CN111289670A - 一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种减肥类中成药及食品中N‑丁基‑3‑(三氟甲基)‑α‑甲基苯乙胺)的检测方法,采用超高效液相色谱‑二极管阵列检测器‑线性离子阱质谱法进行定性确证,超高效液相色谱‑质谱法定量测定。色谱条件:色谱柱:C18色谱柱;检测器:二极管阵列检测器、线性离子阱质谱仪;流动相:A‑0.1%甲酸溶液、B‑0.1%甲酸‑甲醇;流速:0.2‑0.6 mL/min;柱温:25‑40℃;进样量:0.1‑10μL;洗脱梯度程序:0‑1min,30%B;10‑10.2min,75%‑95%B;12‑12.2min,95%‑30%B。本发明方法可特异、快速地筛查并确证减肥类中成药和食品中添加的N‑丁基‑3‑(三氟甲基)‑α‑甲基苯乙胺,主要适用于减肥类中成药及食品的分析。
Description
技术领域
本发明属于化学分析领域,涉及化学物质的色谱、质谱联用检测方法,具体涉及一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的分析方法。
背景技术
芬氟拉明(N-乙基-α-甲基-3-三氟甲基苯乙胺)是一种***类食欲抑制药,具有一定的中枢兴奋作用,能加强周围组织对葡萄糖的利用而降低血糖;还有降低胆固醇、三酰甘油、血浆总脂质的作用。所以,临床上常用于单纯性肥胖及伴有糖尿病、高血压、焦虑症、心血管疾病的肥胖患者。近年来,该药被不法商家添加进减肥类中成药或保健食品中,这种行为已违反了国家法律。目前,国家法定检验标准(国家药品监督管理局药品检验补充检验方法和检验项目批准件编号:2006004、食品中***等化合物的测定BJS 201701)都已收载了芬氟拉明的检测方法,为禁用成分。
N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺(CAS号:52742-18-4,分子式:C14H20F3N,分子量: 259.1547)为芬氟拉明的修饰物(结构式见下),其与芬氟拉明具有相同的结构骨架,因而具有一定的减肥作用。不法分子为了躲避监管,往减肥中成药或食品中添加这种物质以达到增加销量,逃脱法律制裁的目的。日前在市售减肥类中成药中发现有添加这种成分,但尚无此物质的检验方法,本发明建立N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的快速筛查、定量方法,以填补监管漏洞。
a:N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺b:芬氟拉明
发明内容
本发明的目的是提供一种针对减肥类中成药和食品中添加N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检验方法,该方法的原理为:将供试品用甲醇提取稀释,C18色谱柱分离,经紫外光谱检测器和线性离子阱质谱仪检测,采集化合物的紫外吸收光谱,一级质谱离子、二级主要碎片离子进行定性确证,并采用MRM模式建立外标方法测定含量。
本发明解决上述技术问题采用的技术方案为:
一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,包括以下步骤:
(1)测定条件:
色谱条件:
色谱柱:C18色谱柱,100mm/50mm×2.1mm,1.7μm/1.8μm;检测器:二极管阵列检测器、线性离子阱质谱仪;流动相:A-0.1%甲酸溶液、B-0.1%甲酸-甲醇;流速:0.2-0.6mL/min;柱温:25-40℃;进样量:0.1-10μL;洗脱梯度程序:0-1min,30%B;10-10.2min,75%-95%B; 12-12.2min,95%-30%B;紫外检测波长:200-400nm;
质谱条件:
离子源:ESI+;脱溶剂温度(℃):550;离子化电压(V):5500;喷雾气(psi):55;辅助加热气(psi):55;采集模式:MRM,MS2;气帘气:25;碰撞气:Medium;
化合物离子对参数:
注:*定量离子对
(2)精密称量N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品约10mg,置于100mL容量瓶中,用甲醇溶解稀释至刻度,作为对照品溶液一;再移取适量,用甲醇逐级稀释,配成浓度约为10ng/mL的对照品溶液二。
(3)将供试品制成细粉(胶囊剂倾取内容物,片剂及固体食品研细),混合均匀,精密称取适量(固体中成药取用量为一次服用量,固体食品称取1g,液体样品直接移取1mL),置于100mL容量瓶中,加甲醇70mL,涡旋1min,室温水浴超声提取30min,静置,加甲醇定容至刻度,混匀,13000r/min离心5min,移取上清液,进样,测定。
(4)采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器-线性离子阱质谱法进行定性筛查,分别取空白溶液、供试品溶液和对照品溶液一,注入液质联用仪,采集色谱图,比对供试品与对照品的色谱峰保留时间及紫外吸收光谱,如果均一致,则将供试品溶液适当稀释,与空白溶液和对照品溶液二,注入液质联用仪,采集质谱图,比对一、二级质谱特征。
