CN112021454A - 一种耐高温型粪肠球菌及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种耐高温型粪肠球菌及其制备方法，配方按以下重量组分组成：椰油基蔗糖酯活性剂100‑400份，山茶油酯90‑200份，低聚木糖60‑160份，地衣芽孢杆菌50‑150份、粪肠菌80‑120、酵母菌40‑180份；本发明在全价饲料加工过程直接混入，与饲料组分直接高温加工后，保留了大量的活菌，在有效储存期内下降幅度很小，耐胃酸、胆盐等不良化学环境，在进入动物肠道后，在胰脂肪酸酶等作用下溶解后可快速复苏扩增，在肠道定值，大大增强动物的抗病免疫能力。

Description

一种耐高温型粪肠球菌及其制备方法

技术领域

本发明涉及水产养殖技术领域，尤其涉及到一种耐高温型粪肠球菌及其制备方法。

背景技术

针对渔业产业迅速发展与扩张，水产养殖病害日益严重的问题，渔药在我国水产动物养殖与疾病控制上起着不可替代的作用。然而目前渔药大多是仿制兽药、人药和农药等，存在科学性不足、针对性不强、药效不高、对环境影响大等问题，直接影响到水产病害的有效防控、水产养殖产品质量和安全。由于养殖集约化和规模的无序扩张，近海养殖环境的恶化，养殖水平低等因素，造成鱼类疾病的频发，其主要病原病毒、弧菌、嗜水气单胞菌、小瓜虫、车轮虫等，加之监管的困难，导致药物的滥用和过量使用，诱导了病原菌及害虫产生坚强的耐药性，导致疾病难以得到有效控制，破坏养殖环境危及养殖生态，药物残留日益加剧，直接影响到食品安全和人类健康

目前国内外主要采用包被技术解决益生菌在应用过程中存在的上述问题。微胶囊技术作为饲料加工的新方法在欧美已十分普遍，如Ross Crittenden 用蛋白质—碳水化合物—油脂胶片包被婴儿双歧杆菌，显著提高了其在贮存中对温度、湿度和氧气的稳定性，在模拟胃液中能保持完整性，而在模拟肠液中又能迅速溶解。Lyer用海藻酸盐—壳聚糖—淀粉包被干酪肠杆菌，发现微胶囊包被可以抑制胃中不利环境，而在猪肠液中起作用。黄文等利用喷雾干燥法制造微胶囊包被饲用微生物添加剂，发现其提高了微生物活菌制剂对制粒高温加热处理的抵抗能力。目前，国外已有此类产品进人到我国的市场，如瑞士的粪链球菌微胶囊“赐美健”、荷兰的“百福菌”等，但是价格很高，难以大规模使用。此外，利用微包囊技术制备的微生态制剂来生产金鲳鱼等海水鱼配合饲料，以此配合料进行金鲳鱼养殖的应用研究则鲜有报道。

发明内容

本发明针对现有技术的缺陷和实际生产的需求，提供一种耐高温型粪肠球菌及其制备方法，从源头上寻求和开发绿色高效的微生态制剂等生态药物，摆脱目前药物治疗效果不理想、对环境影响大的困境，无疑会对名优鱼类疾病的有效控制、环境保护和食品安全起到推动作用，维护水产品声誉和保障名优鱼类养殖的可持续发展具有重大的现实意义和广阔的应用前景。

为实现上述目的，提供一种耐高温型粪肠球菌，配方按以下重量组分组成：

椰油基蔗糖酯活性剂100-400份，山茶油酯90-200份，低聚木糖60-160 份，地衣芽孢杆菌50-150份、粪肠菌80-120、酵母菌40-180份。

进一步的，配方按以下重量组分组成：

椰油基蔗糖酯活性剂200-300份，山茶油酯120-160份，低聚木糖 90-140份，地衣芽孢杆菌70-130份、粪肠菌95-110、酵母菌80-140份。

进一步的，配方按以下重量组分组成：

椰油基蔗糖酯活性剂230-280份，山茶油酯135-155份，低聚木糖 100-110份，地衣芽孢杆菌90-110份、粪肠菌100-110、酵母菌100-120份。

进一步的，地衣芽孢杆菌1000-3000亿/克，粪肠菌200-800亿/克，酵母菌100-400亿/克。

进一步的，地衣芽孢杆菌1500-2500亿/克，粪肠菌400-700亿/克，酵母菌200-310亿/克。

一种耐高温型粪肠球菌制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、采用反复渐变式升温对所选菌种进行筛选、复壮、改良，得到抗高温型较好的益生菌群；

