CN111939118A - 一种gsh浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的药质体及制备方法 - Google Patents

一种gsh浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的药质体及制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种GSH浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的药质体及制备方法。所提供的药质体具有较好的GSH响应性，能响应细胞内谷胱甘肽浓度刺激，通过Michael消去反应，实现药物的智能释放。该药质体适用于制成经皮给药***，用于甲状腺功能亢进治疗。

Description

一种GSH浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的药质体及制备 方法
技术领域
本发明涉及甲硫咪唑药质体，特别是涉及一种GSH浓度响应性甲硫咪唑药质体及其制备方法。
背景技术
甲硫咪唑(Methimazole,MMI)为咪唑类抗甲状腺药物，其作用机制是抑制甲状腺内过氧化物酶，阻碍吸聚到甲状腺内碘化物的氧化及酪氨酸的偶联，进而阻碍甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)的合成。MMI不影响碘的吸收以及已合成激素的释放，研究表明，MMI口服吸收后在甲状腺内聚集，只有进入甲状腺才能发挥抑制甲状腺素合成的治疗效果，作用强弱取决于甲状腺内的局部药物浓度。由于MMI具有较强的亲水性，难以穿过甲状腺泡膜,致使其口服用药在甲状腺内聚集浓度不高，降低了药物的治疗效果，而单纯的增加剂量又会导致严重的副作用。甲硫咪唑常见的不良反应(ADR)有药物性肝损害、过敏反应、嗅觉***损害、造血***损害；罕见的ADR包括肾病综合征与支气管哮喘、诱发白血病和药物性再生障碍性贫血，救治不及时可致严重后果。且甲亢保守治疗的疗程为6个月～2年，同时目前上市剂型主要为口服片剂和胶囊剂。由于甲硫咪唑生物半衰期短，药物口服剂量大，服用次数频繁，可能导致严重后果，目前已有甲硫咪唑致急性肝衰竭死亡的报道。因此，有必要开发新的给药***，例如经皮给药***，可以增加甲状腺病灶部位的药物浓度，达到降低药物的不良反应，增加长期用药的顺应性，为患者提供更优的用药选择。
采用经皮给药***，虽然能改变药物的用药途径，提高药物的靶向性；但经皮给药要求药物具备较好穿越生物质膜屏障的能力。由于MMI是一个亲水性很强的药物，因此有必要采用药质体(pharmacosomes)原理对其进行疏水改性，构成两亲性药质体，提高其渗透性。药质体是一类在体外无活性或活性较小，在体内经酶或非酶作用，释放出活性物质而产生药理作用的化合物。药质体设计必须考虑一个关键因素是与药物化学连接的载体应当在体内生物相容性好、无毒或低毒。脂肪醇(甲醇除外)具有毒性低，与羧酸形成的酯具有良好的疏水性，成为我们药质体设计的首选。
药质体设计必须考虑的另外一个关键因素是释药开关在药质体到达靶部位后要能快速打开释放出原药。在我们先前的研究中发现，含有巯基的巯嘌呤能通过迈克尔加成反应形成药质体。这种药质体在胞外介质中由于谷胱甘肽(GSH)浓度低(2-20μM)几乎不释放原药；而一旦进入细胞却能响应胞内谷胱甘肽(GSH)浓度(0.5mM-10mM)刺激通过迈克尔消去反应实现原药释放。考虑到MMI结构中含有一个巯基，我们先选择丙炔酸(PA)与MMI进行迈克尔加成反应，制得3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸，然后与疏水性的脂肪醇进行酯化反应制得两亲性GSH刺激响应的2-疏基-1-甲基咪唑药质体。该药质体能通过经皮给药作用于甲状腺位点，并响应胞内GSH刺激释放MMI，可达到降低药物毒副作用的目的。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：为了解决现有技术中存在的问题，本发明拟通过迈克尔加成反应将甲硫咪唑与丙炔酸发生加成反应，随后通过酯化作用与疏水化合物二～六十醇连接构建一个胞内GSH刺激响应的两亲性药质体；该药质体可以制成经皮给药***，用于甲状腺病变部位的经皮给药。由于疏水改性和病变部位的经皮靶向施药，药物在病变部位的渗透性增强，在甲状腺内聚集浓度提高，继而其疗效增强，降低了毒副作用。该响应性甲硫咪唑药质体可用于甲状腺病的治疗。
