CN110938624A - 一种用于基因组dna提取的试剂盒及其应用 - Google Patents

Abstract

本申请公开了一种用于基因组DNA提取的试剂盒及其应用。本申请试剂盒包括裂解液、红细胞裂解液；裂解液含20‑300mM Tris‑HCl、20‑100mM EDTA、0.3‑2M NaCl、0.5‑5％PEG8000和0.5‑10％Triton X‑100、SDS或吐温20；红细胞裂解液含10‑100mM Tris‑HCl、1‑50mM EDTA、10‑300mM NaCl和0.01‑0.2％Triton X‑100。本申请试剂盒，通过裂解液和红细胞裂解液优化，能有效去除多糖，结合酚，防止酚与DNA结合，解决粘稠和浑浊问题，适用于多种不同样本，提取的基因组DNA纯度和得量都能满足各种下游实验使用需求。

Description

一种用于基因组DNA提取的试剂盒及其应用

技术领域

本申请涉及基因组DNA提取技术领域，特别是涉及一种用于基因组DNA提取的试剂盒及其应用。

背景技术

核酸是一类非常重要的生物大分子，它在生物的繁衍、生长、发育、衰老和死亡等一系列的生命进程中都发挥着不可替代的作用，堪称生物界的“主宰”，现在已成为生物化学、分子生物学、遗传学、生命医学等多个生命科学领域的重要研究课题。因此，从众多纷繁复杂的生物大分子里提取出高质量、高纯度的核酸，是开展其他研究必不可少的第一步。

DNA提取的原则包括：保证DNA一级结构的完整性；不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；将其他生物大分子，如蛋白质、多糖和脂类分子等，的污染应降低到最低程度；排除其它核酸分子，如RNA，的污染。

目前，DNA提取的方法主要分为三种：酚氯仿抽提法、离心柱法、磁珠法。酚氯仿抽提法是通过苯酚、氯仿对蛋白质变性、抽提，然后通过有机试剂沉淀而得到DNA；优点是成本低、易实现；缺点是特殊样本DNA纯度偏低，酚氯仿试剂有毒，且需要离心机不断离心，提取大量样本时效率较低。离心柱法主要原理是将对核酸有吸附作用的官能基团固定在离心柱膜上，通过加入不同的裂解试剂、洗涤试剂，并进行反复离心，以达到核酸与杂质分离的目的，获得纯化的核酸。离心柱法的优点是DNA纯度和质量较高，操作便捷、可进行微量提取；缺点是需要反复离心，不适用于大量提取。磁珠法的原理是在磁珠表面修饰有对核酸有吸附作用的特定活性官能基团，通过不同的裂解液结合液洗涤液在特定的条件下能够与目的物质进行特异性结合，同时利用磁珠自身的磁性，在外磁场的作用下可以方便的实现定向移动与富集，从而达到核酸与杂质分离的目的，进而实现对目标物质的分离纯化，获得纯化核酸。磁珠法的优点是提取便捷，安全无毒，无需离心，可适用于高通量提取；缺点是特殊样本纯度较差，易出现磁珠残留、洗脱液带颜色等现象。目前，市售的DNA提取试剂盒基本全部采用离心柱法或磁珠法。

人组织、血细胞、唾液是医学检验领域最常见的基因组DNA提取检测样本。血细胞中的基因组DNA提取容易出现洗脱液粘稠、纯度偏低等问题。唾液中的基因组DNA提取也容易出现得量偏低、洗脱液粘稠、浑浊等问题。

总的来说，目前市售的基因组DNA提取试剂盒，大部分都只能针对一种样本进行基因组DNA提取，例如血细胞中基因组DNA提取试剂盒，或唾液中基因组DNA提取试剂盒，并且，如前面提到的，现有的试剂盒普遍存在洗脱液粘稠、纯度偏低、得量偏低等问题。

