CN110755319A - ***花叶发酵方法、***花叶发酵提取物和化妆品 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及发酵技术领域，具体而言，涉及***花叶发酵方法、***花叶发酵提取物和化妆品。本发明的***花叶发酵方法包括在***花叶浆液中添加发酵菌液进行发酵。本发明的***花叶发酵方法制备的***花叶发酵提取物可以用于制备化妆品。本发明的***花叶发酵方法通过发酵获取更多、更小的活性分子成分，以使制得的发酵提取物抗菌效果更佳，含有该发酵提取物的化妆品抗菌效果更佳。

Description

***花叶发酵方法、***花叶发酵提取物和化妆品
技术领域
本发明涉及发酵技术领域，具体而言，涉及***花叶发酵方法、***花叶发酵提取物和化妆品。
背景技术
工业***又称汉麻(hemp)，是***科(Cannabinaceae)***属(Cannabis)1年生草本植物，具有较为广泛的应用。
相关技术提供的制备***花叶提取物的方法，难以充分发挥活性物质的抗菌效果。
发明内容
本发明的目的在于提供***花叶发酵方法、***花叶发酵提取物和化妆品，其能够通过发酵获取更多、更小的活性分子成分，以使制得的发酵提取物抗菌效果更佳，含有该发酵提取物的化妆品抗菌效果更佳。
本发明是这样实现的：
第一方面，本发明实施例提供一种***花叶发酵方法，包括：在***花叶浆液中添加发酵菌液进行发酵。
在可选的实施方式中，发酵菌液包括处于对数期的液体发酵菌液。
在可选的实施方式中，发酵菌液的制备方法包括：将菌种接种于酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，在温度为25-32℃条件下培养。
在可选的实施方式中，酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，按照重量份计，包括：酵母浸粉1.0-1.5％，蛋白胨2.2-2.5％，葡萄糖2.5-2.6％。
在可选的实施方式中，发酵菌液包括：黄酒酵母发酵菌液、清酒酵母发酵菌液、果酒酵母发酵菌液、食醋酿造酵母发酵菌液、乳杆菌发酵菌液、双歧杆菌发酵菌液和乳球菌发酵菌液中的至少一种。
在可选的实施方式中，***花叶浆液的制备方法包括：将重量比为1:6-10的未干燥的***花叶和水混合，打浆。
在可选的实施方式中，***花叶浆液的pH为6-8。
在可选的实施方式中，还包括：发酵后，在离心半径为8-10cm，转速为11000-13000r/min条件下，离心。
第二方面，本发明实施例提供一种***花叶发酵提取物，其是由前述实施方式任一项的***花叶发酵方法制备的。
第三方面，本发明实施例提供一种化妆品，包括前述实施方式的***花叶发酵提取物。
本发明实施例的***花叶发酵方法的有益效果包括：本发明实施例提供的***花叶发酵方法，通过在***花叶浆液中添加发酵菌液进行发酵，能够充分的将***花叶中的活性物质提取出来，特别是一些小分子成分；这样一来，通过发酵***花叶浆液能够得到抗菌效果更佳的发酵提取物。
本发明实施例的***花叶发酵提取物的有益效果包括：本发明实施例提供的***花叶发酵提取物通过上述的发酵方法制备，其具有更佳的抗菌效果。
本发明实施例的化妆品的有益效果包括：本发明实施例提供的化妆品包括上述的***花叶发酵提取物，其具有更佳的抗菌效果。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下对本发明的***花叶发酵方法、***花叶发酵提取物和化妆品作进一步的详细描述。
本发明提供的***花叶发酵方法包括：在***花叶浆液中添加发酵菌液进行发酵。
通过在***花叶浆液中添加发酵菌液进行发酵，可以促使***花叶中的活性物质充分的释放出来，特别是一些小分子成分；这样一来，通过发酵***花叶浆液能够得到抗菌效果更佳的发酵提取物。
上述***花叶浆液的制备方法包括：将重量比为1:6-10的未干燥的***花叶和水混合，打浆。在打浆后，在110-125℃温度条件下高压灭菌15-20min；然后再将浆液的pH调节至6-8，即可完成***花叶浆液的制备。
上述未干燥的***花叶可以是指：新鲜的***花叶；这样一来，采用新鲜的***花叶制备浆液，能减少***花叶中萜烯类和***二酚等活性物质的损耗。
本发明中灭菌***花叶浆液时，在高温下短时快速灭菌，能够进一步减少萜烯类和***二酚等活性物质的损耗。
将***花叶浆液的pH调节至6-8，有助于后续添加于***花叶浆液中的菌类的生长和发酵过程顺利开展。
本发明的发酵菌液的制备方法包括：将菌种接种于液态的酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，在温度为25-32℃条件下培养。
