CN110897166B - 具有促消化功效的含益生菌与酪蛋白磷酸肽的食用组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种具有促消化功效的含益生菌与酪蛋白磷酸肽的食用组合物。本发明的含益生菌与酪蛋白磷酸肽的食用组合物中，所述益生菌包括乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)及副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)，乳双歧杆菌包括乳双歧杆菌BL‑99、副干酪乳杆菌包括副干酪乳杆菌K56及副干酪乳杆菌ET‑22。本发明的组合物可添加在各种健康食品以及保健食品例如液体饮料、固体饮料、口服液、奶制品、片剂或胶囊等中，可用于有效促消化。

Description

具有促消化功效的含益生菌与酪蛋白磷酸肽的食用组合物

技术领域

本发明主要是关于一种具有促消化功效的食用组合物，具体是指一种包含益生菌与酪蛋白磷酸肽的食用组合物，可有效促消化，该组合物可添加在各种健康食品以及保健食品例如液体饮料、固体饮料、口服液、奶制品(液态奶、酸奶、奶酪、奶片等)、片剂、胶囊等中。

背景技术

据2010-2013年中国居民营养与健康监测数据表明，全国0-5岁儿童生长迟缓率约8％，而农村地区则达到11％；全国0-5岁儿童贫血率为11％。另一项具有代表性的全国调查结果显示中国3-12岁儿童多种微量营养素摄入不足，例如膳食钙摄入不足在90％以上，而维生素B1\B2\A\C的摄入不足率均在一半以上。有近一半的儿童存在挑食现象。幼儿时期因其好奇心强、耐心不足和好动等特定的生理特点，不能集中精力完整地进餐，上述种种原因导致儿童时期的营养素摄入不均衡、微量营养素摄入不足已经成为影响儿童生长发育的主要问题之一。对于消化***尚处于发育期的儿童来说，消化不良、便秘、腹泻等消化功能紊乱问题更是频频发生。

目前，对于儿童膳食营养素摄入不足的弥补措施，多采用饮食干预及营养宣教，但这些措施均需投入较高的人力和物力，且仅适用于局部试点地区，对于大范围推广，一是见效慢，二是成本高。虽然强化营养素补充剂是能够改善儿童营养素摄入现状的措施，但是同时存在坚持性差及成本高的问题。

益生菌对于调节人体肠道菌群、改善便秘具有功效，但对于提高肠动促消化酶活性及改善肠道组织发育的作用，鲜有报道。

酪蛋白磷酸肽(CPP)为乳来源的生物活性肽，在动物的小肠环境中能与钙、铁、锌、硒等二价矿物质离子结合，防止产生沉淀，增强肠内可溶性矿物质的浓度，从而促进肠黏膜对钙、铁、锌、硒，尤其是钙的吸收和利用。现有技术中有关于CPP在补钙功能性食品或保健品的应用中，但经检索，未见CPP促消化功能的相关报道。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种具有促消化功效的食用组合物，以制成食品，供消费者方便食用，同时具有促消化的功效。

本发明的另一目的在于提供所述的食用组合物在制备具有促消化功效的食品中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种具有促消化功效的食品。

一方面，本发明提供了一种含益生菌与酪蛋白磷酸肽的食用组合物，其中，所述益生菌包括乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)及副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)。

根据本发明的具体实施方案，本发明的含益生菌与酪蛋白磷酸肽的食用组合物中，乳双歧杆菌包括乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌包括副干酪乳杆菌K56及副干酪乳杆菌ET-22。

根据本发明的具体实施方案，本发明的食用组合物中，乳双歧杆菌BL-99为保藏编号CGMCC No.15650的菌株(本发明中将其亦称为BL-99)。该菌株具有耐胃酸性能，在pH2.5的胃酸液中处理30min时活菌存活率62％以上，处理2小时活菌存活率61％以上。本发明提供的乳双歧杆菌BL-99还具有耐肠液性能，在pH6.8的小肠液中处理2小时活菌存活率70％以上。小鼠实验表明该菌株无口服急性毒性，无抗生素耐受，安全可以用于食品加工。该菌株已于2018年04月26日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心CGMCC(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，分类命名：乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)；保藏编号为CGMCC No.15650。

