CN111150888B

CN111150888B - 双功效薄膜与其制备方法

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Publication number: CN111150888B
Application number: CN201911104798.3A
Authority: CN
Inventors: 沈欣欣; 王羽淇; 杨明嘉; 刘育秉; 张惟闳; 林芸含; 徐新怡; 邓允中; 卢珈蓉; 李易轩; 林健玮; 郭昆茂; 陈靖眉
Original assignee: Industrial Technology Research Institute ITRI
Current assignee: Industrial Technology Research Institute ITRI
Priority date: 2018-11-07
Filing date: 2019-11-06
Publication date: 2022-03-15
Anticipated expiration: 2039-11-06
Also published as: TWI735073B; CN111150888A; TW202017991A; US20220388293A1; US20200247101A1; US11458715B2; US11904581B2

Abstract

一种制备双功效薄膜的方法，包括：(a)将第一高分子溶液干燥成膜，以形成防粘连层；以及(b)将第二高分子溶液干燥成膜于该防粘连层之上，以形成贴附层。该第一高分子溶液包括第一疏水性溶液与第一亲水性溶液，且在该第一高分子溶液中，该第一疏水性溶液的溶质与该第一亲水性溶液的溶质的重量比为1:0.01‑1。又，该第二高分子溶液由第二亲水性溶液所组成。

Description

双功效薄膜与其制备方法

【技术领域】

本揭露(本公开)涉及一种薄膜，且特别涉及一种双功效薄膜及其制备方法。

【背景技术】

目前手术外科用植入式网片或贴片等补缀医材主要仍以需要搭配手术缝线缝合或利用缝合钉进行伤口处补缀。常见的薄膜材为Surgiwrap、Neoveil等补缀薄膜。

而不需使用缝线的补缀贴片主要以TissuePatch为主，然而，其主要应用于肺脏补缀或弥漫性出血伤口的补缀，而非体内每个地方都可适用。

又目前伤口的补缀遭遇到两大问题，其一为渗漏，而另一则为伤口与其他组织或脏器发生粘连(沾粘)。目前薄膜市售商品大多为单一功能，主要用于补缀，并不具有防粘连的功效。尽管贴片如Seprafilm等玻尿酸系列产品，主要用于降低术后产生粘连的可能性，但此类商品在临床上主要问题为降解太快，且容易破损或溶解，而导致被体内体液冲刷而导致效果降低。此外，上述市售品主要都为解决临床的单一问题，而无法一次解决临床上多样化的问题。

因此，目前亟需一种新颖的补缀薄膜，其能够于达到服贴密封的效果而不需进行额外的固定，且具有优良的防粘连功效。

【发明内容】

本揭露提供一种制备双功效薄膜的方法，包括(a)将第一高分子溶液干燥成膜，以形成防粘连层与(b)将第二高分子溶液干燥成膜于该防粘连层之上，以形成贴附层。该第一高分子溶液包括第一疏水性溶液与第一亲水性溶液，其中该第一疏水性溶液的溶质为选自下列所组成的群组的至少一种疏水性高分子：聚己内酯(polycaprolactone,PCL)、聚乳酸(polylactic acid,PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA)、聚乙醇酸(poly(glycolic acid),PGA)、聚羟基丁酸酯(polyhydroxybutyrate,PHB)、聚对二氧环己酮(polydioxanone,PDS)、聚富马酸二羟丙酯(poly(propylenefumarate),PPF)、聚酸酐(polyanhydrides)、聚缩醛(polyacetals)、聚原酸酯(poly(orthoesters))、聚碳酸酯(polycarbonates)、聚氨酯(polyurethanes)、聚磷腈(polyphosphazenes)与聚磷酸酯(polyphosphoester)，而该第一亲水性溶液的溶质为选自下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：玻尿酸(hyaluronic acid,HA)、聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)、羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)、聚乙二醇衍生物与聚环氧乙烷(poly(ethylene oxide),PEO)，又，其中在第一高分子溶液中，该第一疏水性溶液的溶质与该第一亲水性溶液的溶质的重量比为1:0.01-1。该第二高分子溶液由第二亲水性溶液所组成，其中该第二亲水性溶液的溶质为选自下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：明胶(gelatin)、经改性的明胶、褐藻胶(alginate)、聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)、羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)、聚乙二醇衍生物、胶原蛋白(collagen)、去矿化骨基质(脱钙骨基质，demineralized bone matrix,DBM)、骨塑型蛋白(骨形成蛋白，bone morphogenetic protein,BMP)、白蛋白(albumin)、壳聚糖(几丁聚醣，chitosan)、纤维蛋白(fibrin)、聚氧化乙烯(polyoxyethylene)与聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone)。

本揭露也提供一种双功效薄膜，其由上述制备双功效薄膜的方法所制备。

本发明还提供一种双功效薄膜包括：防粘连层与在该防粘连层之上的贴附层。该防粘连层由第一高分子混合物所构成，该第一高分子混合物包括：第一疏水性高分子，为选自下列所组成的群组的至少一种疏水性高分子：聚己内酯、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙醇酸、聚羟基丁酸酯、聚对二氧环己酮、聚富马酸二羟丙酯、聚酸酐、聚缩醛、聚原酸酯、聚碳酸酯、聚氨酯、聚磷腈与聚磷酸酯；以及第一亲水性高分子，为选自下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：玻尿酸与聚乙烯醇、羧甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙二醇衍生物、聚环氧乙烷，且在该防粘连层中，该第一疏水性高分子与该第一亲水性高分子的重量比为1:0.01-1。又该贴附层由第二亲水性高分子所构成，该第二亲水性高分子选自由下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：明胶、经改性的明胶、褐藻胶、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙二醇衍生物、胶原蛋白、去矿化骨基质、骨塑型蛋白、白蛋白、壳聚糖、纤维蛋白、聚氧化乙烯与聚乙烯吡咯烷酮。

为了让本发明的上述和其他目的、特征、和优点能更明显易懂，下文特举优选实施例，并配合所附图示，作详细说明如下：

【附图说明】

图1为本揭露的双功效薄膜的多层结构的形成原理的示意图。

图2A显示，本揭露的双功效薄膜的形成的一实施例。

图2B显示，本揭露的双功效薄膜的形成的另一实施例。

图3显示，不同浓度的明胶溶液的粘度。

图4显示，比较例1-1与实施例1-1中所制备的薄膜的分层测试结果。

图5显示，比较例1-1、比较例1-2与实施例1-1中所制备的薄膜，以及目前临床使用的市售商品的密封贴片(TissuePatch)的***强度。

图6显示，实施例2-1至2-3的制程的成膜观察结果。

图7显示，实施例3-1至3-3与实施例4-1至4-3的制程的成膜观察结果。

图8显示，实施例5-1至5-5的制程的成膜观察结果。

图9显示，实施例6-1至6-3的制程的成膜观察结果。

图10显示，实施例8-1与8-2以及比较例2-1与2-2中所制备的薄膜的分层测试结果。

图11A显示，比较例1-2、实施例8-1与实施利8-2中所制备的薄膜，以及目前临床使用的市售商品的密封贴片(TissuePatch)的***强度。

图11B显示，比较例1-2、实施例7-1、实施例7-2与实施利8-1中所制备的薄膜，以及目前临床使用的市售商品的密封贴片(TissuePatch)的***强度。

图12显示，比较例1-2、实施例8-1与实施例8-2中所制备的薄膜所制备的薄膜，以及目前临床使用的市售商品的密封贴片(TissuePatch)的拉伸强度。

图13显示，比较例1-2、实施例8-1与实施例8-2中所制备的薄膜所制备的薄膜，以及目前临床使用的市售商品的密封贴片(TissuePatch)的撕裂强度。

图14显示，实施例9-1的制程的成膜观察结果。

图15显示，薄膜的细胞贴附测试中，对不同薄膜进行细胞染色的结果。

图16显示，薄膜的细胞贴附测试中，贴附于不同薄膜的细胞数。

图17显示，薄膜的防粘连功效测试中，大鼠的肠道的薄膜植入位置/伤口位置处的组织切片的H&E染色结果。

【符号说明】

100～具多层结构的薄膜；

101～底层；

103～上层；

W、W’～亲水性成分；

O～疏水性成分；

S～界面；

200～具双层结构的双功效薄膜；

200’～具三层结构的双功效薄膜；

201～防粘连层；

202～中间层；

203～贴附层；

S1～防粘连层201与贴附层203的界面；

S1’～防粘连层201与中间层202的界面；

S2’～中间层203与贴附层203的界面。

【具体实施方式】

在本揭露提供一种双功效薄膜，其一表面可良好地贴附于组织及/或伤口，而另一表面则具有防粘连的功效，可避免不期望的组织粘连发生。

本揭露的双功效薄膜为生物可分解的非纤维形式薄膜，且不需藉由缝线或其他方式固定，即可良好地贴附于手术伤口或弥漫性伤口，并防止组织液渗漏。进一步而言，在本揭露的一实施例中，可提供一种免缝线固定的贴附型双功效薄膜，且此双功效薄膜具有止漏功效与防粘连功效。

