CN110609134B - 磁微粒保存液及其制备方法和使用方法、免疫反应试剂及其用途 - Google Patents

磁微粒保存液及其制备方法和使用方法、免疫反应试剂及其用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种磁微粒保存液及其制备方法和使用方法、免疫反应试剂及其用途。磁微粒保存液，每升磁微粒保存液中包括：缓冲液10‑200mM、蛋白保护剂1‑50g/L和赋形剂1‑100g/L。磁微粒保存液的制备方法：将各原料与水混合即可。免疫反应试剂包括磁微粒保存液和磁微粒。所述磁微粒保存液的使用方法：将所述磁微粒保存液和磁微粒混合后在2‑6℃条件下保存，使用时经温育后即可。免疫反应试剂的用途，用于化学发光检测项目。本申请提供的磁微粒保存液，解决了磁微粒在运输过程中容易受到试剂容器倾覆影响的问题，在4℃条件下保持磁微粒的稳定性，热加速稳定性偏差小。

Description

磁微粒保存液及其制备方法和使用方法、免疫反应试剂及其 用途
技术领域
本发明涉及磁微粒领域，尤其涉及一种磁微粒保存液及其制备方法和使用方法、免疫反应试剂及其用途。
背景技术
在免疫测定技术中，化学发光免疫测定法在近年来逐渐成为较常用的免疫测定方法，其中磁微粒的使用使得免疫复合物的形成与分离更为高效。磁微粒是指磁性纳米粒子与无机或有机分子结合形成的可均匀分散于一定基液中具有高度稳定性的胶态复合材料。由于磁微粒具有磁响应性，成本低、能耗少和无污染等特点，人们在磁微粒表面或通过磁微粒表面的功能基团(如氨基、羧基、巯基及环氧乙烷等)将酶、抗体、寡核苷酸等生物活性物质进行固定，可进一步用于酶的固定化、靶向药物载体、细胞分选、免疫检测、蛋白与核酸的分离纯化及杂交检测等领域。悬浮磁微粒作为载体具有较高的比表面积，能够更为充分地与样品反应，加上外加磁场的灵活应用，已被广泛应用于生物及医学检验等领域。
包被有目的蛋白的化学发光磁微粒由厂家制备成化学发光免疫反应试剂后，需要运输至全国各地不同的用户所在地，在运输过程中很容易造成试剂容器的倾覆，使得磁微粒粘附在容器管壁或者容器封口膜上，造成磁微粒的损失或磁微粒浓度的变化，影响目的蛋白的检测效果，最终影响医生对病人病情的判断，造成严重医疗事故。所以需要一种能够在运输过程中不受试剂容器倾覆影响，并在化学发光检测仪器中温育后可恢复良好流动性的化学发光磁微粒保存液。
有鉴于此，特提出本申请。
发明内容
本发明的目的在于提供一种磁微粒保存液及其制备方法和免疫反应试剂，以解决上述问题。
为实现以上目的，本发明特采用以下技术方案：
一种磁微粒保存液，所述磁微粒保存液中包括：
缓冲液10-200mM、蛋白保护剂1-50g/L和赋形剂1-100g/L；
所述缓冲液包括PBS、Tris-HCl、HEPES和HEPPSO中的任一种；
所述蛋白保护剂包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、酪蛋白、山梨醇和甘油中的一种或多种；
所述赋形剂包括卡拉胶、明胶和PEG2000中的一种或多种。
可选地，每升所述磁微粒保存液中，缓冲液的含量可以是10mM、20mM、30mM、40mM、50mM、60mM、70mM、80mM、90mM、100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM、160mM、170mM、180mM、190mM、200mM以及10-200mM之间的任一值；蛋白保护剂的含量可以为1g/L、5g/L、10g/L、15g/L、20g/L、25g/L、30g/L、35g/L、40g/L、45g/L、50g/L以及1-50g/L之间的任一值；赋形剂的含量可以为1g/L、10g/L、20g/L、30g/L、40g/L、50g/L、60g/L、70g/L、80g/L、90g/L、100g/L以及1-100g/L之间的任一值。
缓冲液可维持溶液在一定的酸碱性范围，也就是使得溶液的PH在很小的范围内，维持一种相对稳定的状态，保护磁微粒与包被在磁微粒上的抗原或抗体。蛋白保护剂可保护包被在磁微粒上的抗原或抗体不被分解，减少特异性吸附，并且更为重要的是能够防止包被在磁微粒上的抗原或抗体吸附到管壁而造成损失。赋形剂在一定浓度下，可使磁微粒保存液在一定温度下呈凝固状态，加热后呈流动状态，保护磁微粒在运输过程中不受容器倾覆的影响。
可选地，卡拉胶可以是CAS号为9000-07-1的产品，也可以是卡拉胶IOTA型等市售卡拉胶产品。
优选地，所述的磁微粒保存液还包括防腐剂；
优选地，所述防腐剂包括Proclin-300；
优选地，所述磁微粒保存液中所述Proclin-300的体积含量为0.02％-1％；
优选地，所述磁微粒保存液中所述Proclin-300的体积含量为0.4％。
