发明内容
针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种减少皮肤紫质的组合物及其制备方法和应用。所述组合物能有效抑制由细菌引起的及炎症,抑制致病菌群的生长,从而减少皮肤紫质,同时还具有抑制油脂分泌的功能,有效防止毛囊皮脂腺导管的过度角化,具有很好的控油效果。
为达此目的,本发明采用以下技术方案:
第一方面,本发明提供一种减少皮肤紫质的组合物,所述组合物包括酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物。
本发明中,通过酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物相互配合,协同增效,从而有效提高对面部肌肤清洁控油和屏障修复的功效,并抑制油分分泌,调节肌肤微生态的平衡;调节皮肤微环境的pH值,抑制致病菌群的生长,有效抑制油脂分泌,抑制毛囊皮脂腺导管的过度角化,从而减少皮肤紫质。
本发明中,所述酵母菌/大米发酵产物滤液精选优良大米,经天然酵母菌自然发酵而成,富含肌肤所需多种活性成分如低聚糖、有机酸、多肽、氨基酸等。能简单快捷的被肌肤常见的益生菌(如:戊糖乳杆菌、克斯微球菌等)的代谢活动吸收利用,而不被肌肤中常见的致病菌(如:痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌)吸收利用,从而帮助肌肤中的益生菌群健康成长,并竞争性抑制致病菌生长繁殖,建立有益于肌肤的良好益生菌生态环境;同时具有快速激活皮肤细胞,抑制皮肤炎症、强化肌肤角质保护屏障的功效,达到从根本上减少皮肤紫质。
本发明中,所述酵母菌/锌发酵产物指含锌的酵母菌体经生物酶解后提取得到的酵母精华物质,除含有大量皮肤必须的氨基酸、肽、核酸等生物活性物质外,还含有超过4500ppm螯合态有机锌,锌与氨基酸螯合形式存在降低了单独锌对于皮肤的刺激,具有良好的消炎和祛痘功能。
本发明中,所述二裂酵母发酵产物溶胞物能通过细胞的信号途径来调节细胞的基因表达和代谢,从而发挥改善皮肤状态的效果。二裂酵母发酵产物溶胞物,会产生包括维他命B群、矿物质、氨基酸等有益护肤的小分子,可以加强角质层的代谢,有效抑制油脂分泌。
本发明中,所述北美金缕梅提取物内含活性单宁成分,可以帮助皮肤收敛,促进皮肤对酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物和二裂酵母发酵产物溶胞物营养物质的吸收,进一步提升面部肌肤的抗炎和舒缓的功能。同时,金缕梅中有一种柔敏因子的存在,在与肌肤的接触过程中,使得肌肤镇定,保持肌肤代谢的平衡,还能消除肌肤的不舒适,对肌肤的健康有很大的作用。
优选地,所述组合物按重量份数计包括:酵母菌/大米发酵产物滤液0.05-10份、酵母菌/锌发酵产物0.05-10份、二裂酵母发酵产物溶胞物0.05-10份和北美金缕梅提取物0.05-10份。
本发明中,所述酵母菌/大米发酵产物滤液的含量0.05-10份,例如可以是0.05份、0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份、5.5份、6份、6.5份、7份、7.5份、8份、8.5份、9份、9.5份、10份。
本发明中,所述酵母菌/锌发酵产物的含量0.05-10份,例如可以是0.05份、0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份、5.5份、6份、6.5份、7份、7.5份、8份、8.5份、9份、9.5份、10份。
本发明中,所述二裂酵母发酵产物溶胞物的含量0.05-10份,例如可以是0.05份、0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份、5.5份、6份、6.5份、7份、7.5份、8份、8.5份、9份、9.5份、10份。