本揭露的双功效薄膜可具有多层结构，且各层之间可紧密粘合，而不需使用额外的粘合剂，其原理可说明如下，但不限于此。

在本揭露中，双功效薄膜的多层间的粘合，可藉由特定是形成各层的顺序来达成，但不限于此。参见图1。图1为本揭露的双功效薄膜的多层结构的形成原理的示意图。

首先，以同时具有疏水性成分O与亲水性成分W的混合溶液形成底层101，其中混合溶液中同时具有疏水性溶剂与亲水性溶剂。

待底层101干燥后，在底层101上以具有亲水性成分W’的溶液形成上层103，待上层干燥后即形成具多层结构的薄膜100。此具有亲水性成分W’的溶液的溶剂为亲水性溶剂，又亲水性成分W与亲水性成分W’可为相同或不同。

在上层103干燥期间，由于上层103中存在的亲水性溶剂会溶解其下方的底层101的表面区域的亲水性成分，而造成底层101与上层103接触的表面部分溶解，因此上层103中的亲水性成分W’可进入底层的表面，而使底层101与上层103的接触表面互相融合，并使此两层的界面S消失或变得不明显，以使两层紧密粘合。

相反地，若先以具有亲水性成分W’的溶液形成底层101，并于底层101干燥后，以同时具有疏水性成分O与亲水性成分W的混合溶液形成上层103，则由于上层103同时存在疏水性溶剂与亲水性溶剂，因此使得亲水性溶剂在上层103中的含量相较于前述以具有亲水性成分W’的溶液形成上层103的情况来得低，而导致上层103中存在的亲水性溶剂较不易溶解其下方的底层101的表面区域的亲水性成分W’，而使得两层较不易互相粘合。

在一实施例中，本揭露的双功效薄膜可由下述制备双功效薄膜得方法所形成，但不限于此。

上述制备双功效薄膜，可包括，但不限于以下步骤。

参见图2A。图2A显示本揭露的双功效薄膜的形成的一实施例。

首先，将第一高分子溶液干燥成膜，以形成防粘连层201。第一高分子溶液可包括第一疏水性溶液与第一亲水性溶液，但不限于此。

而于上述第一高分子溶液中，第一疏水性溶液的溶质与第一亲水性溶液的溶质的重量比可为约1:0.01-1，例如约1:0.02、约1:0.025、约1:0.03、约1:0.05、约1:0.1、约1:0.2、约1:0.3、约1:0.4、约1:0.5、约1:1等，不限于此。

上述第一疏水性溶液的溶质的例子，可包括，聚己内酯(polycaprolactone,PCL)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA)、聚乳酸(polylacticacid,PLA)、聚乙醇酸(poly(glycolic acid),PGA)、聚羟基丁酸酯(polyhydroxybutyrate,PHB)、聚对二氧环己酮(polydioxanone,PDS)、聚富马酸二羟丙酯(poly(propylenefumarate),PPF)、聚酸酐(polyanhydrides)、聚缩醛(polyacetals)、聚原酸酯(poly(orthoesters))、聚碳酸酯(polycarbonates)、聚氨酯(polyurethanes)、聚磷腈(polyphosphazenes)、聚磷酸酯(polyphosphoester)或上述的任意组合，但不限于此。

在一实施例中，上述第一疏水性溶液的溶质可为聚己内酯、聚乳酸-羟基乙酸共聚物或聚乳酸。在此实施例中，第一疏水性溶液的溶质与第一亲水性溶液的溶质的重量比可为1:0.01-1，例如约1:0.02、约1:0.025、约1:0.03、约1:0.05、约1:0.1、约1:0.2、约1:0.3、约1:0.4、约1:0.5、约1:1等，但不限于此。

在特定一实施例中，上述第一疏水性溶液的溶质可为聚己内酯。在此实施例中，聚己内酯与第一亲水性溶液的溶质的重量比可为1:0.01-1，例如约1:0.02、约1:0.025、约1:0.03、约1:0.05、约1:0.1、约1:0.2、约1:0.3、约1:0.4、约1:0.5、约1:1等，但不限于此。

在另一特定实施例中，上述第一疏水性溶液的溶质可为聚乳酸-羟基乙酸共聚物。在此实施例中，聚乳酸-羟基乙酸共聚物与第一亲水性溶液的溶质的重量比可为1:0.01-1，例如约1:0.02、约1:0.025、约1:0.03、约1:0.05、约1:0.1、约1:0.2、约1:0.3、约1:0.4、约1:0.5、约1:1等，但不限于此。

在又另特定一实施例中，上述第一疏水性溶液的溶质可为聚乳酸。在此实施例中，聚乳酸与第一亲水性溶液的溶质的重量比可为1:0.01-1，例如约1:0.02、约1:0.025、约1:0.03、约1:0.05、约1:0.1、约1:0.2、约1:0.3、约1:0.4、约1:0.5、约1:1等，但不限于此。

而上述第一疏水性溶液的溶剂的例子可包括，但不限于，丙酮、醋酸、氯仿、甲醇、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、二噁烷、乙酸乙酯、甲酸、六氟异丙醇、1-甲基-2-吡咯烷酮氯化物、四氢呋喃、甲苯或其混合溶液。

上述第一亲水性溶液的溶质，可包括，但不限于玻尿酸(hyaluronic acid,HA)、聚乙烯醇(po lyvinyl alcohol,PVA)、羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)、聚乙二醇衍生物、聚环氧乙烷(poly(ethylene oxide),PEO)或其组合等。上述聚乙二醇衍生物的例子则可包括，但不限于，甲基丙烯酸酐改性的聚乙二醇等。又上述甲基丙烯酸酐改性的聚乙二醇的分子量可为约1000-40000，例如约1500、约8000、约35000，但不限于此。

在一实施例中，上述第一亲水性溶液的溶质可为玻尿酸或玻尿酸与聚乙烯醇的组合。在此实施例中，第一疏水性溶液的溶质与玻尿酸或玻尿酸与聚乙烯醇的重量比可为约1:0.01-1，例如约1:0.025、约1:0.05、约1:0.075、约1:0.1等，但不限于此。

在一特定实施例中，上述第一亲水性溶液的溶质可为玻尿酸。在此实施例中，第一疏水性溶液的溶质与玻尿酸的重量比可为约1:0.01-1，例如约1:0.025、约1:0.05、约1:0.1等，但不限于此。

在另一特定实施例中，上述第一亲水性溶液的溶质可为玻尿酸与聚乙烯醇的组合。此实施例中，玻尿酸与聚乙烯醇的重量比可为约1:0.5-5，例如约1:0.5、约1:1、约1:1.5、约1:2、约1:3、约1.4、约1:5等，但不限于此。又，在此实施例中，第一疏水性溶液的溶质、玻尿酸与聚乙烯醇的重量比可为约1:0.01-1:0.01-1，例如约1:0.0125:0.0125、约1:0.0125:0.025、约1:0.025:0.025、约1:0.025:0.05等，但不限于此。

又，于上述第一亲水性溶液中，第一亲水性溶液的溶质的含量可为约0.1-10％(w/v)，例如，0.1％(w/v)、0.25％(w/v)、0.5％(w/v)、1％(w/v)、1.5％(w/v)、2％(w/v)、5％(w/v)、8％(w/v)、10％(w/v)等，但不限于此。

此外，上述第一亲水性溶液的溶剂，可为一亲水性溶剂，例如水、酸性水溶液等，但不限于此。酸性水溶液的例子可包括，但不限于，盐酸水溶液、醋酸水溶液等。

而形成上述第一高分子溶液的方法可包括，将上述第一疏水性溶液与上述第一亲水性溶液混合，其中在第一高分子溶液中，上述第一亲水性溶液的溶质可作为分散剂，且上述第一亲水性溶液的溶质于第一高分子溶液中的含量足以使第一高分子溶液成为一胶态的均相混合物。

将第一高分子溶液干燥成膜以形成防粘连层201的方式并无特别限制，只要第一高分子溶液得以形成一薄膜形态即可。在一实施例中，可将第一高分子溶液倒于一平板上，再利用刮刀进行刮膜程序，之后干燥以形成薄膜。

此外，防粘连层201的厚度可视需要而定，并无特殊限制。在一实施例中，防粘连层201的厚度可为约10-200μm，例如，约15μm、约20μm、约30μm、约50μm、约75μm、约100μm、约125μm、约150μm、约200μm等，但不限于此。在一特定实施例中，防粘连层201的厚度可为约15μm，而在另一特定实施例中，防粘连层201的厚度可为约30μm。

接着，在第一高分子溶液干燥成膜，以形成防粘连层201之后，将第二高分子溶液干燥成膜于上述防粘连层201之上，以形成贴附层203，以形成具双层结构的双功效薄膜200。

而第二高分子溶液可包括，但不限于第二亲水性溶液。

第二亲水性溶液的含水量可为约30000-100000ppm，例如约50000-70000ppm、约50000ppm、约63000ppm、约70000ppm等，但不限于此。又，第二亲水性溶液的粘度可为20-2000cP，例如，约30-200cP、约30cP、约100cP、约200cP、约300-700cP、约300cP、约350cP、约400cP、约450cP、约550cP、约580cP、约600cP、约650cP、约700cP、约800-2000cP、约900cP、约1000cP、约1500cP、约2000cP等，但不限于此。

此外，在第二亲水性溶液中，第二亲水性溶液的溶质的含量可为约0.05-60％(w/v)，例如，约0.05-2％(w/v)、约0.1-10％(w/v)、约25-60％(w/v)等，约0.05％(w/v)、约0.1％(w/v)、约0.2％(w/v)、约0.25％(w/v)、约0.5％(w/v)、约0.75％(w/v)、约1％(w/v)、约1.5％(w/v)、约2％(w/v)、约3％(w/v)、约4％(w/v)、约5％(w/v)、约8％(w/v)、约10％(w/v)、约25％(w/v)、约30％(w/v)、约37％(w/v)、约40％(w/v)、约45％(w/v)、约50％(w/v)、约55％(w/v)、约60％(w/v)等，但不限于此。