根据本发明的具体实施方案，本发明的食用组合物中，副干酪乳杆菌K56为保藏编号CGMCC 15139或DSM27447的菌株。副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracaseisubsp.paracasei)K56菌株已于2013年6月27日保存于德国微生物及细胞培养物收集中心(German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)，保藏编号DSM27447；另外，副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)K56菌株也已于2017年12月29日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，分类命名：副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei subsp.paracasei)；保藏编号CGMCC 15139。另外，副干酪乳杆菌K56也已于2014年4月8日寄存于中国台湾地区财团法人食品工业发展研究所(Food Industry Researchand Development Institute,FIRDI)的生物资源保存及研究中心，寄存编号为BCRC910621。

根据本发明的具体实施方案，本发明的食用组合物中，副干酪乳杆菌ET-22为保藏编号CGMCC No.15077的菌株。该菌株已2017年12月18日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，分类命名：副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)；保藏编号CGMCC No.15077。

根据本发明的具体实施方案，本发明的食用组合物中，益生菌与酪蛋白磷酸肽的重量比例为240～700：0.03～50，优选为293～476：0.3～30。

酪蛋白磷酸肽(CPP)是用胰蛋白酶水解的酪蛋白，经过精制、纯化制成。分子结构由二十到三十几个氨基酸残基组成，其中包括4～7个成簇存在的磷酸丝酰基。目前，市售的CPP产品中CPP纯度为12％～80％。本发明的食用组合物中，CPP的重量份数是以CPP产品中的CPP的量计。

在本发明的一些具体实施方案中，本发明的食用组合物中，乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌K56、副干酪乳杆菌ET-22的活菌数之比为0.01～10：0.01～20：0.01～20，优选为0.1～10：0.1～10：0.1～10。

在本发明的另一些具体实施方案中，本发明的食用组合物中，乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌K56、副干酪乳杆菌ET-22的重量(以每种菌的菌粉重量计)比例为0.01～10：0.01～20：0.01～20，优选为0.1～10：0.1～10：0.1～10。

根据本发明的具体实施方案，本发明的食用组合物中，乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌K56、副干酪乳杆菌ET-22各自独立地为活菌。

本案发明人在研究中惊喜地发现，将乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)BL-99、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)K56及副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)ET-22与CPP组合，所得组合物具有显著的促消化功效，这样的组合物对于促进胰蛋白酶活性、促进肠运动等方面起到了协同作用。本发明的组合物为一种具有促消化功效的食用组合物。

从而，另一方面，本发明还提供了所述的益生菌食用组合物在制备具有促消化功效的食品中的应用。具体地，所述促消化包括促进胰蛋白酶活性和/或促进肠运动等。

本发明还提供了一种具有促消化功效的食品，该食品的原料组成中包括本发明所述的食用组合物。

根据本发明的具体实施方案，本发明的包括所述食用组合物的食品，可以为液体饮料、固体饮料、口服液、奶制品、片剂或胶囊。

根据本发明的具体实施方案，本发明的包括所述食用组合物的食品中，所述的食用组合物在食品中的应用量以其中的活菌数计可以为10³CFU～10¹¹CFU/天。

本发明的包括所述食用组合物的食品，因包括所述食用组合物而具有促消化功能。

综上所述，本发明的食用组合物具有促消化功效，其应用于儿童食品，可以通过促进儿童消化吸收功能，提高儿童对食物的消化能力、提高儿童对膳食中营养素的吸收利用，进而达到改善营养素摄入不足的现状。

