CN110960441B - 一种活性稳定的sod组合物及其制备工艺和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种活性稳定的SOD组合物，其特征是：包括以下质量百分比物质：氯化钠0.9％、胶原3％‑10％、蛋白质2％‑5％、蓝铜肽3％‑6％、维生素E 0.3％‑0.8％、SOD 0.2％、增稠剂0.2％‑0.5％、甘油3％‑5％、黄原胶0.1％‑0.5％、辛酸葵酸甘油三酯2％‑5％、植物甾醇油酸酯0.5％‑2％、葡萄糖酸锌1％‑3％、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵0.3％‑0.6％，抗坏血酸0.5％‑1％，余量为水；还公开了所述的活性稳定的SOD组合物在制备膏状化妆护肤品中的应用；本发明还公开了一种活性稳定的SOD组合物的制备方法。

Description

一种活性稳定的SOD组合物及其制备工艺和应用
技术领域
本发明涉及日用化学品领域，特别涉及一种活性稳定的SOD组合物及其制备工艺和应用。
背景技术
SOD为超氧化物歧化酶，是生物体内存在的一种抗氧化金属酶，在机体氧化与抗氧化平衡中起到至关重要的作用，被广泛应用于食品领域、日化工业领域以及制药领域等。SOD的清除自由基、抗衰老、美白、嫩肤等各种功效强大，但由于是一种生物酶，存活的环境要求很苛刻，特别是在化妆品中保质期短(室温下1-3个月活性直线下降)，远远不能适应化妆品的3年的保质期。
发明内容
本发明的目的是提供一种活性稳定的SOD组合物及其制备工艺和应用，其具有SOD活性稳定，存活时间长的优点。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
一种活性稳定的SOD组合物，其特征是：包括以下质量百分比物质：氯化钠0.9％、胶原3％-10％、蛋白质2％-5％、蓝铜肽3％-6％、维生素E 0.3％-0.8％、SOD 0.2％、增稠剂0.2％-0.5％、甘油3％-5％、黄原胶0.1％-0.5％、稳定剂2％-5％、抗氧化添加剂0.5％-2％、葡萄糖酸锌1％-3％、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵0.3％-0.6％，抗坏血酸0.5％-1％，余量为水。
通过采用上述技术方案，使SOD的活性稳定，更易存活，且保质时间更长。其中蓝铜肽与葡萄糖酸锌配合能进一步保持SOD的活性，葡萄糖酸锌在上述体系中会分离出锌离子，蓝铜肽中的铜离子与葡萄糖酸锌中的锌离子与SOD形成配位结构，用于共同稳定SOD的结构。另一方面，蓝铜肽能与抗坏血酸反应，蓝铜肽促使抗坏血酸脱氢生成去氢抗坏血酸，破坏细菌的蛋白质、核酸，从而达到杀死细菌的作用。进一步的，抗坏血酸能增加细菌的细胞膜对蓝铜肽中铜离子的通透性，从而起到增强杀菌作用，杀菌后能减少SOD组合物中细菌对SOD的消耗与破坏，进一步提高SOD的存活时间。
添加上述成分能够使得SOD的活性稳定，更易存活；添加胶原和甘油能使得SOD组合物具有高效保湿的功效；黄原胶也具有增稠作用，能使SOD组合物具有适宜的粘度；蓝铜肽还能使得SOD组合物具有帮助皮肤生成胶原蛋白和弹力蛋白的功效；聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵具有优良的乳化、分散、增稠能力；维生素E及抗坏血酸使得SOD组合物具有抗氧化、抗自由基功能，达到抗衰老、美白等功效。添加0.9％氯化钠溶液可以模拟哺乳动物体内血浆中的离子浓度和渗透压，达到稳定SOD的空间结构的目的。蛋白质可以给予含有胶原蛋白的皮肤层所必需的养分，补充对人体有益的氨基酸，使皮肤中的胶原蛋白活性加强，保持角质层水分以及纤维结构的完整性，改善皮肤细胞生存环境和促进皮肤组织的新陈代谢，增强循环，达到养护皮肤的功效
本发明进一步设置为：所述稳定剂为辛酸癸酸甘油三酯。
通过采用上述技术方案，辛酸癸酸甘油三酯是由辛酸、癸酸和甘油酯化而成的高纯度油脂。它是一种优秀的滋润油脂，具有良好的铺展性，使皮肤具有滑而不腻的感觉，容易被皮肤吸收。对化妆品的均匀细腻起到很好的作用，使皮肤润滑有光泽。
本发明进一步设置为：所述蛋白质为牛奶蛋白。
