CN110887719A - 一种组织病理学的组织样本的处理方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种组织病理学的组织样本的处理方法，包括以下步骤：(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；(2)冲洗；(3)脱水；(4)透明；(5)浸蜡包埋；(6)切片、染色：脱蜡，将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理2‑3min，然后采用苏木素染液处理5‑10min；苏木素助染液的组分：苏木素、硫酸铝、高锰酸钾、柠檬酸、壬基酚聚氧乙烯醚、水；苏木素染液的组分：苏木素份、十二水硫酸铝钾份、高锰酸钾份、醋酸、壬基酚聚氧乙烯醚、丙三醇、无水乙醇、水。本发明处理方法易于操作，针对组织样本切片完整度高，染色效果好，染色明显，对比清晰，细胞层次分明。
Description
技术领域
本发明涉及组织病理学样本处理技术领域，具体涉及一种组织病理学的组织样本的处理方法。
背景技术
新鲜样本离体后，将发生自溶和(或)腐败，使其结构破坏，同时在微观上，细胞退化、自溶。病理组织学或称组织病理学，是研究人体患病时各***器官组织学变化的一门病理学分支学科。其主要研究手段是将离体组织(或细胞)经处理后进行切片(或涂片)、染色后进行光学显微镜观察，用观察结果诊断疾病。因此，病理组织学不仅要求离体样本在宏观方面(如色泽、体积、软硬度等)尽量接近离体前状态，更要求在细胞水平的微观方面要尽量接近活体状态。由此不难看出，用各种方法使组织样本尽量保持其离体前的宏观或微观状态，是此学科诊断和研究的前提和关键。
组织病理学诊断是临床与病理医师之间进行的一种特殊形式的会诊，只有较为确切的病理学诊断才能对临床医师的诊疗方案具有指导意义。由于组织病理学的组织样本易受挤压，且在实际工作中常常需要进行多道染色，给病理诊断带来较大困难和风险。因此，开发操作方便的的处理方法，并处理得到染色效果好的制片，对于组织病理学诊断具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种组织病理学的组织样本的处理方法，易于操作，针对组织样本切片完整度高，染色效果好，染色明显，对比清晰，细胞层次分明。
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：
一种组织病理学的组织样本的处理方法，包括以下步骤：
(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；
固定剂I中由以下组分混合制成：2.5％戊二醛50mL、2％多聚甲醛50mL；
固定剂Ⅱ由以下组分混合制成：40％甲醛10mL，蒸馏水90mL，NaH2PO4·H2O 0.5g，Na2HPO40.5g；
(2)冲洗：使用流水缓慢冲洗；
(3)脱水：梯度乙醇脱水：75％乙醇30min、80％乙醇30min、85％乙醇Ⅰ30min、85％乙醇Ⅱ60min、85％乙醇Ⅲ60min、95％乙醇Ⅰ40min、95％乙醇Ⅱ40min、无水乙醇Ⅰ30min、无水乙醇Ⅱ30min；
(4)透明：选择TO透明剂进行透明，TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；表示TO透明剂Ⅰ、TO透明剂Ⅱ、TO透明剂Ⅲ各处理30min；
(5)浸蜡包埋：64-65℃下，采用石蜡浸蜡，石蜡Ⅰ-IV各30min；其中石蜡Ⅰ-IV各30min表示石蜡Ⅰ、石蜡Ⅱ、石蜡Ⅲ、石蜡IV各处理30min；
(6)切片、染色：切片后进行染色；染色过程中先对切片进行脱蜡，得脱蜡切片；
将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理2-3min，然后采用苏木素染液处理5-10min；水洗后采用0.5％盐酸酒精分色5-10s，然后进行水洗蓝化；
