CN111543235A - 一种提高银杏叶片中总黄酮的方法 - Google Patents

一种提高银杏叶片中总黄酮的方法 Download PDF

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王莉
陆金凯
刘思安
毛欣雨
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    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G17/00—Cultivation of hops, vines, fruit trees, or like trees
    • A01G17/005—Cultivation methods

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Abstract

本发明公开了一种提高银杏叶片中总黄酮的方法，包括在每年的采叶期对银杏使用浓度为1.0‑1.5mM的赤霉素进行叶面喷施，或者使用0.2‑0.3mM的茉莉酸甲酯进行喷施。相对于现有技术，本发明方法操作方便，简单易行，适合在生产上进行推广。相比于正常的银杏叶片，激素处理后的银杏叶片总黄酮含量显著提高，叶片质量提高。

Description

一种提高银杏叶片中总黄酮的方法
技术领域
本发明属于银杏种植技术领域，具体涉及一种提高银杏叶片中总黄酮的方法。
背景技术
银杏(Ginkgo biloba L.)又称白果树，原产于中国，雌雄异株，是珍贵的孑遗植物,素有“活化石”之称。银杏叶、果、树皮都具有药用价值，尤其是银杏叶片，其药用价值最高。银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,GBE)由银杏叶片制备而成，其含有两种主要的生物活性成分:黄酮类化合物(24％)和萜烯内酯类化合物(6％)。据报道，银杏叶提取物具有神经保护、抗癌、保护心脏、减轻压力和增强记忆的作用，并可能对耳鸣、老年疾病和精神疾病有作用。含有银杏叶提取物的药物和补品在老年人群中广泛使用。
目前全球已经有130多个国家使用银杏叶制剂，国际市场对银杏叶片的需求稳定增长。中国拥有世界银杏资源的70％以上，中国是世界上的银杏生产大国，而不是强国，据统计中国银杏干青叶年产量达1.8万～2.0万吨，银杏叶提取物年产量达90吨，但是虽然产量大但是质量很差。随着各种国家、地方、以及行业标准的制定，对银杏叶片和银杏叶片提取物的要求越来越高，中国银杏产业面对机遇的同时也面临着巨大的挑战。因此，如何提高银杏叶片质量至关重要。
发明内容
发明目的：针对上述技术问题，本发明提供了一种提高银杏叶片中总黄酮的方法。
技术方案：为了达到上述发明目的，本发明所采用的技术方案如下：
一种提高银杏叶片中总黄酮的方法，包括在每年的采叶期对银杏使用浓度为1.0-1.5mM的赤霉素进行叶面喷施，或者使用0.2-0.3mM的茉莉酸甲酯进行喷施。
作为优选：
所述赤霉素或者茉莉酸甲酯中还添加有0.01％的Tween-20试剂。
所述银杏为1年生银杏或20年生银杏。
对于1年生银杏，使用浓度为1.0mM的赤霉素进行喷施，或者使用0.3mM的茉莉酸甲酯进行喷施。
对于20年生银杏，使用浓度为1.5mM的赤霉素进行喷施，或者使用0.2mM的茉莉酸甲酯进行喷施。
对于1年生银杏，赤霉素喷施，处理完后3天采叶；茉莉酸甲酯喷施，处理完后1天采叶。
对于20年生银杏，赤霉素喷施，处理完后1天采叶；茉莉酸甲酯喷施，处理完后1天或者2天采叶。
所述喷施，要求喷至叶片正反面全部湿润，直到滴水为止；喷施完如遇降雨天气，需再补喷一次。
有益效果：相对于现有技术，本发明具有以下优势：
(1)该方法操作方便，简单易行，适合在生产上进行推广。
(2)相比于正常的银杏叶片，激素处理后的银杏叶片总黄酮含量显著提高，叶片质量提高。
附图说明
图1不同激素处理对1年生银杏叶片总黄酮含量的影响，其中：A激素处理前和处理后；B不同浓度的GA3对叶片总黄酮含量的影响；C不同浓度的茉莉酸甲酯对叶片总黄酮含量的影响。*表示0.01<P<0.05；**表示P<0.01；***表示P<0.001。
图2不同激素处理对20年生银杏叶片总黄酮含量的影响，其中：A激素处理前和处理后；B不同浓度的GA3对叶片总黄酮含量的影响；C不同浓度的茉莉酸甲酯对叶片总黄酮含量的影响。*表示0.01<P<0.05；**表示P<0.01。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明所述的技术方案给予进一步详细的说明。
1.实施方法
步骤一：银杏叶片激素处理流程
(1)试验地点的选择
试验地点选择扬州大学银杏种质资源圃。银杏园地势平坦，通风透光，气候湿润，栽培管理水平较高。
(2)试验材料的选择
1年生银杏实验材料选择生长状态良好的盆栽小苗；20年生银杏试验材料选择资源圃内生长发育良好，向阳一侧的银杏雄株。
(3)试验材料的处理
对1年生盆栽小苗和20年生大树分别进行赤霉素和茉莉酸甲酯喷施处理。喷施时要求喷至叶片正反面全部湿润，直到滴水为止；喷施完如遇降雨天气，需再补喷一次。
(4)激素浓度的设定
按照赤霉素浓度为1.0mM、1.5mM和2.0mM；茉莉酸甲酯浓度分别为0.1mM、0.2mM和0.3mM对银杏叶片进行处理，并用清水处理的叶片作为对照。
所述赤霉素或者茉莉酸甲酯中还添加有0.01％的Tween-20试剂。
(5)取样时间的设定
在不同浓度的赤霉素和茉莉酸甲酯处理后，连续三天取样。
对于1年生银杏，赤霉素喷施，处理完后3天采叶；茉莉酸甲酯喷施，处理完后1天采叶。
对于20年生银杏，赤霉素喷施，处理完后1天采叶；茉莉酸甲酯喷施，处理完后1天或者2天采叶。
(6)相关指标测定
分别对连续三天取得的1年生和20年生的银杏叶片样品进行总黄酮含量的测定；测试方法采用紫外分光光度计法，使用Excel和SPSS 24.0等软件进行数据统计和分析。
步骤二：不同激素以及浓度的筛选
(1)对1年生银杏小苗试验的分析
如图1所示，数据统计发现，一定浓度的GA3和MeJA处理1年生银杏叶片可以显著提高叶片有效成分含量。其中赤霉素处理最佳浓度为1.0mM，且处理完第3天取样时，叶片总黄酮含量提升最明显，为清水处理的1.46倍左右。而茉莉酸甲酯处理最佳浓度为0.3mM，且处理完1天后取样，叶片总黄酮含量提升最明显，为清水处理的1.3倍左右。数据结果说明，一定浓度的激素处理，可以有效提高1年生银杏叶片的有效成分含量。
(2)对20年生银杏小苗试验的分析
如图2所示，数据统计发现，一定浓度的GA3和MeJA处理20年生银杏叶片同样可以显著提高叶片有效成分含量，但是最佳处理浓度和最佳取样时间和1年生银杏小苗不同。其中1.0mM的赤霉素处理较好，且处理完1天后取样，叶片总黄酮含量提升最明显，为清水处理的1.3倍左右。而茉莉酸甲酯处理最佳浓度为0.2mM，且处理完2天后取样，叶片总黄酮含量提升最明显，为清水处理的1.35倍左右。数据结果说明，一定浓度的激素处理，可以有效提高20年生银杏大树叶片的有效成分含量。

