CN111374050A - 一种马铃薯试管薯的繁育方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于农业栽培生产领域，尤其涉及一种马铃薯试管薯的繁育方法，包括以下步骤：预备脱毒苗：将脱毒试管苗剪去顶芽,切取带3‑4个腋芽的茎段；壮苗培养：茎段转接到装有液体培养基的培养瓶内培养茎段成苗；诱导培养：成苗后,将步骤(2)中液体培养液残余将其倒出，在容器中加入液体诱导培养基，进行诱导结薯；诱导培养50d后收获。解决繁育周期长、成本高、效率低等技术问题，高效、优质、省工、易操作和便于管理。

Description

一种马铃薯试管薯的繁育方法
技术领域
本发明属于农业栽培生产领域，尤其涉及一种马铃薯试管薯的繁育方法。
背景技术
马铃薯是世界少有的高产作物，它具有营养全面、适应性广、抗逆性强、高产稳产、产业链长、粮菜饲工业原料兼用等优良特性，是世界第四大粮食作物。影响马铃薯产量低的一个重要因素就是马铃薯的病毒性退化。马铃薯感染病毒后平均减产30％-80％。大力加强脱毒马铃薯的生产与种薯繁育，提高脱毒种薯供给能力，以加速脱毒薯的推广应用，稳定提高马铃薯单产和总产量，具有意义。
马铃薯属于无性繁殖作物，通常利用块茎做种，多种病害极易通过块茎世代传递和扩大危害，同时马铃薯种薯具有用量大、易损耗、繁育周期长等特殊性，因此马铃薯种薯繁育关系到马铃薯产业的可持续发展和提质增效。
传统方法中马铃薯种薯繁育通常需4-5年的时间，马铃薯繁育技术流程为：试管苗→马铃薯原原种→原种一代→原种二代，在整个繁育过程中使用试管苗繁育，成活率低，且种植存在难度大，不易于管理，导致原原种产量低，成本高。
试管薯是利用现代生物技术将脱毒试管苗在培养瓶内相对封闭条件下生产出来的脱毒种薯，因而试管薯克服了大田生产环境的缺陷，可以进行周年化不间断的工厂化生产，不受气候条件的影响；并且因生产过程易于控制，种薯质量更易于保证；而且试管薯体积小、重量轻，便于贮藏和长距离运输，可以节省的大量人力、物力和财力。所以试管薯的生产在以后脱毒薯的繁育及促进脱毒马铃薯的推广应用中必将发挥越来越重要的作用。
发明内容
针对上述问题本发明提供一种马铃薯试管薯的繁育方法，解决繁育周期长、成本高、效率低等技术问题，高效、优质、省工、易操作和便于管理。
解决以上技术问题的本发明中的一种马铃薯试管薯的繁育方法，包括以下步骤：
(1)预备脱毒苗：将脱毒试管苗剪去顶芽,切取带3-4个腋芽的茎段；
(2)壮苗培养：茎段转接到装有液体培养基的培养瓶内；用液体壮苗培养基培养茎段成苗。
(3)诱导培养：成苗后,将步骤(2)中液体培养液残余将其倒出，在容器中加入液体诱导培养基，进行诱导结薯；
(4)诱导培养50d后收获。
所述步骤(2)中液体培养基配方为：2xPBM大量元素,1xPBM微量元素，蔗糖19g/L,肌醇100mg/L，烟酸0.50mg/L，甘氨酸20mg/L。
其中，大量元素为：KNO3 1890mg/L、NH4NO3 1540mg/L、KH2PO4 162mg/L、MgSO4·7H2O350mg/L、CaCl2·2H2O 450mg/L；
微量元素为：KI 0.82mg/L、H3BO4 5.8mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O7.5mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.023mg/L、CuSO4·5H2O 0.028mg/L、CoCl2·6H2O 0.025mg/L。
所述PH值5.8-6.0。使用质量分数为12％盐酸溶液调节PH。
利用滤纸作桥,各原料搅拌均匀后，将其放置于高温灭菌锅中经121℃灭菌23min，每瓶装入20mL左右的培养基,接入5个茎段。
所述壮苗培养中培养条件为光照强度2000-3000lx，光照时间16h/d、温度21-25℃,3周左右即可长成有5-7节的壮苗后进行后续的步骤。
