CN110655517A - 一种多替拉韦开环杂质的制备方法及其杂质 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种多替拉韦开环杂质的制备方法，包括杂质A和杂质B的制备，具体以化合物1为起始原料，与化合物2缩合生成化合物3，在碱性条件下水解成化合物4，接着与化合物5反应生成化合物6，化合物6采用保护‑关环‑脱保护的方法得到杂质A，进一步反应得杂质B；还公开了所述杂质；与现有技术相比，本发明运用新的，未曾有过的合成路线，完成了多替拉韦原料药杂质A和杂质B的制备；设计的杂质合成路线反应条件简单、温和、收率较好、反应操作安全，解决了多替拉韦降解杂质A和B在酸碱破坏试验中量少、无法分离得到的困境；还完成了对杂质A和杂质B的表征工作，便于后续对杂质A和杂质B的进一步研究。

Description

一种多替拉韦开环杂质的制备方法及其杂质

技术领域

本发明涉及药物合成技术领域，具体是一种多替拉韦开环杂质的制备方法及其杂质。

背景技术

HIV(人类免疫缺陷病毒)整合酶抑制剂多替拉韦钠(dolutegravir sodium)，由葛兰素史克公司研发，于2013年8月获美国FDA(食品药品管理局)批准上市。其中文化学名称为(4R,12aS)-9-{[(2,4-二氟苯基)甲基]氨甲酰基}-4-甲基-6,8-二氧代-3,4,6,8,12,12a-六氢-2H-吡啶并[1’,2’:4,5]吡嗪[2,1-b][1,3]噁嗪-7-烯醇钠，结构式为：

多替拉韦是一种人类免疫缺陷病毒类型1(HIV-1)整合酶链转移抑制药(INSTI)，适用于其他抗逆转录病毒药联用治疗成年及12岁以上和体重至少40kg儿童的HIV-1感染。专利US9120817公开了其制备方法，具体为：起始物料1-[2,2-双(甲基氧基)乙基]-5-甲氧羰基-4-氧代-3-甲氧基-1,4-二氢-2-吡啶羧酸甲酯在氢氧化锂作用下，位阻小的酯基水解成羧酸。化合物1-[2,2-双(甲基氧基)乙基]-5-羧酸-4-氧代-3-甲氧基-1,4-二氢-2-吡啶羧酸甲酯在醋酸与甲基磺酸中缩醛脱保护成醛基。含醛基化合物与(R)-3-氨基正丁醇反应关环生成并环化合物。并环化合物与2,4-二氟苄胺用CDI(N,N-二羰基咪唑)缩合生成酰胺。最后经氯化锂脱甲基生成多替拉韦原料，合成路线如下：

本申请尝试采用上述路线反应合成的多替拉韦原料药，通过LC-MS检测，发现除了主峰420([M+H]⁺)的分子离子峰之外，还有一个与产物分子量一样的420([M+H]⁺)小杂质峰(主要包括杂质A和杂质B)，该杂质推断是由于多替拉韦在酸性条件并且加热的步骤中，侧环不稳定，部分开环降解导致。

因为推测杂质A是在酸性条件下加热生成，本申请尝试用多替拉韦在6N的盐酸水溶液中回流降解，反应6小时后，反应液经LC-MS鉴定，仍只有微量杂质A生成，且与其它杂质混合，难以分离提取；且现有技术也并未披露杂质A和杂质B的制备方法。由于杂质研究有利于药物质量的研究，而且CFDA对药物申报中杂质研究的要求较高，因此获得杂质对照品对药物申报及药品质量控制具有重要的意义，所以本领域急需提供一种全新的、未有类似文章报道的杂质A与杂质B的合成路线。

发明内容

本发明的目的在于提供一种多替拉韦开环杂质的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种多替拉韦开环杂质的制备方法，包括杂质A和杂质B的制备，具体是：以化合物1为起始原料，与化合物2缩合生成化合物3，在碱性条件下水解成化合物4，接着与化合物5反应生成化合物6，化合物6采用保护-关环-脱保护的方法得到杂质A，进一步反应得杂质B，合成路线如下：

