CN112087953A - 给动物施用的芽孢杆菌组合 - Google Patents
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Abstract
公开了包含三种或四种选自解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的芽孢杆菌物种的组合物的实施方案。所述组合物可进一步包含饲料和/或饲料添加剂，或与饲料和/或饲料添加剂组合使用，所述饲料添加剂包含丝兰属、皂树属、硅石、矿物粘土、葡聚糖、甘露聚糖类或其组合。还公开了将所述组合物和/或组合施用于动物如家禽的方法。
Description
相关申请的交叉引用
本申请要求于2018年1月24日提交的第62/621,196号美国临时申请的权益，其以全文并入本文参考。
技术领域
本申请涉及一种给动物、特别是禽类施用的组合和/或组合物，其包含选自解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)的三种或四种芽孢杆菌物种。
背景技术
哺乳动物的胃肠道(GI)被多种微生物群落定居。胃肠道可能包括数百种不同的物种，并且该群落谱可能会根据个体的年龄和健康状况随时间而变化。受试者中的健康微生物群落具有许多好处，例如对病原体的抵抗力，营养吸收和免疫***性能。肠道菌群在介导肠道致病感染中也起着重要作用，这会严重影响生活质量。人和动物的胃肠道菌群组成基本上取决于摄入的物质。因此，通常施用直接饲喂微生物(DFM)组合物以影响生理健康。
DFM产品也可作为家畜中抗生素的替代品施用。DFM可以限制病原微生物对粘膜表面的粘附，可以刺激免疫应答或其他内源有益微生物的增殖。而且，某些DFM产生并分泌其他有益的化合物或组合物，例如抗微生物物质。已证明饲喂DFM产品和预防水平的抗生素对于生长的相似结果。因此，DFM产品可以用作抗生素的替代品，或者可以与抗生素组合使用。
尽管有这些现有的DFM组合物，仍需要一些DFM组合物，其对接受这些组合物的受试者产生有益影响。
发明内容
本发明公开了组合和/或组合物的实施方案，其包含选自解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的三种或四种芽孢杆菌物种。所述组合/组合物在本文中称为芽孢杆菌组合。在一些实施方案中，所述组合物包含枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，或基本上由其组成，或由其组成。在其他实施方案中，所述组合物包含枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌，或基本上由其组成，或由其组成。在进一步的实施方案中，所述组合物包含凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，或基本上由其组成，或由其组成。
还公开了包含芽孢杆菌组合和另外的组分或组合物的混合组合物的实施方案。示例性的混合组合物包括基本上由所述芽孢杆菌组合组成或由所述芽孢杆菌组合组成的第一组合物，和包含饲料、丝兰属、皂树属、丝兰属和皂树属、硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖类混合物、铜盐、维生素、另外的直接饲喂微生物及其任意组合中一或多种的第二组分或组合物。
本发明的前述及其它目的、特征和优点将根据参照附图进行的如下详细描述而变得更加明显。
附图说明
图1是说明实施例3中所述研究结果的表。
图2是说明实施例4中所述研究结果的表。
图3是说明实施例4中所述研究的其他结果的表。
图4是说明实施例6中所述研究的治疗组T1-T11的第0-14天的结果的表。
图5是说明实施例6中所述研究的治疗组T12-T15的第0-14天的结果的表。
图6是说明实施例6中所述研究的治疗组T1-T11的第0-21天和第0-35天的结果的表。
图7是说明实施例6中所述研究的治疗组T12-T15的第0-21天和第0-35天的结果的表。
图8是说明实施例6中所述研究的治疗组T1-T11的第0-42天和第15-22天的结果的表。
图9是说明实施例6中所述研究的治疗组T12-T15的第0-42天和第15-22天的结果的表。
图10是说明实施例6中所述研究的治疗组T1-T11的第22-35天和第36-42天的结果的表，并且还提供了病变指数。
图11是说明实施例6中所述研究的治疗组T12-T15的第22-35天和第36-42天的结果的表，并且还提供了病变指数。
图12是说明从实施例6中所述研究的治疗组T1-11获得的肠细菌数据和加工数据的表。
图13是说明从实施例6中所述研究的治疗组T12-T15获得的肠细菌数据和加工数据的表。
图14是活鸡体重和饲料：增重比的图表，说明了单独的
(250ppm)，单独的各种DMF和
组合对体重增加的影响(0-14天)和实施例6中所述研究的饲料转化率(饲料：增重0-14天)，虚线表示各图的多项式趋势线。
图15是活鸡体重和饲料：增重比的图表，说明了单独的
(250ppm)，单独的各种DMF和
组合对体重增加的影响(0-21天)和实施例6中所述研究的饲料转化率(饲料：增重0-21天)，虚线表示各图的多项式趋势线。
图16是活鸡体重和饲料：增重比的图表，说明了单独的
(250ppm)，单独的各种DMF和
组合对体重增加的影响(0-35天)和实施例6中所述研究的饲料转化率(饲料：增重0-35天)，虚线表示各图的多项式趋势线。
图17是活鸡体重和饲料：增重比的图表，说明了单独的
(250ppm)，单独的各种DMF和
组合对体重增加的影响(0-42天)和实施例6中所述研究的饲料转化率(饲料：增重0-42天)，虚线表示各图的多项式趋势线。
图18是来自体外培养试验的结果表，其观察病原体生长抑制。
图19是来自第二个体外培养试验的结果表，其观察病原体生长抑制。
具体实施方案
I.术语
提供以下对术语和缩写的解释以更好地描述本公开内容并引导本领域普通技术人员实施本公开。如本文所用，“包含”意指“包括”且单数形式“一个”或“一种”或“所述”包括复数指称，除非上下文中另有明确指示。术语“或”是指所述替代要素的单个要素或者两个或更多个要素的组合，除非上下文中另有明确指示。
除非另外解释，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。尽管与本文所述相似或等价的方法和材料可用于本公开的实践或测试，但下文描述了合适的方法和材料。所述材料、方法和实例仅是说明性的而不意图是非限制性的。本公开的其它特征从以下详细描述和权利要求是明显的。
除非另外指明，否则说明书或权利要求书中使用的表示组分、分子量、百分比、温度、时间等的量的所有数字应理解为由术语“约”修饰。因此，除非另有说明，否则隐含地或明确地，所给出的数值参数是近似值，其可以取决于所寻求的期望性质和/或在标准测试条件/方法下的检测限。当直接明确地将实施方案与所讨论的现有技术区分开时，实施方案数字不是近似的，除非记载了“约”这个词。
施用：通过任何途径施用于受试者，例如家禽。在某些实施方案中，施用途径是口服。
抗菌剂：杀死和/或抑制微生物生长的药剂。如本文所用，抗微生物剂包括抗生素、抗真菌剂、抗病毒剂和包括抗球虫剂在内的抗寄生虫剂、或其组合。
载体：用作本文所公开的组合、组合物或组分中(或与其一起)的添加剂的物质。如本文所用，可以将载体加入组合、组合物或组分的颗粒中，或者可以将其与组合、组合物或组分的颗粒物理混合。例如，可以使用载体来改变组合或组合物的非生物学性质，例如流动性、储存期间的稳定性、暴露于湿气等。本文包括载体的实例。
菌落形成单位(CFU)：“菌落形成单位”是指细菌的单个菌落。菌落是一起生长的大量个体细菌。对于某些实施方案，菌落包含基本相同的物种，并且可以包含但不一定包含基本相同的菌株。CFU是样品表面内或表面上细菌数量的量度。但是，CFU不一定是单个细胞或孢子的量度，因为菌落可以由单个或大量的细胞或孢子形成。
组合：组合包括两种或更多种组分，其施用使得至少一种组分的有效时间段与至少另一种组分的有效时间段重叠。组合或其组分可以是组合物。在一些实施方案中，所施用的所有组分的有效时间段彼此重叠。在包含三种组分的组合的示例性实施方案中，所施用的第一组分的有效时间段可以与第二和第三组分的有效时间段重叠，但是第二和第三组分的有效时间段独立地可以彼此重叠或可以彼此不重叠。在包含三种组分的组合的另一示例性实施方案中，所施用的第一组分的有效时间段与第二组分的有效时间段重叠，但第三组分的有效时间段并非如此；第二组分的有效时间段与第一组分和第三组分的有效时间段重叠。组合可以是包含所述组分的组合物、包含一种或多种组分和另一种单独组分(或多种组分)或包含剩余一种或多种组分的一种或多种组合物的组合物，或者所述组合可以是两种或更多种单独组分。在一些实施方案中，所述两种或更多种组分可包含在两个或更多个不同时间施用的相同组分，基本上同时施用或以任何顺序依次施用的两种或更多种不同组分，或其组合。
芽孢杆菌组合：是指仅包括三种或四种选自解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的芽孢杆菌物种的DFM的组合或组合物。在一些公开的实施方案中，“芽孢杆菌组合”是指由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的任意三种或四种组成或基本上由其组成的组合物，用于施用于受试者，特别是动物，甚至更特别是鸟类，例如鸡和火鸡。在其他实施方案中，“芽孢杆菌组合”是指组合施用的解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌，而没有任何其他DFM。本领域普通技术人员将理解，芽孢杆菌组合可以包括从所述三种或四种芽孢杆菌物种中的任意或全部的生产中带出的其他残留物质，例如干奶产品，和/或不会实质影响所述芽孢杆菌物种的结构、功能、新颖和/或基本特征的载体。
CSL组合：指仅包括凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的DFM的组合或组合物。在一些公开的实施方案中，“CSL组合”是指由凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成或基本上由其组成的组合物，用于施用于受试者，特别是动物，甚至更特别是鸟类，例如鸡和火鸡。在其他实施方案中，“CSL组合”是指在没有任何其他DFM的情况下组合施用的凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。本领域普通技术人员将理解，CSL组合可以包括从所述三种芽孢杆菌物种中的任意或全部的生产中带出的其他残留物质，例如干奶产品，和/或不会实质影响所述三种芽孢杆菌物种的结构、功能、新颖和/或基本特征的载体。
ASL组合：指仅包括解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的DFM的组合或组合物。在一些公开的实施方案中，“ASL组合”是指由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成或基本上由其组成的组合物，用于施用于受试者，特别是动物，甚至更特别是鸟类，例如鸡和火鸡。在其他实施方案中，“ASL组合”是指在没有任何其他DFM的情况下组合施用的解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。本领域普通技术人员将理解，ASL组合可以包括从所述三种芽孢杆菌物种中的任意或全部的生产中带出的其他残留物质，例如干奶产品，和/或不会实质影响所述三种芽孢杆菌物种的结构、功能、新颖和/或基本特征的载体。
ASLC组合：指仅包括解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的DFM的组合或组合物。在一些公开的实施方案中，“ASLC组合”是指由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成或基本上由其组成的组合物，用于施用于受试者，特别是动物，甚至更特别是鸟类，例如鸡和火鸡。在其他实施方式中，“ASLC组合”是在没有任何其他DFM的情况下组合施用的解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌。本领域普通技术人员将理解，ASLC组合可以包括从所述四种芽孢杆菌物种中的任意或全部的生产中带出的其他残留物质，例如干奶产品，和/或不会实质影响所述四种芽孢杆菌物种的结构、功能、新颖和/或基本特征的载体。
直接饲喂微生物：包含活的和/或存活的微生物，通常是细菌和/或酵母的组合物，其对动物提供有益作用，例如但不限于抗微生物作用包括减少的细菌计数、改善的饲料转化率、改善的体重增加、改善的健康指标、降低的死亡率和/或改善的病变指数(lesionscore)。
饲料转化率：对动物将饲料质量转化为体重增加的效率的量度。通常，饲料转化率以饲料磅数除以增重磅数来计算，因此可以表示为无量纲数。饲料转化率在本领域中也称为饲料转化比或饲料效率。
甘露聚糖类：包含甘露糖的一类多糖。甘露聚糖类家族包括纯甘露聚糖类(即聚合物骨架由甘露糖单体组成)、葡甘露聚糖(聚合物骨架包含甘露糖和葡萄糖)和半乳甘露聚糖(其中单个半乳糖残基与聚合物骨架相连接的甘露聚糖类或葡甘露聚糖)。甘露聚糖类存在于一些植物物种和酵母的细胞壁中，并且可以作为此类植物物种和/或酵母的提取物提供。
矿物粘土：术语“矿物粘土”是指水合硅酸铝类。矿物粘土通常包括少量杂质，例如钾、钠、钙、镁和/或铁。
皂苷：一类化合物，在天然资源中发现的许多次级代谢物之一。在各种植物物种，例如皂树属和丝兰属中发现的皂苷特别丰富。更具体而言，在结构方面，它们在组成上是两亲糖苷类。在某些实施方案中，皂苷包含与亲脂性三萜或三萜衍生物、甾体或甾体衍生物、或二者组合的一个或更多个亲水糖苷部分。
菌株：菌株是指相同物种的具有可辨别的表型和/或遗传差异的两个成员。
受试者：任何动物或人类，但尤其是家畜(例如牛，绵羊，山羊，猪，火鸡和鸡)和家庭宠物(例如狗，猫和啮齿动物)，本文中最典型的“受试者”是指鸟类，包括家禽，例如鸡和火鸡。
有效量：足以在受试者中获得效果的特定化合物、组合物或组合的量或浓度。
维生素：包括维生素A、维生素B1(硫胺素)、维生素B2(核黄素)、维生素B3(烟酸或烟酰胺)、维生素B5(泛酸)、维生素B6(吡哆醇、吡哆醛或吡哆胺或盐酸吡哆醇)、维生素B7(生物素)、维生素B9(叶酸)、维生素B12(各种钴胺素；维生素添加剂中通常为氰钴胺)、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、K1和K2(即MK-4、MK-7)、叶酸和生物素、及其衍生物和类似物。
其它内容由美国专利申请第14/699,740号、美国专利申请第13/566,433号、美国专利申请第13/872,935号、美国专利公开第2013/0017211、美国专利公开号2012/0156248、美国专利公开号2007/0253983、美国专利公开号2007/0202092、美国专利公开号2007/0238120、美国专利公开号2006/0239992、美国专利公开号2005/0220846、美国专利公开号2005/0180964和澳大利亚专利申请号2011/201420提供，其全部内容均通过引用并入本文。
II.芽孢杆菌组合
芽孢杆菌组合是包含选自凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的三种或四种DFM的组合或组合物。CSL组合是包含凝乳芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌DFM的组合或组合物，并且不包含另外的DFM。ASL组合是包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌DFM的组合或组合物。在一些实施方案中，ASL组合包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，基本上由其组成或由其组成，并且没有另外的DFM。ASLC组合是包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌DFM的组合或组合物。在一些实施方案中，ASLC组合包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌，基本上由其组成或由其组成，但没有其他另外的DFM。
本发明的某些方面涉及这样的发现，给受试者施用芽孢杆菌组合如CSL组合、ASL组合或ASLC组合，与不施用所述组合的受试者相比，给受试者提供了实质性益处。该组合可以作为组合物施用。特别涉及家禽，相对于未饲喂任何一种、一种或两种任意组合的这些芽孢杆菌的家禽，芽孢杆菌组合在饲料转化率、平均体重、平均体重增加、体重变异系数、禽类死亡率、病变指数、沙门氏菌/大肠杆菌/产气荚膜梭菌(CP)发病率和/或粪便物中卵囊中的一或多个方面提供了实质性益处。
在一些实施方案中，所述芽孢杆菌组合中的一种或多种芽孢杆菌以芽孢杆菌孢子提供，在某些实施方案中，所述芽孢杆菌组合中的所有芽孢杆菌均以孢子提供。
在一些实施方案中，所述芽孢杆菌组合中的一种或多种芽孢杆菌是脱水的，例如通过冷冻干燥或冻干、喷雾干燥或其他合适的脱水技术。脱水如通过冷冻干燥或喷雾干燥可以改善细菌的稳定性和/或保质期。在某些实施方案中，将所述芽孢杆菌组合中的所有芽孢杆菌冷冻干燥。
A.芽孢杆菌菌株
本领域普通技术人员将理解，凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和/或解淀粉芽孢杆菌的任何菌株或菌株组合可以在所述芽孢杆菌组合中使用。如本文所用，术语“解淀粉芽孢杆菌”、“凝结芽孢杆菌”、“枯草芽孢杆菌”和“地衣芽孢杆菌”可独立地指各个芽孢杆菌物种的单个菌株，或各个芽孢杆菌物种的多个菌株，如2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多菌株。仅作为示例而非限制，以下列出了每种芽孢杆菌物种的某些可接受的示例性菌株。在某些实施方案中，芽孢杆菌组合包括解淀粉芽孢杆菌TOA5001、凝结芽孢杆菌GBI-30菌株、ATCC编号PTA-6086、地衣芽孢杆菌OBT618和枯草芽孢杆菌菌株OBT1224中的一种或多种，并且在特定实施方案中，所述芽孢杆菌组合包括解淀粉芽孢杆菌TOA5001、凝结芽孢杆菌GBI-30菌株、ATCC编号PTA-6086、地衣芽孢杆菌OBT618和枯草芽孢杆菌OBT1224。
凝结芽孢杆菌菌株
凝结芽孢杆菌Hammer
BAA-738TM菌株LMG 17453，Logan B0934，NCTC 3992，Vitek#202384，凝结芽孢杆菌Hammer
7050TM菌株NRS 609，NCIB 9365，NCTC 10334，DSM1，CCM 2013，WDCM 00002，凝结芽孢杆菌Hammer
8038TM菌株NCA 43P，NCIB 8080，NRS 770，DSM 2312，由Berry作为嗜热酸芽孢杆菌(Bacillus thermoacidurans)保藏在ATCC，凝结芽孢杆菌Hammer
10545TM菌株NRS 784，NCIB 8041，DSM 2311，CCM 1082，由Anderson和Werkman作为糊精芽孢杆菌(Bacillus dextrolacticus)保藏在ATCC，凝结芽孢杆菌Hammer
11014TM菌株NRS T27，78G，DSM 2383，凝结芽孢杆菌Hammer
11369TM菌株C，DSM 2384，由Anderson和Werkman作为糊精芽孢杆菌保藏在ATCC，凝结芽孢杆菌Hammer
12245TM菌株NCA 308，DSM 2308，NCIB 8870，凝结芽孢杆菌Hammer
15949TM菌株NCA4259，DSM 2385，凝结芽孢杆菌Hammer
23498TM菌株M-39，DSM 2314，NCIB 10276，由Nakayama和Yanoshi作为消旋乳酸芽孢杆菌(Bacillus racemilacticus)保藏于ATCC，凝结芽孢杆菌Hammer
31284TM，由Horowitz-Wiassowa和Nowotelnow作为芽孢乳酸菌(Lactobacillus sporogenes)保藏在ATCC，Ganeden Biotech Inc的凝结芽孢杆菌GBI-30菌株，ATCC编号PTA-6086，凝结芽孢杆菌Hammer
53595TM菌株PM-1000，凝结芽孢杆菌Hammer菌株DSM 2350，NRRL-NRS 2012，凝结芽孢杆菌Hammer菌株DSM 2356，NCIB 8523，N.R.Smith(NRS)798，B.Hammer Iowa State College 200，凝结芽孢杆菌Hammer菌株DSM 30760，凝结芽孢杆菌Hammer菌株STI09070(IMET)，1032-005，凝结芽孢杆菌Hammer菌株STI09076(IMET)，1141-003，凝结芽孢杆菌Hammer菌株STI09080(IMET)，1136-014，凝结芽孢杆菌Hammer菌株STI09208(IMET)，491-25，凝结芽孢杆菌Hammer菌株STI09210(IMET)，485-59，凝结芽孢杆菌Hammer菌株NCIB 700460，Th1，凝结芽孢杆菌Hammer菌株NCIB 701099，BG5，TH27(205)，凝结芽孢杆菌Hammer菌株NCIB 701159，254和凝结芽孢杆菌Hammer菌株NCIB 701164，259。
地衣芽孢杆菌菌株
地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
6598TM菌株NRS 745，由(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏于ATCC，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
6634TM菌株NRS304，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
8480TM菌株NRS 1128，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
9259TM，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
9789TM菌株AMNH 723，ATCC 102，ATCC 4527，ATCC 8243，ATCC 9800，NCTC 2586，NCTC 6346，NRS 243，NRS 978，W.Ford 1，DSM 8785，DSM 46308，BU 171，CCDB b-30，CCEB 631，CCM 2205，CN1060，HNCMB 101012，IFO 12195，IFO 12196，IMET 11025，NBRC 12195，NBRC 12196，NCDO735，NCDO 835，NCIB 6346，NCIB 8059，NCIB 8061，OUT 8367，OUT 8368，Smith 243，Smith978，HankeyB13由(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏在ATCC，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
