CN112156024A - 一种用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法 - Google Patents

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Abstract

本发明的第一方面提供了一种用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，将囊泡仿生成分分割成纳米级的微脂囊小球，包裹有低氧诱导调节因子和抗氧化因子，实现诱导激活和损伤修复。所述低氧诱导调节因子在低氧状态捕捉到由低氧信号诱导生成的低氧诱导因子‑1，进一步调节低氧诱导因子‑1的生成，并参与皮肤细胞的呼吸链过程，实现囊泡的靶向送达与精准释放，以及对营养物质的高效利用，再利用参与囊泡转运的多种因子，实现对损伤、衰老细胞的快速、精准、高效修复。

Description

一种用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法
技术领域
本发明涉及皮肤修复相关的技术领域，更具体地，本发明提供一种用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法。
背景技术
对氧气的感知几乎存在于所有的细胞，肌肤表层和深层的细胞均具有氧气感知的能力，表层的角质形成细胞能在低氧状态下对外界环境做出反应。皮肤的衰老是皮肤经历一系列损伤未得到充分修复而不断累积的结果，目前人类对于皮肤衰老的认识已经推进到细胞和分子水平，人体皮肤的微环境变差时，细胞呼吸受阻，部分细胞内氧气含量降低，而长期处于低氧状态会加剧氧化应激反应，导致活性氧和自由基含量急剧上升，使细胞面临过氧化压力，进而造成DNA结构损伤和蛋白酶活性降低。这些物理和化学损伤，使得皮肤细胞活力下降、胶原蛋白合成受阻，皮肤细胞加速老化、衰亡，皮肤显现初老痕迹。
充足的氧气对于细胞呼吸及其损伤修复至关重要。细胞失去氧气和活力、变得干瘪，将加速其衰亡和皮肤的老化，人体受损和衰老的皮肤细胞首当其冲，因此如何利用低氧诱导调节的方法，对处于低氧环境的皮肤受损细胞和衰老细胞进行精确诱导与激活，使上游输送的各类养分和生长因子通过靶位点精准作用于该类细胞，调动皮肤细胞的活力，增强皮肤细胞的活性，显得至关重要。
发明内容
本发明为解决上述问题，本发明的第一方面提供了一种用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，将囊泡仿生成分分割成纳米级的微脂囊小球，包裹有低氧诱导调节因子和抗氧化因子，实现诱导激活和损伤修复。
所述囊泡仿生成分包括但不限于卵磷脂，其成分包括有磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯以及磷脂。
在一种实施方式中，所述微脂囊小球的水性腔隙包裹有水溶性大分子物质，脂溶性或者同时具有水溶性与脂溶性的物质结合在其脂质双分子或亲脂基团中。
所述微脂囊小球是经微脂囊泡包裹和高压乳化后形成的分子直径仅数十纳米的囊泡级微胶囊化多层脂质体。所述微脂囊小球的球体外分别有一个能溶解于水的亲水端和一个能溶解于油的疏水端，无论是在水性物质或者是在油性物质中，微脂囊都具有很好的渗透性与溶解度。微脂囊体中的磷脂成分与人类的细胞膜分子相同。磷脂质膜由亲油性和亲水性两种分子组成，这两种分子呈相向排列，并形成如洋葱般一圈圈旋绕的结构。
所述微脂囊泡包裹和高压乳化技术为本领域技术人员知晓的常规技术，不作具体限定。
所述低氧诱导调节因子在低氧状态导致的氧化应激下，实现对损伤和衰老细胞的精准诱导激活。
氧气是机体进行新陈代谢的必需物质，缺氧反应是机体和细胞的一种强烈应激行为。人体皮肤细胞衰老时，也会伴随着皮肤细胞变差、细胞内氧化压力增大而导致的氧化损伤，同时也会出现细胞呼吸受阻、细胞内氧气含量降低，而氧气感知几乎存在于所有的细胞，表皮的角质形成细胞能在低氧状态下对外界环境做出反应，从而影响***的产生，调节红细胞的产生和血液的携氧能力，促进毛细血管的修复和新生，改善肌肤微循环，避免因血管壁瘀滞导致的红血丝。