发明内容

本申请的目的是提供一种改进的用于基因组DNA提取的试剂盒及其应用。

为了实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：

本申请的第一方面公开了一种用于基因组DNA提取的试剂盒，该试剂盒采用磁珠法对离体样本进行基因组DNA提取，其中，离体样本为人组织样本、血细胞或唾液，该试剂盒包括磁珠、裂解液、红细胞裂解液、结合液、清洗液1和清洗液2；裂解液中含有20-300mmol/L的Tris-HCl、20-100mmol/L的乙二胺四乙酸(EDTA)、0.3-2mol/L的NaCl、0.5％-5％的PEG8000，以及0.5％-10％的Triton X-100、SDS和Tween-20中的至少一种；红细胞裂解液中含有10-100mmol/L的Tris-HCl、1-50mmol/L的乙二胺四乙酸、10-300mmol/L的NaCl和0.01％-0.2％的TritonX-100。

需要说明的是，本申请的试剂盒中提供了两种用于裂解的溶液，即裂解液和红细胞裂解液；其中，裂解液单独用于人组织样本和唾液的基因组DNA提取，红细胞裂解液与裂解液组合使用主要用于血细胞基因组DNA的提取；其余组份，包括磁珠、结合液、清洗液1和清洗液2都是通用的，即都可以用于人组织样本、血细胞和唾液。本申请的试剂盒，特别针对唾液和红细胞研发了两种用于裂解的溶液，即裂解液和红细胞裂解液，通过对两种裂解溶液的优化和改进，能够在裂解时，有效去除多糖，结合酚，防止酚与DNA结合，从而解决提取过程中出现的粘稠和浑浊等问题，提高人组织样本、血细胞和唾液基因组DNA提取的纯度和得量。本申请试剂盒中优化的两种裂解溶液，在进行裂解时，能够使蛋白质变性、染色体离析、释放核酸，适用于组织、血液、细胞、细菌等多种样本基因组DNA的提取。本申请试剂盒提取的基因组DNA在质量和得量上都能满足各种下游实验的要求，例如分子标记检测、基因测序等；并且，采用本申请的试剂盒进行基因组DNA提取，包括样本裂解、结合、清洗、洗脱总共仅需约1h左右，与市售同类型试剂盒相比，本申请试剂盒的流程简便，提取质量和效率高。可以理解，本申请的试剂盒可以适用于相对较复杂的各种临检常用样本的基因组DNA提取，例如组织、血细胞、唾液等；当然，也可以用于细菌等的基因组DNA提取。

还需要说明的是，本申请的关键之一即裂解液和红细胞裂解液的优化改进，至于其它组分，例如磁珠、结合液、清洗液1和清洗液2，都可以参考现有的磁珠法试剂或试剂盒，例如结合液采用异丙醇或无水乙醇；但是，为了获得更好的基因组DNA提取效果，本申请的优选方案中，分别对清洗液1和清洗液2进行了限定，详见以下技术方案。

另外，可以理解，本申请的试剂盒除了磁珠、裂解液、结合液、清洗液1和清洗液2以外，还可以包含其它磁珠法常规使用的试剂，例如蛋白酶K、洗脱液等。其中，蛋白酶K可以组合到本申请的试剂盒中，也可以市售购买。至于洗脱液，一般DNA提取采用的洗脱液为TE溶液或者直接采用无核酸酶的灭菌去离子水，TE溶液可以自行配制或者市售购买获得，灭菌去离子水是实验室常规使用的溶剂。因此，蛋白酶K和洗脱液可以根据需要选择性的组合在本申请的试剂盒中，在此不作具体限定。

优选的，本申请的试剂盒只能够，裂解液由100mmol/L的Tris-HCl、20mmol/L的乙二胺四乙酸、1.4mol/L的NaCl、1％的PEG8000和1％的Tween-20组成；红细胞裂解液由30mmol/L的Tris-HCl、5mmol/L的乙二胺四乙酸、60mmol/L的NaCl和0.015％的Triton X-100组成。

需要说明的是，以上组分和具体浓度是本申请的一种实现方式中具体采用的，证实具有较好基因组DNA提取效果的配方，不排除可以在本申请的优选配方基础上进行化学剂量允许的调整，例如本申请剂量正负5％左右偏差，都能够基本达到本申请的效果。

