CN110720452A - 一种优化病理大体标本保存的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种优化病理大体标本保存的方法,包括以下步骤:(1)将保存于传统固定液中的标本取出,置于10%中性***中浸泡一周;(2)将标本取出,自来水流水冲洗过夜,以去除组织中的甲醛;(3)将标本置于盛有浓度为80%乙醇的容器中复色6‑8小时;(4)将标本从步骤(3)的容器中取出,置于浓度为95%的乙醇中浸泡两小时;(5)置于20%甘油乙酸钠溶液中浸泡一周,使得标本中的乙醇溶出,分离出标本中的沉淀物;(6)取出标本,置于注有新配制的20%甘油乙酸钠保存液的亚克力容器内,标本长期保存。本发明既提高了液体折光率,满足了数码拍摄的需要,又保证了保存液具有较好的流动性和渗透性,避免了大量气泡无法溢出的情况发生。
Description
技术领域
本发明属于标本保存技术领域,涉及一种优化病理大体标本保存的方法,具体涉及优化脂质含量低的病理大体标本保存的方法。
背景技术
普通的病理大体标本保存液一般使用10%***(4%甲醛溶液),存在保存时间过久后标本褪色,含血量高的组织颜色变得晦暗,以及甲醛气体易挥发,造成环境污染,对人体有害等缺点。
现有环保固定液一般采用乙酸钠或乙酸钾作为防腐剂,添加不同浓度的甘油以增加液体的折光率,有利于将标本保存于亚克力容器内进行数码摄影。但浓度过高的甘油(40%)过于粘稠,难以渗透入组织,并且使得保存液中的气泡难以溢出,影响标本的观察和拍摄效果。
发明内容
本发明提供一种化病理大体标本保存的方法,以解决背景技术中所提出的问题。
为解决上述技术问题,本发明的实施例提供一种优化病理大体标本保存的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将保存于传统固定液中的标本取出,置于10%中性***中浸泡一周;
(2)将标本取出,自来水流水冲洗过夜,以去除组织中的甲醛;
(3)将标本置于盛有浓度为80%乙醇的容器中复色6-8小时;
(4)将标本从步骤(3)的容器中取出,置于浓度为95%的乙醇中浸泡两小时;
(5)将标本取出,置于20%甘油乙酸钠溶液中浸泡一周,使得标本中的乙醇溶出,分离出标本中的沉淀物;
(6)取出标本,置于最终保存的亚克力容器内,亚克力容器注入有新配制的20%甘油乙酸钠保存液,标本长期保存。
进一步的,所述步骤(1)中所使用的10%中性***通过将***原液用PBS稀释十倍制得。
其中,所述***原液设置为浓度40%的甲醛溶液。
其中,磷酸盐缓冲液(PBS)由以下配方制得,配方如下:
进一步的,所述步骤(5)或步骤(6)中所述的20%甘油乙酸钠溶液,由以下配方制得,配方如下:
进一步的,一种优化病理大体标本保存的方法还包括步骤(7),所述步骤(7)包括以下步骤:每隔1-3个月更换20%甘油乙酸钠保存液。
本发明的上述技术方案的有益效果如下:本发明的一种优化病理大体标本保存的方法,主要采用三水乙酸钠、甘油作为保存液的主要成分,解决了传统病理大体标本保存中大量使用甲醛溶液,造成环境污染,危害人体健康,且长期保存后标本色泽发暗的问题;同时,本发明改良了目前广泛采用的40%甘油乙酸钠保存液的配方,将甘油浓度降低至20%,既提高了液体折光率,满足了数码拍摄的需要,又保证了保存液具有较好的流动性和渗透性,避免了大量气泡无法溢出的情况发生。
附图说明
图1为本发明的实施例中亚克力容器放置标本的示意图。
图2为本发明的实施例中亚克力容器中所采用螺栓和垫圈的结构示意图。
图3为本发明的实施例中所采用的自制灌注器的结构示意图。
图4为本发明的实施例1中处理前的溃疡型肠结核标本图。
图5为本发明的实施例1中经优化病理大体标本保存的方法处理后的溃疡型肠结核标本图。
图6为本发明的实施例2中处理前的心脏肥大标本图。
图7为本发明的实施例2中经优化病理大体标本保存的方法处理后心脏肥大标本图。
图8为本发明的实施例3中处理前的肾盂移行细胞癌标本图。
图9为本发明的实施例3中采用40%甘油乙酸钠固定液处理后的肾盂移行细胞癌标本图。
图10为本发明的实施例3中经优化病理大体标本保存的方法处理后肾盂移行细胞癌标本图。
具体实施方式
为使本发明要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚,下面将结合具体实施例进行详细描述。
一种优化病理大体标本保存的方法,包括以下步骤:
(1)将保存于传统固定液中的标本取出,置于10%中性***中浸泡一周。
所使用的10%中性***通过将***原液用PBS稀释十倍制得。
其中,所述***原液设置为浓度40%的甲醛溶液。
其中,磷酸盐缓冲液(PBS)由以下配方制得,配方如下:
(2)将标本取出,自来水流水冲洗过夜,以去除组织中的甲醛。去除组织中的甲醛,以避免后续步骤中保存液的浑浊。