在一种实施方式中，所述微脂囊小球包裹有低氧诱导调节因子，在低氧状态捕捉到由低氧信号诱导生成的低氧诱导因子-1，进一步调节低氧诱导因子-1的生成并参与皮肤细胞的呼吸链过程，实现对损伤和衰老细胞的精准诱导激活。
具体来说，在损伤、衰老的皮肤中，细胞呼吸不畅，损伤和衰老的皮肤细胞活力不足并处于低氧状态，将触发低氧信号，诱导生成低氧诱导因子-1；而这一低氧诱导信号可以被参与囊泡转运的低氧诱导调节因子迅速捕捉，进一步调节低氧诱导因子-1的生成，并参与皮肤细胞的呼吸链过程，实现囊泡的靶向送达与精准释放，以及对营养物质的高效利用和对损伤和衰老细胞的呼吸激活；同时利用囊泡转运的其它多种因子，实现对损伤、衰老细胞的快速、精准、高效修复。
在一种实施方式中，所述低氧诱导调节因子激活细胞呼吸，能够调控基因作用于细胞呼吸链，抑制线粒体的过氧化，保护生物膜结构和脂质屏障的完整性。
在一种实施方式中，所述低氧诱导调节因子为能感知低氧信号，调节细胞呼吸的物质。
在一种实施方式中，所述低氧诱导调节因子为能感知低氧信号，调节细胞呼吸的物质，选自植物提取物、动物提取物、微生物提取物、脂溶性醌类中的一种或几种组合。
在一种优选的实施方式中，所述低氧诱导调节因子为植物提取物，包括但不限于丹参提取物、菊花提取物、泽兰提取物、天麻提取物、人参提取物、黄岑提取物、三七提取物、绿茶提取物、银杏叶提取物、南蛇藤提取物。
在一种优选的实施方式中，所述低氧诱导调节因子为动物提取物，包括但不限于蝎毒多肽提取物。
在一种优选的实施方式中，所述低氧诱导调节因子为酵母提取物，包括但不限于酵母提取物。
在一种优选的实施方式中，所述低氧诱导调节因子为脂溶性醌类物质；包括但不限于为泛醌。
所述泛醌为一种脂溶性醌类，带有由不同数目(6～10)异戊二烯单位组成的侧链。
所述泛醌是唯一的脂溶性、内源性抗氧化剂，是大多数真核细胞线粒体电子传递链的重要组成部分，在细胞有氧呼吸过程中产生三磷酸腺苷和抑制细胞膜过氧化反应的中具有重要作用。
所述泛醌一般用作抗氧化剂，用于皮肤的抗氧化衰老，是单一的抗老成分。本发明借助泛醌的低氧诱导调节功能，参与到人体皮肤的低氧诱导调节过程，同时配合其他有效成分，进行协同抗老。泛醌可能通过低氧诱导类物质间接激活皮肤细胞活性，参与能量制造及活化，是细胞代谢和细胞呼吸的激活剂。细胞氧化应激下作为细胞呼吸链中的重要递氢体，能参与氧化磷酸化及ATP的生成过程，调控细胞的氧化还原环境。
在人体皮肤细胞的损伤和衰老过程中，皮肤细胞呼吸变差、细胞氧化压力增大带来的氧化损伤，是皮肤细胞衰老的关键因素。在本发明中发现所述微脂囊小球包裹有抗氧化因子，可在低氧诱导调节因子作用下，参与到皮肤细胞的抗氧化衰老，减少氧化损伤。
在一种实施方式中，所述抗氧化因子与自由基或活性氧结合形成稳定的低能态，阻断脂质体自由基的链式反应，阻止过度氧化造成细胞损伤。
在一种实施方式中，所述抗氧化因子作用于细胞端粒酶，增强其活性，延伸染色体两侧端粒的长度，实现细胞损伤修复。
所述低氧诱导调节因子可辅助抗氧化因子在细胞中转换成稳定状态，二者协同发挥抗氧化作用，对抗皮肤衰老。
在一种实施方式中，所述抗氧化因子为具有抗氧化自由基作用的物质，选自植物提取物、动物提取物、微生物提取物、维生素、肽类物质、酚类物质、酶中的一种或几种组合。
在一种优选的实施方式中，所述抗氧化因子为植物提取物，包括但不限于泽泻提取物、沙棘叶提取物、当归提取物、女贞子提取物、夏枯草提取物、黄岑根提取物、五味子提取物、甘草根提取物、丹参根提取物、木槿花提取物、金盏花提取物。
在一种优选的实施方式中，所述抗氧化因子为动物提取物，包括但不限于美洲大蠊提取物。
在一种优选的实施方式中，所述抗氧化因子为微生物提取物，包括但不限于乳酸菌提取物。
在一种优选的实施方式中，所述抗氧化因子为维生素，包括但不限于维生素A、维生素C、维生素D、维生素E。