本发明中,所述北美金缕梅提取物的含量0.05-10份,例如可以是0.05份、0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份、5.5份、6份、6.5份、7份、7.5份、8份、8.5份、9份、9.5份、10份。
优选地,所述组合物按重量份数计包括:酵母菌/大米发酵产物滤液0.1-5份、酵母菌/锌发酵产物0.1-5份、二裂酵母发酵产物溶胞物0.1-5份和北美金缕梅提取物0.1-5份。
第二方面,本发明提供一种如第一方面所述减少皮肤紫质的组合物的制备方法,所述制备方法包括如下步骤:将酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物混合搅拌,过滤,得到所述减少皮肤紫质的组合物。
优选地,所述混合搅拌的温度为35-45℃,例如可以是35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃、45℃。
优选地,所述混合搅拌的转速为200-400r/min,例如可以是200r/min、220r/min、240r/min、260r/min、280r/min、300r/min、320r/min、340r/min、360r/min、380r/min、400r/min。
优选地,所述混合搅拌的时间为10-30min,例如可以是10min、12min、14min、16min、18min、20min、22min、24min、26min、28min、30min。
优选地,所述过滤为微孔过滤。
优选地,所述微孔的孔径为400-600目,例如可以是400目、420目、440目、460目、480目、500目、520目、540目、560目、580目、600目。
优选地,所述制备方法包括如下步骤:将酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物在35-45℃下以200-400r/min转速混合搅拌10-30min,通过400-600目的微孔进行过滤,得到所述减少皮肤紫质的组合物。
第三方面,本发明提供一种如第一方面所述减少皮肤紫质的组合物在制备化妆品中的应用。
第四方面,本发明提供一种化妆品,所述化妆品包括如第一方面所述减少皮肤紫质的组合物。
优选地,所述减少皮肤紫质的组合物的添加量为化妆品总重量的0.05-20%,例如可以是0.05%、0.1%、0.5%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、12%、14%、16%、18%、20%,优选为0.05-10%;
优选地,所述化妆品包括面膜、乳液、护肤霜、柔肤水、精华液、补水霜或化妆水。
相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:
本发明通过酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物相互配合,协同增效,提高对面部肌肤清洁控油和屏障修复的功效,有效抑制油分分泌,调节肌肤微生态的平衡;调节皮肤微环境的pH值,抑制致病菌群的生长,有效抑制油脂分泌,抑制毛囊皮脂腺导管的过度角化,从而减少皮肤紫质。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了,所述实施例仅仅是帮助理解本发明,不应视为对本发明的具体限制。
以下实施例中,所述酵母菌/大米发酵产物滤液由如下方法制备得到:
(1)备料:将大米清洗、烘干,粉粹至100目;配制浓度为110cfu/mL的酵母菌发酵菌液;配置发酵培养基:以发酵培养基总质量为100%计,蛋白胨1%和葡萄糖4%,余量为蒸馏水;
(2)发酵:将上述菌液、大米和发酵培养基混合,pH值调整为6,在30℃、100r/min的摇床中发酵40h,得发酵液;
