步骤15c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-(氟甲基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物38)的制备：合成方法如实施例12步骤12c，仅是将其中化合物0404-34替换为(3S)-4-(7-(2-氟-6-(氟甲基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0404-38)(80毫克，0.128毫摩尔，1.0当量)，制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-(氟甲基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(25毫克，收率：33.8％)。MS(ES+):m/z＝577(M+H)+.
1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.41(s,2H),7.58(s,1H),7.29(m,3H),6.84(s,1H),6.20(d,J＝15.2Hz,1H),5.76(d,J＝9.4Hz,1H),5.13(ddd,J＝131.5,82.1,47.5Hz,3H),4.33(m,2H),4.08(d,J＝56.0Hz,1H),3.73(d,J＝61.5Hz,2H),3.07(m,1H),2.74(s,1H),1.92(s,3H),1.34(d,J＝19.4Hz,3H),1.06(s,3H),0.91(d,J＝21.1Hz,3H).
实施例16：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物39)的制备(按照方案四线路制备)
步骤16a：(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0404-39)的制备:合成方法如实施例12步骤12b，仅是将其中化合物0402-34替换为(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)硼酸(0402-39)(235毫克，1.13毫摩尔，6.0当量),制备得到淡黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(45毫克，收率：36.3％)。MS(ES+):m/z＝659(M+H)+
步骤16b：6-氟-7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0405-39)的制备:合成方法如实施例14步骤14c，仅是将其中化合物0404-37替换为向(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0404-39)(45毫克，0.224毫摩尔，1.0当量)，制备得到黄色油状物6-氟-7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(28毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝559(M+H)+
步骤16c：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物39)的制备:合成方法如实施例14步骤14d，仅是将其中化合物0405-37替换为6-氟-7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0405-39)(28毫克，粗品)，制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(21毫克，收率：66.6％)。MS(ES+):m/z＝613(M+H)+.熔点：154-162℃；1HNMR(500MHz,DMSO)δ8.39(m,2H),7.74(d,J＝25.3Hz,3H),7.15(s,1H),6.83(s,1H),6.19(d,J＝15.4Hz,1H),5.75(d,J＝9.9Hz,1H),4.93(t,J＝40.8Hz,1H),4.33(m,2H),4.07(d,J＝59.8Hz,1H),3.70(d,J＝35.5Hz,2H),3.15(m,1H),2.72(d,J＝50.1Hz,1H),1.85(dd,J＝25.3,5.2Hz,3H),1.32(t,J＝13.9Hz,3H),1.05(m,3H),0.88(dd,J＝43.1,5.9Hz,3H).
实施例17：(S)-4-(4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物43)的制备(按照方案五线路制备)
步骤17a:(S)-4-(6-氟-7-(2-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0504-43)的制备:氮气保护下，将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(120毫克，0.226毫摩尔，1.0当量),(2-(羟甲基)苯基)硼酸(0502-43)(55毫克，0.339毫摩尔，1.50当量)，碳酸钠(72毫克，0.679毫摩尔，3.0当量)和四(三苯基膦)钯(4毫克，0.0028毫摩尔，0.05当量)的乙腈(5毫升)和水(1毫升)的混合物在80℃下搅拌过夜。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，减压除去溶剂，残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得淡黄色固体(S)-4-(6-氟-7-(2-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(135毫克，收率：99.2％)。MS(ES+):m/z＝603(M+H)+。
步骤17b:(S)-6-氟-7-(2-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0505-43)的制备:(S)-4-(6-氟-7-(2-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0504-43)(135毫克，0.224毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液中加入三氟乙酸(1毫升)，反应在常温下搅拌30分钟。将混合物减压浓缩得黄色油状物(S)-6-氟-7-(2-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(105毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝503(M+H)+。
步骤17c:(S)-4-(4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物43)的制备:向(S)-6-氟-7-(2-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0505-43)(105毫克，粗品)和N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升)的乙腈(5毫升)混合物中滴加丙烯酰氯(28.3毫克，0.313毫摩尔，1.50当量)，反应在常温下搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得黄色固体(S)-4-(4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(65毫克，收率：56.0％)。MS(ES+):m/z＝557(M+H)+.熔点：145-157℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.40(d,J＝4.8Hz,1H),8.31(dd,J＝18.9,9.9Hz,1H),7.53(d,J＝7.7Hz,1H),7.43(t,J＝7.5Hz,1H),7.31(t,J＝7.4Hz,1H),7.25(d,J＝7.6Hz,1H),7.20(d,J＝4.8Hz,1H),6.85(m,1H),6.21(d,J＝16.5Hz,1H),5.76(d,J＝10.6Hz,1H),4.92(dd,J＝19.8,13.9Hz,2H),4.32(m,2H),4.12(m,3H),3.67(m,2H),3.15(t,J＝19.3Hz,1H),2.72(m,1H),1.93(d,J＝4.0Hz,3H),1.33(dd,J＝19.5,6.6Hz,3H),1.06(d,J＝6.6Hz,3H),0.92(d,J＝6.6Hz,3H).
实施例18：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物44)的制备(按照方案五线路制备)
步骤18a:2-(2-氟-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0503-44)的制备：将硼氢化钠(280毫克，7.4毫摩尔，1.5当量)缓慢加入到2-溴-3-氟苯甲醛(1克，4.9毫摩尔，1当量)的甲醇(20毫升)溶液中。混合物在室温下搅拌2小时。用水淬灭反应。过滤混合物，残留物用水洗，干燥得到(2-溴-3-氟苯基)甲醇为白色固体(900毫克，收率：89.1％)。MS(ESI):m/z 206(M+H)+。在氮气保护和冰浴下，将氢化钠(263毫克，6.58毫摩尔，1.5当量)加入至上述(2-溴-3-氟苯基)甲醇(900毫克，4.39毫摩尔，1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)溶液中。混合物在室温下搅拌30分钟。将溴甲基甲醚(653毫克，5.27毫摩尔，1.2当量)的四氢呋喃(1毫升)溶液滴加入混合物中。混合物在室温下再搅拌1小时。反应液用饱和氯化铵淬灭。混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩，经硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚:乙酸乙酯＝200:1)得到透明油状物2-溴-1-氟-3-((甲氧基甲氧基)甲基)苯(825毫克，收率：75.2％)。MS(ESI):m/z 251(M+H)+。在氮气保护下，将上述2-溴-1-氟-3-((甲氧基甲氧基)甲基)苯(250毫克，1毫摩尔，1当量)，双联频哪醇硼酸酯(381毫克，1.5毫摩尔，1.5当量)，四三苯基磷钯(115毫克，0.1毫摩尔，0.1当量)和醋酸钾(294毫克，3毫摩尔，3当量)加入至10毫升甲苯中。混合物在110℃下搅拌16小时。然后，将该混合物冷却至室温，过滤。将滤液减压浓缩，得黑色油状物2-(2-氟-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(358毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 297(M+H)+.
步骤18b:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0504-44)的制备：将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(150毫克，0.283毫摩尔，1当量)，2-(2-氟-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0503-44)(126毫克，0.424毫摩尔，1.5当量)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(20毫克，0.0283毫摩尔，0.1当量)和碳酸钾(118毫克，0.849毫摩尔，3当量)加入至10毫升1,4-二氧六环和1毫升水的混合物中。混合物在92℃下搅拌3小时。然后，将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物经薄层厚制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝15/1)，得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(173毫克，收率：92.02％)。MS(ESI):m/z 665(M+H)+.
步骤18c:6-氟-7-(2-氟-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0505-44)的制备：将(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0504-44)(170毫克，0.251毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷中。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌16小时。然后，将混合物浓缩，残留物的pH值用氢氧化钠调至14。混合物用二氯甲烷萃取，将有机相减压浓缩，并用制备薄层色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝10/1)，得到黄色固体6-氟-7-(2-氟-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(85.5毫克，收率：64.22％).MS(ESI):m/z 521(M+H)+。
步骤18d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物44)的制备。将6-氟-7-(2-氟-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0505-44)(85.5毫克，0.164毫摩尔，1.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(64毫克，0.492毫摩尔，3.0当量)溶解于4毫升四氢呋喃中。然后将丙烯酰氯(18毫克，0.197毫摩尔，1.2当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷和水萃取。将有机相减压浓缩，并用制备薄层色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝15/1)，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(49毫克，收率：52.13％).MS(ESI):m/z 575(M+H)+；熔点：170～171℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.36(m,2H),7.49(m,1H),7.35(d,J＝7.8Hz,1H),7.19(t,J＝8.9Hz,2H),6.86(d,J＝11.6Hz,1H),6.21(d,J＝16.6Hz,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.2Hz,1H),5.08(s,1H),4.96(dd,J＝25.8,22.7Hz,1H),4.33(m,2H),4.06(m,3H),3.60(m,2H),3.15(m,1H),2.72(d,J＝11.5Hz,1H),1.95(s,3H),1.33(dt,J＝18.2,6.1Hz,3H),1.07(d,J＝6.0Hz,3H),0.85(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例19：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氯-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物45)的制备(按照方案五线路制备)
步骤19a：2-(2-氯-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0502-45)的制备：将硼氢化钠(260毫克，6.83毫摩尔，1.5当量)缓慢加入到2-溴-3-氯苯甲醛(1克,4.55毫摩尔，1当量)的甲醇(20毫升)溶液中。混合物在室温下搅拌2小时。用水淬灭反应。过滤混合物，残留物用水洗，干燥得到白色固体(2-溴-3-氯苯基)甲醇(826毫克，收率：82.6％)。MS(ESI):m/z 221(M+H)+。在氮气保护和冰浴下，将氢化钠(298毫克，7.46毫摩尔，2当量)加入至上述制得的(2-溴-3-氯苯基)甲醇(826毫克，3.73毫摩尔，1当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液中。混合物在室温下搅拌30分钟。将溴甲基甲醚(694毫克，5.60毫摩尔，1.5当量)的四氢呋喃(1毫升)滴加入混合物中。混合物在室温下再搅拌1小时。用饱和氯化铵淬灭反应。混合物用乙酸乙酯和水萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和无水硫酸钠干燥。有机相浓缩后用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚:乙酸乙酯＝200:1)得到透明油状物2-溴-1-氯-3-((甲氧基甲氧基)甲基)苯(864毫克，收率：87.62％)。MS(ESI):m/z265(M+H)+。在氮气保护下，将上述制得的2-溴-1-氯-3-((甲氧基甲氧基)甲基)苯(400毫克，1.5毫摩尔，1当量),双联频哪醇硼酸酯(581毫克，2.29毫摩尔，1.5当量),四三苯基磷钯(175毫克，0.15毫摩尔，0.1当量)和醋酸钾(449毫克，4.58毫摩尔，3当量)加入至10毫升甲苯中。混合物在110℃下搅拌反应16小时。然后，将该混合物冷却至室温，过滤。将滤液减压浓缩，得到黑色油状物2-(2-氯-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(360毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 313(M+H)+。
步骤19b：步骤4：(3S)-4-(6-氟-7-(2-氯-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0504-45)的制备：合成方法如实施例18步骤18b，仅是将其中化合物0503-44替换为2-(2-氯-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0502-45)，制备得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氯-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(130毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 681(M+H)+。
步骤19c：6-氟-7-(2-氯-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0505-45)的制备：合成方法如实施例18步骤18c，仅是将其中化合物0504-44替换为(3S)-4-(6-氟-7-(2-氯-6-((甲氧基甲氧基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0504-45)，制备得到黄色固体6-氟-7-(2-氯-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(45毫克，收率：44.12％)。MS(ESI):m/z537(M+H)+。
步骤19d：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氯-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物45)的制备：合成方法如实施例18步骤18d，仅是将其中化合物0505-44替换为6-氟-7-(2-氯-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0505-45)(45毫克，0.08毫摩尔，1.0当量)，制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氯-6-(羟甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮为(26.5毫克，收率：53.53％)。MS(ESI):m/z 591(M+H)+；熔点：174～175℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.36(t,J＝4.6Hz,2H),7.45(tdd,J＝9.7,6.6,3.5Hz,3H),7.18(dd,J＝13.6,4.9Hz,1H),6.85(s,1H),6.21(d,J＝16.9Hz,1H),5.76(dd,J＝9.1,7.1Hz,1H),5.19(ddd,J＝30.7,10.9,5.5Hz,1H),4.96(m,1H),4.33(m,2H),4.07(m,3H),3.74(m,2H),3.17(d,J＝5.3Hz,1H),2.74(m,1H),1.90(dd,J＝55.4,6.0Hz,3H),1.34(ddd,J＝22.9,12.4,6.0Hz,3H),1.07(m,3H),0.94(m,3H).
实施例20：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(1-羟基乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物46)的制备(按照方案五线路制备)
步骤20a:2-(2-氟-6-(1-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0503-46)的制备：在氮气保护下，将甲基溴化镁(1.6毫升，3摩尔/升***溶液,4.73毫摩尔，1.2当量)滴加到2-溴-3-氟苯甲醛(800毫克，3.94毫摩尔，1当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液中。混合物在室温下搅拌1小时。用饱和氯化铵淬灭反应。混合物用乙酸乙酯和水萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和硫酸钠干燥。有机相浓缩得到黄色油状物1-(2-溴-3-氟苯基)乙-1-醇(1.09克，粗品)。MS(ESI):m/z 219(M+H)+。在氮气保护中和冰浴下，将氢化钠(398毫克，9.95毫摩尔，2当量)加入至上述得到的1-(2-溴-3-氟苯基)乙-1-醇(1.09克，4.97毫摩尔，1当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液中。混合物在室温下搅拌30分钟。将溴甲基甲醚(926毫克，7.46毫摩尔，1.5当量)的四氢呋喃(1毫升)滴加入混合物中。混合物在室温下再搅拌1小时。用氯化铵淬灭反应。混合物用乙酸乙酯和水萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和无水硫酸钠干燥。有机相浓缩后用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚:乙酸乙酯＝200:1)得到透明油状物2-溴-1-氟-3-(1-(甲氧基甲氧基)乙基)苯(977毫克，收率：75.15％)。MS(ESI):m/z263(M+H)。在氮气保护下，将上述得到的2-溴-1-氟-3-(1-(甲氧基甲氧基)乙基)苯(400毫克，1.52毫摩尔，1当量),双联频哪醇硼酸酯(581毫克，2.29毫摩尔，1.5当量),四三苯基磷钯(175毫克，0.152毫摩尔，0.1当量)和醋酸钾(449毫克，4.58毫摩尔，3当量)加入至10毫升甲苯中。混合物在110℃下搅拌16小时。然后，将该混合物冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩，得到黑色油状物2-(2-氟-6-(1-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(539毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 311(M+H)+。
步骤20b:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(1-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0504-46)的制备：合成方法如实施例18步骤18b，仅是将其中化合物0503-44替换为2-(2-氟-6-(1-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0503-46)(105毫克，0.34毫摩尔，1.2当量),制备得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(1-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(176毫克，crude)。MS(ESI):m/z 679(M+H)+。
步骤20c:6-氟-7-(2-氟-6-(1-羟基乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0505-46)的制备：合成方法如实施例18步骤18c，仅是将其中化合物0504-44替换为(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(1-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0504-46)，制备得到黄色固体6-氟-7-(2-氟-6-(1-羟基乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(27毫克，收率：20.15％)。MS(ESI):m/z 535(M+H)+。
步骤20d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(1-羟基乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物46)的制备：合成方法如实施例18步骤18d，仅是将其中化合物0505-44替换为6-氟-7-(2-氟-6-(1-羟基乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0505-46)(27毫克，0.05毫摩尔，1.0当量)，制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(1-羟基乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(14毫克，收率：47.14％).MS(ESI):m/z 589(M+H)+；熔点：154～155℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.36(dd,J＝6.8,3.7Hz,2H),7.50(m,1H),7.41(dt,J＝13.0,6.7Hz,1H),7.17(dd,J＝15.3,6.7Hz,2H),6.85(s,1H),6.21(d,J＝16.8Hz,1H),5.77(dd,J＝10.5,2.0Hz,1H),5.02(m,2H),4.36(m,3H),4.08(d,J＝60.8Hz,1H),3.70(d,J＝34.1Hz,2H),3.27(s,3H),3.18(s,1H),2.76(m,1H),1.92(m,3H),1.35(m,3H),1.04(m,3H),0.84(dt,J＝14.9,6.9Hz,3H).
实施例21：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物48)的制备(按照方案五线路制备)
步骤21a:2-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0503-48)的制备：将甲醇钠(3.38毫升，1摩尔/升***溶液,3.38毫摩尔，1.5当量)加入到2-溴-1-(溴甲基)-3-氟苯(600毫克，2.25毫摩尔，1当量)的甲醇(10毫升)溶液中。混合物在室温下搅拌1小时。用水淬灭反应。混合物用石油醚萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和无水硫酸钠干燥。有机相浓缩后用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚:乙酸乙酯＝200:1)得到黄色油状物2-溴-1-氟-3-(甲氧基甲基)苯(415毫克，收率：84.35)。MS(ESI):m/z 219(M+H)+。在氮气保护下，将上述得到的2-溴-1-氟-3-(甲氧基甲基)苯(415毫克，1.89毫摩尔，1当量),双联频哪醇硼酸酯(722毫克，2.84毫摩尔，1.5当量),四三苯基磷钯(109毫克，0.09毫摩尔，0.1当量)和醋酸钾(557毫克，5.68毫摩尔，3当量)加入至10毫升甲苯中。混合物在110℃下搅拌16小时。然后，将该混合物冷却至室温，过滤。将滤液减压浓缩，得到黑色油状物2-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(545毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 267(M+H)+.
步骤21b:(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0504-48)的制备：合成方法如实施例18步骤18b，仅是将其中化合物0503-44替换为2-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0503-48)(90毫克，0.34毫摩尔，1.2当量),制备得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(125毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 635(M+H)+。
步骤21c:-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物48)的制备：将(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0504-48)(125毫克，0.197毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷中。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解，加入N,N-二异丙基乙胺(76毫克，0.591毫摩尔，3.0当量)。将丙烯酰氯(21毫克，0.236毫摩尔，1.2当量)加入至混合物中。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用高效液相色谱纯化，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(26毫克，收率：22.41％)。MS(ESI):m/z 589(M+H)+.熔点：134～135℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.37(t,J＝17.7Hz,2H),7.50(dd,J＝13.8,7.8Hz,1H),7.26(m,3H),6.84(s,1H),6.20(d,J＝16.1Hz,1H),5.76(d,J＝10.5Hz,1H),4.93(d,J＝53.7Hz,1H),4.33(m,2H),4.06(d,J＝34.5Hz,3H),3.63(dd,J＝105.5,36.5Hz,2H),3.07(d,J＝40.6Hz,4H),2.73(s,1H),1.97(d,J＝34.4Hz,3H),1.34(m,3H),1.07(s,3H),0.84(d,J＝6.6Hz,3H).
实施例22：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物49)的制备(按照方案五线路制备)
步骤22a：(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)硼酸(化合物0502-49)的制备：氮气保护下，0℃下，向乙醇(15毫升)中加入钠氢(1.5克，37.6毫摩尔，10.0当量)，混合物在室温下搅拌1.0小时。然后将2-溴-1-(溴甲基)-3-氟苯(1克，3.76毫摩尔，1.0当量)加入上述反应体系，并使混合物在室温下搅拌2.0小时。反应液用水和乙酸乙酯萃取，将有机相干燥并减压浓缩。残留物用硅胶柱(石油醚)纯化，得到黄色油状产物2-溴-1-(乙氧基甲基)-3-氟苯(610毫克，收率：69.6％)。在氮气保护下，在-70℃，向上述得到的2-溴-1-(乙氧基甲基)-3-氟苯(740毫克，3.15毫摩尔，1.0当量)的甲苯(10毫升)溶液中滴加正丁基锂(2.36毫升，3.73毫摩尔，1.2当量)，混合物在-70℃下搅拌0.5小时。然后在-70℃下滴加硼酸三甲酯(425毫克，4.09毫摩尔，1.3当量)的甲苯(1毫升)溶液，混合物搅拌1小时。向反应液中加入2M氢氧化钠溶液调节pH＝10，混合物用石油醚萃取。分液后，水相用1M盐酸调节pH＝5并用乙酸乙酯萃取，将所得有机相干燥并减压浓缩。残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。
步骤22b：(3S)-4-(7-(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0504-49)的制备：在氮气保护下，将(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)硼酸(0502-49)(100毫克，0.508毫摩尔，3.0当量)，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(90毫克，0.169毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(19.5毫克，0.0169毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(36毫克，0.338毫摩尔，2.0当量)加入到10毫升乙腈和2毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下搅拌过夜。反应液冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，减压浓缩，残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝100/1至20/1)得到黄色固体(3S)-4-(7-(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(90毫克，收率：82.3％)。MS(ES+):m/z＝649(M+H)+。
步骤22c：7-(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0505-49)的制备：合成方法如实施例18步骤18c，仅是将其中化合物0504-44替换为((3S)-4-(7-(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0504-49)(90毫克，0.14毫摩尔，1.0当量)，制备得到产物，不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝549(M+H)+。
步骤22d：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物49)的制备：合成方法如实施例18步骤18d，仅是将其中化合物0505-44替换为7-(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0505-49)，制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-(乙氧基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(51毫克，收率：60.5％)。MS(ES+):m/z＝603(M+H)+.熔点：115～120℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.37(dd,J＝23.4,7.5Hz,2H),7.50(dd,J＝13.9,7.9Hz,1H),7.26(m,3H),6.86(d,J＝11.0Hz,1H),6.21(d,J＝16.3Hz,1H),5.77(dd,J＝10.5,2.0Hz,1H),4.93(d,J＝49.1Hz,1H),4.34(dd,J＝40.7,27.4Hz,2H),4.09(dd,J＝42.2,10.8Hz,3H),3.62(dd,J＝115.8,30.8Hz,2H),3.17(dd,J＝13.3,7.3Hz,3H),2.68(d,J＝38.8Hz,1H),1.99(d,J＝26.2Hz,3H),1.35(m,3H),1.06(d,J＝3.9Hz,3H),0.91(m,6H).
实施例23：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物50)的制备(按照方案五线路制备)
步骤23a：2-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0503-50)的制备:往氢化钠(60％，178毫克，4.48毫摩尔，2.0当量)在四氢呋喃(8毫升)的混合物中加入异丙醇(0.34毫升，4.48毫摩尔，2.0当量)，混合物在室温下搅拌20分钟。加入2-溴-1-(溴甲基)-3-氟苯(0.6g，2.24毫摩尔，1.0当量)。混合物再搅拌2.5小时。加入饱和氯化铵水溶液(20毫升)淬灭反应。水层用乙酸乙酯(20毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物经硅胶柱纯化(石油醚∶乙酸乙酯20∶1)，得到浅黄色油状物2-溴-1-氟-3-(异丙氧基甲基)苯(270mg，产率：49％)。LCMS(ESI)：m/z 248[M+1]+。在-78℃，氮气氛围下，往上述得到的2-溴-1-氟-3-(异丙氧基甲基)苯(0.27克，1.093毫摩尔，1.0当量)在四氢呋喃(7毫升)的混合物中加入正丁基锂(1.6M己烷溶液，0.75毫升，1.202毫摩尔，1.1当量)。混合物搅拌40分钟。加入2-甲氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0.36毫升，2.186毫摩尔，2.0当量)，然后在-78℃下再搅拌1小时。加入饱和氯化铵溶液(20毫升)淬灭反应。水层用乙酸乙酯(20毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到浅黄色油状物2-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0.354克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 295[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)。
步骤23b：(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0504-50)的制备:合成方法如实施例18步骤18b，仅是将其中化合物0503-44替换为2-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0503-50)(74.9毫克，0.255毫摩尔，1.5当量)，制备得到淡黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(50毫克，收率：44％)。LCMS(ESI)：m/z 663[M+1]+；TLC：Rf0.5(二氯甲烷：甲醇＝20：1)。
步骤23c：6-氟-7-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0505-50)(0的制备:合成方法如实施例18步骤18c，仅是将其中化合物0504-44替换为(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0504-50)(50毫克，0.075毫摩尔，1.0当量)，制备得到无色油状物6-氟-7-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(25毫克，收率：60％)。LCMS(ESI)：m/z 563[M+1]+；TLC：Rf0.3(二氯甲烷：甲醇＝10：1)。
步骤23d：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物50)的制备:合成方法如实施例18步骤18d，仅是将其中化合物0505-44替换为6-氟-7-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0505-50)，制备得到白色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(异丙氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(8毫克，收率：30％)。LCMS(ESI)：m/z 617[M+1]+；TLC：Rf0.6(二氯甲烷：甲醇＝10：1)；熔点：118-122℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.38(t,J＝12.3Hz,2H),7.48(dd,J＝14.0,7.7Hz,1H),7.26(m,3H),6.87(m,1H),6.21(d,J＝15.6Hz,1H),5.77(d,J＝10.5Hz,1H),4.91(d,J＝31.6Hz,1H),4.19(m,5H),3.72(d,J＝37.0Hz,2H),3.23(dd,J＝31.5,25.2Hz,2H),2.66(s,1H),1.96(m,3H),1.29(m,9H),0.87(dd,J＝13.0,6.4Hz,6H).
实施例24：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2-羟基乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物52)的制备(按照方案五线路制备)
步骤24a：2-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0503-52)的制备:2-(2-溴-3-氟苯基)乙烷-1-醇(450毫克，2.0毫摩尔，1.0当量)，溴甲醚(325毫克，2.6毫摩尔，1.3当量)和N,N-二异丙基乙胺(516毫克，4.0毫摩尔，2.0当量)的二氯甲烷(8毫升)混合物在室温下搅拌过夜。混合物用饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝50/1到25/1)得到无色油状物2-溴-1-氟-3-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)苯(360毫克，收率：66.7％)。氮气保护下，上述得到的2-溴-1-氟-3-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)苯(200毫克，0.76毫摩尔，1.0当量)，双联硼酸频那醇酯(290克，1.14毫摩尔，1.5当量)，醋酸钾(223毫克，2.28毫摩尔，3.0当量)和四三苯基膦钯(88毫克，0.076毫摩尔，0.1当量)的甲苯(10毫升)混合物回流过夜。冷却到室温后，将反应液过滤，滤液减压浓缩得到粗产品2-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷，该产品不需要进一步纯化直接用于下一步。
步骤24b：(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0504-52)的制备:合成方法如实施例18步骤18b，仅是将其中化合物0503-44替换为2-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0503-52)(93毫克，0.30毫摩尔，2.0当量)，制备得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(75毫克，收率：73.5％)。MS(ES+):m/z＝679(M+H)+.
步骤24c：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2-羟基乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物52)的制备:
向(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-(2-(甲氧基甲氧基)乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0504-52)(75毫克，0.14毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(6毫升)溶液中加入三氟乙酸(3毫升)，混合物室温下搅拌过夜。减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(6毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(50毫克，0.39毫摩尔，3.0当量)，冰水浴下，往混合物中滴加丙烯酰氯(12毫克，0.13毫摩尔，1.2当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液。混合物搅拌30分钟。加入水，再加入二氯甲烷萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝12/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(2-羟基乙基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(40毫克，收率：61.5％)。MS(ES+):m/z＝589(M+H)+。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.36(t,J＝8.2Hz,2H),7.40(dd,J＝13.9,7.7Hz,1H),7.15(m,3H),6.84(m,1H),6.20(d,J＝17.9Hz,1H),5.75(m,1H),4.93(t,J＝32.9Hz,1H),4.36(m,3H),4.08(dd,J＝58.8,11.1Hz,1H),3.65(m,2H),3.18(dd,J＝16.8,9.6Hz,2H),2.75(m,1H),2.54(m,1H),2.37(ddd,J＝48.3,18.3,7.2Hz,1H),1.89(dd,J＝68.8,5.8Hz,3H),1.32(m,3H),1.06(dd,J＝24.1,5.7Hz,3H),0.92(m,3H).
实施例25：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物58)的制备(按照方案六线路制备)
步骤25a：(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基)硼酸(化合物0602-58)的制备:2-溴-1-(溴甲基)-3-氟苯(1.0克，3.73毫摩尔，1.0当量)和甲硫醇钠(783毫克，11.2毫摩尔，1.0当量)的乙腈(20毫升)混合物在室温搅拌3小时。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝1000/1到500/1)得到无色油状物(2-溴-3-氟苄基)(甲基)硫烷(600毫克，收率:68.4％)。氮气保护下，-70℃下，向上述得到的(2-溴-3-氟苄基)(甲基)硫烷(300毫克，1.27毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(15毫升)溶液中滴加正丁基锂(98毫克，1.53毫摩尔，1.2当量)。加完后，混合物在零下72℃搅拌1小时，然后在干冰乙醇浴下，滴加硼酸三甲酯(172毫克，1.65毫摩尔，1.3当量)的四氢呋喃(1毫升)溶液。加完后，混合物在零下72℃搅拌30分钟。反应混合物用氯化铵水溶液淬灭，并搅拌10分钟。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤，减压浓缩得到白色固体(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基)硼酸(120毫克，收率:47.0％)。
步骤25b：(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基]-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0604-58)的制备:氮气保护下，将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(98毫克，0.184毫摩尔，1.0当量)，(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基)硼酸(0602-58)(120毫克，0.6毫摩尔，3.20当量)，碳酸钠(80毫克，0.754毫摩尔，3.0当量)和四(三苯基膦)钯(10.6毫克，0.0092毫摩尔，0.05当量)的乙腈(20毫升)和水(2毫升)的混合物在80℃下搅拌过夜。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤。减压除去溶剂，残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝1/2)得淡黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基]-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(43毫克，收率：35.8％)。MS(ES+):m/z＝651(M+H)+。
步骤25c：6-氟-7-(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0605-58)的制备:往(3S)-4-(6-氟-7-(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基]-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0604-58)(43毫克，0.066毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升)，反应在常温下搅拌30分钟。将混合物减压浓缩得到黄色油状物6-氟-7-(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(29毫克，粗品)，直接用于下一步没有进一步纯化。MS(ES+):m/z＝551(M+H)+。
步骤25d：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物58)的制备:往6-氟-7-(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0605-58)(29毫克，粗品)和N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升)的乙腈(5毫升)混合物中滴加丙烯酰氯(7.1毫克，0.079毫摩尔，1.50当量)。反应在常温下搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：乙酸乙酯/甲醇＝20/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-((甲硫基)甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(21毫克，收率：65.6％)。MS(ES+):m/z＝605(M+H)+；熔点:142-151℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.35(d,J＝37.0Hz,2H),7.45(d,J＝6.8Hz,1H),7.22(t,J＝8.9Hz,3H),6.84(s,1H),6.20(d,J＝16.9Hz,1H),5.76(d,J＝10.6Hz,1H),4.93(d,J＝60.0Hz,1H),4.33(m,2H),4.09(d,J＝66.4Hz,1H),3.73(d,J＝59.1Hz,2H),3.49(d,J＝12.8Hz,2H),3.11(s,1H),2.77(d,J＝45.6Hz,1H),1.90(t,J＝32.9Hz,3H),1.68(s,3H),1.33(m,3H),1.05(s,3H),0.84(d,J＝6.2Hz,3H).