第二亲水性溶液的溶质的例子可包括下方所述的至少一种亲水性高分子，但不限于此：明胶(gelatin)、经改性的明胶、褐藻胶(alginate)、聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)、羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)、聚乙二醇衍生物、胶原蛋白(collagen)、去矿化骨基质(demineralized bonematrix,DBM)、骨塑型蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)、白蛋白(albumin)、壳聚糖(chitosan)、纤维蛋白(fibrin)、聚氧化乙烯(polyoxyethylene)、聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone)或上述的任意组合。上述聚乙二醇衍生物的例子则可包括，但不限于甲基丙烯酸酐改性的聚乙二醇等。又上述甲基丙烯酸酐改性的聚乙二醇的分子量可为约1000-40000，例如约1500、约8000、约35000，但不限于此

上述第二亲水性溶液的溶剂，可为亲水性溶剂，例如水、酸性水溶液等，但不限于此。酸性水溶液的例子可包括，但不限于，盐酸水溶液、醋酸水溶液等。

在一实施例中，第二亲水性溶液的溶质为明胶。在此实施例中，明胶的分子量可为约250Bloom，但不限于此。在此实施例中，第二亲水性溶液的含水量可为约30000-100000ppm，例如约50000-70000ppm、约50000ppm、约63000ppm、约70000ppm等，但不限于此。又，在此实施例中，第二亲水性溶液的粘度可为20-1000cP，例如，约250cP、约500cP、约700cP、约950cP等，但也不限于此。另外，在此实施例中，在第二亲水性溶液中，第二亲水性溶液的溶质的含量可为约25-60％(w/v)，例如，约25％(w/v)、约30％(w/v)、约37％(w/v)、约40％(w/v)、约45％(w/v)、约50％(w/v)、约55％(w/v)、约60％(w/v)等，但不限于此。此外，在此实施例中，第二亲水性溶液的溶剂可为水。

在另一实施例中，第二亲水性溶液的溶质为经改性的明胶。经改性的明胶的例子可包括，但不限于，经改性的明胶包括二羟苯丙氨酸(dihydroxyphenyl-alanine,DOPA)改性的明胶(明胶-DOPA)、戊二醛(glutaraldehyde,GA)改性的明胶(明胶-GA)等。在此实施例中，经改性的明胶的分子量可为约250Bloom，但不限于此。在此实施例中，第二亲水性溶液的含水量可为约30000-100000ppm，例如约50000-70000ppm、约50000ppm、约63000ppm、约70000ppm等，但不限于此。又，在此实施例中，第二亲水性溶液的粘度可为100-2000cP，例如，约100、约150、约300、约500cP、约700、约1000cP、约1500、约2000等，但也不限于此。另外，在此实施例中，在第二亲水性溶液中，第二亲水性溶液的溶质的含量可为约25-60％(w/v)，例如，约25％(w/v)、约30％(w/v)、约37％(w/v)、约40％(w/v)、约45％(w/v)、约50％(w/v)、约55％(w/v)、约60％(w/v)等，但不限于此。此外，在此实施例中，第二亲水性溶液的溶剂可为水。

又在另一实施例中，第二亲水性溶液的溶质为羧甲基纤维素。在此实施例中，第二亲水性溶液的含水量可为约30000-100000ppm，例如约50000-70000ppm、约50000ppm、约63000ppm、约70000ppm等，但不限于此。又，在此实施例中，第二亲水性溶液的粘度可为20-1000cP，例如，约30cP、约100cP、约250cP等，但也不限于此。另外，在此实施例中，在第二亲水性溶液中，第二亲水性溶液的溶质的含量可为约0.1-10％(w/v)，例如，约0.1％(w/v)、约0.5％(w/v)、约1％(w/v)、约2％(w/v)、约3％(w/v)、约4％(w/v)、约5％(w/v)、约8％(w/v)、约10％(w/v)等，但不限于此。此外，在此实施例中，第二亲水性溶液的溶剂可为水。

在又另一实施例中，第二亲水性溶液的溶质为胶原蛋白。在此实施例中，第二亲水性溶液的含水量可为约30000-100000ppm，例如约50000-70000ppm、约50000ppm、约63000ppm、约70000ppm等，但不限于此。又，在此实施例中，第二亲水性溶液的粘度可为100-2000cP，例如，约250cP、约1000cP等，但也不限于此。另外，在此实施例中，在第二亲水性溶液中，第二亲水性溶液的溶质的含量可为约0.05-2％(w/v)，例如，约0.05％(w/v)、约0.1％(w/v)、约0.2％(w/v)、约0.25％(w/v)、约0.5％(w/v)、约0.75％(w/v)、约1％(w/v)、约1.5％(w/v)、约2％(w/v)等，但不限于此。此外，在此实施例中，第二亲水性溶液的溶剂可为盐酸水溶液。

第二亲水性溶液的溶剂与第一亲水性溶液的溶剂可为相同或不同，只要第二亲水性溶液的溶剂也可溶解第一亲水性溶液的溶质即可。

同前方所述的原理，在将第二高分子溶液干燥于防粘连层201之上以形成贴附层203期间，由于贴附层203中的第二亲水性溶剂会溶解其下方的防粘连层201的表面区域的第一亲水性高分子，而造成防粘连层201与贴附层203接触的表面部分溶解，因此贴附层203中的第二亲水性高分子可进入防粘连层201的表面，而使防粘连层201与贴附层203的接触表面互相融合，并使此两层的界面S1消失或变得不明显，以使两层紧密粘合。

将第二高分子溶液干燥成膜以形成贴附层203的方式并无特别限制，只要第二高分子溶液得以形成一薄膜形态即可。在一实施例中，可将第二高分子溶液倒于防粘连层201的表面上，再利用刮刀进行刮膜程序，之后干燥以形成薄膜。

此外，贴附层203的厚度可视需要而定，并无特殊限制。在一实施例中，贴附层203的厚度可为约10-200μm，例如，约15μm、约20μm、约30μm、约50μm、约75μm、约100μm、约125μm、约150μm、约200μm等，但不限于此。在一特定实施例中，贴附层203的厚度可为约15μm，而在另一特定实施例中，贴附层203的厚度可为约30μm。

图2B显示本揭露的双功效薄膜的形成的另一实施例。在此实施例中，上述制备双功效薄膜的方法，除了上述将第一高分子溶液干燥成膜以形成防粘连层201的步骤与在第一高分子溶液干燥成膜，以形成防粘连层201之后，将第二高分子溶液干燥成膜于上述防粘连层201之上以形成贴附层203的步骤，还可包括在将第三高分子溶液干燥成膜于防粘连层201上，以形成中间层202于防粘连层201与贴附层203之间。

所有关于防粘连层201与贴附层203以及其形成的说明，同前方所述，因此不于此再重复赘述。

参见图2B。于形成防粘连层201之后，在将第三高分子溶液干燥成膜于防粘连层201上以形成中间层202。第三高分子溶液可包括第二疏水性溶液与第三亲水性溶液，但不限于此。

在上述第三高分子溶液中，第二疏水性溶液的溶质与第三亲水性溶液的溶质的重量比可为约1:0.005-5，例如约1:0.0125、约1:0.15、约1:0.5、约1:0.925、约1:1、约1:1.85等，但不限于此。

上述第二疏水性溶液的溶质的例子，可包括，聚己内酯、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸、聚羟基丁酸酯、聚对二氧环己酮、聚富马酸二羟丙酯、聚酸酐、聚缩醛、聚原酸酯、聚碳酸酯、聚氨酯、聚磷腈、聚磷酸酯或上述的任意组合，但不限于此。

在一实施例中，上述第二疏水性溶液的溶质可为聚己内酯、聚乳酸-羟基乙酸共聚物或聚乳酸。在此实施例中，第二疏水性溶液的溶质与第三亲水性溶液的溶质的重量比可为1:0.005-5，例如约1:0.0125、约1:0925、约1:1.85等，但不限于此。

在一特定实施例中，上述第二疏水性溶液的溶质可为聚己内酯。在此实施例中，聚己内酯与第三亲水性溶液的溶质的重量比可为约1:0.005-5，例如约1:0.0125、约1:0925、约1:1.25、约1:1.85等，但不限于此。

在另一特定实施例中，上述第二疏水性溶液的溶质可为聚乳酸-羟基乙酸共聚物。在此实施例中，聚乳酸-羟基乙酸共聚物与第三亲水性溶液的溶质的重量比可为约1:0.005-5，例如约1:0.925、约1:1.25、约1:1.85等，但不限于此。

在又另一特定实施例中，上述第二疏水性溶液的溶质可为聚乳酸共聚物。在此实施例中，聚乳酸与第三亲水性溶液的溶质的重量比可为约1:0.005-5，例如约1:0.5、约1:1、约1:1.25等，但不限于此。

第三亲水性溶液的含水量可为约30000-100000ppm，例如约50000-70000ppm、约50000ppm、约63000ppm、约70000ppm等，但不限于此。又，第二亲水性溶液的粘度可为20-2000cP，例如，约30-200cP、约30cP、约100cP、约200cP、约300-700cP、约300cP、约350cP、约400cP、约450cP、约550cP、约580cP、约600cP、约650cP、约700cP等，但不限于此。

