CN111733111A - 一株植物乳杆菌nx-1及其在制备降血糖药物中的应用 - Google Patents

一株植物乳杆菌nx-1及其在制备降血糖药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一株植物乳杆菌NX‑1及其在制备降血糖药物中的应用，属于微生物技术领域。本发明公开的一株植物乳杆菌NX‑1，保藏编号为CGMCC No.20109。植物乳杆菌NX‑1未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液对α‑葡萄糖苷酶和α‑淀粉酶均具有较强的抑制作用；且均能显著降低斑马鱼高血糖模型体内的葡萄糖含量。本发明公开的植物乳杆菌NX‑1在制备治疗和/或预防糖尿病药物方面有巨大的潜在应用前景。

Description

一株植物乳杆菌NX-1及其在制备降血糖药物中的应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，更具体的说是涉及一株植物乳杆菌NX-1及其在制备降血糖药物中的应用。
背景技术
糖尿病是一种严重代谢性疾病，其特征是由于胰岛素生产受损(1型糖尿病/T1DM)或胰岛素抵抗(2型糖尿病/T2DM)而引起的慢性高血糖症。据国际糖尿病联盟(International Diabetes Federation，IDF)统计，2019年全球约4.63亿20-79岁成人患糖尿病；预计到2030年，糖尿病患者会达到5.784亿；预计到2045年，糖尿病患者会达到7.002亿。2019年糖尿病患者数量最多的前三位国家分别为中国、印度和美国，糖尿病患者(20-79岁)数量分别为1.164亿、 7700万和3100万。近年来，糖尿病已成为继肿瘤、心血管疾病之后第三位严重危害人类健康的慢性疾病。因此，糖尿病的治疗已成为全球性的问题，需要找到有效的治疗方法。目前治疗糖尿病的主要方法是通过注射胰岛素和口服降糖药来控制患者血糖指数。但是胰岛素注射液的使用易导致注射部位产生炎症、肌肉萎缩等副作用；另外，降糖药物通常也会引起一系列不良反应，如腹泻、肠胃气胀和耐药性等问题，使得其应用受到了很大程度的限制。因此，寻找一种疗效可靠、毒副作用小的治疗方式成为主要研究方向。与传统药物治疗相比，具有降血糖功能的益生菌因其副作用小并且具有其他益生功效等特点，而被广泛关注。
益生菌是对宿主健康和生理功能产生有益作用的活性微生物，如乳杆菌和双歧杆菌等。大量研究表明，益生菌在提高免疫力、维持肠道微生态平衡、降低胆固醇、缓解过敏、减肥、降血糖等方面发挥着重要的作用，已被广泛用于开发功能性食品或膳食补充剂。虽然当前国内市场上益生菌制品种类繁多，但是缺乏拥有我国自主知识产权的功能性菌株。国内生产企业所用益生菌菌种长期依赖进口，而且国外菌株未必适合我国居民肠道生理状况。另外，益生菌的功能缺乏有力的科学研究证据，严重影响了益生菌及其制品的推广。基于此，针对菌种资源的功能深入挖掘，筛选出拥有自主知识产权、具有特定功能性质、适合中国人群生理特性的新型益生菌菌株，对提高我国益生菌生产企业的核心竞争力，促进我国益生菌制品发展尤为重要。
因此，提供一株植物乳杆菌NX-1及其在制备降血糖药物中的应用是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一株植物乳杆菌NX-1及其在制备降血糖药物中的应用。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum NX-1，其保藏编号为CGMCC No.20109，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称 CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2020年06月19日，分类命名为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum。
进一步，所述的一株植物乳杆菌NX-1在制备降血糖药物中的应用。
进一步，所述植物乳杆菌NX-1为灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。
进一步，所述植物乳杆菌NX-1为未灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。
进一步，所述的一株植物乳杆菌NX-1在抑制α-葡萄糖苷酶或α-淀粉酶中的应用。
进一步，所述植物乳杆菌NX-1为灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。
进一步，所述植物乳杆菌NX-1为未灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。
本发明所述新型植物乳杆菌NX-1，在体外具有较强的抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的作用，具备应用于体内调节血糖水平的潜能；并通过斑马鱼高血糖模型证实其具有降低斑马鱼体内葡萄糖含量的益生功效。