9945TM菌株NRS 712，NCIB 8062，由(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏在ATCC，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
9945aTM菌株CD-2，NCIB 11709，芽孢杆菌(Weigmann)Chester
10716TM芽孢杆菌ATCC 11944，BS 2181，Boots 1343，CCM 2181，FDA BT1，NCIB 8874，NRS 1330，Tracy I，DSM 603，IFO 12199，NBRC 12199，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
11945TM菌株1331，FDA BT3，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
11946TM菌株1333，B-1001，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
12139TM菌株CSC，由(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏在ATCC中，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
12713TM菌株PRL B479，NRRL B-1001，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
12759TM菌株ATCC 11560，Damodaron P-8，LMG 7560，NRS 1415，Vitek#200148，NCIB 8549，HankeyB l33，P8，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
12759-MINI-PACKTM株ATCC11560，Damodaron P-8，LMG 7560，NRS 1415，Vitek#200148，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
13438TM菌株NCTC 8233，M.II菌株，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
14409TM菌株620，NRS 1114，NCIB 1042，由ZoBell和Upham以Bacillus abysseus保藏在ATCC，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
14580TM菌株(Gibson)46，NCIB 9375，NCTC 10341，NRS 1264，DSM 13，CCM 2145，IFO 12200，NBRC 12200，WDCM 00068，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
14580D-5TM菌株名称：来自地衣芽孢杆菌菌株46[
14580TM]的基因组DNA，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
14594TM，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
21038TM菌株L-065，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
21039TM，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
21415TM菌株NS 1，由(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏于ATCC，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
21417TM菌株M，由(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏于ATCC，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
21418TM，由(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏于ATCC，枯草地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
21424TM菌株DSM 1969，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
21610TM菌株B-201-7，由(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏于ATCC，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
21667TM菌株FD 23612，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
21733TM菌株DSM 1913，由(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏于ATCC，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
25972TM菌株749/C，DSM 8782，DSM 46217，IMET 10723，NCIB 9443，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
27326TM菌株OM-81，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
27811TM菌株584，FERM-P 1038，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
31667TM菌株DG14，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
31972TM菌株PM-3，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
33632TM菌株(IOC)2390，NCIB 11672，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
39326TM，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
53757TM菌株PWD-1，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
53926TM菌株E312，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester
55768TM菌株O.W.U.138B[OWU 138B]，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM15，C，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 392，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 394，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 7259，NRRL-NRS 1263，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 7459，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 11258，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 11259，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM12369，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 12370，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 26543，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester芽孢杆菌DSM 28096，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 28591，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM30523，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30535，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30542，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30585，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30615，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30620，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30624，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester芽孢杆菌DSM 30643，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30654，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30724，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester芽孢杆菌DSM 30766，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30769，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM30778，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30779，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30865，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30926，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester芽孢杆菌DSM 30959，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM30960，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30961，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 30976，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 31019，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 100653，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株DSM 100655，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester芽孢杆菌DSM 103059，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 1525，1229，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 6816，Glaxo 417，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 7224，Loos，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 8536，P1，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 8537，Ho，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 9536，Gibson 1319，NRS 1553，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 9667，1，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 9668，2，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 9669，3，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB10689，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 11143，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 11643，YNS7712R，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 13497，地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester菌株NCIB 14014，DA33，地衣芽孢杆菌B1(NRRL保藏号B-50907)，枯草芽孢杆菌B2(保藏号B-50908)，地衣芽孢杆菌RW25(NRRL保藏号B-50911)，地衣芽孢杆菌RW32(NRRL保藏号B-50912)，地衣芽孢杆菌RW41(NRRL保藏号B-50913)，地衣芽孢杆菌BL21(NRRL B-50134)，地衣芽孢杆菌3-12a(NRRL B-50504)，地衣芽孢杆菌4-2a(NRRLB-50506)，地衣芽孢杆菌842(NRRL B-50516)，地衣芽孢杆菌DSM 5749(
Chr.Hansen Bio Systems)和地衣芽孢杆菌OBT618(ATCC PTA-122188，OspreyBiotechnics)。
枯草芽孢杆菌菌株
枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
82TM菌株AMC，ATCC 8037，NRS 315，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
82D-5TM菌株名称：来自枯草芽孢杆菌菌株AMC[
82TM]的基因组DNA，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
465TM菌株NRS743，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)
4529TM菌株3，ATCC 8013，NCTC 2588，NRS 1004由Trevisan以马铃薯杆菌(Bacillus vulgatus)保藏于ATCC，由Fabian和Nienhuis作为黑色芽孢杆菌(Bacillus nigrificans)保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
4925TM菌株NRS 740，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
4944TM菌株NCTC，作为细小芽孢杆菌(Bacillus parvus)保藏于ATCC的NRS1106，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillus subtilissubspecies subtilis)(Ehrenberg)Cohn
6051TM菌株Marburg菌株，ATCC 6051-U，CCM 2216，CCRC 10255，CCUG 163B，CFBP 4228，CIP 52.65，DSM 10，IAM 12118，IFO 12210，IFO 13719，IFO 16412，IMET 10758，JCM 1465，LMG 7135，NCAIM B.01095，NCCB 32009，NCCB 53016，NCCB 70064，NCFB 1769，NCIB 3610，NCTC 3610，NRRL B-4219，NRS 1315，NRS744，VKM B-501，(Ehrenberg)Cohn以枯草芽孢杆菌保藏于ATCC的NBRC 13719，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
6051aTM菌株P31K6，以phi-e保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌噬菌体phi-e
605l-BlTM菌株Phi-e，由Lehmann和Neumann以黑色马铃薯杆菌(Bacillusaterrimus)保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
6460TM菌株NRS 259，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
646lTM菌株NRS 275，CN 2192，由Lehmann和Neumann以黑色马铃薯杆菌保藏于ATCC的NCIB 8055，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种(Bacillussubtilis subspecies spizizenii)Nakamura等
6633TM菌株NRS 231，DSM 347，CCM1999，IAM 1069，NCIB 8054，NCTC 10400，以枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn保藏于ATCC的WDCM 00003，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等
6633D-5TM菌株名称：来自枯草芽孢杆菌spizizenii亚种菌株NRS 231[
6633TM]的基因组DNA，以枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn保藏在ATCC，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等
CRM-6633TM菌株NRS 231，以枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn保藏在ATCC，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等
6633-MINI-PACKTM菌株NRS 231，以枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn保藏于ATCC，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
6984TM菌株NRS 747，以马铃薯杆菌水解亚种(Bacillus vulgatus subspecies hydrolyticus)保藏于ATCC，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
7003TM菌株NRS 730，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
7058TM菌株NRS 351，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
7059TM菌株NRS 352，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
7060TM菌株NRS 659，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
7067TM菌株NRS 238，ATCC 7974，ATCC 8012，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
7480TM菌株NRS 1107，由(Benedek)Benedek以Bacillus endoparasiticus保藏于ATCC，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
8188TM菌株ATCC 8450，以Tyrothrix minimus保藏于ATCC的NRS 773，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
8473TM菌株NRS 762，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
9466TM菌株名称：FDA菌株PCI 220[BUCSAV 170，NCIB8159，NRRL B-558，NRS 1088]，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
9524TM菌株3R9675，NRS 1109，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
9799TM菌株NCTC 6276，NRS 1125，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
9858TM菌株NRS 237，NCIB 8063，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
9943TM菌株NRS 979，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
10774TM菌株BU169，NCIB 8872，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
