CN111334465A - 一种牙髓间充质干细胞的制备方法 - Google Patents
一种牙髓间充质干细胞的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111334465A CN111334465A CN201911393603.1A CN201911393603A CN111334465A CN 111334465 A CN111334465 A CN 111334465A CN 201911393603 A CN201911393603 A CN 201911393603A CN 111334465 A CN111334465 A CN 111334465A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dental pulp
- tooth tissue
- deciduous
- deciduous tooth
- stem cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 210000003074 dental pulp Anatomy 0.000 title claims abstract description 40
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 210000004489 deciduous teeth Anatomy 0.000 claims abstract description 83
- 210000005258 dental pulp stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 238000005360 mashing Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 61
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 26
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 210000004262 dental pulp cavity Anatomy 0.000 claims description 8
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 6
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 claims description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 6
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 6
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 claims description 6
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 5
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 claims description 3
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 claims description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 3
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 3
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 claims description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001968 dental pulp cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0664—Dental pulp stem cells, Dental follicle stem cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2509/00—Methods for the dissociation of cells, e.g. specific use of enzymes
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种牙髓间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：S1收集乳牙组织的步骤；S2将收集到的乳牙组织在低温条件下运送至实验室的步骤；S3利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎的步骤；S4将牙髓与破碎的乳牙组织进行分离的步骤；S5将分离出的牙髓放入实验室小型捣碎机中进行捣碎处理的步骤；S6对牙髓干细胞进行扩增培养的步骤。本发明所提供的牙髓间充质干细胞的制备方法，采用液压钳破碎处理乳牙组织并对乳牙组织进行挤压破碎处理和对牙髓进行捣碎处理，操作便捷、效率高、节省原料、干细胞提取成功率高。
Description
技术领域
本发明涉及细胞生命科学技术领域，具体来说，涉及一种牙髓间充质干细胞的制备方法。
背景技术
牙髓组织位于牙齿内部的牙髓腔内，是牙体组织中唯一的软组织。通过对人牙髓细胞的研究，发现了一种与骨髓间充质干细胞有着极其相似的免疫表型及形成矿化结节能力的细胞，细胞中形态呈梭形，可自我更新和多向分化，有着较强的克隆能力。这些由牙髓组织中分离出的成纤维状细胞就称为牙髓干细胞(Dental Pulp Stem Cells,DPSCs)。牙髓干细胞具有多向分化的潜能，它除了能形成矿化结节能力的细胞外，经过不同细胞因子的诱导，还能够分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、血管内皮、肝、神经等细胞系类型。