本发明所述在体外具有抑制抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的作用，同时也能显著降低斑马鱼高血糖模型体内葡萄糖含量的菌株，包括菌株未灭活与灭活的发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)、细胞破碎物上清液(胞内物)。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明公开提供了一株植物乳杆菌NX-1及其在制备降血糖药物中的应用，新型植物乳杆菌NX-1是从自然发酵泡菜液中分离筛选得到的，在体外具有较强的抑制α-葡萄糖苷酶和α- 淀粉酶的作用，在体内能显著降低斑马鱼高血糖模型体内葡萄糖含量，具备应用于体内调节血糖水平的潜能，此为利用新型植物乳杆菌NX-1开发预防或治疗糖尿病的益生菌制剂提供理论参考和指导依据。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为本发明新型植物乳杆菌NX-1的MALDI-TOF MS蛋白指纹图谱；
图2为本发明新型植物乳杆菌NX-1形成的菌落形态图；
图3为本发明新型植物乳杆菌NX-1革兰氏染色后的显微形态观察；
图4为本发明新型植物乳杆菌NX-1未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对α-葡萄糖苷酶的抑制率；
图5为本发明新型植物乳杆菌NX-1未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对α-淀粉酶的抑制率；
图6为本发明新型植物乳杆菌NX-1未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对高血糖斑马鱼体内的葡萄糖含量的影响；
图7为本发明新型植物乳杆菌NX-1未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液对高血糖斑马鱼的降血糖作用。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1新型植物乳杆菌NX-1分离、鉴定及保藏
(1)分离：将辣白菜发酵液经梯度稀释后，分别接种于TPY固体培养基、 MRS固体培养基和BDS固体培养基中，37℃厌氧培养48h，挑取平板上的单菌落划线分离得到纯菌落。将平板上的纯菌落接种于MRS液体培养基中， 37℃厌氧培养12～16h，加入20％甘油，置于-80℃冰箱中保存。
(2)菌株形态学鉴定：对筛选出的菌株进行革兰氏染色后于显微镜下观察，革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
(3)菌株的分子生物学鉴定：对所获得的菌株提取基因组DNA，通过 PCR技术利用16S rDNA通用引物27F和1492R扩增16S rDNA全长片段，之后进行测序，鉴定菌株的种属。
27F：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’；SEQ ID NO.1；
1492R：5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’；SEQ ID NO.2。
实验结果：从广东省广州市农家自然发酵泡菜液中筛选出的菌株，经形态观察、MALDI-TOF MS蛋白指纹图谱和16S rDNA鉴定，其中菌株NX-1 被鉴定为植物乳杆菌，其16SrDNA序列如SEQ ID NO.3所示；MALDI-TOF MS蛋白指纹图谱分别如图1所示。
GTTACCCCACCGACTTTGGGTGTTACAAACTCTCATGGTGTGACGG GCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCC GCGATTACTAGCGATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAATCCGAACTGAGAATGGCTTTAAGAGATTAGCTTACTCTCGCGAGTTCGCA ACTCGTTGTACCATCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGG GCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCA GTCTCACCAGAGTGCCCAACTTAATGCTGGCAACTGATAATAAGGGTT GCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGA CAACCATGCACCACCTGTATCCATGTCCCCGAAGGGAACGTCTAATCTC TTAGATTTGCATAGTATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTAGCTT CGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCT TTGAGTTTCAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGAATGCTTAATGCG TTAGCTGCAGCACTGAAGGGCGGAAACCCTCCAACACTTAGCATTCAT CGTTTACGGTATGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTACCCATA CTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGACAGCCGCCTTCGCCACT GGTGTTCTTCCATATATCTACGCATTTCACCGCTACACATGGAGTTCCA CTGTCCTCTTCTGCACTCAAGTTTCCCAGTTTCCGATGCACTTCTTCGGT TGAGCCGAAGGCTTTCACATCAGACTTAAAAAACCGCCTGCGCTCGCTT TACGCCCAATAAATCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGC TGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAAATACCGTCAATACC TGAACAGTTACTCTCAGATATGTTCTTCTTTAACAACAGAGTTTTACGA GCCGAAACCCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCCATCAGACTTTCGTC CATTGTGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTTTGGGCCGTG TCTCAGTCCCAATGTGGCCGATTACCCTCTCAGGTCGGCTACGTATCAT TGCCATGGTGAGCCGTTACCCCACCATCTAGCTAATACGCCGCGGGACC ATCCAAAAGTGATAGCCGAAGCCATCTTTCAAGCTCGGACCATGCGGT CCAAGTTGTTATGCGGTATTAGCATCTGTTTCCAGGTGTTATCCCCCGCT TCTGGGCAGGTTTCCCACGTGTTACTCACCAGTTCGCCACTCACTCAAA TGTAAATCATGATGCAAGCACCAATCAATACCAGAGTT；SEQ IDNO.3。
该菌单菌落接种到MRS固体培养基上37℃厌氧生长良好、呈球形、灰白色菌落(图2)，革兰氏染色呈阳性(图3)。该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2020年06月19日，分类命名为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum，保藏编号为CGMCC No. 20109。
实施例2新型植物乳杆菌NX-1发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)、细胞破碎物上清液(胞内物)的制备
将新型植物乳杆菌NX-1活化培养后接种于MRS液体培养基中，37℃培养15h后，调整发酵菌浓度为109CFU/mL，4℃，6000r/min离心10min，得到培养上清液和菌体沉淀，上清液经0.22μm滤膜过滤后得发酵上清液(胞外分泌物)；菌体沉淀经PBS两次洗涤后，将菌体用PBS重新悬浮，调整细胞浓度为109CFU/mL得到菌悬液(菌体)；将洗涤重悬浓度为109CFU/mL的菌悬液用超声波破碎仪在冰浴中处理，工作3s、间隔8s，超声破碎15min， 12000×g，4℃离心30min，收集上清液，经0.22μm滤膜过滤即为细胞破碎物上清液(胞内物)。将上述得到的发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)和细胞破碎物上清液(胞内物)经100℃加热20min后，制成热灭活的发酵上清液(胞外分泌物)、菌悬液(菌体)、细胞破碎物上清液(胞内物)。
实施例3新型植物乳杆菌NX-1对α-葡萄糖苷酶活性的抑制能力分析
将100μL 1U/mLα-葡糖苷酶(0.1M PBS，pH 6.8)与50μL的样品(未灭活和灭活的：发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液)混合于1.5mL离心管中。在37℃水浴下预孵育10min后，添加50μL 5mM对硝基苯基-α-D- 吡喃葡萄糖苷(pNPG，0.1M PBS，pH 6.8)作为底物。酶促反应在37℃水浴下进行30min，并通过添加1mL的0.1M Na2CO3(蒸馏水)终止反应。取200μL反应液置于96孔细胞培养板中，α-葡萄糖苷酶活性是通过在405nm 处测量对硝基苯酚从pNPG中的释放来确定的。没有样品的溶剂用作对照，没有底物的溶剂用作空白，阿卡波糖作阳性对照。每组试验重复三次，取其平均值。抑制百分比计算如下：
Figure BDA0002592418600000061
结果如图4所示，阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率为47.87±4.06％，说明阿卡波糖具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用，与临床结果一致。新型植物乳杆菌NX-1未灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为33.13±2.81％、18.50±1.93％和25.67±1.58％。另外，新型植物乳杆菌NX-1灭活的菌悬液、发酵上清液、细胞破碎物上清液对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为14.97±1.49％、12.70±2.14％和14.07±1.51％。因此，上述结果表明新型植物乳杆菌NX-1未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液均对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用。
