CN110777098B - 一种具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌及其分离方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌及其分离方法和应用。所述乳杆菌命名为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)LC86菌株，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2013年12月，保藏编号为CGMCC 1.12731，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。其能够明显改善糖尿病脑病所致的一氧化氮含量升高，能够提高脑组织抗氧化酶活性、改善学习记忆能力。将其应用于防治糖尿病脑病的药物中，无毒副作用，可和其他营养素一起用于临床患者的治疗。

Description

一种具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌及其分离方法和应用
技术领域
本发明属于化学医药领域，具体涉及一种乳杆菌及其分离方法和应用。尤其涉及一种具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌及其分离方法和应用。
背景技术
糖尿病发病率高、并发症多、致死率、致残率高，其中大部分为Ⅱ型糖尿病。糖尿病患者血糖长期升高又得不到控制，会引发各种慢性并发症，例如冠心病、高血压、心肌梗死、脑卒中、老年痴呆、帕金森、肾病、视网膜病等。糖尿病并发症已成为糖尿病病人致死、致残的主要原因，其中包括糖尿病脑病，这显然会对糖尿病病人的生活质量带来严重的影响。
糖尿病脑病容易被忽视、研究相对滞后。糖尿病脑病是最常见的伴发疾病之一，发生隐秘、慢性渐进性加重，常被忽视，但一旦出现明显的临床症状时，便会发展为脑中风损伤、老年痴呆等多种疾病，其病理损伤不可逆转且至今尚无有效的措施阻止其发展。近年来，糖尿病对中枢神经***的影响已引起人们的高度重视，但糖尿病脑病的防治研究起步晚于其他如糖尿病肾病、视网膜疾病，如何防治糖尿病脑病，探索其发病机理并寻找合适的抗糖尿病脑病药物是非常关键的。
糖尿病脑病以获得性认知行为缺陷为特征。认知缺陷可同时发生在Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病患者，影响患者的学习、记忆以及复杂的信息处理过程。成年人Ⅰ型糖尿病常表现为轻、中度认知功能下降，重度患者相对较少，而且认知能力缺陷的形式各家报道不一，这可能与认知障碍的程度、研究人群以及血糖控制程度不同等因素有关。Ⅱ型糖尿病患者亦存在轻、中度认知能力下降，主要表现为语言、记忆和复杂信息处理能力减退，而对运动反应时间及瞬间记忆的影响较少。60岁以下患者常呈轻度认知缺陷，一般对日常生活无明显影响，而老年患者出现痴呆的危险性比正常增加2倍。糖尿病脑病的神经生理学和神经放射影像学的特点与大脑老化十分相似，这些发现暗示了糖尿病脑病在许多方面反映了大脑加速老化的过程。
糖尿病对大脑的损伤主要表现为脑血管疾病(主要包括血栓性脑梗死、脑栓塞、短暂性脑缺血发作、腔隙性脑梗死以及出血性脑卒中)和糖尿病性脑病(由于糖尿病代谢紊乱导致脑血管改变，损害了中枢神经***，使大脑在结构、神经生理及神经精神等方面发生病理改变，以获得性认知行为缺陷为特征的糖尿病慢性并发症)。糖尿病脑病常存在低灌注状态，与高糖、高脂有关。
在糖尿病脑病中，高血糖可通过NO的毒性作用加重脑缺血性损伤。在脑缺血早期，eNOS介导的NO通过扩张血管改善缺血区的血液供应，具有短时保护作用，但随着NO的大量产生，由iNOS介导的神经毒性效应很快占优势，分别在脑缺血进展期和晚期介导神经毒性作用，造成神经元的损伤。
益生菌是对人体有益的活性微生物，其通过调节宿主黏膜与***免疫功能或通过调节肠道内菌群平衡，促进营养吸收保持肠道健康的作用，从而产生有利于宿主健康的作用。肠道菌群在全身性疾病中的重要作用被越来越多的研究者关注，但是通过益生菌防治糖尿病脑病的研究较少。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种乳杆菌及其分离方法和应用。尤其提供一种具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌及其分离方法和应用。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
一方面，本发明提供一种具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌，所述乳杆菌命名为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)LC86菌株，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2013年12月，保藏编号为CGMCC 1.12731，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