通过采用上述技术方案，牛奶蛋白作为一种高效的营养剂，涂覆于皮肤后能促进细胞的再生，加强皮肤外层的保湿作用，提供水分和舒适度；同时牛奶蛋白能抑制黑色素细胞增殖及酪氨酸酶活性，起到美白的作用；牛奶蛋白结合维生素C和维生素E，能保护皮肤免受自由基破坏，对皮肤进行修复。
本发明进一步设置为：所述增稠剂为卡波姆。
通过采用上述技术方案，添加卡波姆作为增稠剂，能调控SOD组合物的整体粘度；同时卡波姆可以与聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵共同作用，对甘油、辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯进行乳化作用，能使得SOD组合物更加均匀细腻。
本发明进一步设置为：所述抗氧化添加剂为植物甾醇油酸酯。
通过采用上述技术方案，植物甾醇具有良好的抗氧化性，但是其分子中的环戊烷多氢菲结构以及C-17上的烃链决定了它不溶于水，而其C-3上的羟基使其在油相中的溶解度也很小，因此通过酯化反应，得到的植物甾醇油酸酯，对植物甾醇的羟基进行修饰从而改善了其在油相中的溶解度，并且同时拥有良好的抗氧化性能。同时植物甾醇能与维生素E协同作用，通过向氧自由基或过氧自由基提供·H，使链式氧化反应中断，从而达到抗氧化的效果。
本发明进一步设置为：包括以下质量百分比物质：氯化钠0.9％、胶原3％、牛奶蛋白2％、蓝铜肽6％、维生素E 0.3％、SOD 0.2％、卡波姆0.2％、甘油3％、黄原胶0.1％、辛酸葵酸甘油三酯3％、葡萄糖酸锌2％、植物甾醇油酸酯0.5％、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵0.3％、抗坏血酸0.5％，余量为水。
通过采用上述技术方案，优选上述质量百分比物质作为活性稳定的SOD组合物的组成，可以最大程度的稳定SOD酶的活性和提高皮肤的美白效果。
本发明的另一目的在于提供上述活性稳定的SOD组合物在制备膏状护肤品中的应用。
本发明还提供了一种活性稳定的SOD组合物的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
(1)在混合锅内加入水、甘油、黄原胶和氯化钠搅拌溶解均匀。
(2)在油相锅内加入辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵和卡波姆，搅拌分散均匀。
(3)把油相锅物料抽入混合锅内，开启均质机，并搅拌均匀。
(4)在混合锅内加入胶原、葡萄糖酸锌、牛奶蛋白、蓝铜肽、维生素E、抗坏血酸、SOD，搅拌溶解均匀，即得此SOD组合物。
通过采用上述技术方案，步骤(1)中，在水中加入氯化钠，使氯化钠充分溶解，然后加入甘油，甘油作为一种良溶剂能与水任意比例互溶。加入黄原胶搅拌溶解均匀，能使得其组分在水中充分的分散，轻微增稠使得步骤(1)得到的组合物稳定性更好；
步骤(2)中，聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵作为一种优良的乳化、分散剂，在油相锅内加入辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵和卡波姆，搅拌分散均匀，能使得油相充分乳化，方便后期进行混合工序。
步骤(3)中，把油相锅物料抽入混合锅内，开启均质机，并搅拌均匀，能使得搅拌更彻底，混合的效果更好更均匀。
步骤(4)中，加入胶原、葡萄糖酸锌、牛奶蛋白、蓝铜肽、维生素E、抗坏血酸、SOD，搅拌溶解均匀，即可得到SOD组合物，简单方便。通过以上步骤得到的SOD组合物，性质稳定，质地均匀细腻。
具体实施方式
以下对本发明作进一步详细说明。
实施例1：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000051
实施例2：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000061
实施例3：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000062