此外，在第三亲水性溶液中，第三亲水性溶液的溶质的含量可为约0.05-60％(w/v)，例如，约0.05-2％(w/v)、约0.1-10％(w/v)、约25-60％(w/v)等，约0.05％(w/v)、约0.1％(w/v)、约0.2％(w/v)、约0.25％(w/v)、约0.5％(w/v)、约0.75％(w/v)、约1％(w/v)、约1.5％(w/v)、约2％(w/v)、约3％(w/v)、约4％(w/v)、约5％(w/v)、约8％(w/v)、约10％(w/v)、约25％(w/v)、约30％(w/v)、约37％(w/v)、约40％(w/v)、约45％(w/v)、约50％(w/v)、约55％(w/v)、约60％(w/v)等，但不限于此。

第三亲水性溶液的溶质的例子可包括下方所述的至少一种亲水性高分子，但不限于此：明胶、经改性的明胶、褐藻胶、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙二醇衍生物、胶原蛋白、去矿化骨基质、骨塑型蛋白、白蛋白、壳聚糖、纤维蛋白、聚氧化乙烯、聚乙烯吡咯烷酮或上述的任意组合。上述聚乙二醇衍生物的例子则可包括，但不限于甲基丙烯酸酐改性的聚乙二醇等。又上述甲基丙烯酸酐改性的聚乙二醇的分子量可为约1000-40000，例如约1500、约8000、约35000，但不限于此。

上述第三亲水性溶液的溶剂可为亲水性溶剂，例如水、酸性水溶液等，但不限于此。酸性水溶液的例子可包括，但不限于，盐酸水溶液、醋酸水溶液等。

在一实施例中，第三亲水性溶液的溶质可为明胶。在此实施例中，明胶的分子量可为约250Bloom，但不限于此。在此实施例中，第三亲水性溶液的含水量可为约30000-100000ppm，例如约50000-70000ppm、约50000ppm、约63000ppm、约70000ppm等，但不限于此。又，在此实施例中，第三亲水性溶液的粘度可为20-1000cP，例如，约250cP、约950cP等，但也不限于此。另外，在此实施例中，在第三亲水性溶液中，第三亲水性溶液的溶质的含量可为约25-60％(w/v)，例如，约25％(w/v)、约30％(w/v)、约37％(w/v)、约40％(w/v)、约45％(w/v)、约50％(w/v)、约55％(w/v)、约60％(w/v)等，但不限于此。此外，在此实施例中，第三亲水性溶液的溶剂可为水。

在另一实施例中，第三亲水性溶液的溶质为经改性的明胶。经改性的明胶的例子可包括，但不限于，经改性的明胶包括二羟苯丙氨酸(DOPA)改性的明胶(明胶-DOPA)、戊二醛(GA)改性的明胶(明胶-GA)等。在此实施例中，经改性的明胶的分子量可为约250Bloom，但不限于此。在此实施例中，第三亲水性溶液的含水量可为约30000-100000ppm，例如约50000-70000ppm、约50000ppm、约63000ppm、约70000ppm等，但不限于此。又，在此实施例中，第三亲水性溶液的粘度可为100-2000cP，例如，约100、约150、约300、约500cP、约700、约1000cP、约1500、约2000等，但也不限于此。另外，在此实施例中，第三亲水性溶液中，第三亲水性溶液的溶质的含量可为约25-60％(w/v)，例如，约25％(w/v)、约30％(w/v)、约37％(w/v)、约40％(w/v)、约45％(w/v)、约50％(w/v)、约55％(w/v)、约60％(w/v)等，但不限于此。此外，在此实施例中，第三亲水性溶液的溶剂可为水。

在又另一实施例中，第三亲水性溶液的溶质可为胶原蛋白。在此实施例中，第三亲水性溶液的含水量可为约30000-100000ppm，例如约50000-70000ppm、约50000ppm、约63000ppm、约70000ppm等，但不限于此。又，在此实施例中，第三亲水性溶液的粘度可为100-2000cP，例如，约500cP、约1000cP等，但也不限于此。另外，在此实施例中，第三亲水性溶液中，第三亲水性溶液的溶质的含量可为约0.05-2％(w/v)，例如，约0.05％(w/v)、约0.1％(w/v)、约0.2％(w/v)、约0.25％(w/v)、约0.5％(w/v)、约0.75％(w/v)、约1％(w/v)、约1.5％(w/v)、约2％(w/v)等，但不限于此。此外，在此实施例中，第三亲水性溶液的溶剂可为盐酸水溶液。

而形成上述第三高分子溶液的方法可包括，将上述第二疏水性溶液与上述第三亲水性溶液混合，其中在第三高分子溶液中，上述第三亲水性溶液的溶质可作为分散剂，且上述第三亲水性溶液的溶质于第三高分子溶液中的含量足以使第三高分子溶液成为一胶态的均相混合物。

将第三高分子溶液干燥成膜以形成中间层202的方式并无特别限制，只要第三高分子溶液得以形成一薄膜形态即可。在一实施例中，可将第三高分子溶液倒于防粘连层201的表面上，再利用刮刀进行刮膜程序，之后干燥以形成薄膜。

此外，中间层202的厚度可视需要而定，并无特殊限制。在一实施例中，中间层202的厚度可为约10-200μm，例如，约15μm、约20μm、约30μm、约50μm、约75μm、约100μm、约125μm、约150μm、约200μm等，但不限于此。在一特定实施例中，贴附层203的厚度可为约15μm，而在另一特定实施例中，贴附层203的厚度可为约30μm。

第三亲水性溶液的溶剂与第一亲水性溶液的溶剂可为相同或不同，只要第三亲水性溶液的溶剂也可溶解第一亲水性溶液的溶质即可。

同前方所述的原理，在将第三高分子溶液干燥于防粘连层201之上以形成中间层202期间，由于中间层202中的第三亲水性溶剂会溶解其下方的防粘连层201的表面区域的第一亲水性高分子，而造成防粘连层201与中间层202接触的表面部分溶解，因此中间层202中的第三亲水性高分子可进入防粘连层201的表面，而使防粘连层201与中间层202的接触表面互相融合，并使此两层的界面S1’消失或变得不明显，以使两层紧密粘合。

将第三高分子溶液于防粘连层201干燥成膜以形成中间层202之后，将第二高分子溶液于中间层202上干燥成膜以形成贴附层203以形成具三层结构的双功效薄膜200’。

第二亲水性溶液的溶剂与第三亲水性溶液的溶剂可为相同或不同，只要第二亲水性溶液的溶剂也可溶解第三亲水性溶液的溶质即可。

同前方所述的原理，由于贴附层203中的第二亲水性溶剂会溶解其下方的中间层202的表面区域的第三亲水性高分子，而造成中间层202与贴附层203接触的表面部分溶解，因此贴附层203中的第二亲水性高分子可进入中间层202的表面，而使中间层202与贴附层203的接触表面互相融合，并使此两层的界面S2’消失或变得不明显，以使两层紧密粘合。

基于上述，本揭露还可提供上述任一种制备双功效薄膜的方法与由其所制备的薄膜。

另外，基于上述，本揭露也提供一种双功效薄膜。此双功效薄膜可包括防粘连层与贴附层于防粘连层之上，但不限于此。

上述防粘连层可由第一高分子混合物所构成，而第一高分子混合物可包括，但不限于，第一疏水性高分子与第一亲水性高分子。

在此所述的第一疏水性高分子与第一亲水性高分子可分别对应至前述第一疏水性溶液的溶质与第一亲水性溶液的溶质，且此两者的相关说明分别与第一疏水性溶液的溶质与第一亲水性溶液的溶质的相关说明相同，因此不于此重复赘述。

而上述贴附层则可由第二亲水性高分子所构成。

在此所述的第二亲水性高分子可对应至前述第二亲水性溶液的溶质，且此其相关说明与第二亲水性溶液的溶质的相关说明相同，因此不于此重复赘述。

在一实施例中，上述本揭露的双功效薄膜除了防粘连层与贴附层之外，还可包括在防粘连层与贴附层之间的中间层。

上述中间层可由第二高分子混合物所构成，而第二高分子混合物可包括，但不限于，第二疏水性高分子与第三亲水性高分子。

在此所述的第二疏水性高分子与第三亲水性高分子可分别对应至前述第二疏水性溶液的溶质与第三亲水性溶液的溶质，且此两者的相关说明分别与第二疏水性溶液的溶质与第三亲水性溶液的溶质的相关说明相同，因此不于此重复赘述。

上述任一本揭露的双功效薄膜的***强度(ASTM F2392)可为约250-600cmH2O，但不限于此。

上述任一本揭露的双功效薄膜的拉伸强度(ASTM D882)可为约2-36MPa，但不限于此。

上述任一本揭露的双功效薄膜的撕裂强度(ASTM D1004)可为约1-10N，但不限于此。

实施例

A.不同浓度的明胶溶液的含水率与粘度

将不同重量的明胶加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成30％、37％与50％明胶溶液的配制。

另用水分分析仪，并以50mL/分钟流量通入氮气来对上述不同浓度的明胶溶液进行含水率测定。又，利用粘度计对上述不同浓度的明胶溶液进行粘度测定。结果分别如表1与图3所示。