10783TM菌株NRRL B-543，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
11774TM菌株NCTC 8236，DSM 2109，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
11838TM菌株AMC 46-A-6(菌株I)，NCIB 8850，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
12100TM菌株NCA 1558，ND 957，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
12432TM菌株MB 32，56R188，ATCC 13597，NCIB 8993，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
12695TM菌株51-52，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
12711TM菌株PRLB92，Ra，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
13542TM，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
13933TM菌株NRRL B-1471，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
13952TM菌株1346，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
14410TM菌株625，由ZoBell和Upham以Bacillus borborokoites保藏于ATCC的NRS 1115，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
14415TM菌株569，由ZoBell和Upham以Bacillus submarinus保藏于ATCC的NRS 1120，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
14416TM菌株576，由ZoBell和Upham以Bacillusthalassokoites保藏于ATCC的NRS 1121，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
14593TM菌株IAM 1145，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
14617TM菌株A-1625，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
14660TM菌株C30-1，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
14662TM菌株C30-109，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
14807TM菌株MB-155，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15040TM菌株SX-67，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15041TM菌株SX-92，由Mann以Bacillus uniflagellatus保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15134TM，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15183TM菌株309，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15244TM菌株3369，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15245TM菌株3349，由Sawamura以纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)保藏于ATCC的IAM1-3，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15476TM菌株M-4-45，由Meyer和Gottheil以短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15477TM菌株M-24-1，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15561TM菌株K-X-1，A-1，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15563TM菌株Marburg，以SP8噬菌体保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌噬菌体SP8
15563-B1TM菌株SP8，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15575TM菌株SB19，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15811TM菌株5380，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15818TM菌株RIA 445，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15819TM菌株RIA447，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
15841TM，以S-a噬菌体保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌噬菌体S-a
15841-B1TM菌株S-a，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
19659TM菌株PRD 66，IFO 13722，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
19659-MINI-PACKTM菌株PRD 66，IFO 13722，由Meyer和Gottheil以短小芽孢杆菌保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21008TM菌株182-H-86，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21183TM菌株5221，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21228TM菌株SC 8548，SO-4，DSM 1970，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21331TM菌株IFO 35，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21332TM菌株IAM 1213，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21394TM菌株4-3-Ky，以枯草芽孢杆菌Sakainensis亚种(Bacillus subtilissubspecies sakainensis)保藏于ATCC的DSM 1971，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21555TM菌株Y13，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21556TM，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21742TM菌株AHr-5，由Frankland和Frankland作为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21770TM菌株SP-3，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
21951TM菌株716，由Meyer和Gottheil作为短小芽孢杆菌保藏于ATCC的IFO 13322，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
23059TM菌株W23，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
23856TM菌株EMG 50，SB19，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
23857TM菌株168，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
23857D-5TM菌株名称：来自枯草芽孢杆菌168[
23857TM]的基因组DNA，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
23858TM菌株EMG 52，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
23859TM菌株EMG 53，由Nakamura以尘埃芽孢杆菌(Bacillus pulvifaciens)保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
25369TM菌株24028，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
27328TM菌株C，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
27370TM菌株168M，以SPO1保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌噬菌体SPO1
27370-B1TM菌株SPO1，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
27505TM菌株K49菌株，以枯草芽孢杆菌解淀粉亚种(Bacillussubtilis subspecies amyloliquefaciens)保藏于ATCC的HER 1346，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
27689TM菌株SB168(trp-)，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
29056TM菌株SB100，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
29233TM菌株X6，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
31002TM菌株Ahr.AUr-9，FERM-1998，由Migula以Bacillusglobigii保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
31028TM菌株FD 6404，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
31091TM菌株1054，IFO 13586，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
31094TM菌株1097，IFO 13621，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
31098TM菌株1027，由Meyer和Gottheil以短小芽孢杆菌保藏于ATCC的IFO 13585，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等
31578TM菌株DSM 6223，RUB 331，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
31954TM菌株MO7S-16/11，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
33234TM菌株NCIB 10106，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
35021TM菌株5230，NRS 6，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
35854TM菌株NRRL B-3411，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
35946TM菌株OSU 75，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等
37014TM菌株DSM 6224，BD170，pSA2100，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等
37015TM菌株DSM 4514，BD170，NCIB 11624，pUB110，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等
37108TM菌株DSM 4873，BGSC 1E32，BR151，pPL608，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等
37128TM菌株DSM 4554，BGSC 1E18，pE194，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等
39090TM菌株DSM6198，BGSC 1S53，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
39320TM菌株MB 4488，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
39374TM菌株MB 3575，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
39706TM菌株B1-20，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
43223TM菌株ABM261，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
49343TM菌株IMVS 0101，由Migula以Bacillus globigii保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
49760TM，由Migula以Bacillus globigii保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
49822TM，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
55033TM菌株SMS274，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
55060TM菌株MB4974，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
55405TM菌株300，以地衣芽孢杆菌(Weigmann)Chester保藏于ATCC的枯草芽孢杆菌inaquosorum亚种(Bacillus subtilis subspeciesinaquosorum)
55406TM菌株DA33，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
55422TM菌株SC 15257，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
55614TM菌株1.2，AQ153，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn
55675TM菌株BP01，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 402，BRC 111470，NCIB 10106，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等菌株DSM 618，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等菌株DSM 1087，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 1088，IFO 13169，NBRC 13169，OUT 8353，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 1089，IFO 3026，NBRC 3026，OUT 8350，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 1090，OUT 8424，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 1091，OUT 8425，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 1092，IFO3009，NBRC 3009，OUT 8235，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM3256，IAM 1213，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 3257，IAM 1259，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 3258，IAM 1260，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 4181，NCA 72-52，SA 22，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM4393，pC194，SB202，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 4449，natto 3335UM4，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 4450，natto 3335UM8，pLS20，pBCl6，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 4451，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 4515，DB163，pGR71，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 4608，BR157，pMW1，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 4750，1E7，BGSC 1E7，pE94-cop6，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 4751，1E34，BGSC 1E34，pAM77，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 4871，BD426，BGSC 1E21，pBD8，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 4872，BD466，BGSC 1E24，pBD10，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 4874，BGSC 1E38，pMK3，YB886，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 5213，BGSC 1A40，BR 151，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 5214，BD 393，BGSC 1A511，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 5545，BGSC 1A459/SU+III，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 5547，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 5552，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 5611，NRRL B-360，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 5660，NRRL B-362，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等菌株DSM 6395，BGSC 2A2，W23 2A2，WB 672，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 6397，BGSC 1A2，SB 491，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等菌株DSM 6399，BGSC 2A1，SB 623，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等菌株DSM 6405，BGSC 2A3，W23SR，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 6887，BGSC 1A309，NP40，枯草芽孢杆菌枯草亚种(Ehrenberg)Nakamura等菌株DSM 6889，1A658，BGSC 1A658，DA 65，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等菌株DSM 8439，CCM 2268，IAM 12021，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 