然后依次置于70％乙醇5min、80％乙醇5min，再采用盐酸化伊红溶液处理20-35s，再依次置于95％乙醇Ⅰ3min、95％乙醇Ⅱ4min、无水乙醇Ⅰ3min、无水乙醇Ⅱ4min、二甲苯+无水乙醇(体积比1：1)5min、二甲苯Ⅰ4min、二甲苯Ⅱ6min；最后采用中性树胶封片；
所述苏木素助染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、硫酸铝10-16份、高锰酸钾0.3-0.5份、柠檬酸20-30份、壬基酚聚氧乙烯醚6-12份、水1500-2000份；
所述苏木素染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、十二水硫酸铝钾60-80份、高锰酸钾0.4-0.7份、醋酸15-25份、壬基酚聚氧乙烯醚6-12份、丙三醇100-120份、无水乙醇30-50份、水1500-2000份。
优选地，步骤(1)中，固定剂I在4-6℃下进行固定，固定时间为30min。
优选地，步骤(1)中，固定剂Ⅱ在常温下进行固定，固定时间为30min。
优选地，步骤(4)中，透明处理的温度为40-45℃。
优选地，步骤(5)中，石蜡熔点为52-54℃。
优选地，所述苏木素助染液由以下质量份数的组分制成：苏木素10份、硫酸铝12份、高锰酸钾0.35份、柠檬酸28份、壬基酚聚氧乙烯醚9份、水1800份。
优选地，所述苏木素染液由以下质量份数的组分制成：苏木素10份、十二水硫酸铝钾72份、高锰酸钾0.5份、醋酸18份、壬基酚聚氧乙烯醚8.5份、丙三醇105份、无水乙醇45份、水1800份。
本发明盐酸化伊红溶液由以下方法制备得到：将1份水溶性伊红Y粉剂溶于200份的蒸馏水中，充分搅拌完全溶解；然后加浓盐酸4份，充分搅拌，静置过夜后过滤；将沉淀物干燥后加95％乙醇，配成饱和液；使用时使用95％乙醇稀释，即得。
本发明的有益效果是：
(1)固定环节中，本发明采用固定剂I、固定剂Ⅱ依次对组织样本进行处理，两种固剂进行配合，固定作用好，使细胞形态保存良好，层次分明，并可有效地保存细胞和组织成分，为后期染色时组织结构清晰打好基础。
(2)本发明在进行乙醇脱水时，合理设置各阶段的乙醇溶度以及脱水时间，通过合理延长组织在低浓度乙醇中的脱水时间，使组织硬度保持适中，后期切片效果好。
(3)固定、冲洗、脱水、浸蜡包埋各步骤配合效果好，可使切片完整度高，且无破碎、无皱缩，后期染色后对比清晰，细胞间无挤压、无裂隙，整体质量高。
(4)在染色时，依次采用苏木素助染液、苏木素染液进行染色，结合后续的盐酸化伊红溶液染色，使整体染色效果好，染色明显，对比清晰，染色均匀度高、稳定性高，有效减少细胞质被异常染成蓝色，可保持组织细胞内的颜色稳定时间长。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种组织病理学的组织样本的处理方法，包括以下步骤：
(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；
固定剂I中由以下组分混合制成：2.5％戊二醛50mL、2％多聚甲醛50mL；固定剂I在4℃下进行固定，固定时间为30min；
固定剂Ⅱ由以下组分混合制成：40％甲醛10mL，蒸馏水90mL，NaH2PO4·H2O 0.5g，Na2HPO40.5g；固定剂Ⅱ在常温下进行固定，固定时间为30min。
(2)冲洗：使用流水缓慢冲洗。
(3)脱水：梯度乙醇脱水：75％乙醇30min、80％乙醇30min、85％乙醇Ⅰ30min、85％乙醇Ⅱ60min、85％乙醇Ⅲ60min、95％乙醇Ⅰ40min、95％乙醇Ⅱ40min、无水乙醇Ⅰ30min、无水乙醇Ⅱ30min。
(4)透明：选择TO透明剂进行透明，TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；透明处理的温度为42℃。
(5)浸蜡包埋：65℃下，采用石蜡浸蜡，石蜡熔点为54℃，石蜡Ⅰ-IV各30min。
(6)切片、染色：切片后进行染色；染色过程中先对切片进行脱蜡，得脱蜡切片；
