CN111228330A - 一种含千金藤碱的抗炎药物组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药领域,具体涉及一种含千金藤碱的抗炎药物组合物及其制备方法。本发明提供的抗炎药物组合物,包括如下组分及其重量百分数:冬凌草提取物1~2%,穿心莲提取物1~2%,千金藤碱2~3%,香精油0.2~0.4%,乳化剂0.1~0.3%,纯化水92.3~95.7%。本发明提供的抗炎药物组合物,加入了一种从地不容中提取的异喹啉类生物碱类化合物‑千金藤碱,可以提高药物的抗炎性能,且不会对人体造成刺激反应,为开发一类新的抗炎药物提供了可能。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,具体涉及一种含千金藤碱的抗炎药物组合物及其制备方法。
背景技术
炎症是机体对外界刺激的一种防御措施,,表现为红、肿、热、痛和功能障碍。炎症一直伴随的我们左右,一部分原因是因为伤口和感染一直伴随着我们,另一部分原因是因为它造成的生理痛苦及机体损伤。
超出常规的炎症可能加剧各类疾病发展,如类风湿性关节炎,克罗恩氏病,动脉粥样硬化,脓毒症和肿瘤等都和炎症有相当大的关联。具体表现为促炎症因子的升高,共刺激分子表达的增高等。
现今社会,越来越多天然植物类产品已经被用作治疗人类药物的基础。尽管西方医学已经成为当今临床实践的前沿,但天然植物产品仍然在全球被用于医学。据估计,发展中国家80%的人们主要依靠天然产品来满足他们的医疗需求。即使在美国,每三人中就有一人使用天然药物。据估计,1981年至2002年间全球推出了877种小分子药物,其中约61%可追溯至天然产物来源。天然产品不仅有效,而且相对无毒,其治疗剂量远低于其毒性水平。
异喹啉类生物碱又称为苄基异喹啉生物碱,这一类生物碱的特点,具有异喹啉骨架。是最大的一类生物碱,根据其连接方式不同,所以分类不一样。该类药物在临床上应用比较广泛,最常见的就是盐酸小檗碱型,它是从黄连、黄柏、三颗针等植物中所提取的,能够起到镇静止痛的作用。该类药物在临床上一般用于抗肿瘤,抗菌镇痛,调节免疫功能以及抗血小板聚集等。
中国专利申请CN106497875A公开了一种千金藤碱的应用以及一种扩增胎盘造血干细胞的培养基和方法,该专利将千金藤碱用于培养基的制备,可以更好的培养造血干细胞,提高扩增效果,具有干性强、活性高的特点。然而,该专利将千金藤碱用于培养基中,并没有开发出其在其他领域中的应用。
综上所述,现有技术中对千金藤碱的应用领域比较局限,而抗炎药物容易使人产生刺激反应。基于此,我们发现一种从地不容中提取到的异喹啉类生物碱类化合物具有较好的抗炎活性,这为开发一类新的抗炎药物提供了可能。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中普遍存在的缺点,提供一种含千金藤碱的抗炎药物组合物及其制备方法。本发明提供的抗炎药物组合物中,包含千金藤碱,首次将千金藤碱用于医药领域,且不会对人体产生刺激作用。
为了达到上述目的,本发明采用的技术方案为:
一种含千金藤碱的抗炎药物组合物,包含如下组分及其重量百分数:冬凌草提取物1~2%,穿心莲提取物1~2%,千金藤碱2~3%,葡萄糖1~3%,香精油0.2~0.4%,乳化剂0.1~0.3%,纯化水89.3~94.7%。
优选地,所述含千金藤碱的抗炎药物组合物,由如下组分及其重量百分数组成:冬凌草提取物1.5%,穿心莲提取物1.5%,千金藤碱2.5%,葡萄糖2%,香精油0.3%,乳化剂0.2%,纯化水92%。
优选地,所述千金藤碱从地不容中提取,具体过程为:取地不容的块根,烘干,粉碎,过100目筛,用浓度为2%的盐酸水溶液冷浸提取,提取液经NaOH碱化,沉淀,pH值为9,过滤沉淀,干燥,得总生物碱提取物;总生物碱提取物经丙酮加热回流提取2次,每次3小时,然后过滤,浓缩,提取物经氧化铝柱柱层析分离,用含水甲醇梯度洗脱,收集富含千金藤碱的洗脱液,浓缩干燥,得千金藤碱粗品;将千金藤碱粗品用丙酮重结晶,即得。
优选地,所述乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比3~5:10~13组成。
优选地,所述乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比4:11组成。
本发明还提供了一种所述含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法,包括如下步骤:
S1、取添加量50%的纯化水,加热至40~50℃,加入冬凌草提取物,穿心莲提取物,混合搅拌均匀,得混合物I;
S2、将步骤S1所得混合物I降温至20~30℃,加入千金藤碱及葡萄糖,混合搅拌均匀,得混合物II;