实施例4新型植物乳杆菌NX-1对α-淀粉酶活性的抑制能力分析
将100μLα-淀粉酶(1.0U/mL)与100μL样品(未灭活和灭活的：发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液)预混合于5mL离心管，置于37℃水浴下预孵育5min后，加入250μL 1％淀粉(pH 6.8PBS溶解)底物开始反应。反应在37℃水浴下进行5min后添加200μL 3,5-二硝基水杨酸(DNS) 试剂溶液将反应终止。将反应混合物置于100℃水浴加热15min。并在冰浴下用2mL蒸馏水稀释。通过测定α-淀粉酶活性540nm处的吸光度。没有样品的溶剂用作对照，没有底物的溶剂用作空白，阿卡波糖作阳性对照。每组试验重复三次，取其平均值。抑制百分比计算如下：
Figure BDA0002592418600000071
结果如图5所示，阿卡波糖对α-淀粉酶的抑制率为38.36±1.81％，说明阿卡波糖具有抑制α-淀粉酶活性的作用，与临床结果一致。新型植物乳杆菌 NX-1未灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液对α-淀粉酶的抑制率分别为23.17±2.81％、10.97±0.84％和15.23±1.21％。另外，新型植物乳杆菌NX-1灭活的菌悬液、发酵上清液、细胞破碎物上清液对α-淀粉酶的抑制率分别为10.13±1.61％、6.77±0.98％和10.67±1.19％。因此，上述结果表明新型植物乳杆菌NX-1未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液均对α-淀粉酶具有较强的抑制作用。
实施例5新型植物乳杆菌NX-1降低高血糖斑马鱼体内的葡萄糖含量
阿卡波糖购自上海绿源生物科技有限公司，基础饲料(1号饲料)购自上海海圣生物实验设备有限公司。
将野生型AB系斑马鱼(5dpf)置于六孔板中。实验设置空白对照组、模型组、阳性对照组(阿卡波糖)、样品(未灭活和灭活的：菌悬液、发酵上清液、细胞破碎物上清液)干预组，每组设置3个复孔，每孔40条鱼，用蔗糖与四氧嘧啶联合处理斑马鱼(5dpf)至10天后构建糖尿病模型。然后空白对照组和模型组的斑马鱼喂食基础饲料(每次20mg)；阳性对照组喂食阿卡波糖+基础饲料(阿卡波糖和基础饲料以1：9的比例混合，每次20mg)；样品干预组喂食样品+基础饲料(样品和基础饲料以1：9的重量比混合，冷冻干燥，每次20mg)；每天两次喂食，连续喂食10天。收集斑马鱼至1.5mL 离心管，每管10条斑马鱼，每个实验组收集3管；将离心管中的水吸干后，加入100μL的乙醇，将离心管置于超声波破碎仪中超声破碎5min，12000× g，4℃离心10min，收集上清液于离心管中，转移至烘箱70℃1小时烘干。每管加入5μL的超纯水，温度37℃，摇床转速200r/min，15min后，取其中2μL，使用葡萄糖试剂盒(Sigma-Aldrich)检测上清液中葡萄糖的浓度。实验重复三次。采用SPSS 19.0软件统计处理数据，实验数据均用
Figure BDA0002592418600000082
数据表示，用单因素方差分析。各实验组与模型对照组比较：*P<0.05，**P< 0.01，***P<0.005。
Figure BDA0002592418600000081
结果见图6和图7；由图6可知，与空白对照组(1.12±0.10nmoL/fish) 相比，模型组的斑马鱼体内葡萄糖含量(4.29±0.21nmoL/fish)显著增加(P <0.005)，说明本次斑马鱼糖尿病模型建立成功。
由图6和图7可知，阿卡波糖组斑马鱼体内葡萄糖含量为1.92±0.15 nmol/fish，降糖率为74.91±4.61％，与模型组(4.29±0.21nmoL/fish)相比差异性显著(P<0.005)。因此，阿卡波糖具有降血糖的作用，与临床结果一致。新型植物乳杆菌NX-1未灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液组的斑马鱼体内葡萄糖含量分别为2.47±0.20nmoL/fish、2.91±0.15 nmoL/fish和3.03±0.22nmoL/fish，同时降糖率分别为57.44±6.45％、43.39± 4.83％和39.63±7.07％，与模型组(4.29±0.21nmoL/fish)相比差异性显著(P <0.005)。另外，新型植物乳杆菌NX-1灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液组的斑马鱼体内葡萄糖含量分别为3.21±0.15nmoL/fish、3.48± 0.16nmoL/fish和3.20±0.22nmoL/fish，同时降糖率分别为34.01±4.59％、 25.61±5.00％和34.36±7.10％，与模型组(4.29±0.21nmoL/fish)相比差异性显著(P<0.05)。因此，上述结果表明新型植物乳杆菌NX-1未灭活与灭活的发酵上清液、菌悬液、细胞破碎物上清液均具有降血糖的功效。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