进一步地，发酵菌液的培养可以在摇床中进行。
当按照上述发酵方法进行的液态发酵达到对数期时，可以将该处于对数期的液体发酵菌液加入***花叶浆液中作为发酵菌液。采用处于对数期的液态发酵菌液进行***花叶浆液的发酵，一方面能够使菌体能够快速的在***花叶浆液中增殖，另一方面能够快速的开展发酵过程。
需要说明的是，只要液态发酵中的菌种处于对数期均可以用于接种于***花叶浆液中作为发酵菌液，菌液中菌体的具体浓度不做限定，即各种浓度皆可。
上述酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，按照重量份计，包括：酵母浸粉1.0-1.5％，蛋白胨2.2-2.5％，葡萄糖2.5-2.6％。
需要说明的是，上述酵母浸出粉胨葡萄糖培养基在配制后，可以采用常规手段进行灭菌处理。
本发明中使用的发酵菌液包括：黄酒酵母发酵菌液、清酒酵母发酵菌液、果酒酵母发酵菌液、食醋酿造酵母发酵菌液、乳杆菌发酵菌液、双歧杆菌发酵菌液和乳球菌发酵菌液中的至少一种；即本发明中使用的菌种包括：黄酒酵母、清酒酵母、果酒酵母、食醋酿造酵母、乳杆菌、双歧杆菌和乳球菌中的至少一种。
需要说明的是，将菌种接种于液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基的方法和相关技术类似，例如使用接种环接种即可。
本发明的***花叶发酵方法中，***花叶浆液可以加入重量比为3倍量配置好的发酵菌液。
发酵时，可以在摇床上控制温度为25-36℃，发酵的时间大致可以是20-65h。
发酵完成后，可以在离心半径为8-10cm，转速为11000-13000r/min条件下，离心，收集到的上清液即为***花叶发酵提取物。
本发明提供的***花叶发酵方法制备出的***花叶发酵提取物可以直接作为面膜或精华液或爽肤水的成品；将上述制备的***花叶发酵提取物直接作为化妆品可以在一定程度上节约生产成本，提高产品的质量，最大化的简化了生产步骤，能够实现大量生产、工业化生产，并能够充分保证产品质量的稳定性，而且这种天然物质作为化妆品还不容易给用户的皮肤造成负担。
当将上述***花叶发酵提取物直接作为化妆品是，可以在10万级净化车间进行灌装后再经过灭菌处理，灭菌条件为：110-125℃，20-25min高压高温灭菌。
本发明提供的化妆品不仅仅限制于上述的面膜、精华液或爽肤水，还可以用***花叶发酵提取物制备凝胶、膏剂等，在此不作具体限定。含有本发明提供的***花叶发酵提取物的化妆品易吸收，效果佳。
以下结合实施例对本发明的***花叶发酵方法、***花叶发酵提取物和化妆品作进一步的详细描述。
实施例1
制备液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，按照重量比计，包括：酵母浸粉1.0％，蛋白胨2.2％，葡萄糖2.5％。
将黄酒酵母接种于灭菌后的液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，在25℃摇床中振荡培养，以对数期的发酵液作为后续发酵的发酵菌液。
将新鲜的***花叶和水按照重量比为1:8制备成***花叶浆液，在110℃条件下灭菌20min，再调节pH值为6。
加入***花叶浆液重量比为3倍量的发酵菌液，在温度为25℃摇床中发酵65h；将发酵好的发酵液在11000r/min转速，离心半径为10cm条件下离心21min，收集上清液，即可制得***花叶发酵提取物。
将***花叶发酵提取物在10万级净化车间进行灌装后再经过灭菌处理，灭菌条件为：110℃，25min高压高温灭菌；即可制得一种化妆品。
实施例2
制备液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，按照重量比计，包括：酵母浸粉1.5％，蛋白胨2.5％，葡萄糖2.6％。
将清酒酵母和果酒酵母共同接种于灭菌后的液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，在32℃摇床中振荡培养，以对数期的发酵液作为后续发酵的发酵菌液。
将新鲜的***花叶和水按照重量比为1:6制备成***花叶浆液，在125℃条件下灭菌15min，再调节pH值为8。
加入***花叶浆液重量比为3倍量的发酵菌液，在温度为36℃摇床中发酵20h；将发酵好的发酵液在13000r/min转速，离心半径为8cm条件下离心19min，收集上清液，即可制得***花叶发酵提取物。
将***花叶发酵提取物在10万级净化车间进行灌装后再经过灭菌处理，灭菌条件为：125℃，20min高压高温灭菌；即可制得一种化妆品。
实施例3