其中R₁为甲基、乙基或苄基；R₂为甲基或乙基；R₃为苯甲酰基、乙酰基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、苄基或烯丙基。

作为本发明进一步的方案，所述多替拉韦开环杂质的制备方法，主要包括以下步骤：

(1)在二氯甲烷为溶剂和N,N'-羰基二咪唑为缩合试剂条件下，化合物1与化合物2室温下反应，反应结束后将所得物料洗涤、蒸干、精制得化合物3；

(2)在碱性条件下，将步骤(1)所得化合物3水解，反应结束后调节所得物料的pH至3-4，旋干，萃取，得化合物4；

(3)在二氯甲烷为溶剂条件下，步骤(2)所得化合物4与化合物5于室温下发生缩合反应，反应结束所得物料经水洗、旋干、重结晶，得化合物6；

(4)保护：步骤(3)所得化合物6以二氯甲烷作溶剂，在碱性条件下，加入保护基试剂R₃Cl反应，反应结束后将物料倒入冰水中，分液、水洗、旋干溶剂得化合物7；

(5)关环：将步骤(4)所得化合物7以乙腈为溶剂，在酸的作用下关环，旋干溶剂，然后预处理得化合物8；

(6)脱保护：在碱性条件下，将步骤(5)所得化合物8水解得杂质A；

(7)将杂质A用乙腈作溶剂，于70-80℃脱除保护基R₁，然后将反应物料经酸洗、旋干、萃取、旋干、乙醇重结晶得杂质B。

作为本发明进一步的方案，所述步骤(1)中反应结束后将所得物料依次用0.5-1.5N盐酸水溶液、4-6％碳酸钠水溶液、饱和食盐水洗涤，有机相减压蒸干，精制得化合物3；所制得的化合物3精制采用硅胶柱层析方法，洗脱剂采用正己烷∶乙酸乙酯＝(5∶1)-(1∶1)。

作为本发明进一步的方案，所述步骤(2)中的水解反应在有机溶剂中进行，其中所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的任意一种；所述碱溶液为1-2N的氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾水溶液中的任意一种；加入水和萃取剂萃取，所述萃取剂为二氯甲烷。

作为本发明进一步的方案，步骤(3)中所述缩合反应所用缩合试剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和二环己基碳二亚胺的复合物或1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1-羟基苯并***的复合物，本发明优选1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1-羟基苯并***的复合物作为缩合试剂；所述缩合试剂和化合物4的摩尔比为(1.1∶1)-(2.0∶1)；反应结束所得物料依次水洗、饱和食盐水洗、旋干，重结晶，所述重结晶具体步骤为：将所得物料旋干后，加二氯甲烷溶解，搅拌下滴加正己烷，后室温搅拌，缓慢析出固体；或加二氯甲烷与正己烷回流溶解，后缓慢冷却至室温，搅拌析晶。

作为本发明进一步的方案，步骤(4)中所述保护基试剂R₃Cl中的保护基R₃为苯甲酰基、乙酰基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、苄基、烯丙基中的任意一种；所述保护基试剂R₃Cl和化合物6的摩尔比为(1.1∶1)-(2.0∶1)；反应所用碱为三乙胺、吡啶、N,N’-二异丙基乙基胺中的任意一种，所述碱与化合物6的摩尔比为(1.1∶1)-(2.0∶1)。

作为本发明进一步的方案，步骤(5)中关环所用的酸为硫酸、对甲基苯磺酸、醋酸、甲基磺酸中的一种或几种，本发明优选醋酸和甲基磺酸的混酸，其中甲基磺酸的添加量为0.2-0.5当量，醋酸的添加量为4-10当量；所述预处理方法为：反应结束后将所得化合物7加入到二氯甲烷中搅拌溶解，用0.8-1N的盐酸水溶液酸洗，减压旋干得到化合物8。