S3、向步骤S2所得混合物II中加入乳化剂,香精油,及剩余的纯化水,混合搅拌均匀,即得。
优选地,步骤S1所述的混合搅拌条件是于500~600rpm转速下搅拌20~30min。
优选地,步骤S2所述的混合搅拌条件为于350~450rpm的转速下搅拌40~45min。
优选地,步骤S3所得混合搅拌条件为于550~650rpm的转速下搅拌35~40min。
本发明中,发现从地不容中可以提取一种异喹啉类生物碱类化合物,这种化合物具有较好的抗炎活性,进一步对这类化合物研究,发现起抗炎作用的是千金藤碱,故进一步将千金藤碱用于制备抗炎药物。
发明人将适量的千金藤碱用于抗炎药物中,可以显著提高抗炎效果,而且,在制备药物组合物时,为了减少抗炎药物的刺激性,发明人不添加防腐剂,以香精油代替,此外,发明人还意外的发现,将香精油与千金藤碱不仅可以提高抗炎药物的防腐效果,还可以大大降低药物对人体的刺激作用。
同时,申请人将千金藤碱、冬凌草提取物与穿心莲提取物一起使用,并按一定比例加入药物中,可以显著提高抗炎效果,且这几种成分的成本低,药物组合物的制备过程简单,适合广大群众的使用,还实现了千金藤碱在抗炎药物中的应用,为开发一类新的抗炎药物提供了可能。
与现有技术相比,本发明提供的含千金藤碱的抗炎药物组合物具有如下优势:
(1)本发明提供的含千金藤碱的抗炎药物组合物,将千金藤碱、冬凌草提取物与穿心莲提取物混合加入,抗炎效果显著;
(2)本发明提供的含千金藤碱的抗炎药物组合物,将香精油与千金藤碱混合使用,不仅可以提高抗炎药物的防腐效果,还可以大大降低药物对人体的刺激作用;
(3)本发明提供的含千金藤碱的抗炎药物组合物,成本低,制备过程简单,为开发一类新的抗炎药物提供了可能。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解释,但是应当注意的是,以下实施例仅用以解释本发明,而不能用来限制本发明,所有与本发明相同或相近的技术方案均在本发明的保护范围之内。若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段,所用原料为市售商品。
所述冬凌草提取物可购自西安千草生物技术股份有限公司;所述穿心莲提取物可购自湖北隆飞生物科技有限公司;所述香精油可购自东莞静庐商贸有限公司。实施例1一种含千金藤碱的抗炎药物组合物
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物,包含如下组分及其重量百分数:冬凌草提取物1%,穿心莲提取物1%,千金藤碱2%,葡萄糖1%,香精油0.2%,乳化剂0.1%,纯化水94.7%;所述千金藤碱从地不容中提取,具体过程为:取地不容的块根,烘干,粉碎,过100目筛,用浓度为2%的盐酸水溶液冷浸提取,提取液经NaOH碱化,沉淀,pH值为9,过滤沉淀,干燥,得总生物碱提取物;总生物碱提取物经丙酮加热回流提取2次,每次3小时,然后过滤,浓缩,提取物经氧化铝柱柱层析分离,用含水甲醇梯度洗脱,收集富含千金藤碱的洗脱液,浓缩干燥,得千金藤碱粗品;将千金藤碱粗品用丙酮重结晶,即得;所述乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比3:10组成。
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法,包括如下步骤:
S1、取添加量50%的纯化水,加热至40℃,加入冬凌草提取物,穿心莲提取物,于500rpm转速下搅拌20min,混合均匀,得混合物I;
S2、将步骤S1所得混合物I降温至20℃,加入千金藤碱及葡萄糖,于350rpm的转速下搅拌40min,混合均匀,得混合物II;
S3、向步骤S2所得混合物II中加入乳化剂,香精油,及剩余的纯化水,于550rpm的转速下搅拌35min,混合均匀,即得。
实施例2一种含千金藤碱的抗炎药物组合物
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物,包含如下组分及其重量百分数:冬凌草提取物2%,穿心莲提取物2%,千金藤碱3%,葡萄糖3%,香精油0.4%,乳化剂0.3%,纯化水89.3%;所述千金藤碱的制备过程与实施例1类似;所述乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比5:13组成。
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法,包括如下步骤:
S1、取添加量50%的纯化水,加热至50℃,加入冬凌草提取物,穿心莲提取物,于600rpm转速下搅拌30min,混合均匀,得混合物I;
S2、将步骤S1所得混合物I降温至30℃,加入千金藤碱及葡萄糖,于450rpm的转速下搅拌45min,混合均匀,得混合物II;