实施例26：2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苯甲酸乙酯(化合物63)的制备(按照方案七线路制备)
步骤26a：3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯甲酸乙酯(化合物0703-63)的制备:将2-溴-3-氟苯甲酸(1.0克，4.58毫摩尔，1.0当量)和氯化亚砜(546毫克，4.58毫摩尔，1.0当量)的乙醇(20毫升)混合物在85℃搅拌3小时。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝500/1到100/1)得到无色油状物2-溴-3-氟苯甲酸乙酯(1.05克，收率:93.7％)。氮气保护下，将上述得到的2-溴-3-氟苯甲酸乙酯(600毫克，2.44毫摩尔，1.0当量)，双联硼酸频那醇酯(1.12克，4.39毫摩尔，1.80当量)，乙酸钾(717毫克，7.32毫摩尔，3.0当量)和四(三苯基膦)钯(141毫克，0.122毫摩尔，0.05当量)的甲苯(30毫升)混合物在115℃搅拌过夜。冷却到室温后，将混合物过滤，滤液减压浓缩得到棕色油状物3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯甲酸乙酯(500毫克，粗品)。
步骤26b：(3S)-4-(7-(2-(乙氧基羰基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0704-63)的制备:氮气保护下，将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(80毫克，0.151毫摩尔，1.0当量)，3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯甲酸乙酯(0703-63)(177毫克，0.604毫摩尔，4.0当量)，碳酸钠(48毫克，0.453毫摩尔，3.0当量)和四(三苯基膦)钯(9毫克，0.0075毫摩尔，0.05当量)的乙腈(15毫升)和水(1.5毫升)的混合物在80℃下过夜。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤。减压除去溶剂，残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝18/1)得淡黄色固体(3S)-4-(7-(2-(乙氧基羰基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(74毫克，收率：74.1％)。MS(ES+):m/z＝663(M+H)+。
步骤26c：3-氟-2-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)苯甲酸乙酯(化合物0705-63)的制备:往(3S)-4-(7-(2-(乙氧基羰基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0704-63)(74毫克，0.112毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升)，反应在常温下搅拌30分钟。将混合物减压浓缩得到黄色油状物3-氟-2-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)苯甲酸乙酯(35毫克，粗品)，没有进一步纯化，直接用于下一步反应。MS(ES+):m/z＝563(M+H)+。
步骤26d：2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苯甲酸乙酯(化合物63)的制备:往3-氟-2-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)苯甲酸乙酯(0705-63)(35mg，粗品)和N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升)的乙腈(5毫升)混合物中滴加丙烯酰氯(8.4毫克，0.093毫摩尔，1.50当量)。反应在常温下搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝16/1)得黄色固体2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苯甲酸乙酯(13毫克，收率：34.2％)。MS(ES+):m/z＝617(M+H)+；熔点:121-133℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.36(d,J＝4.6Hz,2H),7.79(dd,J＝31.7,7.5Hz,1H),7.63(m,2H),7.16(s,1H),6.86(d,J＝10.3Hz,1H),6.21(d,J＝16.0Hz,1H),5.76(d,J＝10.5Hz,1H),4.91(d,J＝28.5Hz,1H),4.18(m,5H),3.69(s,2H),3.16(s,1H),2.69(d,J＝6.1Hz,1H),1.88(s,3H),1.32(dd,J＝15.1,8.1Hz,3H),1.02(m,6H),0.86(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例27：2-(2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苯基)乙酰胺(化合物65)的制备(按照方案四线路制备)
步骤27a：2-(3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)乙腈(化合物0403-65)的制备：在氮气保护下，将2-(2-溴-3-氟苯基)乙腈(432毫克，2毫摩尔，1当量)，双联频哪醇硼酸酯(762毫克，3毫摩尔，1.5当量),四三苯基磷钯(115毫克，0.1毫摩尔，0.05当量)和醋酸钾(588毫克，6毫摩尔，3当量)加入至10毫升甲苯中。混合物在110℃下搅拌16小时。然后，将该混合物冷却至室温，过滤。将滤液减压浓缩，得到黑色油状物2-(3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)乙腈(524毫克，粗品)。MS(ESI):m/z262(M+H)+。
步骤27b：(3S)-4-(7-(2-(2-氨基-2-氧代乙基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0404-65)的制备。将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(150毫克，0.283毫摩尔，1当量),2-(3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)乙腈(0403-65)(89毫克，0.34毫摩尔，1.2当量),四三苯基磷钯(33毫克，0.0283毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(90毫克，0.849毫摩尔，3当量)加入至10毫升乙腈和1毫升水的混合溶液中。混合物在82℃下搅拌16小时。然后，将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过薄层厚制备板纯化残留物(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝15/1)，得到黄色固体(3S)-4-(7-(2-(2-氨基-2-氧代乙基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(56毫克，收率：30.77％)。MS(ESI):m/z 648(M+H)+。
步骤27c：2-(2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苯基)乙酰胺化合物65的制备)：将(3S)-4-(7-(2-(2-氨基-2-氧代乙基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0404-65)(56毫克，0.086毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷中。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N,N-二异丙基乙胺(33毫克，0.258毫摩尔，3.0当量)加入至混合物中。将丙烯酰氯(7.8毫克，0.086毫摩尔，1.0当量)加入至混合物中。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用薄层硅胶色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝15/1)，得到黄色固体2-(2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苯基)乙酰胺(50毫克，收率：96.15％)。MS(ESI):m/z 602(M+H)+.熔点：164～165℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.34(m,2H),7.42(m,1H),7.15(dd,J＝34.2,24.9Hz,4H),6.84(s,1H),6.66(s,1H),6.20(d,J＝17.1Hz,1H),5.76(d,J＝10.5Hz,1H),4.92(d,J＝43.6Hz,1H),4.32(dd,J＝38.8,25.4Hz,2H),4.09(d,J＝65.6Hz,1H),3.69(dd,J＝42.0,28.2Hz,2H),3.14(dd,J＝36.4,15.0Hz,3H),2.72(m,1H),1.90(t,J＝32.8Hz,3H),1.33(m,3H),1.06(dd,J＝20.2,6.0Hz,3H),0.83(d,J＝6.3Hz,3H).
实施例28：N-(2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苄基)乙酰胺(化合物67)的制备(按照方案八线路制备)
步骤28a：N-(3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苄基)乙酰胺(化合物0803-67)的制备:向2-溴-1-(溴甲基)-3-氟苯(1.00克，3.73毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(20毫升)混合物中加入六亚甲基四胺(783毫克，5.59毫摩尔，1.50当量)，反应在室温下搅拌过夜。然后滴加MeOH/HCl溶液。30分钟后，加入水和乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩，得到白色固体(2-溴-3-氟苯基)甲胺(500毫克，收率:65.5％)。MS(ES+):m/z＝204(M+H)+。将上述得到的(2-溴-3-氟苯基)甲胺(300毫克，1.47毫摩尔，1.0当量)，乙酸(135毫克，2.20毫摩尔，1.50当量)，三乙胺(299毫克，2.94毫摩尔，2.0当量)的混合物和HATU(612毫克，1.62毫摩尔，1.10当量)的N,N二甲基甲酰胺(15毫升)的混合物在室温下搅拌2小时。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩，得到透明油状物N-(2-溴-3-氟苄基)乙酰胺(160毫克，收率:44.4％)。MS(ES+):m/z＝246(M+H)+。氮气保护下，将上述得到的N-(2-溴-3-氟苄基)乙酰胺(160毫克，0.653毫摩尔，1.0当量),双联硼酸频那醇酯(298毫克，1.70毫摩尔，1.80当量)，乙酸钾(192毫克，1.96毫摩尔，3.0当量)和四(三苯基膦)钯(40毫克，0.03毫摩尔，0.05当量)的甲苯(15毫升)混合物在115℃搅拌过夜。冷却到室温后，将混合物过滤，滤液减压浓缩得到棕色油状物N-(3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苄基)乙酰胺(140毫克，粗品)。
步骤28b：(3S)-4-(7-(2-(乙酰氨基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0804-67)的制备:氮气保护下，将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(125毫克，0.239毫摩尔，1.0当量),N-(3-氟-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苄基)乙酰胺(0803-67)(140毫克，0.478毫摩尔，2.0当量)，碳酸钠(76毫克，0.717毫摩尔，3.0当量)和四(三苯基膦)钯(14毫克，0.012毫摩尔，0.05当量)的乙腈(15毫升)和水(2毫升)的混合物在80℃下搅拌过夜。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，减压除去溶剂。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得淡黄色固体(3S)-4-(7-(2-(乙酰氨基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(30毫克，收率：18.9％)。MS(ES+):m/z＝662(M+H)+。
步骤28c：N-(3-氟-2-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)苄基)乙酰胺(化合物0805-67)的制备:向(3S)-4-(7-(2-(乙酰氨基甲基)-6-氟苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0804-67)(30毫克，0.045毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升)，反应在室温下搅拌30分钟。将混合物减压浓缩得黄色油状物N-(3-氟-2-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)苄基)乙酰胺(27毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝562(M+H)+。
步骤28d：N-(2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苄基)乙酰胺(化合物67)的制备:向N-(3-氟-2-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)苄基)乙酰胺(27毫克，粗品)的乙腈(5毫升)混合物中滴加丙烯酰氯(6.5毫克，0.072毫摩尔，1.50当量)。混合物在常温下搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得黄色固体N-(2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-3-氟苄基)乙酰胺(17毫克，收率：58.6％)。MS(ES+):m/z＝616(M+H)+。熔点：121-133℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.23(m,3H),7.44(m,1H),7.21(ddd,J＝19.3,14.8,5.3Hz,2H),6.92(m,2H),6.20(d,J＝15.3Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),5.00(d,J＝90.6Hz,1H),4.26(m,3H),3.98(dd,J＝23.0,7.4Hz,2H),3.69(dd,J＝59.3,23.6Hz,2H),3.08(m,1H),2.59(d,J＝48.9Hz,1H),2.00(dd,J＝13.5,6.0Hz,3H),1.77(d,J＝31.6Hz,3H),1.33(dd,J＝16.8,10.9Hz,3H),1.02(dd,J＝36.9,5.7Hz,3H),0.77(dt,J＝11.7,6.5Hz,3H).
实施例29：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物70)的制备(按照方案九线路制备)
步骤29a：6-氟苯并呋喃-7-硼酸(化合物0902-70)的制备:2-溴-3-氟苯酚(1克，5.2毫摩尔，1.0当量)，2-溴-1,1-二甲氧基乙烷(1.3克，7.8毫摩尔，1.5当量)和碳酸钾(1克，7.8毫摩尔，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20毫升)混合物在135℃下搅拌3小时。冷却到室温后，将混合物倒入水中，加入乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到黄色油状物2-溴-1-(2,2-二甲氧基乙氧基)-3-氟苯(1.4克，收率：95.9％)。上述得到的2-溴-1-(2,2-二甲氧基乙氧基)-3-氟苯(1.4克，5.0毫摩尔，1.5当量)和多聚磷酸(1.7克，5.0毫摩尔，1.0当量)的甲苯(30毫升)混合物回流过夜。冷却到室温后，混合物用水洗。有机层减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚)得到无色油状物7-溴-6-氟苯并呋喃(1.0克，收率：92.6％)。氮气保护下，在-70℃向上述得到的7-溴-6-氟苯并呋喃(215毫克，1.0毫摩尔，1.0当量)的甲苯(6毫升)溶液中滴加1.6摩尔每升正丁基锂(0.9毫升，1.4毫摩尔，1.4当量)。滴加完后，混合物搅拌1小时。往混合物中滴加硼酸三甲酯(156毫克，1.5毫摩尔，1.5当量)的甲苯(0.5毫升)溶液，混合物继续搅拌30分钟。反应液用2摩尔每升的氢氧化钠水溶液淬灭，混合物分液。往水层中加入2摩尔每升的盐酸溶液调节pH<2，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到黄色固体6-氟苯并呋喃-7-硼酸(170毫克，收率：94.4％)。
步骤29b：(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-70)的制备:氮气保护下，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(80毫克，0.15毫摩尔，1.0当量)，6-氟苯并呋喃-7-硼酸(化合物0902-70)(82毫克，0.45毫摩尔，3.0当量)，碳酸钠(48毫克，0.45毫摩尔，3.0当量)和四三苯基膦钯(17毫克，0.015毫摩尔，0.1当量)的乙腈/水＝10/1(11毫升)混合物在82℃下搅拌过夜。冷却到室温后，混合物倒入水中，加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：乙酸乙酯/甲醇＝100/1)得黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(75毫克，收率：78.9％)。MS(ES+):m/z＝631(M+H)+.。
步骤29c：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物70)的制备:向(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-70)(75毫克，0.12毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(6毫升)溶液中加入三氟乙酸(2毫升)，混合物室温下搅拌过夜。减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(6毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(46毫克，0.36毫摩尔，3.0当量)，冰水浴下，往混合物中滴加丙烯酰氯(16毫克，0.18毫摩尔，1.5当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液。混合物搅拌30分钟。加入水，再加入二氯甲烷萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝12/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(36毫克，收率：51.4％)。MS(ES+):m/z＝585(M+H)+。1HNMR(500MHz,DMSO)δ8.40(m,2H),7.94(d,J＝1.7Hz,1H),7.79(dd,J＝8.5,5.2Hz,1H),7.26(m,1H),7.18(d,J＝4.9Hz,1H),7.01(m,1H),6.86(d,J＝11.7Hz,1H),6.21(d,J＝15.8Hz,1H),5.76(m,1H),4.96(d,J＝40.4Hz,1H),4.35(dd,J＝28.6,13.3Hz,2H),4.11(m,1H),3.65(m,2H),3.16(m,1H),2.77(m,1H),1.94(d,J＝2.5Hz,3H),1.35(dd,J＝21.1,6.6Hz,3H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),0.94(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例30：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2,3-二氟-6-(甲硫基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物22)的制备(按照方案二线路制备)
步骤30a：(2-溴-3,4-二氟苯基)(甲基)硫烷(化合物0201-22)的制备:在50℃下，将亚硝酸叔丁酯(3.95克,38.4毫摩尔，8当量)缓慢滴加到2-溴-3,4-二氟苯胺(1克，4.8毫摩尔，1当量)的二甲基二硫醚(542毫克，5.77毫摩尔，1.2当量)溶液。混合物加热至95℃并在95℃下搅拌3小时。混合物冷却至室温。混合物用石油醚萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩并用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚)得到黄色油状物(2-溴-3,4-二氟苯基)(甲基)硫烷(767毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 239(M+H)+.
步骤30b：(2,3-二氟-6-(甲硫基)苯基)硼酸(化合物0202-22)的制备:在氮气保护下，在-70℃下将正丁基锂(1.5毫升，1.6摩尔/升的正己烷溶液，2.4毫摩尔，1.2当量)滴加至(2-溴-3,4-二氟苯基)(甲基)硫烷(0201-22)(476毫克，2毫摩尔，1当量)的5毫升甲苯溶液。混合物在-70℃下搅拌30分钟。将硼酸三甲酯(270毫克，2.6毫摩尔，1.3当量)滴加至混合物。混合物在-70℃下额外搅拌30分钟。然后，用2摩尔/升的氢氧化钠水溶液淬灭反应。混合物用石油醚萃取。水相的pH值用2摩尔/升盐酸调节至2。混合物用乙酸乙酯和水萃取。有机相用无水硫酸钠干燥并浓缩，得到黄色固体(2,3-二氟-6-(甲硫基)苯基)硼酸(254毫克，粗品)。MS(ESI):m/z 205(M+H)+.
步骤30c：(3S)-4-(7-(2,3-二氟-6-(甲硫基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0204-22)的制备:将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(100毫克，0.188毫摩尔，1当量)，(2,3-二氟-6-(甲硫基)苯基)硼酸(0202-22)(254毫克，1.257毫摩尔，6当量),四三苯基磷钯(22毫克，0.0188毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(40毫克，0.376毫摩尔，2当量)加入至10毫升乙腈和1毫升水的混合溶液中。混合物在82℃下搅拌16小时。然后，将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过薄层厚制备板纯化残留物(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝20/1)，得到黄色固体(3S)-4-(7-(2,3-二氟-6-(甲硫基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(90毫克，粗品)。MS(ESI):m/z655(M+H)+.
步骤30d：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2,3-二氟-6-(甲硫基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物22)的制备：将(3S)-4-(7-(2,3-二氟-6-(甲硫基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0204-22)(90毫克，0.137毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N,N-二异丙基乙胺(53毫克，0.413毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(12.4毫克，0.137毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，将有机相减压浓缩，并通过薄层厚制备板纯化残留物(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝20/1)，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2,3-二氟-6-(甲硫基)苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(50毫克，收率：59.76％)。MS(ESI):m/z 609(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.40(s,2H),7.58(s,1H),7.23(d,J＝35.5Hz,2H),6.87(s,1H),6.22(s,1H),5.77(s,1H),4.95(d,J＝29.4Hz,1H),4.32(s,2H),4.09(d,J＝59.2Hz,1H),3.85–3.50(m,2H),3.21–3.05(m,1H),2.73(s,1H),2.33(s,3H),1.93(s,3H),1.35(s,3H),1.08(s,3H),0.92(s,3H).
实施例31：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并[b]噻吩-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物71)的制备(按照方案九线路制备)
步骤31a：7-溴-6-氟苯并[b]噻吩(化合物0901-71)的制备:氮气保护下，将2-溴-3-氟苯硫醇(940毫克，5.0毫摩尔，1.0当量)，2-溴-1,1-二甲氧基乙烷(1.1克，6.5毫摩尔，1.3当量)和碳酸钾(966毫克，7.0毫摩尔，1.4当量)加入到7毫升N,N-二甲基甲酰胺中，混合物在室温下搅拌两小时。混合物用乙酸乙酯稀释，经水和饱和食盐水洗涤，有机相减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝30/1到20/1)纯化，得到黄色液体(2-溴-3-氟苯基)(2,2-二甲氧基乙基)硫烷(841毫克，收率：57％)。MS(ES+):m/z＝295(M+H)+.氮气保护下，将上述制备的(2-溴-3-氟苯基)(2,2-二甲氧基乙基)硫烷(841毫克，2.86毫摩尔，1.0当量)，多聚磷酸(1.64克，4.86毫摩尔，1.7当量)加入到40毫升干燥甲苯中，混合物在120℃下搅拌过夜。混合物用乙酸乙酯稀释，经水洗。将有机相减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱(洗脱剂为：石油醚)纯化，得到黄色液体7-溴-6-氟苯并[b]噻吩(386毫克，收率：58％)。MS(ES+):m/z＝231(M+H)+.
步骤31b：(S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-71的制备):在氮气的氛围下，将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(300毫克，0.566毫摩尔，1当量)，六甲基二锡(278毫克，1.132毫摩尔，2当量)和四三苯基磷钯(65毫克，0.05毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(10毫升)。混合物在110℃下搅拌2小时。混合物冷却至室温。混合物浓缩和用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚/乙酸乙酯＝5/1-1/2)得到黄色固体(S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(321毫克，收率:85.94％)。MS(ESI):m/z 661(M+H)+.
步骤31b：(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并[b]噻吩-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-71)的制备:氮气保护下，将(S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-71)150毫克，0.23毫摩尔，1.0当量)，7-溴-6-氟苯并[b]噻吩(化合物0901-71)(116毫克，0.5毫摩尔，2.2当量)，四三苯基膦钯(27毫克，0.023毫摩尔，0.1当量)和碘化亚铜(4.4毫克，0.023毫摩尔，0.1当量)加入到50毫升干燥甲苯中，混合物在110℃下搅拌过夜。混合物用乙酸乙酯稀释。有机相经水洗，减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱(展开剂为：乙酸乙酯/甲醇＝70/1到50/1)纯化，得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并[b]噻吩-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(57毫克，收率：38％)。MS(ES+):m/z＝647(M+H)+.
步骤31c：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并[b]噻吩-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物71)的制备:将(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并[b]噻吩-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-71)(60毫克，0.093毫摩尔，1.0当量)溶解于12毫升二氯甲烷中，滴加1.5毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌两小时。混合物减压浓缩至干，残留物溶解于20毫升四氢呋喃中，加入2毫升二异丙基乙胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(25毫克，0.28毫摩尔，3.0当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。混合物搅拌半小时，用乙酸乙酯稀释。有机相经过水洗，减压浓缩，残留物用制备薄层色谱纯化(展开剂为：乙酸乙酯/甲醇＝20/1)得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并[b]噻吩-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(35毫克，收率：62％)。MS(ES+):m/z＝601(M+H)+.熔点：148℃～150℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.39(t,J＝19.2Hz,2H),8.02(dd,J＝8.4,4.8Hz,1H),7.63(d,J＝5.3Hz,1H),7.41(dd,J＝19.2,7.5Hz,2H),7.21(d,J＝4.7Hz,1H),6.85(d,J＝11.7Hz,1H),6.20(d,J＝16.3Hz,1H),5.75(d,J＝10.5Hz,1H),4.95(d,J＝48.0Hz,1H),4.35(m,2H),4.10(m,1H),3.73(d,J＝51.9Hz,2H),3.09(s,1H),2.76(s,1H),2.01(d,J＝4.5Hz,3H),1.34(dd,J＝24.5,6.3Hz,3H),1.05(d,J＝6.5Hz,3H),0.87(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例32：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物69)的制备(按照方案九线路制备)
步骤32a：5-氟-4-碘苯并[d][1,3]二氧杂戊烷(化合物0901-69)的制备:氮气保护下，将4-氟-3-碘苯-1,2-二酚(500毫克，2.0毫摩尔，1.0当量)，溴氯甲烷(390毫克，3.0毫摩尔，1.5当量)和碳酸铯(1.3克，4.0毫摩尔，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20毫升)混合物100℃下搅拌过夜。冷却到室温后，将混合物倒入水中，然后加入石油醚/乙酸乙酯＝1/1萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝100/1到50/1)得到白色固体5-氟-4-碘苯并[d][1,3]二氧杂戊烷(524毫克，收率：80.2％)。
步骤32b：(3S)-4-(6-氟-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-69)的制备:氮气保护下，(S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-71)(100毫克，0.15毫摩尔，1.0当量)，5-氟-4-碘苯并[d][1,3]二氧杂戊烷(化合物0901-69)(42毫克，0.15毫摩尔，1.0当量)，碘化亚铜(2.9毫克，0.015毫摩尔，0.1当量)和四三苯基膦钯(17.5毫克，0.015毫摩尔，0.1当量)的甲苯(8毫升)混合物在110℃下搅拌过夜。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(70毫克，收率：72.8％)。MS(ES+):m/z＝635(M+H)+.
步骤32c：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物69)的制备:向(3S)-4-(6-氟-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-69)(70毫克，0.1毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(6毫升)溶液加入三氟乙酸(3毫升)，混合物室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(6毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(43毫克，0.33毫摩尔，3.0当量)，冰水浴下，往混合物中滴加丙烯酰氯(15毫克，0.17毫摩尔，1.5当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液。混合物搅拌30分钟。加入水，再加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：乙酸乙酯/甲醇＝12/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(47毫克，收率：72.3％)。MS(ES+):m/z＝589(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.38(m,2H),7.19(d,J＝4.9Hz,1H),7.00(dd,J＝8.5,4.1Hz,1H),6.84(m,1H),6.74(dd,J＝10.3,9.0Hz,1H),6.20(d,J＝16.6Hz,1H),6.00(d,J＝0.7Hz,2H),5.76(m,1H),4.94(dd,J＝21.6,18.6Hz,1H),4.33(m,2H),4.09(m,1H),3.62(m,2H),3.13(dd,J＝36.5,11.5Hz,1H),2.73(m,1H),1.90(d,J＝8.5Hz,3H),1.33(dd,J＝19.8,6.6Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.94(d,J＝6.6Hz,3H).
实施例33：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物72)的制备(按照方案九线路制备)
步骤33a：6-氟-5-碘-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英(化合物0901-72)的制备:氮气保护下，在-70℃向4-氟-1,2-二甲氧基苯(1.0克，6.4毫摩尔，1.0当量)和四甲基乙二胺(743毫克，6.4毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(20毫升)溶液滴加1.6摩尔每升正丁基锂(5.6毫升，8.96毫摩尔，1.4当量)。滴加完后，混合物搅拌2小时。往混合物中滴加碘单质(2.0克，7.68毫摩尔，1.2当量)的四氢呋喃(20毫升)溶液，混合物继续搅拌1小时。反应液用氯化铵水溶液淬灭，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝200/1到50/1)得到无色油状物1-氟-2-碘-3,4-二甲氧基苯(1.2克，收率：66.7％)。氮气保护下，在0℃向上述制得的1-氟-2-碘-3,4-二甲氧基苯(1.2克，4.3毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(20毫升)溶液加入三溴化硼(3.2克，12.9毫摩尔，3.0当量)，混合物室温下搅拌3小时。反应液用水淬灭，过滤后，滤液用乙酸乙酯萃取。有机层干燥、减压浓缩得到棕色固体4-氟-3-碘苯-1,2-二酚(1.1克，收率：100％)。MS(ES+):m/z＝253(M+H)-.氮气保护下，将上述制得的4-氟-3-碘苯-1,2-二酚(500毫克，2.0毫摩尔，1.0当量)，1,2-二溴乙烷(560毫克，3.0毫摩尔，1.5当量)和碳酸铯(1.3克，4.0毫摩尔，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20毫升)混合物100℃下搅拌过夜。冷却到室温后，将混合物倒入水中，然后加入石油醚/乙酸乙酯＝1/1萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝100/1到50/1)得到白色固体6-氟-5-碘-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英(551毫克，收率：67.2％)。
步骤33b：6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-硼酸(化合物0902-72)的制备:氮气保护下，在-70℃向6-氟-5-碘-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英(化合物0901-72)(280毫克，1.0毫摩尔，1.0当量)的甲苯(8毫升)溶液滴加1.6摩尔每升正丁基锂(0.75毫升，1.2毫摩尔，1.2当量)。滴加完后，混合物搅拌1小时。往混合物中滴加硼酸三甲酯(125毫克，1.2毫摩尔，1.2当量)的甲苯(0.5毫升)溶液，混合物继续搅拌30分钟。反应液用2摩尔每升的氢氧化钠水溶液淬灭，混合物分液。往水层中加入2摩尔每升的盐酸溶液调节pH<2，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到无色液体6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-硼酸(160毫克，收率：80.8％)。
步骤33c：(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-72)的制备:氮气保护下，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(100毫克，0.19毫摩尔，1.0当量)，6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-硼酸(化合物0902-72)(113毫克，0.57毫摩尔，3.0当量)，碳酸钠(60毫克，0.57毫摩尔，3.0当量)和四三苯基膦钯(22毫克，0.019毫摩尔，0.1当量)的乙腈/水＝10/1(11毫升)混合物在82℃下搅拌过夜。冷却到室温后，混合物倒入水中，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：乙酸乙酯/甲醇＝100/1)得白色固体(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(65毫克，收率：53.3％)。MS(ES+):m/z＝649(M+H)+.
步骤33d：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物72)的制备:向(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-72)(65毫克，0.1毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(6毫升)溶液加入三氟乙酸(2毫升)，混合物室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(4毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(39毫克，0.3毫摩尔，3.0当量)。冰水浴下，往混合物中滴加丙烯酰氯(14毫克，0.15毫摩尔，1.5当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液。混合物搅拌30分钟。加入水，再加入二氯甲烷萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝12/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(32毫克，收率：53.3％)。MS(ES+):m/z＝603(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.36(dd,J＝41.3,6.5Hz,2H),7.20(d,J＝4.8Hz,1H),6.98(dd,J＝9.0,5.5Hz,1H),6.85(m,1H),6.77(t,J＝9.0Hz,1H),6.21(d,J＝16.0Hz,1H),5.77(dd,J＝10.5,2.0Hz,1H),4.94(d,J＝30.0Hz,1H),4.22(m,7H),3.65(m,2H),3.14(m,1H),2.73(m,1H),1.90(s,3H),1.34(dd,J＝16.8,6.6Hz,3H),1.09(d,J＝6.6Hz,3H),0.94(d,J＝6.6Hz,3H).
实施例34：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物73)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤34a：6-氟苯并呋喃-7-硼酸频那醇酯(化合物0903-73)的制备:将6-氟苯并呋喃-7-硼酸(化合物0902-70)(3.0克，16.7毫摩尔，1.0当量)，频哪醇(2.4克，20.0毫摩尔，1.2当量)和硫酸镁(1.0克)的乙酸乙酯(50毫升)混合物室温下搅拌过夜。混合物过滤，将滤液减压浓缩得到黄色固体6-氟苯并呋喃-7-硼酸频那醇酯(4.4克，收率：100％)。
步骤34b：2,5,6-三氯烟酰胺(化合物0108-73)的制备:干燥条件下，2,5,6-三氯烟酸(0107-73)(2.0克，8.8毫摩尔，1.0当量)的氯化亚砜(20毫升)溶液回流3小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(10毫升)，冰水浴条件下，将溶液滴加到稀氨水中。滴加完后，混合物搅拌30分钟。加入水，混合物过滤，滤饼用水洗，真空干燥白色固体2,5,6-三氯烟酰胺(1.56克，收率：78％)。MS(ES+):m/z＝225(M+H)+.
步骤34c：2,5,6-三氯-N-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酰基)烟酰胺(化合物0109-73)的制备:氮气保护下，2,5,6-三氯烟酰胺(0108-73)(1.56克，6.9毫摩尔，1.0当量)和草酰氯(1.76克，13.8毫摩尔，2.0当量)的四氢呋喃(30毫升)混合物75℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，冰水浴条件下，将2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺(0103-1)(1.0克，6.9毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃溶液(10毫升)滴入其中。滴加完后，混合物搅拌30分钟。加入乙酸乙酯，混合物用碳酸钠水溶液洗，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗产品2,5,6-三氯-N-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酰基)烟酰胺，该产品不需要进一步纯化直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝401(M+H)+.
步骤34d：6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物0110-73)的制备:氮气保护，冰水浴下，向2,5,6-三氯-N-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酰基)烟酰胺(2.6克，6.5毫摩尔，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50毫升)溶液分批加入60％氢化钠(520毫克，13.0毫摩尔，2.0当量)，混合物搅拌1小时。反应液用水淬灭并用石油醚洗涤。往水层中加入2摩尔每升盐酸调节pH＝7，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层干燥、减压浓缩得到黄色固体6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(1.4克，收率：58.3％)。MS(ES+):m/z＝365(M+H)+.
