CN111773345A - 一种治疗乳腺癌的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗乳腺癌的中药组合物及其制备方法,所述中药组合物的组分及其重量份数为:炒鳖甲10~15份、炒地榆8~12份、红花8~10份、制半夏6~8份、杜仲8~10份、知母8~10份、田七2~4份、山柰4~8份、冬虫夏草3~5份、制南星6~9份、苍耳子8~10份、红豆蒄8~10份、天花粉8~10份、血竭4~6份和赤芍6~8份。本发明提供的治疗乳腺癌的中药组合物及其制备方法,既能从根本上杀死癌细胞,具有显著的抗乳腺癌效果,同时又能通过合理加工手段提高药效。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域,更具体地,涉及一种治疗乳腺癌的中药组合物及其制备方法。
背景技术
乳腺癌通常发生在***腺上皮组织,是女性最常见的恶性肿瘤之一,严重影响妇女身心健康甚至危及生命。据资料统计,发病率占全身各种恶性肿瘤的7-10%,在妇女仅次于子宫癌,它的发病常与遗传有关,绝经期前后的妇女发病率较高,仅约1-2%的乳腺患者是男性。手术和放射治疗为其主要的治疗手段,在早期治疗和肿瘤发生转移前,单用手术和放疗可以治愈绝大多数病例,但是一旦发生转移,积极治疗也仅能治愈小部分病人。其次手术治疗经常给女性造成身体和心理的双重伤害,放疗手段副作用大。
近年来我国学者通过实验研究,证实中药具有杀伤癌细胞的作用。中药治疗乳腺癌在思想方法上有抗癌消毒、化瘀消积、扶正补虚等手段。运用中西医结合治疗乳腺癌具有如下作用:1、中药诱导乳腺肿瘤细胞凋亡;2、中药抑制乳腺癌肿瘤细胞的生长、转移与复发;3、中药提高乳腺癌化疗后机体的免疫能力。因而合并应用中药联合治疗,不仅方法多样、疗效显著,而且还具有对机体损伤小、副作用小、注重机体整体调理等优势。
其中,中药的配方以及药材的品种、产地、预处理、炮制等均会对中药药效产生较大程度的影响,从而影响整个乳腺癌治疗效果。然而现有的很多治疗乳腺癌的中药配方设计不合理,其包含的中药药材的加工处理也比较粗糙,提取和炮制技术不成熟,造成药材有效成分损失或变质,严重影响了药材药效。
综上所述,如何设计一种治疗乳腺癌的中药组合物及其制备方法,既能从根本上杀死癌细胞,具有显著的抗乳腺癌效果,同时又能通过合理加工手段提高药效,是目前急需解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于为了解决现有的放射治疗和手术治疗乳腺癌的方法对身心伤害大、副作用大,且现有的很多治疗乳腺癌的中药药材加工处理比较粗糙,提取和炮制技术不成熟,严重影响了药材药效和抗癌效果的技术问题,而提供一种治疗乳腺癌的中药组合物及其制备方法,既能从根本上杀死癌细胞,具有显著的抗乳腺癌效果,同时又能通过合理加工手段提高药效。
本发明通过以下技术方案来实现上述目的,一种治疗乳腺癌的中药组合物,所述中药组合物的组分及其重量份数为:炒鳖甲10~15份、炒地榆8~12份、红花8~10份、制半夏6~8份、杜仲8~10份、知母8~10份、田七2~4份、山柰4~8份、冬虫夏草3~5份、制南星6~9份、苍耳子8~10份、红豆蒄8~10份、天花粉8~10份、血竭4~6份和赤芍6~8份,所述天花粉和赤芍采用阶段式混合提取方法,所述血竭采用水处理+沸石粉处理的方法进行炮制。
其中,天花粉清热泻火、生津止渴、消肿排脓,有效成分主要为天花粉蛋白和多糖,天花粉蛋白是一种碱性蛋白,具有终止妊娠、抗肿瘤、抗病毒、抗真菌、抗炎和影响免疫***等药理作用。多糖具有明显的免疫调节作用,能增强免疫活性,具有显著的抗肿瘤和细胞毒活性。
血竭活血定痛,化瘀止血,敛疮生肌,有效成分主要为血竭素和血竭红素,能明显降低血细胞比容,缩短血浆再钙化时间,抑制血小板聚集,防止血栓形成;此外还具有抗真菌、抗肿瘤的功效。同时,血竭遇水易软化粘连,内服和外用均容易引起过敏反应,表现为过敏性皮炎。
赤芍清热凉血,活血祛瘀,其药效成分主要是以芍药苷为主的单萜及其苷类成分,能扩张冠状动脉、增加冠脉血流量,抑制血小板聚集,抗凝和抗血栓,对多种病原微生物有较强的抑制作用,还有护肝和抗肿瘤作用。
进一步地,所述天花粉和赤芍的提取方法为:
(1)分别称取天花粉和赤芍,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为400~500r/min,干燥后过40~60目筛,分别得到天花粉粉末和赤芍粉末;
(2)分别将天花粉粉末和赤芍粉末对半分,得天花粉粉末A和天花粉粉末B,赤芍粉末A和赤芍粉末B;
(3)将天花粉粉末A在60~80℃用5~7倍水辅助超声萃取2~3h,超声功率为50~60W,过滤后取滤液A备用,滤渣和赤芍粉末A一起混合后,在50~60℃用5~7倍70~80%乙醇溶液辅助超声萃取1~2h,超声功率为60~70W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后和天花粉粉末B一起混合,在30~40℃用粉碎机进行粉碎,转速为500~600r/min,干燥后过60~80目筛,得到的产品在80~90℃用6~8倍水辅助超声萃取2~3h,超声功率为70~80W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后和赤芍粉末B一起混合,在40~50℃用粉碎机进行粉碎,转速为600~800r/min,干燥后过80~100目筛,得到的产品在40~50℃用6~8倍80~90%乙醇溶液辅助超声萃取1~2h,超声功率为60~70W,过滤后取滤液D;