制备液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，按照重量比计，包括：酵母浸粉1.5％，蛋白胨2.4％，葡萄糖2.5％。
将食醋酿造酵母和乳酸杆菌共同接种于灭菌后的液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，在30℃摇床中振荡培养，以对数期的发酵液作为后续发酵的发酵菌液。
将新鲜的***花叶和水按照重量比为1:10制备成***花叶浆液，在120℃条件下灭菌18min，再调节pH值为7。
加入***花叶浆液重量比为3倍量的发酵菌液，在温度为32℃摇床中发酵40h；将发酵好的发酵液在12000r/min转速，离心半径为9cm条件下离心20min，收集上清液，即可制得***花叶发酵提取物。
将***花叶发酵提取物在10万级净化车间进行灌装后再经过灭菌处理，灭菌条件为：120℃，22min高压高温灭菌；即可制得一种化妆品。
实施例4
制备液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，按照重量比计，包括：酵母浸粉1.2％，蛋白胨2.2％，葡萄糖2.6％。
将双歧杆菌和乳球菌共同接种于灭菌后的液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，在27℃摇床中振荡培养，以对数期的发酵液作为后续发酵的发酵菌液。
将新鲜的***花叶和水按照重量比为1:9制备成***花叶浆液，在110℃条件下灭菌18min，再调节pH值为6。
加入***花叶浆液重量比为3倍量的发酵菌液，在温度为32℃摇床中发酵35h；将发酵好的发酵液在12000r/min转速，离心半径为10cm条件下离心20min，收集上清液，即可制得***花叶发酵提取物。
将***花叶发酵提取物在10万级净化车间进行灌装后再经过灭菌处理，灭菌条件为：110℃，25min高压高温灭菌；即可制得一种化妆品。
实施例5
制备液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，按照重量比计，包括：酵母浸粉1.0％，蛋白胨2.2％，葡萄糖2.5％。
将黄酒酵母接种于灭菌后的液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，在25℃摇床中振荡培养，以对数期的发酵液作为后续发酵的发酵菌液。
将干燥的***花叶和水按照重量比为1:20制备成***花叶浆液，在110℃条件下灭菌20min，再调节pH值为6。
加入***花叶浆液重量比为3倍量的发酵菌液，在温度为25℃摇床中发酵65h；将发酵好的发酵液在11000r/min转速，离心半径为10cm条件下离心21min，收集上清液，即可制得***花叶发酵提取物。
将***花叶发酵提取物在10万级净化车间进行灌装后再经过灭菌处理，灭菌条件为：110℃，25min高压高温灭菌；即可制得一种化妆品。
实施例6
制备液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，按照重量比计，包括：酵母浸粉1.0％，蛋白胨2.2％，葡萄糖2.5％。
将黄酒酵母接种于灭菌后的液态酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，在25℃摇床中振荡培养，以还未到对数期的发酵液作为后续发酵的发酵菌液。
将新鲜的***花叶和水按照重量比为1:8制备成***花叶浆液，在110℃条件下灭菌20min，再调节pH值为6。
加入***花叶浆液重量比为3倍量的发酵菌液，在温度为25℃摇床中发酵65h；将发酵好的发酵液在11000r/min转速，离心半径为10cm条件下离心21min，收集上清液，即可制得***花叶发酵提取物。
将***花叶发酵提取物在10万级净化车间进行灌装后再经过灭菌处理，灭菌条件为：110℃，25min高压高温灭菌；即可制得一种化妆品。
一、抗菌性能检测：
1)对实施例1提供的***花叶发酵提取物进行抗菌实验，实验单位为：广东药科大学。
病原学分析认为痤疮的严重程度与痤疮丙酸杆菌的增殖有关，因此，目前抗痤疮药物活性评价主要考察对痤疮丙酸杆菌的抑菌作用；本次测试所用菌株痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)，广东省微生物研究所提供。该测试涉及的试剂还包括：三氯生DP300(麦克林)。
主要设备：KQ3200DA超声波清洗器(昆山市超市仪器有限公司)；LDZX-50KBS高压灭菌锅(上海申安医疗器械厂)；SQP万分之一电子秤(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司)。