13019，SSI MK1，枯草芽孢杆菌spizizenii亚种Nakamura等菌株DSM 15029，NRRL B-23049，枯草芽孢杆菌inaquosorum亚种Rooney等菌株DSM 21200，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 21393，枯草芽孢杆菌inaquosorum亚种Rooney等菌株DSM 22148，KCTC 13429，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 23521，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 23778，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 25152，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 28592，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30512，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30529，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM30533，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30534，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30540，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30541，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30551，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30558，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30562，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30570，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30581，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30597，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30642，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM30651，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30652，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30671，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30676，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30677，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30682，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30711，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30723，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30801，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30924，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30925，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM30927，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30928，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30929，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30941，D1，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 30942，D-FC1，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 31008，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 31009，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM31010，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 31020，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 31021，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 31033，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 100605，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 100612，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 100613，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 100614，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 103044，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM103047，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 103051，枯草芽孢杆菌(Ehrenberg)Cohn菌株DSM 103758，枯草芽孢杆菌AM0904(NRRL保藏编号B-50914)，枯草芽孢杆菌AM0911(NRRL保藏编号B-50915)，枯草芽孢杆菌NP122(NRRL保藏编号B-50910)，枯草芽孢杆菌NP119B(NRRL保藏编号B-50909)，枯草芽孢杆菌BS18(NRRL B-50633)，枯草芽孢杆菌BS278(NRRL 50634)，枯草芽孢杆菌4-7d(NRRL B-50505)，枯草芽孢杆菌3-5h(NRRL B-50507)，枯草芽孢杆菌AGTP BS3BP5(NRRL B-50510)，枯草芽孢杆菌BS918(NRRL B-50508)，枯草芽孢杆菌AGTP BS1013(NRRL-50509)，枯草芽孢杆菌AGTP 944(NRRL B-50548)，枯草芽孢杆菌AGTP BS442(NRRL B-50542)，枯草芽孢杆菌AGTP BS1069(NRRL B-50544)，枯草芽孢杆菌AGTP BS521(NRRL B-50545)，枯草芽孢杆菌B27(NRRL B-50105)，枯草芽孢杆菌3A-P4(PTA-6506)，枯草芽孢杆菌22C-P1(PTA-6508)，枯草芽孢杆菌BL21(NRRL B-50134)，枯草芽孢杆菌菌株GB03，枯草芽孢杆菌菌株QST713，枯草芽孢杆菌DSM 5750(
2B，Chr.HansenBioSystems)，枯草芽孢杆菌菌株OBT 1224(Osprey Biotechnic)。
解淀粉芽孢杆菌菌株
解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等(
23350TM)，解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等(
23842TM)，解淀粉芽孢杆菌SB3296(PTA-7548)，解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等(
23843TM)，解淀粉芽孢杆菌SB3297(PTA-7549)，解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等(
BAA-390TM)，解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等(
23845TM)，解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等(
23844TM)，解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等(
31592TM)，解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等(
53495TM)，解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等(
49763TM)，解淀粉芽孢杆菌：SB3276(PTA-7541)，解淀粉芽孢杆菌：PMBP-M7(小瓶标记的BCRC PMBP-M7)(PTA-5819)，解淀粉芽孢杆菌SB 3284(PTA-7545)，解淀粉芽孢杆菌SB 3288(PTA-7546)，解淀粉芽孢杆菌MF215(SB3446)(PTA-7790)，解淀粉芽孢杆菌SB 3283(PTA-7544)，解淀粉芽孢杆菌MF 225(SB 3448)(PTA-7791)，芽孢杆菌(
70038TM，以解淀粉芽孢杆菌(Fukumoto)Priest等人保藏)，解淀粉芽孢杆菌TOA5001(NITE专利微生物保藏号BP-01844)。
III.芽孢杆菌组合中凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和/或解淀粉芽孢杆菌的量
选择所述芽孢杆菌组合中存在的凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和/或解淀粉芽孢杆菌的相对量以获得期望的结果。对于某些实施方案，所述芽孢杆菌组合包含约105至约1012CFU/克、更通常为约105至1010或108至1010CFU/克所述芽孢杆菌组合中每种芽孢杆菌物种。在某些实施方案中，所述芽孢杆菌组合以足以提供5×105至8×105CFU/克饲料/芽孢杆菌组合的量添加到饲料中。并且在特定的实施方案中，0.25磅/吨饲料足以提供5×105至8×105CFU/克。
在一些实施方案中，可以施用所述芽孢杆菌组合以提供其中所包括的所述芽孢杆菌物种的不同CFU比率。在一些实施方案中，所述芽孢杆菌组合中枯草芽孢杆菌：地衣芽孢杆菌的比例可以相对于彼此为2：1至1：2，并且通常为约1：1。对于所述芽孢杆菌组合中的其他芽孢杆菌物种，相对于其他芽孢杆菌物种，枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌(BSBL)的总量可以大于零至99％，例如从10％到90％，从15％到85％，从20％到80％，从25％到75％，从35％到65％，从45％到55％，或基本上50％(基于CFU)。
在一些实施方案中，ASL组合，以彼此相对的量计，可包含从25％或更少到75％或更多的解淀粉芽孢杆菌(BA)和从75％或更多到25％或更少的BSBL，基本上由其组成或由其组成。在某些实施方案中，ASL组合中BA与BSBL的比例为从25％：75％BA：BSBL至75％：25％BA：BSBL，并且可以为约50％：50％BA：BSBL。
在一些实施方案中，ASLC组合，以彼此相对的量计，可以包含从25％或更少至75％或更多的解淀粉芽孢杆菌(BA)和凝结芽孢杆菌(BC)总量，以及从75％或更多到25％或更少的BSBL，基本上由其组成或由其组成。在某些实施方案中，ASL组合中BA+BC与BSBL的比例为从25％：75％BA+BC：BSBL至75％：25％BA+BC：BSBL，并且可以为约50％：50％BA+BC：BSBL。BA和BC彼此相对的量可以是BA相对于BC为从大于零到99％，如从10％到90％，从15％到85％，从20％到80％，从25％到75％，从35％到65％，从45％到55％，或BA相对于BC基本上为50％(基于CFU)。
例如，CSL组合每克CSL组合可包含3.5x109至10x109 CFU的凝结芽孢杆菌，如4.1x109至7.5x109、5x109到6.4x109或5x109到6x109 CFU的凝结芽孢杆菌/克。CSL组合每克CSL组合可包含5x108至10x108 CFU的枯草芽孢杆菌，如6x108至8.7x108、6.9x108至9x108或7.2x108至8x108 CFU的枯草芽孢杆菌/克。并且CSL组合每克CSL组合可包含5x108至10x108CFU的地衣芽孢杆菌，如6x108到8.7x108、6.9x108到9x108或7.2x108到8x108 CFU的地衣芽孢杆菌/克。
在某些实施方案中，可以施用CSL组合以提供所述三种芽孢杆菌物种的不同CFU比例。例如，在一个实施方案中，CSL组合比例提供约6份至约10份凝结芽孢杆菌比1份至2份枯草芽孢杆菌，和约1份至约2份地衣芽孢杆菌。CSL组合中枯草芽孢杆菌：地衣芽孢杆菌的比例可以为2：1至1：2，并且通常为约1：1。在某些实施方案中，CSL组合每克CSL组合包含约5×109凝结芽孢杆菌，约8x108枯草芽孢杆菌和8x108地衣芽孢杆菌。
在其他实施方案中，所述芽孢杆菌组合包含枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌，基本上由其组成或由其组成。在这样的实施方案中，所述芽孢杆菌物种的相对量，以彼此相对的量计，为25％至50％的枯草芽孢杆菌，30％至65％的地衣芽孢杆菌，5％至30％的解淀粉芽孢杆菌和大于零至15％的凝结芽孢杆菌，如30％至45％的枯草芽孢杆菌，40％到60％的地衣芽孢杆菌，10％到25％的解淀粉芽孢杆菌和1％到12％的凝结芽孢杆菌。在某些实施方案中，所述芽孢杆菌组合，以彼此相对的量计，包含30％至40％的枯草芽孢杆菌，40％至50％的地衣芽孢杆菌，10％至20％的解淀粉芽孢杆菌和2％至10％凝结芽孢杆菌，基本上由其组成或由其组成。在一些实施方案中，所述芽孢杆菌组合中，地衣芽孢杆菌的量大于枯草芽孢杆菌的量。在某些实施方案中，这样的组合物可以是市售产品，例如由Phibro Animal Health Corporation以Provia PrimeTM出售的组合物。
IV.另外的组分
所述芽孢杆菌组合也可以与一种或多种另外的组分或组合物组合施用。另外的组分或组合物可以是与所述芽孢杆菌组合中的所述芽孢杆菌物种如凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌、或解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌以及任选存在的凝结芽孢杆菌一起施用给受试者，特别是动物，如禽类，包括家禽，的任何组分或组合物。某些公开的芽孢杆菌组合特别地被配制用于给家禽施用，因此可以包含与现在已知或以后开发用于家禽施用的任何其他组分或组合物组合的芽孢杆菌组合。示例性另外的组分包括载体，维生素，铜盐，饲料添加剂，另外的DFM，饲料如家禽饲料，或其组合。另外的组分将占组合总重量的1重量％至99重量％，以及所述芽孢杆菌组合将占组合总重量的99重量％至1重量％。优选地，另外的组分将占组合总重量的10重量％至90重量％，以及所述芽孢杆菌组合将占组合总重量的90重量％至10重量％。甚至更优选地，另外的组分将占组合总重量的20重量％至80重量％，以及所述芽孢杆菌组合将占组合总重量的80重量％至20重量％。所述芽孢杆菌组合可以与其他组分一起，任选地以与其他组分例如家禽饲料和/或饲料添加剂的混合物，以足以提供所需量的特定组合中各个芽孢杆菌物种的量施用。例如，对于CSL组合，施用量可以足以提供每克混合物0.5x105至2x105 CFU的凝结芽孢杆菌，每克混合物1.2x105到4x105 CFU的枯草芽孢杆菌，和/或每克混合物1.2x105到4x105 CFU的地衣芽孢杆菌。在一些实施方案中，混合物中凝结芽孢杆菌的量为每克混合物0.6×105至1.5×105CFU，或0.9×105至1.2×105CFU。独立地，混合物中枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌每种的量可以为每克混合物1.5x105至3x105或2.3x105至3x105 CFU。在某些实施方案中，CSL组合与一种或多种另外的组分(如饲料和/或饲料添加剂)一起，以足以提供每克混合物0.62×105，0.93×105或1.2×105CFU的凝结芽孢杆菌以及枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌每种独立地为1.5x105、2.3x105或3x105 CFU的量施用。包含所述芽孢杆菌组合的组合的示例性另外组分和/或组合物在下面更详细地讨论。
A.载体
在一些实施方案中，所述芽孢杆菌组合可以与载体混合和/或分散在载体中以形成分散的组合物。与没有载体的芽孢杆菌组合相比，可以选择一种或多种载体以为组合物提供非生物学益处，例如但不限于达到或改善易于流动的状态，和/或改善其储存和/或运输期间的稳定性。可以与芽孢杆菌组合联合使用的合适载体包括但不限于植物材料，例如甜菜浆，磨碎的玉米粉，玉米粉固体，植物纤维，稻壳，可溶性植物纤维，粗小麦粉，微晶纤维素；碳酸盐，例如金属碳酸盐，例如碳酸钙，碳酸钾；硫酸盐，例如金属硫酸盐，例如硫酸钾，硫酸钠；乳酸盐，包括金属乳酸盐，例如乳酸钙；氧化物，包括金属氧化物，例如氧化钙；丙酸盐，包括金属丙酸盐，例如丙酸钙；硬脂酸盐，包括金属硬脂酸盐，例如硬脂酸钙；磷酸盐，例如磷酸氢钙二水合物(dicalcium phosphate dehydrate)，磷酸一钙，三聚磷酸钠或焦磷酸四钠；矿物，例如白云石，二氧化硅，硅石，石灰石或蛭石；粘土，如膨润土，蒙脱土，高岭土；糖，例如葡萄糖，蔗糖，右旋糖，果糖或其组合；麦芽糖糊精；盐，例如氯化钠；角叉菜胶；纤维素；瓜尔胶；多元醇；硅铝酸钠；尿素；动物蛋白产品；草料产品；谷物产品；植物蛋白产品；谷物加工产品；粗制品；糖蜜产品；或其组合。在某些实施方案中，载体是碳酸钙。
动物蛋白产品可以包括但不限于血粉；动物副产品粉；酪乳，包括炼乳和干酪乳；酪蛋白；干燥水解酪蛋白；奶酪皮；蟹粉；鱼产品，包括鱼副产品，鱼肝和腺粉，鱼粉，鱼蛋白浓缩物，鱼渣粉以及干燥和/或浓缩的鱼可溶物；肉水解物；水解的毛发；水解皮粉；水解家禽副产品集料；水解家禽羽毛；皮革水解物；肉和骨粉；肉骨杂；肉粉；肉粉杂；干肉可溶物；乳白蛋白干；干饲料级乳；干燥乳蛋白；家禽副产品和/或副产品粉；家禽孵化场副产品；虾粉；脱脂乳，包括浓缩、浓缩发酵、干燥或干燥发酵的脱脂乳；乳清，包括浓缩、浓缩发酵、浓缩水解、干燥或干燥的水解乳清；浓缩和/或干燥的乳清产品；浓缩和/或干燥的乳清可溶物；或其组合。
草料产品可包括但不限于苜蓿产品，例如任选地以颗粒形式的脱水粉，碎干草或任选地以颗粒形式的晒干粉；沿海百慕大草干草；脱水玉米植株；脱水青贮饲料；亚麻植物产品；碎草；胡枝子粉和/或干粉(stem meal)；碎大豆干草；或其组合。
谷物产品可包括但不限于大麦，玉米，高粱，混合饲料燕麦，燕麦，黑小麦，小麦，糙米粉，碾碎或碾碎的稻谷糙米，破碎或切碎的大米，啤酒大米，黑麦，或其组合。谷物产品可以是任何合适的形式，例如完整，磨碎，破裂，外壳，糠，筛网破裂，剥落，粗磨，烘烤和/或热处理的。
植物蛋白产品可包括但不限于干豆；芸苔粉(canola meal)；椰子粉；棉籽，例如薄片，蛋糕，粗粉，低棉酚粉和/或整粒棉籽；瓜尔豆粉；昆布干；亚麻籽粉；花生粉；豌豆；马铃薯蛋白；干海藻粉；红花粉；大豆浓缩蛋白；大豆饲料；碎粒大豆；大豆粉，任选地粗磨；热处理大豆；研磨挤压全大豆；大豆粉；大豆粒；向日葵粉，任选地脱壳；或其组合。
加工的谷物副产物可以是抽吸的谷物馏分；干啤酒糟；粗荞麦粉(buckwheatmiddlings)；冷凝蒸馏水可溶物(condensed distillers solubles)；浓缩发酵玉米粉；玉米糠；玉米粉；玉米胚芽粉；玉米面筋饲料和/或粗粉；玉米粒；干酒糟(distillers driedgrains)，任选有可溶物；干酒糟(distillers dried solubles)，面粉，高粱胚芽粕，粗粉，粗砾和/或研磨机进料；玉米粉进料(meal hominy feed)；麦芽；燕麦片；饲喂燕麦粉；珍珠麦副产品；花生皮；米糠；大米抛光物；粗黑麦粉(rye middlings)；糊化或部分抽吸的高粱粉；麦麸，面粉，次粉，胚芽粉，脱脂胚芽粉，粗粉，磨粉和/或低级面粉；或其组合。
粗制品可包括但不限于杏仁壳；苹果果胶干浆；干苹果果渣；甘蔗渣；大麦壳；大麦磨副产品；干燥的普通甜菜浆；荞麦壳；柑橘干粉；柑橘干浆；柑橘籽粉；玉米芯级分；棉籽壳；亚麻秸秆副产品；磨碎玉米芯；车前子壳；麦芽壳；碾去皮的燕麦副产品；燕麦壳；燕麦磨副产品；花生壳；稻壳；大米磨副产品；黑麦磨粉；大豆皮，研磨机进料和/或未分级产品(mill run)；葵花壳；碎稻草；番茄干；或其组合。
糖蜜产品可是甜菜糖蜜；甜菜糖蜜干产品；甜菜干糖蜜；甘蔗糖蜜；柑橘糖蜜；糖蜜酵母浓缩可溶物；浓缩分离器副产物；浓缩糖蜜发酵可溶物；淀粉糖蜜；糖蜜蒸馏器浓缩可溶物；糖蜜蒸馏器干可溶物；或其组合。
B.铜物质
所公开的组合可以与铜物质例如提供铜离子的铜物质混合。铜物质可以是铜盐。可与所述芽孢杆菌组合结合的示例性铜物质包括但不限于氯化铜，溴化铜，碘化铜，硫酸铜，亚硫酸铜，亚硫酸氢铜，硫代硫酸铜，磷酸铜，磷酸二氢铜，磷酸氢铜，次磷酸铜，焦磷酸二氢铜，四硼酸铜，硼酸铜，碳酸铜，碳酸氢铜，偏硅酸铜，柠檬酸铜，苹果酸铜，甲硫氨酸铜，琥珀酸铜，乳酸铜，甲酸铜，乙酸铜，丁酸铜，丙酸铜，苯甲酸铜，酒石酸铜，抗坏血酸铜，葡糖酸铜或其组合，优选硫酸铜，乙酸铜，柠檬酸铜，甲硫氨酸铜或其组合。铜物质，例如铜盐，可以分开或单独提供，或者可以作为组合物的一部分提供，例如饲料或饲料添加剂。某些公开的实施方案包括凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和铜物质，基本上由其组成或由其组成。其他特定的实施方案包括解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和铜物质，基本上由其组成或由其组成。以及其他特定的实施方案，包括解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌和铜物质，基本上由其组成或由其组成。在任何实施方案中，铜物质可以是铜盐，例如可以提供铜离子的盐，例如硫酸铜。