Figure BDA0002315275710000071
实施例4：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000072
Figure BDA0002315275710000081
实施例5：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000082
Figure BDA0002315275710000091
实施例1-5的活性稳定的SOD组合物按照如下步骤进行制备：
(1)在混合锅内加入水、甘油、黄原胶和氯化钠搅拌溶解均匀。
(2)在油相锅内加入辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵和卡波姆，搅拌分散均匀。
(3)把油相锅物料抽入混合锅内，开启均质机，并搅拌均匀。
(4)在混合锅内加入胶原、葡萄糖酸锌、牛奶蛋白、蓝铜肽、维生素E、抗坏血酸、SOD，搅拌溶解均匀，即得此SOD组合物。
对比例1：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000092
Figure BDA0002315275710000101
对比例1的活性稳定的SOD组合物按照如下步骤进行制备：
(1)在混合锅内加入水、甘油、黄原胶和氯化钠搅拌溶解均匀。
(2)在油相锅内加入辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵和卡波姆，搅拌分散均匀。
(3)把油相锅物料抽入混合锅内，开启均质机，并搅拌均匀。
(4)在混合锅内加入胶原、葡萄糖酸锌、牛奶蛋白、维生素E、抗坏血酸、SOD，搅拌溶解均匀，即得对比例1中的SOD组合物。
对比例2：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000102
Figure BDA0002315275710000111
对比例2的活性稳定的SOD组合物按照如下步骤进行制备：
(1)在混合锅内加入水、甘油、黄原胶和氯化钠搅拌溶解均匀。
(2)在油相锅内加入辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵和卡波姆，搅拌分散均匀。
(3)把油相锅物料抽入混合锅内，开启均质机，并搅拌均匀。
(4)在混合锅内加入胶原、葡萄糖酸锌、牛奶蛋白、蓝铜肽、维生素E、SOD，搅拌溶解均匀，即得对比例2中的SOD组合物。
对比例3：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000112
Figure BDA0002315275710000121
对比例3的活性稳定的SOD组合物按照如下步骤进行制备：
(1)在混合锅内加入水、甘油、黄原胶和氯化钠搅拌溶解均匀。
(2)在油相锅内加入辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵和卡波姆，搅拌分散均匀。
(3)把油相锅物料抽入混合锅内，开启均质机，并搅拌均匀。
(4)在混合锅内加入胶原、牛奶蛋白、蓝铜肽、维生素E、抗坏血酸、SOD，搅拌溶解均匀，即得对比例3中的SOD组合物。
对比例4：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000122
Figure BDA0002315275710000131
对比例4的活性稳定的SOD组合物按照如下步骤进行制备：
(1)在混合锅内加入水、甘油和黄原胶搅拌溶解均匀。
(2)在油相锅内加入辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵和卡波姆，搅拌分散均匀。
(3)把油相锅物料抽入混合锅内，开启均质机，并搅拌均匀。
(4)在混合锅内加入胶原、牛奶蛋白、蓝铜肽、维生素E、抗坏血酸、SOD，搅拌溶解均匀，即得对比例4中的SOD组合物。
对比例5：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000132