将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理3min，然后采用苏木素染液处理7min；水洗后采用0.5％盐酸酒精分色8s，然后进行水洗蓝化；
然后依次置于70％乙醇5min、80％乙醇5min，再采用盐酸化伊红溶液处理30s，再依次置于95％乙醇Ⅰ3min、95％乙醇Ⅱ4min、无水乙醇Ⅰ3min、无水乙醇Ⅱ4min、二甲苯+无水乙醇5min、二甲苯Ⅰ4min、二甲苯Ⅱ6min；最后采用中性树胶封片。
其中苏木素助染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、硫酸铝12份、高锰酸钾0.35份、柠檬酸28份、壬基酚聚氧乙烯醚9份、水1800份。
苏木素染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、十二水硫酸铝钾72份、高锰酸钾0.5份、醋酸18份、壬基酚聚氧乙烯醚8.5份、丙三醇105份、无水乙醇45份、水1800份。
盐酸化伊红溶液由以下方法制备得到：将1份水溶性伊红Y粉剂溶于200份的蒸馏水中，充分搅拌完全溶解；然后加浓盐酸4份，充分搅拌，静置过夜后过滤；将沉淀物干燥后加95％乙醇，配成饱和液；使用时使用95％乙醇稀释，即得。
实施例2：
一种组织病理学的组织样本的处理方法，包括以下步骤：
(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；
固定剂I中由以下组分混合制成：2.5％戊二醛50mL、2％多聚甲醛50mL；固定剂I在6℃下进行固定，固定时间为30min；
固定剂Ⅱ由以下组分混合制成：40％甲醛10mL，蒸馏水90mL，NaH2PO4·H2O 0.5g，Na2HPO40.5g；固定剂Ⅱ在常温下进行固定，固定时间为30min。
(2)冲洗：使用流水缓慢冲洗。
(3)脱水：梯度乙醇脱水：75％乙醇30min、80％乙醇30min、85％乙醇Ⅰ30min、85％乙醇Ⅱ60min、85％乙醇Ⅲ60min、95％乙醇Ⅰ40min、95％乙醇Ⅱ40min、无水乙醇Ⅰ30min、无水乙醇Ⅱ30min。
(4)透明：选择TO透明剂进行透明，TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；透明处理的温度为45℃。
(5)浸蜡包埋：65℃下，采用石蜡浸蜡，石蜡熔点为54℃，石蜡Ⅰ-IV各30min。
(6)切片、染色：切片后进行染色；染色过程中先对切片进行脱蜡，得脱蜡切片；
将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理2min，然后采用苏木素染液处理8min；水洗后采用0.5％盐酸酒精分色6s，然后进行水洗蓝化；
然后依次置于70％乙醇5min、80％乙醇5min，再采用盐酸化伊红溶液处理20-35s，再依次置于95％乙醇Ⅰ3min、95％乙醇Ⅱ4min、无水乙醇Ⅰ3min、无水乙醇Ⅱ4min、二甲苯+无水乙醇5min、二甲苯Ⅰ4min、二甲苯Ⅱ6min；最后采用中性树胶封片。
其中苏木素助染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、硫酸铝13份、高锰酸钾0.5份、柠檬酸25份、壬基酚聚氧乙烯醚10份、水2000份。
苏木素染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、十二水硫酸铝钾65份、高锰酸钾0.7份、醋酸20份、壬基酚聚氧乙烯醚12份、丙三醇105份、无水乙醇35份、水2000份。
盐酸化伊红溶液由以下方法制备得到：将1份水溶性伊红Y粉剂溶于200份的蒸馏水中，充分搅拌完全溶解；然后加浓盐酸4份，充分搅拌，静置过夜后过滤；将沉淀物干燥后加95％乙醇，配成饱和液；使用时使用95％乙醇稀释，即得。
实施例3：
一种组织病理学的组织样本的处理方法，包括以下步骤：
(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；
固定剂I中由以下组分混合制成：2.5％戊二醛50mL、2％多聚甲醛50mL；固定剂I在6℃下进行固定，固定时间为30min；