附图说明

图1显示本发明的食用组合物对实验动物小肠运动性的影响。

专利程序的微生物保存：

(一)本发明的乳双歧杆菌BL-99：

保藏日期：2018年04月26日；

保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；

保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所

保藏编号：CGMCC No.15650；

分类命名：乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)。

(二)本发明的副干酪乳杆菌ET-22：

保藏日期：2017年12月18日；

保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；

保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所

保藏编号：CGMCC No.15077；

分类命名：副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。

具体实施方式

为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现结合具体实例对本发明的技术方案进行以下详细说明，应理解这些实例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例1

一、乳双歧杆菌BL-99

本发明的乳双歧杆菌BL-99是自婴儿肠道中分离得到的。该菌株已于2018年04月26日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心CGMCC(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，分类命名：乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)；保藏编号为CGMCC No.15650。

1.乳双歧杆菌BL-99的分类学特征

理化试验结果:

2.乳双歧杆菌BL-99的人工胃液、肠液耐受性

双歧杆菌为通常不抗酸的菌属。本实施例中，测试了本发明的乳双歧杆菌BL-99的人工胃液、肠液耐受性，同时以目前领域中公认耐酸性能极好、可以通过胃肠道存活的乳双歧杆菌BB-12

作为对比。

测试方法：将乳双歧杆菌BL-99菌株于MRS液体培养基中37℃培养16小时后，于4℃、2500rpm下离心10min，收集菌体。

将待测菌株分别在人工胃液、人工小肠液中培养，37℃处理0、30min、2h后进行活菌计数分析，以存活率评价菌株的耐酸及耐肠液性能。存活率＝(处理后的活菌数/0时刻活菌数)×100％。

菌株在人工胃酸(pH2.5)中的存活率检测结果如表1所示，BB-12在人工胃酸(pH2.5)中处理30min时活菌存活率7.04％，处理2小时活菌存活率仅1.64％；而本发明的乳双歧杆菌BL-99在人工胃酸(pH2.5)中处理30min时活菌存活率62.60％，处理2小时活菌存活率61.83％。表明本发明的乳双歧杆菌BL-99具有优异的耐胃酸能力，能较为顺利地通过胃到达肠道发挥益生作用。

表1、菌株在人工胃酸(pH2.5)中的存活率

菌株在人工小肠液(pH6.8)中的存活率检测结果参见表2。数据显示，BB-12在人工小肠液(pH6.8)中处理2小时活菌存活率仅28.95％；而本发明的乳双歧杆菌BL-99在人工小肠液(pH6.8)中处理2小时活菌存活率70.23％。表明本发明的乳双歧杆菌BL-99具有优异的耐肠液能力，可以在肠道内存活并定殖。

表2、菌株在人工小肠液(pH6.8)中的存活率

3.乳双歧杆菌BL-99的的毒力实验及安全性检测

将本发明的乳双歧杆菌BL-99接种于BBL液体培养基中，36±1℃厌氧培养48±2小时，计数培养液中乳双歧杆菌BL-99活菌数为3.7×10⁸cfu/mL，将培养物的原液和5倍浓缩液，经口以20.0mL/kg BW给受试小鼠连续灌胃3天，观察7天。试验设培养基原液和5倍浓缩液对照组。试验结果表明：乳双歧杆菌BL-99的BBL培养物原液和5倍浓缩液组与各自对照组相比，对小鼠体重增长的影响无统计学意义(p＞0.05)，同时未观察到受试小鼠有毒性反应或死亡。

采用SN/T 1944-2007《动物及其制品中细菌耐药性的测定》方法，评估乳双歧杆菌BL-99的抗生素敏感性能。评价结果显示，乳双歧杆菌BL-99对氨苄西林Ampicillin、青霉素G PenicillinG、红霉素Erythromycin、氯霉素Chloramphenicol、克林霉素Clindamycin、万古霉素Vancomycin和四环素Tetracycline等敏感。符合欧洲食品安全委员会(EuropeanFood Safety Authority)对食用细菌耐药性评价规范中的要求。乳双歧杆菌BL-99不含外源抗生素耐药基因，食用安全。