序列表
<110> 广东南芯医疗科技有限公司 佛山市朗芯生物科技有限公司
<120> 一株植物乳杆菌NX-1及其在制备降血糖药物中的应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 1
agagtttgat cctggctcag 20
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 2
ggttaccttg ttacgactt 19
<210> 3
<211> 1404
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 3
gttaccccac cgactttggg tgttacaaac tctcatggtg tgacgggcgg tgtgtacaag 60
gcccgggaac gtattcaccg cggcatgctg atccgcgatt actagcgatt ccgacttcat 120
gtaggcgagt tgcagcctac aatccgaact gagaatggct ttaagagatt agcttactct 180
cgcgagttcg caactcgttg taccatccat tgtagcacgt gtgtagccca ggtcataagg 240
ggcatgatga tttgacgtca tccccacctt cctccggttt gtcaccggca gtctcaccag 300
agtgcccaac ttaatgctgg caactgataa taagggttgc gctcgttgcg ggacttaacc 360
caacatctca cgacacgagc tgacgacaac catgcaccac ctgtatccat gtccccgaag 420
ggaacgtcta atctcttaga tttgcatagt atgtcaagac ctggtaaggt tcttcgcgta 480
gcttcgaatt aaaccacatg ctccaccgct tgtgcgggcc cccgtcaatt cctttgagtt 540
tcagccttgc ggccgtactc cccaggcgga atgcttaatg cgttagctgc agcactgaag 600
ggcggaaacc ctccaacact tagcattcat cgtttacggt atggactacc agggtatcta 660
atcctgtttg ctacccatac tttcgagcct cagcgtcagt tacagaccag acagccgcct 720
tcgccactgg tgttcttcca tatatctacg catttcaccg ctacacatgg agttccactg 780
tcctcttctg cactcaagtt tcccagtttc cgatgcactt cttcggttga gccgaaggct 840
ttcacatcag acttaaaaaa ccgcctgcgc tcgctttacg cccaataaat ccggacaacg 900
cttgccacct acgtattacc gcggctgctg gcacgtagtt agccgtggct ttctggttaa 960
ataccgtcaa tacctgaaca gttactctca gatatgttct tctttaacaa cagagtttta 1020
cgagccgaaa cccttcttca ctcacgcggc gttgctccat cagactttcg tccattgtgg 1080
aagattccct actgctgcct cccgtaggag tttgggccgt gtctcagtcc caatgtggcc 1140
gattaccctc tcaggtcggc tacgtatcat tgccatggtg agccgttacc ccaccatcta 1200
gctaatacgc cgcgggacca tccaaaagtg atagccgaag ccatctttca agctcggacc 1260
atgcggtcca agttgttatg cggtattagc atctgtttcc aggtgttatc ccccgcttct 1320
gggcaggttt cccacgtgtt actcaccagt tcgccactca ctcaaatgta aatcatgatg 1380
caagcaccaa tcaataccag agtt 1404

Claims (7)

1.一株植物乳杆菌Lactobacillusplantarum NX-1，其特征在于，其保藏编号为CGMCCNo.20109。
2.权利要求1所述的一株植物乳杆菌NX-1在制备降血糖药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的一株植物乳杆菌NX-1在制备降血糖药物中的应用，其特征在于，所述植物乳杆菌NX-1为灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。