由于牙髓组织隐藏在牙髓腔中，而乳牙体积小，不方便切割暴露牙髓腔，因而现有技术中通常使用拔髓针将牙髓从牙髓腔中取出，然而这种方式不但效率较低还不能完全将牙髓取出，造成乳牙原料的浪费。
发明内容
本发明的目的是提供一种牙髓间充质干细胞的制备方法。
本发明所提供的牙髓间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：S1收集乳牙组织的步骤；S2将收集到的乳牙组织在低温条件下运送至实验室的步骤；S3利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎的步骤；S4将牙髓与破碎的乳牙组织进行分离的步骤；S5将分离出的牙髓放入实验室小型捣碎机中进行捣碎处理的步骤；S6对牙髓干细胞进行扩增培养的步骤。
所述S1收集乳牙组织的步骤，包括：S11将乳牙放入乳牙保存瓶中；S12对乳牙保存瓶中的乳牙进行消毒处理；S13将乳牙保存瓶放入装有半导体制冷片的低温保存盒内。所述S2将收集到的乳牙组织在低温条件下运送至实验室的步骤在12小时内完成。所述S3利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎的步骤，包括：S31用医用镊子将乳牙组织从乳牙保存瓶中取出放入不锈钢盘中；S32在不锈钢盘中注入150ml生理盐水对乳牙组织进行浸泡和冲洗；S33利用注射器将生理盐水喷入牙髓腔，从而使牙髓与牙髓腔的内壁相分离；S34利用液压钳手动将乳牙组织进行挤压破碎，使得乳牙组织和牙髓成为0.5平方毫米的细小颗粒或碎片。所述S4将牙髓与破碎的乳牙组织进行分离的步骤，包括：S41将经过挤压破碎处理的乳牙组织和牙髓连带生理盐水一起放入25ml离心管中；S42用转速1500rpm离心处理12分钟，以去除生理盐水和乳牙牙骨颗粒或碎片，从而获得牙髓组织。所述S6对牙髓干细胞进行扩增培养的步骤，包括：S61取2mL完全培养基，重悬牙髓沉淀，并转移到12孔板中；S62在5.5％二氧化碳、38摄氏度、湿度饱和的条件下进行培养；S63每隔2天进行一次新鲜培养基半量换液；S648天之后，如细胞融合度达到80％以上，进行传代；S65轻吹悬浮起细胞进行传代，细胞计数，调整细胞浓度9000/cm2传代至12孔板新孔中；S66如细胞融合度再次达到80％以上，进行第二次传代；S67轻吹悬浮起细胞进行传代，细胞计数，调整细胞浓度3500/cm2传代至新的T175培养瓶中，从而完成对牙髓干细胞进行扩增培养。
本发明所提供的牙髓间充质干细胞的制备方法，采用液压钳破碎处理乳牙组织并对乳牙组织进行挤压破碎处理和对牙髓进行捣碎处理，操作便捷、效率高、节省原料、干细胞提取成功率高。
附图说明
图1为本发明实施例一所述的牙髓间充质干细胞的制备方法步骤示意图；
图2为本发明实施例一所述的牙髓间充质干细胞的制备方法中所述收集乳牙组织的步骤示意图；
图3为本发明实施例一所述的牙髓间充质干细胞的制备方法中所述利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎的步骤示意图；
图4为本发明实施例一所述的牙髓间充质干细胞的制备方法中所述将牙髓与破碎的乳牙组织进行分离的步骤示意图；
图5为本发明实施例一所述的牙髓间充质干细胞的制备方法中所述对牙髓干细胞进行扩增培养的步骤示意图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
如图1所示，本实施例提供一种牙髓间充质干细胞的制备方法，包括如下步骤：
S1收集乳牙组织的步骤；
S2将收集到的乳牙组织在低温条件下运送至实验室的步骤；
S3利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎的步骤；
S4将牙髓与破碎的乳牙组织进行分离的步骤；
S5将分离出的牙髓放入实验室小型捣碎机中进行捣碎处理的步骤；
S6对牙髓干细胞进行扩增培养的步骤。
本领域技术人员可以理解，由于乳牙组织体积较小，并不能使用拔髓针将牙髓从牙髓腔中取出效率较低；但牙骨较薄，进行压碎处理较为便利，因此利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎，一方面便于实施，另一方面效率较高，第三还便于较为完全的提取出乳牙组织中的牙髓，资源利用率高。
如图2所示，所述S1收集乳牙组织的步骤，包括：
S11将乳牙放入乳牙保存瓶中；
S12对乳牙保存瓶中的乳牙进行消毒处理；
S13将乳牙保存瓶放入装有半导体制冷片的低温保存盒内。
所述S2将收集到的乳牙组织在低温条件下运送至实验室的步骤在12小时内完成。
如图3所示，所述S3利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎的步骤，包括：
S31用医用镊子将乳牙组织从乳牙保存瓶中取出放入不锈钢盘中；
S32在不锈钢盘中注入150ml生理盐水对乳牙组织进行浸泡和冲洗；
S33利用注射器将生理盐水喷入牙髓腔，从而使牙髓与牙髓腔的内壁相分离；
S34利用液压钳手动将乳牙组织进行挤压破碎，使得乳牙组织和牙髓成为0.5平方毫米的细小颗粒或碎片。
如图4所示，所述S4将牙髓与破碎的乳牙组织进行分离的步骤，包括：
S41将经过挤压破碎处理的乳牙组织和牙髓连带生理盐水一起放入25ml离心管中；
S42用转速1500rpm离心处理12分钟，以去除生理盐水和乳牙牙骨颗粒或碎片，从而获得牙髓组织。
如图5所示，所述S6对牙髓干细胞进行扩增培养的步骤，包括：
S61取2mL完全培养基，重悬牙髓沉淀，并转移到12孔板中；
S62在5.5％二氧化碳、38摄氏度、湿度饱和的条件下进行培养；
S63每隔2天进行一次新鲜培养基半量换液；
S64 8天之后，如细胞融合度达到80％以上，进行传代；
S65轻吹悬浮起细胞进行传代，细胞计数，调整细胞浓度9000/cm2传代至12孔板新孔中；
S66如细胞融合度再次达到80％以上，进行第二次传代；