作为本发明进一步的方案，所述步骤(6)水解反应在有机溶剂中进行，其中所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的任意一种；所述反应碱为氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾中的任意一种。

作为本发明进一步的方案，所述步骤(7)中脱除保护基R₁的试剂为氯化镁或溴化镁，所述氯化镁或溴化镁与杂质A的摩尔比为(1.1∶1)-(2.0∶1)；所述酸洗液为5-7N的盐酸水溶液。

作为本发明进一步的方案，本发明还公开了采用上述所述的方法制备的多替拉韦开环杂质，优选的，所述杂质A的结构如下：

所述杂质A的核磁氢谱相关数据如下：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.55(t,J＝5.9Hz,1H),8.64(s,1H),7.37(td,J＝8.6,6.4Hz,1H),6.87～6.77(m,3H),6.42(d,J＝6.3Hz,1H),5.20～5.08(m,1H),4.65(d,J＝5.9Hz,2H),4.05(s,3H),3.71～3.59(m,1H),3.57～3.47(m,1H),2.55(s,1H),2.00～1.90(m,1H),1.84～1.73(m,1H),1.40(d,J＝6.9Hz,3H)；LC-MS(m/z):434[M+H]⁺。

优选的，所述杂质B结构如下：

所述杂质B的核磁氢谱相关数据如下：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:12.28(s,1H),10.60(t,J＝5.9Hz,1H),8.80(s,1H),7.55(d,J＝6.4Hz,1H),7.43(td,J＝8.7,6.6Hz,1H),7.25(ddd,J＝10.6,9.3,2.6Hz,1H),7.07(tdd,J＝8.5,2.6,1.0Hz,1H),7.01(d,J＝6.4Hz,1H),4.89(dt,J＝8.2,6.5Hz,1H),4.57(d,J＝5.9Hz,2H),4.53(t,J＝4.9Hz,1H),3.43～3.35(m,2H),1.94～1.71(m,2H),1.29(d,J＝6.8Hz,3H)；LC-MS(m/z):420[M+H]⁺。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(1)本发明运用新的，未曾有过的合成路线，完成了多替拉韦原料药杂质A和杂质B的制备；

(2)本发明设计的杂质合成路线反应条件简单、温和、收率较好、反应操作安全，解决了多替拉韦降解杂质A和B在酸碱破坏试验中量少、无法分离得到的困境；

(3)本发明还完成了对杂质A和杂质B的表征工作，通过杂质A和杂质B的质谱和核磁谱图数据分析可知，反应制备的杂质纯度较高，可以满足用于多替拉韦原料药制备中的杂质分析工作，便于后续对杂质A和杂质B的进一步研究。

附图说明

图1为本发明实施例所述的多替拉韦开环杂质的合成路线图；

图2为本发明实施例制备的化合物3的核磁氢谱；

图3为本发明实施例制备的化合物6的核磁氢谱；

图4为本发明实施例制备的杂质A的核磁氢谱；

图5为本发明实施例制备的杂质B的核磁氢谱；

图6为本发明实施例制备的杂质B的核磁碳谱；

图7为本发明实施例制备的杂质A的液质联用报告谱图；

图8为本发明实施例制备的杂质B的液质联用报告谱图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

参阅图1，以优选原料合成多替拉韦开环杂质A和杂质B为例，其合成原理如下：

第一步：化合物1和化合物2反应生成化合物3

以二氯甲烷为溶剂，N,N-二羰基咪唑(CDI)为缩合试剂，化合物1与化合物2室温下发生缩合反应，反应结束后将所得物料依次用1N盐酸水溶液、5％碳酸钠水溶液、饱和食盐水洗涤，有机相减压蒸干，精制得化合物3，所述精制采用硅胶柱层析方法，洗脱剂采用正己烷∶乙酸乙酯＝3∶1；反应方程式如下：