优选的，清洗液1中含有1-4mol/L的异硫氰酸胍或盐酸胍，以及40％-70％的无水乙醇。

优选的，清洗液1由2mol/L的盐酸胍和50％的无水乙醇组成。

优选的，清洗液2中含有10-100mmol/L的NaCl和70％-80％的无水乙醇。

优选的，清洗液2由50mmol/L的NaCl和75％的无水乙醇组成。

需要说明的是，本申请的试剂盒，实际上对两种裂解溶液、清洗液1和清洗液2都分别有改进，因此，在要求较低的情况下，或者一些特殊使用情况下，本申请的两种裂解溶液、清洗液1和清洗液2都可以分别单独与现有的磁珠法试剂组合使用，从而具备相应的效果。例如，采用本申请的裂解液与现有的磁珠法试剂组合，可以更好的适用于唾液或人组织样本的基因组DNA提取，尤其是解决唾液基因组DNA提取的得量低、洗脱液粘稠、浑浊等问题；本申请的红细胞裂解液与现有的磁珠法试剂组合，包括现有磁珠法的裂解液组合，可以一定程度上解决血细胞基因组DNA提取洗脱液粘稠、纯度偏低等问题；而本申请的清洗液1和清洗液2与现有的磁珠法试剂组合，可以使磁珠能更有效地结合基因组DNA，并有效去除蛋白质、盐离子等杂质。

因此，本申请的第二方面公开了一种用于磁珠法提取基因组DNA的裂解液，该裂解液即本申请试剂盒中的裂解液，其中含有20-300mmol/L的Tris-HCl、20-100mmol/L的乙二胺四乙酸、0.3-2mol/L的NaCl、0.5％-5％的PEG8000，以及0.5％-10％的Triton X-100、SDS和Tween-20中的至少一种。

优选的，本申请的裂解液由100mmol/L的Tris-HCl、20mmol/L的乙二胺四乙酸、1.4mol/L的NaCl、1％的PEG8000和1％的Tween-20组成。

本申请的第三方面公开了一种用于磁珠法提取血细胞基因组DNA的红细胞裂解液，该红细胞裂解液也是本申请试剂盒中的红细胞裂解液，其中含有10-100mmol/L的Tris-HCl、1-50mmol/L的乙二胺四乙酸、10-300mmol/L的NaCl和0.01％-0.2％的Triton X-100。

优选的，本申请的红细胞裂解液由30mmol/L的Tris-HCl、5mmol/L的乙二胺四乙酸、60mmol/L的NaCl和0.015％的Triton X-100组成。

本申请的第四方面公开了一种用于磁珠法提取基因组DNA的清洗液，该清洗液包括清洗液1和清洗液2，其中清洗液1和清洗液2就是本申请试剂盒中的清洗液1和清洗液2。

本申请的第五方面公开了本申请的试剂盒、本申请的裂解液或本申请的清洗液在人组织样本或唾液的基因组DNA提取中的应用。

本申请的第六方面公开了本申请的试剂盒、本申请的裂解液、本申请的红细胞裂解液或本申请的清洗液在血细胞的基因组DNA提取中的应用。

可以理解，本申请的试剂盒主要是针对血细胞和唾液的基因组DNA提取中存在的问题而研发的，因此，其中的各试剂，例如裂解液、红细胞裂解液、清洗液等可以相应的用于血细胞和唾液的基因组DNA提取。

由于采用以上技术方案，本申请的有益效果在于：

本申请用于基因组DNA提取的试剂盒，通过对裂解液和红细胞裂解液进行优化，使得本申请的试剂盒能够在裂解时，有效去除多糖，结合酚，防止酚与DNA结合，从而解决提取过程中出现的粘稠和浑浊等问题；本申请的试剂盒适用于组织、血液、细胞、细菌等多种样本基因组DNA的提取，提取的基因组DNA在质量和得量上都能满足各种下游实验的使用需求；并且，本申请试剂盒的流程简便，提高了基因组DNA提取的质量和效率。