Figure BDA0002315275710000141
对比例6：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000142
Figure BDA0002315275710000151
对比例7：
一种活性稳定的SOD组合物，包括如下质量物质(g):
Figure BDA0002315275710000152
Figure BDA0002315275710000161
对比例5-7的活性稳定的SOD组合物按照如下步骤进行制备：
(1)在混合锅内加入水、甘油、黄原胶和氯化钠搅拌溶解均匀。
(2)在油相锅内加入辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵和卡波姆，搅拌分散均匀。
(3)把油相锅物料抽入混合锅内，开启均质机，并搅拌均匀。
(4)在混合锅内加入胶原、牛奶蛋白、蓝铜肽、维生素E、抗坏血酸、SOD，搅拌溶解均匀，即得对比例5-7中的SOD组合物。
上述部分原料来源如下：
SOD，上海绿梅生物科技有限公司；
蓝铜肽，美国无暇肽，商品名CTPT-1；
牛奶蛋白，德国CLR，商品名Lactokine Fluid PF；
植物甾醇油酸酯，美国艾地盟，商品名CARDIOAID-SF；
胶原，德国CLR，商品名Collagen CLR。
实验测试：
1.试剂和仪器
(1)邻苯三酚溶液：142mg的邻苯三酚用10mmol/L的HCl溶解并定容至25ml，冷藏于棕色容量瓶内。
(2)Tris-HCl-EDTA缓冲液：量取150ml 0.5mol/L Tris和91.7ml500mmol/L HCl，补加100mmol/L二乙三胺五乙酸15ml，最后用去离子水定容至1.5L，调整pH值得到50mmol/LpH8.2的Tris-HCL缓冲液。
2.样品
取SOD组合物10g，用水浸泡或溶解定容至100ml过滤，取滤液备用。
3.原理
邻苯三酚在酸性环境中稳定，但在弱碱环境中会发生自氧化反应，邻苯三酚在自氧化时只接受一个电子生成超氧阴离子自由基(O2+O2 -)，并在其自氧化过程中以一定速率产生有色中间产物，SOD可以将O2 -歧化分解成H2O2和O2，从而抑制邻苯三酚的自氧化速率。由此可以依据SOD分解O2 -的能力而间接推算SOD的活性(每分钟反应液中SOD抑制50％反应速率时即为SOD活力单位)。
4.试验方法
(1)邻苯三酚自氧化速率的测定，取pH8.2的Tris-HCl-EDTA缓冲液4.5ml于10ml比色管中，于25℃恒温10min，再加入25℃恒温的45mmol/L的邻苯三酚溶液10μl，均匀混合后迅速于1cm石英比色杯325nm波长测光密度值。每隔30s测一次光密度值，共测4min，求出邻苯三酚的自氧化速率ODA/min。
(2)SOD活性测定，取pH8.2的Tris-HCl-EDTA缓冲液4.5ml于10ml比色管中，25℃恒温10min，加入已恒温至25℃的SOD组合物样品溶液10ml，迅速混匀，于325nm波长测定密度值，30s测一次，测4min，求出光密度值变化速率ODB/min。
(3)根据下面公式进行酶活计算：
Figure BDA0002315275710000181
V1-----反应液总体积,ml
V2-----测定样品体积,ml
n-----样品稀释液倍数
ODA-----邻苯三酚的自氧化速率
ODB-----样品光密度值变化速率
SOD活性测定采用微量邻苯三酚法的测试方法。按照以上方法，制备多组SOD组合物，每隔一定的时间取样并用微量邻苯三酚法(325nm)分别测试SOD活性，观察单位酶活的数字变化。
单位酶活(U/ml)测试结果见下表1和表2：
表1实施例1-5、对比例1-3单位酶活测定表(单位：U/ml)
Figure BDA0002315275710000191
通过表1可得，实施例1-5中都添加了不同量的蓝铜肽、葡萄糖酸锌和抗坏血酸，其中实施例3-5中改变了葡萄糖酸锌的添加量，试验数据表明，实施例5的SOD酶存活时间最长，葡萄糖酸锌的添加量增加对SOD酶的活性具有促进作用。
