CN111548976B - 一株多粘类芽孢杆菌菌株及其应用 - Google Patents

一株多粘类芽孢杆菌菌株及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一株多粘类芽孢杆菌菌株及其应用，所述菌株为多粘类芽孢杆菌LQ19，保藏编号为CGMCC NO.19097。本发明所述的菌株抑菌谱广，不仅对园艺作物和大田作物的根茎部腐烂病病菌的抑菌效果高达73%以上，而且对作物叶部真菌性和细菌性病菌的抑菌效果高达78%以上，可以用于土传病害和气传病害的防治。同时，本发明所述的菌株对作物安全，能促进种子萌发和作物的生长，药效持效性好，不易产生抗药性，可以有效减少化学农药的使用量，有利于作物的无公害生产，在植物病害的生物防治中具有非常广泛的应用前景。

Description

一株多粘类芽孢杆菌菌株及其应用
技术领域
本发明属于杀菌剂技术领域，涉及一株多粘类芽孢杆菌菌株及其应用。
背景技术
作物根茎腐烂病，存在难防难控的特点，多由镰刀菌、腐霉菌等引起，表现为根茎部变色、腐烂、严重时作物出现猝倒或枯萎、死亡，威胁着作物的健康生长。目前作物根茎部腐烂病的防治主要通过化学药剂种子处理或灌根方式防治，叶部病害主要通过化学药剂喷雾方式防治，虽然化学药剂在病害防治中优势突出，但因其不科学使用，造成抗药性、生态环境污染和食品安全等问题日益突出。随着人们环保意识增强，对食品安全问题的重视，以及农业可持续发展的要求，实施减药增效绿色防控技术是植保行业发展的大势所趋，使得生物防治成为当前研究和开发的热点。
多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）是一种具有广谱抑菌活性的细菌，可有效防治植物细菌性和真菌性病害，对植物具有明显的促生长、增产作用。它以芽孢形式存在，耐温性好，质量稳定，药效持久，无任何药害和残留，是无公害、绿色、有机蔬菜生产的首选微生物制剂。在农业病害防治中多粘类芽孢杆菌具有较好的应用前景。
发明内容
本发明的目的在于提供一株多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）及其应用。
第一方面，本发明要求保护一株多粘类芽孢杆菌：
本发明所要求保护的菌株为多粘类芽孢杆菌LQ19，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No .19097，保藏时间为2019年12月05日。所述多粘类芽孢杆菌菌株（Paenibacillus polymyxa）LQ19核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
保藏说明
菌种名称：多粘类芽孢杆菌
拉丁名：Paenibacillus polymyxa
菌株编号：LQ19
保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
保藏机构简称：CGMCC
地址：北京市朝阳区北辰西路1 号院3 号
保藏日期：2019年12月05日
保藏中心登记入册编号：CGMCC No .19097
多粘类芽孢杆菌菌落特征：
在NA培养基上菌落表面光滑，呈乳白色，半透明，挑起有粘性。菌体为杆状，单个或排列分布，大小为（1.1-2.3）μm×（0.4-0.7）μm。芽孢呈椭圆形，胞囊膨大，中生到端生。革兰氏染色为阳性，鞭毛为周生。所述多粘类芽孢杆菌菌株（Paenibacillus polymyxa）LQ19核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
第二方面，本发明要求保护一种微生物制剂或菌肥。
本发明所要求保护的微生物制剂或菌肥含有所述多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）LQ19。进一步地，所述微生物制剂可为生防制剂或菌肥。更进一步地，所述生防制剂可由所述多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）LQ19和辅料或助剂配制而成，辅料如草炭、作物秸秆、稻壳、动物粪便等，助剂主要包括载体、乳化剂、分散剂、润湿剂等。所述菌株可加工多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、颗粒剂、可湿性粉剂、微胶囊剂或水分散粒剂。