(4)分别将滤液A、B、C和D蒸发溶剂后,混合在一起,即得天花粉和赤芍的提取物成品。
进一步地,所述血竭的炮制方法为:
(1)称取原装血竭块,30℃烘干后,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为500~600r/min,干燥后过30~40目筛;
(2)将步骤(1)得到的产品投入高剪切分散机,然后加入3~5倍的水,在30~50℃和8000~9000r/min转速下分散1~2h,然后升温至60~80℃,在10000~12000r/min转速的条件下继续高速分散0.5~1h,得血竭混悬液;
(3)将血竭混悬液过滤,取滤渣在30~40℃烘干机中烘干至含水率为10~30%,然后投入超微粉碎机中,加入1~1.5倍量的沸石粉,在80~90W功率和40~50℃条件下超微粉碎成粒径为10~20μm粉末,然后升温至70~80℃,在100~120W功率条件下超微粉碎成粒径为5~10μm粉末,接着降温至15~20℃,在130~150W功率下超微粉碎成粒径为1~5μm粉末,即得成品 。
进一步地,所述炒地榆是由地榆原材料和灶心土一起炒制而成。
一种治疗乳腺癌的中药组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰的原料处理:将五种原料洗净后去杂,70~80℃烘干后放入粉碎机中,在400~500r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过40~60目筛,得混合粉末;
(2)红花、冬虫夏草和红豆蔻的原料处理:取红花、冬虫夏草和红豆蔻洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)田七的原料处理:取田七洗净后去杂,干燥后打成1~3mm颗粒后备用;
(4)制半夏、制南星和苍耳子的处理:取制半夏、制南星和苍耳子混合,然后捣碎备用;
(5)先取步骤(1)处理得到的炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰混合粉末放入砂锅中,加入冷水浸泡并搅拌5~8min,然后加入步骤(2)处理后的红花、冬虫夏草和红豆蔻的浆状物和步骤(3)处理后得的田七颗粒,继续浸泡并搅拌10~15min;
(6)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至40~60℃后,加入步骤(4)处理后的制半夏、制南星和苍耳子,搅拌均匀然后继续煎煮至80~90℃,然后再加入天花粉和赤芍的提取物以及炮制好的血竭,搅拌均匀然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮13~15min后关火,即得治疗乳腺癌的中药组合物汤剂。
进一步地,所述步骤(4)中加入的冷水量为800~900mL。
本发明的有益效果在于:
(1)本发明通过特定配方制备的中药组合物,尤其是抗癌药材天花粉、血竭和赤芍的配合,能够活血化瘀化解肿块,然后再杀死癌细胞,抗乳腺癌效果明显;
(2)本发明采用阶段式混合提取方法对天花粉和赤芍的有效成分进行深度提取,提高了天花粉蛋白、多糖及总苷的提取率,保留了药效;
(3)本发明采用水处理+沸石粉处理的方法对血竭进行炮制,不仅能防止加工过程中有效成分损失,方便入药,还能防粘连和防止粉末飞扬致敏;
(4)本发明在制备治疗乳腺癌的中药组合物的时候,将性状不同的药材分批加工处理并分时段加入煎煮,能够提高药物汤剂的药效;
(5)炒鳖甲滋阴潜阳、软坚散结,炒地榆凉血止血、解毒敛疮,红花活血通经、散瘀止痛,杜仲补肝肾、强筋骨、安胎,知母清热泻火、滋阴润燥,田七和山柰活血化瘀,红豆蔻散寒燥湿、醒脾消食,冬虫夏草提高人体免疫力,制半夏消痞散结,制南星祛风止痉、散结消肿,苍耳子发散风寒、通鼻窍、祛风湿、止痛,这些药材与抗癌药材天花粉、血竭和赤芍配合一起,增强了抗乳腺癌效果。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1~3
实施例1~3提供了一种治疗乳腺癌的中药组合物,各药材组成及质量如表1所示:
表 1
下面对实施例1~3这三组实施例做具体描述。
实施例1
本实施例提供了一种治疗乳腺癌的中药组合物,由表1中各质量份的药材组成,所述天花粉和赤芍的提取方法为:
(1)分别称取天花粉和赤芍,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为400r/min,干燥后过40目筛,分别得到天花粉粉末和赤芍粉末;
(2)分别将天花粉粉末和赤芍粉末对半分,得天花粉粉末A和天花粉粉末B,赤芍粉末A和赤芍粉末B;
(3)将天花粉粉末A在60℃用5倍水辅助超声萃取2h,超声功率为50W,过滤后取滤液A备用,滤渣和赤芍粉末A一起混合后,在50℃用5倍70%乙醇溶液辅助超声萃取1h,超声功率为60W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后和天花粉粉末B一起混合,在30℃用粉碎机进行粉碎,转速为500r/min,干燥后过60目筛,得到的产品在80℃用6倍水辅助超声萃取2h,超声功率为70W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后和赤芍粉末B一起混合,在40℃用粉碎机进行粉碎,转速为600r/min,干燥后过80目筛,得到的产品在40℃用6倍80%乙醇溶液辅助超声萃取1h,超声功率为60W,过滤后取滤液D;