结果判断:
供试品色谱图中,如果出现与N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品保留时间一致的色谱峰,紫外吸收光谱都一致,且其质谱一级母离子,二级主要子离子质量数均相同,主要子离子的相对丰度比接近(满足下表1规定值),则确定添加了N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺,则利用MRM模式建立标准曲线进行含量测定。
如果未出现与N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品保留时间一致的色谱峰,或者出现了与N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品保留时间一致的色谱峰,但是不能同时满足紫外吸收光谱一致,质谱一级母离子,二级主要子离子质量数相同,主要子离子的相对丰度比接近(满足下表1规定值)的要求,则确定样品中没有添加N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺,计算其检出浓度。
表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度(%) | k>50% | 50%≥k>20% | 20%≥k>10% | k≤10% |
允许的最大偏差(%) | ±20 | ±25 | ±30 | ±50 |
检出浓度:
按下表2中检出限,当称样量为1g(mL),稀释倍数为100时,检出浓度为:0.4μg/kg(L)。
含量测定:
线性范围:
移取上述对照品溶液一,加甲醇稀释配制成最终浓度分别为0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、 50.0ng/mL的系列标准溶液,进样,采集质谱数据,以MRM定量离子对峰面积(Y)对浓度 (X)进行线性拟合,计算线性方程和相关系数(见表2)。结果显示在0.1-50ng/mL范围内,线性关系良好(r>0.999)。
检出限:
取浓度为0.1ng/mL对照品溶液用阴性样品提取液稀释10倍后进样测定,计算3倍信噪比时对应的浓度作为检出限,结果见表1。
表2 N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的线性范围、线性方程、相关系数、检出限
准确度和精密度:
以检测结果阴性的样品为基质,进行加标回收率测定。称取某阴性样品一次服用剂量置于100mL容量瓶中,分别加入N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照溶液(将对照品溶液一稀释成100ng/mL)1、5、10mL,各平行3份,加甲醇70mL,余下按步骤(3)中供试品溶液的制备,进样,测定,与相应浓度的对照品溶液比较,计算回收率(见表3)。
精密度测定以浓度为10ng/mL的对照品溶液,连续进样6次,测定,计算待测物的色谱保留时间和定量离子对峰面积,计算其均值和相对标准偏差(RSD),结果可见精密度良好(见表4)。
表3 N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的回收率(n=3)
浓度(ng/ml) | 平均回收率(%) | RSD(%) |
1 | 116.2 | 3.9 |
5 | 104.1 | 1.9 |
10 | 108.7 | 2.3 |
表4 N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的精密度(n=6)
稳定性:
取浓度为10ng/mL的对照品溶液置于自动进样器中(15℃),分别于0、2、4、8、12、24小时进样测定,计算组分的响应值,结果显示稳定性良好。
进一步的,所述步骤(3)中供试品为固体或液体剂型的中成药及食品。
进一步的,所述供试品为固体型的中成药或食品的,取用时研至粒径≤180μm,所述供试品为中成药胶囊剂的,取用时倾取内容物。
有益效果:
1.本发明方法可准确鉴定减肥类中成药和食品中添加的N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺;
2.本发明方法主要适用于固体和液体剂型的中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的测定;
3.N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺为制作减肥类中成药及食品中可能添加的化学物质,这种物质尚没有检测手段,通过本方法可以准确筛查,确证,为监管提供有力技术支撑。
附图说明:
图1为实施例中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品溶液(浓度为100μg/mL)的 215nm色谱图(a:N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺,下同)。
图2为实施例中供试品溶液的215nm色谱图。
