CN111153908B - 一种具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱、制备方法及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱、制备方法及其用途。所述嗜氮酮生物碱对胃癌细胞系有明显的细胞毒性。

Description

一种具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱、制备方法及其用途
技术领域
本发明涉及化合物领域，尤其涉及一种具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱、制备方法及其用途。
背景技术
长期以来，恶性肿瘤一直严重威胁着人类的健康和生命，成了当之无愧的“第一杀手”。据世界卫生组织统计，全世界每年约有600万人被癌症夺去生命，估计到2020年将升至1000万人。但是，目前仍然没有很好的药物可以用于临床来消除癌症。很多抗肿瘤药物在临床使用的过程中，逐渐发现它们的选择性低，在抑制肿瘤增长的同时对正常细胞也有很大的杀伤力，导致很强的毒副作用。弱的表现为呕吐、乏力、厌食、头晕，严重的则发现对心脏有损伤。因此，寻求结构新颖且毒副作用小的新型抗肿瘤药物迫在眉睫。
海洋微生物，由于其特殊的生存环境，在适应环境的进化过程中形成了独特的遗传代谢机制和化学防御机制，是目前新结构或新活性天然产物的主要来源。海洋抗癌药物研究在海洋药物研究中一直起着主导作用。美国每年有1500个海洋产物被分离出来，1％具有抗癌活性，目前至少已有10个以上海洋抗癌药物进入临床或临床前研究阶段。近年来，加强海洋微生物的活性筛选，寻找高效低毒的抗癌药物，直接用于临床或作为先导化合物进行结构修饰，已经成为海洋抗癌药物研究的发展趋势。另外，海洋微生物容易采集和培养，具有可规模化获取、环境友好、应用成本低等特点，其开发应用前景已获得国际共识。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱。
为实现上述目的，本发明提供一种具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱，其特征在于，其结构式如式(A)所示，
Figure BDA0002379193480000021
其中n为0-5；优选的，n为0-2，更优选的，n为0或1。
进一步R1为
Figure BDA0002379193480000022
其中4’为R构型，5’为R构型；或
Figure BDA0002379193480000023
其中4’为S构型，5’为R构型；或
Figure BDA0002379193480000024
或
Figure BDA0002379193480000025
本发明还提供一种所述具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
菌种的准备：使用海水PDA培养基，高温灭菌，制成平板，置于常温状态下，接种活化好的毛壳属真菌Chaetomium globosum，作为菌种；
发酵种子液制备：在锥形瓶中装入海水PDA液体培养基，高温灭菌后，接种上述菌种培养，将该培养物作为种子液；
接种：采用固体发酵方式，准备发酵瓶，加入高温灭菌后的大米固体发酵培养基，接种上述种子液后室温静置培养；
萃取：待室温静置培养25天后，加入甲醇浸泡发酵产物，发酵产物溶入甲醇溶液中浸泡后，将上层甲醇溶液倒出，每瓶提取1-4次，所得提取液用滤纸过滤，减压浓缩至固态，即得到甲醇提取浸膏；甲醇提取浸膏用蒸馏水分散后，用乙酸乙酯进行液液萃取，取乙酸乙酯部分，减压浓缩至干，得到乙酸乙酯提取浸膏；
分离：将乙酸乙酯提取浸膏经硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比95:5～80:20进行梯度洗脱，得到4个组分，分别命名为Fr1，Fr2，Fr3和Fr4；其中组分Fr2到Fr4合并，通过MCI大孔树脂柱色谱，以甲醇-水为洗脱剂，从体积比50:50～100:0进行梯度洗脱，再得到4个亚组分，分别命名为SF1，SF2，SF3和SF4；其中亚组分SF1通过硅胶柱色谱,反相制备高效液相色谱法和凝胶柱层析法，得到化合物2和化合物3；
第二个亚组分SF2以凝胶柱层析法分离，再得到两个亚组分，分别命名为SF2a和SF2b；其中亚组分SF2a以反相制备高效液相色谱法得到化合物1；亚组分SF2b以反相制备高效液相色谱法得到化合物4；