S3、向步骤S2所得混合物II中加入乳化剂,香精油,及剩余的纯化水,于600rpm的转速下搅拌38min,混合均匀,即得。
实施例3一种含千金藤碱的抗炎药物组合物
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物,由如下组分及其重量百分数组成:冬凌草提取物1.5%,穿心莲提取物1.5%,千金藤碱2.5%,葡萄糖2%,香精油0.3%,乳化剂0.2%,纯化水92%;所述千金藤碱的制备过程与实施例1类似;所述乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比4:11组成。
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法,包括如下步骤:
S1、取添加量50%的纯化水,加热至45℃,加入冬凌草提取物,穿心莲提取物,于550rpm转速下搅拌25min,混合均匀,得混合物I;
S2、将步骤S1所得混合物I降温至25℃,加入千金藤碱及葡萄糖,于400rpm的转速下搅拌42min,混合均匀,得混合物II;
S3、向步骤S2所得混合物II中加入乳化剂,香精油,及剩余的纯化水,于600rpm的转速下搅拌38min,混合搅拌均匀,即得。
对比例1一种含千金藤碱的抗炎药物组合物
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物,由如下组分及其重量百分数组成:冬凌草提取物1.5%,穿心莲提取物1.5%,千金藤碱2.5%,葡萄糖2%,香精油0.3%,乳化剂0.2%,纯化水92%;所述千金藤碱的制备过程与实施例1类似;所述乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比1:1组成。
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法与实施例3类似;
与实施例3的区别在于,对比例1中的乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比1:1组成。
对比例2一种含千金藤碱的抗炎药物组合物
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物,由如下组分及其重量百分数组成:冬凌草提取物1.5%,穿心莲提取物1.5%,葡萄糖2%,香精油0.3%,乳化剂0.2%,纯化水94.5%;所述千金藤碱的制备过程与实施例1类似;所述乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比4:11组成。
所述含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法与实施例3类似;
与实施例3的区别在于,对比例2中不包含千金藤碱。
试验例1刺激性试验
1.试验样品:本发明实施例1-3制得的抗炎药物。
2.试验对象:SPF级C57BL/6小鼠60只,平均分成3组,每组20只。
3.试验方法:试验开始前,在不损伤小鼠皮肤的前提下,将其背部脊柱两侧的背毛刮掉,去毛范围为2cm×2cm。取试验样品2μL涂抹在一侧皮肤上,涂抹面积为1.5cm×1.5cm,用两层纱布和一层玻璃纸覆盖,再用医用胶带固定,另一侧皮肤作相同处理,作为空白对照。分别在24h、48h时观察两侧皮肤的变化。
4.试验结果:最终结果发现,小鼠涂抹试验样品的皮肤与未涂抹试验样品的皮肤无明显差异,说明本发明实施例1-3组制得的抗炎药物对人体无刺激性。
试验例2抗炎药物对LPS诱导人外周血单个核细胞炎症模型的影响
1.试验样品:人外周血细胞;Gibco无血清培养基;脂多糖;***;实施例1-3及对比例1-2制得的抗炎药物。
2.试验方法:取培养好的人外周血核细胞,稀释至200万个/mL,接种于96孔板内,每孔加200μL细胞悬液,置于37℃、5%CO2培养箱内孵育。
试验分成8组,第1组为空白组,加入200μLGibco无血清培养基;第2组为LPS组(脂多糖)组,加入100ng/ml脂多糖;第3组为抗炎产品***实验组,分别加入抗炎产品10μM;第4~8组为含千金藤碱的抗炎药物组,分别加入2.5μM、5μM、10μM;每组中,用药浓度均有5孔重复。抗炎药物组和LPS组加入后置于37℃、5%CO2培养箱内孵育18小时,收取细胞培养上清通过ELISA检测炎性因子IL-6、IL-1β、TNFα释放含量。
3.试验结果:具体试验结果见表1。
表1细胞培养上清中IL-6、IL-1β、TNFα的含量变化
注:与正常对照组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较*P<0.05,**P<0.01;与阳性对照组比较,△P<0.05;△△P<0.01。