固定剂Ⅱ由以下组分混合制成：40％甲醛10mL，蒸馏水90mL，NaH2PO4·H2O 0.5g，Na2HPO40.5g；固定剂Ⅱ在常温下进行固定，固定时间为30min。
(2)冲洗：使用流水缓慢冲洗。
(3)脱水：梯度乙醇脱水：75％乙醇30min、80％乙醇30min、85％乙醇Ⅰ30min、85％乙醇Ⅱ60min、85％乙醇Ⅲ60min、95％乙醇Ⅰ40min、95％乙醇Ⅱ40min、无水乙醇Ⅰ30min、无水乙醇Ⅱ30min。
(4)透明：选择TO透明剂进行透明，TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；透明处理的温度为42℃。
(5)浸蜡包埋：65℃下，采用石蜡浸蜡，石蜡熔点为54℃，石蜡Ⅰ-IV各30min。
(6)切片、染色：切片后进行染色；染色过程中先对切片进行脱蜡，得脱蜡切片；
将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理3min，然后采用苏木素染液处理5min；水洗后采用0.5％盐酸酒精分色5s，然后进行水洗蓝化；
然后依次置于70％乙醇5min、80％乙醇5min，再采用盐酸化伊红溶液处理35s，再依次置于95％乙醇Ⅰ3min、95％乙醇Ⅱ4min、无水乙醇Ⅰ3min、无水乙醇Ⅱ4min、二甲苯+无水乙醇5min、二甲苯Ⅰ4min、二甲苯Ⅱ6min；最后采用中性树胶封片。
其中苏木素助染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、硫酸铝16份、高锰酸钾0.4份、柠檬酸28份、壬基酚聚氧乙烯醚10份、水1500份。
苏木素染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、十二水硫酸铝钾80份、高锰酸钾0.5份、醋酸20份、壬基酚聚氧乙烯醚12份、丙三醇100份、无水乙醇45份、水2000份。
盐酸化伊红溶液由以下方法制备得到：将1份水溶性伊红Y粉剂溶于200份的蒸馏水中，充分搅拌完全溶解；然后加浓盐酸4份，充分搅拌，静置过夜后过滤；将沉淀物干燥后加95％乙醇，配成饱和液；使用时使用95％乙醇稀释，即得。
实施例4：
一种组织病理学的组织样本的处理方法，包括以下步骤：
(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；
固定剂I中由以下组分混合制成：2.5％戊二醛50mL、2％多聚甲醛50mL；固定剂I在5℃下进行固定，固定时间为30min；
固定剂Ⅱ由以下组分混合制成：40％甲醛10mL，蒸馏水90mL，NaH2PO4·H2O 0.5g，Na2HPO40.5g；固定剂Ⅱ在常温下进行固定，固定时间为30min。
(2)冲洗：使用流水缓慢冲洗。
(3)脱水：梯度乙醇脱水：75％乙醇30min、80％乙醇30min、85％乙醇Ⅰ30min、85％乙醇Ⅱ60min、85％乙醇Ⅲ60min、95％乙醇Ⅰ40min、95％乙醇Ⅱ40min、无水乙醇Ⅰ30min、无水乙醇Ⅱ30min。
(4)透明：选择TO透明剂进行透明，TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；透明处理的温度为40℃。
(5)浸蜡包埋：64℃下，采用石蜡浸蜡，石蜡熔点为52℃，石蜡Ⅰ-IV各30min。
(6)切片、染色：切片后进行染色；染色过程中先对切片进行脱蜡，得脱蜡切片；
将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理2.5min，然后采用苏木素染液处理8min；水洗后采用0.5％盐酸酒精分色8s，然后进行水洗蓝化；
然后依次置于70％乙醇5min、80％乙醇5min，再采用盐酸化伊红溶液处理20s，再依次置于95％乙醇Ⅰ3min、95％乙醇Ⅱ4min、无水乙醇Ⅰ3min、无水乙醇Ⅱ4min、二甲苯+无水乙醇5min、二甲苯Ⅰ4min、二甲苯Ⅱ6min；最后采用中性树胶封片。