在一种优选的实施方式中，所述抗氧化因子为肽类物质，包括但不限于米糠肽、还原型谷胱甘肽、大豆肽、乳蛋白肽。
在一种优选的实施方式中，所述抗氧化因子为酚类物质，包括但不限于生育酚、绿茶多酚、叔丁基对苯二酚。
在一种优选的实施方式中，所述抗氧化因子为酶，包括但不限于超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶。
在一种更优选的实施方式中，所述抗氧化因子优选为生育酚，即维生素E的水解产物。
所述生育酚具有天然的抗氧化活性，在结构上主要依赖于苯环第6位置上的羟基团作为活性位点；能有效减少自由基产生，同时又可以与自由基或活性氧形成稳定态，避免自由基或活性氧对细胞的伤害，还有利于增强细胞端粒酶的活性，促进细胞的修复。
在一种实施方式中，所述微脂囊小球还包裹有细胞活性促进因子和组织修复因子。
所述细胞活性促进因子在人体内存在天然受体，编码并生成皮肤的结构蛋白、酶和细胞外基质等，能够通过促进纤维芽细胞活性，激发真皮层胶原蛋白生成，恢复衰老皮肤弹性；此外，还参与了红细胞组成，能够与铁协同作用，改善衰老和敏感皮肤造血微环境；参与皮肤上皮组织的发生，能够促进组织和黏膜形成，维持上皮细胞的完整性。另外，在低氧诱导调节因子的作用下，细胞活性促进因子参与囊泡转运，借助人体的囊泡转运和低氧调节***进行靶向调度和运输，优先分配给低氧状态下的受损和衰老细胞，从而实现对损伤、衰老细胞的快速、精准、高效修复。
所述细胞活性促进因子为视黄醇及其衍生物，选自视黄醇、视黄醛、氢化视黄醇、视黄醇乙酸酯、视黄醇棕榈酸酯、视黄醇亚油酸酯、视黄醇丙酸酯、视黄醇视黄酸酯、视黄醇醋酸酯中的一种或几种组合；优选地，所述细胞活性促进因子为视黄醇棕榈酸酯。
所述组织修复因子是细胞内氧化应激通路的关键信号分子，活化多种蛋白激酶和转录因子，参与细胞内信号传导，进行膜融合修复。另外，在低氧诱导调节因子的作用下，细胞活性促进因子参与囊泡转运，借助人体的囊泡转运和低氧调节***进行靶向调度和运输，优先分配给低氧状态下的受损和衰老细胞，从而实现对损伤、衰老细胞的快速、精准、高效修复。
所述组织修复因子选自表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、神经酰胺、血管内皮生长因子中的任一种；优选地，所述组织修复因子为纳米级仿人型神经酰胺，选自神经酰胺3、神经酰胺4、神经酰胺6II、神经酰胺1、神经酰胺1A、神经酰胺2中的一种或几种组合；优选地，所述组织修复因子为神经酰胺3、神经酰胺6II以及神经酰胺2；所述神经酰胺3、神经酰胺6II以及神经酰胺2的质量比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)；优选地，所述神经酰胺3、神经酰胺6II以及神经酰胺2的质量比为1：1：1。
通过多种因子的参与以及膜融合修复，实现对真皮层受损和衰老细胞的精确诱导与激活，同时改善肌肤微循环；多因子互作进一步加强细胞间的通信能力，保护细胞免受自由基的伤害，更好促进胶原蛋白的产生，解决肌肤敏感和衰老问题。
本发明中，所述泛醌是一类重要的低氧诱导调节因子，在囊泡转运和低氧调节***以及低氧诱导因子-1的作用下，可以感知低氧信号的存在，对肌肤进行靶向激活和精准修复。但泛醌的低水溶性以及角质层的屏障功能，使得将泛醌递送至更深层的肌肤十分困难。
本发明中，将泛醌负载在微脂囊小球上，借助囊泡转运以及低氧诱导调节过程，可实现其包裹的抗氧化因子、细胞活性促进因子、组织修复因子对肌肤细胞的靶向诱导焕活。各种功能因子及微脂囊小球相互协调，实现多种皮肤功效因子层层渗入肌肤深层、靶向送达后缓慢释放的双层目的，进一步实现对衰老皮肤的精准抗衰与长效修复。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1：实施例2护肤组合的保湿功效检测结果；
图2：皱纹评价等级示意图；
图3：实施例2护肤组合的淡化皱纹功效检测结果；