二、副干酪乳杆菌ET-22

本发明的副干酪乳杆菌ET-22已2017年12月18日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，分类命名：副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)；保藏编号CGMCCNo.15077。

根据16S rDNA序列分析以及API细菌鉴定***分析结果来确认ET-22菌株在分类学上的特征。上具体如下：

形态学特征：1.于MRS培养液培养时，菌体呈中短杆状，二端呈圆形，通常成链状，偶尔成对出现。2.革兰氏染色阳性杆菌，不生成孢子，不具触酶、氧化酶及运动性，在好氧及厌氧环境均能生长，最适宜的生长温度为37±1℃，属于兼性异质发酵性菌株，葡萄糖代谢时不产生气体。

本菌株的发酵条件为：MRS液体培养基：蛋白胨，10.0g；牛肉膏，10.0g；酵母浸粉，5.0g；葡萄糖，20.0g；磷酸氢二钾，5.0g；柠檬酸氢二铵，2.0g；乙酸钠，5.0g；七水合硫酸镁，0.5g；四水合硫酸锰，0.2g；吐温80，1.0g；琼脂15.0g；蒸馏水1000mL。调整pH至6.2～6.4之间，121℃灭菌15分钟。

L.paracasei ET-22为微好氧菌，兼性厌氧环境生长较佳，产乳酸，具有耐酸性，可耐受pH值2.5的酸性环境及耐0.4％的胆盐环境4小时，嗜中温菌，生长温度范围在15～45℃，最适生长温度在37℃左右。

实施例2

将各组分按照如下重量复配成组合物：乳双歧杆菌BL-99 1kg(活菌数10⁹CFU/g)；副干酪乳杆菌K56 1kg(活菌数10⁹CFU/g)；副干酪乳杆菌ET22 1kg(活菌数10⁹CFU/g)；CPP40kg(纯度约40％)。

以实施例2制得的组合物为样品，进行以下实验：

1.实验目的

以断奶大鼠为模型动物，评估3株益生菌(BL-99、K56、ET-22)与CPP组合物对断奶鼠对饲料营养成分的消化吸收功效的影响，重点评估组合物干预对食物摄入、消化酶活性及消化道组织结构的影响。

2.实验方法

2.1动物饲养和分组

40只健康SPF级ICR雄性21周断奶大鼠，体重83.2-101.5g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，饲养于屏障***动物房中，维持室内温度22℃，湿度10-60％，12小时明暗交替照明，自由进食和饮水。按照体重将实验动物随机分成4组，每组10只。由大鼠标准饲料喂养(饲料配方由北京科奥协力饲料有限公司提供)适应性喂养1周后，进入正式实验。

2.2灌胃样品准备与干预

在每日灌胃之前配置，分别将事先按照各实验组益生菌的种类和含量分装好的菌粉溶解在10mL生理盐水中备用。空白对照组和益生菌组给予标准饲料，CPP组和“CPP+益生菌”组给予特配饲料(标准饲料+酪蛋白磷酸肽)，对益生菌组和“CPP+益生菌”组同时以灌胃的方式给予益生菌受试样品。每只实验动物灌胃0.5mL，每天上午灌胃一次，连续给予35天。对照组灌胃0.5mL生理盐水。

表3、实验分组

2.3体重增重、食物利用率、蛋白质表观消化率、蛋白质利用率测量

测量大鼠初始体重、实验结束时空腹体重以及干预期内每周测1次体重(实验期共测5次)。记录饲料摄入量、观察大鼠状态。计算体重增重、食物利用率、蛋白质利用率。

2.4肠道消化酶活性检测

实验结束后，禁食24h，自由饮水，采用***麻醉大鼠幽门结扎法收集2h内排出的胃液，检测胃蛋白酶量及活性。屠宰后取小肠组织，测定肠胰蛋白酶和肠淀粉酶活性。采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒分别检测胃蛋白酶、胰蛋白酶和淀粉酶的活性，按照试剂盒的说明书进行操作。