表1

明胶浓度(w/v)	含水率(ppm)
		30％	70000
37％	63000
		50％	50000

B.含PCL/HA/PVA层与明胶层的双层薄膜

B-1.双层薄膜的制备

比较例1-1

含明胶底层+PCL/HA/PVA上层的双层薄膜

1.底层-贴附层的形成

(1)将3.7g的明胶加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成37％明胶溶液的配制。

(2)将37％明胶溶液由烘箱取出，倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜(通风橱)中静置20分钟以挥发溶剂，以形成底层的贴附层。

2.上层-防粘连层的形成

将4g的聚己内酯(PCL)加入20ml的二氯甲烷(DCM)，再以转速50rpm进行混合12小时，完成20％聚己内酯(PCL)溶液的配制。

将0.1g的玻尿酸(HA)与0.1g的聚乙烯醇(PVA)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成含1％玻尿酸(HA)及1％聚乙烯醇(PVA)的溶液的配制。

将含1％玻尿酸(HA)及1％聚乙烯醇(PVA)的溶液由烘箱取出，并倒入20％聚己内酯(PCL)溶液中(溶液取出至倒入20％PCL溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

将混合物倒于上述已形成有贴附层的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的防粘连层，并获得双层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

比较例1-2

含PCL/明胶底层+PCL/HA/PVA上层的双层薄膜

1.底层-贴附层的形成

(1)将2.4g的聚己内酯(PCL)加入12ml的二氯甲烷(DCM)，再以转速50rpm进行混合12小时，以完成20％聚己内酯(PCL)溶液的配制。

(2)将2.22g的明胶加入6ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成37％明胶溶液的配制。

(3)将37％明胶溶液由烘箱取出，并倒入20％聚己内酯溶液中(溶液取出至倒入20％聚己内酯溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

(4)将混合物倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成底层的贴附层。

2.上层-防粘连层的形成

(1)将4g的聚己内酯(PCL)加入20ml的二氯甲烷(DCM)，再以转速50rpm进行混合12小时，以完成20％聚己内酯(PCL)溶液的配制。

(2)将0.1g的玻尿酸(HA)与0.1g的聚乙烯醇(PVA)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成含1％玻尿酸(HA)及1％聚乙烯醇(PVA)的溶液的配制。

(3)将含1％玻尿酸(HA)及1％聚乙烯醇(PVA)的溶液由烘箱取出，并倒入20％聚己内酯(PCL)溶液中(溶液取出至倒入20％PCL溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

(4)将混合物倒于上述已形成有贴附层的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的防粘连层，并获得双层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例1-1

含PCL/HA/PVA底层+明胶上层的双层薄膜

1.底层-防粘连层的形成

(2)将0.1g的玻尿酸(HA)与0.1g的聚乙烯醇(PVA)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，以完成含1％玻尿酸(HA)及1％聚乙烯醇(PVA)的溶液的配制。

(4)将混合物倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成底层的防粘连层。

2.上层-贴附层的形成

(2)将37％明胶溶液由烘箱取出，倒于上述已形成有防粘连层的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的贴附层，并获得双层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

B-2.薄膜的分层测试

将比较例1-1与实施例1-1中所制备的薄膜分别浸泡于PBS缓冲溶液中，并观察薄膜是否出现分层。

结果显示，以本揭露特定形成各层的顺序(实施例1-1)所制备出的薄膜，再经过30分钟浸泡后，薄膜的各层间仍不会分离(参见图4)。相对于此，以相反的形成顺序各层的顺序所制备的薄膜(比较例1-1)，于浸泡溶液后5钟内，薄膜的各层间即发生分层，而使薄膜的各层彼此分离(参见图4)。

B-3.***强度(burst strength)的标准测试

将比较例1-1、比较例1-2与实施例1-1中所制备的薄膜，以及目前临床使用的市售商品的密封贴片(TissuePatch)(聚乳酸(polylactic acid,PLA)所形成，双层结构，以化学共价键来达成贴附效果)，参照ASTM F2392所定义的手术密合物的***强度的标准测试方法(Standard Test Method for Burst Strength of Surgical Sealants)，来进行薄膜的***强度测试。

依据ASTM F2392的***强度测试的操作流程概述如下：

将待测薄膜裁切为直径1.5cm大小的圆片，再将此直径1.5cm薄膜圆片附于猪肠膜上，并于环境温度37度下维持15分钟以制备猪肠测试样本。接着，将制备好的猪肠测试样本架上一水压测试模具，将水压测试模具并以经由蠕动帮浦调整3ml/分钟的流速进行***测试。

结果如图5所示。

依据图5可知，以本揭露特定形成各层的顺序(实施例1-1)所制备出的薄膜的***强度，高于以相反的形成顺序各层的顺序所制备的薄膜(比较例1-2)，且也高于市售商品的密封贴片(TissuePatch)。而尽管比较例1-1所制备出的薄膜的***强度，高于实施例1-1所制备出的薄膜，但同前方所述，比较例1-1所制备出的薄膜的各层间会发生分层。

C.含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜

C-1.三层薄膜的制备

实施例2-1

含PCL/HA底层+PCL/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(未采用PVA溶液，0％PVA溶液)

1.底层-防粘连层的形成

(2)将0.1g的玻尿酸(HA)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成1％玻尿酸(HA)溶液的配制。

(3)将1％玻尿酸(HA)溶液由烘箱取出，并倒入20％聚己内酯(PCL)溶液中(溶液取出至倒入20％PCL溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

2.中间层的形成

(4)将混合物倒于上述已形成有防粘连层的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成中间层。

3.上层-贴附层的形成

(2)将37％明胶溶液由烘箱取出，倒于上述已形成有防粘连层与中间层的双层薄膜的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的贴附层，并获得三层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例2-2

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(采用1％PVA溶液)

1.底层-防粘连层的形成

(2)将0.1g的玻尿酸(HA)与0.1g的聚乙烯醇(PVA)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成含1％玻尿酸(HA)及1％的聚乙烯醇(PVA)的溶液的配制。

2.中间层的形成

3.上层-贴附层的形成

实施例2-3

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(采用2％PVA溶液)

1.底层-防粘连层的形成

(2)将0.1g的玻尿酸(HA)与0.2g的聚乙烯醇(PVA)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成含1％玻尿酸(HA)及2％的聚乙烯醇(PVA)的溶液的配制。

(3)将含1％玻尿酸(HA)及2％聚乙烯醇(PVA)的溶液由烘箱取出，并倒入20％聚己内酯(PCL)溶液中(溶液取出至倒入20％PCL溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

2.中间层的形成

3.上层-贴附层的形成

C-2.成膜的观察

观察实施例2-1、实施例2-2与实施例2-3的制程是否可形成薄膜。结果如图6所示。

依据图6可知，以实施例2-1至2-3(分别采用0％、1％与2％PVA溶液)皆可形成薄膜，其中1％PVA溶液所形成的薄膜表面最均匀。

D.含PLGA/HA/PVA底层+PLGA/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜以及含PLA/HA/PVA底层+PLA/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜

D-1.三层薄膜的制备

实施例3-1

含PLGA/HA/PVA底层+PLGA/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(采用10％PLGA溶液)

1.底层-防粘连层的形成

(1)将2g的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)加入20ml的二氯甲烷(DCM)，再以转速50rpm进行混合12小时，以完成10％PLGA溶液的配制。

(3)将1％玻尿酸(HA)及聚乙烯醇(PVA)溶液由烘箱取出，并分别倒入10％聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)溶液中(溶液取出至倒入聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

2.中间层的形成

(1)将1.2g的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)加入12ml的二氯甲烷(DCM)，再以转速50rpm进行混合12小时，以完成10％聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)溶液的配制。

(3)将37％明胶溶液由烘箱取出，并分别倒入10％聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)溶液中(溶液取出至倒入聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

3.上层-贴附层的形成

(1)将3.7g的明胶加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成37％明胶(Gelatin)溶液的配制。

(2)将37％明胶溶液由烘箱取出，倒于上述已形成有防粘连层与中间层的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，形成贴附层，以获得三层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例3-2

含PLGA/HA/PVA底层+PLGA/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(采用15％PLGA溶液)

除了在底层-防粘连层的形成与中间层的形成中，采用15％PLGA溶液(在底层-防粘连层的形成中，以3g的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)加入20ml的二氯甲烷(DCM)，而在中间层的形成中1.8g的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)加入12ml的二氯甲烷(DCM))，其他制程皆与实施例3-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例3-3

含PLGA/HA/PVA底层+PLGA/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(采用20％PLGA溶液)

除了在底层-防粘连层的形成与中间层的形成中，采用15％PLGA溶液(在底层-防粘连层的形成中，以4g的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)加入20ml的二氯甲烷(DCM)，而在中间层的形成中2.4g的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)加入12ml的二氯甲烷(DCM))，其他制程皆与实施例3-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例4-1

含PLA/HA/PVA底层+PLA/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(采用10％PLA溶液)

1.底层-防粘连层的形成

(1)将2g的聚乳酸(PLA)(PDL20,1.6-2.4dl/g,Corbion)加入20ml的二氯甲烷(DCM)，再以转速50rpm进行混合12小时，以完成10％PLA溶液的配制。

(3)将含1％玻尿酸(HA)及1％聚乙烯醇(PVA)的溶液由烘箱取出，并分别倒入10％聚乳酸(PLA)溶液中(溶液取出至倒入聚乳酸(PLA)溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