(2)将椰油基蔗糖酯活性剂，山茶油酯和低聚木糖加入加热桶，以 15-30rpm的速度匀速搅拌并加热升温至50-60℃，使物料融化成液态，稳定0.5-1小时后向桶中地衣芽孢杆菌、粪肠菌和酵母菌的菌粉，同时以 15-30rpm速度搅拌，保持40-50℃温度搅拌5-10分钟使其充分混匀，得到用于制备微生物复合产品的前期包膜剂

(3)、将两种饲料生产可用脂类表面活性剂与特定生物代谢物基质材料混合加热60℃使其融化成稳定液态，再加入含有一定活菌数的单一或复合菌粉, 保持50℃温度搅拌混匀，得到用于制备微生物产品的前期含菌包膜剂；

(4)将载体淀粉与糊精原料经充分筛分混匀，高温烘干至规定含水量，进入包膜滚筒；

(5)将前期含菌包膜剂按一定速率喷洒进包膜滚筒内，使其与载体充分接触。最终获得含目标微生物的低水分包膜生物成品。

一种耐高温型粪肠球菌制备方法在海水鱼配合饲料中应用。

本发明的有益效果如下：

1、在全价饲料加工过程直接混入，与饲料组分直接高温加工后，保留了大量的活菌，在有效储存期内下降幅度很小，耐胃酸、胆盐等不良化学环境，在进入动物肠道后，在胰脂肪酸酶等作用下溶解后可快速复苏扩增，在肠道定值，大大增强动物的抗病免疫能力。

2、提高抗胃酸与胃酶降解，能促进肠道蠕动，增强肠道排便功能，改善便秘与水生动物拖便浅便现象；而当有致病菌侵入时，能维持肠道菌群平衡，抑制致病菌生长，避免致病菌产生的毒素对肠道粘膜的刺激，从而防止腹泻，以及水生动物空肠与肠道糜烂现象，并可将增值部分的益生菌代谢到水环境促进环境净化与平衡修复

3、经大量实践完全可替代抗生素，效果显著，是绿色养殖的最新优选。

4、克服了目前概念型发酵饲料和生物料的诸多问题，在增重促长、抗病免疫等方面效果卓越，能大幅降低养殖成本。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

椰油基蔗糖酯活性剂100份，山茶油酯90份，低聚木糖60份，地衣芽孢杆菌50份、粪肠菌80、酵母菌40份。

地衣芽孢杆菌1000亿/克，粪肠菌200亿/克，酵母菌100亿/克。

制作步骤为：

(1)、采用反复渐变式升温对所选菌种进行筛选、复壮、改良，得到抗高温型较好的益生菌群，采用渐温式及诱变育种选育的方法对所选菌株反复进行升温复壮，得到耐高温型较好的粪肠球菌，为金鲳鱼等海水鱼配合饲料中添加微生态制剂提供菌种保障；

(2)将椰油基蔗糖酯活性剂，山茶油酯和低聚木糖加入加热桶，以 15rpm的速度匀速搅拌并加热升温至50℃，使物料融化成液态，稳定0.5小时后向桶中地衣芽孢杆菌、粪肠菌和酵母菌的菌粉，同时以15rpm速度搅拌，保持40℃温度搅拌5分钟使其充分混匀，得到用于制备微生物复合产品的前期包膜剂

(3)、将两种饲料生产可用脂类表面活性剂与特定生物代谢物基质材料混合加热60℃使其融化成稳定液态，再加入含有一定活菌数的单一或复合菌粉, 保持50℃温度搅拌混匀，得到用于制备微生物产品的前期含菌包膜剂；

(4)将载体淀粉与糊精原料经充分筛分混匀，高温烘干至规定含水量，进入包膜滚筒；

(5)将前期含菌包膜剂按一定速率喷洒进包膜滚筒内，使其与载体充分接触。最终获得含目标微生物的低水分包膜生物成品。

一种耐高温型粪肠球菌制备方法在海水鱼配合饲料中应用。

实施例2

椰油基蔗糖酯活性剂260份，山茶油酯160份，低聚木糖110份，地衣芽孢杆菌115份、粪肠菌110、酵母菌105份。

地衣芽孢杆菌2100亿/克，粪肠菌450亿/克，酵母菌110亿/克。

制备步骤：

(1)、采用反复渐变式升温对所选菌种进行筛选、复壮、改良，得到抗高温型较好的益生菌群，采用渐温式及诱变育种选育的方法对所选菌株反复进行升温复壮，得到耐高温型较好的粪肠球菌，为金鲳鱼等海水鱼配合饲料中添加微生态制剂提供菌种保障；