(4)分别将滤液A、B、C和D蒸发溶剂后,混合在一起,即得天花粉和赤芍的提取物成品。
所述血竭的炮制方法为:
(1)称取原装血竭块,30℃烘干后,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为500r/min,干燥后过30目筛;
(2)将步骤(1)得到的产品投入高剪切分散机,然后加入3倍的水,在30℃和8000r/min转速下分散1h,然后升温至60℃,在10000r/min转速的条件下继续高速分散0.5h,得血竭混悬液;
(3)将血竭混悬液过滤,取滤渣在30℃烘干机中烘干至含水率为10%,然后投入超微粉碎机中,加入1倍量的沸石粉,在80W功率和40℃条件下超微粉碎成粒径为10μm粉末,然后升温至70℃,在100W功率条件下超微粉碎成粒径为5μm粉末,接着降温至15℃,在130W功率下超微粉碎成粒径为1μm粉末,即得成品。
所述炒地榆是由地榆原材料和灶心土一起炒制而成。
本实施例还提供了一种治疗乳腺癌的中药组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰的原料处理:将五种原料洗净后去杂,70℃烘干后放入粉碎机中,在400r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过40目筛,得混合粉末;
(2)红花、冬虫夏草和红豆蔻的原料处理:取红花、冬虫夏草和红豆蔻洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)田七的原料处理:取田七洗净后去杂,干燥后打成1mm颗粒后备用;
(4)制半夏、制南星和苍耳子的处理:取制半夏、制南星和苍耳子混合,然后捣碎备用;
(5)先取步骤(1)处理得到的炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰混合粉末放入砂锅中,加入800mL冷水浸泡并搅拌5min,然后加入步骤(2)处理后的红花、冬虫夏草和红豆蔻的浆状物和步骤(3)处理后得的田七颗粒,继续浸泡并搅拌10min;
(6)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至40℃后,加入步骤(4)处理后的制半夏、制南星和苍耳子,搅拌均匀然后继续煎煮至80℃,然后再加入天花粉和赤芍的提取物以及炮制好的血竭,搅拌均匀然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮13min后关火,即得治疗乳腺癌的中药组合物汤剂。
实施例2
本实施例提供了一种治疗乳腺癌的中药组合物,由表1中各质量份的药材组成,所述天花粉和赤芍的提取方法为:
(1)分别称取天花粉和赤芍,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为450r/min,干燥后过50目筛,分别得到天花粉粉末和赤芍粉末;
(2)分别将天花粉粉末和赤芍粉末对半分,得天花粉粉末A和天花粉粉末B,赤芍粉末A和赤芍粉末B;
(3)将天花粉粉末A在70℃用6倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为55W,过滤后取滤液A备用,滤渣和赤芍粉末A一起混合后,在55℃用6倍75%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后和天花粉粉末B一起混合,在35℃用粉碎机进行粉碎,转速为550r/min,干燥后过70目筛,得到的产品在85℃用7倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为75W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后和赤芍粉末B一起混合,在45℃用粉碎机进行粉碎,转速为700r/min,干燥后过90目筛,得到的产品在45℃用7倍85%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液D;
(4)分别将滤液A、B、C和D蒸发溶剂后,混合在一起,即得天花粉和赤芍的提取物成品。
所述血竭的炮制方法为:
(1)称取原装血竭块,30℃烘干后,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为550r/min,干燥后过35目筛;
(2)将步骤(1)得到的产品投入高剪切分散机,然后加入4倍的水,在40℃和8500r/min转速下分散1.5h,然后升温至70℃,在11000r/min转速的条件下继续高速分散45min,得血竭混悬液;
(3)将血竭混悬液过滤,取滤渣在35℃烘干机中烘干至含水率为20%,然后投入超微粉碎机中,加入1.25倍量的沸石粉,在85W功率和45℃条件下超微粉碎成粒径为15μm粉末,然后升温至75℃,在110W功率条件下超微粉碎成粒径为7μm粉末,接着降温至18℃,在140W功率下超微粉碎成粒径为3μm粉末,即得成品。
本实施例还提供了一种治疗乳腺癌的中药组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰的原料处理:将五种原料洗净后去杂,75℃烘干后放入粉碎机中,在450r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过50目筛,得混合粉末;