C.维生素
示例性的维生素包括但不限于维生素A，维生素B1(硫胺素)，维生素B2(核黄素)，维生素B3(烟酸或烟酰胺)，维生素B5(泛酸)，维生素B6(吡哆醇，吡哆醛或吡哆胺或盐酸吡哆醇)，维生素B7(生物素)，维生素B9(包括叶酸)，维生素B12(各种钴胺素；维生素添加剂中通常为氰钴胺)，维生素C(抗坏血酸或其盐，如抗坏血酸钠或山梨酸钙)，维生素D(维生素D1，维生素D2，维生素D3，维生素D4，维生素D5，25-羟基维生素D3，25-二羟基维生素D3，或其组合)，维生素E，维生素K(K1和K2(即MK-4，MK-7))和生物素及其衍生物、盐和/或类似物。
D.饲料
饲料可以是适合施用于动物的任何饲料。所述芽孢杆菌组合可以与饲料组合施用，例如通过形成所述芽孢杆菌组合和饲料的混合物，或通过任何顺序依次施用所述芽孢杆菌组合和饲料。在某些公开的实施方案中，动物是家禽，并且所述芽孢杆菌组合与家禽饲料例如家禽基础饮食组合使用并可以与家禽饲料混合。饲料可包括玉米，苜蓿，豌豆，豆粕，大豆油，小麦，燕麦，高粱，大麦，黑麦，稻壳，芸苔，玉米油，石灰石，盐(例如氯化钠)，干酒糟及其可溶物(DDGS)，磷酸氢钙，倍半碳酸钠，甲硫氨酸源，赖氨酸源，L-苏氨酸，矿物油，生物素，叶酸，昆布，甲萘醌二甲嘧啶亚硫酸盐，铝硅酸钙或其任何组合。饲料还可以包含一种或多种另外的组分。另外的组分可以用于任何期望的目的，如例如作为填充剂添加的基本上生物惰性材料，或提供期望的有益效果。例如，饲料可以包括碳酸盐(包括金属碳酸盐，例如碳酸钙)；微量矿物质，例如但不限于氯化物，氟化物，碘化物，铬，铜，锌，铁，镁，锰，钼，磷，钾，钠，硫，硒或其组合；填充剂；载体；着色剂；增味剂；防腐剂；一种或多种维生素；或其组合。防腐剂可以是苯甲酸或其盐，例如苯甲酸钠；乳酸或其盐，例如乳酸钠，乳酸钾或乳酸钙；丙酸或其盐，例如丙酸钠，抗坏血酸或其盐，例如抗坏血酸钠；没食子酸或其盐，例如没食子酸钠；二氧化硫和/或亚硫酸盐；亚硝酸盐；硝酸盐；胆碱或其盐，例如胆碱的阴离子盐，例如胆碱卤化物，例如氯化物，溴化物，碘化物，氟化物或氢氧化胆碱；或其任何组合。所述一种或多种维生素可以包括维生素A；维生素B1，例如单硝酸硫胺素；维生素B2，例如核黄素5-磷酸盐；维生素B3，例如烟酸或烟酰胺；维生素B5，例如泛酸或d-泛酸钙；维生素B6，如吡哆醇或盐酸吡哆醇；维生素B12；维生素C，例如抗坏血酸，抗坏血酸钠或山梨酸钙；维生素D；维生素E；维生素K或其组合。维生素D可包括维生素D1，维生素D2，维生素D3，维生素D4，维生素D5、25-羟基维生素D3、25-二羟基维生素D3或其组合。
饲料，例如家禽饲料，还可以包括脂肪和/或油，例如牛脂，其任选地源自牛肉内脏的提炼(rendering)；猪油，任选地来自猪内脏的提炼；家禽脂肪，任选地来自家禽内脏；饲料级动物脂肪，任选地来自提炼的牛肉、猪肉和/或家禽原料的混合物；黄色油脂，任选地来自再加工的餐厅油脂和/或食用油；和/或混合的动植物脂肪，可以包括不同类型和/或数量的饭店油脂中的动物脂肪与植物油的混合物。另外地或可替代地，饲料可以包括蛋白质源，例如芸苔，鱼粉，豌豆，肉和骨粉，大豆和/或谷物副产品。
E.饲料添加剂
所述芽孢杆菌组合可以与一种或多种饲料添加剂组合使用。在一些实施方案中，将所述芽孢杆菌组合与饲料添加剂混合以形成包含所述芽孢杆菌组合和饲料添加剂的混合物或组合物。在其他实施方案中，所述芽孢杆菌组合与饲料添加剂联合施用。
1.丝兰属和/或皂树属或其提取物
另外地或可替代地，可以将公开的芽孢杆菌组合与丝兰属和/或皂树属植物材料或其提取物组合施用。丝兰属的例子包括但不限于芦荟叶丝兰(Yucca aloifolia)、狭叶丝兰(Yucca angustissima)、阿肯色州丝兰(Yucca arkansana)、长瓣丝兰(Yucca baccata)、纳瓦霍丝兰(Yucca baileyi)、短叶丝兰(Yucca brevifolia)、平原丝兰(Yuccacampestris)、楞次丝兰(Yucca capensis)、卡内罗斯巨丝兰(Yucca carnerosana)、Yuccacernua、科阿韦拉-德克萨斯州丝兰(Yucca coahuilensis)、巴克尔丝兰(Yuccaconstricta)、黑棕丝兰(Yucca decipiens)、索诺拉州丝兰(Yucca declinata)、戴氏丝兰(Yucca desmetiana)、高丝兰(Yucca elata)、安氏丝兰(Yucca endlichiana)、法克森丝兰(Yucca faxoniana)、软叶丝兰(Yucca filamentosa)、树丝兰(Yucca filifera)、软弱叶丝兰(Yucca flaccida)、Yucca gigantean、大平原丝兰(Yucca glauca)、凤尾丝兰(Yuccagloriosa)、大花丝兰(Yucca grandiflora)、哈里曼丝兰(Yucca harrimaniae)、Yuccaintermedia、哈利斯科州丝兰(Yucca jaliscensis)、热带丝兰(Yucca lacandonica)、线性锯齿叶丝兰(Yucca linearifolia)、Yucca luminosa、索乔丝兰(Yucca madrensis)、瓦哈卡-普埃布拉丝兰(Yucca mixtecana)、Yucca necopina、Yucca neomexicana、苍白叶丝兰(Yucca pallida)、Yucca periculosa、巴雷特丝兰(Yucca potosina)、克雷塔罗丝兰(Yucca queretaroensis)、圣安吉洛丝兰(Yucca reverchonii)、鸟喙丝兰(Yuccarostrata)、变叶丝兰(Yucca rupicola)、纤丝兰(Yucca schidigera)、肖特丝兰(Yuccaschottii)、Yucca sterilis、Yucca tenuistyla、汤普森丝兰(Yucca thompsoniana)、特莱氏丝兰(Yucca treculeana)、Yucca utahensis、达提里罗丝兰(Yucca valida)或其组合。在某些实施方案中，所述丝兰是或包含纤丝兰。
皂树属的实例包括但不限于Quillaja brasiliensis、Quillaja lanceolata、Quillaja lancifolia、Quillaja molinae、Quillaja petiolaris、Quillaja poeppigii、皂树(Quillaja saponaria)、Quillaja sellowiana或Quillaja smegmadermos或其组合。在某些实施方案中，皂树属是或包含皂树。
本领域普通技术人员会理解，如本文所用，植物名称可以指作为整体的植物或植物的任何部分，如根、茎或干、树皮、叶、花、花梗、种子、或其组合。这些植物部分可以使用新鲜的或干燥的，并且可以是完整的、粉碎的或捣碎的。所述植物名称还可以指来自植物的任意一个或多个部分的提取物，例如化学提取物、或者通过压制或者任何其它浓缩或提取油的方法获得的提取物、或者本领域技术人员已知的或以后发现的其它提取物。植物提取物可以包括作为皂苷、三萜类化合物、多酚、抗氧化剂或白藜芦醇、或其组合的化合物。
所述组合可以包含包含丝兰属和/或皂树属的组合物，其还可以包括适合于配制所述丝兰属和/或皂树属以施用于动物的载体和粘合剂。在某些实施方案中，所述组合物可以是市售产品，例如由Desert King International以商品名NUTRAFITO PLUS和/或由Phibro Animal Health Corporation以商品名
销售的包含纤丝兰和皂树的组合物。这样的组合物可以包含99％或更多的皂树和1％或更少的纤丝兰至75％的皂树和25％的纤丝兰，例如95％的皂树和5％的纤丝兰至80％的皂树和20％的纤丝兰，以及在某些实施方案中，85％的皂树和15％的纤丝兰，或90％的皂树和10％的纤丝兰。
在一些实施方案中，组合和/或组合物包含丝兰属、皂树属、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，基本上由其组成或由其组成，例如纤丝兰、皂树、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌。所述组合和/或组合物每吨饲料可包含100至500ppm或更多的丝兰属和皂树属，以及0.1至1磅的凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，基本上由其组成或由其组成，例如200-500ppm的丝兰属和皂树属，以及0.1-0.5磅的凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，以及在某些实施方案中为200-300ppm纤丝兰和皂树，以及0.2到0.3磅的凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌。
2.硅石，矿物粘土，葡聚糖和甘露聚糖类
另外地或替代地，芽孢杆菌组合可以与包含硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖类的饲料添加剂组合施用。所述饲料添加剂可进一步包含内源性或作为肯定添加的成分的内切葡聚糖水解酶。如本文所用，内切葡聚糖水解酶的重量％基于70,000单位/克内切葡聚糖水解酶产物。内切葡聚糖水解酶可以是β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶。
在本文公开的任何实施方案中，饲料添加剂可包含葡聚糖(例如β-1,3(4)葡聚糖)、硅石、矿物粘土和甘露聚糖类，基本上由其组成或由其组成。在一些实施方案中，饲料添加剂包含葡聚糖(例如，β-1,3(4)葡聚糖)、硅石、矿物粘土、甘露聚糖类和内切葡聚糖水解酶，基本上由其组成或由其组成。在本文公开的任何实施方案中，葡聚糖和甘露聚糖类可以至少部分地由酵母细胞壁或其提取物提供。因此，在一些实施方案中，饲料添加剂可以包含硅石、矿物粘土和酵母细胞壁或其提取物，基本上由其组成或由其组成，或者饲料添加剂可以包含硅石、矿物粘土、酵母细胞壁或其提取物和内切葡聚糖水解酶，基本上由其组成或由其组成。类似地，在某些公开的实施方案中，内切葡聚糖水解酶可以由酵母细胞壁或酵母细胞壁提取物提供。
合适的硅石源包括但不限于沙子，硅藻土和合成硅石。在一个实施方案中，可使用石英。在某些实施方案中，甘露聚糖类包括葡甘露聚糖。
饲料添加剂的组分通过本领域公知的方法制备，并且可以从商业来源获得。β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶可由长柄木霉(Trichoderma longibrachiatum)菌株的深层发酵产生。硅藻土可以以市售产品的形式获得，其中含有70％至95％的硅石(SiO2)并且其余成分未经分析，但主要是灰分(矿物)，如Association of Analytical Chemists(AOAC，2002)所定义。用于该饲料添加剂中的矿物粘土(例如铝硅酸盐)可以是多种可商购的粘土中的任何一种，包括但不限于蒙脱土、膨润土和沸石。葡聚糖、甘露聚糖类和/或内切葡聚糖水解酶可获自植物细胞壁、酵母或酵母细胞壁或其提取物(例如酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、产朊假丝酵母(Candida utilis))、某些真菌(例如蘑菇)、藻类和细菌。在某些实施方案中，可以肯定地施用酵母以内源地提供葡聚糖、甘露聚糖类和内切葡聚糖水解酶。
在一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，1-40wt％的硅石、0.5-25wt％的葡聚糖和甘露聚糖类以及40-92wt％的矿物粘土。在另一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，5-40重量％的硅石、0.5-15重量％的葡聚糖和甘露聚糖类以及40-80重量％的矿物粘土。在另一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，20-40wt％的硅石、0.5-10wt％的葡聚糖类和甘露聚糖类以及50-70wt％的矿物粘土。在另一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，15-40wt％的硅石、大于0至15wt％的葡聚糖类、大于0至10wt％的甘露聚糖类和50-81wt％的矿物粘土。在另一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，15-40wt％的硅石、0.5-5.0wt％的葡聚糖类、0.5-8.0wt％的甘露聚糖类和50-81wt％的矿物粘土。在另一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，20-30wt％的硅石、0.5-3.5wt％的葡聚糖类、0.5-6.0wt％的甘露聚糖类和60-70wt％的矿物粘土。
在一些实施方案中，β-葡聚糖类和甘露聚糖类是从酵母或酵母细胞壁或其提取物中获得的。饲料添加剂可以包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，1-40wt％的硅石、1-30wt％的酵母细胞壁或其提取物和40-92wt％的矿物粘土。在一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，10-40wt％的硅石、5-20wt％的酵母细胞壁或其提取物和40-80wt％的矿物粘土。在另一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，15-30wt％的硅石、5-15wt％的酵母细胞壁或其提取物和50-70wt％的矿物粘土。
在以上任一个实施方案中，饲料添加剂还可包含内切葡聚糖水解酶，例如β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶。相对于饲料添加剂中存在的硅石、矿物粘土、葡聚糖、甘露聚糖类和/或酵母、酵母细胞壁或酵母细胞壁提取物的量，饲料添加剂可包括0.025wt％的内切葡聚糖水解酶至5wt％的内切葡聚糖水解酶或更多，例如0.05wt％至3wt％的β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶。在一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，0.1-3wt％的β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶、20-40wt％的硅石、0.5-20wt％的葡聚糖和甘露聚糖类和50-70wt％的矿物粘土。在另一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，0.1-3wt％的β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶、20-40wt％的硅石、0.5-10wt％的葡聚糖和甘露聚糖类和50-70wt％的矿物粘土。替代地，饲料添加剂可以包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，0.1-3wt％的β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶、1-40wt％的硅石、5-30wt％的酵母细胞壁或其提取物和40-92wt％的矿物粘土。在一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，0.1-3wt％的β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶、10-40wt％的硅石、5-20wt％的酵母细胞壁或其提取物和40-80wt％的矿物粘土。在另一个实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：以相对于彼此的量计，0.1-3wt％的β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶、15-30wt％的硅石、5-15wt％的酵母细胞壁或其提取物和50-70wt％矿物粘土。
在以上任一实施方案中，硅石可以由硅藻土提供。在以上任一实施方案中，葡聚糖类可以是β-葡聚糖类。在一些实施方案中，β-葡聚糖类可获自酵母或其他材料，例如真菌、藻类、细菌等。在以上任一实施方案中，甘露聚糖类可以包含葡甘露聚糖。
葡聚糖和甘露聚糖类(或酵母或酵母细胞壁或其提取物)可以通过本领域普通技术人员已知的方法制备，并且如通过引用并入本文的专利文件进一步公开。酵母细胞壁或其提取物可以具有包含0-15％的水分和85-100％的干物质的饲料添加剂。干物质可包含10-65％的蛋白质、0-25％的脂肪、0-3％的磷、5-30％的β-葡聚糖、5-35％的甘露聚糖类和0-15％的灰分。在一个独立的实施方案中，可以使用商业来源的β-1,3(4)葡聚糖和葡甘露聚糖，其衍生自具有以下化学饲料添加剂的初级灭活酵母(酿酒酵母)：水分2-5％；蛋白质40-50％；脂肪3-8％；磷0-2％；甘露聚糖类10-16％；β-1,3-(4)葡聚糖10-20％；和灰分2-12％。
在另一个独立的实施方案中，酵母细胞壁或其提取物包含1-7％的水分和93-99％的干物质，并且该干物质可以包含蛋白质18-28％、脂肪10-17％、磷0-2％、甘露聚糖类20-30％、β-1,3-(4)葡聚糖18-28％和灰分2-5％。
在饲料添加剂的一个独立的实施方案中，硅石、葡聚糖和甘露聚糖类以及矿物粘土可以分别按重量计为1-40％、0.5-25％和40-92％组合。在饲料添加剂和/或组合的独立实施方案中，β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶、硅藻土、酵母细胞壁或其提取物和矿物粘土分别按重量计为0.05-3％、1-40％、1-20％和40-92％组合。在独立的饲料添加剂和/或组合物中，β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶、硅藻土、酵母细胞壁或其提取物和矿物粘土分别按重量计为0.1-3％、5-40％、2-15％和40-80％组合。在饲料添加剂和/或组合的另一个独立的实施方案中，β-1,3(4)-内切葡聚糖水解酶、硅藻土、酵母细胞壁或提取物和矿物粘土分别按重量计为0.1-3％、30-40％、4-15％和50-65％组合。
饲料添加剂可进一步包含一种或多种另外的组分。另外的组分可用于任何期望的目的，例如添加作为例如填充剂的基本上生物惰性的材料，或提供期望的有益效果。例如，饲料添加剂可以包括碳酸盐(包括金属碳酸盐，例如碳酸钙)；微量矿物质，例如但不限于氯化物、氟化物、碘化物、铬、铜、锌、铁、镁、锰、钼、磷、钾、钠、硫、硒或其组合；填充剂；微量示踪剂，例如涂有染料的铁颗粒；酵母；大蒜素；蒜氨酸；蒜氨酸酶；藻类；多酚或包含多酚的植物材料；载体；着色剂；增味剂；防腐剂；油；维生素；山梨酸或其盐；或其组合。酵母可以是酵母培养物、活性酵母、活酵母、死酵母、酵母提取物、活性干酵母、啤酒酿造干酵母、培养酵母、干酵母、初级干酵母、圆酵母干酵母、假丝酵母干酵母或其组合。防腐剂可以是苯甲酸或其盐，例如苯甲酸钠；乳酸或其盐，例如乳酸钠、乳酸钾或乳酸钙；丙酸或其盐，例如丙酸钠；抗坏血酸或其盐，例如抗坏血酸钠；没食子酸或其盐，例如没食子酸钠；二氧化硫和/或亚硫酸盐；亚硝酸盐；硝酸盐；胆碱或其盐，例如胆碱的阴离子盐，例如胆碱卤化物如氯化物、溴化物、碘化物、氟化物或氢氧化胆碱；或其任何组合。油可以是矿物油、玉米油、大豆油或其组合。山梨酸或其盐可以是山梨酸钾、山梨酸钠、山梨酸铵或其组合。维生素可以是维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K或其组合。
大蒜素(二烯丙基硫代硫酸酯；2-丙烯-1-亚磺基硫化酸S-2-丙烯酯(2-Propene-1-sulfinothioic acid S-2-propenyl ester))是在大蒜例如生大蒜中发现的化合物。大蒜素通常是通过大蒜素酶的作用在受损的大蒜细胞中由蒜氨酸((2R)-2-氨基-3-[(S)-丙-2-烯基亚磺酰基]丙酸)产生的。大蒜素、蒜氨酸和/或蒜氨酸酶可以如下提供：以整个蒜瓣或鳞茎；压碎、捣碎或切碎的大蒜；大蒜提取物；和/或作为合成或分离的化合物。
多酚可以由来自含多酚的植物材料的植物提取物提供。植物材料还可以包括非多酚化合物，包括多酚降解产物，例如没食子酸和反式咖啡酰基酒石酸。降解可以例如通过氧化和/或生物过程发生。多酚和非多酚化合物都可以具有生物学活性。植物提取物可以从单一植物材料或植物材料的组合制得。可以从中获得植物提取物的合适植物材料包括但不限于苹果、黑刺莓、黑樱莓(black chokeberry)、黑茶藨子、黑接骨木、乌饭树、樱桃、蔓越莓(cranberry)、葡萄、绿茶、啤酒花、洋葱、皂树属、李子、石榴、悬钩子、草莓和丝兰。
在一些实施方案中，植物提取物是从压榨的植物材料如葡萄渣、干燥的植物材料如茶或其组合制备的。果渣可在压制后立即获得或作为青贮产品即在压榨后收集并储存长达几个月的果渣获得。合适的植物具有多种多酚和/或其他非多酚化合物，包括但不限于非多酚有机酸(例如没食子酸和/或反式-咖啡酰基酒石酸)，黄烷醇，没食子酸酯，黄烷二醇，间苯三酚，焦没食子酚和邻苯二酚。在一些实施方案中，植物提取物是从黑皮诺(Pinotnoir)果渣、灰比诺(Pinot gris)果渣或绿茶制备的。
在一些实施方案中，在提取之前或期间将压榨或干燥的植物材料研磨成细粉。压榨的植物材料可以冷冻以利于研磨。可以提取多酚和其他非多酚化合物用于施用。例如，可以使用包含极性溶剂(例如水、醇、酯或其组合)的溶液从粉末中提取多酚和其他非多酚化合物。在一些实施方案中，所述溶液包含与水混溶的醇、酯或其组合，例如低级烷基醇、低级烷基酯或其组合。在一些实施方案中，所述溶液是水或包含25-99％溶剂(例如25-95％溶剂、30-80％溶剂或50-75％溶剂)和水的水溶液。在某些实施方案中，所述溶液是包含甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯或其组合的水溶液。所述溶液可以通过添加酸来酸化。所述酸可以防止或最小化提取物中生物活性多酚和其他非多酚化合物的氧化降解。所述酸可以是任何合适的酸，例如无机酸(例如盐酸)，或有机酸，例如柠檬酸或乙酸。在一些实施方案中，所述溶液包含0.01％至1％的酸，例如0.02-0.5％、0.025-0.25％或0.05-0.15％。在一些实例中，所述溶液包含0.1％的盐酸。
提取可以在0-100℃范围的温度进行。在一些实施方案中，在20-70℃范围内的温度或环境温度进行提取。提取可以持续几分钟到几天的时间。为了提高提取效率，可在提取过程中混合或搅动植物材料和溶液，例如通过在提取过程中研磨植物材料、搅拌混合物、摇动混合物或均化混合物进行。在一些实例中，提取可以用新鲜溶液重复一次或多次以提高植物材料中多酚和其他非多酚化合物的回收。然后将来自每个提取循环的液相合用于进一步处理。