(3)离心:将发酵液在5000r/min、离心半径为10cm的条件下离心30min,弃沉淀,收集上清液;
(4)过滤:将上清液通过孔径为1μm的膜,在操作压力0.15MPa下过滤,得到酵母菌/大米发酵产物滤液。
以下实施例中,所述酵母菌/锌发酵产物由如下方法制备得到:
(1)备料:配制浓度为110cfu/mL的酵母菌发酵菌液;配置发酵培养基:以发酵培养基总质量为100%计,蛋白胨1%和葡萄糖4%,余量为蒸馏水;
(2)发酵:将菌液、硫酸锌和发酵培养基混合,pH值调整为6,在30℃、100r/min的摇床中发酵40h,得发酵液;
(3)离心:将发酵液在5000r/min、离心半径为10cm的条件下离心30min,弃沉淀,收集上清液;
(4)过滤:将上清液通过孔径为1μm的膜,在操作压力0.15MPa下过滤,得到酵母菌/锌发酵产物。
以下实施例中,所述二裂酵母发酵产物溶胞物由如下方法制备得到:
(1)备料:配制浓度为110cfu/mL的二裂酵母菌发酵菌液;配置发酵培养基:以发酵培养基总质量为100%计,:葡萄糖2%、蛋白胨1%、牛肉浸粉0.5%、酵母膏1%、无水乙酸钠0.5%、吐温-80 0.1%、柠檬酸氢二铵0.2%、磷酸氢二钾0.2%、七水硫酸镁0.058%、一水硫酸锰0.019%、L-半胱氨酸盐酸盐0.1%,余量为水;
(2)发酵:将上述菌液和发酵培养基混合,pH值调整为7,在40℃、100r/min的摇床中发酵10h,得发酵液;
(3)离心:将发酵液在5000r/min、离心半径为10cm的条件下离心30min,弃上清液,取沉淀,得到菌泥;
(4)乳化:在菌泥中加入海藻糖,所述菌泥中和海藻糖的质量比为7:3,经高速搅拌器进行充分乳化,得到乳化液;
(5)灭菌:将上述乳化液在110℃下高温湿热灭菌20min,得到所述二裂酵母发酵产物溶胞物。
以下实施例中,所述北美金缕梅提取物由如下方法制备得到:
(1)称取北美金缕梅,粉粹至100目,加入10倍重量粉的水,加入硼酸在65℃提取1.5h,过滤,取上清液,加入柠檬酸调节pH至3.6,室温提取22h,然后加入盐酸调节pH至3.6,加热至80℃,保温32min;
(2)将步骤(1)得到的混合物过滤,得到沉淀物,向沉淀物中加入体积分数为70%的乙醇溶液,在75℃下提取1.5h,过滤,得到滤渣和上清液;取上清液,浓缩,干燥,得到第一提取物;将滤渣加入3倍重量份的体积分数为80%的乙醇溶液,超声提取50min,超声的功率为300W,过滤,取上清液,浓缩,干燥,得到第二提取物;
(3)混合:将步骤(2)得到的第一提取物和第二提取物混合,得到北美金缕梅提取物。
实施例1
本实施例提供一种减少皮肤紫质的组合物,所述组合物按重量份数计包括:酵母菌/大米发酵产物滤液3份、酵母菌/锌发酵产物3份、二裂酵母发酵产物溶胞物3份和北美金缕梅提取物3份。
所述制备方法包括如下步骤:将酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物在40℃下以300r/min速度混合搅拌20min,通过500目的微孔过滤,得到所述减少皮肤紫质的组合物。
实施例2
本实施例提供一种减少皮肤紫质的组合物,所述组合物按重量份数计包括:酵母菌/大米发酵产物滤液3份、酵母菌/锌发酵产物4份、二裂酵母发酵产物溶胞物1份和北美金缕梅提取物3份。
所述制备方法包括如下步骤:将酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物在35℃下以400r/min速度混合搅拌30min,通过400目的微孔过滤,得到所述减少皮肤紫质的组合物。
实施例3
本实施例提供一种减少皮肤紫质的组合物,所述组合物按重量份数计包括:酵母菌/大米发酵产物滤液1份、酵母菌/锌发酵产物4份、二裂酵母发酵产物溶胞物2份和北美金缕梅提取物2份。
