CN111196864A - 一种具有保湿功效的金钗石斛多糖及其制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本申请涉及天然药物提取技术领域中的一种金钗石斛多糖，包含D‑葡萄糖醛酸和D‑半乳糖两种单糖，以摩尔比计，两种单糖比例为：0.5～5︰1；所述的金钗石斛多糖的分子量范围为：2000～3000Da；本发明提取的金钗石斛多糖具有显著的保湿功效，可应用于护肤美容产品。

Description

一种具有保湿功效的金钗石斛多糖及其制备方法及应用
技术领域
本发明属于天然药物提取技术领域，具体涉及一种具有保湿功效的金钗石斛多糖及其制备方法及应用。
背景技术
金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)又名扁黄草、万丈须等，为兰科石斛属植物，是我国传统名贵药用植物，早在《神农本草经》中就列为上品，被誉为“九大仙草”之一。药用部分是新鲜或干燥茎，具有强阴益精、厚肠胃、轻身延年的功效。现代药理学研究表明，金钗石斛的主要有效成分为生物碱类和多糖类化合物，具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、增强免疫、调节胃肠运动、降血糖、降血脂等多重功效，研究发现金钗石斛中的生物碱、多糖类成分对皮肤具有抗炎抑菌，美白，保湿等功效。
多糖是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。多糖在自然界分布极广，亦很重要。有的是构成动、植物细胞壁的组成成分，如肽聚糖和纤维素；有的是作为动植物储藏的养分，如糖原和淀粉；有的具有特殊的生物活性，像人体中的肝素有抗凝血作用，肺炎球菌细胞壁中的多糖有抗原作用。由同一种类型的单糖组成的多糖称为同多糖，如淀粉、纤维素和糖原；以不同的单糖组成的多糖称为杂多糖，如***胶是由戊糖和半乳糖等组成，在化学结构上实属多种多样。就分子量而论，范围也是极大的。
金钗石斛多糖是金钗石斛中碳水化合物的主要存在形式，含量高达干重的10％左右。金钗石斛多糖具抗肿瘤、抗凝血、抗病毒、抗衰老、增强免疫力等多种功能。有关金钗石斛多糖的报道已有很多文献，但大多局限于粗多糖，本发明对金钗石斛多糖深入研究发现一种结构明确的金钗石斛多糖成分，具有较好的保湿功效，可以用于护肤美容类产品。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有保湿功效的金钗石斛多糖，该金钗石斛多糖具有保湿功效，具有较高的应用价值。
本发明提供的是金钗石斛多糖，包含D-葡萄糖醛酸和D-半乳糖两种单糖，以摩尔比计，两种单糖比例为：0.5～5︰1；所述的金钗石斛多糖的分子量范围为：2000～3000Da。
进一步的，所述金钗石斛多糖以摩尔比计，两种单糖比例为：3︰1。
进一步，所述金钗石斛多糖分子结构如下：
Figure BDA0002403033520000021
本发明还有一个目的是提供金钗石斛多糖的制备方法，按以下步骤制备：
1)取金钗石斛，加入10～20倍重量的0.5mol/L的NaOH溶液，70℃下搅拌提取2小时；放冷后，加入6mol/L HCl溶液至混合后的溶液pH值为2～3，离心处理得上清液；将上清液浓缩至金钗石斛原料1倍重量后，加入4倍体积的95％乙醇，静置8～12小时，离心收集沉淀，得金钗石斛粗多糖；
2)向金钗石斛粗多糖中加5～10倍重量的水溶解，在30℃水浴下，分别加入0.5mol/LH2O2和4.0mol/L乙酸；待反应终止后，进行超滤处理，得到金钗石斛多糖。
更具体的，按以下步骤制备：1)取金钗石斛，加入15倍重量的0.5mol/L的NaOH溶液，70℃下搅拌提取2小时；冷却后，加入6mol/L HCl溶液至混合后的溶液pH值为2.5；离心处理得上清液；将上清液浓缩到约金钗石斛原料重量1倍重量后，加入4倍体积的95％食用乙醇，静置10小时，离心收集沉淀，得金钗石斛粗多糖；
2)向金钗石斛粗多糖中加8倍重量的水溶解，在30℃水浴下，分别加入0.5mol/LH2O2和4.0mol/L乙酸；待反应终止后，进行超滤处理，得到金钗石斛多糖。
本发明还有一个目的是提供金钗石斛多糖在护肤产品中的应用。
具体的，所述护肤产品具有保湿的功效。
本发明的金钗石斛多糖从金钗石斛中分离获得的结构明确的均一多糖，是直接将金钗石斛药材在NaOH溶液中降解后，经调解pH值，盐析得到粗多糖，在将金钗石斛粗多糖在H2O2溶液中进一步降解纯化后，最后经过超滤处理，得到本发明的金钗石斛多糖，该多糖由D-葡萄糖醛酸和D-半乳糖两种单糖按照0.5～5︰1的比例缩合而成，本发明的多糖除了具有传统的抗肿瘤、抗凝血、抗病毒、抗衰老、增强免疫力等多种功能外，还具有较强的保湿功效，在美容护肤品中具有较好的应用。
附图说明
图1本发明中金钗石斛多糖HPGPC色谱图；
图2本发明中金钗石斛多糖红外吸收图谱。
具体实施方式
下面通过具体实施方式进一步详细说明：
以下实施例中使用的材料和试剂，除特殊说明，均为普通市售。
实施例1：
一种金钗石斛多糖的制备方法，具体为：取金钗石斛1Kg，加入15L 0.5mol/L的NaOH溶液，于70℃下搅拌提取2小时；冷却后，加6mol/L HCl溶液调节pH值为2.5；离心处理得上清液。上清液浓缩到约1L，加入4L的95％食用乙醇，静置10小时，离心收集沉淀，得金钗石斛粗多糖208g。
取上述金钗石斛粗多糖200g，加1.6L水溶解，在30℃水浴下，加入0.5mol/L H2O2、4.0mmol/L乙酸；反应4小时，待反应完成后，通过超滤处理，得到多糖130g。经高效凝胶色谱法(HPGPC)检测，以Sepax Mono GPC-10MP凝胶色谱柱(4.6mm 300mm，5μm)；以0.1mol/L氯化钠为流动相；流速为0.5mL/min；柱温为30℃；示差检测器检测为金钗石斛多糖(如图1所示)，其分子量为2500Da。
另取该金钗石斛多糖3mg适量，加KBr粉末500mg研磨均匀后，压片，经红外光谱仪分析，红外光谱吸收如图2所示。
另取该金钗石斛多糖15mg加入氘代吡啶溶解后，经核磁共振波谱仪分析，其1H/13C-NMR数据如表1所示。
表2金钗石斛多糖1H/13C-NMR谱图数据及归属
Figure BDA0002403033520000031
Figure BDA0002403033520000041
实施例2：
一种金钗石斛多糖的制备方法，具体为，取金钗石斛1Kg，加入20L 0.5mol/L的NaOH溶液，于70℃下搅拌提取2小时；冷却后，加6mol/L HCl溶液调节pH值至2；离心处理得上清液。将上清液浓缩到约1L，加入4L的95％食用乙醇，静置12小时，离心收集沉淀，得金钗石斛粗多糖210g。
取上述金钗石斛粗多糖200g，加水2L溶解，在30℃水浴下，加入0.5mol/L H2O2、4.0mmol/L乙酸；反应4小时，待反应结束后，进行超滤处理，得到多糖141g。经高效凝胶色谱法(HPGPC)检测为均金钗石斛多糖，其分子量为3000Da。
实施例3：
一种金钗石斛多糖的制备方法，具体为：取金钗石斛1Kg，加入10L 0.5mol/L的NaOH溶液，于70℃下搅拌提取2小时；冷却后，加6mol/L HCl溶液调节pH值为3；离心得上清液。将上清液浓缩到约1L，加入4L的95％食用乙醇，静置8小时，离心收集沉淀，得金钗石斛粗多糖190g。
取上述金钗石斛粗多糖150g，加水0.75L溶解，在30℃水浴下，加入0.5mol/L H2O2、4.0mmol/L乙酸；反应4小时，待反应终止后，进行超滤处理，得到多糖90g。经高效凝胶色谱法(HPGPC)检测为金钗石斛多糖，其分子量为2200Da。
保湿实验验证：
征集60名志愿者，分为3组，每组20人，测定使用实施例1～3金钗石斛多糖前后不同时间段皮肤水分值。实验前，所有志愿者先用温水洗净面部，皮肤自然干后测定该面部皮肤水分值均值(0min)，取0.1g的金钗石斛多糖加纯化水10mL溶解后均匀涂布于面部，15min后洗去，再过30min待其干燥后检测皮肤水分值均值(45min)，再过30min后检测皮肤水分值均值(75min)，测定结果如下：
表2.使用面膜前后皮肤水分值测定表
表2.使用面膜前后皮肤水分值测定表
分组 0min 45min 75min
1 29％ 70％ 52％
2 28％ 68％ 50％
3 29％ 69％ 49％
检测结果表明，使用以上各实施例中的金钗石斛多糖后皮肤水分值均比未使用前大幅提高，尤其是实施例1，其保湿效果最好。由此说明，本发明的金钗石斛多糖能增加皮肤水分值，具有良好的保湿和补水效果。

