CN111499756A - 一种多特异性抗体的取得方法 - Google Patents

一种多特异性抗体的取得方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于特异性抗体制备技术领域，具体的说是一种多特异性抗体的取得方法，包括盒体和盖体；所述盒体与盖体均为圆柱形设计；所述盒体侧面开设有环形槽；所述盖体靠近盒体一侧开设有第一凹槽；所述第一凹槽侧壁开设有均匀分布的第一滑槽；所述第一滑槽内通过弹簧弹性连接有限位块；所述限位块与环形槽相匹配；初始状态下所述盖体和盒体之间通过限位块与第一滑槽滑动连接；所述盒***于环形槽下方开设有滴加槽；所述盒体靠近盖体一侧内部开设有第二凹槽；所述第二凹槽内安装有培养皿；本发明通过将培养槽设置于盒体与盖体形成的空腔中与外界进行隔离封存，并设置密封管和密封盖进行再次密封处理，从而有效防止外界病菌感染。

Description

一种多特异性抗体的取得方法
技术领域
本发明属于特异性抗体制备技术领域，具体的说是一种多特异性抗体的取得方法。
背景技术
目前，生物实验室进行细胞培养时大量使用的圆形平皿(培养皿)，存在以下缺点：培养皿内无法分区，做细菌、动植物组织对比实验时，很不方便；因为是圆形，其方位没有办法辨识，很多情况下操作员会在培养皿背后用记号笔画出或者标记，这样如果擦拭掉，就只能重做试验；在动植物组织培养过程中，仅仅在皿盖上划上区域分割线，缺乏严格物理分隔，不仅在实验操作中容易造成不同处理组之间分辨困难，而且导致试验结果可靠性受到质疑；向培养皿中倒入培养基时候，无法保证培养基厚度的一致性和均匀性，大多数情况下操作员会拿着培养皿来回晃，直到培养基看似四周一样厚度，同时在多次添加培养基时极易对培养皿内部造成污染，影响实验的准确性。
中国专利发布的生物培养皿，专利号为2016111790718，包括圆形培养皿，在培养皿上壁上设有方位标记；在培养皿圆心处设有圆环形连接盘，连接盘圆周上向内均布设有若干个凹槽，在连接盘中心处上方设有具有相同圆心的环状圆台；凹槽与分隔板一端侧设有的卡片相适应，将分隔板卡接在连接盘上，分隔板为条状，是由上部实心的条板和均布横向设置在条板下部的梳齿组成，相邻梳齿间设有通过缝；卡片设置在条板与梳齿二者的连接处；培养皿与连接盘之间，以及连接盘与分隔板之间均为分体式设计，该发明虽然具备一定的分层隔绝效果，但是在实验时仍旧很容易导致外界杂菌对培养皿内部造成污染。
发明内容
为了弥补现有技术的不足，解决现有培养皿密封性能较差，在实验过程中进行添加培养基或接种细胞时极易使外界空气中的杂菌造成培养基发生污染现象的问题，本发明提出的一种多特异性抗体的取得方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一一种多特异性抗体的取得方法，该方法包括以下步骤：
S1：提取多组小鼠细胞，并将其进行体外培养，并在培养的过程中人工接种抗原，进行培养一段时间后向存活的经抗原免疫的小鼠细胞中接种另一种抗原，重复进行培养与接种多次后，得到具备多种抗原免疫的细胞；使用小鼠细胞进行人工感染抗原，从而对小鼠细胞进行筛选，可以分泌对应抗体的细胞存活，而无法分泌对应抗体的细胞死亡，经过多种抗原持续性筛选后存活的细胞可以有效地分泌多种抗体具备多特异性；
S2：提取小鼠体内健康的骨髓瘤细胞，并将其与多抗原免疫细胞进行细胞融合，将融和后的细胞经过荧光检测法进行筛选后得到多抗原免疫杂交瘤细胞，将多抗原免疫杂交瘤细胞与培养基一同置于培养盒中，在常温下进行体外繁殖；将筛选出的可以分泌多种抗体的小鼠细胞与骨髓瘤细胞一同进行融合，使融合细胞具备两个个体共同的特性，既可以分泌多种抗体同时还具备小鼠骨髓瘤细胞可在培养条件下无限***、增殖的特性，从而在培养条件下进行大量繁殖；