本发明分离出了一种新型的乳杆菌，即副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)LC86菌株，且首次揭露该乳杆菌在防治糖尿病脑病中的用途，其能够明显改善糖尿病脑病所致的一氧化氮含量升高，能够提高脑组织抗氧化酶活性、抗神经细胞凋亡、改善学习记忆能力。将其应用于防治糖尿病脑病的药物中，无毒副作用，可和其他营养素一起用于临床患者的治疗或辅助治疗。
在本发明中，所述乳杆菌是从酸奶制品中筛选得到的。本发明所涉及的副干酪乳杆菌LC86菌株分离自酸奶，经筛选、驯化和验证，安全性高，具有良好的生态互助性。
本发明所涉及的乳杆菌培养最适条件为：兼性厌氧，生长温度范围5-53℃(例如5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、37℃、40℃或53℃等)，最适生长温度为37℃，最适pH为6.2-6.8(例如pH6.2、pH6.3、pH6.5或pH6.8等)。
另一方面，本发明提供一种如上所述的具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌的分离方法，所述分离方法包括：
将酸奶制品稀释后于无菌MRS培养基上进行厌氧培养，获得菌落；挑取形态规则的菌落在无菌MRS培养基上进行分离纯化，获得单个纯种菌落并筛选出所述具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌。
优选地，所述厌氧培养的温度为35-39℃，例如35℃、36℃、37℃、38℃或39℃等；厌氧培养的时间为40-50h，例如40h、42h、44h、45h、47h、48h或50h等。
优选地，所述MRS培养基的配方为：酪蛋白胨10.0g/L，牛肉浸取物10.0g/L，酵母提取液5.0g/L，葡萄糖5.0g/L，乙酸钠5.0g/L，柠檬酸二胺2.0g/L，吐温-80 1.0g/L，磷酸氢二钾2.0g/L，七水硫酸镁0.2g/L，七水硫酸锰0.05g/L，碳酸钙20.0g/L，琼脂20.0g/L，pH6.8，121℃灭菌20min。
优选地，所述分离纯化是指：挑取形态规则的菌落在无菌MRS培养基上进行3-10次(例如3次、5次、8次或10次等)划线培养，达到分离纯化的目的。
优选地，所述筛选是采用16S rDNA序列同源性分析法进行筛选。
再一方面，本发明提供一种如上所述的具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌在制备具有防治糖尿病脑病功效的药物中的应用。
在本发明中，所述乳杆菌提高脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。
在本发明中，所述乳杆菌抑制脑组织中丙二醛(MDA)的含量。
在本发明中，所述乳杆菌抑制脑组织中乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性。
在本发明中，所述乳杆菌抑制海马中iNOS的活性。
在本发明中，所述乳杆菌能够显著改善糖尿病脑病患者的学习记忆能力。
在本发明中，所述乳杆菌能够显著控制糖尿病脑病患者血糖值的升高。
优选地，所述乳杆菌的活菌数不低于1×107CFU/g，例如1×107CFU/g、2×107CFU/g、5×107CFU/g、1×108CFU/g或1×109CFU/g等。
优选地，所述药物还包括药学上可接受的辅料。
优选地，所述辅料包括赋形剂、稀释剂、载体、调味剂、粘合剂或填充剂中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合例如稀释剂和载体的组合、调味剂和粘合剂的组合、粘合剂和填充剂的组合等。其他任意的组合方式便不在此一一赘述。
优选地，所述载体包括脂质体、胶束、树状大分子、微球或微囊。
本发明所述乳杆菌可以负载于常用药用载体上作为防治糖尿病脑病的药物，实现更好的生物相容性、靶向性、生物安全性和给药效果。
所述乳杆菌还可以与其他药物或营养制剂联用实现对糖尿病脑病更好的治疗效果。
优选地，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、喷雾剂、膜剂、栓剂、滴鼻剂或滴丸剂。用本发明所涉及的乳杆菌为活性成分的药物可以根据实际需要被制备成上述任一种药物剂型，各剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
其给药途径可以根据实际需要选择口服给药、舌下给药、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔给药或经皮给药的任意一种方式。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明创造性地发现了一株疗效好、且无毒副作用的防治糖尿病脑病的菌株，并创造性地以海马区的一氧化氮为治疗靶点，开创了防治糖尿病脑病的新模式。经动物实验验证证实，该菌株能明显改善糖尿病脑病大鼠的学习记忆能力，有效提高脑组织SOD活力，有效降低MDA含量，有效抑制AchE活性，抑制海马区iNOS的活性。将其用来防治糖尿病脑病或用于糖尿病脑病患者的辅助治疗，疗效显著，且未发现毒副作用，使用方便，能够大大减轻糖尿病脑病患者的痛苦。