(2)红花、冬虫夏草和红豆蔻的原料处理:取红花、冬虫夏草和红豆蔻洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)田七的原料处理:取田七洗净后去杂,干燥后打成2mm颗粒后备用;
(4)制半夏、制南星和苍耳子的处理:取制半夏、制南星和苍耳子混合,然后捣碎备用;
(5)先取步骤(1)处理得到的炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰混合粉末放入砂锅中,加入850mL冷水浸泡并搅拌7min,然后加入步骤(2)处理后的红花、冬虫夏草和红豆蔻的浆状物和步骤(3)处理后得的田七颗粒,继续浸泡并搅拌12min;
(6)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至50℃后,加入步骤(4)处理后的制半夏、制南星和苍耳子,搅拌均匀然后继续煎煮至85℃,然后再加入天花粉和赤芍的提取物以及炮制好的血竭,搅拌均匀然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮14min后关火,即得治疗乳腺癌的中药组合物汤剂。
实施例3
本实施例提供了一种治疗乳腺癌的中药组合物,由表1中各质量份的药材组成,所述天花粉和赤芍的提取方法为:
(1)分别称取天花粉和赤芍,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为500r/min,干燥后过60目筛,分别得到天花粉粉末和赤芍粉末;
(2)分别将天花粉粉末和赤芍粉末对半分,得天花粉粉末A和天花粉粉末B,赤芍粉末A和赤芍粉末B;
(3)将天花粉粉末A在80℃用7倍水辅助超声萃取3h,超声功率为60W,过滤后取滤液A备用,滤渣和赤芍粉末A一起混合后,在60℃用7倍80%乙醇溶液辅助超声萃取2h,超声功率为70W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后和天花粉粉末B一起混合,在40℃用粉碎机进行粉碎,转速为600r/min,干燥后过80目筛,得到的产品在90℃用8倍水辅助超声萃取3h,超声功率为80W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后和赤芍粉末B一起混合,在50℃用粉碎机进行粉碎,转速为800r/min,干燥后过100目筛,得到的产品在50℃用8倍90%乙醇溶液辅助超声萃取2h,超声功率为70W,过滤后取滤液D;
(4)分别将滤液A、B、C和D蒸发溶剂后,混合在一起,即得天花粉和赤芍的提取物成品。
所述血竭的炮制方法为:
(1)称取原装血竭块,30℃烘干后,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为600r/min,干燥后过40目筛;
(2)将步骤(1)得到的产品投入高剪切分散机,然后加入5倍的水,在50℃和9000r/min转速下分散2h,然后升温至80℃,在12000r/min转速的条件下继续高速分散1h,得血竭混悬液;
(3)将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,在90W功率和50℃条件下超微粉碎成粒径为20μm粉末,然后升温至80℃,在120W功率条件下超微粉碎成粒径为10μm粉末,接着降温至20℃,在150W功率下超微粉碎成粒径为5μm粉末,即得成品。
本实施例还提供了一种治疗乳腺癌的中药组合物的制备方法,包括以下步骤:
(1)炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰的原料处理:将五种原料洗净后去杂,80℃烘干后放入粉碎机中,在500r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过60目筛,得混合粉末;
(2)红花、冬虫夏草和红豆蔻的原料处理:取红花、冬虫夏草和红豆蔻洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)田七的原料处理:取田七洗净后去杂,干燥后打成3mm颗粒后备用;
(4)制半夏、制南星和苍耳子的处理:取制半夏、制南星和苍耳子混合,然后捣碎备用;
(5)先取步骤(1)处理得到的炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰混合粉末放入砂锅中,加入900mL冷水浸泡并搅拌8min,然后加入步骤(2)处理后的红花、冬虫夏草和红豆蔻的浆状物和步骤(3)处理后得的田七颗粒,继续浸泡并搅拌15min;
(6)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至60℃后,加入步骤(4)处理后的制半夏、制南星和苍耳子,搅拌均匀然后继续煎煮至90℃,然后再加入天花粉和赤芍的提取物以及炮制好的血竭,搅拌均匀然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮15min后关火,即得治疗乳腺癌的中药组合物汤剂。
对比例1~5
为了对比本发明的中药组合物中的药材配方对抗乳腺癌效果的影响,提供5组对比例,各原料组成如表2所示:
表 2