S3：杂交瘤细胞在培养盒中经过大量繁殖后，将其与抗原之间间隔接种，杂交瘤细胞感知到抗原存在自发分泌特异性抗体，将杂交瘤细胞连通分泌的特异性抗体一同经过离心处理后提取得到多特异性抗体；将大量繁殖后的细胞经过诱导使其分泌出抗体后，利用离心破碎再提取的技术将制得的大量的特异性抗体提取从而有效地使用于医药等行业中；
其中S2中所述培养盒包括盒体和盖体；所述盒体与盖体均为圆柱形设计；所述盒体侧面开设有环形槽；所述盖体靠近盒体一侧开设有第一凹槽；所述第一凹槽与盒体相匹配；所述第一凹槽侧壁开设有均匀分布的第一滑槽；所述第一滑槽内通过弹簧弹性连接有限位块；所述限位块与环形槽相匹配；初始状态下所述盖体和盒体之间通过限位块与第一滑槽滑动连接；所述盒***于环形槽下方开设有滴加槽；所述盒体靠近盖体一侧内部开设有第二凹槽；所述第二凹槽内安装有培养皿；所述培养皿靠近盖体一侧表面开设有均匀分布的培养槽；所述培养皿位于培养槽外侧均开设有密封槽；所述密封槽环形设计；所述密封槽内安装有密封管；所述密封管剖切面为“十”形设计；所述密封管靠近盖体一侧套接有密封盖；所述密封盖靠近密封管一侧开设有第二滑槽；所述密封管“十”形凸起部通过弹簧与第二滑槽远离盖体一侧弹性连接；所述第二滑槽靠近盖体一侧固连有挤压囊；所述密封盖靠近盖体一侧开设有第三滑槽；所述第三滑槽内滑动连接有密封板；所述密封板与第三滑槽之间固连有膨胀囊；所述挤压囊与膨胀囊通过导管导通；所述盖体远离盒体一侧开设有第三凹槽；所述第三凹槽与第一凹槽导通；所述第三凹槽侧壁开设有滑动槽；所述滑动槽内滑动连接有滴加管；所述滴加管与滑动槽之间固连有密封层；所述滴加管远离盒体一侧开设有第四凹槽；所述第四凹槽内安装有密封塞；所述第四凹槽靠近密封塞一侧固连有密封环；
现有技术中，培养皿结构多数较为简单，无法有效地对空气中的细菌、病毒产生隔绝作用，尤其是在进行接种或添加培养基时，极易使外界杂菌进入培养皿中，从而造成培养基的污染，对培养皿中培养的细胞的生存造成一定的威胁，现有技术通过在无菌室中使用培养皿从而解决上述问题，但是无菌室造价较为昂贵，大多数实验室不具备建造条件，工作时，将经过高温消毒、杀菌处理后的培养盒置于平台表面，手动转动盖体，使盖体通过限位块和环形槽相对于盒体之间进行转动，盖体进行转动，从而使盖体上开设的第三滑槽对应不同的培养槽，选定培养槽时，将盖体向盒体方向按压，从而使限位块受到挤压，收缩入第一滑槽内，当盖体移动一定位移后第一滑槽与滴加槽水平位置平齐，限位块在弹簧的弹性作用下卡入滴加槽内，盖体在向盒体方向运动时，滑动槽内滑动连接的滴加管对密封盖产生挤压，从而使密封盖向培养皿方向滑动，密封盖运动从而使密封管位于第二滑槽内部分与弹簧之间产生挤压，从而使第二滑槽内的挤压囊受力减小，随着密封盖的持续位移，挤压囊在第二滑槽内逐渐恢复形变，由于挤压囊与膨胀囊之间通过导管导通，挤压囊恢复形变，从而使膨胀囊内气体回流，使膨胀囊进行收缩，由于膨胀囊与密封板、第三滑槽均固连，膨胀囊收缩使密封板向第三滑槽内滑动，从而使密封管与滴加管之间导通，此时打开密封塞，使用胶头滴管伸入滴加管内即可向培养槽内滴加培养基和细胞，将培养槽经过密封管和密封盖密封保存，使培养槽与外界之间隔绝形成第一层保护，将培养槽与密封管均设置于盒体与盖体形成的空腔中，形成第二层保护，可以有效地杜绝在进行添加培养基或者细胞时，外界环境、使用器具等对培养槽产生污染，导致对实验结果产生误导。
优选的，所述第三滑槽与密封板均为弧形设计；所述密封板为透明玻璃材料制成；初始状态下密封板被膨胀囊挤压至第三滑槽外，相互合拢呈半球形；由于细胞处于培养皿中时不易观察，在培养皿中混入杂菌时，第三滑槽圆弧形设计、相互组合形成凸透镜的设计，在进行滴加培养基时，可以有效地提前对遭受污染的培养基进行弃置处理，从而使操作人员对培养槽中进行观察时可以更加清晰，在实验过程中有效地增强对实验组的筛选作用。