所述制备方法包括如下步骤:将酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物在45℃下以200r/min速度混合搅拌10min,通过600目的微孔过滤,得到所述减少皮肤紫质的组合物。
实施例4
本实施例提供一种减少皮肤紫质的组合物,所述组合物按重量份数计包括:酵母菌/大米发酵产物滤液0.1份、酵母菌/锌发酵产物5份、二裂酵母发酵产物溶胞物5份和北美金缕梅提取物0.1份。
所述制备方法包括如下步骤:将酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物在40℃下以300r/min速度混合搅拌20min,通过500目的微孔过滤,得到所述减少皮肤紫质的组合物。
实施例5
本实施例提供一种减少皮肤紫质的组合物,所述组合物按重量份数计包括:酵母菌/大米发酵产物滤液5份、酵母菌/锌发酵产物0.1份、二裂酵母发酵产物溶胞物0.1份和北美金缕梅提取物5份。
所述制备方法包括如下步骤:将酵母菌/大米发酵产物滤液、酵母菌/锌发酵产物、二裂酵母发酵产物溶胞物和北美金缕梅提取物在40℃下以300r/min速度混合搅拌20min,通过500目的微孔过滤,得到所述减少皮肤紫质的组合物。
对比例1
本对比例提供一种减少皮肤紫质的组合物,与实施例1相比区别仅在于,所述组合物不含酵母菌/大米发酵产物滤液,所述酵母菌/锌发酵产物含量增至4份、二裂酵母发酵产物溶胞物含量增至4份、北美金缕梅提取物含量增至4份。
对比例2
本对比例提供一种减少皮肤紫质的组合物,与实施例1相比区别仅在于,所述组合物不含酵母菌/锌发酵产物,所述酵母菌/大米发酵产物滤液含量增至4份、二裂酵母发酵产物溶胞物含量增至4份、北美金缕梅提取物含量增至4份。
对比例3
本对比例提供一种减少皮肤紫质的组合物,与实施例1相比区别仅在于,所述组合物不含二裂酵母发酵产物溶胞物,所述酵母菌/大米发酵产物滤液含量增至4份、酵母菌/锌发酵产物含量增至4份、北美金缕梅提取物含量增至4份。
对比例4
本对比例提供一种减少皮肤紫质的组合物,与实施例1相比区别仅在于,所述组合物不含北美金缕梅提取物,所述酵母菌/大米发酵产物滤液含量增至4份、酵母菌/锌发酵产物含量增至4份、二裂酵母发酵产物溶胞物含量增至4份。
试验例1
红细胞溶血实验
红细胞溶血实验是兔眼刺激性实验(Draize test)替代方法之一,基本原理是通过测定血红蛋白溶出量及变性程度来评价化学品对眼组织细胞的损伤。国际上主要将RBC实验用于评价化妆品及原料等化学品的眼刺激性研究。
将实施例1-5制得的减少皮肤紫质的组合物以及对比例1-4制备的减少皮肤紫质的组合物进行红细胞溶血实验,本实验依照欧洲替代方法验证中心(ECVAM)的RBC实验测试方法及分级标准。[ECVAM.ECVAM DB-ALM:INVITOX Protoco,Red blood cells testsystem.INVITOX No.37.Ispra.Italy:ECVAM,1994.]。具体测试方法如表1所示:
表1
L/D |
分级 |
﹥100 |
无刺激性 |
10﹤L/D≤100 |
微刺激性 |
1﹤L/D≤10 |
轻度刺激性 |
0.1﹤L/D≤1 |
中度刺激性 |
L/D≤0.1 |
重度刺激性 |
实施例1-5制得的减少皮肤紫质的组合物以及对比例1-4制备的减少皮肤紫质的组合物的红细胞溶血实验结果如表2所示,其中HC50为50%红细胞发生溶血时的样品浓度,DI为蛋白质变性指数,L/D为HC50与DI的比值。
表2
由表2的红细胞溶血实验结果可知,本发明实施例1-5制得的减少皮肤紫质的组合物所得L/D均大于100,刺激性分级为无刺激,说明本发明所述的减少皮肤紫质的组合物均具有温和无刺激的特点,且实施例1-5制得的减少皮肤紫质的组合物的50%红细胞发生溶血时的样品浓度HC50远远大于对比例1-4制得的减少皮肤紫质的组合物的HC50,同时蛋白质变性指数DI亦明显小于对比例1-4制得的减少皮肤紫质的组合物,说明本发明所述组合物的四种成分配伍科学合理,协同增效后能够显著降低毒副作用和刺激性,以达到减弱细胞溶血程度和蛋白质变性的目的。