其中苏木素助染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、硫酸铝10份、高锰酸钾0.5份、柠檬酸30份、壬基酚聚氧乙烯醚12份、水2000份。
苏木素染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、十二水硫酸铝钾60份、高锰酸钾0.4份、醋酸15份、壬基酚聚氧乙烯醚6份、丙三醇115份、无水乙醇30份、水1500份。
盐酸化伊红溶液由以下方法制备得到：将1份水溶性伊红Y粉剂溶于200份的蒸馏水中，充分搅拌完全溶解；然后加浓盐酸4份，充分搅拌，静置过夜后过滤；将沉淀物干燥后加95％乙醇，配成饱和液；使用时使用95％乙醇稀释，即得。
实施例5：
一种组织病理学的组织样本的处理方法，包括以下步骤：
(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；
固定剂I中由以下组分混合制成：2.5％戊二醛50mL、2％多聚甲醛50mL；固定剂I在4℃下进行固定，固定时间为30min；
固定剂Ⅱ由以下组分混合制成：40％甲醛10mL，蒸馏水90mL，NaH2PO4·H2O 0.5g，Na2HPO40.5g；固定剂Ⅱ在常温下进行固定，固定时间为30min。
(2)冲洗：使用流水缓慢冲洗。
(3)脱水：梯度乙醇脱水：75％乙醇30min、80％乙醇30min、85％乙醇Ⅰ30min、85％乙醇Ⅱ60min、85％乙醇Ⅲ60min、95％乙醇Ⅰ40min、95％乙醇Ⅱ40min、无水乙醇Ⅰ30min、无水乙醇Ⅱ30min。
(4)透明：选择TO透明剂进行透明，TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；透明处理的温度45℃。
(5)浸蜡包埋：65℃下，采用石蜡浸蜡，石蜡熔点为54℃，石蜡Ⅰ-IV各30min。
(6)切片、染色：切片后进行染色；染色过程中先对切片进行脱蜡，得脱蜡切片；
将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理2min，然后采用苏木素染液处理10min；水洗后采用0.5％盐酸酒精分色10s，然后进行水洗蓝化；
然后依次置于70％乙醇5min、80％乙醇5min，再采用盐酸化伊红溶液处理30s，再依次置于95％乙醇Ⅰ3min、95％乙醇Ⅱ4min、无水乙醇Ⅰ3min、无水乙醇Ⅱ4min、二甲苯+无水乙醇5min、二甲苯Ⅰ4min、二甲苯Ⅱ6min；最后采用中性树胶封片。
其中苏木素助染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、硫酸铝12份、高锰酸钾0.3份、柠檬酸20份、壬基酚聚氧乙烯醚6份、水1800份。
苏木素染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、十二水硫酸铝钾70份、高锰酸钾0.7份、醋酸25份、壬基酚聚氧乙烯醚8份、丙三醇120份、无水乙醇50份、水1700份。
盐酸化伊红溶液由以下方法制备得到：将1份水溶性伊红Y粉剂溶于200份的蒸馏水中，充分搅拌完全溶解；然后加浓盐酸4份，充分搅拌，静置过夜后过滤；将沉淀物干燥后加95％乙醇，配成饱和液；使用时使用95％乙醇稀释，即得。
对比例1：
一种组织病理学的组织样本的处理方法，与实施例5不同的是：
步骤(1)中：对离体的组织样本固定时只采用固定剂I进行固定；
步骤(6)中：不采用苏木素预染液处理。
其余步骤均与实施例5一致。
对比例2：
一种组织病理学的组织样本的处理方法，与实施例5不同的是：
步骤(1)中：对离体的组织样本固定时只采用固定剂Ⅱ进行固定；
步骤(6)中：不采用苏木素预染液处理。
其余步骤均与实施例5一致。
采用实施例1-5以及对比例1-2中的方法对组织病理学的组织样本进行处理，处理结果如表1所示。
表1：
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (8)