可以回收液相，并且丢弃残留固体或浆液。回收液相可以包括从剩余固体中倒出液体和/或过滤液相以去除残留固体。可以通过任何合适方式例如蒸发(例如旋转蒸发)从液体溶液中除去溶剂(醇、酯或其组合)以产生在弱酸性溶液中含有生物活性成分的水提取物。
在植物材料包括大量油或脂质的某些实施方案中，可以在提取多酚和其他极性非多酚化合物之前进行非极性组分的初始提取。非极性组分可通过在非极性溶剂例如己烷、庚烷或其组合中均化植物材料来提取。将包括提取的非极性组分的溶剂层与植物材料分离并丢弃。
水性植物提取物可以通过合适方式进一步纯化，例如提取、色谱法、蒸馏等，以除去提取物中的非多酚化合物和/或相对于其他化合物增加多酚的浓度。
可以例如通过冷冻干燥或其他低温干燥方法干燥水性植物提取物，并研磨成粉末以提供干燥的植物提取物。在一些实施方案中，干燥的植物提取物包含0.01wt％至25wt％的总多酚，例如0.01wt％至10wt％、0.01wt％至5wt％、0.01wt％至2.5wt％、0.01wt％至1wt％、0.01wt％至0.5wt％、0.02至0.25wt％或0.03-0.1wt％的总多酚。在某些实施方案中，干燥的植物提取物还包含非多酚化合物。例如，干燥的植物提取物可以包含0.01-1mg/g没食子酸，例如0.05-0.5mg/g或0.09-0.25mg/g没食子酸，和/或0.001-0.1mg/g反式-咖啡酰基酒石酸，例如0.005-0.05mg/g或0.01-0.025mg/g反式咖啡酰基酒石酸。
可以例如通过蒸发将水性植物提取物浓缩至较小体积，并用作水性植物提取物。在其他实施方案中，在干燥和研磨之前，将水性植物提取物与载体混合。合适的载体包括例如硅藻土、硅石、麦芽糊精、研磨的谷物(例如玉米)、粗粉(例如大豆或棉籽粉)副产品(例如蒸馏干燥谷物、稻壳、小麦磨粉)、粘土(如膨润土)及其组合。所述植物提取物可以与载体以重量比在10：1至1：10例如5：1至1：5比例组合。例如，植物提取物可以按重量以3：1比例与硅藻土混合。
另外地或替代地，另外的组分可以包括玉米、大豆粉、小麦、小麦纤维、大麦、黑麦、稻壳、芸苔、石灰石、盐、干酒糟及其可溶物(DDGS)、磷酸二钙、倍半碳酸钠、甲硫氨酸源、赖氨酸源、L-苏氨酸、生物素、叶酸、昆布、甲萘醌二甲嘧啶亚硫酸盐、铝硅酸钙或其任何组合。
关于饲料添加剂和/或另外的组分的其他信息可以在以下PCT申请中找到：PCT申请号PCT/US2015/053439和美国申请号15/359,342、14/699,740、14/606,862和62/449,959，通过引用将其全部内容并入本文。
在一些实施方案中，饲料添加剂不包含另外的组分。在其他实施方案中，饲料添加剂包含按重量计大于零至40％或更多的另外的组分，例如按重量计0.1％至40％或按重量计0.2％至35％的另外的组分。在某些实施方案中，饲料添加剂包含按重量计0.1％至5％例如按重量计0.2％至3％的另外的组分。在其他实施方案中，饲料添加剂包含按重量计5％至20％例如按重量计10％至15％的另外的组分。并且在另外的实施方案中，饲料添加剂包含按重量计20％至40％例如按重量计30％至35％的另外的组分。
在一些实施方案中，饲料添加剂包含、基本上由以下组成或由以下组成：硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类和内切葡聚糖水解酶；硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类，内切葡聚糖水解酶，微量示踪剂和矿物油；硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类，内切葡聚糖水解酶，微量示踪剂，矿物油和维生素；硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类，内切葡聚糖水解酶，微量示踪剂，矿物油，维生素和山梨酸钾；硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类，内切葡聚糖水解酶，维生素和活性酵母；硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类，内切葡聚糖水解酶，微量示踪剂，矿物油和活性酵母；硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类，内切葡聚糖水解酶和矿物油；硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类，内切葡聚糖水解酶，维生素和碳酸钙；硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类，内切葡聚糖水解酶，微量示踪剂和小麦纤维；或硅石，矿物粘土，葡聚糖，甘露聚糖类，内切葡聚糖水解酶和微量示踪剂。在任何这些实施方案中，葡聚糖和甘露聚糖类可以由酵母、酵母细胞壁或酵母细胞壁提取物提供。
在一些实施方案中，饲料添加剂不包含过氧化物化合物。在一些实施方案中，饲料添加剂不包含过氧化氢。在一些实施方案中，饲料添加剂不包含过氧化氢脲。在一些实施例中，饲料添加剂不包含尿素。在一些实施方案中，饲料添加剂不包含过氧化氢和尿素。
在某些实施方案中，饲料添加剂是粉状添加剂。在其他实施方案中，饲料添加剂是粒状添加剂。颗粒状饲料添加剂可包含硅石，矿物粘土，葡聚糖和/或甘露聚糖类，以及任选地包含如上所述的内切葡聚糖水解酶。粒状饲料添加剂的松密度可为40lb/ft3至150lb/ft3。在一些实施方案中，粒状组合物中的每个颗粒包含硅石，矿物粘土，葡聚糖和/或甘露聚糖类，和任选地包含内切葡聚糖水解酶，其相对量与组合物中整体上每种成分的相对量基本相同。颗粒状组合物中的每个颗粒可以包含硅石、矿物粘土、葡聚糖、甘露聚糖类和内切葡聚糖水解酶，基本上由其组成或者由其组成。另外地或替代地，每个颗粒可包含硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖类以及任选地包含的内切葡聚糖水解酶的基本上均质的混合物。所述组合物可包含大于40重量％的颗粒，所述颗粒具有至少一个尺寸在0.149mm(100目，美国标准目尺寸)和4.76mm(4目)之间，并且在一些实施方案中，所述组合物包含大于90重量％的颗粒，所述颗粒具有至少一个尺寸在0.149mm(100目)和2mm(10目)之间。和/或所述组合物可包含大于0重量％至100重量％的颗粒和0重量％至不大于60重量％例如不大于10重量％的颗粒，所述颗粒具有至少一个尺寸在10目(2.00mm)至100目(0.149mm)之间，并且颗粒具有至少一个尺寸少于(即小于)100目(0.149mm)。在任何实施方案中，所述颗粒组合物包含多个颗粒，每个颗粒包含硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖类，所述颗粒具有的尺寸使得当施用于动物时，相对于不接受该组合物的动物而言，在施用后一段时间，例如在施用开始之后，可增加白介素10受体β(IL10RB)的表达一段时间。在一些实施方案中，所述时间段可以是从施用开始到28天至至少42天。和/或所述组合物可具有0％至10％的矿物变异系数，或0％至20％的近似变异系数，或两者。可以在美国申请号62/449,959中找到有关粒状饲料添加剂的其他信息，该申请全文以引用方式并入本文。
在一些实施方案中，以被认为或确定为有效实现有益结果的时间间隔每天向动物施用饲料添加剂。饲料添加剂可以每天单剂量或全天分剂量施用。每只动物每天的量可以大于零至500克，例如每只动物每天0.5克至250克、5克至200克或10克至70克。或者，饲料添加剂的饲喂或施用量为每天每千克动物体重大于零至1000mg或更多，例如每千克体重大于零至500mg。在其他实施方案中，饲料添加剂是按动物饲料的重量饲喂或施用的。饲料添加剂可以以每吨(2000磅)饲料大于零至150kg例如每吨饲料0.1kg至100kg的量饲喂或施用。替代地，饲料添加剂可以每公斤饲料大于零至20克例如大于零至10克饲料的量来饲喂或施用。
在一些实施方案中，组合物和/或组合包括第一组合物，其包含凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌，基本上由其组成或由其组成，以及第二组合物，其包含丝兰属、皂树属、硅石、矿物粘土、葡聚糖、甘露聚糖类和内切葡聚糖水解酶的一或多种，基本上由其组成或由其组成。第二组合物可以包含丝兰属和皂树属例如纤丝兰和皂树，基本上由其组成或由其组成。在其他实施方案中，第二组合物包含硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖类以及任选地包含内切葡聚糖水解酶，基本上由其组成或由其组成。
3.另外的DFM
所公开的芽孢杆菌组合可以与一种或多种另外的DFM组合施用给动物。另外的DFM可以是适合于施用于特定动物的任何DFM。在一些实施方案中，动物是家禽，特别是鸡或火鸡，并且另外的DFM是对家禽有益的DFM。举例但不限于，另外的DFM可以是另外的芽孢杆菌属物种、乳杆菌属、肠球菌属、双歧杆菌属、丙酸杆菌属、链球菌属、片球菌属、酵母或其组合。
示例性的另外的DFM包括但不限于嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)、蜂房芽孢杆菌(Bacillus alvei)、噬胺芽孢杆菌(Bacillus aminovorans)、解硫胺素芽孢杆菌(Bacillus aneurinolyticus)、炭疽杆菌(Bacillus anthracis)、Bacillus aquaemaris、萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)、嗜硼芽孢杆菌(Bacillus boroniphilus)、短芽孢杆菌(Bacillus brevis)、热溶芽孢杆菌(Bacillus caldolyticus)、中间芽孢杆菌(Bacillus centrosporus)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)、坚硬芽孢杆菌(Bacillus firmus)、黄热芽孢杆菌(Bacillus flavothermus)、梭状杆菌(Bacillus fusiformis)、Bacillus galliciensis、Bacillus globigii、Bacillus infernus、幼虫芽孢杆菌(Bacillus larvae)、侧孢芽孢杆菌(Bacilluslaterosporus)、迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)、巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)、肠系膜杆菌(Bacillus mesentericus)、胶质芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)、蕈状芽孢杆菌(Bacillus mycoides)、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)、泛养芽孢杆菌(Bacillus pantothenticus)、多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)、假炭疽杆菌(Bacillus pseudoanthracis)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、施氏芽孢杆菌(Bacillus schlegelii)、球形杆菌(Bacillus sphaericus)、耐热芽孢芽孢杆菌(Bacillussporothermodurans)、嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)、热葡糖苷酶芽孢杆菌(Bacillus thermoglucosidasius)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、Bacillus vulgatis、韦氏芽孢杆菌(Bacillus weihenstephanensis)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、鸡乳杆菌(Lactobacillus gallinarum)、乳酸乳杆菌(Lactobacillus lactis)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、假长双歧杆菌(Bifidobacterium pseudolongum)、嗜热双歧杆菌(Bifidobacterium thermophilium)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、乳酸双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、牛链球菌(Streptococcus bovis)、屎链球菌(Streptococcus faecium)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)、二乙酰乳酸肠球菌(Enterococcus diacetylactis)、酿酒酵母、鲍氏酵母菌(Saccharomyces boulardii)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、黑曲霉(Aspergillusniger)、反刍月形单胞菌(Selenomonas ruminantium)、埃氏巨球形菌(Megasphaeraelsdenii)、费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii)、谢氏丙酸杆菌(Propionibacterium shermanii)、丙酸丙酸杆菌(Propionibacteriumacidipropionici)、费氏丙酸杆菌(Propionibacterium fensenii)、布氏普雷沃氏菌(Prevotella bryantii)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、啤酒片球菌(Pediococcus cerevisiae)或其组合。在某些实施方案中，可以将短小芽孢杆菌与所述芽孢杆菌组合联合施用。
V.施用所述芽孢杆菌组合的有益结果
与单独施用所述各个芽孢杆菌物种或施用仅包含两种物种的组合相比，对动物(例如家禽)施用芽孢杆菌组合已提供了实质性的有益结果。这些有益结果是通过考虑例如饲料转化率、平均体重、平均体重增加、体重变异系数、胸肉产量、禽类死亡率、病变指数、坏死性肠炎发病率、沙门氏菌/大肠杆菌/产气荚膜梭菌(CP)发病率和/或小鸡饲养期间不同时间粪便中的卵囊来确定的。参考实施例1，可以通过比较相对于接受所述芽孢杆菌组合的家禽，饲喂基础饮食并用CP攻击的家禽的饲料转化率(FCR)来确定这些益处，所述芽孢杆菌组合例如凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的组合，或解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，任选地具有凝结芽孢杆菌。
向家禽施用公开的芽孢杆菌组合可以减少家禽中的大肠杆菌。与不施用所述组合的家禽中存在的大肠杆菌量相比，大肠杆菌的减少量可大于零至25％或更多，例如减少5％至25％或10％至22％。对于某些公开的工作实施方案，可以在不同的时间例如21和/或42天龄时确定所述减少。
向家禽施用公开的芽孢杆菌组合可以减少家禽中的需氧菌平板计数(APC)。与不施用所述组合的家禽中存在的APC量相比，APC减少可能从大于零到20％或更多，例如减少5％到20％或10％到18％。对于某些公开的工作实施方案，可以在不同的时间例如21和/或42天龄时确定所述减少。
向家禽施用公开的芽孢杆菌组合可以减少家禽中的沙门氏菌。与不施用所述组合的家禽中存在的沙门氏菌量相比，沙门氏菌减少可大于零至65％或更多例如减少25％至65％、35％至65％或45％至65％。对于某些公开的工作实施方案，可以在不同的时间例如21和/或42天龄时确定所述减少。
向家禽施用公开的芽孢杆菌组合可以减少家禽中的产气荚膜梭菌。与不施用所述组合的家禽中存在的产气荚膜梭菌的量相比，产气荚膜梭菌减少可以大于零至30％或更多，例如减少5％至30％、10％到30％或15％到30％。对于某些公开的工作实施方案，可以在不同的时间例如21和/或42天龄时确定所述减少。
向家禽施用公开的芽孢杆菌组合可以减少家禽中的粪卵囊。与不施用所述组合的家禽中存在的卵囊的量相比，卵囊减少可以从大于零到90％或更多，例如减少50％到90％或75％到90％。对于某些公开的工作实施方案，可以在不同的时间例如21和/或42天龄时确定所述减少。
向家禽施用公开的芽孢杆菌组合可以导致家禽的病变指数改善。与不施用所述组合的家禽的病变指数相比，病变指数可改善(即降低)大于零至75％或更多，例如25％至75％或30％至75％。对于某些公开的工作实施方案，可以在不同的时间例如21天和/或42天龄时确定所述改善。
向家禽施用公开的芽孢杆菌组合可以导致家禽的饲料转化率改善。与不施用所述组合的家禽的饲料转化率相比，饲料转化率可以改善(即降低)大于零到10％或更多，例如2％到8％或从4％到8％。可以在不同时间例如家禽在14、21和/或42天龄时确定所述改善。
向家禽施用公开的芽孢杆菌组合可导致家禽死亡率降低。与不施用所述组合的家禽的死亡率相比，死亡率可以降低大于零到95％或更多，例如50％到95％、75％到95％或80％到95％。可以在不同时间例如家禽在14、21和/或42天龄时确定所述改善。
将公开的芽孢杆菌组合施用给家禽可导致改善的平均体重增加。与不施用所述组合的家禽的平均体重增加相比，体重增加可以增加大于零到20％或更多，例如5％到15％、7％到15％或10％到15％。可以在不同的时间例如家禽14、21和/或42天龄时确定所述改善。
VI.实施例
提供以下实施例以说明示例性工作实施方案的某些特征。本领域普通技术人员将理解，本发明的范围不限于这些实施例的特定特征。
实施例1
该实施例涉及实地研究的结果，以比较在饲料中施用的直接饲喂微生物的各种组合用于控制肉鸡中产气荚膜梭菌引起的坏死性肠炎的功效。这项研究的目标是在施用不同菌株或组合的直接饲喂微生物后，在攻击模型中比较评估家禽性能。这项研究是使用攻击模型进行的群组试验，其中用球虫和产气荚膜梭菌对鸡进行攻击。
该研究包括56个笼子，每个笼子开始有8只小鸡。如表1所示，将处理重复进行8批，每批7个笼子。
表1
| 处理 | 球虫攻击 | 产气荚膜梭菌 | 笼/处理 | |
| T1 | 不用药 | DOT 15 | 否 | 8 |
| T2 | 不用药 | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T3 | Gallipro Max 10G,10g/t | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T4 | BC1,7.5g/t | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T5 | BC1,113.5g/t+BS1,113.5g/t | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T6 | BC1,113.5g/t+BS1,113.5g/t+BC16086,7.5g/t | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T7 | BL2+BS2 200g/t+BC2,7.5g/t | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
A.材料和方法
配制了不用药的鸡起始化合物，其包含在美国通常使用的饲料。饮食代表了当地的商业配方，计算得出的分析结果达到或超过了NRC肉鸡起始要求。实验处理饲料是由这种基础起始饲料制备的。混合处理饲料以确保各个测试品的均匀分布。冲洗混合器以防止交叉污染。饲料在相同处理的笼子中分配。在研究过程中要喂食这种饲料(以糊状形式)。
孵化日的雄性肉鸡小鸡得自佐治亚州克利夫兰的Cobb-Vantress。品种为Cobb500。记录种鸡群信息。在孵化场，对鸡进行性别鉴定并接受常规疫苗接种。在研究中仅使用外表健康的小鸡。
B.程序
该研究始于鸡孵化(孵化日)(DOT 0)，此时将它们分配到实验笼中。在研究过程中不更换鸡。将所有鸡分别在DOT 0、15、22和28称重。随意喂食和喂水。在DOT 0天称量饲料，在DOT 15、22和28天称量剩余饲料。
在DOT 15天，所有鸡均口服约5,000巨型艾美尔球虫(E.maxima)卵囊。从DOT 20开始，除处理1以外的所有鸡都接受约108CFU/ml的产气荚膜梭菌的肉汤培养物。每天一次给鸡施用新鲜的肉汤培养物，持续3天(在DOT 20、21和22天)。在DOT 22天，从每个笼子中选出三只鸡，处死，称重，并检查坏死性肠炎病变存在的程度。评分基于0到3分，其中0为正常，3为最严重。
每天两次检查笼子。观察包括饲料和水的供应，温度控制以及任何异常情况。仔细观察鸡是否有异常反应。从笼子中取出死亡的鸡后，会记录笼子号、日期、鸡的体重、性别和可能的死亡原因。计算出笼增重、饲料消耗、饲料转化率、病变指数和死亡率的平均值。
C.结果
预期该研究表明，与不施用任何芽孢杆菌DFMS的鸡相比，并且与仅施用一种或两种所述芽孢杆菌物种而不是施用CSL组合的鸡相比，施用CSL组合可以改善饲料转化率和/或增加体重增加。
此外，结果将证明，与接受攻击但未施用CSL组合的鸡(例如未施用芽孢杆菌DFM和仅施用一种或两种芽孢杆菌物种的鸡)相比，在用产气荚膜梭菌攻击时，施用了CVSL组合的鸡具有降低的死亡率。
实施例2
进行了实地研究以比较在饲料中施用的直接饲喂微生物的各种组合用于控制肉鸡中产气荚膜梭菌引起的坏死性肠炎的功效。这项研究的目标是在施用直接饲喂微生物的不同菌株或组合后，在攻击模型中比较评估家禽性能。这项研究是使用攻击模型进行的群组试验，其中鸡用球虫和产气荚膜梭菌进行攻击。
该研究包括56个笼子，每个笼子开始有8只小鸡。如表2所示，将处理重复进行8批，每批7个笼子。
表2
| 处理 | 球虫攻击 | 产气荚膜梭菌 | 笼/处理 | |
| T1 | 不用药 | DOT 14 | 否 | 8 |
| T2 | 不用药 | DOT 14 | DOT 19,20和21 | 8 |
| T3 | BC1,7.5g/t | DOT 14 | DOT 19,20和21 | 8 |
| T4 | BC2,46.875g/t | DOT 14 | DOT 19,20和21 | 8 |
| T5 | BC2,7.5g/t | DOT 14 | DOT 19,20和21 | 8 |
| T6 | BC1,113.5g/t BL1+BS1,113.5g/t | DOT 14 | DOT 19,20和21 | 8 |
| T7 | BL2+BS2(200g/t | DOT 14 | DOT 19,20和21 | 8 |
A.材料和方法