本发明解决上述技术问题所采用的方案是：
一种GSH浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的甲硫咪唑药质体，其具有如下通式所示结构：
Figure BDA0002652913050000021
其中R为C2-30的烷基，药质体的分子量为212～1024。
优选地，所述R为C12的烷基。
本发明的另一目的是提供一种GSH浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的甲硫咪唑药质体的制备方法，包括如下步骤：
(1)甲硫咪唑丙烯酸的制备
将甲硫咪唑加入甲醇中，再加入甲醇钠，搅拌至甲硫咪唑完全溶解，加入丙炔酸，其中，甲硫咪唑与丙炔酸的摩尔比为(0.1～10)：1，甲醇与甲醇钠的摩尔比为(1～100)：1；将所得混合液在10℃～100℃、氮气保护条件下回流反应1h～200h；反应结束后，用旋转蒸发仪将反应液在1～80℃下旋蒸10-120min，得浓稠白色液体；将所得浓稠白色液体冻干10-120小时后得白色片状固体甲硫咪唑丙烯酸；
(2)甲硫咪唑丙烯酸二～三十酯的制备
按照甲硫咪唑丙烯酸：EDC：NSH＝1：(0.7～6)：(0.6～15)的摩尔比活化羧基稳定中间体，得到甲硫咪唑丙烯酸溶液；将所得甲硫咪唑丙烯酸溶液按照甲硫咪唑丙烯酸：二～三十醇＝(0.1～100)：1的摩尔比投料，在10℃～100℃下反应1～200h；反应结束后，将反应溶液放入1～100℃超纯水超声洗涤1-120min，在转速为1000-10000r/min的条件下离心1-30min，取上清液再溶于1～100℃超纯水中离心，取上清液，如此反复1-10次，最后将上清液冷冻干燥10-120小时，即得目标药质体产物甲硫咪唑丙烯酸二～三十酯。
本发明的另一目的是提供一种GSH浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的甲硫咪唑经皮给药药膏，所述药膏中含有上述的药质体。
优选地，所述药膏由上述药质体与羊毛脂和甘油用乳化法制得。
优选地，所述药膏中含有促渗剂。
优选地，所述促渗剂为氮酮。
本发明提供的上述GSH响应性控释药质体的制备方法，其制备的GSH响应性控释药质体的用途是：改善甲硫咪唑的渗透性，可通过甲状腺病变部位经皮给药，药物在甲状腺内聚集浓度会大大提高，并降低对正常组织的毒副作用。
本发明拟将MMI与丙炔酸进行巯基加成反应先形成MMISCH＝COOH化合物，然后通过酯化反应与脂肪醇连接合成出GSH响应的MMI药质体；然后制成经皮给药***，用于甲亢局部治疗，具有如下优点：
(1)该药物通过疏水改性，获得的药质体会大大增强对甲状腺部位细胞膜及泡膜的渗透性；
(2)获得的药质体能响应细胞内谷胱甘肽浓度刺激，通过Michael消去反应，实现药物的智能释放。
(3)该药物可作为经皮给药***，增加甲状腺病灶部位的药物局部浓度，延长药物在病灶组织的作用时间，从而提升药物的治疗效果，由于给药***直接作用于病灶部位，有望减小对正常组织的损伤、降低药物的不良反应；另外，该***有望提高长期用药的顺应性，提升药物的使用安全性，为患者提供更优的用药选择。
附图说明
图1本发明实施例3制备的MMI-AA和MMI-AA-OLa的核磁H谱，其中图a为MMI-AA，图b为MMI-AA-OLa；
图2本发明实施例3制备的MMI-AA和MMI-AA-OLa的核磁C谱，其中图a为MMI-AA，图b为MMI-AA-OLa；
图3本发明实施例3制备的MMI-AA-OLa的质谱图；