可选地，所述磁微粒保存液中所述Proclin-300的体积含量可以为0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％以及0.02％-1％之间的任一值。
防腐剂主要是为了抑制微生物细胞的生长以及促使微生物细胞凋亡，防止磁微粒保存液中微生物的感染和繁殖，影响最终检测结果。
优选地，所述的磁微粒保存液还包括离子螯合剂；
优选地，所述离子螯合剂包括EDTA；
优选地，所述磁微粒保存液中所述EDTA的含量为0.1-10mM；
优选地，所述磁微粒保存液中所述EDTA的含量为1mM。
可选地，所述磁微粒保存液中所述EDTA的含量可以为0.1mM、0.5mM、1.0mM、2.0mM、3.0mM、4.0mM、5.0mM、6.0mM、7.0mM、8.0mM、9.0mM、10mM以及0.1-10mM之间的任一值。
EDTA是一种能与Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等二价金属离子结合的螯合剂，由于多数核酸酶类和有些蛋白酶类的作用需要Mg2+，在本申请中可作为核酸酶、蛋白酶的抑制剂，保护包被在磁微粒上的抗原或抗体不受核酸酶或蛋白酶的降解，尤其在dsDNA项目上，是必不可少的组成成分。
优选地，所述的磁微粒保存液还包括封闭剂；
优选地，所述封闭剂包括CE510、CE210和DB1130中的一种或多种；
优选地，所述磁微粒保存液中所述封闭剂的体积含量为0.05％-2％；
优选地，所述封闭剂为DB1130；
优选地，所述磁微粒保存液中所述DB1130的体积含量为0.5％。
可选地，所述磁微粒保存液中所述封闭剂的体积含量可以为0.05％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％以及0.05％-2％之间的任一值。
本申请选择的封闭剂是一种全化学合成的水溶性高分子聚合物，结构中包含最佳比例的疏水基团和亲水基团，可有效地降低非特异性吸附，有助于提高磁微粒的分散稳定性。
优选地，所述缓冲液为HEPES；
优选地，所述磁微粒保存液中所述HEPES的含量为100-150mM；
优选地，所述磁微粒保存液中所述HEPES的含量为100mM；
优选地，所述缓冲液的pH为7.6-8.0。
可选地，所述磁微粒保存液中所述HEPES的含量可以为100mM、110mM、120mM、130mM、140mM、150mM以及100-150mM之间的任一值；所述缓冲液的pH可以为7.6、7.7、7.8、7.9、8.0以及7.6-8.0之间的任一值。
优选地，所述蛋白保护剂为人血清白蛋白；
优选地，所述磁微粒保存液中所述人血清白蛋白的含量为5-15g/L；
优选地，所述磁微粒保存液中所述人血清白蛋白的含量为10g/L。
可选地，所述磁微粒保存液中所述人血清白蛋白的含量可以为5g/L、6g/L、7g/L、8g/L、9g/L、10g/L、11g/L、12g/L、13g/L、14g/L、15g/L以及5-15g/L之间的任一值。
优选地，所述赋形剂为鱼明胶；
优选地，所述磁微粒保存液中所述鱼明胶的含量为10-60g/L；
优选地，所述磁微粒保存液中所述鱼明胶的含量为20g/L。
可选地，所述磁微粒保存液中所述鱼明胶的含量可以为10g/L、15g/L、20g/L、25g/L、30g/L、35g/L、40g/L、45g/L、50g/L、55g/L、60g/L以及10-60g/L之间的任一值。
对缓冲液、蛋白保护剂和赋形剂的种类、含量的优选，有助于进一步提高磁微粒保存液的性能。
可选地，所述磁微粒保存液的溶剂包括水；
优选地，所述水为纯化水。
使用纯化水可以减少水中离子对保存液的影响。
一种所述的磁微粒保存液的制备方法，包括：
将各组分与溶剂混合得到所述磁微粒保存液。
一种免疫反应试剂，包括所述的磁微粒保存液和磁微粒。
一种磁微粒保存液的使用方法，包括：
将所述磁微粒保存液和磁微粒混合后在2-6℃条件下保存，使用时经温育后即可；
优选地，所述温育的温度为50-70℃，所述温育的时间为30-60s。
可选地，保存温度可以是2℃、3℃、4℃、5℃、6℃以及2-6℃之间的任一值；所述温育的温度可以为50℃、55℃、60℃、65℃、70℃以及50-70℃之间的任一值；所述温育的时间可以为30s、40s、50s、60s以及30-60s之间的任一值。
一种所述的免疫反应试剂的用途，用于化学发光检测项目；
优选地，所述化学发光检测项目包括AFP、PCT、IL6、IFN-γ、AMH、FSH、CCP和dsDNA中的任一种。
与现有技术相比，本发明的有益效果至少包括：