第二步：化合物3水解生成化合物4

将乙醇和化合物3搅拌混匀，加入2N氢氧化钠水溶液进行水解反应，反应结束用6N盐酸水溶液调节pH至3-4，旋干，再加入水和二氯甲烷萃取，得化合物4；反应方程式如下：

第三步：化合物4与化合物5反应生成化合物6

在以二氯甲烷为溶剂、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1-羟基苯并***为缩合试剂的条件下，化合物4与化合物5于室温下搅拌2h，反应液依次水洗、饱和食盐水洗、旋干，加二氯甲烷搅拌溶解，加入正己烷室温搅拌20-24h，析出产物，抽滤、真空干燥得化合物6；其中，所述缩合试剂与化合物4的最优配比为1.5∶1；反应方程式如下：

第四步：将化合物6用保护基试剂保护处理得到化合物7

以二氯甲烷作溶剂，加入化合物6、三乙胺和保护基试剂苯甲酰氯反应，反应结束后将反应液倒入冰水中，分液、水洗、旋干溶剂得化合物7，其中所述保护基试剂苯甲酰氯和化合物6的最优配比为1.5∶1；所述三乙胺与化合物6的摩尔比为1.8∶1；反应方程式如下：

第五步：关环反应

化合物7以乙腈为溶剂，在6当量醋酸和0.3当量甲基磺酸的作用下关环，然后旋干溶剂，加入二氯甲烷，然后经1N的盐酸水溶液酸洗、减压旋干得化合物8；反应方程式为：

第六步：脱保护得杂质A

往化合物8中加入甲醇和氢氧化钠室温下搅拌1h，水解脱除苯甲酰基得杂质A；反应方程式为：

第七步：杂质A进一步反应得杂质B

杂质A用乙腈作溶剂，75℃氯化镁脱R₁保护基，加6N的盐酸水溶液，旋干，剩余物加水，二氯甲烷萃取旋干，乙醇重结晶得到杂质B，其中所述氯化镁与杂质A的最优配比为1.5∶1；反应方程式为：

实施例2

化合物1与化合物2缩合反应生成化合物3：

反应瓶中加入化合物1(20.0g，63.4mmol)，二氯甲烷(150mL)，室温下搅拌溶解。降温至15-20℃，加入N,N-羰基二咪唑(13.9g，85.7mmol)，氮气保护下保温反应2小时。滴入化合物2(10.0g，69.9mmol)，滴毕升至室温反应2小时。反应液依次用1N HCl水溶液(100mL)，5％的碳酸钠水溶液(130mL)，饱和食盐水(100mL)洗。有机相浓缩至干，所得油状物柱层析分离[流动相：正己烷∶乙酸乙酯(2∶1)]，得白色固体粉末产物化合物3(18.9g，68％)。

制得的化合物3的核磁氢谱参见图2，其核磁氢谱和质谱相关数据如下：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.39(s,1H),8.42(s,1H),7.38(td,J＝8.4,6.4Hz,1H),6.87～6.76(m,2H),4.63(d,2H),4.50(t,J＝4.8Hz,1H),4.04(d,J＝4.8Hz,2H),3.98(d,J＝10.6Hz,6H),3.39(s,6H)；LC-MS(m/z):441[M+H]⁺。