步骤34e：(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-73)的制备:氮气保护下，6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0110-73)(1.4克，3.8毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(2.5克，19.0毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(872毫克，5.7毫摩尔，1.5当量)的乙腈(20毫升)混合物85℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，冰水浴条件下，加入N,N-二异丙基乙胺(1.5克，11.4毫摩尔，3.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-1)(760毫克，3.8毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，然后混合物用水洗、饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝5/1到1/1)得到黄色固体(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(870毫克，收率：41.4％)。MS(ES+):m/z＝547(M+H)+.
步骤34f：(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-73)的制备:氮气保护条件下，(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-73)(150毫克，0.27毫摩尔，1.0当量)，6-氟苯并呋喃-7-硼酸频那醇酯(化合物0903-73)(108毫克，0.41毫摩尔，1.5当量)，碳酸钠(57毫克，0.54毫摩尔，2.0当量)和四三苯基膦钯(31毫克，0.027毫摩尔，0.1当量)的乙腈/水＝10/1(11毫升)混合物82℃下搅拌过夜。冷却到室温后，混合物倒入水中，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝1/2)得黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(130毫克，收率：73.4％)。MS(ES+):m/z＝647(M+H)+.
步骤34g：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物73)的制备:向(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-73)(130毫克，0.2毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(6毫升)溶液加入三氟乙酸(2毫升)，混合物室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(6毫升)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(77.4毫克，0.6毫摩尔，3.0当量)。冰水浴下，往混合物中滴加丙烯酰氯(22毫克，0.24毫摩尔，1.2当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液。混合物搅拌30分钟。加入水，再加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：乙酸乙酯/甲醇＝12/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(72毫克，收率：59.5％)。MS(ES+):m/z＝601(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.54(d,J＝13.0Hz,1H),8.33(d,J＝4.9Hz,1H),7.95(m,1H),7.76(dd,J＝8.6,5.3Hz,1H),7.24(dd,J＝10.2,8.7Hz,1H),7.15(d,J＝4.9Hz,1H),7.01(d,J＝2.1Hz,1H),6.85(m,1H),6.21(dd,J＝13.3,7.4Hz,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.99(d,J＝28.3Hz,1H),4.34(dd,J＝31.4,16.0Hz,2H),4.10(dd,J＝58.7,11.7Hz,1H),3.70(m,2H),3.17(dd,J＝42.6,31.8Hz,1H),2.75(s,1H),1.94(d,J＝25.7Hz,3H),1.36(dd,J＝13.4,6.7Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.92(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例35：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物74的制备)(按照方案九线路制备)
步骤35a：5,6-二氟-7-碘苯并呋喃(化合物0901-74的制备):在氮气的氛围下，在-70℃下将正丁基锂(6.94毫升，1.6摩尔/升的正己烷溶液，11.1毫摩尔，1.6当量)滴加至1，2-二氟-4-甲氧基苯(1克，6.94毫摩尔，1当量)和四甲基乙二胺(805毫克，6.94毫摩尔，1当量)的20毫升四氢呋喃溶液。混合物在-70℃下搅拌2小时。将碘(2.1克，8.3毫摩尔，1.2当量)的10毫升四氢呋喃溶液滴加入至混合物。混合物在-70℃下继续搅拌1小时。然后，用氯化铵水溶液淬灭反应。混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用亚硫酸氢钠水溶液洗。有机相用无水硫酸钠干燥，并浓缩，得到黄色固体1，2-二氟-3-碘-4-甲氧基苯为黄色油状物。(1.94克，粗品).MS(ESI):m/z 271(M+H)+.在氮气的氛围下，在0℃下，将三溴化硼(6克，24.15毫摩尔，3当量)缓慢滴加入到上述制得的1,2-二氟-3-碘-4-甲氧基苯(1.94克，8.05毫摩尔，1当量)的二氯甲烷(10毫升)溶液。混合物在室温下搅拌3小时。用水淬灭反应。混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和无水硫酸钠干燥。有机相浓缩得到黄色油状物3,4-二氟-2-碘苯酚为(2克，粗品)。MS(ESI):m/z 256(M+H)+.在氮气的氛围下，将上述制得的3,4-二氟-2-碘苯酚(2克，7.84毫摩尔，1当量)，2-溴-1,1-二甲氧基乙烷(1.99克，11.76毫摩尔，1.5当量)，碳酸钾(1.62克，11.76毫摩尔，1.5当量)和碘化钾(200毫克，10％的质量分数)加入至N,N-二甲基甲酰胺(20毫升)。混合物在120℃下搅拌16小时。反应冷却至室温。混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和无水硫酸钠干燥。有机相浓缩得到黄色油状物1-(2,2-二甲氧基乙氧基)-3,4-二氟-2-碘苯(2.9克，粗品)。MS(ESI):m/z 345(M+H)+.在氮气的氛围下，将上述制得的1-(2，2-二甲氧基乙氧基)-3，4-二氟-2-碘苯(2克，5.83毫摩尔，1当量)和多聚磷酸(3.94克，11.66毫摩尔，1当量)加入至甲苯(100毫升)。混合物在125℃下搅拌16小时。反应冷却至室温。混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和无水硫酸钠干燥。有机相浓缩和用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚)得到白色固体5,6-二氟-7-碘苯并呋喃(620毫克，收率:38.13％)。MS(ESI):m/z281(M+H)+.
步骤35b：(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-74)的制备:在氮气的氛围下，将(S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-71)(100毫克，0.15毫摩尔，1当量)，5,6-二氟-7-碘苯并呋喃(化合物0901-74)(84毫克，0.3毫摩尔，2当量)，碘化亚铜(3毫克，0.015毫摩尔，0.1当量)和四三苯基磷钯(17毫克，0.015毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(10毫升)。混合物在110℃下搅拌16小时。反应冷却至室温。混合物浓缩，用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:石油醚/乙酸乙酯＝1/3)得到黄色固体(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(59毫克，收率:60.09％)。MS(ESI):m/z 649(M+H)+.
步骤35c：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物74的制备)。将(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-074)(59毫克，0.09毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N，N-二异丙基乙胺(35毫克，0.27毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(8毫克，0.09毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝12/1)，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮。(41毫克，收率：74.8％).MS(ESI):m/z603(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.39(d,J＝41.9Hz,2H),8.01(s,1H),7.86(s,1H),7.18(s,1H),7.01(s,1H),6.84(s,1H),6.19(d,J＝13.9Hz,1H),5.75(d,J＝9.3Hz,1H),4.95(d,J＝42.2Hz,1H),4.34(m,2H),4.08(d,J＝63.5Hz,1H),3.71(d,J＝50.9Hz,2H),3.12(m,1H),2.76(s,1H),1.93(s,3H),1.34(d,J＝21.0Hz,3H),1.06(s,3H),0.92(s,3H).
实施例36：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并[d]噻唑-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物78)的制备(按照方案九线路制备)
步骤36a：7-溴-6-氟苯并[d]噻唑(化合物0901-78)的制备:往6-氟苯并[d]噻唑-2-胺(1.0克，5.95毫摩尔，1.0当量)和乙酸钠(0.98克，11.90毫摩尔，2.0当量)在乙酸(6.5毫升)的混合物中加入溴素(1.05克，6.55毫摩尔，1.1当量)的乙酸(5毫升)溶液。混合物在室温搅拌2.5小时。混合物用水(100毫升)稀释并过滤。固体用水洗涤并在真空下干燥，得到褐色固体7-溴-6-氟苯并[d]噻唑-2-胺(1.46克，收率：99％)。LCMS(ESI)：m/z 247[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)。往上述制得的7-溴-6-氟苯并[d]噻唑-2-胺(1.46克，5.91毫摩尔，1.0当量)在四氢呋喃(40毫升)的混合物中加入亚硝酸叔丁酯(4.57毫升，38.42毫摩尔，6.5当量)。混合物在80℃下加热8小时。减压除去溶剂。残余物经硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯20：1)，得到黄色固体7-溴-6-氟苯并[d]噻唑(918毫克，收率：67％)。LCMS(ESI)：m/z 232[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)。
步骤36b:(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并[d]噻唑-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-78)的制备:往7-溴-6-氟苯并[d]噻唑(化合物0901-78)(114毫克，0.49毫摩尔，2.5当量)，四三苯基膦钯(23毫克，0.020毫摩尔，0.1当量)和碘化亚铜(3.8毫克，0.020毫摩尔，0.1当量)在甲苯(15毫升)的混合物中加入(S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-71)(130毫克，0.20毫摩尔，1.0当量)。混合物在氮气氛围下加热至115℃搅拌过夜。减压下除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(二氯甲烷∶甲醇20∶1)，得到棕色油状物(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并[d]噻唑-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(102毫克，收率：80％)。LCMS(ESI)：m/z 648[M+1]+；TLC：Rf0.5(二氯甲烷：甲醇＝10：1)。
步骤36c:6-氟-7-(6-氟苯并[d]噻唑-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-78)的制备:往(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并[d]噻唑-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-78)(102毫克，0.157毫摩尔，1.0当量)在二氯甲烷(6毫升)的混合物中加入三氟乙酸(1.5毫升)。混合物在室温下搅拌0.5小时。减压除去溶剂。残余物在真空下干燥，得到棕色油状物6-氟-7-(6-氟苯并[d]噻唑-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(110毫克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 548[M+1]+；TLC：Rf0.3(二氯甲烷：甲醇＝10：1)。
步骤36d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并[d]噻唑-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物78)的制备:在0℃下往6-氟-7-(6-氟苯并[d]噻唑-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-78)(86毫克，0.157毫摩尔，1.0当量)和二异丙基乙胺(41毫克，0.314毫摩尔，2.0当量)在二氯甲烷(5毫升)的混合物中滴加丙烯酰氯(21毫克，0.236毫摩尔，1.5当量)的二氯甲烷(1毫升)溶液。混合物搅拌15分钟。混合物用水(15毫升)稀释，然后用二氯甲烷(15毫升×2)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过Pre-TLC(乙酸乙酯：甲醇＝10∶1)纯化,得到白色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并[d]噻唑-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(45毫克，收率：48％)。LCMS(ESI)：m/z 602[M+1]+；TLC：Rf0.6(二氯甲烷：甲醇＝10：1)；熔点：158-162℃。1HNMR(DMSO-d6，500MHz)：δ9.38(s,1H),8.40-8.35(m,2H),8.26-8.23(m,1H),7.20-7.15(m,2H),6.90-6.82(m,1H),6.21(d,J＝16.5Hz,1H),5.78-5.75(m,1H),4.95(s,1H),4.44-4.29(m,2H),4.17-4.02(m,1H),3.76-3.74(m,1H),3.68-3.50(m,1H),3.17-3.11(m,1H),2.78-2.73(m,1H),1.96(s,3H),1.36-1.34(m,3H),1.09-1.07(m,3H),0.97-0.94(m,3H)。
实施例37：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物79)的制备(按照方案九线路制备)
步骤37a:(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-79)的制备:氢气下，(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-70)(50毫克，0.08毫摩尔，1.0当量)和钯碳(10毫克)的甲醇(4毫升)混合物室温下搅拌过夜。混合物过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(50毫克，收率：100％)。MS(ES+):m/z＝633(M+H)+.
步骤37b:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物79)的制备:向(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-79)(50毫克，0.08毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(4毫升)溶液加入三氟乙酸(2毫升)，混合物室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(4毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(31毫克，0.24毫摩尔，3.0当量)，冰水浴下，往混合物中滴加丙烯酰氯(11毫克，0.12毫摩尔，1.5当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液。混合物搅拌30分钟。加入水，再加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟-2,3-二氢苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(27毫克，收率：58.7％)。MS(ES+):m/z＝587(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.39(d,J＝4.9Hz,1H),8.31(dd,J＝18.0,9.0Hz,1H),7.29(dd,J＝8.2,5.6Hz,1H),7.19(d,J＝4.9Hz,1H),6.84(m,1H),6.70(dd,J＝10.3,8.2Hz,1H),6.20(d,J＝16.3Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.93(dd,J＝21.4,18.1Hz,1H),4.50(m,2H),4.32(m,2H),4.09(m,1H),3.70(m,2H),3.14(m,3H),2.72(m,1H),1.89(m,3H),1.33(dd,J＝19.3,6.7Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.94(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例38：(S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(1H-吲哚-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物82的制备)(按照方案九线路制备)
步骤38a:7-溴-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(化合物17-170A-2)的制备：1-溴-1H-吲哚(0.8克，4.08毫摩尔，1.0当量)，二碳酸二叔丁酯(1.8克，8.16毫摩尔，2.0当量)，对二甲氨基吡啶(49毫克，0.4毫摩尔，0.1当量)和二异丙基乙胺(1.6克，12.24毫摩尔，3.0当量)的四氢呋喃(30毫升)混合物在室温下搅拌过夜。反应液用二氯甲烷和水萃取。将有机相干燥，浓缩得到无色油状物7-溴-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(1.2克，粗品)。MS(ESI):m/z＝296(M+H)+.
步骤38b:(S)-7-(4-(4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-82)的制备:在氮气的保护下，将(S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1，2-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-71)(100毫克，0.151毫摩尔，1.0当量)，7-溴-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(化合物0901-82)(89.7毫克，0.303毫摩尔，2.0当量)，碘化亚铜(2.8毫克，0.015毫摩尔，0.1当量)和四三苯基磷钯(17.5毫克，0.015毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(10毫升)。混合物在110℃下搅拌过夜。反应冷却至室温。混合物浓缩，用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:石油醚/乙酸乙酯＝1/3)得到黄色固体(S)-7-(4-(4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(100毫克，收率:93.6％)。MS(ESI):m/z 712(M+H)+.
步骤38c:(S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(1H-吲哚-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物82)的制备:将(S)-7-(4-(4-(叔丁氧基羰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-82)(90毫克，0.135毫摩尔，1.0当量)溶解于5毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N，N-二异丙基乙胺(0.5毫升)加入至混合物。0℃下，将丙烯酰氯(12毫克，0.13毫摩尔，0.9当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝10/1)，得到黄色固体(S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(1H-吲哚-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(27毫克，收率：34.1％).MS(ESI):m/z 566(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ9.36(s,1H),8.75(d,J＝4.6Hz,1H),8.35(d,J＝8.9Hz,1H),8.02(d,J＝7.5Hz,1H),7.76(d,J＝7.5Hz,1H),7.46(s,1H),7.16(t,J＝7.7Hz,1H),6.85(s,2H),6.47(s,1H),6.20(d,J＝16.1Hz,1H),5.75(d,J＝10.2Hz,1H),4.96(s,1H),4.18(m,3H),3.70(d,J＝32.7Hz,2H),3.10(m,1H),2.81(s,1H),1.99(d,J＝5.3Hz,3H),1.34(t,J＝7.2Hz,3H),1.11(d,J＝4.6Hz,3H),0.83(d,J＝3.5Hz,3H).
实施例39：4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物89)的制备(按照方案九线路制备)
步骤39a:6-氟苯并呋喃-7-三氟硼酸钾(化合物0907-89)的制备:往6-氟苯并呋喃-7-硼酸(化合物0902-70)(180毫克，1.0毫摩尔，1.0当量)的甲醇/水＝3/1溶液(10毫升)加入氟氢化钾(234毫克，3.0毫摩尔，3.0当量)的水溶液(1毫升)。混合物室温下搅拌2小时。固体过滤，真空干燥得到白色固体6-氟苯并呋喃-7-三氟硼酸钾(240毫克，收率：99.2％)。MS(ES-):m/z＝203(M+H)-.
步骤39b:(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-89)的制备:氮气保护下，7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0110-1)(395毫克，1.13毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(729毫克，5.65毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(348毫克，2.27毫摩尔，2.0当量)的乙腈(20毫升)混合物在85℃下搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(15毫升)，在冰水浴中冷却，加入N,N-二异丙基乙胺(442毫克，3.42毫摩尔，3.0当量)和(2R,5S)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-89)(242毫克，1.14毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌30分钟。加入乙酸乙酯，混合物用水和饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到50/1)得到黄色固体(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(435毫克，收率：70％)。MS(ES+):m/z＝545(M+H)+.
步骤39c:(2R,5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-89)的制备:在氮气保护下，将6-氟苯并呋喃-7-三氟硼酸钾(化合物0907-89)(80毫克，0.33毫摩尔，1.5当量)，(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-89)(120毫克，0.22毫摩尔，1.0当量)，1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(16毫克，0.022毫摩尔，0.1当量)和氟化钾(39毫克，0.66毫摩尔，3.0当量)加入到25毫升二氧六环和2.5毫升水的混合溶剂中，混合物在90℃下加热2小时。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用水洗，减压浓缩，残留物用制备薄层色谱纯化(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝50/1)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(116毫克，收率：81％)。MS(ES+):m/z＝645(M+H)+.
步骤39d:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物89)的制备:将(2R,5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-89)(116毫克，0.18毫摩尔，1.0当量)溶解于10毫升二氯甲烷中，滴加1.5毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌两小时。混合物减压浓缩至干，残留物溶解于10毫升四氢呋喃中，加入1.5毫升二异丙基乙胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(20毫克，0.22毫摩尔，1.2当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。将混合物搅拌半小时，用乙酸乙酯稀释。有机相经过水洗，减压浓缩，残留物用制备薄层色谱纯化(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝25/1)得到黄色固体4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(22毫克，收率：20％)。MS(ES+):m/z＝599(M+H)+.熔点：147℃～149℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.40(m,2H),7.95(dd,J＝9.0,1.9Hz,1H),7.80(dd,J＝8.4,5.2Hz,1H),7.26(t,J＝9.5Hz,1H),7.19(dd,J＝8.0,4.9Hz,1H),7.02(s,1H),6.84(ddd,J＝20.4,16.8,9.0Hz,1H),6.19(dd,J＝16.7,1.9Hz,1H),5.75(dd,J＝10.1,3.5Hz,1H),4.72(m,2H),3.93(m,4H),2.75(dd,J＝12.8,6.2Hz,1H),1.96(d,J＝14.5Hz,3H),1.32(m,3H),1.23(t,J＝8.4Hz,3H),1.07(d,J＝6.6Hz,3H),0.94(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例40：4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物90)的制备(按照方案九线路制备)
步骤40a:(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-90)的制备:氮气保护下，6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0110-73)(225毫克，0.62毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(400毫克，3.10毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(190毫克，1.24毫摩尔，2.0当量)的乙腈(15毫升)混合物在85℃下搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，在冰水浴中冷却，加入N,N-二异丙基乙胺(240毫克，1.86毫摩尔，3.0当量)和(2R,5S)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-89)(133毫克，0.62毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌30分钟。加入乙酸乙酯，混合物用水和饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到50/1)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(277毫克，收率：79％)。MS(ES+):m/z＝561(M+H)+.
步骤40b:(2R,5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-90)的制备:在氮气保护下，将2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0903-73)(140毫克，0.54毫摩尔，2.0当量)，(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-90)(150毫克，0.27毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(32毫克，0.027毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(57毫克，0.54毫摩尔，2.0当量)加入到50毫升乙腈和5毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下搅拌16小时。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相经水洗，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱纯化(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝50/1)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(86毫克，收率：48％)。MS(ES+):m/z＝661(M+H)+.
步骤40c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物90)的制备:将(2R,5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-90)(86毫克，0.13毫摩尔，1.0当量)溶解于15毫升二氯甲烷中，滴加1.5毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌两小时。混合物减压浓缩至干，残留物溶解于15毫升四氢呋喃中，加入1.5毫升二异丙基乙胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(35毫克，0.39毫摩尔，3.0当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。将混合物搅拌30分钟，用乙酸乙酯稀释。有机相经过水洗，减压浓缩，残留物制备高压液相色谱纯化，得到黄色固体4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(24毫克，收率：25％)。MS(ES+):m/z＝615(M+H)+.熔点：167℃～169℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.51(m,1H),8.32(d,J＝4.9Hz,1H),7.94(m,1H),7.75(ddd,J＝8.5,5.3,1.4Hz,1H),7.23(t,J＝9.4Hz,1H),7.14(t,J＝4.0Hz,1H),7.00(d,J＝1.4Hz,1H),6.83(ddd,J＝27.4,13.7,8.4Hz,1H),6.17(dd,J＝16.7,2.2Hz,1H),5.74(m,1H),4.71(m,2H),3.89(m,4H),2.70(s,1H),1.95(m,3H),1.34(dd,J＝14.6,7.6Hz,3H),1.24(ddd,J＝18.5,10.9,5.2Hz,3H),1.04(dd,J＝6.7,2.1Hz,3H),0.90(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例41：4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物91)的制备(按照方案九线路制备)
步骤41a:(2R,5S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-91)的制备:在氮气的氛围下，将(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2，5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-89)(150毫克，0.275毫摩尔，1当量)，六甲基二锡(270毫克，0825毫摩尔，3当量)和四三苯基磷钯(32毫克，0.03毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(10毫升)。混合物在110℃下搅拌2小时。反应冷却至室温。混合物浓缩和用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚/乙酸乙酯＝5/1-1/2)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(145毫克，收率:78.16％)。MS(ESI):m/z 675(M+H)+.
步骤41b:(2R,5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-91)的制备:在氮气的氛围下，将(2R,5S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-91)(140毫克，0.208毫摩尔，1当量)，5,6-二氟-7-碘苯并呋喃(化合物0901-74)(116毫克，0.416毫摩尔，2当量)，碘化亚铜(4毫克，0.02毫摩尔，0.1当量)和四三苯基磷钯(24毫克，0.02毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(10毫升)。混合物在110℃下搅拌16小时。反应冷却至室温。混合物浓缩，用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:石油醚/乙酸乙酯＝1/3)得到黄色固体(2R,5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(51.6毫克，收率:37.53％)。MS(ESI):m/z663(M+H)+.
步骤41c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物91)的制备:将(2R,5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2，5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-91)(51.6毫克，0.078毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N，N-二异丙基乙胺(30毫克，0.234毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(7毫克，0.078毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝12/1)，得到黄色固体4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2，5-二甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(25毫克，收率：52.08％)。MS(ESI):m/z617(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.42(m,2H),8.03(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),7.89(m,1H),7.20(dd,J＝8.4,5.0Hz,1H),7.03(d,J＝2.1Hz,1H),6.84(m,1H),6.19(dd,J＝16.6,2.1Hz,1H),5.75(ddd,J＝10.4,5.5,2.2Hz,1H),4.76(m,2H),3.85(m,4H),2.75(dt,J＝13.6,6.8Hz,1H),1.96(d,J＝14.5Hz,3H),1.33(ddd,J＝14.1,10.7,6.5Hz,3H),1.21(m,3H),1.07(dd,J＝6.7,2.2Hz,3H),0.94(dd,J＝7.7,3.6Hz,3H).
实施例42：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物97)的制备(按照方案九线路制备)
步骤42a:2-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0903-97)的制备:氮气保护下，将5-氟-4-碘苯并[d][1,3]二氧杂戊烷(化合物0901-69)(554毫克，2.08毫摩尔，1.0当量)溶解于15毫升干燥甲苯。混合物冷却至-75℃，滴加2.5M正丁基锂正己烷溶液(1毫升，2.5毫摩尔，1.2当量)。混合物在-75℃下搅拌2小时。硼酸三甲酯(281毫克，2.7毫摩尔，1.3当量)溶解于干燥甲苯中，滴加到上述混合物中。混合物在-75℃下搅拌一小时。混合物的pH值用2M盐酸调至1，并升温至室温。加入乙酸乙酯萃取。将有机相干燥并减压浓缩得到黄色固体(250毫克,粗品)。将该固体(250毫克，1.358毫摩尔，1.0当量)，四甲基乙二醇(192毫克，1.63毫摩尔，1.2当量)和无水硫酸镁(244毫克，2.037毫摩尔，1.5当量)加入到乙酸乙酯中，混合物在室温下搅拌两小时。混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到2-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷为白色固体(480毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝267(M+H)+.
步骤42b:(3S)-4-(6-氯-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-97)的制备:将(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-73)(300毫克，0.549毫摩尔，1当量)，2-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0903-97)(417毫克，1.567毫摩尔，2.85当量)，四三苯基磷钯(63毫克，0.055毫摩尔，0.1当量)，氯化亚铜(54毫克，0.055毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(116毫克,1.098毫摩尔，2当量)加入至10毫升乙腈和1毫升水的混合溶液中。混合物在80℃的条件下搅拌反应16小时。然后，将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过硅胶柱层析纯化残留物(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇＝100/1-30/1)，得到(3S)-4-(6-氯-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯为黄色固体(344毫克，收率：96.35％)。MS(ESI):m/z 651(M+H)+.
步骤42c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物97)的制备:将(3S)-4-(6-氯-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-97)(344毫克，0.528毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N,N-二异丙基乙胺(204毫克，1.584毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(48毫克，0.528毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用硅胶柱层析纯化残留物(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇＝100/1-30/1)，得到4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5-氟苯并[d][1,3]二氧杂戊烷-4-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮为黄色固体。(208毫克，收率：65.2％).MS(ESI):m/z 605(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.49(d,J＝13.8Hz,1H),8.41(d,J＝4.9Hz,1H),7.20(d,J＝4.9Hz,1H),6.99(dd,J＝8.6,4.3Hz,1H),6.93–6.80(m,1H),6.74(dd,J＝10.3,8.7Hz,1H),6.22(d,J＝17.0Hz,1H),6.02(s,2H),5.77(dd,J＝10.4,2.2Hz,1H),4.96(d,J＝29.5Hz,1H),4.34(dd,J＝32.0,17.9Hz,2H),4.19–3.99(m,1H),3.84–3.50(m,2H),3.26–3.05(m,1H),2.79–2.67(m,1H),1.91(d,J＝2.9Hz,3H),1.35(dd,J＝14.2,6.7Hz,3H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),0.95(d,J＝6.6Hz,3H).
实施例43：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物98)的制备(按照方案九线路制备)
步骤43a:(S)-4-(6-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-98)的制备:氮气保护下，将(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-吡啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-073)(500毫克，0.91毫摩尔，1.0当量)，六甲基二锡(629毫克，1.92毫摩尔，2.1当量)和四三苯基膦钯(106毫克，0.091毫摩尔，0.1当量)加入到100毫升干燥甲苯中，混合物在110℃下搅拌三小时。混合物用乙酸乙酯稀释，经硅藻土过滤，滤液减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝1/2到1/3)纯化，得到黄色固体(S)-4-(6-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基I-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(661毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝677(M+H)+.
步骤43b:(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-98)的制备:在氮气保护下，将5-溴-6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英(化合物0901-98)(51.72毫克，0.222毫摩尔，1.5当量)，(S)-4-(6-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸丁酯(化合物0906-98)(100毫克，0.148毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(17.1毫克，0.0148毫摩尔，0.1当量)加入到10毫升甲苯溶剂中，混合物在120℃下搅拌过夜。反应体系冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取。有机相用水洗，并减压浓缩，残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝150/1至30/1)纯化得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(30毫克，收率：30.6％)。MS(ES+):m/z＝664(M+H)+.
步骤43c:6-氯-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-98)的制备:将(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-98)(30毫克，0.045毫摩尔，1.0当量)溶解于6毫升二氯甲烷中，滴加1毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌1.0小时。反应液减压浓缩至干，所得残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝564(M+H)+.
步骤43d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物98)的制备:将6-氯-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-98)的粗品溶解于10毫升四氢呋喃中，加入2.0毫升N，N-二异丙基乙胺。反应体系置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(8.1毫克，0.09毫摩尔，2.0当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中，混合物搅拌0.5小时。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过水洗，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱(展开剂：二氯甲烷/甲醇＝12/1)纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(20毫克，收率：71.9％)。MS(ES+):m/z＝618(M+H)+.熔点：155～158℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.50–8.30(m,2H),7.18(d,J＝3.6Hz,1H),6.94(dd,J＝9.1,5.5Hz,1H),6.89–6.79(m,1H),6.74(t,J＝9.0Hz,1H),6.20(d,J＝16.2Hz,1H),5.76(dd,J＝10.5,2.1Hz,1H),4.94(d,J＝27.4Hz,1H),4.34(d,J＝38.4Hz,2H),4.22–3.96(m,5H),3.87–3.51(m,2H),3.13(d,J＝10.1Hz,1H),2.71(s,1H),1.95–1.83(m,3H),1.34(dd,J＝12.9,6.5Hz,3H),1.07(dd,J＝6.6,2.9Hz,3H),0.92(t,J＝7.1Hz,3H).
实施例44：4-((S)-4-丙烯酰基-2-乙基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物99)的制备(按照方案九线路制备)
步骤44a:(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-99)的制备:氮气保护下，6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4l5-吡啶[3,2-e]嘧啶-2,4(1H)-二酮(0110-73)(400毫克，1.09毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(703毫克，5.45毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(500毫克，3.27毫摩尔，3.0当量)的乙腈(12毫升)混合物85℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(10毫升)，冰水浴下，加入N,N-二异丙基乙胺(422毫克，3.27毫摩尔，3.0当量)和(S)-3-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-99)(135毫克，1.09毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，然后混合物用水洗、饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1到60/1)得到黄色固体(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(360毫克，收率：59.0％)。MS(ES+):m/z＝561(M+H)+.
步骤44b:(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-99)的制备:在氮气保护下，将6-氟苯并呋喃-7-三氟硼酸钾(化合物0907-98)(195毫克，0.803毫摩尔，3.0当量)，(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-99)(150毫克，0.26毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(30毫克，0.026毫摩尔，0.1当量)和碳酸氢钠(26毫克，0.32毫摩尔，1.2当量)加入到10毫升乙腈和2毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下搅拌过夜。反应液冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝150/1至20/1)得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(168毫克，收率：94.9％)。MS(ES+):m/z＝661(M+H)+.
步骤44c:6-氯-4-((S)-2-乙基哌嗪-1-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-99)的制备:将(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-99)(168毫克，0.25毫摩尔，1.0当量)溶解于6毫升二氯甲烷中，滴加1毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌2.0小时。反应液减压浓缩至干，所得残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝561(M+H)+.
步骤44d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-乙基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物99)的制备:将6-氯-4-((S)-2-乙基哌嗪-1-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-99)的粗品溶解于10毫升四氢呋喃中，加入2.0毫升N，N-二异丙基乙胺。反应体系置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(33.9毫克，0.375毫摩尔，1.5当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中，混合物搅拌0.5小时。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过水洗，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱(展开剂：二氯甲烷/甲醇＝12/1)纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-乙基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(82毫克，收率：53.5％)。MS(ES+):m/z＝615(M+H)+.熔点：115～120℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.54(d,J＝16.2Hz,1H),8.32(d,J＝4.5Hz,1H),7.94(d,J＝22.4Hz,1H),7.75(dd,J＝8.0,5.3Hz,1H),7.23(t,J＝9.3Hz,1H),7.14(s,1H),7.00(s,1H),6.86(s,1H),6.20(d,J＝11.6Hz,1H),5.76(d,J＝10.4Hz,1H),4.81(d,J＝23.6Hz,1H),4.37(m,3H),3.68(d,J＝60.2Hz,2H),3.04(s,1H),2.72(t,J＝37.5Hz,1H),1.83(m,5H),1.06(t,J＝5.9Hz,3H),0.92(m,6H).