附图说明
图1是本发明具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌的个体形态图(放大1000倍)。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
实施例1
副干酪乳杆菌的分离与鉴定。
具体方法为：以青海老酸奶(产品型号57338258454)作为分离样品，将其稀释后用涂布棒涂布于无菌MRS培养基上在37℃下进行厌氧培养48h，获得菌落；挑取形态规则的菌落在无菌MRS培养基上进行5次划线培养以分离纯化，获得单个纯种菌落，镜检确定为乳杆菌，并采用16S rDNA序列同源性分析法筛选出所述具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌。其中MRS培养基的配方为：酪蛋白胨10.0g/L，牛肉浸取物10.0g/L，酵母提取液5.0g/L，葡萄糖5.0g/L，乙酸钠5.0g/L，柠檬酸二胺2.0g/L，吐温-80 1.0g/L，磷酸氢二钾2.0g/L，七水硫酸镁0.2g/L，七水硫酸锰0.05g/L，碳酸钙20.0g/L，琼脂20.0g/L。pH6.8，121℃灭菌20min。
(1)对上述筛选得到的乳杆菌进行16S rDNA分子生物学鉴定。将单菌落挑取，利用无菌水混匀，加入细菌通用引物，进行菌落PCR扩增，对其基因序列进行测定。本发明具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌的16S rDNA碱基序列如下：
TCAGGATGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAGTTCTCGTTGATGATCGGTGCTTGCACCGAGATTCAACATGGAACGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCTTAAGTGGGGGATAACATTTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAGATCCAAGAACCGCATGGTTCTTGGCTGAAAGATGGCGTAAGCTATCGCTTTTGGATGGACCCGCGGCGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGATGATACGTAGCCGAACTGAGAGGTTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGCAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTGGAGAAGAATGGTCGGCAGAGTAACTGTTGTCGGCGTGACGGTATCCAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCTCGGCTTAACCGAGGAAGCGCATCGGAAACTGGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAATGCTAGGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTTTTGATCACCTGAGAGATCAGGTTTCCCCTTCGGGGGCAAAATGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATGACTAGTTGCCAGCATTTAGTTGGGCACTCTAGTAAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAACGAGTTGCGAGACCGCGAGGTCAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGACTGTAGGCTGCAACTCGCCTACACGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCGAAGCCGGTGGCGTAACCCTTTTAGGGAGCGAGCCGTCTAAGGTGGGACAAATGATTAGGGTGAAGTC。
(2)对上述筛选得到的乳杆菌进行菌落形态和个体形态的观察，菌落形态：呈白色，圆形凸起，大小不规则；个体形态可以从图1的光学显微镜视野中观察看到，为革兰氏阳性，菌体呈杆状，不运动。
(3)上述筛选得到的乳杆菌进行生理生化特性鉴定实验，结果如表1所示(“-”代表阴性)。
表1
Figure BDA0002294289060000081
根据以上生理生化实验结果结合菌落形态特征及个体形态特征结果，最终可以确定为乳杆菌。
实施例2
副干酪乳杆菌菌粉的制备。
具体方法为：挑取副干酪乳杆菌LC86单菌落，接种于50mLMRS培养基中，pH6.8，37℃厌氧培养24h，得到种子液；将种子液以2％的接种量接种至新的MRS培养基中，37℃，厌氧培养24h，得到发酵液；将发酵液以12000rpm，10min的条件离心，去除发酵上清液，分离出菌体；将菌体冷冻干燥即得到副干酪乳杆菌菌粉。