图4：实施例2护肤组合的淡化皱纹专家评估检测结果；
图5：实施例2护肤组合的皮肤弹性R5值检测结果；
图6：实施例2护肤组合的皮肤光泽度检测结果；
图7：实施例2护肤组合的皮肤角质层水分含量检测结果；
图8：实施例2护肤组合的皮肤经皮水分流失检测结果；
图9：实施例2护肤组合的专家临床评估(细腻度)检测结果。
具体实施方式
以下列举一些具体实施例，但需注意，下列实施例并没有穷举所有可能的情况。并且下述实施例中所用的材料如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施方式仅用于对本发明进行说明，其并不对本发明的保护范围起到限定作用。本发明的保护范围仅由权利要求限定，在本发明公开的实施方式的基础上所做的任何省略、替换或修改将落入本发明的保护范围。
除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。
实施例1
本实施例1提供一种用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，将囊泡仿生成分分割成纳米级的微脂囊小球，包裹有低氧诱导调节因子和抗氧化因子，实现诱导激活和损伤修复。
所述微脂囊小球的水性腔隙包裹有水溶性大分子物质，脂溶性或者同时具有水溶性与脂溶性的物质结合在其脂质双分子或亲脂基团中。
所述低氧诱导调节因子在低氧状态捕捉到由低氧信号诱导生成的低氧诱导因子-1，进一步调节低氧诱导因子-1的生成，并参与皮肤细胞的呼吸链过程，实现对损伤和衰老细胞的精准诱导激活。
所述低氧诱导调节因子调控基因激活细胞呼吸，能够作用于细胞呼吸链，抑制线粒体的过氧化，保护生物膜结构和脂质屏障的完整性。
所述低氧诱导调节因子为泛醌。
所述抗氧化因子与自由基或活性氧结合形成稳定的低能态，阻断脂质体自由基的链式反应，阻止过度氧化造成细胞损伤。
所述抗氧化因子作用于细胞端粒酶，增强其活性，延伸染色体两侧端粒的长度，实现细胞损伤修复。
所述抗氧化因子为生育酚。
所述微脂囊小球还包裹有细胞活性促进因子和组织修复因子。
实施例2
本实施例2提供一种用于靶向抗衰修护的方法，包括低氧诱导；还包括通道识别与开放、囊泡转运过程。
在低氧诱导过程中，将囊泡仿生成分分割成纳米级的微脂囊小球，包裹有低氧诱导调节因子和抗氧化因子，实现诱导激活和损伤修复。
所述低氧诱导调节因子为泛醌。
所述抗氧化因子为生育酚。
在通道识别与开放过程中，利用保湿因子和微脂囊小球完成通道识别与开放，实现物质跨皮肤屏障和跨细胞膜运输。
所述保湿因子为透明质酸；所述透明质酸包括高分子量透明质酸、中分子量的透明质酸以及低分子量的透明质酸；所述高分子量透明质酸是指透明质酸钠；所述中分子量的透明质酸是指羟丙基三甲基氯化铵透明质酸；所述低分子量的透明质酸是指水解透明质酸；所述高分子量的透明质酸、中分子量的透明质酸以及低分子量的透明质酸的质量比为1：1：1。
所述透明质酸钠购自Q.P.Corporation,HYALURONSAN HA-LQH；水解透明质酸购自Q.P.Corporation,
Figure BDA0002773573050000081
羟丙基三甲基氯化铵透明质酸购自Q.P.Corporation,
Figure BDA0002773573050000082
-P。
在囊泡转运过程中，将囊泡仿生成分分割成纳米级的微脂囊小球，包裹有细胞活性促进因子和组织修复因子，实现膜融合修复和细胞间运输。
所述细胞活性促进因子为视黄醇丙酸酯；所述组织修复因子为神经酰胺3、神经酰胺6II以及神经酰胺2；所述神经酰胺3、神经酰胺6II以及神经酰胺2的质量比为1：1：1。
本实施例还提供了一种利用所述用于靶向抗衰修护的护肤组合物，按照重量百分比计，包括45wt％保湿因子、1.5wt％细胞活性促进因子、0.5wt％低氧诱导调节因子、0.8wt％抗氧化因子、1.1wt％组织修复因子以及余量水；