第三个亚组分SF3通过反相C18柱梯度洗脱，得到两个亚组分SF3a和SF3b；其中亚组分SF3b以反相制备高效液相色谱法分离，得到化合物5和化合物7；
第四个亚组分SF4以反相制备高效液相色谱法和凝胶柱层析法分离，得到化合物6和化合物8；所述化合物1-8即为具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱。
进一步，所述毛壳属真菌Chaetomium globosum为Chaetomium globosum MP4-S01-7。
任选的，所述海水PDA培养基成分为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15-20g，1L海水；
所述大米固体发酵培养基为大米70g，D-葡萄糖2g，麦芽糖1g，甘露醇1g，蛋白胨0.3g，玉米粉0.1g，谷氨酸钠0.1g，100ml海水，调节pH调节至6.5。
进一步，所述接种步骤中：每1L的三角锥瓶加入大米70g，D-葡萄糖2g，麦芽糖1g，甘露醇1g，蛋白胨0.3g，玉米粉0.1g，谷氨酸钠0.1g，100ml海水，调节pH至6.5。
进一步，所述萃取为，待室温静置培养25天后，加入甲醇溶液500mL/瓶浸泡发酵产物，发酵产物溶入甲醇溶液中，浸泡后，将上层甲醇溶液倒出，每瓶提取3次，所得提取液用滤纸过滤，减压浓缩至固态，即得到甲醇提取浸膏；甲醇提取浸膏用1L的蒸馏水分散后，用乙酸乙酯进行液液萃取，取乙酸乙酯部分，减压浓缩至干，得到乙酸乙酯提取浸膏；
任选的，所述分离步骤中石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比95:5～80:20进行梯度洗脱为用石油醚-乙酸乙酯洗脱的体积比依次为95:5，90:10，85:15，80:20进行梯度洗脱。
进一步，所述分离步骤中，硅胶柱色谱以石油醚和丙酮进行洗脱，其中石油醚：丙酮的体积比为9：1；
任选的，凝胶柱层析法以SephadexLH-20为填料，甲醇为洗脱溶剂；
任选的，反相C18柱梯度洗脱为采用50％的甲醇至100％的甲醇进行洗脱；
反相制备高效液相色谱法为以乙腈和8毫升/分钟的流速洗脱；其中亚组分SF1分离时采用的是75％的乙腈；亚组分SF2a和亚组分SF3b分离时采用的是88％的乙腈；亚组分SF4和亚组分SF2b分离时采用的是70％的乙腈。
本发明还保护所述嗜氮酮生物碱和制备方法制备得到的嗜氮酮生物碱在制备抗肿瘤药物中的用途。
进一步，所述抗肿瘤药物为防治胃癌药物。
本发明还保护一种药物制剂，其特征在于，它包括所述的嗜氮酮生物碱。
进一步，所述的制剂为丸剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或注射剂。
所述的化合物对两种胃癌细胞系MGC803和AGS均有明显的细胞毒性。可以用于防止胃癌药物的制备。
附图说明
图1是化合物1-4在a600MHz下测定，b850MHz下测定的核磁共振数据表格图。
图2是化合物5-8在a600MHz下测定，b850MHz下测定的核磁共振数据表格图。
图3是化合物1-8对人胃癌细胞活性的影响结果表格图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1：菌ChaetomiumMP4-S01-7的发酵
(1)菌种的准备：使用海水PDA培养基，高温灭菌，制成平板，置于常温状态下，接种活化好的Chaetomium globosum MP4-S01-7，作为菌种；所述海水PDA培养基成分为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15-20g，1L海水；
Chaetomium globosum MP4-S01-7的保藏信息如下：
保藏菌种：Chaetomium globosum MP4-S01-7，
保藏单位：中国典型培养物保藏中心，
保藏地址：中国武汉武汉大学，
保藏编号：CCTCC No.M2019509，
保藏日期：2019年7月3日。
(2)发酵种子液制备：在多个锥形瓶中分别装入海水PDA液体培养基，高温灭菌后，接种上述菌种培养，将该培养物作为种子液；
(3)接种：采用固体发酵方式，准备发酵瓶，加入大米固体发酵培养基，高温灭菌，接种上述种子液，室温静置培养；所述大米固体发酵培养基为每1L的三角锥瓶装大米70g，D-葡萄糖2g，麦芽糖1g，甘露醇1g，蛋白胨0.3g，玉米粉0.1g，谷氨酸钠0.1g，100ml海水(pH调节至6.5)。