第三方面，本发明要求保护一种菌悬液。
本发明所要求保护的菌悬液为所述多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）LQ19的菌悬液，其中所述多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）LQ19的含量为1.0×107～1.0×1010cfu/mL。
第四方面，本发明要求保护所述多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）LQ19或所述微生物制剂、菌肥或所述菌悬液在如下任一中的应用：
A1) 促进生长和拮抗病原菌的菌剂或菌肥
A2) 拮抗病原菌的菌剂或菌肥
A3) 促进生长的菌剂或菌肥
第五方面，本发明要求保护所述多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）LQ19或所述微生物制剂、菌肥或所述菌悬液的施药方式，为撒施、蘸根、灌根、喷雾或喷淋、拌种、种子包衣中的一种或多种。
第六方面，本发明要求保护所述多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）LQ19或所述微生物制剂、菌肥或所述菌悬液在番茄、香菜、芹菜、草莓、黄瓜、玉米、辣椒、油菜等园艺作物和大田作物的卵菌性、真菌性和/或细菌病害防治中的应用。
本发明公开的多粘类芽孢杆菌菌株（Paenibacillus polymyxa）LQ19核苷酸序列SEQ ID NO:1如下：
CACTTTTTACCACCTTTCGGCGGCTGGCTCCTTGCGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTGTAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGACCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCAATTCCGACTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAATCCGAACTGAGACCGGCTTTTCTAGGATTGGCTCCACCTCGCGGCTTCGCTTCCCGTTGTACCGGCCATTGTAGTACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCTGCTTAGAGTGCCCAGCTTGACCTGCTGGCAACTAAGCATAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCTCCTCTGTCCCGAAGGAAAGGCCTATCTCTAGACCGGTCAGAGGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATACTCCACTGCTTGTGCGGGTCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGTCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAATGCTTAATGTGTTAACTTCGGCACCAAGGGTATCGAAACCCCTAACACCTAGCATTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGCGCCTCAGCGTCAGTTACAGCCCAGAGAGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACCGCTACACGTGGAATTCCACTCTCCTCTTCTGCACTCAAGCTCCCCAGTTTCCAGTGCGACCCGAAGTTGAGCCTCGGGATTAAACACCAGACTTAAAGAGCCGCCTGCGCGCGCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCCCCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGGGGCTTTCTTTCTCAGGTACCGTCACCTCCTAGTAG
本发明公开的多粘类芽孢杆菌菌株所具有的积极效果在于：