附图说明

图1是本申请实施例中人组织样本1提取的基因组DNA的安捷伦4200分析结果图；

图2是本申请实施例中人组织样本2提取的基因组DNA的安捷伦4200分析结果图；

图3是本申请实施例中血细胞样本1提取的基因组DNA的安捷伦4200分析结果图；

图4是本申请实施例中血细胞样本2提取的基因组DNA的安捷伦4200分析结果图；

图5是本申请实施例中唾液样本1提取的基因组DNA的安捷伦4200分析结果图；

图6是本申请实施例中唾液样本2提取的基因组DNA的安捷伦4200分析结果图。

具体实施方式

现有的磁珠法试剂或试剂盒，对人组织、血细胞、唾液等临检常用样本的基因组DNA提取效果较差，纯度和得量都偏低，并且，血细胞的基因组DNA提取试剂盒通常不能用于唾液或组织基因组DNA提取，反之，唾液基因组DNA提取试剂盒也不能用于血细胞或组织基因组DNA提取，这使得在进行临检常用样本基因组DNA提取时，通常要采用多个提取试剂盒。虽然，也有对通用基因组DNA提取试剂盒的相关研究，例如专利申请201610022017就研发了一种适用于血浆、血清、细胞、尿液、唾液等易裂解的液体样本的通用试剂盒；但是，其显然不适用于组织样本、血细胞样本。

本申请正是针对人组织、血细胞、唾液等三种临检常用样本研发了一种新的能够适用于三者的通用的基因组DNA提取试剂盒，该试剂盒包括磁珠、裂解液、红细胞裂解液、结合液、清洗液1和清洗液2；裂解液中含有20-300mmol/L的Tris-HCl、20-100mmol/L的乙二胺四乙酸、0.3-2mol/L的NaCl、0.5％-5％的PEG8000，以及0.5％-10％的Triton X-100、SDS和Tween-20中的至少一种；红细胞裂解液中含有10-100mmol/L的Tris-HCl、1-50mmol/L的乙二胺四乙酸、10-300mmol/L的NaCl和0.01％-0.2％的Triton X-100。

裂解液中，Tris-HCl缓冲体系，起稳定反应体系的pH作用；EDTA为金属离子螯合剂，可以抑制DNase活性；NaCl，提供高盐环境，使DNA充分溶于液相，与蛋白沉淀分离，在乙醇环境中，更容易形成DNA钠盐沉淀；PEG8000为亲水性强的有机聚合物，能去除多糖，结合酚，防止酚与DNA结合；Triton X-100、SDS、Tween-20等为非离子型表面活性剂，能够溶解细胞膜蛋白，有利于蛋白质与DNA分离。本申请通过对裂解液进行优化改进，能有效解决提取过程中出现的粘稠和浑浊等问题，并且，不仅能够适用于唾液基因组DNA提取，而且能够适用于人组织样本、细菌等多种样本的基因组DNA提取。

红细胞裂解液中，Tris-HCl缓冲体系，起稳定反应体系的pH作用；EDTA为金属离子螯合剂，可以抑制DNase活性；NaCl，提供高盐环境，使DNA充分溶于液相，与蛋白沉淀分离，在乙醇环境中，更容易形成DNA钠盐沉淀；Triton X-100为非离子型表面活性剂，能够溶解细胞膜蛋白，有利于蛋白质与DNA分离。本申请的红细胞裂解液，在使用时，与本申请的裂解液组合使用，可处理冻存血、血凝块等复杂血液样本，能更好地适应多样本基因组DNA的提取，解决血细胞基因组DNA提取洗脱液粘稠和纯度偏低的问题。

进一步的改进方案中，本申请清洗液1和清洗液2进行了优化，本申请的清洗液1中含有1-4mol/L的异硫氰酸胍或盐酸胍，以及40％-70％的无水乙醇；清洗液2中含有10-100mmol/L的NaCl和70％-80％的无水乙醇。清洗液1中，异硫氰酸胍或盐酸胍为高离液盐，能够破坏细胞结构，使蛋白变性；无水乙醇用于去除盐离子等杂质。清洗液2中，NaCl用于提供高盐环境，使DNA充分溶于液相，与蛋白沉淀分离；无水乙醇进一步的去除盐离子等杂质。