实施例3
防治糖尿病脑病的动物实验研究。
一、实验材料
1、副干酪乳杆菌LC86菌粉，活菌数1×108CFU/g，制备参照实施例2。
2、STZ溶液：称取100mg链脲佐菌素，加5mL柠檬酸缓冲液，在冰浴中溶解链脲佐菌素，并在30min内使用。
3、实验动物：Wistar大鼠，雄性，12周龄，体重230-250g。
二、糖尿病脑病大鼠模型的制备
将大鼠适应性喂养一周，利用喜暗避明的生理特性，应用Y迷宫筛选出学习记忆能力相近的大鼠用于建立糖尿病脑病模型。Wistar雄性大鼠禁食12h，按60mg/Kg腹腔注射STZ溶液。根据糖尿病大鼠的习惯造模方法，在给药的第3天和第7天两次尾部采血检测每只大鼠空腹血糖值，血糖值大于或等于11.1mmol/L，可以认为是造模成功。
三、分组及给药
将大鼠分为空白组、模型组和样品组，每组10只。未成模且注射pH4.6柠檬酸缓冲液的大鼠为空白组，将成模大鼠随机分为模型组和样品组，样品组：糖尿病脑病模型建立成功后的24h，开始灌胃副干酪乳杆菌LC86，浓度1×109CFU/天/大鼠，每天1次，连续4周时间。
四、药效评价及方法
1、血糖和体重测定
分别于0和4周末测定各组大鼠给药后2h血糖和体重变化。
2、空间学习记忆能力检测
药物干预4周后进行Morris水迷宫实验，训练动物熟悉测试的环境，次日开始进行正式训练。包括定向航行和空间探索实验。定向航行试验：每天上下午各1轮，每只大鼠每次训练120s，两次训练间隔30s，历时4天，训练时随机选择一个入水点，将大鼠面向池壁放入水中，观察记录其120s触到平台的时间(逃避潜伏期)。空间探索实验：在第五天下午撤除平台，大鼠于原平台对侧象限入水，观察其120s内在中心区停留时间百分比和通过原平台位置次数。实验设备由视频采集***、数据分析***和四个象限的环形水池构成，检测实验动物的空间学习能力和空间记忆能力。
3、脑组织的SOD酶活性、MDA含量及AchE酶活性的测定
Morris水迷宫神经行为学测试结束后，将各组大鼠处死，冰上快速取海马，匀浆，2000rpm/min离心10min，取上清。SOD活性、MDA含量和AChE活性测定按试剂盒的说明书进行。
4、iNOS活性测定
用酶联免疫试剂盒按照说明书的步骤，测定大鼠海马区上清液的iNOS浓度。
5、统计学分析
实验数据以平均值±标准差表示，采用SPSS 18.0统计软件进行单因素方差分析统计学分析，组间差异采用q检验，P＜0.05表示有统计学差异。
五、试验结果
1、血糖和体重比较
结果如表2所示，由表2数据可知：在干预开始时，模型组和样品组的血糖值明显高于空白组(P＜0.01)，而体重显著低于空白对照组(P＜0.01)。在四周干预结束后，样品组与模型组相比，血糖值有显著降低(P＜0.05)，体重有所升高(P＜0.05)。
表2
Figure BDA0002294289060000111
2、对糖尿病脑病大鼠空间学习记忆能力的比较
结果如表3所示，由表3数据可知：与空白组相比，模型组的逃避潜伏期明显延长(P＜0.01)，样品组与模型组相比，其逃避潜伏期显著缩短(P＜0.01)。与空白组相比较，模型组中心区域停留时间百分比和通过原平台位置的次数均有明显的下降(P＜0.01)，样品组与模型组相比较，其中心区域停留时间百分比和通过原平台位置的次数均有显著增加(P＜0.01)。以上结果表明副干酪乳杆菌具有明显的改善糖尿病脑病大鼠学习记忆能力的功效。
表3
Figure BDA0002294289060000121
3、脑组织中SOD(超氧化物歧化酶)活性、MDA(丙二醛)含量和AchE(乙酰胆碱酯酶)活性比较
结果如表4所示，由表4数据可知：模型组海马区中SOD活性明显低于空白组(P＜0.01)，而经过4周的干预后，样品组的SOD活性显著回升(P＜0.01)；与模型组相比，样品组的MDA含量显著降低(P＜0.01)；模型组海马区中AchE活性明显高于空白组(P＜0.01)，而经过4周的干预后，样品组的AchE活性得到显著抑制(P＜0.01)。
表4
Figure BDA0002294289060000122
4、iNOS活性比较
结果如表4所示，由表4数据可知：糖尿病脑病模型组海马中iNOS的活性明显高于空白对照组(P＜0.01)，而副干酪乳杆菌干预的样品组的iNOS活性明显降低(P＜0.01)，说明副干酪乳杆菌能够显著抑制糖尿病脑病大鼠海马区的iNOS活性。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌及其分离方法和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
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<400> 1
tcaggatgaa cgctggcggc gtgcctaata catgcaagtc gaacgagttc tcgttgatga 60
tcggtgcttg caccgagatt caacatggaa cgagtggcgg acgggtgagt aacacgtggg 120
taacctgccc ttaagtgggg gataacattt ggaaacagat gctaataccg catagatcca 180