其中，所述保湿因子为透明质酸；所述透明质酸包括高分子量的透明质酸、中分子量的透明质酸以及低分子量的透明质酸；所述高分子量的透明质酸、中分子量的透明质酸以及低分子量的透明质酸的质量比为1：1：1；
所述高分子量的透明质酸是指透明质酸钠；所述中分子量的透明质酸是指羟丙基三甲基氯化铵透明质酸；所述低分子量的透明质酸是指水解透明质酸；
所述透明质酸钠购自Q.P.Corporation,HYALURONSAN HA-LQH；水解透明质酸购自Q.P.Corporation,
Figure BDA0002773573050000083
羟丙基三甲基氯化铵透明质酸购自Q.P.Corporation,
Figure BDA0002773573050000084
-P。
所述细胞活性促进因子为视黄醇棕榈酸酯；低氧诱导调节因子为泛醌；抗氧化因子为生育酚；组织修复因子为神经酰胺3、神经酰胺6II以及神经酰胺2；所述神经酰胺3、神经酰胺6II以及神经酰胺2的质量比为1：1：1。
在使用过程中将细胞活性促进因子、低氧诱导调节因子、抗氧化因子、组织修复因子包裹于微脂囊小球，然后与保湿因子、水混合，喷涂于皮肤表面进行吸收。
性能评估
1.保湿功效检测：
选择面部皮肤偏干、缺乏水分的亚洲健康女性受试者35例，年龄为30～55岁。在使用测试产品前和使用后测试脸颊标记区域的皮肤角质层含水量的情况。
检测方式：利用皮肤水分测试仪Corneometer CM825，对脸颊区域测量3次，求取平均值。
检测环境：温度20.1℃～21.2℃，相对湿度48.1％～53.2％。
检测流程如下表1所示：
表1：检测流程安排
Figure BDA0002773573050000091
统计方法为：
统计分析软件为SPSS。在不同时间点的测量值与基础值比较，使用前后比较，如果值为正态分布，则采用t检验方法进行统计分析；如果值为非正态分布，则采用秩和检验方法进行统计分析；
统计方法均采用双尾检验，检验水准＝0.05。
安全性评价采用统计描述的方法，逐例分析不良事件程度，不良事件持续时间。
变化率即相对使用前的变化率，计算公式如下：
使用产品第1h的△(差值)＝T1-T0
使用产品第4h的△(差值)＝T4-T0
使用产品第8h的△(差值)＝T8-T0
Figure BDA0002773573050000101
Figure BDA0002773573050000102
Figure BDA0002773573050000103
式中，T0——受试区使用产品前，皮肤参数基础值。
T1——受试区使用产品后第1h，皮肤参数数值。
T4——受试区使用产品后第4h，皮肤参数数值。
T8——受试区使用产品后第8h，皮肤参数数值。
N——受试者人数。
受试者：入组35名受试者，最终统计35名受试者，使用产品为实施例2所得的护肤组合物。
皮肤角质层含水量Corneometer值检测结果见图1，图中n.s.表示无统计学差异，p>0.05，“*”表示0.01≤p<0.05；“**”表示0.001≤p<0.01；“***”表示p<0.001，通过检测可以知道单次使用产品后的区域在1小时、4小时和8小时的皮肤角质层水分含量与基础值相比均有显著性的上升(p<0.001)，1小时的增长率为71.48％，4小时的增长率为48.02％，8小时的增长率为32.89％。
空白对照区域在1小时的皮肤角质层水分含量与基础值相比无显著性差异(p>0.05)，1小时的下降率为0.07％，空白对照区域在4小时的皮肤角质层水分含量与基础值相比有显著性的下降(0.01<p<0.05)，4小时的下降率为0.9％，空白对照区域在8小时的皮肤角质层水分含量与基础值相比有显著性的下降(p<0.01)，8小时的下降率为1.96％。
通过保湿性检测，可以证明本发明提供的用于靶向抗衰修护的方法形成的护肤组合物对皮肤具有很好的保湿性，能有效保持皮肤表面的水分。
2.淡化皱纹功效检测：