优选的，所述滴加管内部开设有第四滑槽；所述第四滑槽内通过弹簧滑动连接有按压块；所述按压块环形设计且按压块靠近盒体一侧锥型设计；所述滴加管位于按压块下方开设有对称设计的第五滑槽；所述第五滑槽内均滑动连接有支撑杆；所述支撑杆均“T”形设计；所述支撑杆均延伸至滴加管外侧且支撑杆与滴加管壁之间通过弹簧弹性连接；所述支撑杆另一端延伸至滴加管内腔；所述支撑杆位于滴加管内腔一端均固连有挡板；所述挡板靠近按压块一侧倾斜设计；初始状态下相对设立的两个所述挡板之间相互结合，从而配合按压块将滴加管内腔密封；
通过按压盖体，从而使密封板打开，使培养槽通过滴加管和密封管与外界导通，虽然可以有效地降低空气中杂菌进入的几率，但是在滴加培养基时培养槽与外界的不完全密封仍会使培养槽产生污染的可能，工作时，打开密封塞，将胶头滴管***滴加管内，胶头滴管前端伸入按压块环形空腔中，后端较粗部位与按压块之间接触，从而使胶头滴管的滴加口与外界隔绝，此时继续将胶头滴管向内***，胶头滴管推动按压块沿第四滑槽向下运动，按压块向下运动对挡板产生挤压，由于按压块下端锥形设计，挡板上表面倾斜设置，按压块向下滑动使挡板向左右方向滑动，从而使挡板堵塞的滴加管导通，使胶头滴管与培养槽之间导通，当滴加完毕后，将胶头滴管向外拔出挡板在支撑杆的挤压作用下从新将滴加管堵塞，从而有效地使滴加过程全程处于密封之中，有效地降低培养槽受外界污染的几率。
优选的，所述盒***于滴加槽下方开设有清洗槽；所述培养皿内部开设有第一空腔；所述第一空腔与密封槽相互导通；所述第一空腔内转动连接有定位盘；所述定位盘上开设有均匀分布的定位槽；所述定位槽与密封槽外径大小相同；所述第一空腔位于培养皿一侧开口设置；所述定位盘上固连有拨动杆；所述盒体正对拨动杆处开设有调节槽；所述拨动杆通过调节槽延伸至外界；初始状态下定位槽与密封槽相互错位设置；相邻两个所述培养槽之间均开设有第一通槽；所述第一通槽使相邻两个培养槽之间导通；所述密封管位于密封槽内部均开设有第二通槽；初始状态下所述密封管将第一通槽堵塞、第二通槽与第一通槽竖直方向错位设置；所述培养皿一侧固连有输送管用于导通外界；所述输送管位于培养皿内一端与第一通槽导通；
培养盒在试验完成后需要将内部培养槽内的细胞、培养基进行清理，同时还需要对培养槽进行清洗，直接将盖体、密封管等进行拆卸清理过于麻烦且还易对培养盒内部结构造成不可修复的损坏，此时将拨动杆于调节槽内进行滑动，从而使定位盘于第一空腔内进行转动，使定位盘上开设的定位槽与密封槽之间平齐，再次按压盖体，使盖体向下压制，由于盖体处于滴加环节使第一凹槽上壁与密封盖之间已经接触，盖体持续下压使密封管进入定位槽内，从而使密封管壁上开设的第二通槽与培养槽之间的第一通槽之间导通，此使将水管***滴加管中，使水流进入密封管、培养槽，并通过第一通槽使每一个密封管中均充满水流，当水流添加至一定程度后经过晃动，使培养基、细胞与水流融合，然后通过输送管将水流排送至外界，即可完成对培养盒的清洗。
优选的，所述第二凹槽侧壁开设有均匀分布的挤压槽；所述挤压槽“L”形设计；所述挤压槽靠近培养皿一侧滑动连接有挤压块；所述挤压槽远离培养皿一侧螺纹连接有转动柱；所述第二凹槽位于培养皿下方滑动连接有弹力板；所述弹力板与第二凹槽之间通过弹簧连接；
在清洗过程中，水流与细胞、培养基之间融合，然后将其带出，使用人工进行晃动对密封管内的水流影响较慢、效果较差，工作时，在进行实验时，通过转动柱将均匀设置的挤压块对培养皿进行挤压、固定，当需要清洗时，反向转动转动柱使挤压块与培养皿之间压力减小，从而使培养盒在晃动过程中，活动的培养皿在弹力板的作用下可以产生较大的位移，从而有效的加强对密封管内的水流的冲击效果，从而使清洗效果更好。
优选的，所述挤压块靠近培养皿一侧弧形设计且表面固连有橡胶层；挤压块在对培养皿进行夹持、挤压、固定时，由于培养皿玻璃材料制成，容易发生破裂，工作时，橡胶层使挤压块与培养皿之间进行软接触，从而有效地避免了在对培养皿进行固定时，挤压块对培养皿表面造成的摩擦、压力，有效地避免培养皿受到损伤。
本发明的有益效果如下：