(3)将标本置于盛有浓度为80%乙醇的容器中复色6-8小时。乙醇复色利用了乙醇的还原性使得血红蛋白回复正常色泽,复色的具体时间可根据复色效果而定。
(4)将标本从步骤(3)的容器中取出,置于浓度为95%的乙醇中浸泡两小时。
(5)将标本取出,置于20%甘油乙酸钠溶液中浸泡一周,使得标本中的乙醇溶出,分离出标本中的沉淀物。步骤(3)、(4)、(5)中所采用浸泡容器应当避免采用亚克力容器,可采用普通玻璃容器,以防止乙醇分子进入亚克力容器的PMMA分子链,导致PMMA溶胀,出现开裂的现象。
(6)取出标本,置于最终保存的亚克力(聚甲基丙烯酸甲酯,PMMA)容器内,亚克力容器注入有新配制的20%甘油乙酸钠保存液,标本长期保存。优选的,亚克力容器选择白色透明的容器。
所述步骤(5)或步骤(6)中所采用的20%甘油乙酸钠溶液,由以下配方制得,配方如下:
优选的,在20%甘油乙酸钠溶液中加入1ml***原液,可以防止保存液中的真菌生长。
在本发明中,步骤(6)所采用的亚克力容器如图1所示,步骤(6)中将标本置入亚克力容器的具体过程如下:将亚克力容器清洗晾干,置入标本后注入保存液没过标本,在容器上缘均匀涂上亚克力粘合剂(氯仿溶解聚甲基丙烯酸甲酯),将容器上盖粘上晾干过夜。容器上盖留两小孔,并通过螺栓和垫圈(见图2)封闭小孔。通过打开小孔,使用自制的灌注器(见图3)进行保存液的定期更换。
(7)每隔1-3个月更换20%甘油乙酸钠保存液。定期更换保存液可以有效解决部分标本含血量较高,保存一段时间后会使保存液呈现逐渐加深的黄色的问题。
本发明主要针对脂质含量低的标本,脂质含量高的标本由于脂质溶出而使保存液变浑浊。由于热胀会使保存液自小孔内溢出,故保存液不易加满。
实施例1
溃疡型肠结核标本
溃疡型肠结核原标本长期浸泡于10%***固定液中,标本色泽晦暗,如图4所示,经本发明的优化保存方法处理及保存后,标本回复接近新鲜标本的色泽,如图5所示。
实施例2
心脏肥大标本
心脏肥大原标本长期浸泡于10%***固定液中,标本色泽晦暗,如图6所示,经本发明处理后,标本回复接近新鲜标本的色泽,如图7所示。
实施例3
肾盂移行细胞癌癌标本
肾盂移行细胞癌癌原标本长期浸泡于10%***固定液中,标本色泽晦暗,如图8所示,经本发明处理后,标本回复接近新鲜标本的色泽。用40%甘油乙酸钠保存液后,容器内出现大量气泡,且一周后气泡任未消失,如图9所示;后改用本发明中使用的20%甘油乙酸钠,容器内气泡几乎完全消失,如图10所示,20%甘油乙酸钠保存液具有较好的流动性和渗透性,避免了大量气泡无法溢出的情况发生。
将标本图片转化为8通道灰度图片后,利用图像分析软件ImageJ对各张图片进行图像分析,得出各张图片的标本区域的像素浓度(integrated density,IntDen),计算方法为:ΔIntDen = IntDen标本- IntDen背景,该数值反映了标本的透亮度,在更换本发明使用的保存液后,标本的透亮度均有所增加,具体数值如下表1所示:
表1 图4-图10中标本透亮度的具体数值
以上所述是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明所述原理的前提下,还可以作出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种优化病理大体标本保存的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将保存于传统固定液中的标本取出,置于10%中性***中浸泡一周;
(2)将标本取出,自来水流水冲洗过夜,以去除组织中的甲醛;
(3)将标本置于盛有浓度为80%乙醇的容器中复色6-8小时;
(4)将标本从步骤(3)的容器中取出,置于浓度为95%的乙醇中浸泡两小时;
(5)将标本取出,置于20%甘油乙酸钠溶液中浸泡一周,使得标本中的乙醇溶出,分离出标本中的沉淀物;
(6)取出标本,置于最终保存的亚克力容器内,亚克力容器注入有新配制的20%甘油乙酸钠保存液,标本长期保存。
2.根据权利要求1所述的一种优化病理大体标本保存的方法,其特征在于,所述步骤(1)中所使用的10%中性***通过将***原液用PBS稀释十倍制得。
3.根据权利要求2所述的一种优化病理大体标本保存的方法,其特征在于,所述***原液设置为浓度40%的甲醛溶液。
5.根据权利要求1所述的一种优化病理大体标本保存的方法,其特征在于,所述步骤(5)或步骤(6)中所述的20%甘油乙酸钠溶液,由以下配方制得,配方如下:
。
6.根据权利要求1所述的一种优化病理大体标本保存的方法,其特征在于,还包括步骤(7),所述步骤(7)包括以下步骤:每隔1-3个月更换20%甘油乙酸钠保存液。
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