实施例2：嗜氮酮生物碱的提取与分离
(1)萃取：待室温静置培养25天后，加入甲醇溶液500mL/瓶浸泡发酵产物，发酵产物溶入甲醇溶液中，浸泡过夜后，将上层甲醇溶液倒出即得提取液，每瓶提取3次，所得提取液用滤纸过滤，减压浓缩至固态，即得到甲醇提取浸膏；甲醇提取浸膏用1L的蒸馏水分散后，用乙酸乙酯进行液液萃取，取乙酸乙酯部分，减压浓缩至干，得到乙酸乙酯提取浸膏。
(2)分离：乙酸乙酯提取浸膏，经硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比95:5～80:20进行梯度洗脱，得到4个组分(Fr1，Fr2，Fr3和Fr4)(以TLC检测，相同组分进行合并，以下均同此)；组分Fr2到Fr4合并，通过MCI大孔树脂柱色谱，以甲醇-水为洗脱剂，从体积比50:50～100:0进行梯度洗脱，得到4个亚组分(SF1，SF2，SF3和SF4)。组分SF1通过硅胶柱色谱(石油醚/丙酮＝9/1),反相制备高效液相色谱法(以75％的乙腈和8毫升/分钟的流速洗脱)和凝胶柱层析法(SephadexLH-20为填料，甲醇为洗脱溶剂)，得到化合物3和化合物2；组分SF2以凝胶柱层析法(SephadexLH-20为填料，甲醇为洗脱溶剂)分离，得到两个亚组分(SF2a和SF2b)。组分SF2a以反相制备高效液相色谱法，以88％的乙腈和8毫升/分钟的流速洗脱，得到化合物1；组分SF2b以反相制备高效液相色谱法，以70％的乙腈和8毫升/分钟的流速洗脱，得到化合物4。组分SF3通过反相C18柱色谱梯度洗脱(50％的甲醇至100％甲醇)，得到两个亚组分SF3a和SF3b，其中组分SF3b以凝胶柱层析法(SephadexLH-20为填料，甲醇为洗脱溶剂)和反相制备高效液相色谱法(以88％的乙腈和8毫升/分钟的流速洗脱)分离，得到化合物5和化合物7。组分SF4以反相制备高效液相色谱法(以70％的甲醇和8毫升/分钟的流速洗脱)和凝胶柱层析法(SephadexLH-20为填料，甲醇为洗脱溶剂)分离，得到化合物6和化合物8。
实施例3：嗜氮酮生物碱的结构解析
嗜氮酮生物碱的结构是基于它们的质谱、核磁共振数据分析确定的。
化合物1
无规则深红色粉末；核磁数据见图1(a600 MHz下测定.b850 MHz下测定)；分子式C33H42ClNO5，高分辨质谱HRESIMS(positive)m/z 568.2835[M+H]+(calcd forC33H43 35ClNO5,568.2830)。结构为：
Figure BDA0002379193480000061
化合物2
无规则深红色粉末；核磁数据见图1；分子式C33H42ClNO5，高分辨质谱HRESIMS(positive)m/z 568.2851[M+H]+(calcd for C33H43 35ClNO5,568.2830)。结构为：
Figure BDA0002379193480000062
化合物3
无规则深红色粉末；核磁数据见图1；分子式C28H34ClNO5，高分辨质谱HRESIMS(positive)m/z 500.2199[M+H]+(calcd for C28H35 35ClNO5,500.2204)。结构为：
Figure BDA0002379193480000063
化合物4
无规则深红色粉末；核磁数据见图1；分子式C28H34ClNO5，高分辨质谱HRESIMS(positive)m/z 500.2197[M+H]+(calcd for C28H35 35ClNO5,500.2204)。结构为：
Figure BDA0002379193480000071
化合物5
无规则橙色粉末；核磁数据见图2；分子式C33H40ClNO4，高分辨质谱HRESIMS(positive)m/z 550.2711[M+H]+(calcd for C33H41 35ClNO4,550.2724)。结构为：
Figure BDA0002379193480000072
化合物6
无规则橙色粉末；核磁数据见图2；分子式C28H32ClNO4，高分辨质谱HRESIMS(positive)m/z 482.2102[M+H]+(calcd for C28H33 35ClNO4,482.2098)。结构为：
Figure BDA0002379193480000073
化合物7
无规则深红色粉末；核磁数据见图2；分子式C31H38ClNO4，高分辨质谱HRESIMS(positive)m/z 524.2597[M+H]+(calcd for C31H39 35ClNO4,524.2856)。结构为：