本申请的试剂盒能够适用于多种不同形式的临检样本，包括冻存血、血凝块等复杂血液样本、人组织样本、血细胞、唾液等，以及其它动物样本和细菌，本申请的试剂盒解决了血细胞基因组DNA提取洗脱液粘稠、纯度低的问题，解决了唾液基因组DNA提取得量低、洗脱液粘稠、浑浊等问题，对不同的样本提取的基因组DNA在质量和得量上都能满足各种下游实验的使用需求；并且，本申请试剂盒操作流程简单、所需样本起始量低，适用于自动化工作站，即可以将本申请的试剂盒移植到自动化工作站中，通过自动化的方式实现基因组DNA提取；而且，本申请的试剂盒经核算，其提取1例样本的成本约为1.7元，仅为同类型市售产品的约1/4，大大降低了基因组DNA的提取成本。

下面通过具体实施例和附图对本申请作进一步详细说明。以下实施例仅对本申请进行进一步说明，不应理解为对本申请的限制。

实施例一

本例的试剂盒具体包括裂解液、蛋白酶K、磁珠悬浮液、红细胞裂解液、结合液、清洗液1、清洗液2和洗脱液。

其中，裂解液由100mmol/L的Tris-HCl、20mmol/L的乙二胺四乙酸、1.4mol/L的NaCl、1％的PEG8000和1％的Tween-20组成。

蛋白酶K购自天根生化科技，磁珠悬浮液购自美基生物科技。

红细胞裂解液由30mmol/L的Tris-HCl、5mmol/L的乙二胺四乙酸、60mmol/L的NaCl和0.015％的TritonX-100组成。

结合液为异丙醇。

清洗液1由2mol/L的盐酸胍和50％的无水乙醇组成。

清洗液2由50mmol/L的NaCl和75％的无水乙醇组成。

洗脱液为无核酸酶的灭菌去离子水。

本例试剂盒的使用方法如下：

(1)对于人组织样本，取30mg组织于2.0mL离心管中，加入300μL裂解液和20μL蛋白酶K，加入1例4mm研磨珠，于研磨仪上60Hz研磨60s，然后，于56℃金属浴中孵育30min；

(2)对于血细胞样本，取500μL血细胞于2.0mL离心管中，加入1mL红细胞裂解液，涡旋混匀后，12000rpm离心1min，弃掉上清，再次加入1mL红细胞裂解液，涡旋混匀后，12000rpm离心1min，弃掉上清，加入300μL裂解液和20μL蛋白酶K，震荡混匀，于56℃金属浴中孵育30min；

(3)对于唾液样本，取300μL唾液于1.5mL离心管中，加入300μL裂解液和20μL蛋白酶K，震荡混匀，于56℃金属浴中孵育30min；

(4)加入0.6-1倍体积的结合液和10μL磁珠悬浮液，震荡结合10min；

(5)瞬离后，上架磁吸1min，弃掉上清液；加入500μL清洗液1，涡旋震荡30s，上架磁吸1min，弃掉上清；

(6)加入500μL清洗液2，涡旋震荡30s，上架磁吸上架磁吸1min，弃掉上清；重复清洗液2清洗1次；

(7)室温晾干3-5min，加入60μL洗脱液，涡旋震散磁珠，于56℃金属浴中孵育5min；

(8)瞬离后上架磁吸，将上清液转移到新的离心管中，即获得提取的基因组DNA，-20℃保存。

本例按照以上试剂盒和方法，对两个人组织样本、两个血细胞样本和两个唾液样本进行了基因组DNA提取，并对提取的基因组DNA进行质量检测。具体的，本例检测了所有提取的基因组DNA的A260、A280和A230；并计算A260/280，A260/230，以此表征基因组DNA的纯度。采用QUBIT测定提取的提取的基因组DNA的浓度，并采用安捷伦4200分析提取的提取的基因组DNA的主片段大小和主片段的含量。各项检测结果如表1所示；安捷伦4200的分析结果如图1至图6所示，图1为人组织样本1的分析结果图，图2为人组织样本2的分析结果图，图3为血细胞样本1的分析结果图，图4为血细胞样本2的分析结果图，图5为唾液样本1的分析结果图，图6为唾液样本2的分析结果图。