(2)将椰油基蔗糖酯活性剂，山茶油酯和低聚木糖加入加热桶，以25rpm 的速度匀速搅拌并加热升温至55℃，使物料融化成液态，稳定0.8小时后向桶中地衣芽孢杆菌、粪肠菌和酵母菌的菌粉，同时以25rpm速度搅拌，保持 45℃温度搅拌8分钟使其充分混匀，得到用于制备微生物复合产品的前期包膜剂利用离子对交联生物活性包被技术对菌体进行包埋，与特定比例的生物代谢物基质材料混合处理，得到包被菌体，使菌体钝化休眠，从而进一步提高粪肠球菌的耐高温能力；

(3)、将两种饲料生产可用脂类表面活性剂与特定生物代谢物基质材料混合加热60℃使其融化成稳定液态，再加入含有一定活菌数的单一或复合菌粉, 保持50℃温度搅拌混匀，得到用于制备微生物产品的前期含菌包膜剂；

(4)将载体淀粉与糊精原料经充分筛分混匀，高温烘干至规定含水量，进入包膜滚筒；

(5)将前期含菌包膜剂按一定速率喷洒进包膜滚筒内，使其与载体充分接触。最终获得含目标微生物的低水分包膜生物成品，打开包膜设备中底部包膜剂出口处与管路相连的自吸泵，以约100公斤/小时的速度将已混匀的含菌包膜剂喷洒进直径1.5米，长度为8米的包膜滚筒中，滚筒转速控制在8转/分钟。与此同时，将淀粉与糊精原料经充分筛分混匀，高温烘干至规定含水量，滚筒混合后经提升机提升进入包膜滚筒与含菌包膜剂充分接触。由包膜滚筒出口端收集已包膜细粉，经输送带送至包装机包装，获得含目标复合微生物的低水分包膜生物成品。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (6)

1.一种耐高温型粪肠球菌，其特征在于，配方按以下重量组分组成：

椰油基蔗糖酯活性剂100-400份，山茶油酯90-200份，低聚木糖60-160份，地衣芽孢杆菌50-150份、粪肠菌80-120、酵母菌40-180份。

2.根据权利要求1所述的一种耐高温型粪肠球菌，其特征在于，配方按以下重量组分组成：

椰油基蔗糖酯活性剂200-300份，山茶油酯120-160份，低聚木糖90-140份，地衣芽孢杆菌70-130份、粪肠菌95-110、酵母菌80-140份。

3.根据权利要求1所述的一种耐高温型粪肠球菌，其特征在于，，配方按以下重量组分组成：

椰油基蔗糖酯活性剂230-280份，山茶油酯135-155份，低聚木糖100-110份，地衣芽孢杆菌90-110份、粪肠菌100-110、酵母菌100-120份。

4.根据权利要求1所述的一种耐高温型粪肠球菌，其特征在于，地衣芽孢杆菌1000-3000亿/克，粪肠菌200-800亿/克，酵母菌100-400亿/克。

5.根据权利要求4所述的一种耐高温型粪肠球菌，其特征在于，地衣芽孢杆菌1500-2500亿/克，粪肠菌400-700亿/克，酵母菌200-310亿/克。

6.根据权利要求1-5中任意一项所述的一种耐高温型粪肠球菌制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、采用反复渐变式升温对所选菌种进行筛选、复壮、改良，得到抗高温型较好的益生菌群；

(2)将椰油基蔗糖酯活性剂，山茶油酯和低聚木糖加入加热桶，以15-30rpm的速度匀速搅拌并加热升温至50-60℃，使物料融化成液态，稳定0.5-1小时后向桶中地衣芽孢杆菌、粪肠菌和酵母菌的菌粉，同时以15-30rpm速度搅拌，保持40-50℃温度搅拌5-10分钟使其充分混匀，得到用于制备微生物复合产品的前期包膜剂

(3)、将两种饲料生产可用脂类表面活性剂与特定生物代谢物基质材料混合加热60℃使其融化成稳定液态，再加入含有一定活菌数的单一或复合菌粉,保持50℃温度搅拌混匀，得到用于制备微生物产品的前期含菌包膜剂；

(4)将载体淀粉与糊精原料经充分筛分混匀，高温烘干至规定含水量，进入包膜滚筒；

(5)将前期含菌包膜剂按一定速率喷洒进包膜滚筒内，使其与载体充分接触。最终获得含目标微生物的低水分包膜生物成品。