实施例3

将本发明实施例2制备的化合物3在碱性条件下水解生成化合物4，化合物4与化合物5缩合反应生成化合物6：

反应瓶中加入化合物3(18.9g，42.9mmol)，乙醇(190mL)，搅拌溶解。加入2N NaOH水溶液(95mL)，室温下搅拌反应1小时，TLC鉴定原料消失。6N HCl水溶液调节pH至3-4。反应液浓缩至干，剩余物中加入水(50mL)，二氯甲烷(100m L×3)萃取，合并有机相浓缩至干得白色固体化合物4，该固体直接加入二氯甲烷(180mL)，1-羟基苯并***(8.7g，64.4mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(12.3g，64.4mmol)，化合物5(7.7g，85.8mmol)。室温搅拌2小时，反应液用水(180mL)洗，饱和食盐水(100mL)洗，有机相浓缩至干。剩余物中加入二氯甲烷(40mL)，搅拌溶解，加入正己烷(120mL)。室温搅拌24小时，有固体析出，抽滤，滤饼真空干燥，得淡黄色固体颗粒化合物6(16.2g，76％)。

所制得的化合物6的核磁氢谱参见图3，其核磁氢谱和质谱相关数据如下：¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ:10.33(t,J＝5.9Hz,1H),8.35(s,1H),7.39(td,J＝8.5,6.4Hz,1H),7.12(d,J＝8.4Hz,1H),6.88～6.77(m,2H),4.63～4.59(m,3H),4.41～4.32(m,1H),4.03(d,J＝5.0Hz,2H),3.90(s,3H),3.84～3.72(m,2H),3.39(d,J＝4.3Hz,6H),1.99～1.89(m,1H),1.66～1.56(m,1H),1.33(d,J＝6.7Hz,3H)；LC-MS(m/z):498[M+H]⁺。

实施例4

杂质A的制备

反应瓶中加入化合物6(16.0g，32.2mmol)，二氯甲烷(160mL)，三乙胺(4.9g，48.3mmol)。降温至0-5℃，缓慢滴加苯甲酰氯(5.4g，38.6mmol)的二氯甲烷(40mL)溶液。滴毕，室温搅拌反应5小时。将反应液缓慢倒入冰水中，分液，有机相水(100mL)洗，有机相浓缩至干得油状化合物7。剩余油状物化合物7中加入乙腈(200mL)，甲基磺酸(0.9g，9.7mmol)，冰醋酸(9.3g，154.6mmol)。氮气保护升温至回流反应7小时，降温，水泵减压旋去溶剂。剩余物中加入二氯甲烷(120mL)，1N HCl(120mL)洗，有机相减压旋干，得到黄色油状物化合物8。所得化合物8加入甲醇(150mL)，氢氧化钠(7.2g，178.8mmol)，室温搅拌反应1小时。水泵减压旋去溶剂，剩余物中加入水(150mL)，二氯甲烷(150mL)萃取，水泵减压旋去溶剂得白色粉末固体化合物杂质A(9.0g，65％)。

所述杂质A的核磁氢谱参见图4，其核磁氢谱和质谱相关数据如下：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.55(t,J＝5.9Hz,1H),8.64(s,1H),7.37(td,J＝8.6,6.4Hz,1H),6.87～6.77(m,3H),6.42(d,J＝6.3Hz,1H),5.20～5.08(m,1H),4.65(d,J＝5.9Hz,2H),4.05(s,3H),3.71～3.59(m,1H),3.57～3.47(m,1H),2.55(s,1H),2.00～1.90(m,1H),1.84～1.73(m,1H),1.40(d,J＝6.9Hz,3H)；LC-MS(m/z):434[M+H]⁺。

所述杂质A的液质联用报告谱图参见图7，由图7可知：质谱出的分子量与杂质A相符，且LC-MS里相应的质谱峰和液相谱图证明，所合成的杂质A纯度较高，适用于杂质对照品研究。

实施例5

杂质B的合成

反应瓶中加入杂质A(9.0g，20.8mmol)，加入乙腈(100mL)，搅拌溶解后，氮气保护下升温至70-80℃，加入氯化镁(2.8g，29.8mmol)，保温反应5小时。降至室温，加入6NHCl水溶液(20mL)，反应液浓缩至干，剩余物中加入水(100mL)，二氯甲烷(100mL×2)萃取，合并有机相，水泵减压旋去溶剂。加入乙醇(60mL)，升温至75-80℃回流搅拌1小时，降至室温，抽滤，滤饼乙醇洗，45℃常压烘干得白色固体粉末产物杂质B(7.3g，84％)。