图4～8是本发明实施例1～5制备的甲硫咪唑药质体在不同内环境的药物释放曲线；
图9本发明实施例3制备的MMI-AA-OLa的透射电镜图，其中左右图中标尺分别代表1μm、200nm；
图10本发明实施例制备的MMI-AA-OLa在不同类型促渗剂的药物累积透皮释放百分含量(％)。
具体实施方式
为更好的理解本发明，下面的实施例是对本发明的进一步说明，但本发明的内容不仅仅局限于下面的实施例。
实施例1：
(1)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸(甲硫咪唑丙烯酸，MMI-AA)的制备
将甲硫咪唑(10mmol)溶解于甲醇(1mol)中，在搅拌状态下将甲醇钠(10mmol)加入其中至甲硫咪唑完全溶解，再将丙炔酸(100mmol)加入其中。反应温度：10℃，氮气保护，回流状态下反应200小时。反应结束后，用旋转蒸发仪将反应液在32℃下旋蒸10min后，得浓稠白色液体；将浓稠白色液体冷冻干燥10小时，冻干后即得MMI-AA(白色片状固体)。
(2)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸-乙酯(甲硫咪唑丙烯酸乙酯，MMI-AA-OEt)的制备
将所得甲硫咪唑丙烯酸(1mmol)与EDC(6mmol)溶解于DMF(129mmol)，搅拌状态下活化20min，20min后加入NHS(15mmol)搅拌状态下稳定1小时。将乙醇(10mmol)溶解于DMF(129mmol)，最后将处理好的甲硫咪唑丙烯酸溶液，加入到乙醇溶液中，不断搅拌，反应温度10℃，氮气保护，反应1小时。反应结束后，将反应溶液放入4℃超纯水超声洗涤，超声洗涤1min后，在转速为1000r/min的条件下离心30min，取上清液再溶于4℃超纯水离心，取上清液，如此反复5次，最后将上清液冷冻干燥10小时，冻干后即得MMI-AA-OEt(米黄色液体)。
实施例2：
(1)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸(甲硫咪唑丙烯酸，MMI-AA)的制备
将甲硫咪唑(10mmol)溶解于甲醇(0.8mol)中，在搅拌状态下将甲醇钠(10mmol)加入其中至甲硫咪唑完全溶解，再将丙炔酸(10mmol)加入其中。反应温度：20℃，氮气保护，回流状态下反应150小时。反应结束后，用旋转蒸发仪将反应液在32℃下旋蒸20min后，得浓稠白色液体；将浓稠白色液体冷冻干燥30小时，冻干后即得MMI-AA(白色片状固体)。
(2)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸-正辛酯(甲硫咪唑丙烯酸正辛酯，MMI-AA-OCa)的制备
将所得甲硫咪唑丙烯酸(10mmol)与EDC(10mmol)溶解于DMF(129mmol)，搅拌状态下活化20min，20min后加入NHS(10mmol)搅拌状态下稳定1小时。将正辛醇(10mmol)溶解于DMF(129mmol)，最后将处理好的甲硫咪唑丙烯酸溶液，加入到正辛醇溶液中，不断搅拌，反应温度20℃，氮气保护，反应100小时。反应结束后，将反应溶液放入4℃超纯水超声洗涤，超声洗涤10min后，在转速为2000r/min的条件下离心20min，取上清液再溶于4℃超纯水离心，取上清液，如此反复5次，最后将上清液冷冻干燥20小时，冻干后即得MMI-AA-OCa(赭黄色液体)。
实施例3：
(1)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸(甲硫咪唑丙烯酸，MMI-AA)的制备
将甲硫咪唑(30mmol)溶解于甲醇(0.5mol)中，在搅拌状态下将甲醇钠(10mmol)加入其中至甲硫咪唑完全溶解，再将丙炔酸(10mmol)加入其中。反应温度：50℃，氮气保护，回流状态下反应100小时。反应结束后，用旋转蒸发仪将反应液在32℃下旋蒸60min后，得浓稠白色液体；将浓稠白色液体冷冻干燥50小时，冻干后即得MMI-AA(白色片状固体)。