Claims (6)

1.一种金钗石斛多糖，其特征在于：包含D-葡萄糖醛酸和D-半乳糖两种单糖，以摩尔比计，两种单糖比例为：0.5～5︰1；所述的金钗石斛多糖的分子量范围为：2000～3000Da。
2.根据权利要求1所述的金钗石斛多糖，其特征在于：所述金钗石斛多糖以摩尔比计，两种单糖比例为：3︰1。
3.根据权利要求2所述的金钗石斛多糖，其特征在于：所述金钗石斛多糖分子结构如下：
Figure FDA0002403033510000011
4.根据权利要求1～3任一所述的金钗石斛多糖的制备方法，其特征在于：按以下步骤制备：
1)取金钗石斛，加入10～20倍重量的0.5mol/L的NaOH溶液，70℃下搅拌提取2小时；放冷后，加入6mol/L HCl溶液至混合后的溶液pH值为2～3，离心处理得上清液；将上清液浓缩至金钗石斛原料1倍重量后，加入4倍体积的95％乙醇，静置8～12小时，离心收集沉淀，得金钗石斛粗多糖；
2)向金钗石斛粗多糖中加5～10倍重量的水溶解，在30℃水浴下，分别加入0.5mol/LH2O2和4.0mol/L乙酸；待反应终止后，进行超滤处理，得到金钗石斛多糖。
5.根据权利要求1～3任一所述的金钗石斛多糖在护肤产品中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，所述护肤产品具有保湿的功效。
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