所述杂质B的核磁氢谱和碳谱参见图5和图6，其核磁氢谱和质谱相关数据如下：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:12.28(s,1H),10.60(t,J＝5.9Hz,1H),8.80(s,1H),7.55(d,J＝6.4Hz,1H),7.43(td,J＝8.7,6.6Hz,1H),7.25(ddd,J＝10.6,9.3,2.6Hz,1H),7.07(tdd,J＝8.5,2.6,1.0Hz,1H),7.01(d,J＝6.4Hz,1H),4.89(dt,J＝8.2,6.5Hz,1H),4.57(d,J＝5.9Hz,2H),4.53(t,J＝4.9Hz,1H),3.43～3.35(m,2H),1.94～1.71(m,2H),1.29(d,J＝6.8Hz,3H)；LC-MS(m/z):420[M+H]⁺。

所述杂质B的液质联用报告谱图参见图8，由图7可知：质谱出的分子量与杂质B相符，且LC-MS里相应的质谱峰和液相谱图证明，所合成的杂质B纯度较高，适用于杂质对照品研究。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (11)

1.一种多替拉韦开环杂质的制备方法，其特征在于，包括杂质A和杂质B的制备，具体是：以化合物1为起始原料，与化合物2缩合生成化合物3，在碱性条件下水解成化合物4，接着与化合物5反应生成化合物6，化合物6采用保护-关环-脱保护的方法得到杂质A，进一步反应得杂质B，合成路线如下：

其中R₁为甲基、乙基或苄基；R₂为甲基或乙基；R₃为苯甲酰基、乙酰基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、苄基或烯丙基。

2.根据权利要求1所述的一种多替拉韦开环杂质的制备方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

(1)在二氯甲烷为溶剂和N,N'-羰基二咪唑为缩合试剂条件下，化合物1与化合物2室温下反应，反应结束后将所得物料洗涤、蒸干、精制得化合物3；

(2)在碱性条件下，将步骤(1)所得化合物3水解，反应结束后调节所得物料的pH至3-4，旋干，萃取，得化合物4；

(3)在二氯甲烷为溶剂条件下，步骤(2)所得化合物4与化合物5于室温下发生缩合反应，反应结束所得物料经水洗、旋干、重结晶，得化合物6；

(4)保护：步骤(3)所得化合物6以二氯甲烷作溶剂，在碱性条件下，加入保护基试剂R₃Cl反应，反应结束后将物料倒入冰水中，分液、水洗、旋干溶剂得化合物7；

(5)关环：将步骤(4)所得化合物7以乙腈为溶剂，在酸的作用下关环，旋干溶剂，然后预处理得化合物8；

(6)脱保护：在碱性条件下，将步骤(5)所得化合物8水解得杂质A；

(7)将杂质A用乙腈作溶剂，于70-80℃脱除保护基R₁，然后将反应物料经酸洗、旋干、萃取、旋干、乙醇重结晶得杂质B。

3.根据权利要求2所述的一种多替拉韦开环杂质的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中反应结束后将所得物料依次用0.5-1.5N盐酸水溶液、4-6％碳酸钠水溶液、饱和食盐水洗涤，有机相减压蒸干，精制得化合物3；所制得的化合物3精制采用硅胶柱层析方法，洗脱剂采用正己烷∶乙酸乙酯＝(5∶1)-(1∶1)。

4.根据权利要求2所述的一种多替拉韦开环杂质的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的水解反应在有机溶剂中进行，其中所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的任意一种；所述碱溶液为1-2N的氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾水溶液中的任意一种；加入水和萃取剂萃取，所述萃取剂为二氯甲烷。