测试的主要方法包括：
取供试物(实施例1提供的***花叶发酵提取物)，用灭菌生理盐水溶解至一定浓度(1倍)，再取其稀释备用。取新鲜菌液1mL分别接种于营养肉汤培养基中，加入上述不同浓度供试物溶液，置普通培养箱37℃培养72h，观察结果。另设空白对照组(生理盐水)、阳性对照组DP300。
参照2015版《中华人民共和国药典》中的抑制微生物生长的内容设定，将抑菌功效以抑菌圈大小分为4个等级。见表1。
表1抑制痤疮丙酸杆菌功效评价标准
Figure BDA0002245123310000081
最低抑菌浓度结果判定：培养基混浊者表示有菌生长，药液无抑菌作用；培养基透明者表示无菌生长，药液有抑菌作用。最低抑菌浓度(minimalinhibitory concentration，MIC)即为抑制细菌生长的药液最大稀释倍数时的浓度。
实验检测结果见表2。
表2***花叶发酵提取物对痤疮丙酸杆菌的MIC的测定
Figure BDA0002245123310000091
根据表2的结果可知，加入生理盐水的平皿的菌落生长面积为100％，而加入0.1％DP300的阳性对照组的菌落生长面积为0.0％，这说明溶剂生理盐水对***花叶发酵提取物的抑菌测试结果无干扰，且本实验结果有效。由表2中的数据可知，***花叶发酵提取物在6.25％、12.5％、25％和50％的浓度下，对痤疮丙酸杆菌菌落生长面积有抑制作用。由此可知，***花叶发酵提取物对痤疮丙酸杆菌的抑制作用明显。
2)对实施例1-6的***花发酵提取物的抗菌性检测，检测方式和1)类似，将实施例1-6提供的***花发酵提取物的浓度统一稀释成25％和50％两种，进行测试。结果见表3。
表3各组***花叶发酵提取物对痤疮丙酸杆菌的MIC的测定
Figure BDA0002245123310000101
根据表3的结果可知，本发明提供的制备方法制备的***花叶发酵提取物具有良好的抗菌性能。
其中，实施例1-4的测试结果优于实施例5和6的测试结果，由此可知，采用新鲜的***花叶进行发酵加工制得的***花叶发酵提取物的抗菌效果优于采用干燥的***花叶制备的发酵提取物；将处于对数期的菌液作为发酵菌液添加于***花叶浆液中进行发酵的制得发酵提取物的抗菌效果更佳。
综上所述，本发明实施例提供的***花叶发酵方法，通过在***花叶浆液中添加发酵菌液进行发酵，能够充分的将***花叶中的活性物质提取出来，特别是一些小分子成分；这样一来，通过发酵***花叶浆液能够得到抗菌效果更佳的发酵提取物。
本发明实施例提供的***花叶发酵提取物通过上述的发酵方法制备，其具有更佳的抗菌效果。
本发明实施例提供的化妆品包括上述的***花叶发酵提取物，其具有更佳的抗菌效果。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种***花叶发酵方法，其特征在于，包括：在***花叶浆液中添加发酵菌液进行发酵。
2.根据权利要求1所述的***花叶发酵方法，其特征在于，所述发酵菌液包括处于对数期的液体发酵菌液。
3.根据权利要求1所述的***花叶发酵方法，其特征在于，所述发酵菌液的制备方法包括：将菌种接种于酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，在温度为25-32℃条件下培养。
4.根据权利要求3所述的***花叶发酵方法，其特征在于，所述酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，按照重量份计，包括：酵母浸粉1.0-1.5％，蛋白胨2.2-2.5％，葡萄糖2.5-2.6％。
5.根据权利要求1所述的***花叶发酵方法，其特征在于，所述发酵菌液包括：黄酒酵母发酵菌液、清酒酵母发酵菌液、果酒酵母发酵菌液、食醋酿造酵母发酵菌液、乳杆菌发酵菌液、双歧杆菌发酵菌液和乳球菌发酵菌液中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的***花叶发酵方法，其特征在于，所述***花叶浆液的制备方法包括：将重量比为1:6-10的未干燥的***花叶和水混合，打浆。
7.根据权利要求1所述的***花叶发酵方法，其特征在于，所述***花叶浆液的pH为6-8。
8.根据权利要求1所述的***花叶发酵方法，其特征在于，还包括：发酵后，在离心半径为8-10cm，转速为11000-13000r/min条件下，离心。
9.一种***花叶发酵提取物，其特征在于，其是由权利要求1-8任一项所述的***花叶发酵方法制备的。
10.一种化妆品，其特征在于，包括权利要求9所述的***花叶发酵提取物。
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