其中,对比例1、2与实施例3的不同之处在于,将炒鳖甲、炒地榆、红花、制半夏、杜仲、知母、田七、山柰、冬虫夏草、制南星、苍耳子和红豆蒄的质量调整在本发明的配方范围之外;对比例3~5与实施例2的不同之处在于将天花粉、血竭和赤芍的质量调整在本发明的配方范围之外。
对比例6
本对比例与实施例1的区别在于,删除步骤(1)、(2)、(3)和(4),将步骤(5)改为:(1)称取炒鳖甲、炒地榆、红花、制半夏、杜仲、知母、田七、山柰、冬虫夏草、制南星、苍耳子、红豆蒄、天花粉、血竭和赤芍,洗净去杂,放入砂锅中,加入800mL冷水浸泡并搅拌15min。
步骤(6)改为:将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至80℃后,然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮13min后关火,即得治疗乳腺癌的中药组合物汤剂。
对比例7
本对比例与实施例1的区别在于,所述步骤(3)田七的原料处理改为:取田七洗净后去杂,干燥后用粉碎机粉碎成40目粉末后备用。
对比例8
本对比例与实施例1的区别在于,所述步骤(5)改为:分别取步骤(1)处理得到的炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母、山柰混合粉末和步骤(2)处理后的红花、冬虫夏草、红豆蔻的浆状物,以及步骤(3)处理后得的田七颗粒,加入800mL冷水浸泡并搅拌15min。
对比例9
本对比例与实施例1的区别在于,所述步骤(6)改为:将步骤(4)处理后的制半夏、制南星和苍耳子放入砂锅中,搅拌均匀后加盖移至明火中煎煮至80℃,然后再加入天花粉和赤芍的提取物以及炮制好的血竭,搅拌均匀然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮13min后关火,即得治疗乳腺癌的中药组合物汤剂。
对比例10
本对比例与实施例1的区别在于,所述步骤(6)改为:将天花粉和赤芍的提取物以及炮制好的血竭放入砂锅中,搅拌均匀后加盖移至明火中煎煮,先大火煎煮至40℃后,加入步骤(4)处理后的制半夏、制南星和苍耳子,搅拌均匀后继续煎煮至80℃,然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮13min后关火,即得治疗乳腺癌的中药组合物汤剂。
实施例1~3和对比例1~10的抗乳腺癌效果实验
中药组合物汤剂的浓缩处理:将实施例1~3和对比例1~10制得的中药组合物汤剂在常温下蒸发浓缩至相对密度为1.2~1.3。
(1)本发明中药组合物对人乳腺癌细胞株的体外生长抑制率试验
取对数生长期的人乳腺癌细胞株,调整好浓度,按每孔6000细胞分装于96孔板(0.2mL/孔)内,设置生理盐水对照组和给药组,给药组分别加入1g的实施例1~3和对比例1~10制得的中药组合物浓缩汤剂,每个实验组设5个平行孔。实验组设置好后,置35℃培养48h,实验终止前2h加入MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)溶液,再培养4h,测试前加入二甲基亚砜(DMSO),轻度振荡10min后置于490nm波长的酶联免疫检测仪内,测每个孔板的样品的OD(吸光度)值,再计算得生长抑制率,每个实验组的生长抑制率取5个平行样品的平均值,其结果如下表3所示。
表 3
(2)本发明中药组合物对人乳腺癌裸鼠移植瘤的体内药效试验
实验动物选择:取免疫功能缺陷型BALB/c裸鼠共计70只,鼠龄为3~5周,体重为22~25g,雌雄各半。
取已接种20~25天的人乳腺癌裸鼠移植瘤的瘤块,切成2mm×2mm×2mm小块,用套管针接种于裸鼠的右腋皮下,接种10~15天,待肿瘤长至直径可测量时,随机分成生理盐水对照组和给药组,将给药组中的小鼠分别喂入实施例1~3和对比例1~10制得的中药组合物浓缩汤剂,一日分两次,连续服用30天,停药次日处死小鼠,称体重和瘤重,计算平均抑瘤率。其结果如下表4所示。
表 4
由表3和4中结果可知,实施例1~3的生长抑制率和抑瘤率均高于生理盐水对照组和对比例1~10,可知按照本发明设计的中药组合物及其制备方法,在乳腺癌细胞和肿瘤的生长抑制方面体现了较为明显的优势,可以用于治疗乳腺癌。
为了对比天花粉和赤芍的提取方法对提取率的影响,提供6组对比例,具体如下:
对比例11
本对比例与实施例2的区别在于,删除步骤(2),将天花粉和赤芍分开提取,此时步骤(3)改为:将天花粉粉末在70℃用6倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为55W,过滤后取滤液A备用,滤渣在55℃用6倍75%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后在35℃用粉碎机进行粉碎,转速为550r/min,干燥后过70目筛,得到的产品在85℃用7倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为75W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后在45℃用粉碎机进行粉碎,转速为700r/min,干燥后过90目筛,得到的产品在45℃用7倍85%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液D。赤芍的提取方式和条件与上述天花粉相同,最终得滤液A′、B′、C′和D′。