实施例45：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(4,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物102的制备)(按照方案九线路制备)
步骤45a:7-溴-4,6-二氟苯并呋喃(化合物0903-102)的制备:在氮气的氛围下，将2-溴-3,5-二氟苯酚(911毫克，4.35毫摩尔，1当量),2-溴-1,1-二乙氧基乙烷(1.03克，5.23毫摩尔，1.2当量),碳酸钾(900毫克,6.525毫摩尔，1.5当量)和碘化钾(91.1毫克，10％的质量分数)加入至N,N-二甲基甲酰胺(20毫升)。混合物在120℃下搅拌16小时。混合物冷却至室温。混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和无水硫酸钠干燥。有机相浓缩得到2-溴-1-(2,2-二乙氧基乙氧基)-3,5-二氟苯为黄色油状物(1.479克，粗品)。MS(ESI):m/z 325(M+H)+.在氮气的氛围下，将上述制得的2-溴-1-(2,2-二乙氧基乙氧基)-3,5-二氟苯(1.42克，4.35毫摩尔，1当量)和多聚磷酸(1.46克，4.35毫摩尔，1当量)加入至1,2-二氯乙烷(20毫升)。混合物在85℃下搅拌16小时。混合物冷却至室温。混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤和无水硫酸钠干燥。有机相浓缩和用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚)得到7-溴-4,6-二氟苯并呋喃为白色固体(650毫克，收率:64.35％)。MS(ESI):m/z 233(M+H)+.
步骤45b:2-(4,6-二氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0903-102)的制备:氮气保护下，将7-溴-4,6-二氟苯并呋喃(化合物0901-102)(309毫克，1.33毫摩尔，1.0当量)溶解于15毫升干燥甲苯。混合物冷却至-75℃，滴加1.6M正丁基锂正己烷溶液(1毫升,1.6毫摩尔,1.2当量)。混合物在-75℃下搅拌2小时。硼酸三甲酯(180毫克，1.73毫摩尔，1.3当量)溶解于干燥甲苯中，滴加到上述混合物中。混合物在-75℃下搅拌一小时。混合物的pH值用2M盐酸调至1，并升温至室温。加入乙酸乙酯萃取。有机相减压浓缩得到黄色固体(200毫克，粗品)。将该固体(200毫克，1.015毫摩尔，1.0当量)，四甲基乙二醇(144毫克，1.218毫摩尔，1.2当量)和无水硫酸镁(183毫克，1.52毫摩尔，1.5当量)加入到乙酸乙酯中，混合物在室温下搅拌两小时。混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到2-(4,6-二氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷为白色固体(291毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝281(M+H)+.
步骤45c:(3S)-4-(6-氯-7-(4,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-102)的制备:将(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-73)(100毫克，0.183毫摩尔，1当量)，2-(4,6-二氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0903-102)(102毫克，0.366毫摩尔，2当量)，四三苯基磷钯(21毫克，0.018毫摩尔，0.1当量)，氯化亚铜(18毫克，0.018毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(38.8毫克，0.366毫摩尔，2当量)加入至10毫升乙腈和1毫升水的混合溶液中。混合物在80℃的条件下搅拌反应16小时。然后，将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过硅胶柱层析纯化残留物(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇＝100/1-30/1)，得到(3S)-4-(6-氯-7-(4,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯为黄色固体(87毫克，收率：71.9％)。MS(ESI):m/z 665(M+H)+.
步骤45d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(4,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物102)的制备:将(3S)-4-(6-氯-7-(4,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-102)(87毫克，0.131毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N,N-二异丙基乙胺(50毫克，0.393毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(12毫克，0.131毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化残留物(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝12/1)，得到4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(4,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮为黄色固体。(75毫克，收率：92.59％).MS(ESI):m/z 619(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.54(d,J＝14.4Hz,1H),8.34(d,J＝4.8Hz,1H),8.02(d,J＝20.6Hz,1H),7.32(t,J＝10.2Hz,1H),7.14(dd,J＝15.0,3.6Hz,2H),6.92–6.78(m,1H),6.19(dd,J＝15.0,11.8Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.2Hz,1H),4.97(d,J＝32.7Hz,1H),4.32(dd,J＝34.7,17.3Hz,2H),4.09(dd,J＝58.4,10.4Hz,1H),3.88–3.46(m,2H),3.27–3.02(m,1H),2.74(d,J＝6.1Hz,1H),1.94(s,3H),1.35(dd,J＝14.5,6.7Hz,3H),1.06(d,J＝6.7Hz,3H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例46：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物103的制备)(按照方案九线路制备)
步骤46a:(3S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-103)的制备:在氮气的氛围下，将(S)-4-(6-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1，2-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-98)(150毫克，0.221毫摩尔，1当量)，5，6-二氟-7-碘苯并呋喃(化合物0901-74)(121毫克，0.442毫摩尔，2当量)，碘化亚铜(4毫克，0.02毫摩尔，0.1当量)和四三苯基磷钯(25毫克，0.02毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(10毫升)。混合物在110℃下搅拌16小时。反应冷却至室温。混合物浓缩，用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:石油醚/乙酸乙酯＝1/3)得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(5，6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(90毫克，收率:61.22％)。MS(ESI):m/z665(M+H)+.
步骤46b:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物103)的制备:将(3S)-4-(6-氯-7-(5，6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-103)(90毫克，0.135毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N，N-二异丙基乙胺(53毫克，0.406毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(12毫克，0.135毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝12/1)，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5，6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(35毫克，收率：41.81％).MS(ESI):m/z 619(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.57(d,J＝14.0Hz,1H),8.34(d,J＝4.9Hz,1H),8.03(d,J＝23.9Hz,1H),7.86(dd,J＝10.1,7.9Hz,1H),7.16(d,J＝4.6Hz,1H),7.03(d,J＝2.2Hz,1H),6.85(m,1H),6.20(m,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.99(d,J＝31.7Hz,1H),4.36(m,2H),4.16(d,J＝13.2Hz,1H),3.75(m,2H),3.16(dd,J＝39.9,28.8Hz,1H),2.75(m,1H),1.94(s,3H),1.36(dd,J＝13.8,6.7Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.92(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例47：4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物104)的制备(按照方案九线路制备)
步骤47a:(2R,5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-104)的制备:在氮气的氛围下，将(2R，5S)-4-(6-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶基[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0906-104)(150毫克，0.217毫摩尔，1当量)，5,6-二氟-7-碘苯并呋喃(0901-74)(121毫克，0.434毫摩尔，2当量)，碘化亚铜(4毫克，0.02毫摩尔，0.1当量)和四三苯基磷钯(25毫克，0.02毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(10毫升)。混合物在110℃下搅拌16小时。反应冷却至室温。混合物浓缩，用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:石油醚/乙酸乙酯＝1/3)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2，5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(95毫克，收率:64.62％)。MS(ESI):m/z 679(M+H)+.
步骤47b:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物104)的制备:将(2R,5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-104)(95毫克，0.14毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N,N-二异丙基乙胺(54毫克，0.42毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(13毫克，0.14毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝12/1)，得到黄色固体4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮。(50毫克，收率：56.46％).MS(ESI):m/z 633(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.58(dd,J＝16.2,8.0Hz,1H),8.47(dd,J＝8.7,5.3Hz,1H),8.06(s,1H),7.87(t,J＝8.9Hz,1H),7.45(d,J＝15.4Hz,1H),7.03(d,J＝2.1Hz,1H),6.84(m,1H),6.19(d,J＝16.7Hz,1H),5.75(m,1H),4.73(m,2H),4.10(m,4H),2.87(m,1H),2.05(s,3H),1.36(m,3H),1.25(ddd,J＝22.0,10.8,7.0Hz,3H),1.14(dd,J＝19.8,11.5Hz,3H),0.99(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例48：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物105)的制备(按照方案九线路制备)
步骤48a:7-溴-6-氯苯并呋喃(化合物0901-105)的制备：氮气保护条件下，将化合物2-溴-3-氯苯酚(1.0克，4.83摩尔，1.0当量)溶于DMF(20毫升)，往里加入溴代乙醛缩二乙醇(1.43克，7.24摩尔，1.5当量)，碳酸钾(999毫克，7.24摩尔，1.5当量)。混合物于120℃搅拌过夜。反应液冷却到室温，将其倒入15毫升水中，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，减压浓缩，所得残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。
氮气保护下，向上一步得到的2-溴-1-氯-3-(2,2-二乙氧基乙氧基)苯的粗品溶解于30mL 1,2-二氯乙烷中，加入多聚磷酸(1.95克，5.79毫摩尔，1.2当量)，混合物在85℃下搅拌过夜。向反应液中加入水，混合物用二氯甲烷萃取，将有机相干燥并减压浓缩。残留物用硅胶柱(石油醚)纯化，得到黄色油状产物7-溴-6-氯苯并呋喃(500m g，产率：82.0％)(500毫克，收率：45.0％)。
步骤48b:2-(6-氯苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0903-105)的制备:氮气保护下，在-60℃下，向7-溴-6-氯苯并呋喃(0901-105)(450毫克，1.95毫摩尔，1.0当量)的甲苯(15毫升)溶液中滴加正丁基锂(1.01毫升，2.53毫摩尔，1.3当量)，混合物在-70℃下搅拌1.0小时。然后在-70℃下向反应液滴加2-甲氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(462毫克，2.92毫摩尔，1.5当量)的甲苯(2毫升)溶液，混合物在-70℃下搅拌2.0小时。向反应液中加入水，并用乙酸乙酯萃取，所得有机相减压浓缩至干，残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。
步骤48c:(3S)-4-(6-氯-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-105)的制备:在氮气保护下，将2-(6-氯苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-105)(219毫克，0.789毫摩尔，3.0当量)，(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-吡啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-73)(150毫克，0.263毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(30.41毫克，0.0263毫摩尔，0.1当量)和碳酸氢钠(44.18毫克，0.526毫摩尔，2.0当量)加入到10毫升乙腈和2毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下搅拌过夜。反应液冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝100/1至20/1)得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(140毫克，收率：80.4％)。MS(ES+):m/z＝662(M+H)+.
步骤48d:6-氯-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-105)的制备:将(3S)-4-(6-氯-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-105)(140毫克，0.211毫摩尔，1.0当量)溶解于6毫升二氯甲烷中，滴加1毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌1.0小时。反应液减压浓缩至干，所得残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝562(M+H)+.
步骤48e:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物105)的制备:将6-氯-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮的粗品(0905-105)溶解于10毫升四氢呋喃中，加入2.0毫升N，N-二异丙基乙胺。反应体系置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(38.1毫克，0.422毫摩尔，2.0当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中，混合物搅拌0.5小时。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过水洗，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱(展开剂：二氯甲烷/甲醇＝12/1)纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(45毫克，收率：34.6％)。MS(ES+):m/z＝616(M+H)+.熔点：169～174℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.56(d,J＝15.4Hz,1H),8.33(t,J＝4.5Hz,1H),7.96(d,J＝20.2Hz,1H),7.75(d,J＝8.4Hz,1H),7.41(d,J＝8.3Hz,1H),7.16(dd,J＝24.4,4.3Hz,1H),7.03(d,J＝3.1Hz,1H),6.86(d,J＝11.3Hz,1H),6.21(d,J＝15.9Hz,1H),5.77(d,J＝10.1Hz,1H),4.98(d,J＝40.1Hz,1H),4.50–4.23(m,2H),4.09(d,J＝56.1Hz,1H),3.74(dd,J＝66.5,21.4Hz,2H),3.20–3.10(m,1H),2.77(d,J＝6.2Hz,1H),1.92(s,3H),1.43–1.31(m,3H),1.07(d,J＝5.7Hz,3H),0.99–0.84(m,3H).
实施例49：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物106)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤49a:步骤49a:2-异丙基-4,6-二甲基苯胺(化合物0103-106)的制备：在氮气保护下，将2-溴-6-甲基苯胺(1.86克，10.0毫摩尔，1.0当量)、4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂硼烷(5.04克，30.0毫摩尔，3.0当量)、碳酸钠(2.12克，20.0毫摩尔，2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(0.73克，1.0毫摩尔，当量0.1)的二氧六环/水＝5/1(120毫升)的混合物回流过夜。冷却至室温后，将混合物过滤并真空浓缩。残留物通过色谱柱(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)纯化，得到无色油状物2-甲基-6-(丙-1-烯-2-基)苯胺(1.5克，收率：～100.0％)。MS(ES+)：M/z＝148(M+H)+。氢气条件下，上述制备得到的2-甲基-6-(丙-1-烯-2-基)苯胺(1.47克，10毫摩尔，1.0当量)和钯碳(0.5克，34％质量比)的乙酸乙酯(50毫升)混合物室温搅拌过夜。将反应液过滤，滤液减压浓缩得到淡黄色油状物2-异丙基-4,6-二甲基苯胺(1.4克，收率：94％)。MS(ES+):m/z＝150(M+H)+.
步骤49b:2,6-二氯-5-氟-N-((2-异丙基-6-甲基苯基)氨甲酰基)烟酰胺(化合物0109-106)的制备：在氮气保护下，0℃下，向2,6-二氯-5-氟烟酰胺(0108-1)(1.4克，6.7毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(50毫升)混合液中加入草酰氯(0.94克，7.4毫摩尔，1.1当量)，将混合物温热至室温，然后加热至60℃并搅拌1小时。冷却至室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(50毫升)并冷却至0℃，逐滴加入2-异丙基-4,6-二甲基苯胺(0103-106)(1.1克，7.4毫摩尔，1.1当量)的四氢呋喃溶液(10毫升)。将混合物温热至室温并搅拌过夜。将混合物减压浓缩，得到粗品2,6-二氯-5-氟-N-((2-异丙基-6-甲基苯基)氨甲酰基)烟酰胺，直接用于下一步骤，无需进一步纯化。MS(ES+)：M/z＝384(M+H)+。
步骤49c:7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(化合物0110-106)：在氮气保护下，冰水浴下，向2,6-二氯-5-氟-N-((2-异丙基-6-甲基苯基)氨基甲酰)烟酰胺(化合物0109-106)(3.84克，10毫摩尔，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(22毫升)溶液中分批加入60％氢化钠(1.2克，30毫摩尔，3.0当量)，混合物在室温下搅拌1小时。反应液用饱和氯化铵水溶液淬灭，并搅拌30分钟。过滤混合液，并用水(10毫升*3)清洗固体，然后在减压下干燥固体，得到类白色固体7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1.92克，收率：55％)。MS(ES+)：M/z＝348(M+H)+。
步骤49d:(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-106)的制备：在氮气保护下，7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0110-106)(1.57克,4.5毫摩尔,1.0当量)、二异丙基乙胺(2.9克，22.5毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(1.38克，9.0毫摩尔，2.0当量)的乙腈(50毫升)混合物在在75℃下搅拌1.5小时。冷却至室温后，减压除去溶剂。将残留物溶于四氢呋喃(50毫升)，在冰水浴下，加入二异丙基乙胺(1.74克，13.5毫摩尔，3.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0111-1)(0.9克，4.5毫摩尔，1.0当量)，将混合液搅拌0.5小时。加入二氯甲烷，用水和盐水清洗混合物。将有机层减压浓缩。残留物通过硅胶色谱法纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝40/1)，得到棕色固体(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.97克，收率：68.0％)。MS(ES+)：M/z＝530(M+H)+。
步骤49e:(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-106)的制备:在氮气保护下，将2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0903-73)(248毫克，0.945毫摩尔，2.0当量)，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-106)(250毫克，0.472毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(30毫克，0.026毫摩尔，0.1当量)和碳酸氢钠(79毫克，0.945毫摩尔，2.0当量)加入到10毫升乙腈和2毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下搅拌过夜。反应液冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝150/1至30/1)得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(168毫克，收率：64.3％)。MS(ES+):m/z＝660(M+H)+.
步骤49f:6-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-106)的制备:将(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-106)(168毫克，0.25毫摩尔，1.0当量)溶解于6毫升二氯甲烷中，滴加1毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌2.0小时。反应液减压浓缩至干，所得残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝560(M+H)+.
步骤49g:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物106)的制备:将6-氟-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-106)的粗品溶解于10毫升四氢呋喃中，加入2.0毫升N，N-二异丙基乙胺。反应体系置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(33.9毫克，0.375毫摩尔，1.5当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中，混合物搅拌0.5小时。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过水洗，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱(展开剂：二氯甲烷/甲醇＝12/1)纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(10毫克，收率：5.4％)。MS(ES+):m/z＝614(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.40(s,1H),7.95(s,1H),7.79(dd,J＝8.4,5.2Hz,1H),7.24(m,3H),7.11(s,1H),7.02(s,1H),6.87(d,J＝10.8Hz,1H),6.21(d,J＝15.9Hz,1H),5.77(d,J＝10.5Hz,1H),4.93(d,J＝31.1Hz,1H),4.35(dd,J＝39.9,26.0Hz,2H),4.08(d,J＝62.1Hz,1H),3.65(m,2H),3.15(m,1H),2.59(d,J＝6.3Hz,1H),1.89(s,3H),1.34(dd,J＝17.0,6.5Hz,3H),1.24(s,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.94(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例50：(S)-4-(4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物107)的制备(按照方案九线路制备)
步骤50a:7-频哪醇硼酸酯苯并呋喃(化合物0903-107)的制备:在氮气保护下，在-70℃下，向7-溴-苯并呋喃(化合物0901-107)(300毫克，1.53毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(10毫升)溶液中滴加正丁基锂(1.6摩尔，1.24毫升，1.99毫摩尔，1.3当量)，混合物在-70℃下搅拌40分钟。然后在-70℃下滴加甲醇频哪醇硼酸酯(387毫克，2.45毫摩尔，1.6当量)的四氢呋喃(1.5毫升)溶液，混合物搅拌1小时。滴加氯化铵水溶液淬灭反应液，混合物用水和乙酸乙酯萃取，将有机相干燥并减压浓缩。残留物(0.4克，粗品)不经过进一步纯化，直接用于下一步。
步骤50b:(S)-4-(7-(苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-107)的制备:在氮气保护下，将7-频哪醇硼酸酯苯并呋喃(化合物0903-107)(0.4克，粗品)，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(100毫克，0.19毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦(21.8毫克，0.019毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(40.0毫克，0.38毫摩尔，2.0当量)加入到10毫升乙腈和1毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下搅拌过夜。反应液冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，减压浓缩，残留物用硅胶柱纯化(二氯甲烷/甲醇＝100/1至40/1)得到黄色液体(S)-4-(7-(苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(110毫克，收率：77.4％)。MS(ES+):m/z＝613(M+H)+.
步骤50c:(S)-4-(4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物107)的制备:将(S)-4-(7-(苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-107)(120毫克，0.196毫摩尔，1.0当量)溶解于10毫升二氯甲烷中，滴加2毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌1.0小时。反应液减压浓缩，残留物溶解于10毫升四氢呋喃中，加入N，N-二异丙基乙胺(2毫升)。反应体系置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(35.4毫克，0.39毫摩尔，2.0当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中，混合物搅拌0.5小时。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到黄色固体(S)-4-(4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(80毫克，收率：72.0％)。MS(ES+):m/z＝567(M+H)+.
1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.43(s,1H),8.37(s,1H),7.94(d,J＝1.7Hz,1H),7.79(d,J＝7.4Hz,1H),7.30(dt,J＝14.9,7.4Hz,2H),7.22(d,J＝4.6Hz,1H),7.02(d,J＝1.9Hz,1H),6.85(m,1H),6.21(d,J＝16.3Hz,1H),5.77(d,J＝10.4Hz,1H),4.95(s,1H),4.38(dd,J＝39.2,12.2Hz,2H),4.09(dd,J＝61.7,12.4Hz,1H),3.64(dd,J＝64.5,51.3Hz,2H),3.15(dd,J＝17.1,8.2Hz,1H),2.74(d,J＝5.9Hz,1H),1.96(d,J＝4.3Hz,3H),1.35(t,J＝6.7Hz,3H),1.08(d,J＝6.4Hz,3H),0.95(dd,J＝6.4,3.5Hz,3H).
实施例51：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲基苯并呋喃-7-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物108)的制备(按照方案九线路制备)
步骤51a:(3S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲基苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-108)的制备:氮气保护下，将叔丁基(S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0906-71)(120毫克，0.181毫摩尔，1.0当量)，7-溴-6-甲基苯并呋喃(化合物0901-108)(77毫克，0.362毫摩尔，2.0当量)，碘化亚铜(5毫克，0.027毫摩尔，0.15当量)和四(三苯基膦)钯(21毫克，0.018毫摩尔，0.1当量)的甲苯(10毫升)混合物回流过夜。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤。减压除去溶剂，残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝1/3)得淡黄色固体(3S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲基苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(43毫克，收率：37.7％)。MS(ES+):m/z＝627(M+H)+
步骤51b:6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲基苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-108)的制备:往(3S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲基苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-108)(43毫克，0.068毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液加入三氟乙酸(0.5毫升)，反应在常温下搅拌30分钟。将混合物减压浓缩得到黄色油状物6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲基苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(32毫克，粗品)，直接用于下一步没有进一步纯化。MS(ES+):m/z＝527(M+H)+
步骤51c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲基苯并呋喃-7-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物108)的制备:往6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲基苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-108)(30mg，粗品)和N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升)的乙腈(5毫升)混合物中滴加丙烯酰氯(7.4毫克，0.085毫摩尔，1.50当量)。反应在常温下搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：乙酸乙酯/甲醇＝15/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲基苯并呋喃-7-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(16毫克，收率：48.4％)。MS(ES+):m/z＝581(M+H)+；熔点:151-163℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.38(t,J＝12.2Hz,2H),7.85(d,J＝1.9Hz,1H),7.61(d,J＝7.9Hz,1H),7.18(dd,J＝25.8,6.1Hz,2H),6.90(dd,J＝36.1,7.0Hz,2H),6.21(d,J＝16.6Hz,1H),5.83–5.71(m,1H),4.96(d,J＝47.2Hz,1H),4.48–4.24(m,2H),4.21–3.99(m,1H),3.74(d,J＝55.0Hz,2H),3.14(d,J＝24.8Hz,1H),2.85–2.72(m,1H),2.05(s,3H),1.93(d,J＝4.4Hz,3H),1.35(dd,J＝24.1,6.6Hz,3H),1.07(d,J＝6.5Hz,3H),0.88(d,J＝4.4Hz,3H).
实施例52：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物109)的制备(按照方案九线路制备)
步骤52a:7-溴-6-甲氧基苯并呋喃(化合物0901-109)的制备:氮气保护下，将2-溴-3-氟苯酚(812毫克，4.0毫摩尔，1.0当量)，2-溴-1,1-二甲氧基乙烷(1.01克，6.0毫摩尔，1.5当量)，碘化钾(80毫克，0.48毫摩尔，0.1当量)和碳酸钾(1.38克，10.0毫摩尔，2.5当量)加入到7毫升二甲基甲酰胺中，混合物在120℃下搅拌16小时。混合物用乙酸乙酯稀释，再用水和饱和食盐水洗涤。有机相减压浓缩，残留物用硅胶柱层析色谱(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝30/1到20/1)纯化，得到黄色液体2-溴-1-(2,2-二甲氧基乙氧基)-3-甲氧基苯(1.14克，收率：98％)。MS(ES+):m/z＝291(M+H)+.氮气保护下，将上述制备得到的2-溴-1-(2,2-二甲氧基乙氧基)-3-甲氧基苯(1.14克，4.0毫摩尔，1.0当量)，多聚磷酸(2.64克，8.0毫摩尔，2.0当量)加入到35毫升干燥甲苯中，混合物在120℃下搅拌过夜。混合物用乙酸乙酯稀释，经水洗，将有机相减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱(洗脱剂为：石油醚)纯化，得到白色固体7-溴-6-甲氧基苯并呋喃(830毫克，收率：93％)。MS(ES+):m/z＝227(M+H)+
步骤52b:(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)硼酸(化合物0902-109)的制备:氮气保护下，将7-溴-6-甲氧基苯并呋喃(化合物0901-109)(713毫克，3.16毫摩尔，1.0当量)溶解于63毫升干燥甲苯。混合物冷却至-75℃，滴加1.6M正丁基锂正己烷溶液(2.37毫升，3.79毫摩尔，1.2当量)。混合物在-75℃下搅拌2小时。硼酸三甲酯(427毫克，4.11毫摩尔，1.3当量)溶解于干燥甲苯中，滴加到上述混合物中。混合物在-75℃下搅拌一小时。加入2毫升2M氢氧化钠溶液和20毫升水，混合物升温至室温。加入乙酸乙酯，分层。往水相滴加1M盐酸调节pH至1，加入乙酸乙酯萃取。有机相减压浓缩得到棕色固体(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)硼酸(389毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝193(M+H)+.
步骤52c:2-(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0903-109)的制备:将(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)硼酸(化合物0902-109)(389毫克，2.03毫摩尔，1.0当量)，四甲基乙二醇(359毫克，3.04毫摩尔，1.5当量)和无水硫酸镁(731毫克，6.0毫摩尔，3.0当量)加入到乙酸乙酯中，混合物在室温下搅拌两小时。混合物经硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体2-(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(640毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝275(M+H)+.
步骤52d:(3S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-109)的制备:在氮气保护下，将2-(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(化合物0903-109)(640毫克，2.03毫摩尔，4.0当量)，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(265毫克，0.5毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(232毫克，0.2毫摩尔，0.4当量)和碳酸钠(530毫克，5.0毫摩尔，10.0当量)加入到66毫升乙腈和6.6毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下加热2小时。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取。将有机相用水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝100/1到30/1)得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(366毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝643(M+H)+.
步骤52e:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物109)的制备:将(3S)-4-(6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-109)(366毫克，0.57毫摩尔，1.0当量)溶解于10毫升二氯甲烷中，滴加2毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌两小时。混合物减压浓缩至干，残留物溶解于15毫升四氢呋喃中，加入二异丙基乙胺(221毫克，1.71毫摩尔，3.0当量)。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(103毫克，1.14毫摩尔，2.0当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。将混合物搅拌半小时，用乙酸乙酯稀释。有机相经过水洗，减压浓缩，残留物制备薄层色谱(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝30/1)纯化，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-7-(6-甲氧基苯并呋喃-7-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(200毫克，收率：58％)。MS(ES+):m/z＝597(M+H)+.熔点：156～158℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.32(dd,J＝14.1,7.8Hz,2H),7.76(d,J＝2.1Hz,1H),7.69(d,J＝8.6Hz,1H),7.16(d,J＝4.9Hz,1H),7.11(d,J＝8.7Hz,1H),6.88(dd,J＝18.2,7.1Hz,2H),6.21(d,J＝16.9Hz,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.97(dd,J＝25.5,22.4Hz,1H),4.35(m,2H),4.11(m,1H),3.62(m,5H),3.15(dd,J＝39.7,12.1Hz,1H),2.77(m,1H),1.94(d,J＝2.6Hz,3H),1.35(dd,J＝23.7,6.7Hz,3H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例53：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟-5-羟基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物110)的制备(按照方案九线路制备)
步骤53a:6-氟-7-碘苯并呋喃-5-醇(化合物0901-110)的制备:氮气保护下，在冰水浴中，向6-氟-7-碘-5-甲氧基苯并呋喃(300毫克，1.02毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(10毫升)的溶液中加入三溴化硼(386毫克，1.54毫摩尔，1.5当量)。加完后，混合物在室温下搅拌1小时。反应混合物用氯化铵水溶液淬灭，并搅拌10分钟。加入水和二氯甲烷萃取，有机层用饱和食盐水洗涤，减压浓缩得到白色固体6-氟-7-碘苯并呋喃-5-醇(240毫克，收率：96.1％)。MS(ES+):m/z＝279(M+H)+.
步骤53b:(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟-5-羟基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-110)的制备:氮气保护下，将(S)-4-(6-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0906-98)(120毫克，0.177毫摩尔，1.0当量)，6-氟-7-碘苯并呋喃-5-醇(0901-110)(98毫克，0.355毫摩尔，2.0当量)，碘化亚铜(3.5毫克，0.017毫摩尔，0.1当量)和四(三苯基膦)钯(20毫克，0.017毫摩尔，0.1当量)的甲苯(15毫升)混合物回流过夜。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤。减压除去溶剂，残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝1/2)得淡黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟-5-羟基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(35毫克，收率：29.9％)。MS(ES+):m/z＝663(M+H)+
步骤53c:6-氯-7-(6-氟-5-羟基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-110)的制备:向(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟-5-羟基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-110)(35毫克，0.053毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液加入三氟乙酸(0.5毫升)。混合物在常温下搅拌30分钟，并减压浓缩得到6-氯-7-(6-氟-5-羟基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(20毫克，粗品)。直接下一步没有纯化。MS(ES+):m/z＝563(M+H)+
步骤53d:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟-5-羟基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物110)的制备:往6-氯-7-(6-氟-5-羟基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0905-110)(20mg粗品)的乙腈(5毫升)混合物中加入N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升)，然后滴加丙烯酰氯(4.8毫克，0.053毫摩尔，1.50当量)。混合物在常温下搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯以萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟-5-羟基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(9毫克，收率：40.9％)。MS(ES+):m/z＝617(M+H)+。熔点：92-104℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ9.85(s,1H),8.52(d,J＝12.7Hz,1H),8.34(d,J＝4.8Hz,1H),7.82(d,J＝29.6Hz,1H),7.23(d,J＝8.4Hz,1H),7.15(s,1H),6.86(s,2H),6.21(d,J＝15.6Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.2Hz,1H),4.97(d,J＝29.1Hz,1H),4.41–4.29(m,2H),4.14(s,1H),3.76(dd,J＝40.7,29.4Hz,2H),3.18–3.08(m,1H),2.73(s,1H),1.99–1.89(m,3H),1.35(dd,J＝13.8,6.7Hz,3H),1.06(dd,J＝6.8,3.0Hz,3H),0.91(s,3H).