试验例2
体外控油功效评价试验
测试样品:实施例1-5制备的减少皮肤紫质的组合物和对比例1-4制备的减少皮肤紫质的组合物。
实验对象:3个雄性SD大鼠肝脏
实验步骤:使用3个雄性SD大鼠肝脏匀浆制作9个相同的5α-还原酶液,分成9组,每组添加组合物样品之一,通过一系列的反应体系,检测含有控组合物的控油组合物对5α-还原酶液的抑制率,抑制率越高控油效果越佳。测试结果如表3所示。
表3
由表3可看出,实施例1-5制备的减少皮肤紫质的组合物对5α-还原酶液抑制率普遍比对比例1-4制备的组合物高,对5α-还原酶液抑制率在33.20~60.32%之间,其中实施例1的抑制率最高,达到60.32%,由此可知其控油效果最佳。说明本发明所述减少皮肤紫质的组合物通过对四种活性成分的合理搭配,协同增效,能充分发挥组合物的控油效果,比缺少任意一种组分的组合形式体现出更加的控油效果。
试验例3
病原菌抑制测试
测试实施例和对比例在益生菌与病原菌同时存在时对菌群生产情况的影响和作用。分别配制质量浓度为0.5%的实施例1-5制备的减少皮肤紫质的组合物和对比例1-4制备的减少皮肤紫质的组合物。然后将菌群在上述介质中培育,24小时后计算细菌数目。菌群为克氏库微球菌与金黄色葡萄球菌混合菌群,具体测试结果如表4所示(其中,T24/T0代表24小时内细菌增长倍数)。
表4
由表4的测试数据可知,经过24h的培养,相较于对比例1-4的组合物,实施例1-5制备的减少皮肤紫质的组合物病原菌数量明显减少。这表明本发明所述减少皮肤紫质的组合物会使病原菌因缺乏食物和营养而导致数量显著降低,起到选择性被益生菌利用,并抑制病原菌的作用,从根本上抑制产生皮肤紫质的细菌代谢。而且,相较于对比例1-4,实施例1-5制备的减少皮肤紫质的组合物中病原菌减少数量更多,这表明本发明所述减少皮肤紫质的组合物通过对四种活性成分的合理搭配,协同增效,更能够有效抑制病原菌滋生代谢。
试验例4
皮肤图像分析***VISIA的紫质测试
选取90名受试者,分为9组,每组10人,分别试用2周实施例1-5制备的减少皮肤紫质的组合物和对比例1-4制备的减少皮肤紫质的组合物,分别在试用前,试用1周后和试用2周后用皮肤图像分析***VISIA拍照,记录紫质特征计数,并计算平均值,具体测试结果如表5所述:
表5
由表5的测试数据可知,使用实施例1-5制备的减少皮肤紫质的组合物1-2周后人面部的紫质特征数得到了明显的受试者来说降低,试用2周后紫质特征数降低到11以下。相较于使用对比例1-4制备的组合物,不仅人面部的紫质特征数得到明显降低,而且效果稳定,长时间使用不会出现反复现象,这表明本发明本发明所述减少皮肤紫质的组合物通过对四种活性成分的合理搭配,协同增效,更能够有效减少皮肤紫质。
此外,图1为受试者试用前面部的紫质特征图。图2为受试者使用实施例1制备的减少皮肤紫质的组合物1周后的面部的紫质特征图。图3为受试者使用实施例1制备的减少皮肤紫质的组合物2周后的面部的紫质特征图。也可以明确地看出,使用本发明所述减少皮肤紫质的组合物后人面部的紫质特征数得到了大幅度地降低,而且试验1周和2周效果基本相同,彻底根治紫质问题,不会出现反复显现。
申请人声明,本发明通过上述实施例来说明本发明所述的减少皮肤紫质的组合物及其制备方法和应用,但本发明并不局限于上述实施例,即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了,对本发明的任何改进,对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等,均落在本发明的保护范围和公开范围之内。