步骤(4)改为:分别将滤液A、B、C和D蒸发溶剂后,混合在一起,即得天花粉的提取物成品;然后再分别将滤液A′、B′、C′和D′蒸发溶剂后,混合在一起,即得赤芍的提取物成品。
对比例12
本对比例与实施例2的区别在于,删除步骤(2),将天花粉和赤芍一次性混合提取,此时步骤(3)改为:将天花粉粉末和赤芍粉末在70℃用6倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为55W,过滤后取滤液A备用,滤渣在55℃用6倍75%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后在35℃用粉碎机进行粉碎,转速为550r/min,干燥后过70目筛,得到的产品在85℃用7倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为75W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后在45℃用粉碎机进行粉碎,转速为700r/min,干燥后过90目筛,得到的产品在45℃用7倍85%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液D。
对比例13
本对比例与实施例2的区别在于,将天花粉粉末B和赤芍粉末B的加入顺序调换,此时步骤(3)改为:将天花粉粉末A在70℃用6倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为55W,过滤后取滤液A备用,滤渣和赤芍粉末A一起混合后,在55℃用6倍75%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后和赤芍粉末B一起混合,在35℃用粉碎机进行粉碎,转速为550r/min,干燥后过70目筛,得到的产品在85℃用7倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为75W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后和天花粉粉末B一起混合,在45℃用粉碎机进行粉碎,转速为700r/min,干燥后过90目筛,得到的产品在45℃用7倍85%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液D。
对比例14
本对比例与实施例2的区别在于,天花粉和芍药均用水萃取,此时步骤(3)改为:将天花粉粉末A在70℃用6倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为55W,过滤后取滤液A备用,滤渣和赤芍粉末A一起混合后,在55℃用6倍水辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后和天花粉粉末B一起混合,在35℃用粉碎机进行粉碎,转速为550r/min,干燥后过70目筛,得到的产品在85℃用7倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为75W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后和赤芍粉末B一起混合,在45℃用粉碎机进行粉碎,转速为700r/min,干燥后过90目筛,得到的产品在45℃用7倍水辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液D。
对比例15
本对比例与实施例2的区别在于,天花粉和芍药均用乙醇萃取,此时步骤(3)改为:将天花粉粉末A在70℃用6倍75%乙醇溶液辅助超声萃取2.5h,超声功率为55W,过滤后取滤液A备用,滤渣和赤芍粉末A一起混合后,在55℃用6倍75%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后和天花粉粉末B一起混合,在35℃用粉碎机进行粉碎,转速为550r/min,干燥后过70目筛,得到的产品在85℃用7倍85%乙醇溶液辅助超声萃取2.5h,超声功率为75W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后和赤芍粉末B一起混合,在45℃用粉碎机进行粉碎,转速为700r/min,干燥后过90目筛,得到的产品在45℃用7倍85%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液D。
对比例16
本对比例与实施例2的区别在于,将天花粉和芍药的提取温度改变,此时步骤(3)改为:将天花粉粉末A在55℃用6倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为55W,过滤后取滤液A备用,滤渣和赤芍粉末A一起混合后,在70℃用6倍75%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后和天花粉粉末B一起混合,在35℃用粉碎机进行粉碎,转速为550r/min,干燥后过70目筛,得到的产品在45℃用7倍水辅助超声萃取2.5h,超声功率为75W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后和赤芍粉末B一起混合,在45℃用粉碎机进行粉碎,转速为700r/min,干燥后过90目筛,得到的产品在85℃用7倍85%乙醇溶液辅助超声萃取1.5h,超声功率为65W,过滤后取滤液D。