图3为实施例中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品溶液(浓度为100μg/mL)的紫外吸收光谱图。
图4为实施例1中供试品溶液的外吸收光谱图。
图5为实施例中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品溶液(浓度为10ng/mL)的 TIC色谱图。
图6为实施例1中供试品溶液的TIC色谱图。
图7为实施例中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品溶液(浓度为10ng/mL)的 MRM(260.2/187.1)色谱图。
图8为实施例中供试品溶液的MRM(260.2/187.1)色谱图。
图9为实施例中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品溶液(浓度为10ng/mL)的 MRM(260.2/159.1)色谱图。
图10为实施例中供试品溶液的MRM(260.2/159.1)色谱图。
图11为实施例中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品溶液(浓度为10ng/mL)的 MS2质谱图(CE:20V)。
图12为实施例1中供试品溶液的MS2质谱图(CE:20V)。
图13为实施例中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品溶液(浓度为10ng/mL)的 MS2质谱图(CE:25V)。
图14为实施例1中供试品溶液的MS2质谱图(CE:25V)。
图15为实施例中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品溶液(浓度为10ng/mL)的 MS2质谱图(CE:30V)。
图16为实施例1中供试品溶液的MS2质谱图(CE:30V)。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明,下述具体实施例仅作为对本发明的解释性说明。
仪器:Shimadzu LC-30A超高效液相色谱仪(Shimadzu,Japan);AB SCIEX6500+ 质谱仪(AB SCIEX,America);KQ-300DA型数据超声波清洗器(昆山超声仪器公司生产); Milli-Q纯水***(Millipore公司);Metler-Toledo电子天平(感量:0.01mg)。
试剂:超纯水;甲醇和甲酸均为质谱纯;N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品(来源:TRC)。
实施例1
一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,包括以下步骤:
(1)检测条件:
色谱柱:Waters ACQUITYHSS T3,100mm×2.1mm,1.8μm;检测器:二极管阵列检测器、线性离子阱;流动相:A-0.1%甲酸溶液、B-0.1%甲酸-甲醇;流速:0.3mL/min;柱温:30℃;进样量:1μL;洗脱梯度程序:0-1min,30%B;10-10.2min,75%-95%B;12-12.2min,95%-30%B;
紫外检测波长:200-400nm;
质谱条件:
离子源:ESI+;脱溶剂温度(℃):550;离子化电压(V):5500;喷雾气(psi):55;辅助加热气(psi):55;采集模式:MRM,MS2;气帘气:25;碰撞气:Medium;
化合物离子对参数:
注:*定量离子对
(2)精密称量N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品约10mg,置于100mL容量瓶中,用甲醇溶解稀释至刻度,作为对照品溶液一;再移取适量,用甲醇逐级稀释,配成浓度约为10ng/mL的对照品溶液二。
(3)将某批号的纤之素胶囊(黄色胶囊)20粒倾取内容物,混匀,精密称取一次服用量 (约0.5g),置于100mL容量瓶中,加甲醇70mL,涡旋1min,室温水浴超声提取30min,静置,加甲醇定容至刻度,混匀,13000r/min离心5min,移取上清液,进样,测定。
(4)采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器-线性离子阱质谱法进行定性筛查,分别取空白溶液、供试品溶液和对照品溶液一,注入液质联用仪,采集色谱图及紫外吸收光谱;将供试品溶液适当稀释,与空白溶液和对照品溶液二,注入液质联用仪,采集质谱图,比对一、二级质谱特征。
采集数据:
比较步骤(2)和(3)采集的对照品溶液一和供试品溶液的液相色谱图,发现(3)在保留时间8.2min处显示有色谱峰,与N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品的保留时间及紫外光谱特征一致(见附图1-4)。
将供试品溶液的稀释液与对照品溶液二比较发现:供试品溶液中N-丁基-3-(三氟甲基)-α- 甲基苯乙胺保留时间一致处色谱峰对应的TIC图、MRM图、MS2碎片均与对照品一致,且二级主要碎片的丰度比满足表1规定值(见附图5-16)。