(2)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸-十二酯(甲硫咪唑丙烯酸十二酯，MMI-AA-OLa)的制备
将甲硫咪唑丙烯酸(9mmol)与EDC(27mmol)溶解于DMF(260mmol)，搅拌状态下活化20min，20min后加入NHS(45mmol)搅拌状态下稳定1小时。将十二醇(0.3mmol)溶解于DMF(260mmol)，最后将处理好的甲硫咪唑丙烯酸溶液，加入到十二醇溶液中，不断搅拌，反应温度30℃，氮气保护，反应50小时。反应结束后，将反应溶液放入4℃超纯水超声洗涤，超声洗涤60min后，在转速为5000r/min的条件下离心15min，取上清液再溶于4℃超纯水离心，取上清液，如此反复5次，最后将上清液冷冻干燥60小时，冻干后即得MMI-AA-OLa(米黄色液体)。
实施例4：
(1)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸(甲硫咪唑丙烯酸，MMI-AA)的制备
将甲硫咪唑(15mmol)溶解于甲醇(0.3mol)中，在搅拌状态下将甲醇钠(10mmol)加入其中至甲硫咪唑完全溶解，再将丙炔酸(3mmol)加入其中。反应温度：80℃，氮气保护，回流状态下反应30小时。反应结束后，用旋转蒸发仪将反应液在32℃下旋蒸80min后，得浓稠白色液体；将浓稠白色液体冷冻干燥100小时，冻干后即得MMI-AA(白色片状固体)。
(2)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸-十八酯(甲硫咪唑丙烯酸十八酯，MMI-AA-OSt)的制备
将甲硫咪唑丙烯酸(2.7mmol)与EDC(13.5mmol)溶解于DMF(129mmol)，搅拌状态下活化20min，20min后加入NHS(27mmol)搅拌状态下稳定1小时。将十八醇(0.03mmol)溶解于DMF(129mmol)，60℃下搅拌30min直至完全溶解。最后将处理好的甲硫咪唑丙烯酸溶液，加入到十八醇溶液中，不断搅拌，反应温度60℃，氮气保护，反应10小时。反应结束后，将反应溶液放入4℃超纯水超声洗涤80min，过滤，滤饼再溶于4℃超纯水超声洗涤80min，过滤，如此反复5次，最后将滤饼冷冻干燥90小时，冻干后即得MMI-AA-OSt(白色粉末)。
实施例5：
(1)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸(甲硫咪唑丙烯酸，MMI-AA)的制备
将甲硫咪唑(10mmol)溶解于甲醇(0.3mol)中，在搅拌状态下将甲醇钠(0.3mol)加入其中至甲硫咪唑完全溶解，再将丙炔酸(1mmol)加入其中。反应温度：100℃，氮气保护，回流状态下反应1小时。反应结束后，用旋转蒸发仪将反应液在32℃下旋蒸120min后，得浓稠白色液体；将浓稠白色液体冷冻干燥120小时，冻干后即得MMI-AA(白色片状固体)。
(2)3-[(1-甲基-1H-咪唑-2-基)硫代]-2-丙烯酸-三十酯(甲硫咪唑丙烯酸三十酯，MMI-AA-OTr)的制备
将甲硫咪唑丙烯酸(10mmol)与EDC(7mmol)溶解于DMF(129mmol)，搅拌状态下活化20min，20min后加入NHS(6mmol)搅拌状态下稳定1小时。将三十醇(0.1mmol)溶解于DMF(129mmol)，60℃下搅拌30min直至完全溶解。最后将处理好的甲硫咪唑丙烯酸溶液，加入到三十醇溶液中，不断搅拌，反应温度100℃，氮气保护，反应1小时。反应结束后，将反应溶液放入4℃超纯水超声洗涤120min，过滤，滤饼再溶于4℃超纯水超声洗涤120min，过滤，如此反复5次，最后将滤饼冷冻干燥120小时，冻干后即得MMI-AA-OTr(白色粉末)。
将上述实施例中制备的GSH响应性药质体冷冻干燥后，分别溶于pH为7.4的三组不同GSH浓度(0μM，10μM和5mM)的缓冲溶液中，和pH为5.6的两组不同GSH浓度(0μM，20mM)的缓冲溶液中，用高效液相色谱法(HPLC)测定甲硫咪唑丙烯酸十二酯的累积释药率，研究其体外释药行为。具体如下：