对比例3中与实施例相比没有添加葡萄糖酸锌，实验数据表明对比例3与实施例相比，酶活性的下降速度很快，到第十二个月时，SOD酶已经失活。这表明葡萄糖酸锌提供的锌离子，对于SOD的活性起到了重要作用，葡萄糖酸锌用于SOD组合物，能够提高SOD的活性，延长SOD酶的存活时间。
对比例2中与实施例相比没有添加抗坏血酸，实验数据表明对比例2与实施例相比，酶活性的下降速度很快，到第十二个月时，SOD酶已经失活。这表明添加抗坏血酸作为一种抗氧化强还原组分，能提高SOD酶的活性，延长SOD酶的存活时间。
对比例1中与实施例相比没有添加蓝铜肽，实验数据表明对比例1与实施例相比，酶活性的下降速度很快，到第十二个月时，SOD酶已经失活。这表明蓝铜肽提供的铜离子，对于SOD的活性起到了重要作用，蓝铜肽用于SOD组合物，能够提高SOD的活性，延长SOD酶的存活时间。
表2不同NaCl浓度下的单位酶活测定表(单位：U/ml)
Figure BDA0002315275710000201
通过表2可得，组分中氯化钠溶液也起到重要作用，添加0.9％氯化钠可以模拟哺乳动物体内血浆中的离子浓度和渗透压，达到稳定SOD的空间结构的目的，但氯化钠的浓度太高或者太低都会对SOD的酶活产生抑制作用。综上所述，合适浓度的氯化钠溶液、蓝铜肽、葡萄糖酸锌和抗坏血酸在SOD组合物中缺一不可。蓝铜肽与葡萄糖酸锌配合能进一步保持SOD的活性，葡萄糖酸锌在上述体系中会分离出锌离子，蓝铜肽中的铜离子与葡萄糖酸锌中的锌离子与SOD形成配位结构，用于共同稳定SOD的结构；抗坏血酸能增加细菌的细胞膜对蓝铜肽中铜离子的通透性，从而起到增强杀菌作用，杀菌后能减少SOD组合物中细菌对SOD的消耗与破坏，进一步提高SOD的存活时间。它们中的任意组分都对SOD的稳定起到了重要作用，并且共同作用与SOD的活性。
以上所述的实施方式，并不构成对该技术方案保护范围的限定。任何在上述实施方式的精神和原则之内所作的修改、等同替换和改进等，均应包含在该技术方案的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种活性稳定的SOD组合物，其特征是：包括以下质量百分比物质：氯化钠0.9％、胶原3％-10％、蛋白质2％-5％、蓝铜肽3％-6％、维生素E 0.3％-0.8％、SOD 0.2％、增稠剂0.2％-0.5％、甘油3％-5％、黄原胶0.1％-0.5％、稳定剂2％-5％、抗氧化添加剂0.5％-2％、葡萄糖酸锌1％-3％、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵0.3％-0.6％，抗坏血酸0.5％-1％，余量为水，所述增稠剂为卡波姆，所述抗氧化添加剂为植物甾醇油酸酯。
2.根据权利要求1所述的活性稳定的SOD组合物，其特征是：所述稳定剂为辛酸癸酸甘油三酯。
3.根据权利要求2所述的活性稳定的SOD组合物，其特征是：所述蛋白质为牛奶蛋白。
4.根据权利要求3所述的活性稳定的SOD组合物，其特征是：包括以下质量百分比物质：氯化钠0.9％、胶原3％、牛奶蛋白2％、蓝铜肽6％、维生素E 0.3％、SOD 0.2％、卡波姆0.2％、甘油3％、黄原胶0.1％、辛酸癸 酸甘油三酯2％、葡萄糖酸锌3％、植物甾醇油酸酯0.5％、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵0.3％、抗坏血酸0.5％，余量为水。
5.权利要求1-4任意一项所述的活性稳定的SOD组合物在制备膏状化妆护肤品中的应用。
6.一种活性稳定的SOD组合物的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括如下步骤：
(1)在混合锅内加入水、甘油、黄原胶和氯化钠搅拌溶解均匀，
(2)在油相锅内加入辛酸癸酸甘油三酯、植物甾醇油酸酯、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵和卡波姆，搅拌分散均匀，
(3)把油相锅物料抽入混合锅内，开启均质机，并搅拌均匀，
(4)在混合锅内加入胶原、葡萄糖酸锌、牛奶蛋白、蓝铜肽、维生素E、抗坏血酸、SOD，搅拌溶解均匀，即得此SOD组合物。
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