S67轻吹悬浮起细胞进行传代，细胞计数，调整细胞浓度3500/cm2传代至新的T175培养瓶中，从而完成对牙髓干细胞进行扩增培养。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (7)
1.一种牙髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1收集乳牙组织的步骤；
S2将收集到的乳牙组织在低温条件下运送至实验室的步骤；
S3利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎的步骤；
S4将牙髓与破碎的乳牙组织进行分离的步骤；
S5将分离出的牙髓放入实验室小型捣碎机中进行捣碎处理的步骤；
S6对牙髓干细胞进行扩增培养的步骤。
2.如权利要求1所述的牙髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1收集乳牙组织的步骤；
S2将收集到的乳牙组织在低温条件下运送至实验室的步骤；
S3利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎的步骤；
S4将牙髓与破碎的乳牙组织进行分离的步骤；
S5将分离出的牙髓放入实验室小型捣碎机中进行捣碎处理的步骤；
S6对牙髓干细胞进行扩增培养的步骤。
3.如权利要求2所述的牙髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述S1收集乳牙组织的步骤，包括：
S11将乳牙放入乳牙保存瓶中；
S12对乳牙保存瓶中的乳牙进行消毒处理；
S13将乳牙保存瓶放入装有半导体制冷片的低温保存盒内。
4.如权利要求3所述的牙髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述S2将收集到的乳牙组织在低温条件下运送至实验室的步骤在12小时内完成。
5.如权利要求4所述的牙髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述S3利用液压钳对乳牙组织进行挤压破碎的步骤，包括：
S31用医用镊子将乳牙组织从乳牙保存瓶中取出放入不锈钢盘中；
S32在不锈钢盘中注入150ml生理盐水对乳牙组织进行浸泡和冲洗；
S33利用注射器将生理盐水喷入牙髓腔，从而使牙髓与牙髓腔的内壁相分离；
S34利用液压钳手动将乳牙组织进行挤压破碎，使得乳牙组织和牙髓成为0.5平方毫米的细小颗粒或碎片。
6.如权利要求5所述的牙髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述S4将牙髓与破碎的乳牙组织进行分离的步骤，包括：
S41将经过挤压破碎处理的乳牙组织和牙髓连带生理盐水一起放入25ml离心管中；
S42用转速1500rpm离心处理12分钟，以去除生理盐水和乳牙牙骨颗粒或碎片，从而获得牙髓组织。
7.如权利要求6所述的牙髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述S6对牙髓干细胞进行扩增培养的步骤，包括：
S61取2mL完全培养基，重悬牙髓沉淀，并转移到12孔板中；
S62在5.5％二氧化碳、38摄氏度、湿度饱和的条件下进行培养；
S63每隔2天进行一次新鲜培养基半量换液；
S64 8天之后，如细胞融合度达到80％以上，进行传代；
S65轻吹悬浮起细胞进行传代，细胞计数，调整细胞浓度9000/cm2传代至12孔板新孔中；
S66如细胞融合度再次达到80％以上，进行第二次传代；
S67轻吹悬浮起细胞进行传代，细胞计数，调整细胞浓度3500/cm2传代至新的T175培养瓶中，从而完成对牙髓干细胞进行扩增培养。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911393603.1A CN111334465A (zh) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | 一种牙髓间充质干细胞的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911393603.1A CN111334465A (zh) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | 一种牙髓间充质干细胞的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111334465A true CN111334465A (zh) | 2020-06-26 |
Family
ID=71179594
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911393603.1A Pending CN111334465A (zh) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | 一种牙髓间充质干细胞的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111334465A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113604430A (zh) * | 2021-09-06 | 2021-11-05 | 郑州源创吉因实业有限公司 | 一种牙髓间充质干细胞的培养方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102807967A (zh) * | 2012-08-31 | 2012-12-05 | 沙船（天津）生物科技发展有限公司 | 乳牙牙髓在制备间充质干细胞中的应用和乳牙牙髓间充质干细胞的培养方法 |
| CN104560872A (zh) * | 2014-12-29 | 2015-04-29 | 深圳市北科生物科技有限公司 | 牙齿来源间充质干细胞体外分离与培养方法 |
| CN105602895A (zh) * | 2016-02-02 | 2016-05-25 | 江苏赫柏慧康再生医疗技术研究院有限公司 | 一种乳牙牙髓间充质干细胞的制备方法 |