（1）本发明提供的多粘类芽孢杆菌菌株（Paenibacillus polymyxa）LQ19对人、畜、农作物安全，对环境友好。
（2）本发明提供的多粘类芽孢杆菌菌株（Paenibacillus polymyxa）LQ19杀菌谱广，抑菌活性高，可以降低化学农药的使用量，有利于延缓病原菌抗药性的产生，延长农药的使用寿命，降低对生态环境的污染和提高食品安全性，促进农业可持续发展。
附图说明
图1：菌株LQ19在NA培养基上的菌落形态图；
图2：菌株LQ19对病原菌菌丝生长的抑制作用图；实线框为对照，虚线框为多粘类芽孢杆菌处理。编号1-4分别代表辣椒炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、芹菜茎基腐病菌（Fusarium oxysporum f. sp.apii）、番茄灰叶斑病菌（Corynespora cassiicola）和黄瓜靶斑病菌（Corynespora cassiicola）；编号5-8分别代表草莓枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. fragariae）、黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp.cucumebrium Owen）、香菜根腐病菌（F. oxysporum f. sp. coriandrii）、和玉米茎基腐病菌（Fusarium graminearum）；
图3：菌株LQ19浸种处理对黄瓜生长的影响图；左：多粘类芽孢杆菌处理 右：对照处理；
图4：菌株LQ19灌根处理对黄瓜生长的影响图；左：多粘类芽孢杆菌处理 右：对照处理;
图5：菌株LQ19浸种处理对香菜根腐病的防治效果图；左：多粘类芽孢杆菌处理右：对照处理；
图6：菌株LQ19喷雾处理对黄瓜灰霉病防治效果图。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步的详细说明，但本发明绝非仅限于这些实施例。以下实施例仅为本发明较优选的实施例，仅仅用于阐述本发明，不能理解为对本发明范围的限制。应当指出的是，凡在本发明的实质和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包括在本发明的保护范围之内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
如无特殊说明，本发明所采用的各种材料和试剂均能通过商业方式获得。同样，所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。本发明提供了一株多粘类芽孢杆菌，申请人命名为LQ19，已于2019年12月05日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No .19097。
实施例1
多粘类芽孢杆菌LQ19的分离与鉴定
一、 多粘类芽孢杆菌菌株LQ19的分离
从天津市武清区种植黄瓜的大棚采集根际土样，将土样放入装有无菌水和灭菌玻璃珠的小三角瓶中，200rpm/min振荡20min；取振荡后的悬液做系列梯度稀释，103、104倍稀释的菌悬液各吸取200μL均匀涂布NA培养基，置28℃培养12h后，挑取单菌落，NA培养基平板上用平板划线法进行菌种纯化。将分离纯化所得的其中一个菌株命名为LQ19。
二、多粘类芽孢杆菌菌株LQ19的鉴定
1.形态特征观察
参考《伯杰氏***细菌学手册》（Garrity, 2001）和《一般细菌学常用鉴定方法》（东秀珠等，2001），按照常规方法进行。
多粘类芽孢杆菌LQ19的形态学特征如下：在NA培养基上菌落表面光滑，呈乳白色，半透明，挑起有粘性。菌体为杆状，单个或排列分布，大小为（1.1-2.3）μm×（0.4-0.7）μm。芽孢呈椭圆形，胞囊膨大，中生到端生。革兰氏染色为阳性，鞭毛为周生。
2.16S rDNA 序列扩增和分析
