CN110974869A - 构树叶粗提物在制备治疗非酒精性脂肪肝病药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了构树叶粗提物在制备治疗非酒精性脂肪肝病药物中的应用,通过细胞油红O染色、小鼠肝脏油红O染色、小鼠血液中甘油三脂和总胆固醇含量的测定,证明构树叶粗提物可以有效抑制脂质在HepG2细胞中的聚集,以及改善肝脏内脂质累积和降低小鼠血液内胆固醇和甘油三脂的水平。本发明用构树叶粗提物治疗非酒精性脂肪肝病,试验中未见其显著的毒性作用,且构树叶粗提物具有良好的疗效。因此构树叶粗提物可以用于新药开发,并且其对药物靶标确认有着重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及构树叶粗提物在制备治疗非酒精性脂肪肝疾病药物中的应用,属于医药领域。
背景技术
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是指由除酒精外的其他损肝因素所致的、以肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征,是一种与胰岛素抵抗和遗传易感性密切相关的获得性代谢应激性肝损伤。该疾病过程中会产生大量的脂质积聚和炎症反应,但是往往没有明显的临床症状,故而患者都是在肝硬化以及严重肝炎时期才被发现。据报道,NAFLD的全球人口患病率约为20%,并由于西方饮食习惯在亚洲国家的普及,导致NAFLD在中国青少年中患病率高达25%。所以NAFLD正迅速被公认为世界范围内慢性肝病的主要诱因。近年来,针对治疗NAFLD的药物研究颇多,目前有几个药物正在进行研究,包括维生素E、格列酮类和他汀类等。但由于它们的副作用多,临床医师并不推荐。因此,开发具有高效性且安全的药物是非常必要的。最近几年很多文献报道了天然化合物可通过抗脂质积聚、抗炎和抗纤维化保护NAFLD。所以,利用天然化合物治疗NAFLD是我们必须要解决的问题。
构树是桑科构树属的一种落叶乔木。构树叶性凉味甘,具有凉血、利水等作用。现代药学研究表明,构树叶、树皮、根皮、汁液中含有多种生物活性成分,如吡咯烷类生物碱、黄酮化合物及萜类化合物等,具有抗菌、抗氧化、镇痛、消炎、抗肿瘤等生理活性,具有广泛的医药用途。然而,其对NAFLD的治疗作用仍然是未知的。因此研究其在体内外对NAFLD的治疗效果对于日后的临床应用具有重要的意义。
发明内容
本发明发现了构树叶粗提物对由泰洛沙泊引起的小鼠非酒精性脂肪肝具有良好的保护效果。
本发明发现了构树叶粗提物可以有效抑制脂质在HepG2细胞内聚集。
本发明发现了构树叶粗提物可以降低血液中脂肪含量。
附图说明
图1为本发明细胞油红染色实验结果;
其中A:空白组B:模型组C:OA+PA+BP(40μg/mL)D:OA+PA+BP(160μg/mL)。
图2为本发明小鼠肝脏油红染色实验结果;
其中A:空白组B:泰洛沙泊组C:Ty+BP(100mg/kg)D:Ty+BP(200mg/kg)E:Ty+BP(300mg/kg)。
图3为本发明小鼠血液甘油三酯与总胆固醇的测定实验结果;
其中:对比空白组,##p<0.01;对比模型组*p<0.05和**p<0.01。
具体实施方式
通过以下实施例进一步举例描述本发明,并不以任何方式限制本发明,在不背离本发明的技术解决方案的前提下,对本发明所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。
1.构树叶的提取
将构树叶碾碎成干粉,用75%乙醇溶液加热1h回流提取,物料比1:20,重复上述操作,收集两次提取液,用旋转蒸发仪浓缩,70℃烘干,得到构树叶粗提物。
2.细胞油红染色实验
HepG2细胞培养于含10%FBS,100U/mL青霉素和100U/mL链霉素的DMEM培养基中,放置于5%CO2,37℃的恒温培养箱中孵育。将约2×104个每孔的HepG2细胞接种在24孔细胞培养板中,分为空白组,模型组、药物低浓度组和药物高浓度组。空白组加入DMEM培养基,模型组、药物低浓度组和药物高浓度组在DMEM培养基中加入油酸和棕榈酸酸(2:1=660μM:330μM),药物低浓度组和药物高浓度组又分别加入40、160μM构树叶粗提物,培养18小时后,进行细胞油红染色实验。可见使用药物后,脂质在HepG2细胞内富集程度明显降低。结果见附图1。
3.小鼠非酒精性脂肪肝病的治疗研究
3.1小鼠非酒精性脂肪肝病的模型建立
选取体重在18-20g的雄性C57BL/6小鼠,经腹腔注射500mg/kg泰洛沙泊溶液,建立小鼠非酒精性脂肪肝病模型。
3.2油红染色实验
将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、药物低、中、高浓度组以及药物对照组。连续7日灌胃给予构树叶粗提物,药物低、中、高浓度组药物浓度分别为100、200、300mg/kg。第七日灌胃后一小时腹腔注射500mg/kg泰洛沙伯溶液。18小时后取肝脏制作冰冻切片,并利用油红染色实验检测小鼠肝脏中的脂质积累情况。可见使用药物后,脂质在肝细胞富集程度明显降低。结果见附图2。
3.3甘油三酯与总胆固醇的测定实验
将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、药物低、中、高浓度组以及药物对照组。连续7日灌胃给予构树叶粗提物,药物低、中、高浓度组药物浓度分别为100、200、300mg/kg。第七日灌胃后一小时腹腔注射500mg/kg泰洛沙伯溶液。18小时后取小鼠血液,利用试剂盒(由南京建成生物工程研究所提供)测定其中甘油三酯与总胆固醇水平。可见使用药物后,小鼠血液中甘油三酯与总胆固醇水平显著下降。结果见附图3。
Claims (4)
1.构树叶粗提物在制备治疗非酒精性脂肪肝病药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述的非酒精性脂肪肝病是指由泰罗沙伯引起的非酒精性脂肪肝病。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述的构树叶粗提物具有降低细胞内脂质水平的功能。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述的构树叶粗提物具有降低血脂的功能。
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CN101306086A (zh) * | 2007-05-18 | 2008-11-19 | 刘尚文 | 构叶保健减肥胶囊及其制备方法 |
CN101417991A (zh) * | 2008-11-18 | 2009-04-29 | 大连工业大学 | 构树叶黄酮的提取方法 |
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