Figure BDA0002379193480000074
化合物8
无规则深红色粉末；核磁数据见图2；分子式C26H30ClNO4，高分辨质谱HRESIMS(positive)m/z 456.1935[M+H]+(calcd for C26H31 35ClNO4,456.1942)。结构为：
Figure BDA0002379193480000081
实施例4：嗜氮酮生物碱的抗肿瘤活性
(1)肿瘤细胞系的培养：人胃癌细胞系MGC803和AGS都在37℃、5％CO2潮湿的条件下，在加有10％胎牛血清和1％青霉素/链霉素的RPMI 1640中培养。
(2)化合物1-8对人胃癌细胞系的细胞毒作用：使用细胞计数试剂盒8(CCK8)试验测定化合物1-8对胃癌细胞活力的影响。Taxol(紫杉醇)用作阳性药。将MGC803和AGS细胞分别接种在96孔板(2～3×103细胞/孔)中过夜，再用不同浓度(0.1-10μM)的化合物1-8处理72小时，将处理后的细胞与CCK8溶液在室温下孵育3小时，在450nm下测量吸光度，计算IC50值。结果见图3。
从图3可以看出，化合物对两种细胞系均有明显的细胞毒性，除了化合物8对AGS的IC50值大于10外，其他化合物对两个细胞的IC50值均小于10μM。其中化合物1,2,5的IC50值更是均小于1μM，显示出最强抗肿瘤活性。此外，化合物2对MGC803和AGS细胞系均展现出相似的抑制作用，而化合物1和5对AGS的细胞毒作用更明显。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (12)

1.一种具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱，其特征在于，其结构式如式(A)所示，
Figure FDA0002915109570000011
其中n为0-5；
R1为
Figure FDA0002915109570000012
其中4’为R构型，5’为R构型；或
Figure FDA0002915109570000013
其中4’为S构型，5’R构型；或
Figure FDA0002915109570000014
或
Figure FDA0002915109570000015
2.如权利要求1所述具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱，其特征在于，所述n为0-2。
3.如权利要求2所述具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱，其特征在于，所述n为0或1。
4.一种权利要求1-3任一所述具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
菌种的准备：使用海水PDA培养基，高温灭菌，制成平板，置于常温状态下，接种活化好的毛壳属真菌Chaetomium globosum MP4-S01-7，作为菌种；
发酵种子液制备：在锥形瓶中装入海水PDA液体培养基，高温灭菌后，接种上述菌种培养，将该培养物作为种子液；
接种：采用固体发酵方式，准备发酵瓶，加入高温灭菌后的大米固体发酵培养基，接种上述种子液后室温静置培养；
萃取：待室温静置培养25天后，加入甲醇浸泡发酵产物，发酵产物溶入甲醇溶液中浸泡后，将上层甲醇溶液倒出，每瓶提取1-4次，所得提取液用滤纸过滤，减压浓缩至固态，即得到甲醇提取浸膏；甲醇提取浸膏用蒸馏水分散后，用乙酸乙酯进行液液萃取，取乙酸乙酯部分，减压浓缩至干，得到乙酸乙酯提取浸膏；
分离：将乙酸乙酯提取浸膏经硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比95:5～80:20进行梯度洗脱，得到4个组分，分别命名为Fr1，Fr2，Fr3和Fr4；其中组分Fr2到Fr4合并，通过MCI大孔树脂柱色谱，以甲醇-水为洗脱剂，从体积比50:50～100:0进行梯度洗脱，再得到4个亚组分，分别命名为SF1，SF2，SF3和SF4；其中亚组分SF1通过硅胶柱色谱,反相制备高效液相色谱法和凝胶柱层析法，得到化合物2和化合物3；
其中化合物2的结构为
Figure FDA0002915109570000021
化合物3的结构为
Figure FDA0002915109570000022
第二个亚组分SF2以凝胶柱层析法分离，再得到两个亚组分，分别命名为SF2a和SF2b；其中亚组分SF2a以反相制备高效液相色谱法得到化合物1；亚组分SF2b以反相制备高效液相色谱法得到化合物4；