1.本发明所述的一种多特异性抗体的取得方法，通过设置滴加槽、盖体和盒体，通过手动按压盖体，使盖体向盒体方向进行压制，从而使盖体上的滴加管对密封盖进行挤压，从而使密封板开口，实现了培养槽的多重密封，有效的降低培养槽中发生杂菌污染的几率，同时配合设置于滴加管内的按压块和挡板再次对滴加过程进行封闭式操作，有效地降低培养槽中进行添加培养基时发生外界杂菌入侵的几率。
2.本发明所述的一种多特异性抗体的取得方法，通过设置清洗槽、定位盘和定位槽，通过滴加管向培养槽与密封罐中添加水流，并将水流经过第一通槽引导对所有的培养槽均进行清洗，同时配合底部设置的弹力板加强对培养皿的晃动效果，有效地加强了对培养盒的清洗效果。
附图说明
下面结合附图对本发明作进一步说明。
图1是本发明的方法流程图；
图2是培养盒的主视图；
图3是培养盒的拆分图；
图4是培养盒的剖视图；
图5是图2中A-A处剖视图；
图6是图4中B处的局部放大图；
图中：盒体1、盖体2、环形槽11、滴加槽12、清洗槽13、第一凹槽3、第一滑槽31、限位块32、第二凹槽4、培养皿41、培养槽42、密封槽43、密封管44、密封盖45、第二滑槽46、挤压囊47、第三滑槽48、密封板481、膨胀囊482、第三凹槽5、滑动槽51、密封层52、滴加管6、第四凹槽61、密封塞62、密封环63、第四滑槽64、按压块65、第五滑槽66、支撑杆67、挡板68、第一空腔7、定位盘71、定位槽72、拨动杆73、调节槽74、第一通槽75、第二通槽76、挤压槽8、挤压块81、转动柱82、弹力板83、橡胶层84。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
如图1至图6所示，本发明所述的一种多特异性抗体的取得方法，该方法包括以下步骤：
S1：提取多组小鼠细胞，并将其进行体外培养，并在培养的过程中人工接种抗原，进行培养一段时间后向存活的经抗原免疫的小鼠细胞中接种另一种抗原，重复进行培养与接种多次后，得到具备多种抗原免疫的细胞；使用小鼠细胞进行人工感染抗原，从而对小鼠细胞进行筛选，可以分泌对应抗体的细胞存活，而无法分泌对应抗体的细胞死亡，经过多种抗原持续性筛选后存活的细胞可以有效地分泌多种抗体具备多特异性；
S2：提取小鼠体内健康的骨髓瘤细胞，并将其与多抗原免疫细胞进行细胞融合，将融和后的细胞经过荧光检测法进行筛选后得到多抗原免疫杂交瘤细胞，将多抗原免疫杂交瘤细胞与培养基一同置于培养盒中，在常温下进行体外繁殖；将筛选出的可以分泌多种抗体的小鼠细胞与骨髓瘤细胞一同进行融合，使融合细胞具备两个个体共同的特性，既可以分泌多种抗体同时还具备小鼠骨髓瘤细胞可在培养条件下无限***、增殖的特性，从而在培养条件下进行大量繁殖；
S3：杂交瘤细胞在培养盒中经过大量繁殖后，将其与抗原之间间隔接种，杂交瘤细胞感知到抗原存在自发分泌特异性抗体，将杂交瘤细胞连通分泌的特异性抗体一同经过离心处理后提取得到多特异性抗体；将大量繁殖后的细胞经过诱导使其分泌出抗体后，利用离心破碎再提取的技术将制得的大量的特异性抗体提取从而有效地使用于医药等行业中；
其中S2中所述培养盒包括盒体1和盖体2；所述盒体1与盖体2均为圆柱形设计；所述盒体1侧面开设有环形槽11；所述盖体2靠近盒体1一侧开设有第一凹槽3；所述第一凹槽3与盒体1相匹配；所述第一凹槽3侧壁开设有均匀分布的第一滑槽31；所述第一滑槽31内通过弹簧弹性连接有限位块32；所述限位块32与环形槽11相匹配；初始状态下所述盖体2和盒体1之间通过限位块32与第一滑槽31滑动连接；所述盒体1位于环形槽11下方开设有滴加槽12；所述盒体1靠近盖体2一侧内部开设有第二凹槽4；所述第二凹槽4内安装有培养皿41；所述培养皿41靠近盖体2一侧表面开设有均匀分布的培养槽42；所述培养皿41位于培养槽42外侧均开设有密封槽43；所述密封槽43环形设计；所述密封槽43内安装有密封管44；所述密封管44剖切面为“十”形设计；所述密封管44靠近盖体2一侧套接有密封盖45；所述密封盖45靠近密封管44一侧开设有第二滑槽46；所述密封管44“