取一定量的冷冻干燥后的上述实施例中的甲硫咪唑丙烯酸十二酯溶于适量的二氯甲烷中，待充分溶解后，将溶液平均分成5份封装进截留分子量200的透析袋中。依次将5份溶液浸没入盛有不同释放介质(pH＝7.4，0μM GSH，10μM GSH和5mM GSH；pH＝5.6，0μMGSH，20mM GSH)的锥形瓶中。在37℃下，将各锥形瓶连同溶液置于恒温旋转震荡器中震荡模拟生物体环境。在预先设定好的时间间隔内，取出5mL释放介质，同时添加5mL新鲜介质以维持漏槽条件。取出的释放介质中的甲硫咪唑的量通过高效液相色谱法来测定，所有的测试一式三份。
按甲硫咪唑标准曲线计算药物浓度。采用以下公式计算甲硫咪唑的累积释药率(Re)：
Re＝Mt/M0
式中：Re表示纳米制剂的累积释药率；Mt表示在时间t时纳米制剂总释药量；M0为纳米制剂总药量。
尽管这里参考给出的实施方案说明并且描述了本发明的某些方面，但并不是为了将所附的权利要求限定到所显示的细节中。相反，可以预料本领域的技术人员可以对这些细节进行不同的修改，其中这些修改应该还在所要求的主题的精神和范围内，并且是为了相应地解释这些权利要求。
图1本发明制备的甲硫咪唑丙烯酸(MMI-AA)和甲硫咪唑丙烯酸十二酯(MMI-AA-OLa)的核磁H谱。
MMI-AA氢谱：1H NMR(500MHz,D2O)，化学位移(δ)：咪唑碳碳双键氢：7.45(t，J＝5.7Hz,1H),7.42(d,J＝2.0Hz,1H)，乙烯碳碳双键氢：6.80(d,J＝9.2Hz,1H),6.07(d,J＝9.3Hz,1H)，D2O：4.70(s，3H)，咪唑甲基：3.80(s，3H)。综上所述，MMI-AA各个氢信号峰的归属与其分子结构相符，可以证明MMI-AA的结构形成。
MMI-AA-OLa氢谱：1H NMR(500MHz，DMSO)，化学位移(δ)：咪唑碳碳双键氢：7.34(s，1H)，7.00(t，J＝10.3Hz，1H)，乙烯碳碳双键氢：7.73(t，J＝16.3Hz，1H)，6.12(d，J＝9.9Hz，1H)，咪唑甲基氢：3.56(m，3H)，十二酯碳氧单键氢：4.11(dd，J＝18.3，11.7Hz，2H)，DMSO-d6：3.31(m，17H)，2.50(m，15H)。综上所述，MMI-AA-OLa各个氢信号峰的归属与其分子结构相符，可以证明MMI-AA-OLa的结构形成。
图2本发明制备的甲硫咪唑丙烯酸(MMI-AA)和甲硫咪唑丙烯酸十二酯(MMI-AA-OLa)的核磁C谱。
MMI-AA碳谱：13C NMR(126MHz，D2O)，化学位移(δ)：羧基碳：173.42(s)，乙烯双键碳：140.70(s)，121.31(s)，咪唑碳氮双键碳：134.59(s)，咪唑碳碳双键碳：125.22(s),123.90(s)，咪唑甲基碳：34.97(s)。综上所述，MMI-AA各个碳信号峰的归属与其分子结构相符，可以证明MMI-AA的结构形成。
MMI-AA-OLa碳谱：13C NMR(126MHz，DMSO)，化学位移(δ)：羧基碳：171.26(s)，乙烯双键碳：145.89(m)，114.76(m)，咪唑碳氮双键碳：139.38(m)，咪唑碳碳双键碳：129.21(s)，124.65(m)，咪唑甲基碳：33.02(s)。十二酯碳氧单键碳：61.18(s)，DMSO-d6：40.03(m)，十二酯亚甲基碳：31.77(s)，29.51(dd，J＝11.5，6.5Hz)，29.18(s)，28.50(s)，25.98(s)，25.78(d，J＝12.3Hz)，22.57(s)，十二酯甲基碳：14.42(s)。综上所述，MMI-AA-OLa各个碳信号峰的归属与其分子结构相符，可以证明MMI-AA-OLa的结构形成。
图3本发明制备的甲硫咪唑丙烯酸十二酯质谱图。