1.一种组织病理学的组织样本的处理方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)固定：对离体的组织样本进行固定，固定时依次采用固定剂I、固定剂Ⅱ进行固定；
固定剂I中由以下组分混合制成：2.5％戊二醛50mL、2％多聚甲醛50mL；
固定剂Ⅱ由以下组分混合制成：40％甲醛10mL，蒸馏水90mL，NaH2PO4·H2O 0.5g，Na2HPO40.5g；
(2)冲洗：使用流水缓慢冲洗；
(3)脱水：梯度乙醇脱水：75％乙醇30min、80％乙醇30min、85％乙醇Ⅰ30min、85％乙醇Ⅱ60min、85％乙醇Ⅲ60min、95％乙醇Ⅰ40min、95％乙醇Ⅱ40min、无水乙醇Ⅰ30min、无水乙醇Ⅱ30min；
(4)透明：选择TO透明剂进行透明，TO透明剂Ⅰ-Ⅲ各30min；
(5)浸蜡包埋：64-65℃下，采用石蜡浸蜡，石蜡Ⅰ-IV各30min；
(6)切片、染色：切片后进行染色；染色过程中先对切片进行脱蜡，得脱蜡切片；
将脱蜡切片先采用苏木素预染液处理2-3min，然后采用苏木素染液处理5-10min；水洗后采用0.5％盐酸酒精分色5-10s，然后进行水洗蓝化；
然后依次置于70％乙醇5min、80％乙醇5min，再采用盐酸化伊红溶液处理20-35s，再依次置于95％乙醇Ⅰ3min、95％乙醇Ⅱ4min、无水乙醇Ⅰ3min、无水乙醇Ⅱ4min、二甲苯+无水乙醇5min、二甲苯Ⅰ4min、二甲苯Ⅱ6min；最后采用中性树胶封片；
所述苏木素助染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、硫酸铝10-16份、高锰酸钾0.3-0.5份、柠檬酸20-30份、壬基酚聚氧乙烯醚6-12份、水1500-2000份；
所述苏木素染液由以下质量份数的组分混合制成：苏木素10份、十二水硫酸铝钾60-80份、高锰酸钾0.4-0.7份、醋酸15-25份、壬基酚聚氧乙烯醚6-12份、丙三醇100-120份、无水乙醇30-50份、水1500-2000份。
2.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法，其特征在于，步骤(1)中，固定剂I在4-6℃下进行固定，固定时间为30min。
3.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法，其特征在于，步骤(1)中，固定剂Ⅱ在常温下进行固定，固定时间为30min。
4.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法，其特征在于，步骤(4)中，透明处理的温度为40-45℃。
5.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法，其特征在于，步骤(5)中，石蜡熔点为52-54℃。
6.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法，其特征在于，所述苏木素助染液由以下质量份数的组分制成：苏木素10份、硫酸铝12份、高锰酸钾0.35份、柠檬酸28份、壬基酚聚氧乙烯醚9份、水1800份。
7.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法，其特征在于，所述苏木素染液由以下质量份数的组分制成：苏木素10份、十二水硫酸铝钾72份、高锰酸钾0.5份、醋酸18份、壬基酚聚氧乙烯醚8.5份、丙三醇105份、无水乙醇45份、水1800份。
8.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法，其特征在于，所述盐酸化伊红溶液由以下方法制备得到：将1份水溶性伊红Y粉剂溶于200份的蒸馏水中，充分搅拌完全溶解；然后加浓盐酸4份，充分搅拌，静置过夜后过滤；将沉淀物干燥后加95％乙醇，配成饱和液；使用时使用95％乙醇稀释，即得。
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