所述诱导培养基采用液体MS培养基，蔗糖8％，激素BAP 5mg/L和香豆素10mg/L,PH值为5.8-6.0。
处理方法为：每瓶加入20mL,每处理3瓶,重复3次。
所述诱导培养中培养条件为光照强度1500-25001x，光照时间8h/d，温度18-23℃。
诱导培养期间定期观察,从第10d开始纪录各处理中形成试管薯(直径大于3mm)的数量。
本发明配方选材经济适用，配制程序简单快速，操作工序方便易学。解决了试管薯后期营养不足的问题。根据品种结薯对短日照的敏感性进行光照时间调节，来达到不同品种试管薯的诱导，不添加任何生长物质。
本发明制备的试管薯质量高，单粒薯重为0.13～0.16a，诱导率达到87％以上，优质薯率达到98.5％以上；本发明制备步骤简单，所需成本低。折合亩产增产幅度在20％～58％之间。
具体实施方式
实施例1
一种马铃薯试管薯的繁育方法，包括以下步骤：
(1)预备脱毒苗：将脱毒试管苗剪去顶芽,切取带3-4个腋芽的茎段；
(2)壮苗培养：茎段转接到装有液体培养基的培养瓶内；用液体壮苗培养基培养茎段成苗。液体培养基配方为：大量元素2xPBM,微量元素1xPBM，蔗糖19g/L,肌醇100mg/L，烟酸0.50mg/L，甘氨酸20mg/L。PH值6.0。使用质量分数为12％盐酸溶液调节PH。
大量元素为：KNO3 1890mg/L、NH4NO3 1540mg/L、KH2PO4 162mg/L、MgSO4·7H2O350mg/L、CaCl2·2H2O 450mg/L；
微量元素为：KI 0.82mg/L、H3BO4 5.8mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O7.5mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.023mg/L、CuSO4·5H2O 0.028mg/L、CoCl2·6H2O 0.025mg/L。
利用滤纸作桥,各原料搅拌均匀后，将其放置于高温灭菌锅中经121℃灭菌23min，每瓶装入20mL左右的培养基,接入5个茎段。
培养条件为光照强度2000lx，光照时间16h/d、温度21℃,3周左右即可长成有5-7节的壮苗后进行后续的步骤。
(3)诱导培养：成苗后,将步骤(2)中液体培养液残余将其倒出，在容器中加入液体诱导培养基，进行诱导结薯；
诱导培养基采用液体MS培养基，以MS培养基质量计算，加入蔗糖8％，激素BAP5mg/L和香豆素10mg/L,PH值为5.8。
处理方法为：每瓶加入20mL,每处理3瓶,重复3次。
诱导培养中培养条件为光照强度15001x，光照时间8h/d，温度18℃。
(4)诱导培养50d后收获。
诱导培养期间定期观察,从第10d开始纪录各处理中形成试管薯(直径大于3mm)的数量。
实施例2
其它内容如实施例1中内容，其中：
(1)在无菌条件下,将脱毒试管苗剪去顶芽,切取带3-4个腋芽的茎段转接到装有液体培养基的培养瓶内。培养基采用研制的液体培养基，2xPBM大量元素,1xPBM微量元素，蔗糖19g/L,有机物同MS),PH值5.9,利用滤纸作桥,经121℃灭菌23min,每瓶装入20mL左右的培养基,接入5个茎段，培养条件为光照强度2500lx、光照16h/d、温度24℃,3周左右即可长成有5-7节的壮苗。
将固体壮苗培养的脱毒马铃薯试管苗剪取顶芽后，直接加入液体培养基中，进行试管薯生产；又可将剪取的顶芽则接入固体培养基进行壮苗培养，用作下批试管薯的繁育生产，如此周年往复循环进行试管薯生产。每次切取下来的顶芽都用作为下一代基础苗繁育，顶芽在固体壮苗培养基中长得又快又好，并且生长整齐一致，这又为下一代试管薯生产产量高打下坚实基础。
固体培养基可为：
(2)诱导培养
成苗后,培养液基本吸收完毕,如有残余将其倒出，然后加入经高压灭菌的液体诱导培养基。诱导培养基采用液体MS培养基+蔗糖8％+不同激素处理,PH值均为5.9,每瓶加入20mL,每处理3瓶,重复3次。培养条件为光照强度20001x、光照时间8h/d、温度20℃。