配制了不用药的鸡起始化合物，其包含在美国通常使用的饲料。饮食代表了当地的商业配方，计算得出的分析结果达到或超过了NRC肉鸡起始要求。实验处理饲料是由这种基础起始饲料制备的。混合处理饲料以确保各个测试品的均匀分布。冲洗混合器以防止交叉污染。在研究过程中喂食这种饲料(以糊状形式)。
孵化日的雄性肉鸡小鸡得自佐治亚州克利夫兰的Cobb-Vantress。品种为Cobb500。记录种鸡群信息。在孵化场，对鸡进行性别鉴定并接受常规疫苗接种。在研究中仅使用外表健康的小鸡。
B.程序
该研究始于鸡孵化(孵化日)(DOT 0)，此时将它们分配到实验笼中。在研究过程中不更换鸡。将所有鸡分别在DOT 0、14、21和28天称重。在DOT 0天称量饲料，在DOT 14、21和28天称量剩余饲料。随意喂食和喂水。
在DOT 14天，所有鸡均口服约5,000巨型艾美尔球虫卵囊。从DOT 19开始，除处理1以外的所有鸡都接受约108CFU/ml的产气荚膜梭菌的肉汤培养物。每天一次给鸡施用新鲜肉汤培养物，持续3天(在DOT 19，20和21天)。
在DOT 21天，从每个笼子选出三只鸡，处死，称重，并检查坏死性肠炎病变存在的程度。评分基于0到3分，其中0为正常，3为最严重。
每天两次检查笼子。观察饲料和水的供应，温度控制以及任何异常情况。仔细观察鸡的任何异常反应。从笼子中取出死亡的鸡后，会记录笼子编号，日期，鸡的体重，性别和可能的死亡原因。计算出笼增重、饲料消耗、饲料转化率、病变指数和死亡率的平均值。
C.结果
预期该研究表明，与不施用任何芽孢杆菌DFMS的鸡相比，并且与仅施用一种或两种所述芽孢杆菌物种而不是CSL组合的鸡相比，施用CSL组合可以改良饲料转化率和/或增加体重增重。
此外，结果将证明，与接受攻击但未施用CSL组合的鸡(例如未施用芽孢杆菌DFM和仅施用一种或两种芽孢杆菌物种的鸡)相比，在用产气荚膜梭菌攻击时，施用CVSL组合的鸡具有降低的死亡率。
实施例3
饲养总共4,992只刚孵化(一日龄，或试验第0天)的鸡，以开始试验喂养期。如表3所示喂养小鸡。
表3
| 配给量编号 | 试验材料(添加剂)<sup>1,2</sup> |
| PHIBRO4-1 | 对照1(干净)-基础饲料+无挑战 |
| PHIBRO4-2 | 对照2(估计)-基础饲料+CP挑战 |
| PHIBRO4-3 | Provia 6086+CP攻击 |
| PHIBRO4-4 | Osprey BL+BS+CP攻击 |
| PHIBRO4-5 | Osprey BL+BS+Provia 6086(推荐水平)+CP攻击 |
| PHIBRO4-6 | Osprey BL+BS+Provia 6086(半数推荐水平)+CP攻击 |
| PHIBRO4-7 | 对照1(干净)+Osprey BL+BS+Provia 6086(推荐水平)+无攻击 |
| PHIBRO4-8 | Calsporin+CP攻击 |
1将每种处理饲喂52个混合性别肉鸡的12个重复。
2首先混合基础饲料(在整个处理过程中有足够的饲料)，然后添加每种测试材料并重新混合。
4推荐水平：
Provia 6086(全剂量)：每吨完整饲料7.5克。产品每克包含150亿CFU凝结芽孢杆菌，最终饲料中每克约有1.2x105CFU。
Osprey BL(全剂量)：每吨完整饲料0.25磅。产品每克包含2.4x109 CFU枯草芽孢杆菌，最终饲料中每克约含3x105 CFU。
Osprey BS(全剂量)：每吨完整饲料025磅。产品每克包含2.4x109 CFU地衣芽孢杆菌，最终饲料中每克约含3x105 CFU。
CALSPORIN(N/C)：9.07克每吨饲料。
该研究的结果总结在图1中。
实施例4
该实施例涉及现场研究。该研究的方案如表4所示。
表4
1将每种处理饲喂52个混合性别肉鸡的12个重复。
2首先混合基础饲料(在整个处理过程中有足够的饲料)，然后添加每种测试材料并重新混合。
3推荐水平：
Provia 6086：每吨完整饲料7.5克。产品每克包含150亿CFU凝结芽孢杆菌，最终饲料中每克约有1.2x105CFU。
Osprey BL(全剂量)：每吨完整饲料0.25磅。产品每克包含2.4x109 CFU直接饲喂微生物，最终饲料中每克约含3x105 CFU。
Osprey BS(全剂量)：每吨完整饲料0.25磅。产品每克包含2.4x109 CFU直接饲喂微生物，最终饲料中每克约含3x105 CFU。
CALSPORIN(N/C)：9.07克每吨饲料。
产品Y1-1和Y2-2：对于处理10和11的每一个，施用182克每吨饲料。
该研究的结果在图2和3中提供。参考图2和3，“显著性(P<0.05)”表示没有共同上标的行中的平均值存在由最小显著差异确定的显著差异(P<0.05)。
实施例5
该实施例涉及现场研究的结果，以比较饲料中施用的直接饲喂微生物的各种组合控制肉鸡中产气荚膜梭菌引起的坏死性肠炎的功效，以及直接饲喂微生物对鸡的饲料转化率和体重增加的效果。这项研究的目标是在施用不同菌株或组合的直接饲喂微生物后，在攻击模型中比较评估家禽性能。这项研究是使用攻击模型进行的群组试验，其中用球虫和产气荚膜梭菌对鸡进行攻击。
该研究由56个笼子组成，每个笼子有8只小鸡。如表5所示，将处理重复进行8批，每批7个笼子。
表5
| 处理 | 球虫攻击 | 产气荚膜梭菌 | 笼/处理 | |
| T1 | 不用药 | DOT 15 | 否 | 8 |
| T2 | 不用药 | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T3 | BA | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T4 | BSBL | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T5 | 50％:50％BA:BSBL | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T6 | 25％:75％BA:BSBL | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
| T7 | 75％:25％BA:BSBL | DOT 15 | DOT 20,21和22 | 8 |
BSBL：枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的1:1混合物。
BA：解淀粉芽孢杆菌
A.材料和方法
配制了不用药的鸡起始化合物，其包含在美国通常使用的饲料。饮食代表了当地商业配方，计算得出的分析结果达到或超过了NRC肉鸡起始要求。实验处理饲料是由这种基础起始饲料制备的。混合处理饲料以确保各个测试品的均匀分布。冲洗混合器以防止交叉污染。饲料在相同处理的笼子中分配。在研究过程中要喂食这种饲料(以糊状形式)。
孵化日的雄性肉鸡小鸡得自佐治亚州克利夫兰的Cobb-Vantress。品种为Cobb500。记录种鸡群信息。在孵化场，对鸡进行性别鉴定并接受常规疫苗接种。在研究中仅使用外表健康的小鸡。
B.程序
该研究始于鸡孵化(孵化日)(DOT 0)，此时将它们分配到实验笼中。在研究过程中不更换鸡。将所有鸡分别在DOT 0、15、22和28天称重。随意喂食和喂水。在DOT0天称量饲料，在DOT 15、22和28天称量剩余饲料。
在DOT 15天，所有鸡均口服约5,000巨型艾美尔球虫卵囊。从DOT 20开始，除处理1以外的所有鸡都接受约108CFU/ml的产气荚膜梭菌的肉汤培养物。每天一次给鸡施用新鲜肉汤培养物，持续3天(在DOT 20，21和22天)。在DOT 22天，从每个笼子选出三只鸡，处死，称重，并检查坏死性肠炎病变存在的程度。评分基于0到3分，其中0为正常，3为最严重。
每天两次检查笼子。观察饲料和水的供应、温度控制以及任何异常情况。仔细观察鸡的任何异常反应。从笼子中取出死亡的鸡后，会记录笼子编号，日期，鸡的体重，性别和可能的死亡原因。计算出笼增重、饲料消耗、饲料转化、病变指数和死亡率的平均值。
C.结果
预期该研究表明，与不施用任何芽孢杆菌DFMS的鸡相比，并且与仅施用一种或两种所述芽孢杆菌物种而不是所述三种芽孢杆菌的组合鸡相比，施用解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢芽孢杆菌组合可以改良饲料转化率和/或增加体重增重。
此外，结果将证明，与接受攻击但未施用所述解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢芽孢杆菌组合的鸡(例如未施用芽孢杆菌DFM和仅施用一种或两种芽孢杆菌物种的鸡)相比，在用产气荚膜梭菌攻击时，施用所述组合的鸡具有降低的死亡率。
实施例6
研究概述
进行这项研究是为了确定
单独(以0和250ppm喂养)或与枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌(以Provia PrimeTM施用)以及其他DFM测试材料联合使用对从孵化到42日龄的肉鸡生活性能(live performance)的剂量滴定安全性和功效。Provia PrimeTM以每吨0.25磅水平进料。特别是，仅对Provia PrimeTM进行了测试，以确定是否可以满足最大遗传潜能或者是否同时饲喂
(两种水平)和Provia PrimeTM以及其他单株候选株(短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌)是有益的。
测试期从试验第0天(小鸡孵化日)开始，到第42天结束。给鸡饲喂商业型粉状饲料。将小鸡随机分配到15个测试组之一，这是对于每次重复的52个混性别肉鸡11个重复组(T1-T5)或4个重复组(T6-T15)，总计4,940只动物。在试验第0天(孵化日)将小鸡随机分配进行处理，在试验期间不替换小鸡。每天观察小鸡异常生长模式或健康问题的迹象。在试验第0、14、21、35和42天测量体重和食物消耗。
目标，简介和研究概述：
1、当肉鸡在地面围栏从孵化饲养到42日龄时，当肉鸡受到正常生活表现压力时，主要目的是确定在典型的球虫-梭菌攻击模型压力点下，各种来源的禽类相关产品测试来源对生活表现和加工因子的影响。球虫-梭菌攻击模型包括梭菌细菌和球虫攻击，并在该试验范围内被施用于所有鸡。将测试材料彼此进行比较，并与阴性对照(NC)进行比较，后者没有测试材料施用，但包括所述攻击。
2、主要目标包括比较不同组合的家禽相关产品测试来源，使用美国鸡肉行业中通常饲喂的水平，并确定对肉鸡市售重量、死亡率和饲料转化、生活表现和其他测试参数的影响。
3、通过施用梭菌和球虫卵囊以及来自高死亡率农场的堆积垃圾中的其他天然细菌，对本试验中所有鸡进行应激攻击。
4、对肠细菌计数，包括产气荚膜梭菌、大肠杆菌和APC(需氧菌平板计数)，并以Log10计数测量。
5、特别针对该试验，在统计上合理的鸡数量(每笼52只鸡21天龄时2M和2F以及每笼52只鸡42天龄时每次重复的5M和5F)上测试沙门氏菌属发病率，以模拟USDA/FSIS处理要求的计数。
6、在42天体重和生活表现测量之后，测试了干产率(％)和部分产率(％)。
7、另一个目的是确定是否枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的组合(以Provia PrimeTM施用)以及其他芽孢杆菌产品，除了单独饲喂
以外，为ROI(投资回报)提供了额外的好处。
测试***
在本研究中使用的商业模拟测试压力模型使用了以正常家禽业起始饮食(0-21天龄)、生长饮食(22-35天龄)和肥育饮食(36-42天龄)以地面空间要求(每只鸡至少0.85英尺2)饲养的肉鸡种鸡，在具有高架铁丝网地面的围栏中饲养。口粮配方(表6)通过计算机生成的线性回归程序进行，该程序模拟在实际家禽生产技术中使用的配方。如表7所示，从孵化第0天(孵化日)到直至42日龄，自由饲喂肉鸡并连续给其实验饮食。处理T1-T15被喂食给11个重复(T1-T5)和4个重复(T6-T15)的52个混性别肉鸡。首先混合基础饮食(在整个处理过程中有足够饲料)，然后添加每种测试材料并重新混合。每种处理方法每克最终饲料提供最少提供5x105 CFU。施用梭菌和球虫卵囊以及来自高死亡率农场的堆积垃圾中的其他天然细菌，使所有鸡承受压力。
表6饲料配方参数：
| 营养 | 起始饮食，0-21天 | 生长饮食，22-35天 | 肥育饮食，36-42天 |
| 代谢能(kcal/kg) | 3,025 | 3,150 | 3,201 |
| 代谢能(kcal/#) | 1,372 | 1,429 | 1,452 |
| 蛋白(％) | 22 | 20 | 19 |
| 赖氨酸(％) | 1.28 | 1.15 | 1.02 |
| 甲硫氨酸(％)最少 | 0.512 | 0.46 | 0.408 |
| 甲硫氨酸+半胱氨酸(％) | 0.947 | 0.851 | 0.755 |
| 精氨酸(％)最少 | 1.36 | 1.22 | 1.08 |
| 苏氨酸(％)最少 | 0.858 | 0.771 | 0.68 |
| 色氨酸(％)最少 | 0.19 | 0.17 | 0.15 |
| 总磷(％)最少 | 0.70 | 0.65 | 0.60 |
| 有效磷(％) | 0.5 | 0.45 | 0.42 |
| 总钙(％) | 1.05 | 0.9 | 0.85 |
| 膳食钠(％) | 0.20 | 0.20 | 0.20 |
| 膳食胆碱(％) | 1.35 | 1.15 | 0.95 |
表7实验饮食
基于孵化日个体重量将肉鸡随机化，并且将其放入每个具有高架铁丝网地面的围栏里。每个围栏的每个生长围栏区域都具有足够的地面、进料器和水空间，以人道地对待直至42日龄的鸡。生长42天后，对肉鸡称重，确定饲料消耗，确定病变指数并计算饲料转化(饲料消耗/体重)。
材料和方法
测试材料说明
Provia PrimeTM(枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的组合)和
(包含10％至20％的纤丝兰(Yucca schidigera)和80％至90％的皂树的组合物)均以预混合料“粉末形式”提供。按照本报告实验部分的规定，从0-42天试验开始，以不同水平连续喂食这些食物。
一个目的是比较不同测试材料(包括
和Provia PrimeTM和其他芽孢杆菌物种或其组合)与阴性对照(不提供其他测试材料且用压力攻击)当肉鸡遭受亚临床攻击时(施用时，经细菌和球菌攻击的堆积垃圾和中等压力条件)对肉鸡生活表现和病变指数的影响。目的是确定Provia PrimeTM是否提供饲喂
(250ppm)或单独的各个芽孢杆菌物种以外的投资回报率(ROI)的额外收益。
细菌攻击的描述(“测试压力模型”)
在“球虫-梭菌攻击模型”中，将鸡在含有产气荚膜梭菌和其他病原性细菌的堆积垃圾源上生长。鸡群之间的布局时间<11天。根据以前试验，这些生物有望出现在本研究中。每只围栏最少要覆盖500万个卵囊(或每只鸡100,000-150,000个)+无菌水，并且不要混入垃圾中。球虫卵囊主要为大肠埃希菌(E.acervulina)和巨型艾美尔球虫(E.maxima)。每个围栏都“用专门设计来带起垃圾的塑料靴套走过”，每天最少3次，目的是将垃圾在围栏之间传播并均衡攻击。
实验设计
在试验第0天(与孵化日相同)从商业孵化场获得了总共5,500只混合性别的肉鸡小鸡(足够数量以确保至少4,940只健康的混合性别小鸡可供进行研究)。将它们立即在温度受控条件下运输到研究围栏单元，以确保鸡舒适度。到达研究机构后，立即将肉鸡随机分组。每个围栏有52只健康/活泼的混合性别的肉鸡，每个测试组有11个重复(处理1-5)或4个重复(处理6-15)。从孵化日(在本研究中称为试验第0天)到42日龄的各个组，自由喂养肉鸡。
肉鸡描述
在收到肉鸡后，对可能影响研究结果的疾病或其他并发症的迹象进行评估。检查后，对肉鸡称重。使用随机区组设计将肉鸡分配给每只围栏和处理组。喂食前，通过比较各个测试组和参考组的平均值与对照组的标准偏差，评估各处理组的体重分布。对照组和测试组或参考组之间的差异在一个标准差之内，因此，本研究认为处理组之间的体重分布是可以接受的。
在凌晨(孵化日或第0天)收集肉鸡(孵化至1日龄，称为第0天)并在孵化后12小时内将其随机分配给每只实验围栏。弱小的鸡被人道处死。在研究过程中没有更换鸡。
居住和每日观察
肉用混合性别鸡栏的每个实验测试单元被放置在分开的围栏中，该围栏位于带有强制通风加热器的房间中，该加热器带有跨室通风***，由操作管理人员精确控制。将肉鸡放在5英尺x10英尺的围栏面积和空间中，每只鸡最少要有0.85英尺2的空间(没有饲喂器和饮水器空间)。每个围栏至少有两个***式饮水器(通过井水)提供水。
在最初0-7天的生长期，每个围栏使用两雏槽式喂食器，然后在剩余生长期使用较大的槽式喂食器。
在整个研究过程中，连续(24小时)使用白炽灯(LED照明***，在喂食器/饮水器周围采用>10fc吸吸力将鸡吸引至喂食器/饮水器)。在第一周使用了大于10fc(仅在饮水器/喂食器附近)和剩余地板空间大于2fc的完全照明，然后在接下来的两周内调暗至<4fc。
每天至少观察三次鸡的总体健康、行为和/或毒性证据以及环境条件。每天在围栏房检查温度3次。随意提供饮用水和饲料。
在整个喂养期间未施用任何类型的药物(处理组测试材料除外)。记录死亡率，冷藏，并在8小时内对所有发现死亡或垂死的肉鸡进行尸检(内部和外部体块)。
数据和观察
在生长期的第0天和第42天收集了生活表现体重和饲料摄入量。计算0-42日龄的体重增加、采食量、饲料：增重比(饲料效率)。在21和42天龄收集病变指数。在典型方差ANOVA分析模型中，采用处理x重复RCB(Randomized Complete Block)，统计学评估对照组和测试组饲喂的肉鸡之间的差异，P<0.05。对照组是不添加测试材料的NC对照。
在研究结束时，通过农场堆肥技术根据当地法规处置了尸检肉鸡的所有尸体和研究结束时剩余的所有鸡。
饮食准备
使用受过家禽饲料配方训练的合格营养师所用的配方，配制满足典型商业肉鸡饮食最低营养要求的饮食。实际饲料配方如上表6所示。
将
和Provia PrimeTM饲料原料按“原样”添加到每个定量口粮中，首先将少量饲料与基础饲料混合，然后添加剩余的测试材料以完成混合配方。通过调整玉米粉和大豆粉成分以及家禽生产中常用的其他次要成分的浓度，可以满足饮食蛋白、赖氨酸、甲硫氨酸、甲硫氨酸+半胱氨酸、精氨酸、苏氨酸、色氨酸、总磷、有效磷、总钙、饮食钠和饮食胆碱。在准备饮食之前，用玉米粉冲洗混合设备。使用桨式混合机准备所有饮食。在每次饮食之间，使用压缩空气和真空清洁混合机；在每个处理组之间用玉米粉冲洗混合设备，并保留冲洗材料以处理。
饮食和水施用
以三个饲料阶段饲喂饮食：起始饮食(0-21日龄)，生长饮食(22-35日龄)和肥育饮食(36-42日龄)。随意提供所有饮食。随意提供淡水(来自研究设施深井)。
表8执行的测试标准
结果与讨论
在试验第0天(或孵化日)将小鸡随机分配到处理中。在42日龄时，确定了生活表现(生长增重，死亡率和饲料转化)和其他标准。同样在42日龄时，测量病变指数，并采集肠粪便样品以进行进一步实验室分析。在43-46日龄时，测量加工数据。
图4-23提供了研究的数据。关于日常观察，对每个围栏严密监控，每天最少三次，以确定总体健康状况，鸡行为和/或毒性证据以及环境条件。每天在本研究采用的生长区域内检查温度(每次监测高温和低温)三次。观察到的温度范围为86-91°F(试验第0-7天)，84-88°F(8-14天)，83-85°F(15-21天)，78-83°F(22-28天)，73-77°F(第29-35天)和70-74°F(第36-42天)。
在本研究中，在整个生长期至42日龄期间，特别是对于由细菌压力引起的(针对性的)轻度至中度疾病攻击模型，对于NC(被攻击，未添加测试材料)定量口粮的死亡率通过策略将其视为受细菌堆积垃圾中等攻击的平均至中等，并且位于家禽业死亡率标准的上象限(NC阴性对照>6％，美国平均死亡率<5％)。当鸡在堆积垃圾层积铺垫地板上生长时，正常家禽业死亡率典型通常<5％，而高疾病攻击模型为<9％。这些数据表明，轻度至中度疾病攻击模型发挥了预期作用。
所有来源的
和/或与Provia PrimeTM以及其他DFM来源的组合被发现有较低的死亡率(即较低死亡率)的显著改善(P>0.05)。根据所有
(按250ppm进食)、Provia PrimeTM和其他DFM来源的死亡率的改善，这些数据表明该产品特别对于家禽的安全性和可能的存活率改善。此外，与未添加测试材料但具有压力攻击的对照相比，使用含
(按250ppm喂养)、Provia PrimeTM和其他DFM的处理，在体重、饲料转化和体重增加(0-42天龄)方面观察到各种显著差异(P>0.05)，影响了生活表现和死亡率。
在第42日龄，使用至多250ppm的
以及其他DFM并与饲料添加剂水平的
组合，体重(图4-23)显著增加(P>0.05)，0-42天饲料转化显著降低(P>0.05)。但是，当Provia PrimeTM与
以250ppm组合时，两种产品的组合相比于单独喂饲
在统计学上看来(P<0.05)可以最大化生活表现。在该试验的大多数生活表现情况中，以及所有年龄的鸡，使用250ppm
与NC对照相比，以及饲喂
和DFM测试材料的组合与肉鸡的阴性对照组(没有
或Provia PrimeTM)相比，都有统计学改善(P<0.05)。其他单芽孢杆菌DFM表现出相似的趋势，但显著性不及Provia PrimeTM。
在第21和42日龄时，通过log10计算肠细菌水平(包括肠大肠杆菌，APC或有氧菌平板计数，产气荚膜梭菌菌落)并确定沙门氏菌发病率(群体的％)。在第21和42日龄时，Provia PrimeTM与以250ppm喂食的
在统计学上(P<0.05)看来最大化生活表现以及肠道细菌(产气荚膜梭菌，大肠杆菌，APC，沙门氏菌水平)降低水平。此外，胸肉(温屠体重量，冷藏重量，和活重百分比进行比较)显示出相似的统计趋势。肠大肠杆菌、产气荚膜梭菌和沙门氏菌发病率随着
水平增加以及在这些
水平添加ProviaPrimeTM而显著(P<0.05)降低。
和Provia PrimeTM两种测试材料的组合，在250ppm
以及在组合中添加了1X水平的ProviaPrimeTM时，在统计学上(P<0.05)降低了大肠杆菌和沙门氏菌发病率。
与生活表现数据(即体重和饲料转化)相似，使用250ppm
(带有或不带有Provia PrimeTM)时，第21天和第42天(图10和11)的肠道病变指数显著改善(P>0.05)。
与生活表现数据相似，
和Provia PrimeTM与两种促进改进剂结合使用时，干产率(％)和胸肉产率(冷藏和活重的百分比)统计学增加(P<0.05)，对于每个标准约大于4％。添加
和Provia PrimeTM的一种或两种导致与加工部分产率(％)相关的较不显著的变化。其他单个芽孢杆菌DFM表现出相似的趋势，但显著性不及Provia PrimeTM。
可以使用欧洲生产效率因子(EPEF)来标准化技术结果，例如每天增加的体重，成活率和饲料转化。EPEF计算如下：
EPEF＝(平均获得的克数/天×存活率％)/(饲料转化率×10)。
在统计学上发现250ppm
和Provia PrimeTM的结合使用可提高(P<0.05)(或改善)EPEF，尽管分别落后于250ppm
和Provia PrimeTM单独处理，两者在统计学上似乎相似(P<0.05)。在两种
添加量均为250ppm的情况下，Provia PrimeTM进一步改善了活体重、饲料转化率和死亡率这3个指标的遗传潜力，计算EPEF，提供最佳性能组合。