选择面部皮肤满足眼角皱纹等级2～5级(D0)(皱纹等级如图2所示)，且左右眼角皱纹等级没有明显差异而且面部肌肤松弛，面部轮廓及苹果肌下垂的受试者32名，年龄范围在30～55周岁。受试者在使用测试产品前、连用14天及连用28天并由1名专家对受试者在产品使用后的皮肤进行感官评估。产品使用前后的评价结果通过统计学检验方法进行比较从而判断是否有统计学差异。
检测方式：利用皮肤快速光学成像***PRIMOS lite对眼角区域测量3次，求取平均值。
检测环境：温度20.1℃～21.2℃，相对湿度48.1％～53.2％。
检测流程如下表2所示：
表2：检测流程安排
Figure BDA0002773573050000111
Figure BDA0002773573050000121
统计方法为：
统计分析软件为SPSS。在不同时间点的测量值与基础值比较，使用前后比较，
如果值为正态分布，则采用t检验方法进行统计分析；如果值为非正态分布，则
采用秩和检验方法进行统计分析；
统计方法均采用双尾检验，检验水准＝0.05。
安全性评价采用统计描述的方法，逐例分析不良事件程度，不良事件持续时间。
变化率即相对使用前的变化率，计算公式如下：
使用产品2周的△(差值)＝D14-D0
使用产品4周的△(差值)＝D28-D0
使用产品2周的变化率(％)
使用产品4周的变化率(％)
式中，D0——受试区使用产品前，皮肤参数基础值。
D14——受试区使用产品2周，皮肤参数数值。
D28——受试区使用产品4周，皮肤参数数值。
N——受试者人数。
眼角皱纹面积检测结果如图3所示，图中“n.s.”表示无统计学差异；“*”表示0.01≤p<0.05；“**”表示0.001≤p<0.01；“***”表示p<0.001。连续使用实施例2所得护肤组合物28天，受试者的眼角皱纹面积在产品使用14天与基础值相比有显著性下降(p<0.001)，下降率为8.62％；在产品使用28天与基础值相比有显著性下降(p<0.001)，下降率为8.95％。
专家评估结果如图4所示，图中“n.s.”表示无统计学差异；“*”表示0.01≤p<0.05；“**”表示0.001≤p<0.01；“***”表示p<0.001。连续使用实施例2所得护肤组合物28天，受试者的专家临床评估(眼角皱纹)在产品使用14天与基础值相比有显著性下降(p<0.001)，下降率为9.91％；在产品使用28天与基础值相比有显著性下降(p<0.001)，下降率为24.32％。
选择面部皮肤满足眼角皱纹等级2～5级(D0)(皱纹等级如图2所示)，且左右眼角皱纹等级没有明显差异而且面部肌肤松弛，面部轮廓及苹果肌下垂的受试者32名，年龄范围在30～55周岁，自我评估测试结果如下表3所示：
表3：受试者使用实施例2所得护肤组合物D28天的评价如下：
Figure BDA0002773573050000131
*评价指标：1分为“非常不满意”，2分为“不满意”，3分为“一般”，4分为“满意”，5分为“非常满意”，统计N≥4分的人数的占比。
通过淡化皱纹功效检测，可以证明本发明提供的用于靶向抗衰修护的方法形成的护肤组合物对皮肤具有很好的淡化皱纹的功效。
3.皮肤整体效果检测：
选择面部皮肤偏干、缺乏水分的亚洲健康女性受试者35名，年龄范围在30～55周岁。受试者在使用测试产品前、连用14天及连用28天分别测试皮肤水分、皮肤弹性R5、皮肤经皮水分流失、皮肤光泽度，并由1名专家对受试者在产品使用后的皮肤进行感官评估。产品使用前后的评价结果通过统计学检验方法进行比较从而判断是否有统计学差异。
检测方式：
皮肤角质层水分含量：利用皮肤水分测试仪Corneometer CM825，对脸颊区域测量3次，求取平均值；
经皮水分流失量：利用皮肤水分流水测试仪Tewameter TM 300，对脸颊区域测量3次，求取平均值；
皮肤光泽度：利用皮肤光泽度测试探头Glossymeter GL200，对脸颊区域测量3次，求取平均值；
皮肤黑色素：利用皮肤黑色素和血红素测试仪Mexameter MX18，对脸颊区域测量3次，求取平均值；
皮肤弹性：利用皮肤弹性测试仪Cutometer dual MPA580，对脸颊区域测量3次，求取平均值；