利用细菌基因组DNA提取试剂盒（TIANGEN公司）提取基因组DNA作为PCR反映的模板。PCR引物（27F 5’-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3’和1492R 5’-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3）由苏州金维智生物科技有限公司（天津）合成。使用Applied Biosystem Veriti PCR 仪扩增细菌的16S rDNA. 反应体系: 2×TSINGKE Master Mix 12.5μL; 27F (10pmol/L) 1μL；1492R (10pmol/L) 1μL; DNA模板 1μL; ddH2O补至25μL。PCR反应条件：94℃预变性5min，94℃变性30min，57℃退火1min，72℃延伸1min，72℃最后延伸10min，30个循环。PCR扩增产物由苏州金维智生物科技有限公司（天津）纯化并测序。将菌株的16S rDNA序列在GenBank核酸序列数据库进行序列比较分析。
结果表明测得的多粘类芽孢杆菌LQ19 16S rDNA序列部分长度为1019bp，如SEQIDNO.1。将序列上传至GeneBank数据库得到GeneBank no. MT645705，经BLASTn序列比对分析发现多粘类芽孢杆菌LQ19 16S rDNA序列与Paenibacillus polymyxa strain TF2H2（KY454473.1）相似度99.80%。
实施例2
多粘类芽孢杆菌菌株LQ19对13种病原菌的抑菌作用
A、供试病原菌
供试病原卵菌包括番茄猝倒病菌；供试病原真菌包括香菜根腐病菌、芹菜茎基腐病菌、草莓枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、玉米茎基腐病菌、黄瓜靶斑病菌、辣椒炭疽病菌、黄瓜灰霉病菌、油菜菌核病菌、番茄灰叶斑病菌和芹菜叶斑病；供试病原细菌包括黄瓜细菌性角斑病菌。以上供试菌株均由天津市植物保护研究所种苗病害研究室分离保存所有，可免费提供用于本发明相关实验所用，不可作为其它用途。
B、试验方法：
方法一：本实验采用菌丝生长速率法测定菌株LQ19对病原真菌和病原细菌的抑制作用，具体如下：将菌株LQ19菌液加入融化好的PDA中，使终浓度为106cfu/mL，混合均匀后倒入培养皿中，待培养基冷却凝固后，将病原菌菌饼接入PDA上，设置不含LQ19菌液处理为空白对照，25℃恒温培养，培养24-72h调查各处理病原菌生长直径，计算抑制率。每处理重复3次，取平均值。
方法二：本实验采用抑菌圈测定菌株LQ19对病原细菌的抑制作用，具体如下：在LB培养基上接种细菌病原菌进行活化，然后挑取单菌落移入50mL NB培养液中，于37℃、170rpm振荡培养2d，用融化的NA稀释至105cfu/mL，倒入灭菌的培养皿中，待凝固后在NA平板中央点接本发明所述菌株LQ19，37℃培养过夜，测量抑菌圈大小，并计算抑制率。结果详见详见表1，抑菌试验照片见图2。
表1 本发明所述菌株LQ19对病原菌菌丝生长的抑制
Figure 594520DEST_PATH_IMAGE001
表1结果显示本发明所述菌株LQ19对13种病原菌均有强抑制作用，抑制率在73.31%~92.36%，可以有效防治上述病害。
实施例3
本发明所述菌株LQ19对黄瓜生长的影响
将本发明所述菌株LQ19悬浮剂用清水稀释至107cfu/mL，浸种处理黄瓜种子24h，然后将浸种处理的种子播种于装有营养土塑料花盆（直径8cm），置于25℃光照培养箱中培养，光照时间为12h，对照组用清水浸种处理，每个处理设3个重复。处理14d后记录出苗率、株高、根长、鲜重，详见表2和图3。
播后7d，从对照组取出5盆黄瓜苗，并使用浓度为107cfu/mL的菌株LQ19灌根处理黄瓜苗，每盆菌液用量为15 mL，处理7天后记录出苗率、株高、根长、鲜重，详见表2和图4。
表2 本发明所述菌株LQ19对黄瓜生长的影响
Figure 885824DEST_PATH_IMAGE002
表2结果显示本发明所述菌株LQ19于播前浸种处理黄瓜种子24h，播后14d其出苗率较对照处理提高2.31%，株高、根长、单株鲜重较对照处理分别提高12.25%、45.59%和26.07%（图3）。播后7d使用多粘类芽孢杆菌灌根处理黄瓜苗，处理7d后黄瓜苗株高、根长和单株鲜重分别较对照处理提高21.83%、67.08%和39.82%（图4）。表明本发明所述菌株LQ19浸种处理对黄瓜种子萌发有促进作用，浸种和灌根处理对黄瓜幼苗生长均有促进作用。
实施例4
本发明所述菌株LQ19浸种处理对香菜根腐病的防治效果
将本发明所述菌株LQ19悬浮剂用清水稀释至107cfu/mL，浸种处理香菜种子24h，然后将浸种处理的种子播种于装有带菌土塑料花盆（直径8cm），带菌土为田间根腐病发生地块土壤，置于20℃光照培养箱中培养，光照时间为12h，对照组用无菌水浸种处理，每个处理设3个重复。处理30d后记录出苗和死苗情况、测量株高、根长和鲜重。防效按式（1）和（2）计算，表中数据为3个重复处理的平均值，试验结果详见表3和图5。