十”形凸起部通过弹簧与第二滑槽46远离盖体2一侧弹性连接；所述第二滑槽46靠近盖体2一侧固连有挤压囊47；所述密封盖45靠近盖体2一侧开设有第三滑槽48；所述第三滑槽48内滑动连接有密封板481；所述密封板481与第三滑槽48之间固连有膨胀囊482；所述挤压囊47与膨胀囊482通过导管导通；所述盖体2远离盒体1一侧开设有第三凹槽5；所述第三凹槽5与第一凹槽3导通；所述第三凹槽5侧壁开设有滑动槽51；所述滑动槽51内滑动连接有滴加管6；所述滴加管6与滑动槽51之间固连有密封层52；所述滴加管6远离盒体1一侧开设有第四凹槽61；所述第四凹槽61内安装有密封塞62；所述第四凹槽61靠近密封塞62一侧固连有密封环63；
现有技术中，培养皿41结构多数较为简单，无法有效地对空气中的细菌、病毒产生隔绝作用，尤其是在进行接种或添加培养基时，极易使外界杂菌进入培养皿41中，从而造成培养基的污染，对培养皿41中培养的细胞的生存造成一定的威胁，现有技术通过在无菌室中使用培养皿41从而解决上述问题，但是无菌室造价较为昂贵，大多数实验室不具备建造条件，工作时，将经过高温消毒、杀菌处理后的培养盒置于平台表面，手动转动盖体2，使盖体2通过限位块32和环形槽11相对于盒体1之间进行转动，盖体2进行转动，从而使盖体2上开设的第三滑槽48对应不同的培养槽42，选定培养槽42时，将盖体2向盒体1方向按压，从而使限位块32受到挤压，收缩入第一滑槽31内，当盖体2移动一定位移后第一滑槽31与滴加槽12水平位置平齐，限位块32在弹簧的弹性作用下卡入滴加槽12内，盖体2在向盒体1方向运动时，滑动槽51内滑动连接的滴加管6对密封盖45产生挤压，从而使密封盖45向培养皿41方向滑动，密封盖45运动从而使密封管44位于第二滑槽46内部分与弹簧之间产生挤压，从而使第二滑槽46内的挤压囊47受力减小，随着密封盖45的持续位移，挤压囊47在第二滑槽46内逐渐恢复形变，由于挤压囊47与膨胀囊482之间通过导管导通，挤压囊47恢复形变，从而使膨胀囊482内气体回流，使膨胀囊482进行收缩，由于膨胀囊482与密封板481、第三滑槽48均固连，膨胀囊482收缩使密封板481向第三滑槽48内滑动，从而使密封管44与滴加管6之间导通，此时打开密封塞62，使用胶头滴管伸入滴加管6内即可向培养槽42内滴加培养基和细胞，将培养槽42经过密封管44和密封盖45密封保存，使培养槽42与外界之间隔绝形成第一层保护，将培养槽42与密封管44均设置于盒体1与盖体2形成的空腔中，形成第二层保护，可以有效地杜绝在进行添加培养基或者细胞时，外界环境、使用器具等对培养槽42产生污染，导致对实验结果产生误导。
作为本发明的一种实施方式，所述第三滑槽48与密封板481均为弧形设计；所述密封板481为透明玻璃材料制成；初始状态下密封板481被膨胀囊482挤压至第三滑槽48外，相互合拢呈半球形；由于细胞处于培养皿41中时不易观察，在培养皿41中混入杂菌时，第三滑槽48圆弧形设计、相互组合形成凸透镜的设计，在进行滴加培养基时，可以有效地提前对遭受污染的培养基进行弃置处理，从而使操作人员对培养槽42中进行观察时可以更加清晰，在实验过程中有效地增强对实验组的筛选作用。
作为本发明的一种实施方式，所述滴加管6内部开设有第四滑槽64；所述第四滑槽64内通过弹簧滑动连接有按压块65；所述按压块65环形设计且按压块65靠近盒体1一侧锥型设计；所述滴加管6位于按压块65下方开设有对称设计的第五滑槽66；所述第五滑槽66内均滑动连接有支撑杆67；所述支撑杆67均“T”形设计；所述支撑杆67均延伸至滴加管6外侧且支撑杆67与滴加管6壁之间通过弹簧弹性连接；所述支撑杆67另一端延伸至滴加管6内腔；所述支撑杆67位于滴加管6内腔一端均固连有挡板68；所述挡板68靠近按压块65一侧倾斜设计；初始状态下相对设立的两个所述挡板68之间相互结合，从而配合按压块65将滴加管6内腔密封；