(3)培养期间定期观察,从第10d开始纪录各处理中形成试管薯(直径大于3mm)的数量。诱导培养50d后收获。
实施例3
其它内容如实施例1中内容，马铃薯试管薯的繁育方法，具体步骤如下：
(1)预备脱毒苗：将脱毒试管苗剪去顶芽,切取带3-4个腋芽的茎段；
(2)壮苗培养：茎段转接到装有液体培养基的培养瓶内；用液体壮苗培养基培养茎段成苗。液体培养基配方为：大量元素2xPBM,微量元素1xPBM，蔗糖19g/L,有机物同MS,PH值5.8。使用质量分数为12％盐酸溶液调节PH。
利用滤纸作桥,各原料搅拌均匀后，将其放置于高温灭菌锅中经121℃灭菌23min，每瓶装入20mL左右的培养基,接入5个茎段。
培养条件为光照强度2000-3000lx，光照时间16h/d、温度21-25℃,3周左右即可长成有5-7节的壮苗后进行后续的步骤。
(3)诱导培养：成苗后,将步骤(2)中液体培养液残余将其倒出，在容器中加入液体诱导培养基，进行诱导结薯；
诱导培养基采用液体MS培养基，蔗糖8％，不同激素处理,PH值均为6.0。
处理方法为：每瓶加入20mL,每处理3瓶,重复3次。
诱导培养中培养条件为光照强度25001x，光照时间8h/d，温度23℃。
(4)诱导培养50d后收获。
诱导培养期间定期观察,从第10d开始纪录各处理中形成试管薯(直径大于3mm)的数量。
采用本发明中繁育方法分别对陇薯3号和陇薯7号进行田间种薯繁育试验，结果表明：本发明中试管薯出苗率、生长势、单株结薯数、单株薯重均比传统方法增加，且差异显著。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征以及本发明的优点，上述实施例和说明书所描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都将落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护的范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (8)

1.一种马铃薯试管薯的繁育方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)预备脱毒苗：将脱毒试管苗剪去顶芽,切取带3-4个腋芽的茎段；
(2)壮苗培养：茎段转接到装有液体培养基的培养瓶内培养茎段成苗；
(3)诱导培养：成苗后,将步骤(2)中液体培养液残余将其倒出，在容器中加入液体诱导培养基，进行诱导结薯；
(4)诱导培养50d后收获。
2.根据权利权利要求1所述的一种马铃薯试管薯的繁育方法，其特征在于：所述步骤(2)中液体培养基配方为：2xPBM大量元素,1xPBM微量元素，蔗糖19g/L,肌醇100mg/L，烟酸0.50mg/L，甘氨酸20mg/L。
3.根据权利权利要求2所述的一种马铃薯试管薯的繁育方法，其特征在于：所述液体培养基PH值5.8-6.0。
4.根据权利权利要求3所述的一种马铃薯试管薯的繁育方法，其特征在于：使用质量分数为12％盐酸溶液调节PH。
5.根据权利权利要求1所述的一种马铃薯试管薯的繁育方法，其特征在于：所述壮苗培养中培养条件为光照强度2000-3000lx，光照时间16h/d、温度21-25℃。
6.根据权利权利要求1所述的一种马铃薯试管薯的繁育方法，其特征在于：所述诱导培养基采用液体MS培养基，蔗糖8％，激素BAP 5mg/L和香豆素10mg/L。
7.根据权利权利要求6所述的一种马铃薯试管薯的繁育方法，其特征在于：所述诱导培养基PH值为5.8-6.0。
8.根据权利权利要求1所述的一种马铃薯试管薯的繁育方法，其特征在于：所述诱导培养中培养条件为光照强度1500-25001x，光照时间8h/d，温度18-23℃。
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