判断某批号的纤之素胶囊(黄色胶囊)中含有N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺。
按照步骤(3)中制备2份样品提取溶液,并根据其质谱响应适当稀释直至化合物浓度位于定量线性范围内,进样,采集数据,将响应信号代入拟合方程,计算出供试品中检出化合物的含量。
结果:N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺含量为41.6mg/g。
Claims (9)
1.一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)对照品溶液配制:精密称量N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品并用甲醇配制为0.1mg/mL的对照品溶液一及10ng/mL的对照品溶液二;
(2)供试品提取稀释:将供试品制成细粉,混合均匀(液体直接量取),精密称取一次服用量,置于容量瓶中,加甲醇后经涡旋、室温水浴超声提取、静置,然后加甲醇定容,混匀,经离心处理后移取上清液;
(3)采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器-线性离子阱质谱法进行定性筛查,分别取空白溶液、供试品溶液和对照品溶液一,注入液质联用仪,采集空白、供试品和对照品色谱图,比对供试品与对照品的色谱峰保留时间及紫外吸收光谱,如果均一致,则将供试品溶液适当稀释,与空白溶液和对照品溶液二,注入液质联用仪,采集质谱图,比对一、二级质谱特征;
(4)含量测定:在经步骤(3)确定供试品中添加了N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺后,按照步骤(2)中制备2份样品提取溶液,并根据其色谱响应稀释直至化合物浓度位于定量线性范围内,进样,采集数据,将响应信号代入拟合方程,计算出供试品中检出化合物的含量;所述的步骤(3)中的检测条件为:
色谱条件:
色谱柱:C18色谱柱,100mm/50mm×2.1mm,1.7μm/1.8μm;检测器:二极管阵列检测器、线性离子阱质谱仪;流动相:A-0.1%甲酸溶液、B-0.1%甲酸-甲醇;流速:0.2-0.6mL/min;柱温:25-40℃;进样量:0.1-10μL;洗脱梯度程序:0-1min,30%B;10-10.2min,75%-95%B;12-12.2min,95%-30%B;
紫外检测波长:200-400nm;
质谱条件:
离子源:ESI+;脱溶剂温度(℃):550;离子化电压(V):5500;喷雾气(psi):55;辅助加热气(psi):55;采集模式:MRM,MS2;气帘气:25;碰撞气:Medium;
化合物离子对参数:
注:*定量离子对。
2.根据权利要求1所述的一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,其特征在于:所述的定性筛查时,在供试品色谱图中,如果出现与N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品保留时间一致的色谱峰,紫外吸收光谱都一致,且其质谱一级母离子,二级主要子离子质量数均相同,主要子离子的相对丰度比接近(满足相对离子丰度的最大允许偏差规定值),则确定添加了N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺,利用MRM模式建立标准曲线进行含量测定;
如果未出现与N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品保留时间一致的色谱峰,或者出现了与N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺对照品保留时间一致的色谱峰,但是不能同时满足紫外吸收光谱一致,质谱一级母离子,二级主要子离子质量数相同,主要子离子的相对丰度比接近(满足相对离子丰度的最大允许偏差规定值)的要求,则确定样品中没有添加N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺,计算其检出浓度。
3.根据权利要求2所述的一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,其特征在于:所述的相对离子丰度的最大允许偏差为:
5.根据权利要求1所述的一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,其特征在于:所述步骤(3)中供试品为固体或液体剂型的中成药或食品。
6.根据权利要求5所述的一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,其特征在于:所述供试品为固体型的中成药或食品的,取用时研至粒径≤180μm,所述供试品为中成药胶囊剂的,取用时倾取内容物。