其中化合物1的结构为
Figure FDA0002915109570000023
化合物4的结构为
Figure FDA0002915109570000031
第三个亚组分SF3通过反相C18柱梯度洗脱，得到两个亚组分SF3a和SF3b；其中亚组分SF3b以反相制备高效液相色谱法分离，得到化合物5和化合物7；
其中化合物5的结构为
Figure FDA0002915109570000032
化合物7的结构为
Figure FDA0002915109570000033
第四个亚组分SF4以反相制备高效液相色谱法和凝胶柱层析法分离，得到化合物6和化合物8；
其中化合物6的结构为
Figure FDA0002915109570000034
化合物8的结构为
Figure FDA0002915109570000035
所述化合物1-8即为具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱。
5.根据权利要求4所述具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱的制备方法，其特征在于，所述海水PDA培养基成分为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15-20g，1L海水；
所述大米固体发酵培养基为大米70g，D-葡萄糖2g，麦芽糖1g，甘露醇1g，蛋白胨0.3g，玉米粉0.1g，谷氨酸钠0.1g，100ml海水，调节pH调节至6.5。
6.根据权利要求4所述具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱的制备方法，其特征在于，所述接种步骤中：每1L的三角锥瓶加入大米70g，D-葡萄糖2g，麦芽糖1g，甘露醇1g，蛋白胨0.3g，玉米粉0.1g，谷氨酸钠0.1g，100ml海水，调节pH至6.5。
7.根据权利要求4所述的具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱的制备方法，其特征在于，所述萃取为，待室温静置培养25天后，加入甲醇溶液500mL/瓶浸泡发酵产物，发酵产物溶入甲醇溶液中，浸泡后，将上层甲醇溶液倒出，每瓶提取3次，所得提取液用滤纸过滤，减压浓缩至固态，即得到甲醇提取浸膏；甲醇提取浸膏用1L的蒸馏水分散后，用乙酸乙酯进行液液萃取，取乙酸乙酯部分，减压浓缩至干，得到乙酸乙酯提取浸膏；
任选的，所述分离步骤中石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比95:5～80:20进行梯度洗脱为用石油醚-乙酸乙酯洗脱的体积比依次为95:5，90:10，85:15，80:20进行梯度洗脱。
8.根据权利要求4所述具有抗肿瘤活性的嗜氮酮生物碱的制备方法，其特征在于，所述分离步骤中，硅胶柱色谱以石油醚和丙酮进行洗脱，其中石油醚：丙酮的体积比为9：1；
任选的，凝胶柱层析法以SephadexLH-20为填料，甲醇为洗脱溶剂；
任选的，反相C18柱梯度洗脱为采用50％的甲醇至100％的甲醇进行洗脱；
反相制备高效液相色谱法为以乙腈或甲醇和8毫升/分钟的流速洗脱；其中亚组分SF1分离时采用的是75％的乙腈；亚组分SF2a和亚组分SF3b分离时采用的是88％的乙腈；亚组分SF2b分离时采用的是70％的乙腈，亚组分SF4分离时采用的是70％甲醇。
9.权利要求1-3任一所述的嗜氮酮生物碱和权利要求4-8任一制备方法制备得到的嗜氮酮生物碱在制备抗肿瘤药物中的用途。
10.如权利要求9所述用途，其特征在于，所述抗肿瘤药物为防治胃癌药物。
11.一种药物制剂，其特征在于，包括权利要求1所述的嗜氮酮生物碱。
12.根据权利要求11所述药物制剂，其特征在于，所述的制剂为丸剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或注射剂。
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CN113527247B (zh) * 2021-08-18 2023-02-03 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 一种嗜氮酮类多聚体化合物及其制备方法和应用

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