agaaccgcat ggttcttggc tgaaagatgg cgtaagctat cgcttttgga tggacccgcg 240
gcgtattagc tagttggtga ggtaatggct caccaaggcg atgatacgta gccgaactga 300
gaggttgatc ggccacattg ggactgagac acggcccaaa ctcctacggg aggcagcagt 360
agggaatctt ccacaatgga cgcaagtctg atggagcaac gccgcgtgag tgaagaaggc 420
tttcgggtcg taaaactctg ttgttggaga agaatggtcg gcagagtaac tgttgtcggc 480
gtgacggtat ccaaccagaa agccacggct aactacgtgc cagcagccgc ggtaatacgt 540
aggtggcaag cgttatccgg atttattggg cgtaaagcga gcgcaggcgg ttttttaagt 600
ctgatgtgaa agccctcggc ttaaccgagg aagcgcatcg gaaactggga aacttgagtg 660
cagaagagga cagtggaact ccatgtgtag cggtgaaatg cgtagatata tggaagaaca 720
ccagtggcga aggcggctgt ctggtctgta actgacgctg aggctcgaaa gcatgggtag 780
cgaacaggat tagataccct ggtagtccat gccgtaaacg atgaatgcta ggtgttggag 840
ggtttccgcc cttcagtgcc gcagctaacg cattaagcat tccgcctggg gagtacgacc 900
gcaaggttga aactcaaagg aattgacggg ggcccgcaca agcggtggag catgtggttt 960
aattcgaagc aacgcgaaga accttaccag gtcttgacat cttttgatca cctgagagat 1020
caggtttccc cttcgggggc aaaatgacag gtggtgcatg gttgtcgtca gctcgtgtcg 1080
tgagatgttg ggttaagtcc cgcaacgagc gcaaccctta tgactagttg ccagcattta 1140
gttgggcact ctagtaagac tgccggtgac aaaccggagg aaggtgggga tgacgtcaaa 1200
tcatcatgcc ccttatgacc tgggctacac acgtgctaca atggatggta caacgagttg 1260
cgagaccgcg aggtcaagct aatctcttaa agccattctc agttcggact gtaggctgca 1320
actcgcctac acgaagtcgg aatcgctagt aatcgcggat cagcacgccg cggtgaatac 1380
gttcccgggc cttgtacaca ccgcccgtca caccatgaga gtttgtaaca cccgaagccg 1440
gtggcgtaac ccttttaggg agcgagccgt ctaaggtggg acaaatgatt agggtgaagt 1500
c 1501

Claims (6)

1.一种具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌，其特征在于，所述乳杆菌命名为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)LC86菌株，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2013年12月，保藏编号为CGMCC 1.12731，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.如权利要求1所述的具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌，其特征在于，所述乳杆菌是从酸奶制品中筛选得到的。
3.如权利要求1或2所述的具有防治糖尿病脑病功效的乳杆菌在制备具有防治糖尿病脑病功效的药物中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述乳杆菌的活菌数不低于1×107CFU/g。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药物还包括药学上可接受的辅料。
6.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、喷雾剂、膜剂、栓剂、滴鼻剂或滴丸剂。
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