2.中间层的形成

(1)将1.2g的聚乳酸(PLA)加入12ml的二氯甲烷(DCM)，再以转速50rpm进行混合12小时，以完成10％聚乳酸(PLA)溶液的配制。

(3)将37％明胶溶液由烘箱取出，并分别倒入10％聚乳酸(PLA)溶液中(溶液取出至倒入聚乳酸(PLA)的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

3.上层-贴附层的形成

实施例4-2

含PLA/HA/PVA底层+PLA/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(采用15％PLA溶液)

除了在底层-防粘连层的形成与中间层的形成中，采用15％PLA溶液(在底层-防粘连层的形成中，以3g的聚乳酸(PLA)加入20ml的二氯甲烷(DCM)，而在中间层的形成中1.8g聚乳酸(PLA)加入12ml的二氯甲烷(DCM))，其他制程皆与实施例4-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例4-3

含PLA/HA/PVA底层+PLA/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(采用20％PLA溶液)

除了在底层-防粘连层的形成与中间层的形成中，采用15％PLA溶液(在底层-防粘连层的形成中，以4g的聚乳酸(PLA)加入20ml的二氯甲烷(DCM)，而在中间层的形成中2.4g的聚乳酸(PLA)加入12ml的二氯甲烷(DCM))，其他制程皆与实施例4-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

D-2.成膜的观察

观察实施例3-1至3-3与实施例4-1至4-3的制程是否可形成薄膜。结果如图7所示。

依据图7可知，除实施例4-3外，实施例3-1至3-3(采用10-20％PLGA溶液)与实施例4-1至4-2(采用10-15％PGA溶液)，皆可形成薄膜。

E.含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+CMC上层的三层薄膜以及含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+胶原蛋白上层的三层薄膜

E-1.三层薄膜的制备

实施例5-1

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+CMC上层的三层薄膜(采用1％CMC溶液)

1.底层-防粘连层的形成

2.中间层的形成

3.上层-贴附层的形成

(1)将0.1g的羧甲基纤维素(CMC)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成1％羧甲基纤维素(CMC)溶液的配制。

(2)将1％羧甲基纤维素(CMC)溶液由烘箱取出，倒于上述已形成有防粘连层与中间层的双层薄膜的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的贴附层，并获得三层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例5-2

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+CMC上层的三层薄膜(采用2％CMC溶液)

除了在上层-贴附层的形成中，采用2％羧甲基纤维素(CMC)溶液(在上层-贴附层的形成中，以0.2g的羧甲基纤维素(CMC)加入10ml的去离子水(DDW))，其他制程皆与实施例5-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例5-3

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+CMC上层的三层薄膜(采用3％CMC溶液)

除了在上层-贴附层的形成中，采用3％羧甲基纤维素(CMC)溶液(在上层-贴附层的形成中，以0.3g的羧甲基纤维素(CMC)加入10ml的去离子水(DDW))，其他制程皆与实施例5-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例5-4

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+CMC上层的三层薄膜(采用4％CMC溶液)

除了在上层-贴附层的形成中，采用4％羧甲基纤维素(CMC)溶液(在上层-贴附层的形成中，以0.4g的羧甲基纤维素(CMC)加入10ml的去离子水(DDW))，其他制程皆与实施例5-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例5-5

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+CMC上层的三层薄膜(采用5％CMC溶液)

除了在上层-贴附层的形成中，采用5％羧甲基纤维素(CMC)溶液(在上层-贴附层的形成中，以0.5g的羧甲基纤维素(CMC)加入10ml的去离子水(DDW))，其他制程皆与实施例5-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例6-1

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+胶原蛋白上层的三层薄膜(采用0.25％胶原蛋白溶液)

1.底层-防粘连层的形成

2.中间层的形成

3.上层-贴附层的形成

(1)将0.025g的胶原蛋白加入10ml的0.001N HCl水溶液，利用均质机搅拌以被溶解，完成0.25％胶原蛋白溶液的配制。

(2)将0.25％胶原蛋白溶液倒于上述已形成有防粘连层与中间层的双层薄膜的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的贴附层，并获得三层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例6-2

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+胶原蛋白上层的三层薄膜(采用0.5％胶原蛋白溶液)

除了在上层-贴附层的形成中，采用0.5％胶原蛋白溶液(在上层-贴附层的形成中，以0.05g的胶原蛋白加入10ml的0.001N HCl水溶液)，其他制程皆与实施例6-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例6-3

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+胶原蛋白上层的三层薄膜(采用0.75％胶原蛋白溶液)

除了在上层-贴附层的形成中，采用0.75％胶原蛋白溶液(在上层-贴附层的形成中，以0.075g的胶原蛋白加入10ml的0.001N HCl水溶液)，其他制程皆与实施例6-1相同(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

E-2.成膜的观察

观察实施例5-1至5-5与实施例6-1至6-3的制程是否可形成薄膜。结果如图8与图9所示。

依据图8与图9可知，实施例5-1至5-5(采用1-5％CMC溶液)与实施例6-1至6-3(采用0.25％、0.5％与0.75％胶原蛋白溶液)，皆可形成薄膜。

F.含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+明胶-DOPA上层的三层薄膜以及含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+明胶-GA上层的三层薄膜

F-1.三层薄膜的制备

实施例7-1

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+明胶-DOPA上层的三层薄膜

1.底层-防粘连层的形成

2.中间层的形成

3.上层-贴附层的形成

(1)将3.7g的明胶-DOPA加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成37％明胶溶液的配制。

(2)将37％明胶-DOPA溶液由烘箱取出，倒于上述已形成有防粘连层与中间层的双层薄膜的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的贴附层，并获得三层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

实施例7-2

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+明胶-GA上层的三层薄膜

1.底层-防粘连层的形成

2.中间层的形成

3.上层-贴附层的形成

(1)将3.7g的明胶加入10ml的去离子水(DDW)并在40-50℃隔水加热，同时以滴定方式加入0.025％戊二醛(Glutaraldehyde，GA)溶液并搅拌以进行持续交联反应1小时，接着于50℃烘箱加热12-16小时以进行溶解，完成37％明胶-GA溶液的配制。

(2)将37％明胶-GA溶液由烘箱取出，倒于上述已形成有防粘连层与中间层的双层薄膜的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的贴附层，并获得三层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

G.含PCL/HA/PVA+PCL/明胶层+明胶层的三层薄膜

G-1.三层薄膜的制备

比较例2-1

含明胶底层+PCL/明胶中间层+PCL/HA/PVA上层的三层薄膜(在刮膜程序中使用厚度为150μm的刮刀)

1.底层-贴附层的形成

(2)将37％明胶溶液由烘箱取出，倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，形成底层的贴附层。

2.中间层的形成

(2)将2.22g的明胶加入6ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成37％明胶(Gelatin)溶液的配制。

(4)将混合物倒于上述已形成有贴附层的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成中间层。

3.上层-防粘连层的形成

(4)将混合物倒于上述已形成有贴附层与中间层的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的防粘连层，获得三层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

比较例2-2

含明胶底层+PCL/明胶中间层+PCL/HA/PVA上层的三层薄膜(在刮膜程序中使用厚度为75μm的刮刀)

除了在刮膜程序中使用厚度为75μm的刮刀外，其他制程皆与比较例2-1相同(各层在干燥前的厚度为约75μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约15μm)。

实施例8-1

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(在刮膜程序中使用厚度为150μm的刮刀)

1.底层-防粘连层的形成

2.中间层的形成

3.上层-贴附层的形成

实施例8-2

含PCL/HA/PVA底层+PCL/明胶中间层+明胶上层的三层薄膜(在刮膜程序中使用厚度为75μm的刮刀)

除了各层厚度为75μm外，其他制程皆与实施例8-1相同(各层在干燥前的厚度为约75μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约15μm)。

G-2.薄膜的分层测试

将实施例8-1与8-2以及比较例2-1与2-2中所制备的薄膜分别浸泡于PBS缓冲溶液中，并观察薄膜是否出现分层。结果如表2与图10所示。

表2

N：未出现分层；

Y：出现分层

结果显示，以本揭露特定形成各层的顺序(实施例8-1与8-2)所制备出的薄膜，在经过30分钟浸泡后，薄膜的各层间仍不会分离(参见图10)。相对于此，以相反的形成顺序各层的顺序所制备的薄膜(比较例2-1与2-2)，在浸泡5钟内，薄膜的各层之间即发生分层，而使薄膜的各层彼此分离(参见图10)。

G-3.***强度的标准测试

将比较例1-2、实施例7-1、实施例7-2、实施例8-1与实施例8-2中所制备的薄膜，以及目前临床使用的市售商品的密封贴片(TissuePatch)(聚乳酸(polylactic acid,PLA)所形成，双层结构，以化学共价键来达成贴附效果)，参照ASTM F2392所定义的手术密合物的***强度的标准测试方法，来进行薄膜的***强度测试。

依据ASTM F2392的***强度测试的操作流程概述如下：

将待测薄膜裁切为直径1.5cm大小的圆片，再将此直径1.5cm薄膜圆片附于猪肠膜上，并于环境温度37度下维持15分钟以制备猪肠测试样本。接着，将制备好的猪肠测试样本架上水压测试模具，将水压测试模具并以经由蠕动帮浦调整3ml/分钟的流速进行***测试。