1.本申请通过使用缓冲液、蛋白保护剂和赋形剂，从不同方面出发，全方位共同保护磁微粒和包被在磁微粒上的抗原或抗体，稳定磁微粒的性状，维持稳定的包被在磁微粒上的抗原或抗体的保存液体环境，保护包被在磁微粒上的抗原或抗体不被核酸酶或蛋白酶降解，减少管壁对包被在磁微粒上的抗原或抗体的吸附，减少特异性吸附，保护磁微粒在运输过程中不受容器倾覆的影响；使得磁微粒可以保存在4℃条件下，且具有很好的稳定性，避免试剂容器倾覆造成的影响，而且在温育后仍可恢复良好的流动性，热加速稳定性偏差不超过10％；
2.本申请提供的磁微粒保存液的制备方法，操作简单；
3.本申请提供的免疫反应试剂，通过加入磁微粒保存液，避免运输过程中因磁微粒损失或浓度变化带来的负面影响，检测结果精准；
4.本申请提供的磁微粒保存液的使用方法，操作简单；
5.本申请提供的免疫反应试剂，用途广泛。
具体实施方式
如本文所用之术语：
“由……制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
连接词“由……组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由……组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1～5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1～4”、“1～3”、“1～2”、“1～2和4～5”、“1～3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
在这些实施例中，除非另有指明，所述的份和百分比均按质量计。
“质量份”指表示多个组分的质量比例关系的基本计量单位，1份可表示任意的单位质量，如可以表示为1g，也可表示2.689g等。假如我们说A组分的质量份为a份，B组分的质量份为b份，则表示A组分的质量和B组分的质量之比a：b。或者，表示A组分的质量为aK，B组分的质量为bK(K为任意数，表示倍数因子)。不可误解的是，与质量份数不同的是，所有组分的质量份之和并不受限于100份之限制。
“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)。
下面将结合具体实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
需要说明的是，封闭剂均购自：日本JSR Life Sciences Company的Blockmaster系列。
实施例1
准备缓冲液HEPES(pH为8.0)、人血清白蛋白、鱼明胶。将缓冲液HEPES、人血清白蛋白和鱼明胶加入纯化水中并定容1000ml，控制缓冲液HEPES的含量为120mM、人血清白蛋白5g/L、鱼明胶40g/L。
将AFP检测项目使用的化学发光磁微粒与上述磁微粒保存液混合，得到免疫反应试剂，在4℃条件下保存。
使用时先在60℃条件下金属浴温育60s，即可使用。
实施例2
准备缓冲液PBS(pH为7.6)、牛血清白蛋白、卡拉胶、防腐剂Proclin-300。将缓冲液PBS、牛血清白蛋白、卡拉胶和防腐剂Proclin-300加入纯水中并定容1000ml，控制缓冲液PBS的含量为10mM、牛血清白蛋白的含量为50g/L、卡拉胶的含量为1g/L、防腐剂Proclin-300的体积含量为0.02％。
将PCT检测项目使用的化学发光磁微粒与上述磁微粒保存液混合，得到免疫反应试剂，在4℃条件下保存。
使用时先在50℃条件下金属浴温育50s，即可使用。
实施例3
准备缓冲液Tris-HCl、酪蛋白、PEG2000、防腐剂Proclin-300、EDTA。将缓冲液Tris-HCl、酪蛋白、PEG2000、防腐剂Proclin-300和EDTA加入纯水中并定容1000ml，控制缓冲液Tris-HCl的含量为200mM、酪蛋白的含量为1g/L、PEG2000的含量为100g/L、防腐剂Proclin-300的体积含量为1％、EDTA的含量为1mM。
将IL6检测项目使用的化学发光磁微粒与上述磁微粒保存液混合，得到免疫反应试剂，在4℃条件下保存。
使用时先在70℃条件下金属浴温育30s，即可使用。
实施例4
准备缓冲液HEPPSO、山梨醇、卡拉胶、防腐剂Proclin-300、EDTA和CE510。将缓冲液HEPPSO、山梨醇、卡拉胶、防腐剂Proclin-300、EDTA和CE510加入纯水中并定容1000ml，控制缓冲液HEPPSO的含量为50mM、山梨醇的含量为10g/L、卡拉胶的含量为1g/L、防腐剂Proclin-300的体积含量为0.1％、EDTA的含量为0.1mM、CE510的体积含量为0.05％。
将IFN-γ检测项目使用的化学发光磁微粒与上述磁微粒保存液混合，得到免疫反应试剂，在4℃条件下保存。
使用时先在65℃条件下金属浴温育60s，即可使用。
实施例5