由表1可知,与对照组相比,本发明实施例1-3组含千金藤碱的抗炎药物组合物明显比其他组的抗炎效果,而对比例2组去掉了千金藤碱,抗炎效果大大降低,对比例1组由于改变了乳化剂的组分,虽然抗炎效果有所降低,但是还是比对照组高。
试验例3本发明抗炎药物对腹膜炎小鼠的影响
1.试验样品:本发明实施例3组制得的含千金藤碱的抗炎药物组合物。
2.试验动物:SPF级C57BL/6小鼠80只,平均分为8组,雌雄各半,8周龄[购自南京君科生物科技有限公司,质量合格证号:0017145,动物中心许可证号:SCXK(苏)2011-0003]。
3.试验方法:给予小鼠腹腔注射LPS 50μg构建腹膜炎;使用生理盐水将含千金藤碱的药物组合物稀释至50μg/mL;阳性对照药为服用炎可宁片做同样处理(重庆陪都药业股份有限公司,国药准字Z20044200)。
随机将上述造模后的70只小鼠分为7组,分别为模型组、阳性对照组(20mg/kg)、本发明实施例3低(5mg/kg)、中(10mg/kg)、高(20mg/kg)剂量组。取另外一组小鼠作为正常对照组,腹腔注射给予同等体积生理盐生理盐水,模型组造模后腹腔注射给予同等体积生理盐生理盐水,药物实验组造模后按计量腹腔注射给予相应的药物。
4.试验结果:具体试验结果见表2。
表2造模小鼠体内IL-6、IL-1β、TNFα的变化
注:与正常对照组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较*P<0.05,**P<0.01;与阳性对照组比较,△P<0.05;△△P<0.01。
由表2可知,注射本发明实施例3组的含千金藤碱的抗炎药物组合物时,不同浓度下,抗炎效果也不同。
最后应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明做了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (9)
1.一种含千金藤碱的抗炎药物组合物,其特征在于,包含如下组分及其重量百分数:冬凌草提取物1~2%,穿心莲提取物1~2%,千金藤碱2~3%,葡萄糖1~3%,香精油0.2~0.4%,乳化剂0.1~0.3%,纯化水89.3~94.7%。
2.如权利要求1所述的含千金藤碱的抗炎药物组合物,其特征在于,由如下组分及其重量百分数组成:冬凌草提取物1.5%,穿心莲提取物1.5%,千金藤碱2.5%,葡萄糖2%,香精油0.3%,乳化剂0.2%,纯化水92%。
3.如权利要求1或2所述的含千金藤碱的抗炎药物组合物,其特征在于,所述千金藤碱从地不容中提取,具体过程为:取地不容的块根,烘干,粉碎,过100目筛,用浓度为2%的盐酸水溶液冷浸提取,提取液经NaOH碱化,沉淀,pH值为9,过滤沉淀,干燥,得总生物碱提取物;总生物碱提取物经丙酮加热回流提取2次,每次3小时,然后过滤,浓缩,提取物经氧化铝柱柱层析分离,用含水甲醇梯度洗脱,收集富含千金藤碱的洗脱液,浓缩干燥,得千金藤碱粗品;将千金藤碱粗品用丙酮重结晶,即得。
4.如权利要求1或2所述的含千金藤碱的抗炎药物组合物,其特征在于,所述乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比3~5:10~13组成。
5.如权利要求4所述的含千金藤碱的抗炎药物组合物,其特征在于,所述乳化剂由豆蛋白及卵磷脂按重量比4:11组成。
6.一种如权利要求1-5任一项所述的含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、取添加量50%的纯化水,加热至40~50℃,加入冬凌草提取物,穿心莲提取物,混合搅拌均匀,得混合物I;
S2、将步骤S1所得混合物I降温至20~30℃,加入千金藤碱及葡萄糖,混合搅拌均匀,得混合物II;
S3、向步骤S2所得混合物II中加入乳化剂,香精油,及剩余的纯化水,混合搅拌均匀,即得。
7.如权利要求6所述含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法,其特征在于,步骤S1所述的混合搅拌条件是于500~600rpm转速下搅拌20~30min。
8.如权利要求6所述含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法,其特征在于,步骤S2所述的混合搅拌条件为于350~450rpm的转速下搅拌40~45min。
9.如权利要求6所述含千金藤碱的抗炎药物组合物的制备方法,其特征在于,步骤S3所得混合搅拌条件为于550~650rpm的转速下搅拌35~40min。
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