甲硫咪唑丙烯酸十二酯(MMI-AA-OLa)准分子离子峰[M+1]+＝353.21781，C19H32O2N2S+。MMI-AA-OLa分子式为：C19H32O2N2S，理论分子量352.21845。分子量误差为1.82ppm<5ppm，表明MMI-AA-OLa实测分子量与理论相符。
表1为本发明制备的甲硫咪唑药质体的表观油水分配系数。
表1甲硫咪唑药质体表观油水分配系数(n＝5)
Figure BDA0002652913050000091
可见改性后的甲硫咪唑药质体与甲硫咪唑的lgP对比，lgP值均有所增加，lgP值越大，说明该物质越亲油。lgP对于药物在皮肤吸收速度和程度有很大影响，药物最佳lgP为2<lgP<3，该化合物脂溶性和水溶性适中，具有较好生物膜渗透性而发挥疗效。甲硫咪唑丙烯酸十二酯(MMI-AA-OLa)在pH＝5.6和7.4的油水分配系数lgP均在2至3之间，提示其有良好的渗透性，但又维持了一定的水溶性，是用于透皮给药的最佳化合物。
图4～8是本发明制备的甲硫咪唑药质体在不同内环境的药物释放曲线。释放介质一份为GSH浓度10μM、pH7.4的PBS缓冲溶液(模拟人体血液环境)，一份为GSH浓度5mM、pH7.4的PBS缓冲溶液(模拟正常细胞内环境)，另一份为GSH浓度20mM、pH5.6的PBS缓冲溶液(模拟病变细胞内环境)。结果显示，MMI-AA-OEt在0μM的GSH溶液中只有极少量的药物释放，7.5小时和163小时的累积释药率分别为4.85％(pH＝7.4)，2.39％(pH＝5.6)和6.34％(pH＝7.4)，3.34％(pH＝5.6)；而在pH＝7.4 and 10μM GSH、pH＝7.4 and 5mM GSH、pH＝5.6 and20mM GSH的溶液中累积释药率明显增大，7.5小时累积释药率分别为15.17％、26.63％和59.88％，163小时累积释药率分别为19.80％、35.46％和93.01％。MMI-AA-OCa在0μM的GSH溶液中只有极少量的药物释放，7.5小时和163小时的累积释药率分别为4.85％(pH＝7.4)，2.39％(pH＝5.6)和6.33％(pH＝7.4)，3.33％(pH＝5.6)；而在pH＝7.4 and 10μM GSH、pH＝7.4 and 5mM GSH、pH＝5.6 and 20mM GSH的溶液中累积释药率明显增大，7.5小时累积释药率分别为15.15％、26.61％和59.82％，163小时累积释药率分别为19.78％、35.43％和92.92％。MMI-AA-OLa在0μM的GSH溶液中只有极少量的药物释放，7.5小时和163小时的累积释药率分别为4.81％(pH＝7.4)，2.37％(pH＝5.6)和6.27％(pH＝7.4)，3.30％(pH＝5.6)；而在pH＝7.4 and 10μM GSH、pH＝7.4 and 5mM GSH、pH＝5.6 and 20mM GSH的溶液中累积释药率明显增大，7.5小时累积释药率分别为15.02％、26.37％和59.28％，163小时累积释药率分别为19.61％、35.11％和92.10％。MMI-AA-OSt在0μM的GSH溶液中只有极少量的药物释放，7.5小时和163小时的累积释药率分别为4.80％(pH＝7.4)，2.37％(pH＝5.6)和6.27％(pH＝7.4)，3.30％(pH＝5.6)；而在pH＝7.4 and 10μM GSH、pH＝7.4 and 5mM GSH、pH＝5.6 and 20mM GSH的溶液中累积释药率明显增大，7.5小时累积释药率分别为15.00％、26.34％和59.22％，163小时累积释药率分别为19.59％、35.08％和92.00％。MMI-AA-OTr在0μM的GSH溶液中只有极少量的药物释放，7.5小时和163小时的累积释药率分别为4.32％(pH＝7.4)，2.13％(pH＝5.6)和5.64％(pH＝7.4)，2.97％(pH＝5.6)；而在pH＝7.4and 10μM GSH、pH＝7.4 and 5mM GSH、pH＝5.6 and 20mM GSH的溶液中累积释药率明显增大，7.5小时累积释药率分别为13.50％、23.71％和53.30％，163小时累积释药率分别为17.63％、31.57％和82.79％。MMI-AA-OTr与其他药质体在同等条件下对比，药物累积释放量有明显差异，可能与碳链的立***阻有关。结果表明GSH响应性药质体在没有GSH环境中具有较好的稳定性，不会造成药物的大量泄漏；而在pH＝7.4and10μM GSH、pH＝7.4 and5mM GSH和pH＝5.6 and 20mM GSH环境中能逐渐释放药物。总体表现出谷胱甘肽浓度依赖型释药方式。