准备缓冲液HEPES、人血清白蛋白、鱼明胶、防腐剂Proclin-300、EDTA和CE210。将缓冲液HEPES、人血清白蛋白、鱼明胶、防腐剂Proclin-300、EDTA和CE210加入纯水中并定容1000ml，控制缓冲液HEPES的含量为150mM、人血清白蛋白的含量为15g/L、鱼明胶的含量为60g/L、防腐剂Proclin-300的体积含量为0.5％、EDTA的含量为10mM、CE210的体积含量为2％。
将AMH检测项目使用的化学发光磁微粒与上述磁微粒保存液混合，得到免疫反应试剂，在4℃条件下保存。
使用时先在60℃条件下金属浴温育60s，即可使用。
实施例6
准备缓冲液HEPES(pH为8.0)、人血清白蛋白、鱼明胶、防腐剂Proclin-300、EDTA和DB1130。将缓冲液HEPES、人血清白蛋白、鱼明胶、防腐剂Proclin-300、EDTA和DB1130加入纯水中并定容1000ml，控制缓冲液HEPES的含量为100mM、人血清白蛋白的含量为10g/L、鱼明胶的含量为20g/L、防腐剂Proclin-300的体积含量为0.4％、EDTA的含量为1mM、DB1130的体积含量为0.5％。
将FSH检测项目使用的化学发光磁微粒与上述磁微粒保存液混合，得到免疫反应试剂，在4℃条件下保存。
使用时先在60℃条件下金属浴温育60s，即可使用。
将包被有不同抗体或抗原的化学发光磁微粒分为四组，第一组保存在等体积的本申请实施例6提供的磁微粒保存液中，第二组保存在等体积的CN109725148A公开的免疫磁珠保存液中(对比例1)，第三组使用CN109444401A公开的制备得到免疫反应试剂(对比例2)，第四组保存在等体积的CN103091306A公开的纳米磁微粒的封闭保存液中(对比例3)。然后将每组试剂按照4℃6天和37℃6天进行热加速稳定性评价；4℃条件下保存20h后倾覆试剂容器，观察磁微粒流动性，再分别放置于60℃金属浴60s后，观察磁微粒流动性。应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测不同项目的化学发光磁微粒的免疫活性(各项目样本提前分装冻存)。实验结果如表1和表2所示：
表1化学发光磁微粒流动性观察
Figure BDA0002232894550000101
Figure BDA0002232894550000111
由表1可以看出，在不同项目中，实施例6保存的磁微粒在4℃20h后，呈凝固状态，有利于运输试剂，60℃温育60s后恢复良好流动性，可直接用于检测。对比例1和对比例3保存的磁微粒在4℃20h后，呈半凝固状态，仍存在运输风险。对比例2保存的磁微粒在4℃20h后，仍然具有很强的流动性，存在运输风险。
表2化学发光磁微粒在不同保存液和保存条件下的免疫活性
Figure BDA0002232894550000112
Figure BDA0002232894550000121
按照如下公式计算偏差，偏差越小，热加速稳定性越好。
偏差＝(37℃6天测得的数据/4℃6天测得的数据)-1
由表2数据计算可知，在不同项目中，实施例6提供的磁微粒保存液保存的磁微粒的免疫活性均为最好，说明其热加速稳定性最好。
为了进一步说明本申请对提供的磁微粒保存液的各组分进行选择优化的过程，特进行如下实验：
A.缓冲液类型的选择
按照表3配制化学发光磁微粒保存液，应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性。实验结果如表4所示：
表3不同缓冲液类型的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000131
表4不同缓冲液类型时dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性
编号 缓冲液类型 dsDNA化学发光磁微粒免疫活性
1 PBS 375453
2 Tris-HCl 429098
3 HEPES 445554
4 HEPPSO 387960
由上表4的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性值可知，HEPES缓冲液最合适。
B.缓冲液浓度的选择
按照表5配制dsDNA化学发光磁微粒保存液，应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性。实验结果如表6所示：
表5不同缓冲液浓度的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000132
Figure BDA0002232894550000141
表6不同缓冲液类型时dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性