7.根据权利要求1所述的一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,其特征在于:步骤(2)中所述的供试品待测物提取稀释的具体方法为:将供试品制成细粉,混合均匀(液体直接移取),精密称取一次服用量,置于100mL容量瓶中,加甲醇70mL,涡旋1min,室温水浴超声提取30min,静置,加甲醇定容至刻度,混匀,经离心处理后移取上清液,进样,测定。
8.根据权利要求1、5-7中任一项所述的一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,其特征在于:所述供试品取用量为:固体中成药取用量为一次服用量,食品取用量为1.0g,液体中成药或食品取用量为1mL。
9.根据权利要求1或7所述的一种减肥类中成药及食品中N-丁基-3-(三氟甲基)-α-甲基苯乙胺的检测方法,其特征在于:所述的离心处理的离心机转速≥13000r/min,离心时间≥5min。
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Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102901780A (zh) * | 2012-10-17 | 2013-01-30 | 湖南省食品药品检验研究院 | 一种在中药、保健食品或化妆品中同时检测七种非法添加减肥类化学成分的方法 |
CN104597165A (zh) * | 2015-02-06 | 2015-05-06 | 山东省食品药品检验研究院 | 一种减肥类中成药和保健食品中非法添加物的Q-Orbitrap高分辨质谱检测方法 |
CN108061777A (zh) * | 2017-11-27 | 2018-05-22 | 浙江公正检验中心有限公司 | 减肥类保健食品中34种非法添加药物残留量的检测方法 |
CN108387671A (zh) * | 2017-11-14 | 2018-08-10 | 湖南省检验检疫科学技术研究院 | 一种筛查保健食品中的非法添加物的方法 |
CN109211895A (zh) * | 2018-11-23 | 2019-01-15 | 广州智汇生物科技有限公司 | 一种保健食品中非法添加违禁药物芬氟拉明的快速检测方法 |
CN109738565A (zh) * | 2019-01-31 | 2019-05-10 | 徐敦明 | 一种测定保健食品中非法添加化合物的方法 |
CN110068630A (zh) * | 2019-05-21 | 2019-07-30 | 苏州市药品检验检测研究中心 | 一种抗疲劳类中成药及保健食品中西地那非杂质12的检测方法 |
CN110082450A (zh) * | 2019-05-21 | 2019-08-02 | 苏州市药品检验检测研究中心 | 一种减肥类中成药及保健食品中胡椒碱的检测方法 |
-
2020
- 2020-01-16 CN CN202010047719.6A patent/CN111289670A/zh active Pending
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102901780A (zh) * | 2012-10-17 | 2013-01-30 | 湖南省食品药品检验研究院 | 一种在中药、保健食品或化妆品中同时检测七种非法添加减肥类化学成分的方法 |
CN104597165A (zh) * | 2015-02-06 | 2015-05-06 | 山东省食品药品检验研究院 | 一种减肥类中成药和保健食品中非法添加物的Q-Orbitrap高分辨质谱检测方法 |
CN108387671A (zh) * | 2017-11-14 | 2018-08-10 | 湖南省检验检疫科学技术研究院 | 一种筛查保健食品中的非法添加物的方法 |
CN108061777A (zh) * | 2017-11-27 | 2018-05-22 | 浙江公正检验中心有限公司 | 减肥类保健食品中34种非法添加药物残留量的检测方法 |
CN109211895A (zh) * | 2018-11-23 | 2019-01-15 | 广州智汇生物科技有限公司 | 一种保健食品中非法添加违禁药物芬氟拉明的快速检测方法 |
CN109738565A (zh) * | 2019-01-31 | 2019-05-10 | 徐敦明 | 一种测定保健食品中非法添加化合物的方法 |
CN110068630A (zh) * | 2019-05-21 | 2019-07-30 | 苏州市药品检验检测研究中心 | 一种抗疲劳类中成药及保健食品中西地那非杂质12的检测方法 |
CN110082450A (zh) * | 2019-05-21 | 2019-08-02 | 苏州市药品检验检测研究中心 | 一种减肥类中成药及保健食品中胡椒碱的检测方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
詹淑玉等: "UPLC-MS/MS法快速测定减肥类中成药及保健食品中非法添加15种化学药的研究", 《中草药》 * |
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