通过按压盖体2，从而使密封板481打开，使培养槽42通过滴加管6和密封管44与外界导通，虽然可以有效地降低空气中杂菌进入的几率，但是在滴加培养基时培养槽42与外界的不完全密封仍会使培养槽42产生污染的可能，工作时，打开密封塞62，将胶头滴管***滴加管6内，胶头滴管前端伸入按压块65环形空腔中，后端较粗部位与按压块65之间接触，从而使胶头滴管的滴加口与外界隔绝，此时继续将胶头滴管向内***，胶头滴管推动按压块65沿第四滑槽64向下运动，按压块65向下运动对挡板68产生挤压，由于按压块65下端锥形设计，挡板68上表面倾斜设置，按压块65向下滑动使挡板68向左右方向滑动，从而使挡板68堵塞的滴加管6导通，使胶头滴管与培养槽42之间导通，当滴加完毕后，将胶头滴管向外拔出挡板68在支撑杆67的挤压作用下从新将滴加管6堵塞，从而有效地使滴加过程全程处于密封之中，有效地降低培养槽42受外界污染的几率。
作为本发明的一种实施方式，所述盒体1位于滴加槽12下方开设有清洗槽13；所述培养皿41内部开设有第一空腔7；所述第一空腔7与密封槽43相互导通；所述第一空腔7内转动连接有定位盘71；所述定位盘71上开设有均匀分布的定位槽72；所述定位槽72与密封槽43外径大小相同；所述第一空腔7位于培养皿41一侧开口设置；所述定位盘71上固连有拨动杆73；所述盒体1正对拨动杆73处开设有调节槽74；所述拨动杆73通过调节槽74延伸至外界；初始状态下定位槽72与密封槽43相互错位设置；相邻两个所述培养槽42之间均开设有第一通槽75；所述第一通槽75使相邻两个培养槽42之间导通；所述密封管44位于密封槽43内部均开设有第二通槽76；初始状态下所述密封管44将第一通槽75堵塞、第二通槽76与第一通槽75竖直方向错位设置；所述培养皿41一侧固连有输送管用于导通外界；所述输送管位于培养皿41内一端与第一通槽75导通；
培养盒在试验完成后需要将内部培养槽42内的细胞、培养基进行清理，同时还需要对培养槽42进行清洗，直接将盖体2、密封管44等进行拆卸清理过于麻烦且还易对培养盒内部结构造成不可修复的损坏，此时将拨动杆73于调节槽74内进行滑动，从而使定位盘71于第一空腔7内进行转动，使定位盘71上开设的定位槽72与密封槽43之间平齐，再次按压盖体2，使盖体2向下压制，由于盖体2处于滴加环节使第一凹槽3上壁与密封盖45之间已经接触，盖体2持续下压使密封管44进入定位槽72内，从而使密封管44壁上开设的第二通槽76与培养槽42之间的第一通槽75之间导通，此使将水管***滴加管6中，使水流进入密封管44、培养槽42，并通过第一通槽75使每一个密封管44中均充满水流，当水流添加至一定程度后经过晃动，使培养基、细胞与水流融合，然后通过输送管将水流排送至外界，即可完成对培养盒的清洗。
作为本发明的一种实施方式，所述第二凹槽4侧壁开设有均匀分布的挤压槽8；所述挤压槽8“L”形设计；所述挤压槽8靠近培养皿41一侧滑动连接有挤压块81；所述挤压槽8远离培养皿41一侧螺纹连接有转动柱82；所述第二凹槽4位于培养皿41下方滑动连接有弹力板83；所述弹力板83与第二凹槽4之间通过弹簧连接；
在清洗过程中，水流与细胞、培养基之间融合，然后将其带出，使用人工进行晃动对密封管44内的水流影响较慢、效果较差，工作时，在进行实验时，通过转动柱82将均匀设置的挤压块81对培养皿41进行挤压、固定，当需要清洗时，反向转动转动柱82使挤压块81与培养皿41之间压力减小，从而使培养盒在晃动过程中，活动的培养皿41在弹力板83的作用下可以产生较大的位移，从而有效的加强对密封管44内的水流的冲击效果，从而使清洗效果更好。
作为本发明的一种实施方式，所述挤压块81靠近培养皿41一侧弧形设计且表面固连有橡胶层84；挤压块81在对培养皿41进行夹持、挤压、固定时，由于培养皿41玻璃材料制成，容易发生破裂，工作时，橡胶层84使挤压块81与培养皿41之间进行软接触，从而有效地避免了在对培养皿41进行固定时，挤压块81对培养皿41表面造成的摩擦、压力，有效地避免培养皿41受到损伤。