Figure BDA0002232894550000142
由上表6的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性可知，HEPES缓冲液浓度100mM最合适。
C.蛋白保护剂种类的选择
按照表7配制dsDNA化学发光磁微粒保存液，应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性。实验结果如表8所示：
表7不同蛋白保护剂的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000143
Figure BDA0002232894550000151
表8不同蛋白保护剂时dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性
编号 蛋白保护剂种类 dsDNA化学发光磁微粒免疫活性
1 牛血清白蛋白 432379
2 酪蛋白 304149
3 山梨醇 375984
4 甘油 313582
5 人血清白蛋白 445554
由表8所列的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性可知，人血清白蛋白最合适。
D.蛋白保护剂浓度的选择
按照表9配制dsDNA化学发光磁微粒保存液，应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性。实验结果如表10所示：
表9不同蛋白保护剂浓度的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000152
表10不同蛋白保护剂浓度时dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性
Figure BDA0002232894550000153
Figure BDA0002232894550000161
由表10所列的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性可知，人血清白蛋白10g/L浓度最合适。
E.赋形剂种类的选择
按照表11配制dsDNA化学发光磁微粒保存液，应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性。实验结果如表12所示：
表11不同赋形剂种类的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000162
表12不同赋形剂种类时dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性
编号 赋形剂种类 dsDNA化学发光磁微粒免疫活性
1 卡拉胶 402547
2 鱼明胶 445554
3 PEG2000 395874
由表12所列的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性可知，鱼明胶最合适。
F.赋形剂浓度的选择
按照表13配制dsDNA化学发光磁微粒保存液，将化学发光磁微粒放置4℃20h后观察化学发光磁微粒流动性，温育60℃60s后，观察化学发光磁微粒流动性。实验结果如表14所示：
表13不同鱼明胶浓度的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000171
表14不同鱼明胶浓度的化学发光磁微粒工作液的流动性
Figure BDA0002232894550000172
由表14所列的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性可知，鱼明胶20g/L浓度最合适。
G.防腐剂浓度的选择
按照表15配制dsDNA化学发光磁微粒保存液，应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性。实验结果如表16所示：
表15不同防腐剂浓度的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000173
Figure BDA0002232894550000181
表16不同防腐剂浓度时dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性
Figure BDA0002232894550000182
由表16所列的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性可知，防腐剂Proclin-300的体积含量0.4％最合适。
H.离子螯合剂浓度的选择