专家评估：在受试者使用样品前、第14天、第28天由1名专家对受试者面部皮肤的细腻度进行临床评估，具体评分标准为：1分—7分代表很粗糙—一点都不细腻—非常细腻。
检测环境：温度20.1℃～21.2℃，相对湿度48.1％～53.2％。
检测流程如下表4所示：
表4：检测流程安排
Figure BDA0002773573050000141
Figure BDA0002773573050000151
统计方法为：
统计分析软件为SPSS。在不同时间点的测量值与基础值比较，使用前后比较，如果值为正态分布，则采用t检验方法进行统计分析；如果值为非正态分布，则采用秩和检验方法进行统计分析；
统计方法均采用双尾检验，检验水准＝0.05。
安全性评价采用统计描述的方法，逐例分析不良事件程度，不良事件持续时间。
变化率即相对使用前的变化率，计算公式如下：
使用产品2周的△(差值)＝D14-D0
使用产品4周的△(差值)＝D28-D0
Figure BDA0002773573050000152
Figure BDA0002773573050000161
式中，D0——受试区使用产品前，皮肤参数基础值。
D14——受试区使用产品2周，皮肤参数数值。
D28——受试区使用产品4周，皮肤参数数值。
N——受试者人数。
受试者：入组35名受试者，最终统计33名受试者，其中两名受试者由于其他原因退出测试，使用产品为实施例2所得的护肤组合物。
皮肤弹性R5值检测结果见图5，图中n.s.表示无统计学差异，“*”表示0.01≤p<0.05；；“**”表示0.001≤p<0.01；“***”表示p<0.001，通过检测可以知道连续使用实施例2所得的护肤组合物28天，受试者的皮肤弹性R5值在产品使用14天与基础值相比有显著性增长(p<0.001)，增长率为6.30％；在产品使用28天与基础值相比有显著性增长(p<0.001)增长率为13.19％。
皮肤光泽度检测结果见图6，图中n.s.表示无统计学差异，“*”表示0.01≤p<0.05；；“**”表示0.001≤p<0.01；“***”表示p<0.001，通过检测可以知道连续使用实施例2所得的护肤组合物28天，受试者的皮肤光泽度在产品使用14天与基础值相比有显著性增长(p<0.001)，增长率为10.06％；在产品使用28天与基础值相比有显著性增长(p<0.001)增长率为19.33％。
皮肤角质层水分含量检测结果见图7，图中n.s.表示无统计学差异，“*”表示0.01≤p<0.05；；“**”表示0.001≤p<0.01；“***”表示p<0.001，通过检测可以知道连续使用实施例2所得的护肤组合物28天，受试者的皮肤角质层水分含量在产品使用14天与基础值相比有显著性增长(p<0.001)，增长率为30.27％；在产品使用28天与基础值相比有显著性增长(p<0.001)，增长率为59.23％。
皮肤经皮水分流失检测结果见图8，图中n.s.表示无统计学差异，“*”表示0.01≤p<0.05；；“**”表示0.001≤p<0.01；“***”表示p<0.001，通过检测可以知道连续使用实施例2所得的护肤组合物28天，受试者的皮肤经皮水分流失在产品使用14天与基础值相比有显著性下降(p<0.001)，下降率为14.54％；在产品使用28天与基础值相比有显著性下降(p<0.001)，下降率为18.98％。
专家临床评估(细腻度)结果见图9，图中n.s.表示无统计学差异，“*”表示0.01≤p<0.05；；“**”表示0.001≤p<0.01；“***”表示p<0.001，通过检测可以知道连续使用实施例2所得的护肤组合物28天，受试者的专家临床评估(细腻度)在产品使用14天与基础值相比有显著性增长(p<0.001)，增长率为15.17％；在产品使用28天与基础值相比有显著性增长(p<0.001)，增长率为28.97％。
自我评估
受试者自我评估测试结果如下表5所示：
表5：受试者使用实施例2所得护肤组合物D28天的评价如下：