具体工作流程如下：
工作时，将经过高温消毒、杀菌处理后的培养盒置于平台表面，手动转动盖体2，使盖体2通过限位块32和环形槽11相对于盒体1之间进行转动，盖体2进行转动，从而使盖体2上开设的第三滑槽48对应不同的培养槽42，选定培养槽42时，将盖体2向盒体1方向按压，从而使限位块32受到挤压，收缩入第一滑槽31内，当盖体2移动一定位移后第一滑槽31与滴加槽12水平位置平齐，限位块32在弹簧的弹性作用下卡入滴加槽12内，盖体2在向盒体1方向运动时，滑动槽51内滑动连接的滴加管6对密封盖45产生挤压，从而使密封盖45向培养皿41方向滑动，密封盖45运动从而使密封管44位于第二滑槽46内部分与弹簧之间产生挤压，从而使第二滑槽46内的挤压囊47受力减小，随着密封盖45的持续位移，挤压囊47在第二滑槽46内逐渐恢复形变，由于挤压囊47与膨胀囊482之间通过导管导通，挤压囊47恢复形变，从而使膨胀囊482内气体回流，使膨胀囊482进行收缩，由于膨胀囊482与密封板481、第三滑槽48均固连，膨胀囊482收缩使密封板481向第三滑槽48内滑动，从而使密封管44与滴加管6之间导通，打开密封塞62，将胶头滴管***滴加管6内，胶头滴管前端伸入按压块65环形空腔中，后端较粗部位与按压块65之间接触，从而使胶头滴管的滴加口与外界隔绝，此时继续将胶头滴管向内***，胶头滴管推动按压块65沿第四滑槽64向下运动，按压块65向下运动对挡板68产生挤压，由于按压块65下端锥形设计，挡板68上表面倾斜设置，按压块65向下滑动使挡板68向左右方向滑动，从而使挡板68堵塞的滴加管6导通，使胶头滴管与培养槽42之间导通，即可进行滴加。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (6)

1.一种多特异性抗体的取得方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
S1：提取多组小鼠细胞，并将其进行体外培养，并在培养的过程中人工接种抗原，进行培养一段时间后向存活的经抗原免疫的小鼠细胞中接种另一种抗原，重复进行培养与接种多次后，得到具备多种抗原免疫的细胞；
S2：提取小鼠体内健康的骨髓瘤细胞，并将其与多抗原免疫细胞进行细胞融合，将融和后的细胞经过荧光检测法进行筛选后得到多抗原免疫杂交瘤细胞，将多抗原免疫杂交瘤细胞与培养基一同置于培养盒中，在常温下进行体外繁殖；
S3：杂交瘤细胞在培养盒中经过大量繁殖后，将其与抗原之间间隔接种，杂交瘤细胞感知到抗原存在自发分泌特异性抗体，将杂交瘤细胞连同分泌的特异性抗体一同经过离心处理后提取得到多特异性抗体；
其中S2中所述培养盒包括盒体(1)和盖体(2)；所述盒体(1)与盖体(2)均为圆柱形设计；所述盒体(1)侧面开设有环形槽(11)；所述盖体(2)靠近盒体(1)一侧开设有第一凹槽(3)；所述第一凹槽(3)与盒体(1)相匹配；所述第一凹槽(3)侧壁开设有均匀分布的第一滑槽(31)；所述第一滑槽(31)内通过弹簧弹性连接有限位块(32)；所述限位块(32)与环形槽(11)相匹配；初始状态下所述盖体(2)和盒体(1)之间通过限位块(32)与第一滑槽(31)滑动连接；所述盒体(1)位于环形槽(11)下方开设有滴加槽(12)；所述盒体(1)靠近盖体(2)一侧内部开设有第二凹槽(4)；所述第二凹槽(4)内安装有培养皿(41)；所述培养皿(41)靠近盖体(2)一侧表面开设有均匀分布的培养槽(42)；所述培养皿(41)位于培养槽(42)外侧均开设有密封槽(43)；所述密封槽(43)环形设计；所述密封槽(43)内安装有密封管(44)；所述密封管(44)剖切面为“十”形设计；所述密封管(44)靠近盖体(2)一侧套接有密封盖(45)；所述密封盖(45)靠近密封管(44)一侧开设有第二滑槽(46)；所述密封管(44)“十”形凸起部通过弹簧与第二滑槽(46