按照表17配制dsDNA化学发光磁微粒保存液，应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性。实验结果如表18所示：
表17不同EDTA浓度的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000183
表18不同EDTA浓度时dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性
稀释液编号 EDTA浓度 dsDNA化学发光磁微粒免疫活性
1 0.1mM 421478
2 1mM 445554
3 10mM 412569
由表18所列的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性可知，EDTA浓度1mM最合适。
I.封闭剂的选择
按照表19配制dsDNA化学发光磁微粒保存液，应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性。实验结果如表20所示：
表19不同封闭剂种类的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000191
表20不同封闭剂种类时dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性
Figure BDA0002232894550000192
由表20所列的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性可知，DB1130最合适。
J.封闭剂浓度的选择
按照表21配制dsDNA化学发光磁微粒保存液，应用富士全自动化学发光酶免疫分析***(LUMIPULSE G1200)检测dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性。实验结果如表22所示：
表21不同封闭剂浓度的化学发光磁微粒保存液
Figure BDA0002232894550000201
表22不同封闭剂浓度时dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性
编号 DB1130/体积含量 dsDNA化学发光磁微粒免疫活性
1 0.05％ 425874
2 0.50％ 445554
3 2％ 402147
由表22所列的dsDNA化学发光磁微粒的免疫活性可知，DB1130的体积含量为0.5％最合适。
由A-J研究结果可知，本申请实施例6提供的方案为最佳方案。
本申请提供的磁微粒保存液，解决了化学发光磁微粒在运输过程中容易受到试剂容器倾覆影响的问题，使化学发光磁微粒可以保存在4℃条件下，避免试剂容器倾覆造成的影响，在温育后仍可恢复良好的流动性，并且在4℃条件下保持化学发光磁微粒的稳定性，热加速稳定性偏差不超过10％。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
此外，本领域的技术人员能够理解，尽管在此的一些实施例包括其它实施例中所包括的某些特征而不是其它特征，但是不同实施例的特征的组合意味着处于本发明的范围之内并且形成不同的实施例。例如，在上面的权利要求书中，所要求保护的实施例的任意之一都可以以任意的组合方式来使用。公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在加深对本发明的总体背景技术的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域技术人员所公知的现有技术。

Claims (4)

1.一种磁微粒保存液用于制备dsDNA检测用免疫反应试剂的用途，其特征在于，所述磁微粒保存液由以下组分组成：
100mM，pH为8.0的HEPES缓冲液；
10g/L的人血清白蛋白；
20g/L的鱼明胶；
1mM的EDTA；
体积含量为0.4％的Proclin-300；
体积含量为0.5％的DB1130。
2.根据权利要求1所述的磁微粒保存液用于制备dsDNA检测用免疫反应试剂的用途，其特征在于，所述dsDNA检测用免疫反应试剂由dsDNA化学发光磁微粒与所述磁微粒保存液混合而制备获得。
3.根据权利要求2所述的磁微粒保存液用于制备dsDNA检测用免疫反应试剂的用途，其特征在于，所述dsDNA检测用免疫反应试剂在4℃、20h条件下为凝固态。
4.根据权利要求2所述的磁微粒保存液用于制备dsDNA检测用免疫反应试剂的用途，其特征在于，所述dsDNA检测用免疫反应试剂在60℃、60S条件下为流动态。
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