| CN110468098A (zh) * | 2019-07-05 | 2019-11-19 | 北京中瑞联合生物科技有限公司 | 一种牙髓干细胞制备方法 |
-
2019
- 2019-12-30 CN CN201911393603.1A patent/CN111334465A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102807967A (zh) * | 2012-08-31 | 2012-12-05 | 沙船（天津）生物科技发展有限公司 | 乳牙牙髓在制备间充质干细胞中的应用和乳牙牙髓间充质干细胞的培养方法 |
| CN104560872A (zh) * | 2014-12-29 | 2015-04-29 | 深圳市北科生物科技有限公司 | 牙齿来源间充质干细胞体外分离与培养方法 |
| CN105602895A (zh) * | 2016-02-02 | 2016-05-25 | 江苏赫柏慧康再生医疗技术研究院有限公司 | 一种乳牙牙髓间充质干细胞的制备方法 |
| CN110468098A (zh) * | 2019-07-05 | 2019-11-19 | 北京中瑞联合生物科技有限公司 | 一种牙髓干细胞制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| STAN GRONTHOS: "A method to isolate culture expand human dental pulp stem cells", 《PEOTOCOL》 * |
| 王玉睿: "乳牙牙髓间充质细胞聚合体用于年轻恒牙全脱位后延迟再植的临床转化应用研究", 《中国优秀硕士论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113604430A (zh) * | 2021-09-06 | 2021-11-05 | 郑州源创吉因实业有限公司 | 一种牙髓间充质干细胞的培养方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6767740B2 (en) | Stem cell and dental pulp harvesting method and apparatus | |
| CN110540959A (zh) | 一种脐带间充质干细胞分离培养扩增方法 | |
| CN105238751B (zh) | 一种脐带组织间充质干细胞的分离培养方法 | |
| CN101984049B (zh) | 从脂肪组织中分离间充质干细胞的方法 | |
| EP3307341B1 (en) | Mechanical apparatus and method for isolating stromal vascular fraction | |
| US10329533B2 (en) | Regenerative cell and adipose-derived stem cell processing system and method | |
| CN104560870A (zh) | 一种制备蜕膜间充质干细胞的方法 | |
| CN107299082A (zh) | 从组织中分离胎盘***并培养成间充质干细胞的方法 | |
| CN113249317A (zh) | 一种人脐带间充质干细胞的分离培养扩增方法及*** | |
| CN101591644A (zh) | 临床治疗用脐带间充质干细胞的制备和储存 | |
| CN103074298A (zh) | 一种人脂肪间充质干细胞库及其构建方法 | |
| CN111334465A (zh) | 一种牙髓间充质干细胞的制备方法 | |
| CN106434547A (zh) | 制备脐带间充质干细胞的方法 | |
| CN107338219A (zh) | 一种胎盘间充质干细胞的分离及培养方法 | |
| CN105505865A (zh) | 一种脐带间充质干细胞的分离方法 | |
| CN108949682A (zh) | 一种牙髓间充质干细胞的制备、培养及纯化方法 | |
| CN107227295A (zh) | 脱落乳牙干细胞的分离与体外增殖方法 | |
| CN107287158A (zh) | 从小鼠致密骨中高效获取间充质干细胞的方法 | |
| CN109666634A (zh) | 一种脂肪间充质干细胞分离培养及制剂制备方法 | |
| CN102399741A (zh) | 逆向分化体细胞产生造血干细胞的培养液、方法及用途 | |
| CN104531615B (zh) | 一种通过大鼠应力骨折模型募集间充质干细胞的方法 | |
| CN110468098A (zh) | 一种牙髓干细胞制备方法 | |
| CN107779431A (zh) | 干细胞制剂的制备方法 | |
| CN106265739A (zh) | 一种利用关节镜冲洗液制备间充质干细胞制剂的方法 | |
| CN101914496A (zh) | 一种简化的脐带间充质干细胞的规模化制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 201315 Room 517, Building 25, Lane 3399, Kangxin Road, Pudong New Area, Shanghai Applicant after: Shanghai Ruixunyi Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 201315 Room 517, Building 25, Lane 3399, Kangxin Road, Pudong New Area, Shanghai Applicant before: Shanghai Xuyi Biotechnology Co.,Ltd. |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200626 |