表1提取的基因组DNA质量检测结果

表1和图1至图6的结果显示，本例的试剂盒能够有效的提取血细胞、唾液、人组织的基因组DNA，并且，提取的基因组DNA纯度和浓度都较高，能够很好的满足后续使用需求。

实施例二

本例在实施例一的基础上，对裂解液、红细胞裂解液、清洗液1和清洗液2的组分和各组分浓度进行了试验，详细如下：

1.裂解液配方试验

本例对裂解液中各组分的不同浓度进行了试验，具体如表2所示。

表2裂解液配方试验

本例按照表2配制了试验1至试验7的七种配方的裂解液，其余试剂，例如蛋白酶K、红细胞裂解液、结合液、清洗液1和清洗液2等都与实施例一相同，采用实施例一相同的方法，对实施例一的两个人组织样本、两个血细胞样本和两个唾液样本进行基因组DNA提取。并按照实施例一的方法测量所提取的基因组DNA的浓度和纯度。结果显示，本例的七种配方的裂解液，最终都能够提取获得符合使用需求的基因组DNA，尤其是试验6和7的效果相对较好，与实施例一接近。

2.红细胞裂解液配方试验

本例对红细胞裂解液中各组分的不同浓度进行了试验，具体如表3所示。

表3红细胞裂解液配方试验

本例按照表3配制了试验1至试验4的四种配方的红细胞裂解液，其余试剂，例如蛋白酶K、裂解液、结合液、清洗液1和清洗液2等都与实施例一相同，采用实施例一相同的方法，对实施例一的两个血细胞样本进行基因组DNA提取。并按照实施例一的方法测量所提取的基因组DNA的浓度和纯度。结果显示，本例的四种配方的红细胞裂解液液，最终都能够提取获得符合使用需求的基因组DNA，尤其是试验2的效果相对较好。

3.清洗液配方试验

本例对清洗液1和清洗液2中各组分的不同浓度进行了试验，具体如表4所示。

表4清洗液配方试验

本例按照表4配制了试验1至试验5的五种配方的清洗液1和清洗液2，其余试剂，例如蛋白酶K、裂解液、红细胞裂解液和结合液等都与实施例一相同，采用实施例一相同的方法，对实施例一的两个人组织样本、两个血细胞样本和两个唾液样本进行基因组DNA提取。并按照实施例一的方法测量所提取的基因组DNA的浓度和纯度。结果显示，本例的五种配方的清洗液1和清洗液2，最终都能够提取获得符合使用需求的基因组DNA，尤其是试验2和5的效果相对较好。

以上试验结果显示，本例的试剂盒中，裂解液中含有20-300mmol/L的Tris-HCl、20-100mmol/L的乙二胺四乙酸、0.3-2mol/L的NaCl、0.5％-5％的PEG8000，以及0.5％-10％的Triton X-100、SDS和Tween-20中的至少一种；红细胞裂解液中含有10-100mmol/L的Tris-HCl、1-50mmol/L的乙二胺四乙酸、10-300mmol/L的NaCl和0.01％-0.2％的Triton X-100；清洗液1中含有1-4mol/L的异硫氰酸胍或盐酸胍，以及40％-70％的无水乙醇；清洗液2中含有10-100mmol/L的NaCl和70％-80％的无水乙醇；都可以基本满足对人组织、血细胞和唾液的基因组DNA提取需求。其中，结合实施例一的结果，裂解液由100mmol/L的Tris-HCl、20mmol/L的乙二胺四乙酸、1.4mol/L的NaCl、1％的PEG8000和1％的Tween-20组成；红细胞裂解液由30mmol/L的Tris-HCl、5mmol/L的乙二胺四乙酸、60mmol/L的NaCl和0.015％的Triton X-100组成；清洗液1由2mol/L的盐酸胍和50％的无水乙醇组成；清洗液2由50mmol/L的NaCl和75％的无水乙醇组成；效果最佳，作为本例优选的试剂盒方案。