4.根据权利要求2所述的一株植物乳杆菌NX-1在制备降血糖药物中的应用，其特征在于，所述植物乳杆菌NX-1为未灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。
5.权利要求1所述的一株植物乳杆菌NX-1在抑制α-葡萄糖苷酶或α-淀粉酶中的应用。
6.根据权利要求5所述的一株植物乳杆菌NX-1在抑制α-葡萄糖苷酶或α-淀粉酶中的应用，其特征在于，所述植物乳杆菌NX-1为灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。
7.根据权利要求5所述的一株植物乳杆菌NX-1在抑制α-葡萄糖苷酶或α-淀粉酶中的应用，其特征在于，所述植物乳杆菌NX-1为未灭活的发酵上清液、菌悬液和细胞破碎物上清液。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113151072A (zh) * 2021-04-07 2021-07-23 广东南芯医疗科技有限公司 一株短双歧杆菌nx-5及其在抗氧化中的应用
CN113295636A (zh) * 2021-06-29 2021-08-24 湖北师范大学 α-葡萄糖苷酶抑制剂体内评价方法
WO2022194189A1 (zh) * 2021-03-16 2022-09-22 集美大学 一种具α-葡萄糖苷酶抑制活性的乳杆菌红毛藻发酵上清液及其用途
CN116478888A (zh) * 2023-05-29 2023-07-25 华南农业大学 一株多功能植物乳植杆菌及其应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105132318A (zh) * 2015-09-01 2015-12-09 扬州大学 植物乳杆菌Grx16及其应用
CN107475160A (zh) * 2017-09-20 2017-12-15 中国农业科学院农产品加工研究所 具有双重降糖靶点的植物乳杆菌及其应用
CN107502575A (zh) * 2017-09-20 2017-12-22 中国农业科学院农产品加工研究所 一株具有α‑葡萄糖苷酶高抑制活性的植物乳杆菌
CN108004171A (zh) * 2017-12-18 2018-05-08 富乐顿生物工程科技（北京）有限公司 一种降低α-葡萄糖苷酶活性的空间植物乳杆菌SS18-5及其应用
CN108018236A (zh) * 2017-12-18 2018-05-11 富乐顿生物工程科技（北京）有限公司 一种降低α-葡萄糖苷酶活性的空间植物乳杆菌SS18-37及其应用
CN109810912A (zh) * 2017-11-21 2019-05-28 华大精准营养（深圳）科技有限公司 一株植物乳杆菌lh-511及其应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105132318A (zh) * 2015-09-01 2015-12-09 扬州大学 植物乳杆菌Grx16及其应用
CN107475160A (zh) * 2017-09-20 2017-12-15 中国农业科学院农产品加工研究所 具有双重降糖靶点的植物乳杆菌及其应用
CN107502575A (zh) * 2017-09-20 2017-12-22 中国农业科学院农产品加工研究所 一株具有α‑葡萄糖苷酶高抑制活性的植物乳杆菌
CN109810912A (zh) * 2017-11-21 2019-05-28 华大精准营养（深圳）科技有限公司 一株植物乳杆菌lh-511及其应用
CN108004171A (zh) * 2017-12-18 2018-05-08 富乐顿生物工程科技（北京）有限公司 一种降低α-葡萄糖苷酶活性的空间植物乳杆菌SS18-5及其应用
CN108018236A (zh) * 2017-12-18 2018-05-11 富乐顿生物工程科技（北京）有限公司 一种降低α-葡萄糖苷酶活性的空间植物乳杆菌SS18-37及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘顺 等: "具有潜在降血糖作用乳酸菌的筛选", 《营养与保健》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022194189A1 (zh) * 2021-03-16 2022-09-22 集美大学 一种具α-葡萄糖苷酶抑制活性的乳杆菌红毛藻发酵上清液及其用途
CN113151072A (zh) * 2021-04-07 2021-07-23 广东南芯医疗科技有限公司 一株短双歧杆菌nx-5及其在抗氧化中的应用
CN113295636A (zh) * 2021-06-29 2021-08-24 湖北师范大学 α-葡萄糖苷酶抑制剂体内评价方法
CN116478888A (zh) * 2023-05-29 2023-07-25 华南农业大学 一株多功能植物乳植杆菌及其应用
CN116478888B (zh) * 2023-05-29 2024-06-28 湖南铠佑生物科技有限公司 一株多功能植物乳植杆菌及其应用

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