Claims (8)

1.一种提高银杏叶片中总黄酮的方法，其特征在于，包括在每年的采叶期对银杏使用浓度为1.0-1.5mM的赤霉素进行叶面喷施，或者使用0.2-0.3mM的茉莉酸甲酯进行喷施。
2.根据权利要求1所述的提高银杏叶片中总黄酮的方法，其特征在于，所述赤霉素或者茉莉酸甲酯中还添加有0.01％的Tween-20试剂。
3.根据权利要求1所述的提高银杏叶片中总黄酮的方法，其特征在于，所述银杏为1年生银杏或20年生银杏。
4.根据权利要求3所述的提高银杏叶片中总黄酮的方法，其特征在于，对于1年生银杏，使用浓度为1.0mM的赤霉素进行喷施，或者使用0.3mM的茉莉酸甲酯进行喷施。
5.根据权利要求3所述的提高银杏叶片中总黄酮的方法，其特征在于，对于20年生银杏，使用浓度为1.5mM的赤霉素进行喷施，或者使用0.2mM的茉莉酸甲酯进行喷施。
6.根据权利要求3所述的提高银杏叶片中总黄酮的方法，其特征在于，对于1年生银杏，赤霉素喷施，处理完后3天采叶；茉莉酸甲酯喷施，处理完后1天采叶。
7.根据权利要求3所述的提高银杏叶片中总黄酮的方法，其特征在于，对于20年生银杏，赤霉素喷施，处理完后1天采叶；茉莉酸甲酯喷施，处理完后1天或者2天采叶。
8.根据权利要求1所述的提高银杏叶片中总黄酮的方法，其特征在于，所述喷施，要求喷至叶片正反面全部湿润，直到滴水为止；喷施完如遇降雨天气，需再补喷一次。
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