实施例54：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟-5-甲氧基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮((化合物111)的制备(按照方案九线路制备)
步骤54a:(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟-5-甲氧基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-111)的制备:氮气保护下，将(S)-4-(6-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0906-98)(70毫克，0.103毫摩尔，1.0当量)，6-氟-7-碘-5-甲氧基苯并呋喃(0901-111)(60毫克，0.166毫摩尔，2.5当量)，碘化亚铜(2毫克，0.01毫摩尔，0.1当量)和四(三苯基膦)钯(12毫克，0.01毫摩尔，0.1当量)的甲苯(10毫升)混合物回流过夜。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤。减压除去溶剂，残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝1/2)得淡黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟-5-甲氧基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(35毫克，收率：50.0％)。MS(ES+):m/z＝677(M+H)+
步骤54b:6-氯-7-(6-氟-5-甲氧基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-111)的制备:往(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟-5-甲氧基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-111)(35毫克，0.05毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(10毫升)溶液加入三氟乙酸(1毫升)，反应在常温下搅拌30分钟，减压浓缩得6-氯-7-(6-氟-5-甲氧基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(20毫克，粗品)。直接下一步没有纯化。MS(ES+):m/z＝577(M+H)+
步骤54c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟-5-甲氧基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物111)的制备:往6-氯-7-(6-氟-5-甲氧基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0905-111)(20毫克，粗品)的乙腈(5毫升)混合物中加入N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升)，滴加丙烯酰氯(4.7毫克，0.052毫摩尔，1.50当量)。反应在常温下搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯以萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟-5-甲氧基苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(6毫克，收率：28.5％)。MS(ES+):m/z＝631(M+H)+。熔点：101-113℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.53(d,J＝13.1Hz,1H),8.34(d,J＝4.8Hz,1H),7.90(d,J＝30.7Hz,1H),7.49(d,J＝8.2Hz,1H),7.15(s,1H),6.94(d,J＝1.8Hz,1H),6.86(d,J＝12.8Hz,1H),6.21(d,J＝16.5Hz,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.98(d,J＝26.5Hz,1H),4.42–4.30(m,2H),4.06(dd,J＝31.5,27.0Hz,1H),3.91–3.55(m,5H),3.14(d,J＝9.6Hz,1H),2.71(d,J＝20.7Hz,1H),1.97–1.88(m,3H),1.36(dd,J＝13.3,6.9Hz,3H),1.06(dd,J＝6.9,1.7Hz,3H),0.91(d,J＝4.0Hz,3H).
实施例55：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物112)的制备(按照方案九线路制备)
步骤55a:(3S)-4-(7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(tert-butyl(化合物0904-112)的制备:在氮气保护下，将2-(6-氯苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-105)(261毫克，0.94毫摩尔，5.0当量)，(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶基[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-1)(100毫克，0.188毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(21.77毫克，0.019毫摩尔，0.1当量)和碳酸氢钠(31.58毫克，0.376毫摩尔，2.0当量)加入到10毫升乙腈和2毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下搅拌过夜。反应液冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝100/1至20/1)得到黄色固体(3S)-4-(7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(105毫克，收率：86.0％)。MS(ES+):m/z＝646(M+H)+.
步骤55b:7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-112)的制备:将(3S)-4-(7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-112)(140毫克，0.162毫摩尔，1.0当量)溶解于6毫升二氯甲烷中，滴加1毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌1.0小时。反应液减压浓缩至干，所得残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝546(M+H)+.
步骤55c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物112)的制备:将7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0905-112)的粗品溶解于10毫升四氢呋喃中，加入2.0毫升N，N-二异丙基乙胺。反应体系置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(29.3毫克，0.326毫摩尔，2.0当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中，混合物搅拌0.5小时。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过水洗，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱(展开剂：二氯甲烷/甲醇＝12/1)纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(6-氯苯并呋喃-7-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(38毫克，收率：39.1％)。MS(ES+):m/z＝600(M+H)+.熔点：156～160℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.46(dd,J＝20.4,9.4Hz,1H),8.34(d,J＝4.8Hz,1H),7.98(s,1H),7.78(d,J＝8.4Hz,1H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.16(d,J＝4.6Hz,1H),7.05(d,J＝2.2Hz,1H),6.95–6.74(m,1H),6.21(d,J＝16.0Hz,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.1Hz,1H),4.97(d,J＝40.2Hz,1H),4.35(dd,J＝29.7,13.7Hz,2H),4.22–3.94(m,1H),3.85–3.46(m,2H),3.27–3.10(m,1H),2.86–2.69(m,1H),1.93(s,3H),1.35(dd,J＝20.2,6.7Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.90(s,3H).
实施例56：(S,E)-4-(4-(4-(丁-2-烯酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物113)的制备
将巴豆酸(13毫克，0.15毫摩尔，1.5当量)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(50毫克，0.13毫摩尔，1.3当量)和三乙胺(21毫克，0.2毫摩尔，2.0当量)加入到10毫升四氢呋喃中，混合物在室温下搅拌15分钟。加入(S)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物70)(53毫克，0.1毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物经过水洗，有机相减压浓缩，残留物用制备薄层色谱(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝30/1)纯化得到黄色固体(S,E)-4-(4-(4-(丁-2-烯酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(37毫克，收率：62％)。MS(ES+):m/z＝599(M+H)+.熔点：155℃-157℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.35(d,J＝4.7Hz,2H),7.94(s,1H),7.79(dd,J＝8.3,5.2Hz,1H),7.26(t,J＝9.5Hz,1H),7.18(d,J＝4.6Hz,1H),7.01(s,1H),6.78(dd,J＝14.4,6.8Hz,1H),6.57(s,1H),4.95(d,J＝39.2Hz,1H),4.33(dd,J＝29.1,13.1Hz,2H),4.09(d,J＝61.4Hz,1H),3.68(m,2H),3.06(s,1H),2.77(s,1H),1.90(m,6H),1.35(m,3H),1.08(d,J＝6.5Hz,3H),0.93(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例57：(S,E)-4-(4-(4-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物114)的制备
将(E)-4-(二甲氨基)丁-2-烯酸盐酸盐(25毫克，0.15毫摩尔，1.5当量)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(50毫克，0.13毫摩尔，1.3当量)和三乙胺(31毫克，0.3毫摩尔，3.0当量)加入到10毫升四氢呋喃中，混合物在室温下搅拌30分钟。加入(S)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物70)(53毫克，0.1毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物经过水洗。将有机相减压浓缩，残留物用制备薄层色谱(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝30/1)纯化得到黄色固体(S,E)-4-(4-(4-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(26毫克，收率：40％)。MS(ES+):m/z＝642(M+H)+.熔点：162℃-164℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.41(m,2H),7.95(d,J＝2.1Hz,1H),7.80(dd,J＝8.6,5.2Hz,1H),7.26(dd,J＝10.4,8.7Hz,1H),7.19(d,J＝4.9Hz,1H),7.01(t,J＝7.9Hz,2H),6.75(m,1H),4.97(d,J＝35.8Hz,1H),4.35(m,2H),4.11(dd,J＝59.8,12.8Hz,1H),3.85(d,J＝6.7Hz,2H),3.74(m,2H),3.17(m,1H),2.76(d,J＝6.3Hz,1H),2.72(s,6H),1.95(s,3H),1.36(m,3H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),0.94(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例58：(S,E)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(4-(4-甲氧基丁-2-烯酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物115)的制备
将(E)-4-甲氧基丁-2-烯酸(18毫克，0.15毫摩尔，1.5当量)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(50毫克，0.13毫摩尔，1.3当量)和三乙胺(31毫克，0.3毫摩尔，3.0当量)加入到10毫升四氢呋喃中，混合物在室温下搅拌30分钟。加入(S)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物70)(53毫克，0.1毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物经过水洗。将有机相减压浓缩，残留物用制备薄层色谱(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝30/1)纯化得到黄色固体(S,E)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-5-基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(4-(4-甲氧基丁-2-烯酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(31毫克，收率：49％)。MS(ES+):m/z＝629(M+H)+.熔点：136℃-138℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.35(s,2H),7.93(s,1H),7.78(s,1H),7.25(m,1H),7.17(s,1H),7.00(s,1H),6.74(s,1H),6.65(s,1H),4.95(d,J＝39.8Hz,1H),4.34(dd,J＝29.2,12.2Hz,2H),4.04(d,J＝56.7Hz,3H),3.71(m,2H),3.35(s,3H),3.11(m,1H),2.76(s,1H),1.93(s,3H),1.34(m,3H),1.07(d,J＝5.5Hz,3H),0.93(d,J＝5.2Hz,3H).
实施例59：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物116)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤59a:4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-胺(化合物0103-116)的制备:往4,6-二氯嘧啶-5-胺(1.5克，9.15毫摩尔，1.0当量)，Pd(dppf)Cl2(669毫克，0.915毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(2.91克，27.45毫摩尔，3.0当量)在二氧六环(30毫升)和水(5毫升)的混合物中加入异丙烯基硼酸频哪醇酯(1.84克，10.98毫摩尔，1.2当量)。混合物在氮气氛围下加热至95℃反应12小时。减压下除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚∶乙酸乙酯6∶1)，得到黄色固体4-氯-6-(丙-1-烯-2-基)嘧啶-5-胺(1.11克，产率：72％)。LCMS(ESI)：m/z 170[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝6:1).往上述制得的4-氯-6-(丙-1-烯-2-基)嘧啶-5-胺(1.11克，6.57毫摩尔，1.0当量)，Pd(dppf)Cl2(481毫克，0.657毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(3.48克，32.85毫摩尔，5.0当量)在二氧六环(22毫升)和水(5.5毫升)的混合物中加入甲基硼酸(1.97克，32.85毫摩尔，5.0当量)。混合物在氮气氛围下加热至102℃反应20小时。减压下除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚∶乙酸乙酯1∶1)，得到棕色油状物4-甲基-6-(丙-1-烯-2-基)嘧啶-5-胺(0.625克，产率：64％)。LCMS(ESI)：m/z 150[M+1]+；TLC：Rf0.3(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)。上述制备得到的4-甲基-6-(丙-1-烯-2-基)嘧啶-5-胺(0.625克，4.195毫摩尔，1.0当量)和钯碳(0.1g)在乙酸乙酯(12毫升)的混合物在氢气球压力下室温搅拌过夜。混合物过滤。滤液在减压下浓缩，得到棕色油状物4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-胺(406毫克，产率：64％)。LCMS(ESI)：m/z 152[M+1]+；TLC：Rf0.4(石油醚:乙酸乙酯＝1:1).
步骤59b:2,6-二氯-5-氟-N-(((4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)氨基甲酰基)烟酰胺(化合物0109-116)的制备:往2,6-二氯-5-氟烟酰胺(0.731克，3.495毫摩尔，1.3当量)的四氢呋喃(12毫升)混合液中加入草酰氯(0.59毫升，6.99毫摩尔，2.6当量)。混合物在氮气氛围下加热到75℃反应2小时。在减压下除去溶剂。残余物溶解于四氢呋喃(10毫升)中并冷却到0℃。逐滴加入4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-胺(0103-116)(0.406克，2.689毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(5毫升)溶液。混合物升到室温并搅拌1h。在减压下除去溶剂，残余物用二氯甲烷/石油醚(1：5，20毫升)稀释，然后过滤。收集固体并在真空下干燥，得到淡黄色固体2,6-二氯-5-氟-N-(((4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)氨基甲酰基)烟酰胺(1.04克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 386[M+1]+；TLC：Rf0.6(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)。
步骤59c:7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物0110-116)的制备:在0℃下往氢化钠(60％，0.323克，8.08毫摩尔，3.0当量)在N-甲基吡咯烷酮(5毫升)的混合物中逐滴加入2,6-二氯-5-氟-N-(((4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)氨基甲酰基)烟酰胺(0109-116)(1.04克，2.69毫摩尔，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(5毫升)溶液。混合物在0℃搅拌40分钟。加入饱和氯化铵溶液(50毫升)淬灭反应。加入1N稀盐酸溶液调节pH＝6。水层用乙酸乙酯(20毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到白色固体7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0.81克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 350[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)。
步骤59d:(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-116)的制备:往7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0110-116)(0.81克，2.314毫摩尔，1.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(1.91毫升，11.57毫摩尔，5.0当量)在乙腈(20毫升)的混合物中加入三氯氧磷(0.39毫升，4.17毫摩尔，1.8当量)。混合物在氮气氛围下加热至85℃反应2小时。减压除去溶剂。将残余物溶于四氢呋喃(15毫升)。在0℃下加入N,N-二异丙基乙胺(1.91毫升，11.57毫摩尔，5.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-1)(0.463克，2.314毫摩尔，1.0当量)。混合物升到室温然后搅拌30分钟。减压除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯1：1)，得到棕色固体(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.435克，收率：35％)。LCMS(ESI)：m/z 532[M+1]+；TLC：Rf0.3(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)。
步骤59e:(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-116)的制备:往(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-116)(130毫克，0.245毫摩尔，1.0当量)，Pd(dppf)Cl2(27毫克，0.037毫摩尔，0.15当量)和氟化钾(57毫克，0.98毫摩尔，4.0当量)在二氧六环(10毫升)和水(1毫升)的混合物中加入(6-氟苯并呋喃-7-基)三氟硼酸钾(178毫克，0.734毫摩尔，3.0当量)。混合物在氮气氛围下加热到100℃反应过夜。减压除去溶剂。将残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯1：2)，得到棕色固体(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(138毫克，收率：89％)。LCMS(ESI)：m/z632[M+1]+；TLC：Rf0.3(石油醚:乙酸乙酯＝1:2)。
步骤59f:6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-116)的制备:往(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-116)(138毫克，0.219毫摩尔，1.0当量)在二氯甲烷(6毫升)的混合物中加入三氟乙酸(1.5毫升)。混合物在室温下搅拌0.5小时。减压除去溶剂。残余物在真空下干燥，得到棕色油状物6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(140毫克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 532[M+1]+；TLC：Rf0.3(二氯甲烷：甲醇＝10：1)。
步骤59g:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物116)的制备:在0℃下往6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0905-116)(116毫克，0.219毫摩尔，1.0当量)和二异丙基乙胺(57毫克，0.438毫摩尔，2.0当量)在二氯甲烷(5毫升)的混合物中滴加丙烯酰氯(30毫克，0.329毫摩尔，1.5当量)的二氯甲烷(1毫升)溶液。混合物搅拌10分钟。混合物用水(15毫升)稀释，然后用二氯甲烷(10毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过Pre-TLC(乙酸乙酯：甲醇＝10∶1)纯化,得到白色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-6-甲基嘧啶-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(89毫克，收率：70％)。LCMS(ESI)：m/z 586[M+1]+；TLC：Rf0.6(二氯甲烷：甲醇＝10：1)；熔点：143-146℃。1HNMR(DMSO-d6，500MHz)：δ8.94(s,1H),8.48-8.40(m,1H),7.93(d,J＝2.0Hz,1H),7.82-7.79(m,1H),7.29-7.25(m,1H),7.02(d,J＝2.0Hz,1H),6.90-6.83(m,1H),6.23-6.19(m,1H),5.78-5.75(m,1H),5.02-4.95(m,1H),4.41-4.28(m,2H),4.17-4.02(m,1H),3.82-3.71(m,1H),3.67-3.48(m,1H),3.23-3.12(m,1H),2.83-2.80(m,1H),2.15(s,3H),1.38-1.34(m,3H),1.09(d,J＝6.5Hz,3H),0.95(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例60：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物117)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤60a:4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-胺(化合物0103-117)的制备:往4,6-二氯-2-甲基嘧啶-5-胺(2.0克，11.24毫摩尔，1.0当量)，Pd(dppf)Cl2(822毫克，1.124毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(3.57克，33.72毫摩尔，3.0当量)在二氧六环(40毫升)和水(7毫升)的混合物中加入异丙烯基硼酸频哪醇酯(2.27克，13.48毫摩尔，1.2当量)。混合物在氮气氛围下加热至95℃反应16小时。减压下除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚∶乙酸乙酯6∶1)，得到棕色油状物4-氯-2-甲基-6-(丙-1-烯-2-基)嘧啶-5-胺(1.56克，产率：76％)。LCMS(ESI)：m/z 184[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝6:1).往上述制备得到的4-氯-2-甲基-6-(丙-1-烯-2-基)嘧啶-5-胺(1.1克，6.01毫摩尔，1.0当量)，Pd(dppf)Cl2(446毫克，0.601毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(3.19克，30.05毫摩尔，5.0当量)在二氧六环(22毫升)和水(5.5毫升)的混合物中加入甲基硼酸(1.8克，30.05毫摩尔，5.0当量)。混合物在氮气氛围下加热至102℃反应18小时。减压下除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚∶乙酸乙酯1∶1)，得到棕色油状物2,4-二甲基-6-(丙-1-烯-2-基)嘧啶-5-胺(0.668克，产率：68％)。LCMS(ESI)：m/z 164[M+1]+；TLC：Rf0.3(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)。上述制备得到的2,4-二甲基-6-(丙-1-烯-2-基)嘧啶-5-胺(0.668克，4.10毫摩尔，1.0当量)和钯碳(80mg)在乙酸乙酯(15毫升)的混合物在氢气球压力下室温搅拌过夜。混合物过滤。滤液在减压下浓缩，得到棕色固体4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-胺(439毫克，产率：65％)。LCMS(ESI)：m/z 166[M+1]+；TLC：Rf0.4(石油醚:乙酸乙酯＝1:1).
步骤60b:2,6-二氯-5-氟-N-(((4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)氨基甲酰基)烟酰胺(化合物0109-117)的制备:往2,6-二氯-5-氟烟酰胺(0.723克，3.46毫摩尔，1.3当量)的四氢呋喃(15毫升)混合液中加入草酰氯(0.59毫升，6.92毫摩尔，2.6当量)。混合物在氮气氛围下加热到75℃反应2小时。在减压下除去溶剂。残余物溶解于四氢呋喃(10毫升)中并冷却到0℃。逐滴加入4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-胺(0103-117)(0.439克，2.66毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(5毫升)溶液。混合物升到室温并搅拌1h。在减压下除去溶剂。残余物用二氯甲烷/石油醚(1：5，20毫升)稀释，然后过滤。收集固体并在真空下干燥，得到淡黄色固体2,6-二氯-5-氟-N-(((4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)氨基甲酰基)烟酰胺(1.07克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 400[M+1]+；TLC：Rf0.6(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)。
步骤60c:7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物0110-117)的制备:在0℃下往氢化钠(60％，0.319克，7.98毫摩尔，3.0当量)在N-甲基吡咯烷酮(5毫升)的混合物中逐滴加入2,6-二氯-5-氟-N-(((4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)氨基甲酰基)烟酰胺(0109-117)(1.06克，2.66毫摩尔，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(5毫升)溶液。混合物在0℃搅拌40分钟。加入饱和氯化铵溶液(40毫升)淬灭反应。加入1N稀盐酸溶液调节pH＝6。水层用乙酸乙酯(20毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到淡黄色固体7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0.8克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 364[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)。
步骤60d:(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-117)的制备:往7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0110-117)(0.541克，1.49毫摩尔，1.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(1.23毫升，7.45毫摩尔，5.0当量)在乙腈(15毫升)的混合物中加入三氯氧磷(0.25毫升，2.68毫摩尔，1.8当量)。混合物在氮气氛围下加热至85℃反应2小时。减压除去溶剂。将残余物溶于四氢呋喃(15毫升)。在0℃下加入N,N-二异丙基乙胺(1.23毫升，7.45毫摩尔，5.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.298克，1.49毫摩尔，1.0当量)。混合物升到室温然后搅拌1小时。减压除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯1：1)，得到棕色固体(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.165克，收率：20％)。LCMS(ESI)：m/z 546[M+1]+；TLC：Rf0.3(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)。
步骤60e:(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)-2-氧-1-2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-117)的制备:往(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-117)(165毫克，0.302毫摩尔，1.0当量)，Pd(dppf)Cl2(33毫克，0.045毫摩尔，0.15当量)和氟化钾(70毫克，1.208毫摩尔，4.0当量)在二氧六环(15毫升)和水(1.5毫升)的混合物中加入(6-氟苯并呋喃-7-基)三氟硼酸钾(219毫克，0.906毫摩尔，3.0当量)。混合物在氮气氛围下加热到100℃反应过夜。减压除去溶剂。将残余物在硅胶上进行柱色谱分离(乙酸乙酯：甲醇20：1)，得到棕色油状物(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)-2-氧-1-2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(177毫克，收率：91％)。LCMS(ESI)：m/z646[M+1]+；TLC：Rf0.5(二氯甲烷:甲醇＝10:1)。
步骤60f:6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-117)的制备:往(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)-2-氧-1-2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-117)(177毫克，0.274毫摩尔，1.0当量)在二氯甲烷(8毫升)的混合物中加入三氟乙酸(2毫升)。混合物在室温下搅拌0.5小时。减压除去溶剂。残余物在真空下干燥，得到棕色油状物6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(160毫克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 546[M+1]+；TLC：Rf0.3(二氯甲烷：甲醇＝10：1)。
步骤60g:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物117)的制备:在0℃下往6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0905-117)(95毫克，0.174毫摩尔，1.0当量)和二异丙基乙胺(45毫克，0.348毫摩尔，2.0当量)在二氯甲烷(5毫升)的混合物中滴加丙烯酰氯(24毫克，0.261毫摩尔，1.5当量)的二氯甲烷(1毫升)溶液。混合物搅拌10分钟。混合物用水(10毫升)稀释，然后用二氯甲烷(10毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(10毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过Pre-TLC(乙酸乙酯：二氯甲烷：甲醇＝5:5：1)纯化,得到白色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(4-异丙基-2,6-二甲基嘧啶-5基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(55毫克，收率：53％)。LCMS(ESI)：m/z 600[M+1]+；TLC：Rf0.6(二氯甲烷：甲醇＝10：1)；熔点：133-136℃。1HNMR(DMSO-d6，500MHz)：δ8.47-8.39(m,1H),7.94(d,J＝2.5Hz,1H),7.83-7.80(m,1H),7.30-7.27(m,1H),7.03(d,J＝2.0Hz,1H),6.90-6.82(m,1H),6.23-6.19(m,1H),5.78-5.75(m,1H),5.01-4.94(m,1H),4.39-4.28(m,2H),4.16-4.02(m,1H),3.79-3.73(m,1H),3.67-3.64(m,1H),3.21-3.09(m,1H),2.77-2.75(m,1H),2.55(s,3H),2.09(s,3H),1.38-1.34(m,3H),1.07(d,J＝7.0Hz,3H),0.93(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例61：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物118)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤61a:4,6-二异丙基嘧啶-5-胺(化合物0103-118)的制备:氮气保护下，将4,6-二氯嘧啶-5-胺(984毫克，6.0毫摩尔，1.0当量)，异丙烯基硼酸频那醇酯(2.32克，13.8毫摩尔，2.3当量)，碳酸钠(1.91克，18.0毫摩尔，3.0当量)和1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(439毫克，0.6毫摩尔，0.1当量)加入到36毫升二氧六环和6毫升水的混合溶剂中，混合物在95℃下搅拌18小时。冷却到室温后，加入乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物经过硅胶柱层析纯化得到黄色油状物4,6-二异丙烯基嘧啶-5-胺(680毫克，收率：64％)。MS(ES+):m/z＝176(M+H)+.氢气条件下，将上述制备得到的4,6-二异丙烯基嘧啶-5-胺(680毫克，3.89毫摩尔，1.0当量)和10％钯碳(70毫克)加入到50毫升甲醇中，混合物在室温搅拌过夜。将混合物过滤，滤液减压浓缩得到棕色油状物4,6-二异丙基嘧啶-5-胺(662毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝180(M+H)+.
步骤61b:2,5,6-三氯-N-(((4,6-二异丙基嘧啶-5-基)氨基甲酰基)烟酰胺(化合物0109-118)的制备:氮气保护下，2,5,6-三氯烟酰胺(0108-73)(775毫克，3.43毫摩尔，1.0当量)和草酰氯(915毫克，7.20毫摩尔，2.1当量)的四氢呋喃(25毫升)混合物在75℃下搅拌3小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(25毫升)，在0℃下，将4,6-二异丙基嘧啶-5-胺(化合物0103-118)(680毫克，3.78毫摩尔，1.1当量)的四氢呋喃溶液(2毫升)滴加到上述混合物中。混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，用饱和食盐水洗涤，有机相减压浓缩得到黄色油状物2,5,6-三氯-N-(((4,6-二异丙基嘧啶-5-基)氨基甲酰基)烟酰胺(1.14克，收率：77％)。MS(ES+):m/z＝430(M+H)+.
步骤61c:6,7-二氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-4-羟基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0110-118)的制备:在氮气保护，零下30℃下，向2,5,6-三氯-N-(((4,6-二异丙基嘧啶-5-基)氨基甲酰基)烟酰胺(0109-118)(1.0克，2.32毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(50毫升)溶液中滴加1M双(三甲基硅烷基)氨基钾四氢呋喃溶液(5.81毫升，5.81毫摩尔，2.5当量)，混合物搅拌2小时。反应液用1M氯化氢水溶液淬灭，调节混合物pH值到3。加入乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物用二氯甲烷和甲醇(1/20)处理得到白色固体6,7-二氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-4-羟基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(505毫克，收率：55％)。MS(ES+):m/z＝394(M+H)+.
步骤61d:(S)-4-(6,7-二氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-118)的制备:氮气保护下，6,7-二氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-4-羟基吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0110-118)(505毫克，1.28毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(826毫克，6.40毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(589克，3.85毫摩尔，3.0当量)的乙腈(30毫升)的混合物在85℃下搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(30毫升)，在冰水浴中冷却，加入N,N-二异丙基乙胺(991毫克，7.68毫摩尔，6.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-1)(256毫克，1.28毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌0.5小时。加入乙酸乙酯，混合物用水和饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到50/1)得到黄色固体(S)-4-(6,7-二氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(592毫克，收率：80％)。MS(ES+):m/z＝576(M+H)+.
步骤61e:(3S)-4-(6-氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-118)的制备:在氮气保护下，将2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-73)(97毫克，0.37毫摩尔，1.3当量)，(S)-4-(6,7-二氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-118)(150毫克，0.26毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(30毫克，0.026毫摩尔，0.1当量)，氯化亚铜(26毫克，0.26毫摩尔，1.0当量)和碳酸钠(56毫克，0.52毫摩尔，2.0当量)加入到15毫升乙腈和1.25毫升水的混合溶剂中，混合物在81℃下搅拌过夜。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1到30/1)得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(165毫克，收率：93％)。MS(ES+):m/z＝676(M+H)+.
步骤61f:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物118)的制备:将(3S)-4-(6-氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-118)(165毫克，0.24毫摩尔，1.0当量)溶解于10毫升二氯甲烷中，滴加1.5毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌两小时。混合物减压浓缩至干，残留物溶解于10毫升四氢呋喃中，加入0.5毫升二异丙基乙胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(27毫克，0.29毫摩尔，1.2当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。将混合物搅拌30分钟，用乙酸乙酯稀释。有机相经过水洗，减压浓缩，残留物用制备薄层色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-1-(4,6-二异丙基嘧啶-5-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(94毫克，收率：61％)。MS(ES+):m/z＝630(M+H)+.熔点：254～256℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ9.00(s,1H),8.57(d,J＝9.1Hz,1H),7.92(d,J＝2.2Hz,1H),7.77(dd,J＝8.6,5.3Hz,1H),7.25(dd,J＝10.1,8.8Hz,1H),7.01(d,J＝2.2Hz,1H),6.95–6.79(m,1H),6.28–6.15(m,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),5.02(s,1H),4.35(ddd,J＝41.2,20.6,9.8Hz,2H),4.11(dd,J＝55.7,13.4Hz,1H),3.83(s,1H),3.69–3.49(m,1H),3.21(d,J＝55.6Hz,1H),2.74(d,J＝31.2Hz,2H),1.37(d,J＝5.9Hz,3H),1.08(d,J＝8.3Hz,6H),0.90(t,J＝6.1Hz,6H).
实施例62：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基苯基)吡啶基[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物120)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤62a:2,6-二氯-5-氟-N-((2-异丙基苯基)氨基甲酰基)烟酰胺(化合物0109-120)的制备:氮气保护下，2，6-二氯-5-氟烟酰胺(400毫克，1.91毫摩尔，1.0当量)和草酰氯(485毫克，3.82毫摩尔，2.0当量)的四氢呋喃(10毫升)混合物75℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(10毫升)，冰水浴下，滴加2-异丙基苯胺(258毫克，1.91毫摩尔，1当量)的四氢呋喃溶液(1毫升)。加完后，混合物搅拌30分钟。混合物的pH值用2摩尔/升的盐酸调至1。混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩得到黄色油状物2,6-二氯-5-氟-N-((2-异丙基苯基)氨基甲酰基)烟酰胺，该产品不需要进一步纯化直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝370(M+H)+.
步骤62b:7-氯-6-氟-1-(2-异丙基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物0110-120)的制备:在氮气保护，冰水浴下，向2,6-二氯-5-氟-N-((2-异丙基苯基)氨基甲酰基)烟酰胺(0109-120)(629毫克，1.7毫摩尔，1.0当量)的10毫升N-甲基吡咯烷酮溶液分批加入60％氢化钠(204毫克，5.1毫摩尔，3.0当量)，混合物搅拌1小时。反应液用2摩尔/升盐酸淬灭，并搅拌10分钟。混合物过滤。残留物用水洗，并干燥得到黄色固体7-氯-6-氟-1-(2-异丙基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮(450毫克，粗品)。MS(ES+):m/z＝334(M+H)+.
步骤62c:(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基苯基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-120)的制备:氮气保护下，7-氯-6-氟-1-(2-异丙基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(0110-120)(450毫克，1.35毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(870毫克，6.75毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(620毫克，4.05毫摩尔，3当量)的乙腈(10毫升)混合物85℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(10毫升)，冰水浴下，加入N,N-二异丙基乙胺(522毫克，4.05毫摩尔，3.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯叔丁酯(0111-1)(270毫克，1.35毫摩尔，1当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物用水洗、饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到80/1)得到黄色固体(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基苯基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(380毫克，收率：54.59％)。MS(ES+):m/z＝516(M+H)+.
步骤62d:(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-120)的制备:将(S)-4-(7-氯-6-氟-1-(2-异丙基苯基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-120)(127毫克，0.246毫摩尔，1当量)，6-氟苯并呋喃-7-三氟硼酸钾(0907-89)(119毫克，0.492毫摩尔，2当量)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(18毫克，0.0246毫摩尔，0.1当量)和氟化钾(28毫克，0.429毫摩尔，2当量)加入至10毫升1，4-二氧六环和1毫升水的混合溶液中。混合物在85℃的条件下搅拌反应3小时。然后，将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。通过薄层厚制备板纯化残留物，得到黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(120毫克，收率：79.47％)。MS(ESI):m/z 665(M+H)+.