结果如图11A与11B所示。

依据图11A与11B可知，以本揭露特定形成各层的顺序(实施例7-1、实施例7-2、实施例8-1与实施例8-2)所制备出的薄膜的***强度，高于以相反的形成顺序各层的顺序所制备的薄膜(比较例1-2)，也高于市售商品的密封贴片(TissuePatch)。

G-4.拉伸强度测试

将比较例1-2、实施例8-1与实施例8-2中所制备的薄膜，以及目前临床使用的市售商品密封贴片(TissuePatch)依据ASTM D882规范塑料薄片的拉伸特性的标准测试方法(Standard Test Method for Tensile Properties of Thin Plastic Sheeting)，来进行拉伸测试。

依据ASTM D882的拉伸测试的操作流程概述如下：

ASTM D882规范用以量测拉力强度性质，特别适用于厚度在1mm以下的可塑性薄膜。依据此规范，使用锋利的裁切刀将测试试片裁切成150*25.4mm²的长条形状，并将上下气压夹具的初始距离调整成100mm，且将拉伸速度设定为12.5mm/分钟。测试结果显示于图12。

图12显示，以本揭露特定形成各层的顺序(实施例实施例8-1与实施例8-2)所制备出的薄膜的拉伸强度，高于以相反的形成顺序各层的顺序所制备的薄膜(比较例1-2)约2-3倍，但低于市售商品的密封贴片(TissuePatch)。

G-5.撕裂强度测试

将比较例1-2、实施例8-1与实施例8-2中所制备的薄膜，以及目前临床使用的密封贴片(TissuePatch)依据ASTM D1004规范塑料薄片的拉伸特性的标准测试方法，来进行撕裂强度测试。

依据ASTM D1004的撕裂强度测试的操作流程概述如下：

参照ASTM D1004进行撕裂强度测试，依据标准内容设计试片大小，利用万能拉伸试验机以51mm±5％/分钟的拉伸速度进行撕裂测试。结果如图13所示。

依据图13可知，以本揭露特定形成各层的顺序(实施例实施例8-1与实施例8-2)所制备出的薄膜的撕裂强度，高于以相反的形成顺序各层的顺序所制备的薄膜(比较例1-2)约1-1.5倍，也高于市售商品的密封贴片(TissuePatch)。

H.含PCL/HA/PVA底层+PCL/胶原蛋白中间层+胶原蛋白上层的三层薄膜

H-1.三层薄膜的制备

实施例9-1

含PCL/HA/PVA底层+PCL/胶原蛋白中间层+胶原蛋白上层的三层薄膜(在刮膜程序中使用厚度为150μm的刮刀)

1.底层-防粘连层的形成

2.中间层的形成

(2)将0.05g的胶原蛋白加入10ml的0.001N HCl水溶液，利用均质机搅拌以被溶解，完成0.5％胶原蛋白溶液的配制。

(3)将0.5％胶原蛋白溶液倒入20％聚己内酯溶液中(溶液倒入20％聚己内酯溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

3.上层-贴附层的形成

(1)将0.05g的胶原蛋白加入10ml的0.001N HCl水溶液，利用均质机搅拌以被溶解，完成0.5％胶原蛋白溶液的配制。

(2)将0.5％胶原蛋白溶液倒于上述已形成有防粘连层与中间层的双层薄膜的特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成上层的贴附层，并获得三层薄膜(各层在干燥前的厚度为约150μm(刮刀的厚度)，在干燥成膜后的厚度为约30μm)。

H-2.成膜的观察

观察实施例9-1的制程是否可形成薄膜。结果如图14所示。

依据图14可知，实施例9-1(中间层与上层采用0.5％胶原蛋白溶液)，可形成薄膜。

I.薄膜的细胞贴附测试

I-1.含不同成分的多种薄膜的制备

分别制备纯PCL薄膜、PCL/明胶薄膜、PCL/HA薄膜、PCL/HA/PVA(使用1％PVA溶液)薄膜、PCL/HA/PVA(使用2％PVA溶液)薄膜、PCL/CMC/PEG薄膜与PCL/CMC/PEO薄膜。

上述各薄膜的制备方法如下方所述：

1.纯PCL薄膜的制备

(2)将20％聚己内酯(PCL)溶液倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成单层的纯PCL薄膜。

2.PCL/明胶薄膜的制备

(2)将3.7g的明胶加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成37％明胶溶液的配制。

(4)将混合物倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成单层的PCL/明胶薄膜。

3.PCL/HA薄膜的制备

(2)将0.1g的玻尿酸(HA)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成含1％玻尿酸(HA)溶液的配制。

(3)将含1％玻尿酸(HA)的溶液由烘箱取出，并倒入20％聚己内酯(PCL)溶液中(溶液取出至倒入20％PCL溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

(4)将混合物倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成单层的PCL/HA薄膜。

4.PCL/HA/PVA(使用1％PVA溶液)薄膜的制备

(4)将混合物倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成单层的PCL/HA/PVA(使用1％PVA溶液)薄膜。

5.PCL/HA/PVA(使用2％PVA溶液)薄膜的制备

(2)将0.1g的玻尿酸(HA)与0.2g的聚乙烯醇(PVA)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成含1％玻尿酸(HA)及2％聚乙烯醇(PVA)的溶液的配制。

(4)将混合物倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成单层的PCL/HA/PVA(使用2％PVA溶液)薄膜。

6.PCL/CMC/PEG薄膜的制备

(2)将0.1g的羧甲基纤维素(CMC)与0.2g的聚乙二醇(PEG)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成含1％羧甲基纤维素(CMC)及2％聚乙二醇(PEG)的溶液的配制。

(3)将含1％羧甲基纤维素(CMC)及2％聚乙二醇(PEG)的溶液由烘箱取出，并倒入20％聚己内酯(PCL)溶液中(溶液取出至倒入20％PCL溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

(4)将混合物倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成单层的PCL/CMC/PEG薄膜。

7.PCL/CMC/PEO薄膜的制备

(2)将0.1g的羧甲基纤维素(CMC)与0.2g的聚环氧乙烷(PEO)加入10ml的去离子水(DDW)，并于50℃烘箱加热12小时以进行溶解，完成含1％羧甲基纤维素(CMC)及2％聚环氧乙烷(PEO)的溶液的配制。

(3)将含1％羧甲基纤维素(CMC)及2％聚环氧乙烷(PEO)的溶液由烘箱取出，并倒入20％聚己内酯(PCL)溶液中(溶液取出至倒入20％PCL溶液的时间须在1分钟内)，进行混合搅拌(搅拌时间1分钟至1分半钟)，以形成混合物。

(4)将混合物倒于特氟龙板上，并使用厚度为150μm的刮刀，利用半自动刮膜机以35mm/s的刮膜速度对其进行刮膜程序，然后在抽气柜中静置20分钟以挥发溶剂，以形成单层的PCL/CMC/PEO薄膜。

I-2.细胞贴附测试

以纤维母细胞(fibroblast)(L929)进行细胞贴附测试。薄膜的测试面积为1.9cm²。将待测试的薄膜置于培养盘底部并加入细胞(8x10⁴细胞)进行培养。于培养24小时候之后，取出薄膜并将其以PBS清洗两次，之后再以鬼笔环肽(phalloidin)染色以对贴附薄膜上的细胞进行染色。

在染色后，以荧光显微镜进行观察并记录，之后以ImageJ进行量化。

各薄膜的荧光染色结果如图15所示，而贴附于各薄膜的细胞数如图16所示。

依据图15与图16可知，PCL/明胶薄膜与PCL/CMC/PEG薄膜可与细胞良好地贴附，可作为贴附层，而贴附于PCL/HA薄膜、PCL/HA/PVA(使用1％PVA溶液)薄膜与PCL/HA/PVA(使用2％PVA溶液)薄膜的细胞数目少，因此这些薄膜可作为防粘连层，其中PCL/HA/1％PVA薄膜细胞贴附数量最少。

J.动物试验-薄膜的防粘连功效测试

以大鼠进行薄膜的防粘连功效测试，执行方法如下所述：

1.选择大鼠6-8周龄的壮年大鼠。

2.以0.4ml/kg剂量的麻醉剂将大鼠麻醉。

3.于麻醉后，将大鼠剃毛。于剃毛后将毛发清除干净，并将大鼠置于无菌操作台。

4.以碘酒对预订进行腹腔手术位置的大鼠腹部表面进行杀菌消毒。

5.对大鼠进行开腹。开腹伤口大小约2公分，开腹位置位于大鼠中线横膈膜下偏右0.5公分。

6开创后即可看见大鼠肠道位置。辨识出大肠段并挑选肠系膜较少区段以作为进行伤口仿真的区域。

7.在肠道的上述挑选区域内，以20G针头在1.5公分长的范围内穿刺30次，以模拟临床常见肠穿孔，并完成肠穿孔渗漏膜式。

8.完成上步骤后，在实验组中，使用实施例8-1中所制备的薄膜(长3cm，宽2cm)，并以薄膜的贴附层的表面直接贴附(不缠绕)大鼠的肠道伤口区域以进行补缀。于对照组中，不进行缀补补缀(不植入任何薄膜)。

9.在补缀完成后，在实验组中，以4-0尼龙线进行腹腔伤口闭合。于对照组中，不进行缀补补缀(不植入任何薄膜)即进行腹腔伤口闭合。

10.完成伤口闭合后，进行表皮伤口表面消毒杀菌，以完成动物手术过程。

11.手术完成2小时后与24小时后进行观察。大鼠可正常活动即可给予饲料，并持续观察大鼠28天。

12.在28天后，将大鼠以CO₂牺牲。之后将大鼠解剖并将大鼠的肠道的薄膜植入位置/伤口位置取样。在取样后将样本进行组织切片并H&E染色以观察与分析。结果如图17所示。