(1)胃蛋白酶的测定方法：取出小鼠的胃液，做适度稀释后，于4℃冰箱暂存备用。胃蛋白酶的测定按照试剂盒的步骤进行。先进行酶促反应，将两个1.5mL的离心管标为空对照管和测定管，先分别向两个离心管中加入0.04mL稀释后的胃液，于37℃条件下预热2min后，对照管中加入0.4mL试剂一和0.2mL试剂二，测定管中加0.2mL试剂二，充分混匀后，37℃孵育10min后，测定管中加入0.4mL试剂一，充分混匀，37℃孵育10min，3500r/min离心10min，取上清0.3mL进行显色反应。取4个5mL的离心管，分别标为对照管、测定管、标准管和空白管，对照管和测定管中加入0.3mL上清，标准管中加入0.3mL标准品应用液(50μg/mL)，空白管中加入0.3mL标准品稀释液，然后四个管中分别加入1.5mL的试剂三和0.3mL的试剂四，充分混匀，37℃孵育20min，用可见光分光光度计于660nm处测定各管的吸光度值(蒸馏水调零)。计算公式如下：

(2)胰蛋白酶的测定方法：取出小鼠的肠液后，于4℃冰箱暂存备用。胰蛋白酶的测定按照试剂盒的步骤进行。将两个5mL的离心管标为空白管和测定管，先分别向两个离心管中加入1.5mL胰蛋白酶底物应用液，于37℃条件下预热5min，然后空白管中加入50μL样本匀浆介质，而测定管中加入50μL肠液，分别快速混匀，并计时，迅速倒入石英比色皿中，30s时使用紫外分光光度计于253nm处测定其吸光度值(用双蒸水调零)，记为A1；将溶液倒入原试管中置于37℃孵育20min，再迅速倒入石英比色皿中，20.5min时使用紫外分光光度计于253nm处测定其吸光度值，记为A2。计算公式如下：

(3)α-淀粉酶的测定方法：取出小鼠的肠液，做适度稀释后，于4℃冰箱暂存备用。α-淀粉酶的测定按照试剂盒的步骤进行。将两个5mL的离心管标为空白管和测定管，分别向两个离心管中加入0.5mL底物缓冲液，测定管中再加入0.1mL稀释后的肠液，混匀，于37℃下孵育7.5分钟后，空白管和测定管中再分别加入0.5mL碘应用液，空白管加入3.1mL双蒸水，测定管中加入3mL双蒸水，再次混匀，用可见光分光光度计于660nm处测定两管的吸光度值(双蒸水调零)。计算公式如下：

2.5大鼠肠道组织形态学指标

实验结束后，禁食24h，自由饮水，对全部动物屠宰，采取小肠(空肠、回肠)、前段大肠、后段大肠组织。大、小肠切片染色并采用软件Image-Pro Plus 6.0进行形态观察，包括肠绒毛高度和肠绒毛表面光滑度。

2.6统计分析方法

除特别注明外，实验结果以均值±标准偏差

来进行表示。采用SPSS16.0软件对实验数据进行统计学分析，首先采用单因素方差分析对数据进行齐次检验，随后各组数据间的比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)中Duncan's法进行分析，显著性水准设定为P<0.05。

3.实验结果

3.1组合物对实验动物体重增重、摄食量、食物利用率和蛋白质利用率的影响

在实验期内，动物表征正常，精神及活动状况良好，每日给予受试物后未出现任何不良反应。与对照组相比，各干预组在体重增重、摄食量、食物利用率、蛋白质表观消化率和蛋白质利用率上，均无显著差异。