步骤62e:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基苯基)吡啶基[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物120)的制备:将(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基苯基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-120)(120毫克，0.18毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N，N-二异丙基乙胺(69毫克，0.54毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(16毫克，0.18毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝12/1)，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-异丙基苯基)吡啶基[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(55毫克，收率：53.5％).MS(ESI):m/z 570(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.34(d,J＝9.6Hz,1H),7.92(t,J＝2.0Hz,1H),7.77(dd,J＝8.6,5.2Hz,1H),7.37(dd,J＝7.8,1.2Hz,1H),7.29(m,1H),7.22(m,2H),7.10(d,J＝7.8Hz,1H),7.00(d,J＝2.2Hz,1H),6.84(m,1H),6.19(dd,J＝18.1,8.0Hz,1H),5.75(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.90(d,J＝31.7Hz,1H),4.31(m,2H),4.09(m,1H),3.66(m,2H),3.15(m,1H),2.60(dd,J＝15.2,8.8Hz,1H),1.33(dd,J＝9.2,6.8Hz,3H),1.08(d,J＝6.8Hz,3H),0.97(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例63：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物121)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤63a:2,6-二氯-N-(((2,4-二异丙基吡啶-3-基)氨基甲酰基)-5-氟烟酰胺(化合物0109-121)的制备:氮气保护下，0℃下，向2,6-二氯-5-氟烟酰胺(0108-1)(400毫克，1.09毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(20毫升)溶液中加入草酰氯(486毫克，3.82毫摩尔，2.0当量)。然后使混合物在75℃下搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，冰水浴下，滴加2,4-二异丙基吡啶-3-胺(0103-121)(307毫克，1.72毫摩尔，0.9当量)的四氢呋喃溶液(15毫升)。加完后，混合物搅拌30分钟。加入乙酸乙酯，然后将混合物过滤。滤液用碳酸钠水溶液洗、水洗、饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗产品2,6-二氯-N-(((2,4-二异丙基吡啶-3-基)氨基甲酰基)-5-氟烟酰胺，该产品不需要进一步纯化直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝413(M+H)+.
步骤63b:7-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物0110-121)的制备:在氮气保护，冰水浴下，向2,6-二氯-N-(((2,4-二异丙基吡啶-3-基)氨基甲酰基)-5-氟烟酰胺(0109-121)(400毫克，0.97毫摩尔，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(10毫升)溶液分批加入60％氢化钠(155毫克，3.87毫摩尔，4.0当量)，混合物搅拌1小时。反应液用饱和氯化铵水溶液淬灭，并搅拌10分钟，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝50/1到10/1)得到白色固体7-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(360毫克，收率：98.6.0％)。MS(ES+):m/z＝377(M+H)+.
步骤63c:(S)-4-(7-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-吡啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-121)的制备:氮气保护下，7-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0110-121)(360毫克，0.96毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(616毫克，4.77毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(440毫克，2.88毫摩尔，3.0当量)的乙腈(15毫升)混合物85℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(10毫升)，冰水浴下，加入N,N-二异丙基乙胺(422毫克，3.27毫摩尔，3.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(192毫克，0.96毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物用水洗、饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1到40/1)得到黄色固体(S)-4-(7-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-吡啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(350毫克，收率：65.0％)。MS(ES+):m/z＝559(M+H)+.
步骤63d:(3S)-4-(1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-121)的制备:在氮气保护下，将2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-73)(140毫克，0.536毫摩尔，2.0当量)，(S)-4-(7-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-吡啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-121)(150毫克，0.268毫摩尔，1.0当量)，三(二亚苄基丙酮)二钯(25毫克，0.0268毫摩尔，0.1当量)，三环己基膦(15毫克，0.0536毫摩尔，0.2当量)和碳酸氢钠(45毫克，0.536毫摩尔，2.0当量)加入到10毫升乙腈和2毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下搅拌过夜。反应液冷却至室温，用乙酸乙酯萃取。有机相用水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱(二氯甲烷/甲醇＝150/1至30/1)得到黄色固体(3S)-4-(1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(152毫克，收率：86.3％)。MS(ES+):m/z＝659(M+H)+.
步骤63e:1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-121)的制备:将(3S)-4-(1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-121)(152毫克，0.23毫摩尔，1.0当量)溶解于6毫升二氯甲烷中，滴加1毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌2.0小时。反应液减压浓缩至干，所得残留物不经过进一步纯化，直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝569(M+H)+.
步骤63f:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物121)的制备:将1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0905-121)的粗品溶解于10毫升四氢呋喃中，加入2.0毫升N，N-二异丙基乙胺。反应体系置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(32毫克，0.353毫摩尔，1.3当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中，混合物搅拌0.5小时。加入水和乙酸乙酯萃取产物，有机相经过水洗，减压浓缩。残留物用制备薄层色谱(展开剂：二氯甲烷/甲醇＝12/1)纯化得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(40毫克，收率：28.3％)。MS(ES+):m/z＝613(M+H)+.熔点：134～139℃；1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.42(d,J＝4.3Hz,2H),7.89(s,1H),7.78(m,1H),7.25(dd,J＝16.4,7.0Hz,2H),7.01(s,1H),6.87(d,J＝11.4Hz,1H),6.21(d,J＝14.7Hz,1H),5.77(d,J＝10.1Hz,1H),4.97(s,1H),4.33(dd,J＝36.2,12.3Hz,2H),4.07(m,1H),3.65(m,2H),3.15(s,1H),2.66(s,1H),1.36(d,J＝5.7Hz,3H),1.07(d,J＝5.6Hz,6H),0.90(m,6H).
实施例64：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物122)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤64a:2,5,6-三氯-N-(((2,4-二异丙基吡啶-3-基)氨基甲酰基)烟酰胺(化合物0109-122)的制备:氮气保护下，2,5,6-三氯烟酰胺(385毫克，1.72毫摩尔，1.0当量)和草酰氯(437毫克，3.44毫摩尔，2.0当量)的四氢呋喃(15毫升)混合物75℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(5毫升)，冰水浴下，滴加2,4-二异丙基吡啶-3-胺(0103-121)(275毫克，1.72毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃溶液(5毫升)。加完后，混合物搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯，将混合物过滤。滤液用碳酸钠水溶液洗、水洗、饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗产品2,5,6-三氯-N-(((2,4-二异丙基吡啶-3-基)氨基甲酰基)烟酰胺，该产品不需要进一步纯化直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝429(M+H)+.
步骤64b:6,7-二氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物0110-122)的制备:在氮气保护，冰水浴下，向2,5,6-三氯-N-(((2,4-二异丙基吡啶-3-基)氨基甲酰基)烟酰胺(0109-122)(300毫克，0.7毫摩尔，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(15毫升)溶液分批加入60％氢化钠(85毫克，2.1毫摩尔，3.0当量)，混合物搅拌1小时。反应液用饱和氯化铵水溶液淬灭，并搅拌10分钟，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝10/1到4/1)得到白色固体6,7-二氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(235毫克，收率：85.4％)。MS(ES+):m/z＝393(M+H)+.
步骤64c:(S)-4-(6,7-二氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4--3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-122)的制备:氮气保护下，6,7-二氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0110-122)(235毫克，0.599毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(386毫克，2.99毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(275毫克，1.797毫摩尔，3.0当量)的乙腈(10毫升)混合物85℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂得到黄色固体4,6,7-三氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮该产品不需要进一步纯化直接用于下一步。MS(ES+):m/z＝411(M+H)+.氮气保护下，将上述得到的4,6,7-三氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(245毫克,0.597毫摩尔,1.0当量)溶于四氢呋喃(10毫升)，冰水浴下，加入N,N-二异丙基乙胺(231毫克，1.79毫摩尔，3.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(120毫克，0.597毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物用水洗、饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到80/1)得到黄色固体(S)-4-(6,7-二氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4--3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150毫克，收率：44.1％)。MS(ES+):m/z＝575(M+H)+.
步骤64d:(3S)-4-(6-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-122)的制备:氮气保护下，把(S)-4-(6,7-二氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4--3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-122)(130毫克,0.226毫摩尔,1.00当量),2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-73)(118毫克,0.452毫摩尔,2.00当量),碳酸氢钠(38毫克，0.452毫摩尔,2.00当量)，三环己基膦(13毫克，0.0452毫摩尔,0.02当量)和三(二亚苄基丙酮)二钯(21毫克，0.0226毫摩尔,0.1当量)的乙腈(10毫升)和水(1毫升)混合物在80℃下搅拌过夜。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤，减压除去溶剂，残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝16/1)得淡黄色固体(3S)-4-(6-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(78毫克，收率：51.3％)。MS(ES+):m/z＝675(M+H)+.
步骤64e:6-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-122)的制备:往(3S)-4-(6-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-122)(56毫克，0.08毫摩尔，1.00当量)的二氯甲烷(5毫升)溶液加入三氟乙酸(0.5毫升)，混合物在常温下搅拌30分钟，减压浓缩得到粗产品6-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(50毫克，粗品)。直接下一步没有纯化。MS(ES+):m/z＝575(M+H)+.
步骤64f:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物122)的制备:0℃下，向6-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0905-122)(50毫克，粗品)和N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升)的乙腈(5毫升)混合物中滴加丙烯酰氯(11.8毫克，0.13毫摩尔，1.50当量)，混合物在常温下搅拌30分钟。加入水和乙酸乙酯萃取，有机层用饱和食盐水洗涤并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：乙酸乙酯/甲醇＝15/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-1-(2,4-二异丙基吡啶-3-基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(42毫克，收率：77.7％)。MS(ES+):m/z＝629(M+H)+熔点:162-173℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.53(s,1H),8.39(d,J＝5.1Hz,1H),7.89(d,J＝2.2Hz,1H),7.74(dd,J＝8.6,5.3Hz,1H),7.22(dd,J＝10.1,8.7Hz,2H),6.99(d,J＝2.2Hz,1H),6.85(dd,J＝25.5,14.4Hz,1H),6.20(d,J＝16.4Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.99(s,1H),4.32(m,2H),4.09(dd,J＝59.1,13.0Hz,1H),3.70(m,2H),3.16(s,1H),2.60(dd,J＝54.8,23.0Hz,2H),1.35(d,J＝5.4Hz,3H),1.05(d,J＝6.7Hz,6H),0.87(dd,J＝6.6,4.0Hz,6H).
实施例65：2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯甲腈(化合物123)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤65a:2,6-二氯-N-(((2-氰基-6-异丙基苯基)氨基甲酰基)-5-氟烟酰胺(0109-123)的制备：氮气保护下，0℃下，向2,6-二氯-5-氟烟酰胺(0103-123)(500毫克，2.39毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(20毫升)溶液中加入草酰氯(608毫克，4.78毫摩尔，2.0当量)。然后使混合物在75℃下搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，冰水浴下，滴加2-氨基-3-异丙基苯腈(385毫克，2.39毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃溶液(1毫升)。加完后，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯和水萃取，将有机相干燥，减压浓缩，柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1到1：1)得到浅黄色固体2,6-二氯-N-(((2-氰基-6-异丙基苯基)氨基甲酰基)-5-氟烟酰胺(0.864克，收率：91.5％)。MS(ES+):m/z＝395(M+H)+.
步骤65b:2-(7-氯-6-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯甲腈(0110-123)的制备:在0℃下往氢化钠(60％，0.263克，6.56毫摩尔，3.0当量)在N-甲基吡咯烷酮(5毫升)的混合物中逐滴加入2,6-二氯-N-(((2-氰基-6-异丙基苯基)氨基甲酰基)-5-氟烟酰胺(0109-123)(0.864克，2.187毫摩尔，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(5毫升)溶液。混合物在0℃搅拌1小时。加入饱和氯化铵溶液(40毫升)淬灭反应。混合物过滤。固体用水洗涤然后在真空下干燥，得到灰色固体2-(7-氯-6-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯甲腈(0.728克，产率：93％)。LCMS(ESI)：m/z 359[M+1]+；TLC：Rf0.5(二氯甲烷：甲醇＝30：1)。
步骤65c:(S)-4-(7-氯-1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-6-氟-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4--3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-123)的制备:往2-(7-氯-6-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯甲腈(0110-123)(0.35克，0.975毫摩尔，1.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(0.8毫升，4.875毫摩尔，5.0当量)在乙腈(12毫升)的混合物中加入三氯氧磷(0.18毫升，1.95毫摩尔，2.0当量)。混合物在氮气氛围下加热至85℃反应2小时。减压除去溶剂。将残余物溶于四氢呋喃(10毫升)。在0℃下加入N,N-二异丙基乙胺(0.8毫升，4.875毫摩尔，5.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-1)(0.195克，0.975毫摩尔，1.0当量)。混合物升到室温然后搅拌1小时。减压除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯2：1)，得到棕色固体(S)-4-(7-氯-1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-6-氟-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4--3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.175克，收率：33％)。LCMS(ESI)：m/z 541[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)。
步骤65d:(3S)-4-(1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-123)的制备:往(S)-4-(7-氯-1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-6-氟-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4--3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-123)(130毫克，0.241毫摩尔，1.0当量)，Pd(dppf)Cl2(17.6毫克，0.024毫摩尔，0.1当量)和氟化钾(42毫克，0.723毫摩尔，3.0当量)在二氧六环(10毫升)和水(1毫升)的混合物中加入(6-氟苯并呋喃-7-基)三氟硼酸钾(175毫克，0.722毫摩尔，3.0当量)。混合物在氮气氛围下加热到100℃反应过夜。减压除去溶剂。将残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯2：1)，得到棕色固体(3S)-4-(1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(70毫克，收率：45％)。LCMS(ESI)：m/z 641[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)。
步骤65e:2-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧吡喃并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯甲腈(化合物0905-123)的制备:往(3S)-4-(1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-123)(70毫克，0.109毫摩尔，1.0当量)在二氯甲烷(6毫升)的混合物中加入三氟乙酸(1.5毫升)。混合物在室温下搅拌0.5小时。减压除去溶剂。残余物在真空下干燥，得到棕色油状物2-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧吡喃并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯甲腈(70毫克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 541[M+1]+；TLC：Rf0.3(二氯甲烷：甲醇＝10：1)。
步骤65f:2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯甲腈(化合物123)的制备:在0℃下往2-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1-基)-2-氧吡喃并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯甲腈(0905-123)(59毫克，0.109毫摩尔，1.0当量)和二异丙基乙胺(28毫克，0.218毫摩尔，2.0当量)在二氯甲烷(5毫升)的混合物中滴加丙烯酰氯(15毫克，0.164毫摩尔，1.5当量)的二氯甲烷(1毫升)溶液。混合物搅拌10分钟。混合物用水(10毫升)稀释，然后用二氯甲烷(10毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过Pre-TLC(乙酸乙酯：甲醇＝80∶1)纯化,得到白色固体2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯甲腈(36毫克，收率：56％)。LCMS(ESI)：m/z595[M+1]+；TLC：Rf0.6(二氯甲烷：甲醇＝20：1)；熔点：146-149℃。1HNMR(DMSO-d6，500MHz)：δ8.52-8.40(m,1H),7.94(d,J＝2.5Hz,1H),7.81-7.77(m,3H),7.55-7.52(m,1H),7.27-7.23(m,1H),7.00(d,J＝2.0Hz,1H),6.89-6.84(m,1H),6.21(d,J＝16.5Hz,1H),5.76(d,J＝11.5Hz,1H),5.08-4.91(m,1H),4.43-4.28(m,2H),4.16-4.01(m,1H),3.87-3.54(m,2H),3.22-3.07(m,1H),2.80-2.76(m,1H),1.38-1.32(m,3H),1.11(d,J＝3.0Hz,3H),0.98(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例66：2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯腈(化合物124)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤66a:2,5,6-三氯-N-((2-氰基-6-异丙基苯基)氨基甲酰基)烟酰胺(化合物0109-124)的制备:氮气保护下，2,5,6-三氯烟酰胺(339毫克，1.5毫摩尔，1.0当量)和草酰氯(401毫克，3.16毫摩尔，2.1当量)的四氢呋喃(20毫升)混合物在75℃下搅拌3小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，在0℃下，将2-氨基-3-异丙基苯腈(0103-123)(258毫克，1.61毫摩尔，1.1当量)的四氢呋喃溶液(2毫升)滴加到上述混合物中。混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，用饱和食盐水洗涤，有机相减压浓缩得到黄色固体2,5,6-三氯-N-((2-氰基-6-异丙基苯基)氨基甲酰基)烟酰胺(600毫克，收率：97％)。MS(ES+):m/z＝411(M+H)+.
步骤66b:2-(6,7-二氯-4-羟基-2-氧吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯腈(化合物0110-124)的制备:在氮气保护，零下30℃下，向2,5,6-三氯-N-((2-氰基-6-异丙基苯基)氨基甲酰基)烟酰胺(0110-124)(550毫克，1.34毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(35毫升)溶液中滴加1M双(三甲基硅烷基)氨基钾四氢呋喃溶液(3.34毫升，3.34毫摩尔，2.5当量)，混合物搅拌2小时。反应液用1M氯化氢水溶液淬灭，调节混合物pH值到1。加入乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残留物用甲醇处理得到黄色固体2-(6,7-二氯-4-羟基-2-氧吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯腈(267毫克，收率：53％)。MS(ES+):m/z＝375(M+H)+.
步骤66c:(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-124)的制备:氮气保护下，2-(6,7-二氯-4-羟基-2-氧吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯腈(0110-124)(230毫克，0.61毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(394毫克，3.05毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(282毫克，1.84毫摩尔，3.0当量)的乙腈(15毫升)混合物在85℃下搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，在冰水浴中冷却，加入N,N-二异丙基乙胺(473毫克，3.66毫摩尔，6.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-1)(122毫克，0.61毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌0.5小时。加入乙酸乙酯，混合物用水和饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到25/1)得到黄色固体(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(274毫克，收率：80％)。MS(ES+):m/z＝557(M+H)+.
步骤66d:(3S)-4-(6-氯-1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-124)的制备:在氮气保护下，将2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-73)(85毫克，0.33毫摩尔，1.5当量)，(S)-4-(6,7-二氯-1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-124)(120毫克，0.22毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(26毫克，0.022毫摩尔，0.1当量)，氯化亚铜(22毫克，0.22毫摩尔，1.0当量)和碳酸钠(47毫克，0.44毫摩尔，2.0当量)加入到18毫升乙腈和1.5毫升水的混合溶剂中，混合物在81℃下搅拌过夜。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用水洗，减压浓缩，残留物用制备薄层色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝30/1)得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(104毫克，收率：71％)。MS(ES+):m/z＝657(M+H)+.
步骤66e:2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯腈(化合物124)的制备:将(3S)-4-(6-氯-1-(2-氰基-6-异丙基苯基)-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-124)(104毫克，0.16毫摩尔，1.0当量)溶解于16毫升二氯甲烷中，滴加2.0毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌两小时。混合物减压浓缩至干，残留物溶解于15毫升四氢呋喃中，加入1.5毫升二异丙基乙胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(19毫克，0.21毫摩尔，1.3当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。将混合物搅拌30分钟，用乙酸乙酯稀释。有机相经过水洗，减压浓缩，残留物用制备薄层色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到2-(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧吡啶并[2,3-d]嘧啶-1(2H)-基)-3-异丙基苯腈(72毫克，收率：73％)。MS(ES+):m/z＝611(M+H)+.熔点：164～166℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.69–8.53(m,1H),7.96(d,J＝31.8Hz,1H),7.77(dd,J＝8.3,5.2Hz,3H),7.52(t,J＝7.8Hz,1H),7.24(t,J＝9.4Hz,1H),7.01(d,J＝2.0Hz,1H),6.86(d,J＝10.6Hz,1H),6.22(d,J＝16.5Hz,1H),5.77(d,J＝12.2Hz,1H),5.03(d,J＝74.3Hz,1H),4.48–4.24(m,2H),4.25–4.02(m,1H),3.95–3.50(m,2H),3.15(d,J＝31.2Hz,1H),2.77(s,1H),1.36(dd,J＝15.4,6.7Hz,3H),1.11(d,J＝6.8Hz,3H),0.97(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例67：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-(羟甲基)-6-异丙基苯基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物126)的制备(按照方案一和方案九线路制备)
步骤67a:N-((2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)氨基甲酰基)-2,6-二氯-5-氟烟酰胺(化合物0109-126)的制备:往2,6-二氯-5-氟烟酰胺(0.543克，2.6毫摩尔，1.3当量)在四氢呋喃(10毫升)的混合液中加入草酰氯(0.44毫升，5.2毫摩尔，2.6当量)。混合物在氮气氛围下加热到75℃反应2小时。在减压下除去溶剂。残余物溶解于四氢呋喃(10毫升)中并冷却到0℃。逐滴加入2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯胺(0103-126)(0.805克，2.0毫摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(5毫升)溶液。混合物升到室温并搅拌2h。在减压下除去溶剂。残余物在真空下干燥，得到白色固体N-((2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)氨基甲酰基)-2,6-二氯-5-氟烟酰胺(1.35克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 638[M+1]+；TLC：Rf0.5(二氯甲烷：石油醚＝3：1)。
步骤67b:1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-7-氯-6-氟吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物0110-126)的制备:在0℃下往氢化钠(60％，0.24克，6.0毫摩尔，3.0当量)在N-甲基吡咯烷酮(7毫升)的混合物中逐滴加入N-((2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)氨基甲酰基)-2,6-二氯-5-氟烟酰胺(0109-126)(1.28克，2.0毫摩尔，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(6毫升)溶液。混合物在0℃搅拌2小时。加入水(60毫升)淬灭反应。加入1N稀盐酸溶液调节pH＝6。水层用乙酸乙酯(25毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(20毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(二氯甲烷∶石油醚5∶1)，得到白色固体1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-7-氯-6-氟吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0.66克，产率：55％)。LCMS(ESI)：m/z 603[M+1]+；TLC：Rf0.3(二氯甲烷:石油醚＝5:1).
步骤67c:(S)-4-(1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-7-氯-6-氟-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0112-126)的制备:往1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-7-氯-6-氟吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0110-126)(0.30克，0.498毫摩尔，1.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(0.45毫升，2.739毫摩尔，5.5当量)在乙腈(10毫升)的混合物中加入三氯氧磷(0.084毫升，0.897毫摩尔，1.8当量)。混合物在氮气氛围下加热至85℃反应2小时。减压除去溶剂。将残余物溶于四氢呋喃(15毫升)。在0℃下加入N,N-二异丙基乙胺(0.45毫升，2.739毫摩尔，5.5当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-1)(0.10克，0.498毫摩尔，1.0当量)。混合物升到室温然后搅拌1小时。减压除去溶剂。残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯3：1)，得到淡黄色油状物(S)-4-(1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-7-氯-6-氟-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.297克，收率：76％)。LCMS(ESI)：m/z 784[M+1]+；TLC：Rf0.3(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)。
步骤67d:(3S)-4-(1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧代1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物0904-126)的制备:往(S)-4-(1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-7-氯-6-氟-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0112-126)(170毫克，0.217毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(38毫克，0.033毫摩尔，0.15当量)和碳酸氢钠(55毫克，0.651毫摩尔，3.0当量)在乙腈(15毫升)和水(1.5毫升)的混合物中加入2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-73)(142毫克，0.543毫摩尔，2.5当量)。混合物在氮气氛围下加热到90℃反应过夜。减压除去溶剂。将残余物在硅胶上进行柱色谱分离(石油醚：乙酸乙酯3：1)，得到淡黄色油状物(3S)-4-(1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧代1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(161毫克，收率：84％)。LCMS(ESI)：m/z 884[M+1]+；TLC：Rf0.5(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)。
步骤67e:1-(2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物0905-126)的制备:往(3S)-4-(1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-2-氧代1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0904-126)(161毫克，0.182毫摩尔，1.0当量)在二氯甲烷(6毫升)的混合物中加入三氟乙酸(1.5毫升)。混合物在室温下搅拌0.5小时。减压除去溶剂。残余物在真空下干燥，得到淡黄色油状物1-(2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(160毫克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 784[M+1]+；TLC：Rf0.3(二氯甲烷：甲醇＝20：1)。
步骤67f:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-(羟甲基)-6-异丙基苯基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物126)的制备:在0℃下往1-(2-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4-((S)-2-甲基哌嗪-1基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(0905-126)(143毫克，0.182毫摩尔，1.0当量)和二异丙基乙胺(47毫克，0.364毫摩尔，2.0当量)在二氯甲烷(5毫升)的混合物中滴加丙烯酰氯(25毫克，0.273毫摩尔，1.5当量)的二氯甲烷(1毫升)溶液。混合物搅拌10分钟。混合物用水(15毫升)稀释，然后用二氯甲烷(10毫升×3)萃取。合并的有机层用饱和食盐水(10毫升×1)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩,得到淡黄色油状物4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-1-(2-((((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-6-异丙基苯基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(155毫克，粗品)。LCMS(ESI)：m/z 838[M+1]+；TLC：Rf0.5(二氯甲烷：甲醇＝20：1)。往上述制备得到的产物在四氢呋喃(8毫升)的混合物中加入四丁基氟化铵(1M四氢呋喃溶液，0.27毫升，0.27毫摩尔，1.5当量)。混合物在室温下搅拌40小时。减压除去溶剂。残余物通过Pre-TLC(乙酸乙酯∶甲醇＝10∶1)纯化，得到白色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1-(2-(羟甲基)-6-异丙基苯基)吡啶基并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(40毫克，收率：37％)。LCMS(ESI)：m/z 600[M+1]+；TLC：Rf0.5(二氯甲烷：甲醇＝20：1)；熔点：146-149℃。1HNMR(DMSO-d6，500MHz)：δ8.41-8.37(m,1H),7.92(d,J＝2.0Hz,1H),7.80-7.77(m,1H),7.35-7.30(m,2H),7.27-7.23(m,2H),7.01(d,J＝2.5Hz,1H),6.91-6.83(m,1H),6.21(d,J＝15.5Hz,1H),5.78-5.76(m,1H),4.96-4.93(m,2H),4.43-4.29(m,2H),4.24-4.19(m,1H),4.14-4.02(m,2H),3.72-3.48(m,2H),3.18-3.12(m,1H),2.63-2.55(m,1H),1.34(d,J＝6.5Hz,3H),1.08-1.06(m,3H),0.98-0.96(m,3H)。
实施例68：阻转异构体拆分
本发明化合物存在立体异构体，其中邻位取代基R5,R6的取代可产生可分离的阻转异构体(atropisomers)，此阻转异构体的混合物可用手性SFC或手性HPLC制备柱分离得到两个单一的化合物(方法1)或将中间体0110用手性SFC分离(方法2)然后通过后续多步反应制备成终产物或将中间体0110制备成手性盐并将此盐拆分(方法3)然后通过后续多步反应制备成终产物。
方法1：终产物的手性SFC或手性HPLC分离
Figure BDA0002750625860001301
手性SFC分离条件：色谱柱：IG柱或IC柱，流动相：CO2/MeOH
手性HPLC分离条件：色谱柱：AD-H柱或IC柱，流动相：(MeOH/i-PrOH):环己烷体系。
方法2：中间体0110的手性SFC拆分
Figure BDA0002750625860001302
实施例68-1：7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1002-1)和7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1003-1)的制备:
将7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(0110-1)(30克)溶于甲醇(1800mL)中，用手性SFC分离。分离条件：仪器：SFC-150(Thar,Waters)，柱：IG 20*250mm,10um(Daicel)，柱温：35℃，流动相：CO2/MeOH＝50/50，流速：100g/min。分离得到：
第一流分为化合物7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1003-1)(14.5克)。LCMS(ESI)：m/z 349[M+1]+；1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.24(s,1H),8.50(dd,J＝16.7,6.1Hz,2H),7.27(d,J＝4.9Hz,1H),2.97–2.66(m,1H),2.03(s,3H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),1.00(d,J＝6.7Hz,3H).
第二流份为7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1002-1)(15.2克)，LCMS(ESI)：m/z 349[M+1]+；1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.24(s,1H),8.49(dd,J＝16.7,6.1Hz,2H),7.27(d,J＝4.9Hz,1H),2.98–2.72(m,1H),2.03(s,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),1.00(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例68-2：6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1002-73)和6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1003-73)的制备:
将6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[3,2-e]嘧啶-2,4(1H)-二酮(0110-73)(40克)溶于甲醇(1000mL)中，用手性SFC分离。分离条件：仪器：SFC-80(Thar,Waters)，柱：IG 20*250mm,10um(Daicel)，柱温：35℃，流动相：CO2/MeOH＝45/55，流速：80g/min。分离得到：
第一流分为化合物6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1003-73)(19.1克)。LCMS(ESI)：m/z 365[M+1]+；1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.26(s,1H),8.64–8.47(m,2H),7.27(d,J＝4.9Hz,1H),2.87(dt,J＝13.3,6.6Hz,1H),2.03(d,J＝5.8Hz,3H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),1.02(t,J＝5.8Hz,3H).
第二流分为6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1002-73)(19.8克)。LCMS(ESI)：m/z 365[M+1]+；1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.26(s,1H),8.71–8.40(m,2H),7.27(d,J＝4.9Hz,1H),2.89–2.67(m,1H),2.04(s,3H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),1.01(d,J＝6.7Hz,3H).
方法3：中间体0110制备成手性盐后拆分
Figure BDA0002750625860001321
实施例68-3：6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1002-73)的制备:
步骤68-3a:6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮-二苯甲酰酒石酸盐(化合物1001-73)的制备：将6,7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[3,2-e]嘧啶-2,4(1H)-二酮(0110-73)(2.0克，5.5毫摩尔，1.0当量)和D-二苯甲酰酒石酸(3.9克，11.0毫摩尔，2.0当量)溶于2-甲基四氢呋喃(30毫升)，升温到60℃搅拌30分钟。冷却到室温，旋干溶剂，往反应液中加入2-甲基四氢呋喃(24毫升)，升温到60℃，观察到固体完全溶解，再缓慢加入正己烷(24毫升)，撤去加热装置，趁热往反应液中加入少量晶种(晶种由纯的单一化合物6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮与二苯甲酰酒石酸制成)，室温下搅拌1小时，再静置过夜。过滤，滤饼用2-甲基四氢呋喃/正己烷＝1/2洗涤两次(10毫升每次)，真空干燥得到白色粉末固体6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮-二苯甲酰酒石酸盐(含2分子甲基四氢呋喃)(1.34克，收率：38.8％，ee:99.31％)。MS(ESI):m/z＝365(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ13.86(s,1H),12.26(s,1H),8.58(s,1H),8.51(d,J＝4.8Hz,1H),8.02(d,J＝7.3Hz,2H),7.73(t,J＝7.4Hz,1H),7.60(t,J＝7.7Hz,2H),7.27(d,J＝4.9Hz,1H),5.87(s,1H),3.82(dq,J＝12.4,6.1Hz,1H),3.74(td,J＝7.8,6.1Hz,1H),3.55(dd,J＝14.5,7.9Hz,1H),2.87(dt,J＝13.3,6.6Hz,1H),2.04(s,3H),1.97–1.88(m,1H),1.87–1.73(m,2H),1.31(ddd,J＝16.4,11.9,7.6Hz,1H),1.12(d,J＝6.1Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),1.01(d,J＝6.6Hz,3H).
步骤68-3b:6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1002-73)的制备:将6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮-二苯甲酰酒石酸盐(1001-73)(1.34克，2.1毫摩尔，1.0当量)溶于乙酸乙酯(20毫升)，加入20毫升水，再滴入碳酸氢钠水溶液调节pH约7到8。分液，有机相用饱和食盐水洗涤，干燥，旋干得到白色粉末固体6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(770毫克，收率：99.2％，ee:99.51％)。MS(ESI):m/z＝365(M+H)+；1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.26(s,1H),8.71–8.40(m,2H),7.27(d,J＝4.9Hz,1H),2.89–2.67(m,1H),2.04(s,3H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),1.01(d,J＝6.7Hz,3H).