以上内容是结合具体的实施方式对本申请所作的进一步详细说明，不能认定本申请的具体实施只局限于这些说明。对于本申请所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换。

Claims (10)

1.一种用于基因组DNA提取的试剂盒，所述试剂盒采用磁珠法对离体样本进行基因组DNA提取，所述离体样本为人组织样本、血细胞或唾液，其特征在于：所述试剂盒包括磁珠、裂解液、红细胞裂解液、结合液、清洗液1和清洗液2；

所述裂解液中含有20-300mmol/L的Tris-HCl、20-100mmol/L的乙二胺四乙酸、0.3-2mol/L的NaCl、0.5％-5％的PEG8000，

以及0.5％-10％的Triton X-100、SDS和Tween-20中的至少一种；

所述红细胞裂解液中含有10-100mmol/L的Tris-HCl、1-50mmol/L的乙二胺四乙酸、10-300mmol/L的NaCl和0.01％-0.2％的Triton X-100。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述裂解液由100mmol/L的Tris-HCl、20mmol/L的乙二胺四乙酸、1.4mol/L的NaCl、1％的PEG8000和1％的Tween-20组成；

所述红细胞裂解液由30mmol/L的Tris-HCl、5mmol/L的乙二胺四乙酸、60mmol/L的NaCl和0.015％的Triton X-100组成。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述清洗液1中含有1-4mol/L的异硫氰酸胍或盐酸胍，以及40％-70％的无水乙醇。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述清洗液1由2mol/L的盐酸胍和50％的无水乙醇组成。

5.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述清洗液2中含有10-100mmol/L的NaCl和70％-80％的无水乙醇；

优选的，所述清洗液2由50mmol/L的NaCl和75％的无水乙醇组成。

6.一种用于磁珠法提取基因组DNA的裂解液，其特征在于：所述裂解液中含有20-300mmol/L的Tris-HCl、20-100mmol/L的乙二胺四乙酸、0.3-2mol/L的NaCl、0.5％-5％的PEG8000，

以及0.5％-10％的Triton X-100、SDS和Tween-20中的至少一种；

优选的，所述裂解液由100mmol/L的Tris-HCl、20mmol/L的乙二胺四乙酸、1.4mol/L的NaCl、1％的PEG8000和1％的Tween-20组成。

7.一种用于磁珠法提取血细胞基因组DNA的红细胞裂解液，其特征在于：所述红细胞裂解液中含有10-100mmol/L的Tris-HCl、1-50mmol/L的乙二胺四乙酸、10-300mmol/L的NaCl和0.01％-0.2％的Triton X-100；

优选的，所述红细胞裂解液由30mmol/L的Tris-HCl、5mmol/L的乙二胺四乙酸、60mmol/L的NaCl和0.015％的Triton X-100组成。

8.一种用于磁珠法提取基因组DNA的清洗液，所述清洗液包括清洗液1和清洗液2，其特征在于：所述清洗液1中含有1-4mol/L的异硫氰酸胍或盐酸胍，以及40％-70％的无水乙醇，所述清洗液2中含有10-100mmol/L的NaCl和70％-80％的无水乙醇；

优选的，所述清洗液1由2mol/L的盐酸胍和50％的无水乙醇组成，所述清洗液2由50mmol/L的NaCl和75％的无水乙醇组成。

9.根据权利要求1-5任一项所述的试剂盒、权利要求6所述的裂解液或权利要求8所述的清洗液在人组织样本或唾液的基因组DNA提取中的应用。

10.根据权利要求1-5任一项所述的试剂盒、权利要求6所述的裂解液、权利要求7所述的红细胞裂解液或权利要求8所述的清洗液在血细胞的基因组DNA提取中的应用。

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