通过使用线性回归，使用每个测试参数和年龄组的生长和饲料转化图(图16-23)来确定潜在的最有效水平。通常，基于这些回归分析曲线和图形数据得出以下结论：
1、将鸡饲养到21日龄时，组合使用250ppm
和1X Provia PrimeTM可达到最大平均体重。发现饲喂至少250ppm
和Provia PrimeTM以及组合每吨0.25磅的Provia PrimeTM是最有效的饲料：增重值。
2、引人注意的是，当鸡饲养到42日龄时，与单独饲喂250ppm
单独饲喂Provia PrimeTM或NC对照相比，组合使用250ppm
加Provia PrimeTM(0.25磅/吨)统计学上可以获得最大平均体重。但是，
(250ppm
水平)或ProviaPrimeTM(0.25磅/吨)水平数据均显著好于(P<0.05)NC对照。换句话说，发现组合饲喂250ppm
和Provia PrimeTM时获得最有效的体重和饲料：增重值，其次是单独饲喂250ppm
然后是单独饲喂Provia PrimeTM。
3、对于整个试验期间的死亡率百分比，在研究中通过使用250ppm
组合喂食的大多数DFM(包括：Provia PrimeTM4-way DFM组合，短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌或地衣形芽孢杆菌)实现统计学上(P<0.05)类似的平均死亡率改善。
4、对于250ppm
水平和Provia PrimeTM水平数据，22-35日龄时的体重增加和饲料效率值甚至比NC对照显著更低，但相对而言类似于PC对照。
5、当鸡饲养到22-35或36-42日龄时，与单独使用250ppm
或组合其他DFM单菌株剂量相比，使用Provia PrimeTM和250ppm
的组合可以达到较高的平均市售体重。
6、与22-35和36-42日龄结果相似，通过饲喂Provia PrimeTM组合250ppm
实现了统计学(P<0.05)改善的体重变异系数(或CV％)值。
7、所有测试饲料品中的肠细菌含量大肠杆菌和APC(需氧菌平板计数)在统计学上相似(P<0.05)；但是，所有处理均优于阴性对照。
8、使用
和Provia PrimeTM的组合显著降低(P<0.05)肠产气荚膜梭菌和沙门氏菌发病率。两种测试材料的组合在250ppm
时，在统计学上(P<0.05)降低了产气荚膜梭菌和沙门氏菌发病率，并且通过组合添加每吨0.25磅的Provia PrimeTM而更显著降低。
9、当同时添加
和Provia PrimeTM时，干产率(％)和胸肉产率(冷藏重量和活重的％)统计学上增加(P<0.05)，这两种的组合增加了加工价值的改善。
结论
与不饲喂ABF饲料添加剂或阴性对照相比，单独使用
(以250ppm进食)或组合Provia PrimeTM(以每吨0.25磅水平进食)可以在所有饲料添加剂添加水平和组合下，(以各种效率)改善体重、饲料转化率、死亡率、干产量、胸肉产量和肠细菌水平。定义基本使用水平的真正测试是定义ROI(投资回报率)并确定喂养产品组合的“成本效益”。看来，在肉鸡整个生命周期中，直到42日龄和市售年龄，饲喂所有产品的组合(与仅仅饲喂到21或35日龄相比)似乎可以改善生活表现和其他关键指标数据。
Provia PrimeTM以及所有其他DFM单菌株产品，似乎在帮助
统计学上改善(P<0.05)最大生活表现、病变指数和加工特性(尤其是胸肉产量)方面发挥作用。将250ppm
水平与Provia PrimeTM组合使用时，可以看到最明显的显著改善效果(体重，饲料转化率，死亡率，胸肉产量和病变指数，P<0.05)，其中，相对阴性对照定量口粮(感染且无其他测试材料)相比，单独饲喂任何一种产品，以及在大多数情况下包括阳性或PC对照定量口粮(未感染且无其他测试材料)，具有概率为5％的显著性。单菌株DFM也有作用，特别是与
组合时。
引人注意的是，不管是否使用DFM，
似乎独立地改善生长速度和饲料效率，直至市售年龄。
和Provia PrimeTM似乎都是有益于肉鸡生活表现和加工特性的饲料成分，最终实现了最大遗传潜力，因为与PC对照组或NC对照组相比，这可能与成本效益有关。Provia PrimeTM似乎是实现这一极高标准营销目标的重要组分，并且比单菌株芽孢杆菌来源(包括：短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌)具有优势。
VII.示例性实施方案
以下编号的陈述示出了所公开技术的示例性实施方案。
陈述1、一种芽孢杆菌组合，基本上由选自凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的三种或四种芽孢杆菌物种组成。
陈述2、一种组合物，基本上由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌组成。
陈述3、陈述2的组合物，由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌组成。
陈述4、一种组合物，基本上由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成。
陈述5、一种组合物，由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成。
陈述6、一种组合物，基本上由凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成。
陈述7、陈述6的组合物，由凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成。
陈述8、一种混合组合物，包括：
芽孢杆菌组合；和
另外的组分。
陈述9、陈述8的混合组合物，其中所述另外的组分包含铜盐。
陈述10、陈述9的组合物，其中所述铜盐是氯化铜、溴化铜、碘化铜、硫酸铜、亚硫酸铜、亚硫酸氢铜、硫代硫酸铜、磷酸铜、磷酸二氢铜、磷酸氢铜、次磷酸铜、焦磷酸二氢铜、四硼酸铜、硼酸铜、碳酸铜、碳酸氢铜、偏硅酸铜、柠檬酸铜、苹果酸铜、甲硫氨酸铜、琥珀酸铜、乳酸铜、甲酸铜、乙酸铜、丁酸铜、丙酸铜、苯甲酸铜、酒石酸铜、抗坏血酸铜、葡萄糖酸铜或其组合。
陈述11、陈述8的混合组合物，其中所述另外的组分包含维生素。
陈述12、陈述5-6任一项的混合组合物，其中所述组合物还包含维生素。
陈述13、陈述11-12任一项的组合物，其中维生素是维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K或其组合。
陈述14、陈述8的混合组合物，其中所述另外的组分包含另外的直接饲喂微生物，或者陈述9-13的组合物，其中所述组合物还包含另外的直接饲喂微生物。
陈述15、陈述8-14任一项的混合组合物，其中所述芽孢杆菌组合基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成。
陈述16、陈述8-14任一项的混合组合物，其中所述芽孢杆菌组合基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成。
陈述17、一种施用于家禽的组合物，包括：
芽孢杆菌组合；和
家禽饲料。
陈述18、陈述17的组合物，其中所述芽孢杆菌组合基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成。
陈述19、陈述17的组合物，其中所述芽孢杆菌组合基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成。
陈述20、陈述17-19的组合物，其中家禽饲料包含植物材料、碳酸盐、硫酸盐、乳酸盐、氧化物、丙酸盐、硬脂酸盐、磷酸盐、矿物质、铜物质(copper species)、糖、盐、动物蛋白产品、草料产品、谷物产品、植物蛋白产品、加工谷物产品、粗粮产品、糖蜜产品或其组合。
陈述21、陈述17-20任一项的组合物，其中所述家禽饲料包含甜菜浆、磨碎的玉米、玉米糖浆固体、植物纤维、稻壳、可溶性植物纤维、粗小麦粉、微晶纤维素、碳酸钙、碳酸钾、硫酸钾、硫酸钠、乳酸钙、氧化钙、丙酸钙、硬脂酸钙、磷酸氢钙二水合物、磷酸二氢钙、三聚磷酸钠、焦磷酸四钠、白云石、二氧化硅、硅石、石灰石、蛭石、膨润土、蒙脱石、高岭土、葡萄糖、蔗糖、右旋糖、果糖、麦芽糖糊精、氯化钠、角叉菜胶、纤维素、瓜尔胶、多元醇、铝硅酸钠、尿素、生物素、叶酸、倍半碳酸钠、甲硫氨酸源、赖氨酸源、L-苏氨酸或其组合。
陈述22、陈述17-21任一项的组合物，其中所述家禽饲料包含硫酸铜。
陈述23、陈述17-22任一项的组合物，其中所述组合物每克饲料包含12×105至4x105CFU枯草芽孢杆菌。
陈述24、陈述17-23任一项的组合物，其中所述组合物每克饲料包含12×105至4x105CFU地衣芽孢杆菌。
陈述25、一种混合组合物，包含：
第一组合物，基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成；以及
第二组合物，包含饲料、丝兰属、皂树属、丝兰属和皂树属、硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖混合物或者它们的组合的一或多种。
陈述26、一种组合物，包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌以及如下的一或多种：(a)丝兰属、皂树属或丝兰属和皂树属，(b)硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖类，或者(c)它们的组合。
陈述27、配制为施用于家禽的组合物，包含：
解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌；以及
饲料添加剂。
陈述28、一种包装，包含：
组合物，基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成；或者
三种单独的包装部分，每个分别对应于解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。
陈述29、一种方法，包括向受试者施用芽孢杆菌组合。
陈述30、陈述29的方法，其中受试者是家畜。
陈述31、陈述24的方法，其中所述芽孢杆菌组合作为混合物施用，所述混合物包含基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌和包含至少一种另外的组分组成的组合物。
陈述32、一种方法，包括向家禽施用包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的组合物。
陈述33、陈述32的方法，其中所述组合物基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成。
陈述34、陈述32的方法，其中所述组合物是陈述1-27任一项的组合物。
陈述35、一种方法，包括：
提供解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，以及
形成包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌和饲料、饲料添加剂、直接饲喂微生物、载体或其组合的第一组合物。
陈述36、陈述35的方法，其中所述饲料添加剂包括：
丝兰属；
皂树属；
丝兰属和皂树属；
硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖类；或者
它们的组合。
陈述37、由陈述35-36中任一项的方法制备的组合物。
陈述38、一种降低鸟类死亡率、病变指数、沙门氏菌/大肠杆菌/产气荚膜梭菌(CP)发病率和/或粪便物中卵囊的方法，包括给家禽施用有效量的包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的组合物。
陈述39、陈述38的方法，其中所述组合物基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成。
陈述40、一种用于施用于家禽的组合物，包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。
陈述41、陈述40的组合物，用于降低鸟类死亡率、病变指数、沙门氏菌/大肠杆菌/产气荚膜梭菌(CP)发病率和/或粪便物中的卵囊。
陈述42、陈述40-41任一项的组合物，用于增加胸肉产量。
考虑到可以应用所公开的发明的原理的许多可能的实施方案，应当认识到，示出的实施方案仅是本发明的优选实例，而不应被认为是对本发明范围的限制。相反，本发明的范围由所附权利要求书限定。因此，我们要求保护所有落入这些权利要求的范围和精神内的发明。
Claims (58)
1.一种芽孢杆菌组合，基本上由选自凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的三种或四种芽孢杆菌物种组成。
2.权利要求1的芽孢杆菌组合，其中所述芽孢杆菌组合是基本上由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成的组合物。
3.权利要求2的芽孢杆菌组合，其中所述组合物由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成。
4.权利要求1-3中任一项的芽孢杆菌组合，其中所述芽孢杆菌组合中芽孢杆菌物种相对于彼此的相对量为25％至50％的枯草芽孢杆菌、30％至65％的地衣芽孢杆菌、5％至30％的解淀粉芽孢杆菌以及大于0至15％的凝结芽孢杆菌。
5.权利要求1的芽孢杆菌组合，其中所述芽孢杆菌组合是基本上由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌组成的组合物。
6.权利要求5的芽孢杆菌组合，其中所述组合物由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌组成。
7.权利要求1的芽孢杆菌组合，其中所述芽孢杆菌组合是基本上由凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成的组合物。
8.权利要求7的芽孢杆菌组合，其中所述组合物由凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成。
9.权利要求1-8中任一项的芽孢杆菌组合，其中所述芽孢杆菌组合中的一种或多种芽孢杆菌物种是脱水的。
10.权利要求9的芽孢杆菌组合，其中所述芽孢杆菌组合中的所有芽孢杆菌物种都是脱水的。
11.权利要求9或权利要求10的芽孢杆菌组合，其中所述芽孢杆菌物种是冷冻干燥的。
12.权利要求1的芽孢杆菌组合，其基本上由30％至45％的枯草芽孢杆菌、40％至60％的地衣芽孢杆菌、10％至25％的解淀粉芽孢杆菌和1％至12％凝结芽孢杆菌组成。
13.权利要求12的芽孢杆菌组合，其中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的每一种都是冷冻干燥的。
14.权利要求1-2、4-5、7或9-13中任一项的芽孢杆菌组合，其还包含载体。
15.权利要求14的芽孢杆菌组合，其中所述载体是金属碳酸盐。
16.一种组合和/或组合物，其包含：
根据权利要求1-15中任一项的芽孢杆菌组合；和
另外的组分。
17.权利要求16的组合和/或组合物，其中所述另外的组分包含丝兰属、皂树属、硅石、矿物粘土、葡聚糖、甘露聚糖类、内切葡聚糖水解酶、铜盐、维生素中的一种或多种。
18.权利要求17的组合和/或组合物，其中所述另外的组分包含纤丝兰(Yuccaschidigera)、皂树(Quillaja saponaria)或其组合。
19.权利要求17或18的组合和/或组合物，其中所述另外的组分包含硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖类。
20.权利要求19的组合和/或组合物，其中所述另外的组分还包含内切葡聚糖水解酶。
21.权利要求16-20中任一项的组合和/或组合物，其中所述另外的组分包含铜盐。
22.权利要求21的组合和/或组合物，其中所述铜盐是氯化铜、溴化铜、碘化铜、硫酸铜、亚硫酸铜、亚硫酸氢铜、硫代硫酸铜、磷酸铜、磷酸二氢铜、磷酸氢铜、次磷酸铜、焦磷酸二氢铜、四硼酸铜、硼酸铜、碳酸铜、碳酸氢铜、偏硅酸铜、柠檬酸铜、苹果酸铜、甲硫氨酸铜、琥珀酸铜、乳酸铜、甲酸铜、乙酸铜、丁酸铜、丙酸铜、苯甲酸铜、酒石酸铜、抗坏血酸铜、葡萄糖酸铜或其组合。
23.权利要求16-22中任一项的组合和/或组合物，其中所述另外的组分包含维生素。
24.权利要求23的组合和/或组合物，其中所述维生素是维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K或其组合。
25.权利要求16-24中任一项的组合和/或组合物，其中所述组合和/或组合物包含第一组合物和第二组合物，所述第一组合物是根据权利要求1-6中任一项的芽孢杆菌组合，所述第二组合物包含另外的组分。
26.权利要求25的组合和/或组合物，其中所述第二组合物包含纤丝兰和皂树。
27.权利要求25或权利要求26的组合和/或组合物，其中所述第二组合物包含硅石、矿物粘土、葡聚糖、甘露聚糖类，和任选地，包含内切葡聚糖水解酶。
28.权利要求25-27中任一项的组合和/或组合物，其中所述第二组合物包含直接饲喂微生物。
29.权利要求16-28中任一项的组合和/或组合物，其中所述芽孢杆菌组合基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成。
30.权利要求29的组合和/或组合物，其中所述组合和/或组合物中解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌的量以相对于彼此的量计为25％至50％的枯草芽孢杆菌、30％至65％的地衣芽孢杆菌、5％至30％的解淀粉芽孢杆菌以及大于0至15％的凝结芽孢杆菌。
31.一种施用于家禽的组合物，包括：
根据权利要求1-15中任一项的芽孢杆菌组合；和
家禽饲料。
32.权利要求31的组合物，其中所述芽孢杆菌组合基本上由解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成。
33.权利要求32的组合物，其中以相对于彼此的量计，所述芽孢杆菌组合基本上由25％至50％的枯草芽孢杆菌、30％至65％的地衣芽孢杆菌、5％至30％的解淀粉芽孢杆菌和大于0至15％的凝结芽孢杆菌组成。
34.权利要求31-33的组合物，其中所述家禽饲料包含植物材料、碳酸盐、硫酸盐、乳酸盐、氧化物、丙酸盐、硬脂酸盐、磷酸盐、矿物质、铜物质、糖、盐、动物蛋白产品、草料产品、谷物产品、植物蛋白产品、加工谷物产品、粗粮产品、糖蜜产品或其组合。
35.权利要求31-34中任一项的组合物，其中所述家禽饲料包含甜菜浆、磨碎的玉米、玉米糖浆固体、植物纤维、稻壳、可溶性植物纤维、粗小麦粉、微晶纤维素、碳酸钙、碳酸钾、硫酸钾、硫酸钠、乳酸钙、氧化钙、丙酸钙、硬脂酸钙、磷酸氢钙二水合物(dehydrate)、磷酸二氢钙、三聚磷酸钠、焦磷酸四钠、白云石、二氧化硅、硅石、石灰石、蛭石、膨润土、蒙脱石、高岭土、葡萄糖、蔗糖、右旋糖、果糖、麦芽糖糊精、氯化钠、角叉菜胶、纤维素、瓜尔胶、多元醇、铝硅酸钠、尿素、生物素、叶酸、倍半碳酸钠、甲硫氨酸源、赖氨酸源、L-苏氨酸或其组合。
36.权利要求31-35中任一项的组合物，其中所述家禽饲料包含硫酸铜。
37.权利要求31-36中任一项的组合物，其中所述组合物包含每克饲料12×105至4x105CFU枯草芽孢杆菌。
38.权利要求31-37中任一项的组合物，其中所述组合物包含每克饲料12×105至4x105CFU地衣芽孢杆菌。
39.权利要求31-38中任一项的组合物，其中所述组合物包含每吨饲料0.1磅至1磅的所述芽孢杆菌组合。
40.权利要求31-39中任一项的组合物，其中所述组合物包含每吨饲料0.1磅至0.5磅的所述芽孢杆菌组合。
41.权利要求31-40中任一项的组合物，其中所述组合物还包含丝兰属和/或皂树属。
42.权利要求31-41中任一项的组合物，其中所述组合物包含纤丝兰和皂树。
43.权利要求31-42中任一项的组合物，其中所述组合物包含每吨饲料100ppm至500ppm的包含纤丝兰和皂树的组合物。
44.一种方法，包括向受试者施用根据权利要求1-15中任一项的芽孢杆菌组合。
45.权利要求44的方法，其中受试者是家畜。
46.权利要求44的方法，其中所述受试者是家禽。
47.权利要求44-46中任一项的方法，其中所述芽孢杆菌组合作为组合物施用，所述组合物包含基本上由解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成的第一组合物和包含至少一种另外的组分的第二组合物。
48.权利要求39的方法，其中所述组合物是根据权利要求25-28中任一项的组合物。
49.一种方法，包括：
提供解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，以及
形成包含解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌以及饲料、饲料添加剂、直接饲喂的微生物、载体或其组合的第一组合物。
50.权利要求49的方法，其中所述饲料添加剂包含：
丝兰属；
皂树属；
丝兰属和皂树属；
硅石、矿物粘土、葡聚糖和甘露聚糖类；或者
它们的组合。
51.由权利要求49-50中任一项的方法制备的组合物。
52.用于给家禽施用的用途的组合物，所述组合物包含解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。
53.权利要求52的用于所述用途的组合物，其中所述组合物的施用降低了鸟类死亡率、病变指数、沙门氏菌(Salmonella)/大肠杆菌(E.Coli)/产气荚膜梭菌(Clostridiumperfingens)(CP)发病率和/或粪便物中的卵囊。
54.权利要求52或权利要求53的用于所述用途的组合物，其中所述组合物的施用增加胸肉产量、增加体重增加、改善饲料转化比或其组合。
55.权利要求52-54中任一项的用于所述用途的组合物，其中所述组合物包含解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，而不包含其他直接饲喂微生物或芽孢杆菌物种。
56.权利要求52-55中任一项的用于所述用途的组合物，其中以相对于彼此的量计，所述组合物包含25％至50％的枯草芽孢杆菌、30％至65％的地衣芽孢杆菌、5％至30％的解淀粉芽孢杆菌和大于0至15％的凝结芽孢杆菌。
57.一种降低鸟类死亡率、病变指数、沙门氏菌/大肠杆菌/产气荚膜梭菌(CP)发病率和/或粪便物中的卵囊的方法，包括给家禽施用有效量的包含解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的组合物。
58.权利要求57的方法，其中所述组合物基本上由解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌组成。
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