图6本发明制备的甲硫咪唑丙烯酸十二酯的透射电镜图。如图可知甲硫咪唑丙烯酸十二酯药质体的结构为空心纳米囊泡，平均粒径为200±3.6nm。
图7本发明制备的甲硫咪唑丙烯酸十二酯在不同类型促渗剂的药物累积透皮释放百分含量(％)。MMI(0％PE，1.587±0.444)与MMI(2％Azone，1.632±0.384)的24h累积渗透量(％)对比无明显差异，表明2％氮酮的促渗剂不能增强MMI的24h累积渗透量(％)。MMI(0％PE)与MMI-AA-OLa(0％PE)的24h累积渗透量(％)对比，十二醇改性后的MMI药脂质体(27.924±0.741)的24h累积渗透量(％)比MMI(1.587±0.444)增加了26.337％，表明改性后的MMI-AA-OLa的24h累积渗透量(％)显著提高。MMI-AA-OLa(0％PE)与MMI-AA-OLa(2％Azone)的24h累积渗透量(％)对比，含2％Azone(83.804±0.557)的24h累积渗透量(％)是MMI-AA-OLa(0％PE，27.924±0.741)不含促渗剂的3.001倍，表明2％Azone有良好的促进MMI-AA-OLa渗透皮肤的作用。
以上所述是本发明的优选实施方式而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和变动，这些改进和变动也视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种GSH浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的甲硫咪唑药质体，其特征在于，具有如下通式所示结构：
Figure FDA0002652913040000011
其中R为C2-30的烷基。
2.如权利要求1所述的药质体，其特征在于，所述R为C12的烷基。
3.一种GSH浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的甲硫咪唑药质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)甲硫咪唑丙烯酸的制备
将甲硫咪唑加入甲醇中，再加入甲醇钠，搅拌至甲硫咪唑完全溶解，加入丙炔酸，其中，甲硫咪唑与丙炔酸的摩尔比为(0.1～10)：1，甲醇与甲醇钠的摩尔比为(1～100)：1；将所得混合液在氮气保护条件下回流反应；反应结束后，将反应液旋蒸得浓稠白色液体；将所得浓稠白色液体冻干后得白色片状固体甲硫咪唑丙烯酸；
(2)甲硫咪唑丙烯酸二～三十酯的制备
按照甲硫咪唑丙烯酸：EDC：NSH＝1：(0.7～6)：(0.6～15)的摩尔比活化羧基稳定中间体，得到甲硫咪唑丙烯酸溶液；将所得甲硫咪唑丙烯酸溶液按照甲硫咪唑丙烯酸：二～三十醇＝(0.1～100)：1的摩尔比投料；反应结束后，将反应溶液放入超纯水中超声洗涤，离心，取上清液再溶于超纯水中离心，取上清液，如此反复1-10次，最后将所得上清液冷冻干燥，即得目标药质体产物甲硫咪唑丙烯酸二～三十酯。
4.一种GSH浓度响应性治疗甲状腺功能亢进的甲硫咪唑经皮给药药膏，其特征在于，所述药膏中含有权利要求1或者权利要求2所述的药质体，所述药膏由权利要求1或者权利要求2所述的药质体与羊毛脂和甘油用乳化法制得。
5.如权利要求4所述的药膏，其特征在于，所述药膏中含有促渗剂。
6.如权利要求4所述的药膏，其特征在于，所述促渗剂为氮酮。
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