3.2组合物对肠道消化酶活性的影响

如表4所示，“CPP+益生菌”组的胰蛋白酶活力显著高于对照组，也显著高于CPP组和益生菌组(p＜0.05)。而单独CPP组和单独益生菌组合组的胰蛋白酶活性并未见显著高于对照组，这说明CPP与益生菌的组合具有协同效应，协同促进了胰蛋白酶的活性。各实验组胃蛋白酶活性和胰淀粉酶活性与对照组比较无显著性差异(p＞0.05)。

以上结果表明，“CPP+益生菌”组具有促进小鼠肠道消化酶活性，从而具有促进肠道消化功能。

表4、益生菌对大鼠消化酶活力的影响

组别	胰蛋白酶(U/ml)
		对照	652.72±145.02abc
CPP	724.81±138.18bcd
		BL-99	840.44±139.81d
K56	607.94±56.76ab
		ET-22	776.72±56.00cd
复合益生菌	628.86±67.87ab
		CPP+益生菌组合	1126.30±150.46e

注：同一列不同小写字母表示差异显著(P<0.05)

3.3组合物对实验动物肠道组织形态学的影响

如表5所示，CPP+益生菌组的回肠绒毛高度显著高于对照组，也是各处理组中最高的。复合益生菌组的空肠绒毛高度显著高于任何单一益生菌组。CPP+益生菌组的空肠、回肠绒毛表面光滑度均比对照组要高，表明CPP+益生菌组对于改善小肠组织形态学结构效果最强，绒毛高度越高、绒毛表面光滑度越高，小肠吸收能力越强。

表5、组合物对大鼠肠道组织形态学的影响

	空肠绒毛高度	回肠绒毛高度
			对照	359.67±32.85ab	255.18±34.99a
复合益生菌	421.17±34.22c	276.13±9.78abc
			CPP	349.23±43.35a	287.17±18.28bc
CPP+益生菌	369.08±31.34ab	294.12±26.32c

同一列不同小写字母之间差异显著(p<0.05)。

综合实施例2结果，“益生菌+CPP”组合物干预组的胰蛋白酶活力显著高于对照组，也显著高于CPP组和益生菌组(p＜0.05)，说明CPP与益生菌的组合具有协同效应，协同促进了胰蛋白酶的活性。CPP+益生菌组的回肠绒毛高度显著高于对照组，也是各处理组中最高的。表明CPP+益生菌组对于改善小肠吸收能力越强。

实施例3

1.实验目的

以断奶小鼠为模型动物，评估3株益生菌(BL-99、K56、ET-22)与CPP组合物对断奶小鼠小肠动力的影响。

2.实验方法

2.1动物饲养和分组

50只健康SPF级ICR雄性21周断奶小鼠，体重11.6-19.5g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，饲养于屏障***动物房中，维持室内温度22℃，湿度10-60％，12小时明暗交替照明，自由进食和饮水。按照体重将实验动物随机分成5组，每组10只。由大、小鼠标准饲料喂养(饲料配方由北京科奥协力饲料有限公司提供)适应性喂养1周后，进入正式实验。

2.2灌胃样品准备与干预

在每日灌胃之前配置，分别将事先按照各实验组益生菌的种类和含量分装好的菌粉溶解在10mL生理盐水中备用。空白对照组、模型对照组和益生菌组给予标准饲料，CPP组和“CPP+益生菌”组给予特配饲料(标准饲料+酪蛋白磷酸肽)，对益生菌组和“CPP+益生菌”组同时以灌胃的方式给予益生菌受试样品。每只实验动物灌胃0.5mL，每天上午灌胃一次，连续给予35天。对照组灌胃0.5mL生理盐水。

表6、实验分组

2.3小肠运动试验

第30天干预结束后进行小肠运动实验，实验前禁食16h，自由饮水。于测定当天给予受试样品，30min后模型对照组和各实验组均灌胃复方地芬诺酯(0.025％)，空白对照组灌胃同体积蒸馏水。给复方地芬诺酯30min后，各组灌胃墨汁(含5％的活性炭粉、10％***树胶)。给墨汁25min后颈椎脱臼处死小鼠，打开腹腔，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管。将小肠拉成直线，测量肠管长度作为“小肠总长度”，从幽门至炭末前沿的距离作为“炭末在肠内推进距离”，按下式计算炭末推进百分率。