死苗率（%）=死苗数/总苗数×100 （1）
防效（%）=（对照死苗率-处理死苗率）/对照死苗率×100 （2）
表3 本发明所述菌株LQ19对香菜根腐病的防治效果
Figure 887278DEST_PATH_IMAGE003
表3结果显示：本发明所述菌株LQ19于播种前浸种处理香菜种子24h，播后30d香菜种子出苗率较对照处理提高了15%，菌株LQ19处理降低香菜根腐病的发生，防治效果达到74.83%。菌株LQ19处理可以促进香菜植株生长，其株高、根长和鲜重分别提高16.86%、23.06%和23.81%。表明本发明所述菌株LQ19浸种处理香菜种子不仅可以促进香菜种子萌发和幼苗生长，而且对根腐病有较好的防治效果。
实施例5
本发明所述菌株LQ19喷雾处理对黄瓜病害的防治效果
分别将直径4mm灰霉病菌和靶斑病菌的菌饼接种到不同株黄瓜幼苗叶片上，接种24h后，用清水将本发明所述菌株LQ19可湿性粉剂稀释至最终浓度为107cfu/mL，对黄瓜叶片进行喷雾处理，以清水处理为对照，每个处理重复3次，详见表4。
表4 本发明所述菌株LQ19喷雾处理对黄瓜病害的防治效果
Figure 555020DEST_PATH_IMAGE004
表4结果显示本发明所述菌株LQ19喷雾处理对黄瓜灰霉病和靶斑病的防治效果分别为84.18%和77.78%。表明本发明所述菌株LQ19喷雾处理对黄瓜灰霉病和靶斑病有较好的防治效果。
实施例6
多粘类芽孢杆菌LQ19菌悬液的制备
将纯化后的多粘类芽孢杆菌LQ19在NB培养基中28℃，120rpm振荡培养48h获得种子液，然后按照种子液和发酵培养基以体积比1:100的比例扩大培养，于28℃，120rpm振荡培养48h，大量产生多粘类芽孢杆菌的芽孢。所得菌悬液含所述多粘类芽孢杆菌LQ19的有效含量为1.0×107～1.0×1010cfu/mL。
实施例7
多粘类芽孢杆菌菌株LQ19可湿性粉剂的制备
多粘类芽孢杆菌菌株LQ19 30%、载体白炭黑 60%、十二烷基苯磺酸钠5%、2-萘磺酸甲醛聚合物钠盐 4.5%、保护剂UV-1 0.5%，混合均匀，50℃电热恒温鼓风干燥箱中持续2~3h烘干，最后经粉碎机进行超微粉碎，制成可湿性粉剂。
实施例8
多粘类芽孢杆菌菌株LQ19油悬浮剂的制备
按照以下比例称量各组分，多粘类芽孢杆菌菌株LQ19 20%，十二万基磺酸钙 8%，壬基酚聚氧乙烯醚TX-6 5%, 乙二醇 4%，有机膨润土 2%，大豆油补足 100%。先将有机膨润土加入到大豆油中加热至80℃，边加热边搅拌，待溶解后，停止加热使冷却到室温，加入其它助剂搅拌均匀，然后加入孢子搅拌1h，即得油悬浮剂。
SEQUENCE LISTING
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<213> 人工序列
<400> 1
cactttttac cacctttcgg cggctggctc cttgcggtta cctcaccgac ttcgggtgtt 60
gtaaactctc gtggtgtgac gggcggtgtg tacaagaccc gggaacgtat tcaccgcggc 120
atgctgatcc gcgattacta gcaattccga cttcatgtag gcgagttgca gcctacaatc 180
cgaactgaga ccggcttttc taggattggc tccacctcgc ggcttcgctt cccgttgtac 240
cggccattgt agtacgtgtg tagcccaggt cataaggggc atgatgattt gacgtcatcc 300
ccaccttcct ccggtttgtc accggcagtc tgcttagagt gcccagcttg acctgctggc 360
aactaagcat aagggttgcg ctcgttgcgg gacttaaccc aacatctcac gacacgagct 420
gacgacaacc atgcaccacc tgtctcctct gtcccgaagg aaaggcctat ctctagaccg 480
gtcagaggga tgtcaagacc tggtaaggtt cttcgcgttg cttcgaatta aaccacatac 540
