CN1113896C - 用虾及其废弃物制备表皮生长因子的方法 - Google Patents
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Abstract
一种用海产品及废弃物制备表皮生长因子的方法,属于生物化学领域,方法是将海产品绞碎、匀浆,冻融,离心,收集沉淀另用;上清液调pH值至7,放置数分钟再离心,取上清液入透析袋浓缩,再离心;上清液再以醋酸缓冲液作梯度洗脱,收集目的物透析、除盐、除菌,冻干保存,将收集的沉淀消化、清洗、脱钙、漂白、粉碎、干燥即可提取副产物壳聚糖,本发明原料丰富、工艺简单、低成本高产率,其目的物达到电泳纯,社会效益和经济效益极为可观。
Description
一种用虾及其废弃物制备表皮生长因子的方法,属于生物化学领域。
表皮生长因子(EGF)是生物活性物质,是重要的细胞生长调解因子,具有广泛的应用领域。在生物学、医学科学的研究上可作为有丝***原、配基-受体模型、无血清培养基成分;在临床医学上,可用于促进上皮增生、治疗眼角膜损伤、角膜移植、烧伤、外伤、溃疡,或用于抑制神经胶质瘤、鳞状上皮癌;近年来在化妆品方面用于促进上皮脱落、促进透明质酸和糖蛋白的合成、刺激细胞再生、组织的修复及嫩肤、抗皱、防晒等方面。由于其广泛的用途和巨大的经济效益,国内外对其需求及开发已成热点。
目前主要是从小白鼠颌下政腺中提取表皮生长因子(EGF),虽然小白鼠颌下腺表皮生长因子(EGF)含量较多,但要达到一定规模的产量实为困难。从人尿中提取表皮生长因子(EGF)也是一种办法,但人尿中其含量甚低,在实际操作上有相当难度。最近用转基因的办法以大肠杆菌为载体,制备表皮生长因子(EGF),但由于操作技术复杂、投资大、技术条件要求高,使其制造成本昂贵。
本发明提供一种工艺技术简单、成品率高的制备表皮生长因子(EGF)的原料及方法。
本发明的主要特征是以虾及其废弃物为原料,从中分离纯化表皮生长因子(EGF),方法是将虾及其废弃物绞碎、匀浆,冻融两次,离心,收集沉淀另用;将上清液调pH值至7,放置数分钟再离心,取上清液入透析袋,浓缩5~8倍,再离心;上清液经DEAE-52柱,以pH5.6的醋酸缓冲液作梯度洗脱,目的物在0.09~0.11M区间,收集目的物,透析、除盐、除菌,冻干保存。
本发明制备的表皮生长因子(EGF),原料来源丰富、工艺流程简单、低成本高产率,其目的物表皮生长因子(EGF)达到电泳纯,社会效益和经济效益相当可观,副产物壳聚糖系天然高分子多糖,药用价值很高,具有预防病毒感染、降低血清和肝脏中胆固醇的作用,并具有防腐和抗癌等作用,在食品业上有广泛的应用价值。
本发明以虾头、虾壳体为制备原料叙述如下:
将虾头、虾壳体绞碎,加两倍体积抽提缓冲液进行匀浆,冻融两次,离心,收集沉淀另用;将上清液调pH值至7,放置10分钟再离心,取上清液入透析袋,浓缩5~8倍,再离心;上清液经DEAE-52柱,以pH5.6的醋酸缓冲液作梯度洗脱,缓冲液浓度0.1M,收集目的物,透析、除盐、除菌,冻干保存。EGF得率为:0.1mg/以上。
将收集的沉淀消化、清洗、脱钙、漂白、粉碎、干燥可提取副产物壳聚糖。
Claims (1)
1、一种用虾及其废弃物制备表皮生长因子的方法,其特征在于将虾及其废弃物绞碎、匀浆,冻融,离心,收集沉淀另用;将上清液调pH值至7,放置数分钟再离心,取上清液入透析袋,浓缩5~8倍,再离心;上清液经DEAE-52柱,以pH5.6的醋酸缓冲液作梯度洗脱,目的物在0.09~0.11M区间,收集目的物,透析、除盐、除菌,冻干保存。
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- 1998-01-04 CN CN98113703A patent/CN1113896C/zh not_active Expired - Fee Related
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