将实施例1~3和对比例11~16制得的天花粉和赤芍的提取物,用紫外可见分光光度计,分别在595nm、622nm和243nm处测定吸光度,通过线性回归方程计算得各有效成分的含量,并计算得出提取率,结果如下表5。
表 5
由表5中结果可知,实施例1~3天花粉和赤芍中天花粉蛋白、多糖和总苷的提取率均高于对比例11~16,特别较对比例11中天花粉和赤芍单独提取时的提取率存在明显优势,可知按照本发明设计的天花粉和赤芍的提取方法,对有效成分进行深度提取,提高了天花粉蛋白、多糖和总苷的提取率,保留了药效。
为了对比血竭的炮制方法对提取率的影响,提供12组对比例,具体如下:
对比例17
本对比例与实施例3的区别在于,删除步骤(2),不进行水处理,此时步骤(3)改为:将步骤(1)得到的血竭粉末投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,在90W功率和50℃条件下超微粉碎成粒径为20μm粉末,然后升温至80℃,在120W功率条件下超微粉碎成粒径为10μm粉末,接着降温至20℃,在150W功率下超微粉碎成粒径为5μm粉末,即得成品。
对比例18
本对比例与实施例3的区别在于,不进行沸石粉处理,此时步骤(3)改为:将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,在90W功率和50℃条件下超微粉碎成粒径为20μm粉末,然后升温至80℃,在120W功率条件下超微粉碎成粒径为10μm粉末,接着降温至20℃,在150W功率下超微粉碎成粒径为5μm粉末,即得成品。
对比例19
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)中血竭混悬液过滤得到的滤渣烘干至含水率为5%。
对比例20
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)中血竭混悬液过滤得到的滤渣烘干至含水率为35%。
对比例21
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)改为:将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,然后升温至80℃,在120W功率条件下超微粉碎成粒径为10μm粉末,接着降温至20℃,在150W功率下超微粉碎成粒径为5μm粉末,即得成品。
对比例22
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)改为:将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,在90W功率和50℃条件下超微粉碎成粒径为20μm粉末,然后降温至20℃,在150W功率下超微粉碎成粒径为5μm粉末,即得成品。
对比例23
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)改为:将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,在90W功率和50℃条件下超微粉碎成粒径为20μm粉末,然后升温至80℃,在120W功率条件下超微粉碎成粒径为10μm粉末即得成品。
对比例24
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)改为:将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,降温至20℃,在150W功率下超微粉碎成粒径为5μm粉末,即得成品。
对比例25
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)改为:将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,然后升温至80℃,在120W功率条件下超微粉碎成粒径为10μm粉末,即得成品。
对比例26
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)改为:将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,在90W功率和50℃条件下超微粉碎成粒径为20μm粉末,即得成品。
对比例27
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)改为:将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,在90W功率和50℃条件下超微粉碎成粒径为20μm粉末,然后降温至20℃,在120W功率条件下超微粉碎成粒径为10μm粉末,接着升温至80℃,在150W功率下超微粉碎成粒径为5μm粉末,即得成品。
对比例28
本对比例与实施例3的区别在于,将步骤(3)改为:将血竭混悬液过滤,取滤渣在40℃烘干机中烘干至含水率为30%,然后投入超微粉碎机中,加入1.5倍量的沸石粉,在150W功率和50℃条件下超微粉碎成粒径为20μm粉末,然后升温至80℃,在120W功率条件下超微粉碎成粒径为10μm粉末,接着降温至20℃,在90W功率下超微粉碎成粒径为5μm粉末,即得成品。
称取原装血竭块1g,按照实施例1~3和对比例17~28方法进行炮制,分别对炮制前的原装血竭块以及炮制后的血竭成品的有效成分进行质量测定。高效液相色谱仪采用HPLC峰面积归一法和线性回归方程,选取500-600nm作为最大吸收波长,测定血竭素的质量,结果如下表6。