5.根据权利要求2所述的一种多替拉韦开环杂质的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述缩合反应所用缩合试剂为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和二环己基碳二亚胺的复合物或1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1-羟基苯并***的复合物，本发明优选1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和1-羟基苯并***的复合物作为缩合试剂；所述缩合试剂和化合物4的摩尔比为(1.1∶1)-(2.0∶1)；反应结束所得物料依次水洗、饱和食盐水洗、旋干，重结晶，所述重结晶具体步骤为：将所得物料旋干后，加二氯甲烷溶解，搅拌下滴加正己烷，后室温搅拌，缓慢析出固体；或加二氯甲烷与正己烷回流溶解，后缓慢冷却至室温，搅拌析晶。

6.根据权利要求2所述的一种多替拉韦开环杂质的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述保护基试剂R₃Cl中的保护基R₃为苯甲酰基、乙酰基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、苄基、烯丙基中的任意一种；所述保护基试剂R₃Cl和化合物6的摩尔比为(1.1∶1)-(2.0∶1)；反应所用碱为三乙胺、吡啶、N,N’-二异丙基乙基胺中的任意一种，所述碱与化合物6的摩尔比为(1.1∶1)-(2.0∶1)。

7.根据权利要求2所述的一种多替拉韦开环杂质的制备方法，其特征在于，步骤(5)中关环所用的酸为硫酸、对甲基苯磺酸、醋酸、甲基磺酸中的一种或几种，本发明优选醋酸和甲基磺酸的混酸，其中甲基磺酸的添加量为0.2-0.5当量，醋酸的添加量为4-10当量；所述预处理方法为：反应结束后将所得化合物7加入到二氯甲烷中搅拌溶解，用0.8-1N的盐酸水溶液酸洗，减压旋干得到化合物8。

8.根据权利要求2所述的一种多替拉韦开环杂质的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)水解反应在有机溶剂中进行，其中所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的任意一种；所述反应碱为氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾中的任意一种。

9.根据权利要求2所述的一种多替拉韦开环杂质的制备方法，其特征在于，所述步骤(7)中脱除保护基R₁的试剂为氯化镁或溴化镁，所述氯化镁或溴化镁与杂质A的摩尔比为(1.1∶1)-(2.0∶1)；所述酸洗液为5-7N的盐酸水溶液。

10.一种采用权利要求1-9任意一项所述的方法制备的多替拉韦开环杂质，其特征在于，所述杂质A的结构如下：

所述杂质A的核磁氢谱相关数据如下：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.55(t,J＝5.9Hz,1H),8.64(s,1H),7.37(td,J＝8.6,6.4Hz,1H),6.87～6.77(m,3H),6.42(d,J＝6.3Hz,1H),5.20～5.08(m,1H),4.65(d,J＝5.9Hz,2H),4.05(s,3H),3.71～3.59(m,1H),3.57～3.47(m,1H),2.55(s,1H),2.00～1.90(m,1H),1.84～1.73(m,1H),1.40(d,J＝6.9Hz,3H)；LC-MS(m/z):434[M+H]⁺。

11.一种采用权利要求1-9任意一项所述的方法制备的多替拉韦开环杂质，其特征在于，所述杂质B结构如下：

所述杂质B的核磁氢谱相关数据如下：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:12.28(s,1H),10.60(t,J＝5.9Hz,1H),8.80(s,1H),7.55(d,J＝6.4Hz,1H),7.43(td,J＝8.7,6.6Hz,1H),7.25(ddd,J＝10.6,9.3,2.6Hz,1H),7.07(tdd,J＝8.5,2.6,1.0Hz,1H),7.01(d,J＝6.4Hz,1H),4.89(dt,J＝8.2,6.5Hz,1H),4.57(d,J＝5.9Hz,2H),4.53(t,J＝4.9Hz,1H),3.43～3.35(m,2H),1.94～1.71(m,2H),1.29(d,J＝6.8Hz,3H)；LC-MS(m/z):420[M+H]⁺。

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