图17显示，在对照组中，可发现肠道组织间出现***生成，并团聚在一起(对照组，放大倍率100X，黑色箭头处)，而在实验组中，肠***并无其他粘连的肠段且无***产生(实验组，放大倍率10X)。

又，观察模拟肠穿孔的伤口处，在实验组中，肠道的薄膜植入位置，并无渗漏或粘连的状况发生(实验组，放大倍率100X)，而此代表本揭露的薄膜可有效密封与补缀伤口。

虽然本发明已以优选实施例揭露如上，然其并非用以限定本发明，任何本领域技术人员在不脱离本发明的精神和范围内，应可作些许更动与润饰，因此本发明的保护范围应以所附权利要求书所界定的范围为准。

Claims

1.一种制备双功效薄膜的方法，包括：

(a)将第一高分子溶液干燥成膜，以形成防粘连层，

其中，该第一高分子溶液包括第一疏水性溶液与第一亲水性溶液，

其中该第一疏水性溶液的溶质为选自下列所组成的群组的至少一种疏水性高分子：聚己内酯、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙醇酸、聚羟基丁酸酯、聚对二氧环己酮、聚富马酸二羟丙酯、聚酸酐、聚缩醛、聚原酸酯、聚碳酸酯、聚氨酯、聚磷腈与聚磷酸酯，而

该第一亲水性溶液的溶质为选自下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：玻尿酸、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙二醇衍生物与聚环氧乙烷，

又，其中在该第一高分子溶液中，该第一疏水性溶液的溶质与该第一亲水性溶液的溶质的重量比为1:0.01-1；以及

(b)将第二高分子溶液干燥成膜于该防粘连层之上，以形成贴附层，

其中，该第二高分子溶液由第二亲水性溶液所组成，

该第二亲水性溶液的溶质为选自下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：明胶、经改性的明胶、褐藻胶、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙二醇衍生物、胶原蛋白、去矿化骨基质、骨塑型蛋白、白蛋白、壳聚糖、纤维蛋白、聚氧化乙烯与聚乙烯吡咯烷酮。

2.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第一疏水性溶液的溶剂包括丙酮、醋酸、氯仿、甲醇、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、二噁烷、乙酸乙酯、甲酸、六氟异丙醇、1-甲基-2-吡咯烷酮氯化物、四氢呋喃、甲苯或其混合溶液。

3.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第一疏水性溶液的溶质为聚己内酯、聚乳酸或聚乳酸-羟基乙酸共聚物。

4.如权利要求3所述的制备双功效薄膜的方法，其中在第一高分子溶液中，该第一疏水性溶液的溶质与该第一亲水性溶液的溶质的重量比为1:0.01-1。

5.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第一亲水性溶液的溶剂包括水或酸性水溶液。

6.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中在第一亲水性溶液中，该第一亲水性溶液的溶质的含量为0.1-10％(w/v)。

7.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第一亲水性溶液的溶质为玻尿酸或玻尿酸与聚乙烯醇的组合。

8.权利要求7所述的制备双功效薄膜的方法，其中在第一高分子溶液中，该第一疏水性溶液的溶质与该第一亲水性溶液的溶质的重量比为1:0.01-1。

9.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第一疏水性溶液的溶质为聚己内酯而该第一亲水性溶液的溶质为玻尿酸，且在第一高分子溶液中，该聚己内酯与玻尿酸的重量比为1:0.01-1。

10.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第一疏水性溶液的溶质为聚己内酯而该第一亲水性溶液的溶质为玻尿酸与聚乙烯醇的组合，且在第一高分子溶液中，该聚己内酯、该玻尿酸与该聚乙烯醇的重量比为1:0.01-1:0.01-1。

11.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第二亲水性溶液的溶剂，包括水或酸性水溶液。

12.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中在第二亲水性溶液中，该第二亲水性溶液的溶质的含量为0.05-60％(w/v)。

13.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中第二亲水性溶液的含水量为30000-100000ppm。

14.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中第二亲水性溶液的粘度为20-2000cP。

15.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第二亲水性溶液的溶质为明胶、经改性的明胶、羧甲基纤维素或胶原蛋白。

16.如权利要求15所述的制备双功效薄膜的方法，其中经改性的明胶包括二羟苯丙氨酸改性的明胶或戊二醛改性的明胶。

17.如权利要求1所述的制备双功效薄膜的方法，在步骤(a)与(b)之间，还包括将第三高分子溶液干燥成膜于该防粘连层上，以形成中间层于该防粘连层与该贴附层之间，其中，该第三高分子溶液包括第二疏水性溶液与第三亲水性溶液，

其中该第二疏水性溶液的溶质为选自下列所组成的群组的至少一种疏水性高分子：

聚己内酯、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙醇酸、聚羟基丁酸酯、聚对二氧环己酮、聚富马酸二羟丙酯、聚酸酐、聚缩醛、聚原酸酯、聚碳酸酯、聚氨酯、聚磷腈与聚磷酸酯，而

该第三亲水性溶液的溶质为选自下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：明胶、经改性的明胶、褐藻胶、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙二醇衍生物、胶原蛋白、去矿化骨基质、骨塑型蛋白、白蛋白、壳聚糖、纤维蛋白、聚氧化乙烯与聚乙烯吡咯烷酮，

其中在第三高分子溶液中，该第二疏水性溶液的溶质与该第三亲水性溶液的溶质的重量比为1:0.005-5。

18.如权利要求17所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第二疏水性溶液的溶剂包括丙酮、醋酸、氯仿、甲醇、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、二噁烷、乙酸乙酯、甲酸、六氟异丙醇、1-甲基-2-吡咯烷酮氯化物、四氢呋喃、甲苯或其混合溶液。

19.如权利要求17所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第二疏水性溶液的溶质为聚己内酯、聚乳酸或聚乳酸-羟基乙酸共聚物。

20.如权利要求17所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第三亲水性溶液的溶剂包括水或酸性水溶液。

21.如权利要求17所述的制备双功效薄膜的方法，其中第三亲水性溶液中，该第三亲水性溶液的溶质的含量为0.05-60％(w/v)。

22.如权利要求17所述的制备双功效薄膜的方法，其中第三亲水性溶液的含水量为30000-100000ppm。

23.如权利要求17所述的制备双功效薄膜的方法，其中第三亲水性溶液的粘度为20-2000cP。

24.如权利要求17所述的制备双功效薄膜的方法，其中该第三亲水性溶液的溶质为明胶或胶原蛋白。

25.一种双功效薄膜，包括：

防粘连层：以及

在该防粘连层之上的贴附层，

其中该防粘连层由第一高分子混合物所构成，该第一高分子混合物包括：

第一疏水性高分子，选自由下列所组成的群组的至少一个疏水性高分子：聚己内酯、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙醇酸、聚羟基丁酸酯、聚对二氧环己酮、聚富马酸二羟丙酯、聚酸酐、聚缩醛、聚原酸酯、聚碳酸酯、聚氨酯、聚磷腈与聚磷酸酯；以及

第一亲水性高分子，为选自下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：玻尿酸、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙二醇衍生物与聚环氧乙烷，

且在该防粘连层中，该第一疏水性高分子与该第一亲水性高分子的重量比为1:0.01-1，

又其中该贴附层由第二亲水性高分子所构成，该第二亲水性高分子选自由下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：明胶、经改性的明胶、褐藻胶、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙二醇衍生物、胶原蛋白、去矿化骨基质、骨塑型蛋白、白蛋白、壳聚糖、纤维蛋白、聚氧化乙烯与聚乙烯吡咯烷酮。

26.如权利要求25所述的双功效薄膜，其中该第一疏水性高分子为聚己内酯、聚乳酸或聚乳酸-羟基乙酸共聚物。

27.如权利要求25所述的双功效薄膜，其中该第一亲水性高分子为玻尿酸或玻尿酸与聚乙烯醇的组合。

28.如权利要求25所述的双功效薄膜，还包括在该防粘连层与该贴附层之间的中间层，

其中，该中间层由第二高分子混合物所构成，而该第二高分子混合物包括：

第二疏水性高分子，为选自下列所组成的群组的至少一种疏水性高分子：聚己内酯、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙醇酸、聚羟基丁酸酯、聚对二氧环己酮、聚富马酸二羟丙酯、聚酸酐、聚缩醛、聚原酸酯、聚碳酸酯、聚氨酯、聚磷腈与聚磷酸酯；以及

第三亲水性高分子，为选自下列所组成的群组的至少一种亲水性高分子：明胶、经改性的明胶、褐藻胶、聚乙烯醇、羧甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙二醇衍生物、胶原蛋白、去矿化骨基质、骨塑型蛋白、白蛋白、壳聚糖、纤维蛋白、聚氧化乙烯与聚乙烯吡咯烷酮，

又，其中于第二高分子混合物中，该第二疏水性高分子与该第三亲水性高分子的重量比为1:0.005-5。

29.如权利要求28所述的双功效薄膜，其中该第二疏水性高分子为聚己内酯、聚乳酸或聚乳酸-羟基乙酸共聚物。

30.如权利要求28所述的双功效薄膜，其中该第三亲水性高分子为明胶或胶原蛋白。