)远离盖体(2)一侧弹性连接；所述第二滑槽(46)靠近盖体(2)一侧固连有挤压囊(47)；所述密封盖(45)靠近盖体(2)一侧开设有第三滑槽(48)；所述第三滑槽(48)内滑动连接有密封板(481)；所述密封板(481)与第三滑槽(48)之间固连有膨胀囊(482)；所述挤压囊(47)与膨胀囊(482)通过导管导通；所述盖体(2)远离盒体(1)一侧开设有第三凹槽(5)；所述第三凹槽(5)与第一凹槽(3)导通；所述第三凹槽(5)侧壁开设有滑动槽(51)；所述滑动槽(51)内滑动连接有滴加管(6)；所述滴加管(6)与滑动槽(51)之间固连有密封层(52)；所述滴加管(6)远离盒体(1)一侧开设有第四凹槽(61)；所述第四凹槽(61)内安装有密封塞(62)；所述第四凹槽(61)靠近密封塞(62)一侧固连有密封环(63)。
2.根据权利要求1所述的一种多特异性抗体的取得方法，其特征在于：所述第三滑槽(48)与密封板(481)均为弧形设计；所述密封板(481)为透明玻璃材料制成；初始状态下密封板(481)被膨胀囊(482)挤压至第三滑槽(48)外，相互合拢呈半球形。
3.根据权利要求1所述的一种多特异性抗体的取得方法，其特征在于：所述滴加管(6)内部开设有第四滑槽(64)；所述第四滑槽(64)内通过弹簧滑动连接有按压块(65)；所述按压块(65)环形设计且按压块(65)靠近盒体(1)一侧锥型设计；所述滴加管(6)位于按压块(65)下方开设有对称设计的第五滑槽(66)；所述第五滑槽(66)内均滑动连接有支撑杆(67)；所述支撑杆(67)均“T”形设计；所述支撑杆(67)均延伸至滴加管(6)外侧且支撑杆(67)与滴加管(6)壁之间通过弹簧弹性连接；所述支撑杆(67)另一端延伸至滴加管(6)内腔；所述支撑杆(67)位于滴加管(6)内腔一端均固连有挡板(68)；所述挡板(68)靠近按压块(65)一侧倾斜设计；初始状态下相对设立的两个所述挡板(68)之间相互结合，从而配合按压块(65)将滴加管(6)内腔密封。
4.根据权利要求1所述的一种多特异性抗体的取得方法，其特征在于：所述盒体(1)位于滴加槽(12)下方开设有清洗槽(13)；所述培养皿(41)内部开设有第一空腔(7)；所述第一空腔(7)与密封槽(43)相互导通；所述第一空腔(7)内转动连接有定位盘(71)；所述定位盘(71)上开设有均匀分布的定位槽(72)；所述定位槽(72)与密封槽(43)外径大小相同；所述第一空腔(7)位于培养皿(41)一侧开口设置；所述定位盘(71)上固连有拨动杆(73)；所述盒体(1)正对拨动杆(73)处开设有调节槽(74)；所述拨动杆(73)通过调节槽(74)延伸至外界；初始状态下定位槽(72)与密封槽(43)相互错位设置；相邻两个所述培养槽(42)之间均开设有第一通槽(75)；所述第一通槽(75)使相邻两个培养槽(42)之间导通；所述密封管(44)位于密封槽(43)内部均开设有第二通槽(76)；初始状态下所述密封管(44)将第一通槽(75)堵塞、第二通槽(76)与第一通槽(75)竖直方向错位设置；所述培养皿(41)一侧固连有输送管用于导通外界；所述输送管位于培养皿(41)内一端与第一通槽(75)导通。
5.根据权利要求1所述的一种多特异性抗体的取得方法，其特征在于：所述第二凹槽(4)侧壁开设有均匀分布的挤压槽(8)；所述挤压槽(8)“L”形设计；所述挤压槽(8)靠近培养皿(41)一侧滑动连接有挤压块(81)；所述挤压槽(8)远离培养皿(41)一侧螺纹连接有转动柱(82)；所述第二凹槽(4)位于培养皿(41)下方滑动连接有弹力板(83)；所述弹力板(83)与第二凹槽(4)之间通过弹簧连接。
6.根据权利要求5所述的一种多特异性抗体的取得方法，其特征在于：所述挤压块(81)靠近培养皿(41)一侧弧形设计且表面固连有橡胶层(84)。
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