以下化合物可以用实施例69至实施例87的方法制备。
Figure BDA0002750625860001331
Figure BDA0002750625860001341
实施例69：化合物48的拆分
化合物48(4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-(甲氧基甲基)苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮)(220毫克)用手性制备柱分离(柱型号：AD-H,10*5mm,5um,；流动相：(MeOH/i-PrOH＝2/3):环己烷＝7/93to15/85,50min)得两个流分：第1流分(化合物48-2，100毫克)和第2流分(48-1，90毫克)。
第1流分(化合物48-2)：1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.40(s,2H),7.50(s,1H),7.27(d,J＝13.6Hz,3H),6.86(s,1H),6.22(s,1H),5.77(s,1H),4.99(s,1H),4.34(d,J＝63.5Hz,2H),4.07(d,J＝23.6Hz,3H),3.74(d,J＝59.8Hz,2H),3.03(s,4H),2.73(s,1H),2.50(s,3H),1.31(s,3H),1.06(s,3H),0.85(s,3H).
第2流分(化合物48-1)：1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.36(d,J＝32.4Hz,2H),7.50(s,1H),7.27(d,J＝11.5Hz,3H),6.85(s,1H),6.20(d,J＝13.2Hz,1H),5.77(s,1H),4.88(s,1H),4.33(m,2H),4.05(d,J＝41.0Hz,3H),3.61(d,J＝62.7Hz,2H),3.15(m,1H),3.03(s,3H),2.74(s,1H),1.94(s,3H),1.36(s,3H),1.06(s,3H),0.85(s,3H).
实施例70：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物70-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤70a:(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1004-70-1)的制备：氮气保护下，7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1002-1)(3克，8.62毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(5.56克，43.1毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(3.95克，25.86毫摩尔，3.0当量)的乙腈(30毫升)混合物85℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(30毫升)，冰水浴下，加入N,N-二异丙基乙胺(3.34克，25.86毫摩尔，3.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.724克，8.62毫摩尔，1当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物用水洗、饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到80/1)得到叔丁基(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶基[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸为黄色固体(3.57克，收率：78.29％)。MS(ES+):m/z＝531(M+H)+.
步骤70b:(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1006-70-1)的制备:氮气保护条件下，(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-70-1)(100毫克，0.19毫摩尔，1.0当量)，6-氟苯并呋喃-7-硼酸频那醇酯(0902-70)(74毫克，0.28毫摩尔，1.5当量)，碳酸钠(40毫克，0.38毫摩尔，2.0当量)，氯化亚铜(19毫克，0.19毫摩尔，1.0当量)和四三苯基膦钯(22毫克，0.019毫摩尔，0.1当量)的乙腈/水＝10/1(11毫升)的混合物在82℃下搅拌过夜。冷却到室温后，混合物倒入水中，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，并减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝1/2)得黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(110毫克，收率：92.4％)。MS(ES+):m/z＝631(M+H)+.
步骤70c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物70-1)的制备:向(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-70-1)(110毫克，0.17毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(4毫升)溶液加入三氟乙酸(2毫升)，混合物室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(6毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(65毫克，0.51毫摩尔，3.0当量)，冰水浴下，往混合物中滴加丙烯酰氯(18.5毫克，0.2毫摩尔，1.2当量)的四氢呋喃(0.5毫升)溶液。混合物搅拌30分钟。加入水，再加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶薄层层析制备板纯化(洗脱剂为：乙酸乙酯/甲醇＝12/1)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(93毫克，收率：91.2％)。MS(ES+):m/z＝585(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.38(dd,J＝20.9,7.0Hz,2H),7.94(d,J＝2.2Hz,1H),7.79(dd,J＝8.6,5.2Hz,1H),7.25(dd,J＝10.4,8.7Hz,1H),7.19(d,J＝4.7Hz,1H),7.01(d,J＝2.2Hz,1H),6.84(m,1H),6.20(d,J＝16.7Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.91(s,1H),4.34(m,2H),4.08(dd,J＝62.4,13.2Hz,1H),3.63(dd,J＝49.3,35.1Hz,2H),3.18(d,J＝12.2Hz,1H),2.77(m,1H),1.94(s,3H),1.36(d,J＝6.7Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例71：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物70-2)的制备(按照方案十线路制备)
步骤71a:(S)-4-(7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1008-70-2)的制备：合成方法如实施例70步骤70a,仅是将其中7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(化合物1002-1)替换为7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(1003-1)(3.0克，8.6毫摩尔，1.0当量)，得到白色固体(S)-4-(7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4.1克，收率：89.1％)。MS(ES+):m/z＝531(M+H)+.
步骤71b:(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1010-70-2)的制备:合成方法如实施例70步骤70b,仅是将其中(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-70-1)替换为(S)-4-(7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100毫克，0.19毫摩尔，1.0当量)，得到白色固体黄色固体(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(110毫克，收率：92.4％)。MS(ES+):m/z＝631(M+H)+.
步骤71c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物70-2)的制备:合成方法如实施例70步骤70c,仅是将其中(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-70-1)替换为(3S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1010-70-2)(110毫克，0.17毫摩尔，1.0当量)得黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(85毫克，收率：83.3％)。MS(ES+):m/z＝585(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.44(d,J＝9.6Hz,1H),8.35(d,J＝4.9Hz,1H),7.94(d,J＝2.2Hz,1H),7.79(dd,J＝8.6,5.2Hz,1H),7.25(dd,J＝10.5,8.7Hz,1H),7.17(d,J＝5.3Hz,1H),7.01(d,J＝2.2Hz,1H),6.85(m,1H),6.20(d,J＝16.8Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.99(m,1H),4.36(dd,J＝50.2,12.5Hz,2H),4.09(dd,J＝57.6,13.5Hz,1H),3.66(m,2H),3.09(t,J＝11.4Hz,1H),2.76(d,J＝5.7Hz,1H),1.94(s,3H),1.32(d,J＝6.7Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例72：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物73-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤72a:(S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1004-73-1)的制备:氮气保护下，6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(1002-73)(1.0克，2.7毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(1.7克，13.5毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(1.3克，8.1毫摩尔，3.0当量)的乙腈(30毫升)混合物85℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，冰水浴条件下，加入N,N-二异丙基乙胺(1.0克，8.1毫摩尔，3.0当量)和(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(540毫克，2.7毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物用水洗、饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1到50/1)得到黄色固体(S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.48克，收率：98.7％)。MS(ES+):m/z＝547(M+H)+.
步骤72b:(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1006-73-1)的制备:氮气保护条件下，(S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.0克，1.8毫摩尔，1.0当量)，6-氟苯并呋喃-7-硼酸频那醇酯(0903-73)(720毫克，2.7毫摩尔，1.5当量)，碳酸钠(382毫克，3.6毫摩尔，2.0当量)，氯化亚铜(178毫克，1.8毫摩尔，1.0当量)和四三苯基膦钯(208毫克，0.18毫摩尔，0.1当量)的乙腈/水＝10/1(22毫升)混合物82℃下搅拌过夜。冷却到室温后，混合物倒入水中，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，并减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1到30/1)得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.2克，收率：100％)。MS(ES+):m/z＝647(M+H)+.
步骤72c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物73-1)的制备:向(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-73-1)(1.2克，1.86毫摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(10毫升)溶液加入三氟乙酸(4毫升)，混合物室温下搅拌1小时。减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(20毫升)，加入N,N-二异丙基乙胺(720毫克，5.58毫摩尔，3.0当量)，冰水浴下，往混合物中滴加丙烯酰氯(202毫克，2.23毫摩尔，1.2当量)的四氢呋喃(2毫升)溶液。混合物搅拌30分钟。加入水，再加入乙酸乙酯萃取。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1到30/1)得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(850毫克，收率：77.3％)。MS(ES+):m/z＝601(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.53(s,1H),8.34(d,J＝4.9Hz,1H),7.95(d,J＝29.9Hz,1H),7.77(dd,J＝8.6,5.3Hz,1H),7.24(dd,J＝10.2,8.7Hz,1H),7.16(d,J＝4.9Hz,1H),7.02(d,J＝2.1Hz,1H),6.87(dd,J＝25.7,14.0Hz,1H),6.22(d,J＝16.3Hz,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.96(s,1H),4.35(m,2H),4.09(m,1H),3.68(m,2H),3.18(d,J＝5.3Hz,1H),2.75(s,1H),1.94(d,J＝21.7Hz,3H),1.38(d,J＝6.7Hz,3H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),0.92(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例73：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物73-2)的制备(按照方案十线路制备)
步骤73a:(S)-4-(6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1008-73-2)的制备:合成方法如实施例72步骤72a,仅是将6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(1002-73)替换为6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(1003-73)(5.0克，13.7毫摩尔，1.0当量)，得到白色固体(S)-4-(6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5.9克，收率：78.7％)。MS(ES+):m/z＝547(M+H)+.
步骤73b:(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1010-73-2)的制备:合成方法如实施例72步骤72b,仅是将(S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-73-1)替换为(S)-4-(6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1008-73-2)(5.7克，10.4毫摩尔，1.0当量)，得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(7.0克，收率：104.5％)。MS(ES+):m/z＝647(M+H)+.
步骤73c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物73-2)的制备:合成方法如实施例72步骤70c,仅是将(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-73-1)替换为(3S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1010-73-2)(7.0克，10.58毫摩尔，1.0当量)，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(5.0克，收率：76.9％)。MS(ES+):m/z＝601(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.55(s,1H),8.34(d,J＝4.8Hz,1H),7.95(d,J＝30.0Hz,1H),7.76(dd,J＝8.6,5.3Hz,1H),7.24(dd,J＝10.2,8.7Hz,1H),7.15(d,J＝4.8Hz,1H),7.01(d,J＝2.0Hz,1H),6.94–6.74(m,1H),6.21(d,J＝16.0Hz,1H),5.77(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),5.02(s,1H),4.44–4.25(m,2H),4.10(dd,J＝57.1,12.4Hz,1H),3.91–3.43(m,2H),3.11(s,1H),2.76(s,1H),1.93(d,J＝25.5Hz,3H),1.35(d,J＝6.7Hz,3H),1.14–1.01(m,3H),0.92(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例74:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物74-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤74a:(S)-4-(6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1005-74-1)的制备:在氮气的氛围下，将(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-70-1)(474毫克，0.894毫摩尔，1当量)，六甲基二锡(586毫克，1.788毫摩尔，2当量)和四三苯基磷钯(103毫克，0.09毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(15毫升)。混合物在110℃下搅拌2小时。反应冷却至室温。混合物浓缩，用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚/乙酸乙酯＝5/1-1/2)得到黄色固体(S)-4-(6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(400毫克，收率:67.79％)。MS(ESI):m/z 661(M+H)+.
步骤74b:(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1006-74-1)的制备:在氮气的氛围下，将(S)-4-(6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1005-74-1)(300毫克，0.454毫摩尔，1当量)，5，6-二氟-7-碘苯并呋喃(0901-74)(190毫克，0.681毫摩尔，1.5当量)，碘化亚铜(8.6毫克，0.045毫摩尔，0.1当量)和四三苯基磷钯(52毫克，0.045毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(15毫升)。混合物在125℃下搅拌16小时。反应冷却至室温。混合物浓缩，用硅胶柱层析纯化(展开剂:石油醚/乙酸乙酯＝10/1-1/3)得到黄色固体(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200毫克，收率:67.91％)。MS(ESI):m/z 649(M+H)+.
步骤74c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物74-1)的制备:将(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-74-1)(200毫克，0.308毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N，N-二异丙基乙胺(119毫克，0.924毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(28毫克，0.308毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用硅胶柱层析纯化(展开剂:二氯甲烷/甲醇＝200/1-20/1)，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(118毫克，收率：63.5％)。MS(ESI):m/z 603(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.41(m,1H),8.35(d,J＝4.9Hz,1H),8.01(d,J＝2.1Hz,1H),7.86(dd,J＝10.0,7.9Hz,1H),7.17(d,J＝4.9Hz,1H),7.01(d,J＝2.2Hz,1H),6.84(dd,J＝25.7,14.5Hz,1H),6.19(d,J＝16.4Hz,1H),5.75(dd,J＝10.4,2.2Hz,1H),4.90(s,1H),4.31(dd,J＝48.3,13.4Hz,2H),4.07(dd,J＝61.9,12.8Hz,1H),3.59(m,2H),3.20(m,1H),2.76(dt,J＝12.9,6.3Hz,1H),1.92(s,3H),1.35(d,J＝6.7Hz,3H),1.06(d,J＝6.7Hz,3H),0.92(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例75:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物74-2)的制备(按照方案十线路制备)
步骤75a:(S)-4-(6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1009-74-2)的制备:合成方法如实施例74步骤74a,仅是将(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-70-1)替换为(S)-4-(7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300毫克，0.56毫摩尔，1.0当量)得到黄色固体(S)-4-(6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200毫克，收率:53.6％)。MS(ESI):m/z 661(M+H)+.
步骤75b:(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1010-74-2)的制备:合成方法如实施例74步骤74b,仅是将(S)-4-(6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1005-74-1)替换为(S)-4-(6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1009-74-2)(200毫克，0.3毫摩尔，1当量)制备得到黄色固体(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150毫克，收率:76.5％)。MS(ESI):m/z649(M+H)+.
步骤75c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物74-2)的制备:合成方法如实施例74步骤74c,仅是将(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-74-1)替换为(3S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1010-74-2)制备得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(100毫克，收率：71.9％).MS(ESI):m/z 603(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.47(d,J＝9.0Hz,1H),8.35(d,J＝4.9Hz,1H),8.01(d,J＝2.1Hz,1H),7.86(dd,J＝10.0,7.9Hz,1H),7.17(d,J＝4.9Hz,1H),7.01(d,J＝2.2Hz,1H),6.83(m,1H),6.19(d,J＝16.6Hz,1H),5.75(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.99(m,1H),4.35(dd,J＝48.9,12.1Hz,2H),4.08(dd,J＝56.4,12.9Hz,1H),3.63(m,2H),3.12(dd,J＝49.4,37.7Hz,1H),2.75(d,J＝5.6Hz,1H),1.93(s,3H),1.31(d,J＝6.7Hz,3H),1.06(d,J＝6.7Hz,3H),0.92(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例76:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物89-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤76a:(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1004-89-1)的制备:氮气保护下，7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1002-1)(1.0克，2.87毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(1.85克，14.35毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(1.32克，8.61毫摩尔，3.0当量)的乙腈(50毫升)混合物在85℃下搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(50毫升)，在冰水浴中冷却，加入N,N-二异丙基乙胺(1.11克，8.61毫摩尔，3.0当量)和(2R,5S)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-89)(615毫克，2.87毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物用水和饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到50/1)得到黄色固体(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.22克，收率：78％)。MS(ES+):m/z＝545(M+H)+.
步骤76b:(2R,5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1006-89-1)的制备:在氮气保护下，将2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-73)(511毫克，1.95毫摩尔，1.3当量)，(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-89-1)(816毫克，1.5毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(174毫克，0.15毫摩尔，0.1当量)，氯化亚铜(149毫克，1.5毫摩尔，1.0当量)和碳酸钠(318毫克，3.0毫摩尔，2.0当量)加入到45毫升乙腈和3.8毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下加热过夜。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取。有机相用水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1到30/1)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(962毫克，收率：99％)。MS(ES+):m/z＝645(M+H)+.
步骤76c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物89-1)的制备:将(2R,5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-89-1)(962毫克，1.49毫摩尔，1.0当量)溶解于80毫升二氯甲烷中，滴加12毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌两小时。混合物减压浓缩至干，残留物溶解于50毫升四氢呋喃中，加入2毫升二异丙基乙胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(149毫克，1.64毫摩尔，1.1当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。将混合物搅拌1小时，用乙酸乙酯稀释。有机相经过水洗，减压浓缩，残留物用制硅胶柱层析色谱(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1到30/1)纯化，得到黄色固体4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(300毫克，收率：33％)。MS(ES+):m/z＝599(M+H)+.熔点：275～277℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.38(dd,J＝14.4,6.8Hz,2H),7.95(d,J＝2.1Hz,1H),7.80(dd,J＝8.6,5.2Hz,1H),7.26(dd,J＝10.4,8.7Hz,1H),7.18(d,J＝4.9Hz,1H),7.02(d,J＝2.2Hz,1H),6.84(ddd,J＝29.8,16.6,10.5Hz,1H),6.19(d,J＝16.7Hz,1H),5.75(ddd,J＝10.4,5.4,2.1Hz,1H),4.80(m,2H),3.90(m,4H),2.75(dq,J＝13.2,6.6Hz,1H),1.95(s,3H),1.36(m,3H),1.25(dd,J＝23.4,9.8Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.95(dd,J＝6.5,2.7Hz,3H).
实施例77:4-((2S，5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物89-2)的制备(按照方案十线路制备)
步骤77a:(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1008-89-2)的制备:合成方法如实施例76步骤76a,仅是将7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1002-1)替换为7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1003-1)(300毫克，0.86毫摩尔，1.0当量)得到黄色固体(2R，5S)-4-(7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(330毫克，收率：69.4％)。MS(ES+):m/z＝545(M+H)+.
步骤77b:(2R,5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1011-89-2)的制备:合成方法如实施例76步骤76b,仅是将(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-89-1)替换为(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1008-89-2)(150毫克,0.275毫摩尔,1.00当量)得到淡黄色固体(2R，5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(120毫克，收率：70.1％)。MS(ES+):m/z＝645(M+H)+.
步骤77c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物89-2)的制备:合成方法如实施例76步骤76c,仅是将(2R,5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-89-1)替换为(2R,5S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1011-89-2)(120毫克，0.186毫摩尔，1.00当量)得到黄色固体4-((2S，5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(92毫克，收率：71.8％)。MS(ES+):m/z＝599(M+H)+熔点:162-171℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.45(d,J＝9.2Hz,1H),8.36(d,J＝4.9Hz,1H),7.96(d,J＝1.2Hz,1H),7.80(dd,J＝8.4,5.3Hz,1H),7.26(t,J＝9.5Hz,1H),7.19(d,J＝4.8Hz,1H),7.02(s,1H),6.83(ddd,J＝20.2,16.8,10.5Hz,1H),6.19(dd,J＝16.7,2.0Hz,1H),5.75(m,1H),4.72(m,2H),3.81(m,4H),2.74(dt,J＝6.4,5.5Hz,1H),1.98(s,3H),1.32(dd,J＝10.9,6.7Hz,3H),1.21(dd,J＝40.9,6.7Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.94(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例78:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物90-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤78a:(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1004-90-1)的制备:氮气保护下，6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1002-73)(1.0克，2.74毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(1.77克，13.70毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(1.26克，8.22毫摩尔，3.0当量)的乙腈(50毫升)混合物在85℃下搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(50毫升)，在冰水浴中冷却，加入N,N-二异丙基乙胺(1.06克，8.22毫摩尔，3.0当量)和(2R,5S)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0111-89)(587毫克，2.74毫摩尔，1.0当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物用水和饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到50/1)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.37克，收率：88％)。MS(ES+):m/z＝561(M+H)+.
步骤78b:(2R,5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1006-90-1)的制备:在氮气保护下，将2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-73)(590毫克，2.25毫摩尔，1.5当量)，(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-90-1)(842毫克，1.5毫摩尔，1.0当量)，四三苯基膦钯(174毫克，0.15毫摩尔，0.1当量)，氯化亚铜(149毫克，1.5毫摩尔，1.0当量)和碳酸钠(318毫克，3.0毫摩尔，2.0当量)加入到48毫升乙腈和3.8毫升水的混合溶剂中，混合物在80℃下加热过夜。混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取。有机相用水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析色谱纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1to30/1)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(944毫克，收率：95％)。MS(ES+):m/z＝661(M+H)+.
步骤78c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物90-1)的制备:将(2R,5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-90-1)(944毫克，1.43毫摩尔，1.0当量)溶解于66毫升二氯甲烷中，滴加10毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌两小时。混合物减压浓缩至干，残留物溶解于40毫升四氢呋喃中，加入2毫升二异丙基乙胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(143毫克，1.58毫摩尔，1.1当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。将混合物搅拌半小时，用乙酸乙酯稀释。有机相经过水洗，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析色谱(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝150/1到30/1)，得到黄色固体4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(500毫克，收率：56％)。MS(ES+):m/z＝615(M+H)+.熔点：175～177℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.51(d,J＝7.7Hz,1H),8.34(d,J＝4.8Hz,1H),7.95(d,J＝25.0Hz,1H),7.76(dd,J＝8.2,5.4Hz,1H),7.24(t,J＝9.4Hz,1H),7.15(d,J＝4.7Hz,1H),7.01(s,1H),6.83(m,1H),6.19(d,J＝16.7Hz,1H),5.75(m,1H),4.76(dd,J＝117.1,84.1Hz,2H),3.91(m,4H),2.74(s,1H),1.93(d,J＝17.6Hz,3H),1.36(t,J＝5.5Hz,3H),1.25(dd,J＝32.9,6.7Hz,3H),1.06(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝5.0Hz,3H).
实施例79:4-((2S，5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物90-2)的制备(按照方案十线路制备)
步骤79a:(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1008-90-2)的制备:合成方法如实施例78步骤78a,仅是将6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1002-73)替换为6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1003-73)(400毫克，1.09毫摩尔，1.0当量)得黄色固体(2R，5S)-4-(6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶基[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(220毫克，收率：36.0％)。MS(ES+):m/z＝561(M+H)+.
步骤79b:(2R,5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1010-90-2)的制备:合成方法如实施例78步骤76b,仅是将(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-90-1)替换为(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1008-90-2)(150毫克，0.267毫摩尔，1.00当量)得淡黄色固体(2R，5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(160毫克，收率：90.9％)。MS(ES+):m/z＝661(M+H)+.
步骤79c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物90-2)的制备:合成方法如实施例78步骤78c,仅是将(2R,5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-90-1)替换为(2R,5S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1010-90-2)得黄色固体4-((2S，5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(102毫克，收率：70.8％)。MS(ES+):m/z＝615(M+H)+熔点:152-161℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.55(s,1H),8.33(d,J＝4.9Hz,1H),7.95(d,J＝29.6Hz,1H),7.76(dd,J＝8.6,5.2Hz,1H),7.23(m,1H),7.15(d,J＝4.7Hz,1H),7.00(d,J＝1.8Hz,1H),6.82(td,J＝17.3,10.5Hz,1H),6.18(dd,J＝16.7,2.2Hz,1H),5.74(m,1H),4.71(m,2H),3.94(m,4H),2.71(s,1H),1.95(d,J＝22.7Hz,3H),1.34(t,J＝6.9Hz,3H),1.21(m,3H),1.05(d,J＝6.7Hz,3H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例80:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物91-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤80a:(2R,5S)-4-(6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1005-91-1)的制备:氮气保护下，将(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-89-1)(300毫克，0.55毫摩尔，1.0当量)，六甲基二锡(380毫克，1.16毫摩尔，2.1当量)和四三苯基膦钯(64毫克，0.55毫摩尔，0.1当量)加入到50毫升干燥甲苯中，混合物在110℃下搅拌三小时。混合物用乙酸乙酯稀释，经硅藻土过滤，滤液减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱(洗脱剂为：石油醚/乙酸乙酯＝1/2到1/3)纯化，得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(332毫克，收率：89％)。MS(ES+):m/z＝675(M+H)+.
步骤80b:(2R,5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1006-91-1)的制备:氮气保护下，将(2R,5S)-4-(6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1005-91-1)(332毫克，0.49毫摩尔，1.0当量)，5,6-二氟-7-碘苯并呋喃(0901-74)(206毫克，0.74毫摩尔，1.5当量)，四三苯基膦钯(58毫克，0.05毫摩尔，0.1当量)和碘化亚铜(9.5毫克，0.05毫摩尔，0.1当量)加入到40毫升干燥甲苯中，混合物在125℃下搅拌过夜。混合物用乙酸乙酯稀释。有机相经水洗，减压浓缩。残留物用硅胶柱层析色谱(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝100/1到30/1)纯化，得到黄色固体(2R,5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(210毫克，收率：64％)。MS(ES+):m/z＝663(M+H)+.
步骤80c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物91-1)的制备:将(2R,5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-91-1)(210毫克，0.32毫摩尔，1.0当量)溶解于15毫升二氯甲烷中，滴加1.5毫升三氟乙酸，混合物在室温下搅拌两小时。混合物减压浓缩至干，残留物溶解于20毫升四氢呋喃中，加入1毫升二异丙基乙胺。混合物置于冰水浴中冷却。丙烯酰氯(35毫克，0.38毫摩尔，1.2当量)溶解于0.5毫升四氢呋喃中，滴加到上述混合物中。将混合物搅拌半小时，用乙酸乙酯稀释。有机相经过水洗，减压浓缩，残留物用制备薄层色谱纯化(展开剂为：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到黄色固体4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(35毫克，收率：62％)。MS(ES+):m/z＝617(M+H)+.熔点：156～158℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.43(m,2H),8.03(d,J＝2.1Hz,1H),7.89(dd,J＝9.8,8.0Hz,1H),7.32(s,1H),7.04(d,J＝2.1Hz,1H),6.84(ddd,J＝30.0,16.6,10.5Hz,1H),6.19(d,J＝16.7Hz,1H),5.75(m,1H),4.46(m,3H),3.85(m,2H),3.49(d,J＝3.6Hz,1H),2.83(dd,J＝13.3,6.7Hz,1H),2.00(s,3H),1.37(dd,J＝6.3,3.2Hz,3H),1.26(m,3H),1.10(d,J＝6.7Hz,3H),0.98(dd,J＝6.5,2.9Hz,3H).
实施例81:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物91-2)的制备(按照方案十线路制备)
步骤81a:(2R,5S)-4-(6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1009-91-2)的制备:合成方法如实施例80步骤80a,仅是将(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-89-1)替换为(2R,5S)-4-(7-氯-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1008-89-1)(165毫克,0.3毫摩尔,1.0当量)得到黄色固体(2R，5S)-4-(6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(160毫克，收率：79.2％)。MS(ES+):m/z＝675(M+H)+.
步骤81b:(2R,5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1010-91-2)的制备:合成方法如实施例80步骤80b,仅是将(2R,5S)-4-(6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1005-91-1)替换为(2R,5S)-4-(6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1009-91-2)(160毫克,0.237毫摩尔,1.00当量)淡黄色固体(2R，5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(90毫克，收率：57.6％)。MS(ES+):m/z＝663(M+H)+.
步骤81c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物91-2)的制备:合成方法如实施例80步骤80c,仅是将(2R,5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-91-1)替换为(2R,5S)-4-(7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1010-91-2)(90毫克，0.136毫摩尔，1.00当量)得黄色固体4-((2S，5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-6-氟-1(P)-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(42毫克，收率：57.5％)。MS(ES+):m/z＝617(M+H)+熔点:161-173℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.49(d,J＝9.2Hz,1H),8.36(d,J＝4.9Hz,1H),8.03(d,J＝2.0Hz,1H),7.88(dd,J＝9.9,7.9Hz,1H),7.20(d,J＝4.9Hz,1H),7.02(d,J＝2.1Hz,1H),6.83(ddd,J＝20.4,16.7,10.5Hz,1H),6.18(dd,J＝16.7,2.2Hz,1H),5.74(m,1H),4.71(m,2H),3.81(m,4H),2.74(dt,J＝6.4,5.4Hz,1H),1.97(s,3H),1.31(dd,J＝10.7,6.6Hz,3H),1.19(dd,J＝35.1,5.7Hz,3H),1.06(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例82:2-((2S)-1-丙烯酰基-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(化合物100-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤82a:(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(化合物1004-100-1)的制备:氮气保护下，7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1002-1)(200毫克，0.573毫摩尔，1.0当量)，N,N-二异丙基乙胺(369毫克，2.865毫摩尔，5.0当量)和三氯氧磷(438毫克，2.865毫摩尔，5当量)的乙腈(10毫升)混合物85℃搅拌2小时。冷却到室温后，减压除去溶剂。残留物溶于四氢呋喃(10毫升)，冰水浴下，加入N,N-二异丙基乙胺(222毫克，1.719毫摩尔，3.0当量)和(S)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(148毫克，0.573毫摩尔，1当量)，混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯，混合物用水洗、饱和食盐水洗涤。有机层减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到80/1)得到(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯为黄色固体(300毫克，收率：88.88％)。MS(ES+):m/z＝590(M+H)+.
步骤82b:(2S)-2-(氰甲基)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(化合物1006-100-1)的制备:将(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(1004-100-1)(300毫克，0.508毫摩尔，1当量)，2-(6-氟苯并呋喃-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(0903-73)(176毫克，0.66毫摩尔，1.3当量)，四三苯基磷钯(59毫克，0.0508毫摩尔，0.1当量)，氯化亚铜(50毫克，0.508毫摩尔，0.1当量)和碳酸钠(108毫克，1.016毫摩尔，2当量)加入至10毫升乙腈和1毫升水的混合溶液中。混合物在82℃的条件下搅拌反应3小时。然后，将该混合物冷却至室温，用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇＝200/1到80/1)，得到(2S)-2-(氰甲基)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸苄酯为黄色固体(343毫克，收率：97.77％)。MS(ESI):m/z 690(M+H)+.
步骤82c:2-((2S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(化合物1007-100-1)的制备:在氮气下和室温下，往三乙基硅烷(144毫克，1.24毫摩尔，2.5当量)的5毫升二氯甲烷溶液加入三乙胺(10毫克，0.1毫摩尔，0.2当量)和醋酸钯(11毫克，0.05毫摩尔，0.1当量)。混合物在室温下搅拌反应0.5小时。在室温下，往混合物中加入(2S)-2-(氰甲基)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(343毫克，0.497毫摩尔，1当量)的1毫升二氯甲烷溶液。混合物在室温下搅拌反应6小时。该反应用氯化铵水溶液淬灭，水相用二氯甲烷萃取，有机相用水和饱和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为：二氯甲烷/甲醇/氨水＝200/1/1到80/1/1)，得到2-((2S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈为黄色固体(220毫克，收率：79.71％)。MS(ESI):m/z 556(M+H)+.