墨汁推进率＝墨汁推进长度(cm)/小肠总长度(cm)×100％

2.4统计分析方法

除特别注明外，实验结果以均值±标准偏差

来进行表示。采用SPSS16.0软件对实验数据进行统计学分析，首先采用单因素方差分析对数据进行齐次检验，随后各组数据间的比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)中Duncan's法进行分析，显著性水准设定为P<0.05。

3.实验结果

结果参见图1，益生菌K56和益生菌ET-22、复合益生菌组、CPP+益生菌组小鼠的墨汁推进率显著升高(p＜0.05)，表明，益生菌K56、益生菌ET-22、复合益生菌组和“CPP+益生菌”组均可促进小鼠肠道运动，并且复合益生菌组促小肠运动能力要分别强于单独益生菌组，CPP+益生菌组促进小鼠肠道运动的能力要强于单独益生菌组和CPP组。

综合实施例2和实施例3结果，益生菌与CPP组合物在能显著提高实验动物消化酶活性、促进肠道动力、通过改善小肠组织形态从而提高吸收能力，在促消化吸收方面表现出协同效应。

Claims (19)

1.一种含益生菌与酪蛋白磷酸肽的食用组合物，其中，所述益生菌包括乳双歧杆菌（Bifidobacterium lactis）及副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）；

其中，乳双歧杆菌包括乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌包括副干酪乳杆菌K56及副干酪乳杆菌ET-22；乳双歧杆菌BL-99为保藏编号CGMCC No. 15650的菌株，副干酪乳杆菌K56为保藏编号CGMCC 15139或DSM27447的菌株，副干酪乳杆菌ET-22为保藏编号CGMCC No.15077的菌株。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，益生菌与酪蛋白磷酸肽的重量比例为240~700：0.03~50。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中，益生菌与酪蛋白磷酸肽的重量比例为293~476：0.3~30。

4.根据权利要求1或2或3所述的组合物，其中，乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌K56、副干酪乳杆菌ET-22的活菌数之比为0.01~10：0.01~20：0.01~20。

5.根据权利要求4所述的组合物，其中，乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌K56、副干酪乳杆菌ET-22的活菌数之比为0.1~10：0.1~10：0.1~10。

6.根据权利要求1或2或3所述的组合物，其中，乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌K56、副干酪乳杆菌ET-22的重量比例为0.01~10：0.01~20：0.01~20。

7.根据权利要求6所述的组合物，其中，乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌K56、副干酪乳杆菌ET-22的重量比例为0.1~10：0.1~10：0.1~10。

8.根据权利要求1所述的组合物，其中，乳双歧杆菌BL-99、副干酪乳杆菌K56、副干酪乳杆菌ET-22各自独立地为活菌。

9.权利要求1~8任一项所述的组合物在制备具有促消化功效的食品中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其中，所述促消化包括促进胰蛋白酶活性和/或促进肠运动。

11.根据权利要求9所述的应用，其中，所述食品为液体饮料或固体饮料。

12.根据权利要求9所述的应用，其中，所述食品为口服液。

13.根据权利要求9所述的应用，其中，所述食品为奶制品。

14.根据权利要求9所述的应用，其中，所述食品为片剂或胶囊。

15.一种具有促消化功效的食品，该食品的原料组成中包括权利要求1~8任一项所述的益生菌食用组合物。

16.根据权利要求15所述的食品，其中，所述食品为液体饮料或固体饮料。

17.根据权利要求15所述的食品，其中，所述食品为口服液。

18.根据权利要求15所述的食品，其中，所述食品为奶制品。

19.根据权利要求15所述的食品，其中，所述食品为片剂或胶囊。

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