Figure BDA0002773573050000171
*评价指标：1分为“非常不满意”，2分为“不满意”，3分为“一般”，4分为“满意”，5分为“非常满意”，统计N≥4分的人数的占比。
使用实施例2所得的护肤组合物28天，90.91％的受试者认为肌肤滋润度明显改善，93.94％的受试者认为肌肤保湿效果明显提升，93.94％的受试者认为肌肤细腻度明显改善，90.91％的受试者认为嫩肤效果明显，81.82％的受试者认为光泽度明显提升，93.94％的受试者对产品温和性表示满意，96.97％的受试者对产品总体表示满意。
综上所述，实施例2所得的护肤组合物具有保湿、修护皮肤屏障功能、提升光泽度、增强弹性的功效。
本发明的设计思路和保护范围之内，对上述的具体实施例的其他改动或变型对本领域技术人员来讲是显而易见的。尽管本发明是对照特定实施例进行描述的，但这些实施例的目的只在于例示而不是为了进行限定，相应地，本专利并不仅限于此处描述的几个特定实施例的范围和效果，也不限于与本领域内由发明所取得的进展在某种程度上不一致的其他任何方式。

Claims (10)

1.一种用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，将囊泡仿生成分分割成纳米级的微脂囊小球，包裹有低氧诱导调节因子和抗氧化因子，实现诱导激活和损伤修复。
2.根据权利要求1所述用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，所述微脂囊小球的水性腔隙包裹有水溶性大分子物质，脂溶性或者同时具有水溶性与脂溶性的物质结合在其脂质双分子或亲脂基团中。
3.根据权利要求1所述用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，所述低氧诱导调节因子在低氧状态捕捉到由低氧信号诱导生成的低氧诱导因子-1，进一步调节低氧诱导因子-1的生成，并参与皮肤细胞的呼吸链过程，实现对损伤和衰老细胞的精准诱导激活。
4.根据权利要求3所述用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，所述低氧诱导调节因子激活细胞呼吸，能够调控基因作用于细胞呼吸链，抑制线粒体的过氧化，保护生物膜结构和脂质屏障的完整性。
5.根据权利要求1～4任一项所述用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，所述低氧诱导调节因子为具有感知低氧信号和调节细胞呼吸功能的可开发成分，选自植物提取物、动物提取物、微生物提取物、脂溶性醌类中的一种或几种组合。
6.根据权利要求1所述用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，所述抗氧化因子与自由基或活性氧结合形成稳定的低能态，阻断脂质体自由基的链式反应，阻止过度氧化造成细胞损伤。
7.根据权利要求6所述用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，所述抗氧化因子作用于细胞端粒酶，增强其活性，延伸染色体两侧端粒的长度，实现细胞损伤修复。
8.根据权利要求6或7所述用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，所述抗氧化因子为具有抗氧化自由基作用的可开发成分，选自植物提取物、动物提取物、微生物提取物、维生素、肽类物质、酚类物质、酶中的一种或几种组合。
9.根据权利要求1所述用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，所述微脂囊小球还包裹有细胞活性促进因子。
10.根据权利要求1所述用于靶向抗衰修护的低氧诱导方法，其特征在于，所述微脂囊小球还包裹有组织修复因子。
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