步骤82d:2-((2S)-1-丙烯酰基-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(化合物100-1)的制备:将2-((2S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(1007-100-1)(220毫克，0.396毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升四氢呋喃。将N,N-二异丙基乙胺(153毫克，1.188毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(43毫克，0.475毫摩尔，1.2当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝12/1)，得到2-((2S)-1-丙烯酰基-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈为黄色固体。(139毫克，收率：57.67％).MS(ESI):m/z 610(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.57(d,J＝9.4Hz,1H),8.36(d,J＝4.9Hz,1H),7.95(d,J＝2.1Hz,1H),7.80(dd,J＝8.6,5.2Hz,1H),7.26(dd,J＝10.4,8.7Hz,1H),7.19(d,J＝4.9Hz,1H),7.02(d,J＝2.1Hz,1H),6.85(s,1H),6.23(dd,J＝16.6,2.0Hz,1H),5.87–5.75(m,1H),4.97(s,1H),4.44(s,1H),4.38–4.04(m,2H),4.01–3.52(m,3H),3.22–2.99(m,2H),2.82(dt,J＝13.1,6.5Hz,1H),1.93(s,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例83:2-((2S)-1-丙烯酰基-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(化合物101-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤83a:(S)-2-(氰基甲基)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(化合物1004-101-1)的制备:合成方法如实施例82步骤82a，仅是将其中7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1002-1)替换为6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1002-73)(200毫克，0.548毫摩尔，1.0当量)得到(S)-2-(氰基甲基)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸苄酯为黄色固体(300毫克，收率：90.36％)。MS(ES+):m/z＝606(M+H)+.
步骤83b:(2S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(化合物1006-101-1)的制备:合成方法如实施例82步骤82b，仅是将其中(S)-4-(7-氯-6-氟-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(1004-100-1)替换为(S)-2-(氰基甲基)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(1004-101-1)(300毫克,0.496毫摩尔,1当量)得到(2S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯为黄色固体(342.5毫克，收率：97.99％)。MS(ESI):m/z706(M+H)+.
步骤83c:2-((2S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(化合物1007-101-1)的制备:合成方法如实施例82步骤82c，制备得到2-((2S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈为黄色固体(234毫克，收率：84.47％)。MS(ESI):m/z 572(M+H)+.
步骤83d:2-((2S)-1-丙烯酰基-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(化合物101-1)的制备:合成方法如实施例82步骤82d，仅是将其中2-((2S)-4-(6-氟-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(1007-100-1)替换为2-((2S)-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(234毫克，0.41毫摩尔，1.0当量)得到2-((2S)-1-丙烯酰基-4-(6-氯-7-(6-氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈为黄色固体(178毫克，收率：69.53％).MS(ESI):m/z 626(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.70(s,1H),8.34(d,J＝4.7Hz,1H),7.95(d,J＝31.5Hz,1H),7.76(dd,J＝8.6,5.3Hz,1H),7.24(t,J＝9.4Hz,1H),7.16(d,J＝4.7Hz,1H),7.01(d,J＝1.7Hz,1H),6.85(s,1H),6.23(dd,J＝16.7,1.6Hz,1H),5.81(d,J＝10.8Hz,1H),4.95(s,1H),4.44(s,1H),4.39–4.01(m,2H),3.78(t,J＝89.8Hz,3H),3.23–2.99(m,2H),2.81(s,1H),1.92(d,J＝31.6Hz,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例84:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物103-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤84a:(S)-4-(6-氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1005-103-1)的制备:在氮气的氛围下，将(S)-4-(6，7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-73-1)(340毫克，0.62毫摩尔，1当量)，六甲基二锡(612毫克，1.86毫摩尔，3当量)和四三苯基磷钯(69毫克，0.06毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(15毫升)。混合物在110℃下搅拌2小时。混合物冷却至室温。混合物浓缩和用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚/乙酸乙酯＝5/1-1/2)得到黄色固体(S)-4-(6-氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1，2-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(313毫克，收率:74.36％)。MS(ESI):m/z 677(M+H)+.
步骤84b:(3S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1006-103-1)的制备:在氮气的氛围下，将(S)-4-(6-氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1005-103-1)(150毫克，0.221毫摩尔，1当量)，5,6-二氟-7-碘苯并呋喃(0901-74)(121毫克，0.442毫摩尔，2当量)，碘化亚铜(4毫克，0.02毫摩尔，0.1当量)和四三苯基磷钯(25毫克，0.02毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(10毫升)。混合物在110℃下搅拌16小时。反应冷却至室温。混合物浓缩，用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:石油醚/乙酸乙酯＝1/3)得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(67毫克，收率:45.57％)。MS(ESI):m/z 665(M+H)+.
步骤84c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物103-1)的制备:将(3S)-4-(6-氯-7-(5，6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-103-1)(67毫克，0.101毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N，N-二异丙基乙胺(39毫克，0.303毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(9毫克，0.101毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝12/1)，得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(54毫克，收率：86.67％).MS(ESI):m/z 619(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.56(s,1H),8.38(d,J＝5.0Hz,1H),8.06(s,1H),7.86(dd,J＝10.0,7.9Hz,1H),7.25(s,1H),7.03(d,J＝2.1Hz,1H),6.84(m,1H),6.21(d,J＝16.1Hz,1H),5.76(dd,J＝10.4,2.3Hz,1H),4.96(s,1H),4.33(dd,J＝41.5,12.8Hz,2H),4.12(m,1H),3.69(m,2H),3.16(s,1H),2.79(m,1H),1.98(s,3H),1.37(d,J＝6.7Hz,3H),1.09(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例85:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物103-2)的制备(按照方案十线路制备)
步骤85a:(S)-4-(6-氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1005-103-2)的制备:合成方法如实施例84步骤84a，仅是将其中(S)-4-(6，7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-73-1)替换为(S)-4-(6，7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-73-2)得到黄色固体(S)-4-(6-氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(217毫克，收率:58.49％)。MS(ESI):m/z 677(M+H)+.
步骤85b:(3S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1006-103-2)的制备:合成方法如实施例84步骤84b，仅是将其中(S)-4-(6-氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1005-103-1)替换为(S)-4-(6-氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1，2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯得到黄色固体(3S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(145毫克，收率:68.07％)。MS(ESI):m/z 665(M+H)+.
步骤85c:4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物103-2)的制备:合成方法如实施例84步骤84c，仅是将其中(3S)-4-(6-氯-7-(5，6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-103-1)替换为(3S)-4-(6-氯-7-(5，6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(140毫克，0.21毫摩尔，1.0当量)得到黄色固体4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮。(45毫克，收率：34.61％).MS(ESI):m/z 619(M+H)+.1HNMR(500MHz,DMSO)δ8.56(s,1H),8.32(d,J＝4.8Hz,1H),8.01(d,J＝23.2Hz,1H),7.83(dd,J＝9.9,8.0Hz,1H),7.14(d,J＝4.6Hz,1H),7.00(d,J＝2.1Hz,1H),6.83(m,1H),6.19(d,J＝16.1Hz,1H),5.75(dd,J＝10.4,2.2Hz,1H),5.00(s,1H),4.34(m,2H),4.08(dd,J＝56.1,12.5Hz,1H),3.68(m,2H),3.10(d,J＝11.2Hz,1H),2.75(s,1H),1.93(s,3H),1.33(d,J＝6.7Hz,3H),1.05(d,J＝6.7Hz,3H),0.90(d,J＝6.6Hz,3H).
实施例86:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物104-1)的制备(按照方案十线路制备)
步骤86a:(2R,5S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶基[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1005-104-1)的制备:在氮气的氛围下，将(S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-90-1)(300毫克，0.535毫摩尔，1当量)，六甲基二锡(526毫克，1.607毫摩尔，3当量)和四三苯基磷钯(62毫克，0.05毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(15毫升)。混合物在110℃下搅拌2小时。反应冷却至室温。混合物浓缩，用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚/乙酸乙酯＝5/1-1/2)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300毫克，收率:81.16％)。MS(ESI):m/z 691(M+H)+.
步骤86b:(2R,5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1006-104-1)的制备:在氮气的氛围下，将(2R,5S)-4-(6-氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1005-104-1)(300毫克，0.434毫摩尔，1当量)，5,6-二氟-7-碘苯并呋喃(0901-74)(182毫克，0.652毫摩尔，1.5当量)，碘化亚铜(8毫克，0.04毫摩尔，0.1当量)和四三苯基磷钯(50毫克，0.04毫摩尔，0.1当量)加入至甲苯(10毫升)。混合物在125℃下搅拌16小时。反应冷却至室温。混合物浓缩，用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:石油醚/乙酸乙酯＝1/3)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(115毫克，收率:39.02％)。MS(ESI):m/z 679(M+H)+.
步骤86c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物104-1)的制备:将(2R,5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-104-1)(115毫克，0.169毫摩尔，1.0当量)溶解于4毫升二氯甲烷。然后加入1毫升三氟乙酸。混合物在室温下搅拌2小时。然后，将混合物浓缩，残留物用5毫升四氢呋喃溶解。将N，N-二异丙基乙胺(65毫克，0.507毫摩尔，3.0当量)加入至混合物。将丙烯酰氯(15毫克，0.169毫摩尔，1.0当量)加入至混合物。混合物在室温下搅拌15分钟。然后，用氨水淬灭反应。混合物用二氯甲烷萃取，有机相减压浓缩，并用厚制备薄层硅胶板纯化(展开剂:乙酸乙酯/甲醇＝12/1)，得到黄色固体4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮。(79毫克，收率：73.83％).MS(ESI):m/z633(M+H)+.1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.52(d,J＝8.3Hz,1H),8.33(d,J＝4.9Hz,1H),8.03(s,1H),7.83(dd,J＝10.0,7.9Hz,1H),7.14(d,J＝4.6Hz,1H),7.00(d,J＝2.2Hz,1H),6.82(m,1H),6.17(d,J＝16.8Hz,1H),5.74(ddd,J＝10.4,5.7,2.2Hz,1H),4.80(m,2H),3.86(m,4H),2.74(dq,J＝13.0,6.3Hz,1H),1.92(s,3H),1.35(m,3H),1.23(dd,J＝32.7,6.7Hz,3H),1.05(d,J＝6.7Hz,3H),0.91(s,3H).
实施例87:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物104-2)的制备(按照方案十线路制备)
步骤87a:(2R,5S)-4-(6-氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1009-104-2)的制备:合成方法如实施例86步骤86a，仅是将其中(S)-4-(6,7-二氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1004-90-1)替换为(S)-4-(6,7-二氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1008-90-2)(160毫克,0.285毫摩尔,1.0当量)得到黄色固体(2R,5S)-4-(6-氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(91毫克，收率：46.8％)。MS(ES+):m/z＝677(M+H)+.
步骤87b:(2R,5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(化合物1010-104-2)的制备:合成方法如实施例86步骤86b，仅是将其中(2R,5S)-4-(6-氯-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1005-104-1)替换为(2R,5S)-4-(6-氯-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-7-(三甲基锡烷基)-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1009-104-2)(91毫克,0.134毫摩尔,1.00当量)得淡黄色固体(2R，5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(90毫克，收率：99.6％)。MS(ES+):m/z＝679(M+H)+.
步骤87c:4-((2S,5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(化合物104-2)的制备:合成方法如实施例86步骤86c，仅是将其中(2R,5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(M)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1006-104-1)替换为(2R,5S)-4-(6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1010-104-2)(90毫克，0.132毫摩尔，1.00当量)得黄色固体4-((2S，5R)-4-丙烯酰基-2,5-二甲基哌嗪-1-基)-6-氯-7-(5,6-二氟苯并呋喃-7-基)-1(P)-(2-异丙基-4甲基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-2(1H)-酮(30毫克，收率：55.5％)。MS(ES+):m/z＝633(M+H)+熔点:153-162℃。1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.60(s,1H),8.36(d,J＝4.8Hz,1H),8.05(d,J＝20.5Hz,1H),7.87(m,1H),7.18(d,J＝3.7Hz,1H),7.04(d,J＝1.3Hz,1H),6.84(td,J＝17.4,10.5Hz,1H),6.20(dd,J＝16.7,1.6Hz,1H),5.76(m,1H),4.73(m,2H),3.96(m,4H),2.73(s,1H),1.98(s,3H),1.36(t,J＝6.7Hz,3H),1.23(m,3H),1.07(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝6.6Hz,3H).
实验例 生物活性试验
本发明所用的阳性对照化合物为AMG 510(US2018334454A1)，结构如下：
Figure BDA0002750625860001561
一、KRAS-G12C/SOS1结合实验
1.实验材料
KRAS-G12C/SOS1结合实验试剂盒 cisbio，#63ADK000CB16PEG
HTRF96孔微孔板 cisbio，#C11995500BT
TECAN酶标仪 Infinite200PRO
2.实验原理
采用HTRF KRAS-G12C/SOS1结合试验研究KRAS-G12C与SOS1蛋白的相互作用。利用HTRF(均质时间分辨荧光)技术能够以高通量形式简单、快速地测定化合物的性质。当HTRF供体抗体anti-Tag1-Tb3+和受体抗体anti-Tag2-XL665由于SOS1和KRAS-G12C结合而接近时，供体抗体的激发触发了对受体抗体的荧光共振能量转移(FRET)，受体抗体反过来在665nm处特异性发射。这一特定信号与KRAS-G12C/SOS1相互作用的程度成正比。因此，当化合物阻断KRAS-G12C/SOS1相互作用时会导致HTRF信号减弱。
KRAS-G12C/SOS1结合试剂盒包含:供体抗体anti-Tag1-Tb3+，受体抗体anti-Tag2-XL665，Tag1-SOS1蛋白，Tag2-KRAS-G12C蛋白，稀释液，检测缓冲液。
3.实验方法
1)将Tag2-KRAS-G12C蛋白，Tag1-SOS1蛋白用稀释液按照1:100进行稀释，将anti-Tag1-Tb3+抗体和anti-Tag2-XL665用检测缓冲液分别按照1:100或1：25进行稀释。
2)将待测化合物用稀释液进行稀释，按照10000nM浓度起始，4倍梯度稀释，共6个浓度梯度，稀释成10x母液。
3)96孔板中，每孔按顺序加入4ul Tag2-KRAS-G12C蛋白,4ul Tag1-SOS1蛋白,2ul稀释液(阳性对照)或待测化合物(不同浓度的10x母液)，共10ul，室温孵育15分钟后，加入预先混合好的5ul anti-Tag1-Tb3+和5ul anti-Tag2-XL665，封好板后室温孵育2小时。用TECAN INFINITE F NANO+酶标仪读取HTRF信号。
4.实验结果
用公式比率＝665nm信号值/620nm信号值*104计算每个单孔的受体和供体激发信号的比率。使用Graphpadprism软件处理数据。通过S形剂量-反应曲线拟合计算IC50值，结果如下表1所示。
表1.化合物对KRAS-G12C/SOS1结合的抑制活性IC50(nM)
Figure BDA0002750625860001571
Figure BDA0002750625860001581
其中：I>1000nM,1000nM≥II>500nM,500nM≥III>100nM,100nM≥IV>50nM,V≤50nM。
从上表中的数据可以看出，本发明的吡啶并嘧啶酮类化合物能有效阻断KRAS-G12C/SOS结合。
二、肿瘤细胞增殖抑制实验
1.实验材料
RPMI1640培养基 GIBCO，#C11875500BT
DMEM培养基 GIBCO，#C11995500BT
胎牛血清(FBS) BiologicalIndustries，#040011ACS
CellTiter-Glo发光细胞活力检测试剂盒 Promega，#G7573
Scepter自动细胞计数仪 Millipore，#PHCC00000
2.细胞株(所有人源细胞都已经进行STR数据鉴定)
细胞株名称 突变位点 种属 来源
H358 KRASG12C 人 必贝特细胞库
H23 KRASG12C 人 必贝特细胞库
MIA-Paca2 KRASG12C 人 必贝特细胞库
3.实验方法
将H358、H23或MIA-Paca2细胞消化离心重悬后用Scepter自动细胞计数仪测定细胞密度。将细胞稀释成每毫升含44,000个细胞的溶液。调整密度后的细胞溶液以每孔90微升加入96孔培养板中。将96孔板置于37℃、5％CO2培养箱中，待细胞培养24小时后，加入不同浓度的待测化合物。细胞在10％胎牛血清存在下与化合物一起培养72小时。使用CellTiter-Glo发光细胞活力检测试剂盒(详见厂家说明书)测定ATP的含量来评估细胞生长抑制。简要来讲，每个孔中加入30微升CellTiter-Glo试剂，摇板10分钟，诱导细胞裂解，用Fluoroskan Ascent FL(Thermo)检测记录萤光信号。从二甲基亚砜处理72小时的细胞得到最大的信号值。从单独的培养基(细胞数为零)得到最小信号值。抑制率％＝(最大信号值-化合物信号值)/(最大信号值-最小信号值)×100％。使用Graphpadprism5软件处理数据。通过S形剂量-反应曲线拟合计算IC50值。
4.实验结果
计算出上述实验中各化合物的IC50，结果如下表2所示。
表2.化合物对肿瘤细胞增殖的抑制活性IC50(nM)
Figure BDA0002750625860001591
Figure BDA0002750625860001601
Figure BDA0002750625860001611
Figure BDA0002750625860001621
其中：I>500nM,500nM≥II>100nM,100nM≥III>50nM,50nM≥IV>10nM,V≤10nM。
从上表中的数据可以看出，本发明的吡啶并嘧啶酮类化合物对KRAS G12C突变的肿瘤有很强的抗细胞增殖活性。
三、药代动力学(PK)实验
1.实验方法
雄性SD大鼠，体重180-250克，试验前过夜禁食。待测化合物溶解在0.5％羟丙甲纤维素(HPMC)和0.1％Tween 80混合溶剂，或30％磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)中，以20mg/kg灌胃给药。给药后15分钟、30分钟和1、2、4、6、8及24小时尾端断口取血，每时间点约0.3ml，置于含K2-EDTA的离心管中，离心处理(2000g，10分钟，4℃)取血浆，储存在-80℃的超低温冰箱中。50μL的血浆样品用135μL乙腈(含内标1μg/mL)涡旋混合进行蛋白沉淀，离心，取上清进行LC-MS/MS分析。
2.实验结果
本发明提供的吡啶并嘧啶酮类化合物各化合物在大鼠经口服给药后，吸收良好，血液暴露量较高，结果见图1、2和表3。本发明的吡啶并嘧啶酮类化合物的Tmax为0.67-2.0小时，Cmax为1626.7-5606.7ng/ml，AUC0-24h为4304.5-20075.1ng/ml*h。Cmax是指最大血药浓度，T1/2为半衰期，AUC0-24是指0-24小时时间-浓度曲线下面积，AUC0-inf是指0-Inf时间-浓度曲线下面积。
表3.大鼠灌胃给药(20mg/kg)药代动力学参数
Figure BDA0002750625860001622
Figure BDA0002750625860001631
四、Caco-2药物的跨膜转运实验
1.实验内容
Figure BDA0002750625860001632
2.实验方法
Caco-2细胞模型是一种人克隆结肠腺癌细胞，用来进行模拟体内肠转运的实验(JMass Spectrom 35:71-76,2000)。本实验采用单层Caco-2细胞评估药物的渗透作用。实验以10μM的酒石酸美托洛尔、阿替洛尔和红霉素分别作为高被动通透性、低被动通透性和高外排比的阳性对照标志物，将待测化合物分别加入在聚碳酸酯微孔膜上形成的单层Caco-2细胞的顶端(Apical，在结果中简称A)或基底外侧(Basolateral,在结果中简称B)，37℃孵育90min后用LC-MS/MS测定另一侧的浓度。化合物由顶端至基底外侧表观通透性系数(PappA-B)和基底外侧到顶端通透系数(Papp B-A)，分别表示化合物双向转运的能力。而外排率(Efflux Rate＝Papp B-A/PappA-B)的高低反映化合物发生主动外排作用的强弱。
受试化合物渗透性：
表观通透系数(Papp)＝(接受侧体积/(膜面积×培养时间))×(培养结束时接受侧药物浓度/(培养开始时给药侧药物浓度×稀释倍数)
本实验采用Millipore细胞培养板(PSHT 010R5)：膜面积＝0.7cm2，接受侧体积＝0.8mL(A-to-B)或0.4mL(B-to-A)，培养时间＝90分钟。
3.实验结果
表4.表观通透性系数(Papp)及外排率(Papp B-A/PappA-B)
Figure BDA0002750625860001641
本试验条件下，如果药物表观通透性系数PappA-B>10×106cm/s，表明药物通透性高。化合物70-1、73-1、90-1、103-1和104-1的表观通透性系数PappA-B值均大于10×106cm/s，提示化合物70-1、73-1、90-1、103-1和104-1通过肠道的吸收率很高，比AMG 510更优。化合物70-1、73-1、90-1、103-1和104-1的外排率(Papp B-A/PappA-B)在1-2之间,表示化合物70-1、73-1、90-1、103-1和104-1的外排作用弱，而AMG 510的外排率较高为6.22。
五、肿瘤模型药效学实验
1.实验方法
(1)H358人非小细胞肺癌异种移植小鼠皮下模型：
本实验研究化合物73-1、90-1在H358人非小细胞肺癌异种移植小鼠皮下肿瘤模型中的抗癌活性，以及化合物73-1抑制H358异种移植肿瘤生长的量效关系。BALB/c裸鼠购自常州科康生物科技有限公司，适应期至少一周。当H358细胞培养到足够数量时，收集细胞，将悬浮在0.1mL不含血清的培养基和基质胶(1:1,v/v)中的200万个细胞注入每只小鼠右侧翼皮下区域并小心避开血管。使用游标卡尺测量肿瘤的大小，计算肿瘤体积的公式为：肿瘤体积＝(长×宽2)/2，计算相对肿瘤增殖率T/C值的公式为：T/C(％)＝100×ΔT/ΔC(ΔT>0)或T/T(％)＝100×ΔT/T0(ΔT<0)。ΔT为治疗组肿瘤体积差值，ΔC为赋形剂对照组肿瘤体积差值，T0为治疗组给药前肿瘤体积。
在化合物73-1、90-1的H358人非小细胞肺癌异种移植小鼠皮下肿瘤模型中的抗癌活性研究中，当H358肿瘤体积达到平均160mm3左右时，将动物随机分为4个口服给药组，即赋形剂(30％磺丁基-β-环糊精)对照组、AMG510阳性对照组和化合物73-1、90-1给药组(n＝3/组)，4个给药组给药剂量均为100mg/kg，10mL/kg口服灌胃给药，每天给药一次。将化合物分别溶解在30％磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)以及1.5摩尔等值的盐酸(pH约为4)中，终浓度均为10mg/mL，连续给药26天。
在化合物73-1抑制H358异种移植肿瘤生长的量效关系研究中，当H358肿瘤体积达到平均183mm3左右时，将动物分为不同的处理组，即赋形剂(30％磺丁基-β-环糊精)对照组、化合物73-1剂量12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg口服给药组(n＝8/组)，每天给药一次。将化合物73-1以相应的浓度分别溶解在30％磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)以及1.5摩尔等值的盐酸(pH约为4)中，以10mL/kg灌胃给药，连续给药28天。
(2)MIAPaca2 T2人胰腺癌异种移植小鼠皮下模型：
本实验研究化合物73-1在MIAPaca2人胰腺癌异种移植小鼠皮下肿瘤模型中的抗癌活性。BALB/c裸鼠购自江苏集萃药康生物科技有限公司，适应期至少一周。MIAPaca2细胞在含10％胎牛血清和2.5％马血清的DMEM中培养到足够数量时，收集细胞，将悬浮在0.1mL不含血清的培养基和基质胶(1:1,v/v)中的500万个细胞注入每只小鼠右侧翼皮下区域小心避开血管并在动物体内连续传代2次。使用游标卡尺测量肿瘤的大小，计算肿瘤体积和T/C值方法同上。当MIAPaca2 T2肿瘤体积达到平均163mm3左右时，将动物随机分为3个口服给药组，即赋形剂(30％磺丁基-β-环糊精)对照组、AMG510阳性对照100mg/kg(每天一次给药)组和化合物73-150mg/kg(每天2次给药)组(n＝8/组)。将化合物以相应的浓度分别溶解在30％磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)以及1.5摩尔等值的盐酸(pH 4-5)中，10ml/kg灌胃给药，连续给药28天。
2.实验结果
(1)化合物73-1、90-1在H358人非小细胞肺癌异种移植小鼠皮下肿瘤模型中的抗癌活性：
化合物73-1和90-1的剂量均为100mg/kg，每天给药1次，连续口服给药26天后，化合物73-1给药组的T/C值为-100.0％(p<0.001)；化合物90-1给药组的T/C值为-99.5％(p<0.001)；阳性化合物AMG510的剂量为100mg/kg，每天给药1次，连续口服给药26天后，T/C值为-93.8％(p<0.001)。治疗组动物与同期赋形剂对照组比均没有出现明显的临床症状且体重变化不明显(结果见表5和图3)。
结果显示，在KRAS突变H358人非小细胞肺癌异种移植小鼠皮下肿瘤模型中，化合物73-1可导致肿瘤完全消失，AMG510在MTD剂量可使肿瘤缩小，与文献报导一致(Nature575:217,2019)。
(2)化合物73-1抑制H358异种移植肿瘤生长的量效关系：
化合物73-1每天给药1次，连续口服给药28天后，剂量12.5mg/kg给药组的T/C值为-68.5％(p<0.001)；剂量25mg/kg给药组的T/C值为-74.0％(p<0.001)；剂量50mg/kg给药组的T/C值为-93.5％(p<0.001)；剂量100mg/kg给药组的T/C值为-96.6％(p<0.001)。化合物73-1剂量12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg每天给药1次，连续口服给药28天后动物与同期赋形剂对照组比均没有出现明显的临床症状且体重变化不明显(结果见表6和图4)。
结果显示，化合物73-1呈剂量依赖性抑制H358肿瘤生长并能致使肿瘤部分消失，动物耐受性良好。
(3)化合物73-1在MIAPaca2人胰腺癌异种移植小鼠皮下肿瘤模型中的抗癌活性：
连续口服给药28天后，化合物73-1剂量50mg/kg(每天2次给药)组的T/C值为-100％(p<0.001)；阳性化合物AMG510剂量100mg/kg(每天1次给药)组的T/C值为-96％(p<0.001)。治疗组动物与同期赋形剂对照组比均没有出现明显的临床症状且体重变化不明显(结果见表7和图5)。
结果显示，在KRAS G12C突变MIA Paca2人胰腺癌异种移植小鼠皮下肿瘤模型中，化合物73-1可导致肿瘤完全消失，AMG510在MTD剂量可使肿瘤缩小，与文献报导一致(Nature575:217,2019)。
表5.在H358异种移植肿瘤模型中化合物73-1、90-1抗肿瘤活性和对小鼠体重的影响
Figure BDA0002750625860001661
Figure BDA0002750625860001671
表6.在H358异种移植肿瘤模型中化合物73-1抗肿瘤量效活性和对小鼠体重的影响
Figure BDA0002750625860001672
表7在MIA Paca2 T2移植肿瘤模型中化合物73-1抗肿瘤活性和对小鼠体重的影响
Figure BDA0002750625860001673
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对以下实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (22)

1.具有式(ⅠI)所示结构的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体：
Figure FDA0003133854490000011
其中：
Q和R3之间的虚线表示Q与R3之间的化学键可选单键或双键；
Q选自：O，S；
R3选自：CR15，O，S，CHR15，C(R15)2；
Q，R3和与其相连的C原子一起组成5-6元杂环基或者杂芳基；所述5-6元杂环基或者杂芳基和与其相并的六元芳基共同组成如下结构：
Figure FDA0003133854490000012
X1为N，X2为CH，R4，R5分别独立选自：H，C1-C6烷基，氰基；或者，
X1为N，X2为N，R4为异丙基，R5为C1-C6烷基；或者，
X1为CH，X2为CH，R4为氰基，R5为C1-C6烷基；
X3，X4分别独立选自：CR11；
R1选自：卤素；
R2选自：卤素，C1-C6烷基；
R6选自：H，卤素，-OR，硝基，氰基，-N(R)2，C1-C6烷基，-C(O)N(R)2，-C(O)R；
R7，R8分别独立选自：H，C1-C6烷基，氰基取代的C1-C6烷基；
R9选自：H，卤素；
R10选自：H；
各R11分别独立选自：H，卤素，-OR，-SR，-N(R)2，硝基，氰基，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基；
各R15分别独立选自：H，卤素，OR，-SR，-N(R)2，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基,C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基；
各R分别独立选自：H，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C3-C8环烷基取代的C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基。
2.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，X1为N，X2为CH。
3.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，X1为N，X2为N，R4为异丙基，R5为C1-C6烷基。
4.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，X3，X4都为CR11；其中，R11选自：H，卤素，OR，R选自：H，C1-C3烷基。
5.根据权利要求4所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，X3选自：CH，COH，CF；X4选自：CH，CF。
6.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，R1选自：F，Cl。
7.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，R2选自：F，Cl。
8.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，R4，R5分别独立选自：H，C1-C3烷基，氰基。
9.根据权利要求8所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，R4选自：甲基，异丙基，氰基；R5选自：异丙基。
10.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，R6选自：H，C1-C3烷基。
11.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，R7，R8分别独立选自：H，C1-C3烷基，氰基取代的C1-C3烷基。
12.根据权利要求11所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，R7选自：甲基；R8选自：H，甲基，氰基甲基。
13.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，R15选自：H。
14.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，
X1为N；X2分别独立选自：N或CH；
X3，X4分别独立选自：CR11；
R1，R2分别独立选自：F，Cl；
R4，R5分别独立选自：H，C1-C6烷基，氰基；
R6选自：H，卤素，OR，C1-C6烷基；
R7选自：C1-C6烷基；
R8选自：H，C1-C6烷基，氰基取代的C1-C6烷基；
R9选自：H；
R10选自：H；
各R11分别独立选自：H，卤素，OR，-SR，-N(R)2，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基；
各R分别独立选自：H，C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，羟基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷氧基取代的C1-C6烷基，氨基取代的C1-C6烷基，C1-C6烷基胺基取代的C1-C6烷基。
15.根据权利要求1所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体，其特征在于，选自如下化合物：
Figure FDA0003133854490000031
Figure FDA0003133854490000041
Figure FDA0003133854490000051
Figure FDA0003133854490000061
16.权利要求1-15任一项所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体在制备突变型KRAS抑制剂中的应用。
17.权利要求1-15任一项所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体在制备KRAS G12C抑制剂中的应用。
18.权利要求1-15任一项所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体在制备预防和/或***的药物中的应用。
19.根据权利要求18所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为携带KRAS G12C基因突变的血液肿瘤或实体肿瘤。
20.根据权利要求19所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为：非小细胞肺癌、小细胞肺癌、淋巴癌、食管癌、卵巢癌、黑色素瘤、子***、尿路上皮癌、胰腺癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、胆管癌、白血病、黑色素瘤、结肠癌、直肠癌、子宫内膜癌或脑胶质瘤。
21.一种突变型KRAS抑制剂，其特征在于，其活性成分包括有权利要求1-15任一项所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体。
22.一种预防和/或***的药物组合物，其特征在于，包括活性成分以及药学上可接受的载体，所述活性成分包括有权利要求1-15任一项所述的吡啶并嘧啶酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体。
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