表6
由表6中结果可知,本发明实施例1~3炮制后的血竭,其有效成分血竭素的损失率均低于对比例17~28,可知按照本发明设计的血竭的炮制方法,能够减少加工过程中有效成分的损失,提高药效。
本发明的有益效果在于:本发明提供了一种治疗乳腺癌的中药组合物及其制备方法,通过特定配方制备的中药组合物,尤其是抗癌药材天花粉、血竭和赤芍的配合,能够活血化瘀化解肿块,然后再杀死癌细胞,抗乳腺癌效果明显。
最后应说明的是,以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种治疗乳腺癌的中药组合物,其特征在于:所述中药组合物的组分及其重量份数为:炒鳖甲10~15份、炒地榆8~12份、红花8~10份、制半夏6~8份、杜仲8~10份、知母8~10份、田七2~4份、山柰4~8份、冬虫夏草3~5份、制南星6~9份、苍耳子8~10份、红豆蒄8~10份、天花粉8~10份、血竭4~6份和赤芍6~8份,所述天花粉和赤芍采用阶段式混合提取方法,所述血竭采用水处理+沸石粉处理的方法进行炮制。
2.根据权利要求1所述的治疗乳腺癌的中药组合物,其特征在于:所述天花粉和赤芍的提取方法为:
(1)分别称取天花粉和赤芍,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为400~500r/min,干燥后过40~60目筛,分别得到天花粉粉末和赤芍粉末;
(2)分别将天花粉粉末和赤芍粉末对半分,得天花粉粉末A和天花粉粉末B,赤芍粉末A和赤芍粉末B;
(3)将天花粉粉末A在60~80℃用5~7倍水辅助超声萃取2~3h,超声功率为50~60W,过滤后取滤液A备用,滤渣和赤芍粉末A一起混合后,在50~60℃用5~7倍70~80%乙醇溶液辅助超声萃取1~2h,超声功率为60~70W,过滤后取滤液B备用,滤渣干燥后和天花粉粉末B一起混合,在30~40℃用粉碎机进行粉碎,转速为500~600r/min,干燥后过60~80目筛,得到的产品在80~90℃用6~8倍水辅助超声萃取2~3h,超声功率为70~80W,过滤后取滤液C备用,滤渣干燥后和赤芍粉末B一起混合,在40~50℃用粉碎机进行粉碎,转速为600~800r/min,干燥后过80~100目筛,得到的产品在40~50℃用6~8倍80~90%乙醇溶液辅助超声萃取1~2h,超声功率为60~70W,过滤后取滤液D;
(4)分别将滤液A、B、C和D蒸发溶剂后,混合在一起,即得天花粉和赤芍的提取物成品。
3.根据权利要求1所述的治疗乳腺癌的中药组合物,其特征在于:所述血竭的炮制方法为:
(1)称取原装血竭块,30℃烘干后,在常温下用粉碎机进行粉碎,转速为500~600r/min,干燥后过30~40目筛;
(2)将步骤(1)得到的产品投入高剪切分散机,然后加入3~5倍的水,在30~50℃和8000~9000r/min转速下分散1~2h,然后升温至60~80℃,在10000~12000r/min转速的条件下继续高速分散0.5~1h,得血竭混悬液;
(3)将血竭混悬液过滤,取滤渣在30~40℃烘干机中烘干至含水率为10~30%,然后投入超微粉碎机中,加入1~1.5倍量的沸石粉,在80~90W功率和40~50℃条件下超微粉碎成粒径为10~20μm粉末,然后升温至70~80℃,在100~120W功率条件下超微粉碎成粒径为5~10μm粉末,接着降温至15~20℃,在130~150W功率下超微粉碎成粒径为1~5μm粉末,即得成品。
4.根据权利要求1所述的治疗乳腺癌的中药组合物,其特征在于:所述炒地榆是由地榆原材料和灶心土一起炒制而成。
5.根据权利要求1~3任一所述的治疗乳腺癌的中药组合物的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰的原料处理:将五种原料洗净后去杂,70~80℃烘干后放入粉碎机中,在400~500r/min转速下进行粉碎 ,干燥后过40~60目筛,得混合粉末;
(2)红花、冬虫夏草和红豆蔻的原料处理:取红花、冬虫夏草和红豆蔻洗净后去杂,沥干后研磨成浆状物备用;
(3)田七的原料处理:取田七洗净后去杂,干燥后打成1~3mm颗粒后备用;
(4)制半夏、制南星和苍耳子的处理:取制半夏、制南星和苍耳子混合,然后捣碎备用;
(5)先取步骤(1)处理得到的炒鳖甲、炒地榆、杜仲、知母和山柰混合粉末放入砂锅中,加入冷水浸泡并搅拌5~8min,然后加入步骤(2)处理后的红花、冬虫夏草和红豆蔻的浆状物和步骤(3)处理后得的田七颗粒,继续浸泡并搅拌10~15min;
(6)将装有中药的砂锅加盖后移至明火中煎煮,先大火煎煮至40~60℃后,加入步骤(4)处理后的制半夏、制南星和苍耳子,搅拌均匀然后继续煎煮至80~90℃,然后再加入天花粉和赤芍的提取物以及炮制好的血竭,搅拌均匀然后调小火量保持慢火微沸状态煎煮13~15min后关火,即得治疗乳腺癌的中药组合物汤剂。
6.根据权利要求4所述的治疗乳腺癌的中药组合物的制备方法,其特征在于:所述步骤(4)中加入的冷水量为800~900mL。
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田美欣等: "指导乳腺癌患者口服化痰散结方对化疗前后P-gp表达的影响", 《齐鲁护理杂志》 * |
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