tccactgctt gtgcgggtcc ccgtcaattc ctttgagttt cagtcttgcg accgtactcc 600
ccaggcggaa tgcttaatgt gttaacttcg gcaccaaggg tatcgaaacc cctaacacct 660
agcattcatc gtttacggcg tggactacca gggtatctaa tcctgtttgc tccccacgct 720
ttcgcgcctc agcgtcagtt acagcccaga gagtcgcctt cgccactggt gttcctccac 780
atctctacgc atttcaccgc tacacgtgga attccactct cctcttctgc actcaagctc 840
cccagtttcc agtgcgaccc gaagttgagc ctcgggatta aacaccagac ttaaagagcc 900
gcctgcgcgc gctttacgcc caataattcc ggacaacgct tgccccctac gtattaccgc 960
ggctgctggc acgtagttag ccggggcttt ctttctcagg taccgtcacc tcctagtag 1019

Claims (15)

1.一株多粘类芽孢杆菌菌株，其特征在于，所述菌株为多粘类芽孢杆菌菌株LQ19，于2019年12月05日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.19097；所述多粘类芽孢杆菌菌株（Paenibacillus polymyxa）LQ19核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.权利要求1所述一株多粘类芽孢杆菌菌株LQ19在防治园艺作物和大田作物根茎腐烂病和叶部病害中应用，或在制备病害的微生物抑菌剂或菌肥中的应用。
3.权利要求2所述应用，其中所述病害为卵菌性、真菌性和/或细菌性病原菌。
4.权利要求3所述应用，其中所述卵菌性病害为番茄猝倒病；所述真菌性病原菌选自如下病原菌的一种或两种以上：香菜根腐病菌、芹菜茎基腐病菌、草莓枯萎病病菌、黄瓜枯萎病菌、玉米茎基腐病菌、黄瓜靶斑病菌、辣椒炭疽病菌、黄瓜灰霉病菌、油菜菌核病菌、番茄灰叶斑病菌和芹菜叶斑病；所述细菌性病原菌为黄瓜细菌性角斑病。
5.权利要求1所述一株多粘类芽孢杆菌菌株制成的发酵液，其特征在于所述多粘类芽孢杆菌的菌浓度为1×107~1×1010cfu/g。
6.权利要求1所述一株多粘类芽孢杆菌菌株制成的液体菌剂，其特征在于所述多粘类芽孢杆菌的菌浓度为1×107~1×1010cfu/g。
7.权利要求1所述一株多粘类芽孢杆菌菌株制成的固体菌剂，其特征在于所述多粘类芽孢杆菌的菌浓度为1×107~1×1010cfu/g。
8.权利要求1所述一株多粘类芽孢杆菌菌株制成的菌肥，其特征在于所述多粘类芽孢杆菌的菌浓度为1×107~1×1010cfu/g。
9.权利要求5所述发酵液的制备方法，其特征在于：将纯化后的多粘类芽孢杆菌LQ19在NB培养基中28℃，120rpm振荡培养48h获得种子液，然后按照种子液和发酵培养基以体积比1:100的比例扩大培养，于28℃，120rpm振荡培养48h得到的培养物即为发酵液。
10.权利要求6所述液体菌剂的制备方法，其特征在于：将发酵液以10000rpm离心10min，收集菌体，以无菌水重新悬浮，添加防冻剂、稳定剂、分散剂、乳化剂获得液体菌剂。
11.权利要求7所述固体菌剂的制备方法，其特征在于：向菌液中添加载体、分散剂、润湿剂混匀，经超微气流粉碎、混合、造粒，通过干燥、筛分得到固体菌剂。
12.权利要求8所述菌肥的制备方法，其特征在于：将辅料草炭、作物秸秆、稻壳、动物粪便与多粘类芽孢杆菌LQ19混合发酵制得菌肥。
13.权利要求2所述应用，其特征在于：所述作物选自番茄、香菜、芹菜、草莓、黄瓜、玉米、辣椒、油菜中的一种或两种以上。
14.权利要求6-7任一项所述菌剂，其特征在于：所述任一菌剂的使用方式为撒施、蘸根、灌根、喷雾或喷淋、拌种、种子包衣中的一种或多种。
15.权利要求6-7任一项所述菌剂在促进种子萌发、提高作物株高、根长和鲜重方面的应用。
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