CN110448642A - 一种黄精发酵物、制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种黄精发酵物、制备方法及应用，属于生物医药制造技术领域。该制备方法选用乳酸菌类益生菌菌株作为发酵剂，将发酵剂接种至灭菌后的黄***液中发酵，得黄精发酵物；其中发酵剂由植物乳杆菌和短乳杆菌按照菌悬液体积比1:0‑10混合制得，发酵剂按1％‑30％的接种量接入灭菌后的黄***液中，并在20‑36.5℃下发酵10‑80h；本发明还公开了上述黄精发酵物以及上述黄精发酵物的应用。本发明的制备方法大幅度降低了黄精小分子糖类物质，利用高产氨基丁酸的乳酸菌菌株对黄精进行发酵，既去除了黄精中的小分子糖类，又保留了黄精中的皂苷及黄精多糖等降血糖相关活性成分；发酵产生的氨基丁酸等成分与黄精中的活性成分协同产生抗2型糖尿病作用。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药制造技术领域，具体涉及一种黄精发酵物、制备方法及应用。
背景技术
糖尿病是目前威胁人类健康的重大疾病之一。糖尿病是继心脑血管疾病和肿瘤之后危害人类健康的第三大疾病，其并发症包括高血脂、糖尿病肾病、糖尿病眼病、肝损伤、心血管疾病等。治疗糖尿病的一线药物如磺酰脲类、双胍类等需要长时间用药，药物费用较高，同时长时间用药容易引起低血糖、乳酸性酸中毒、腹胀、腹泻等毒副作用，因此，开发新型、高效、低毒的抗糖尿病药物或者辅助治疗用产品依然是生物医药领域研究的热点。
中医药在糖尿病治疗方面有长期的临床实践经验，发现了许多具有显著疗效的药物。其中黄精就是对糖尿病有显著疗效的中药之一。我国药典记载黄精为百合科植物滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.、黄精Polygonatum sibiricum Red.或多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua的干燥根茎。首载于《名医别录》，功效为：补气养阴，健脾，润肺，益肾。使用黄精相关的方剂治疗糖尿病的记载很多，如2015年版《中国药典》收载的渴乐宁胶囊、参精止渴丸均用于糖尿病的治疗，方中也以黄精为主要原料之一。也有大量的文献报道证实，黄精多糖、黄精总提取物均有较好的降血糖作用。
黄精作为国家卫计委规定的药食同源原料品种，本身具有一定的缓解糖尿病的作用，但由于黄精中的小分子糖类如蔗糖、葡萄糖和果糖含量较高，据我们测定，干燥黄精中的小分子糖类含量大多在10％左右，个别地方产的黄精小分子糖含量超过20％，由于现有技术黄精中的小分子糖含量高，因此不适合糖尿病患者食用。
发明内容
本发明的目的是为了克服黄精作为降血糖药物使用的缺陷，通过微生物发酵法除去黄精里的小分子糖类，从而提高黄精用于糖尿病的治疗效应。
本发明的目的之一是提供了一种黄精发酵物的制备方法，选用能产生氨基丁酸的乳酸菌类益生菌作为发酵剂，将发酵剂接种至灭菌后的黄***液中发酵，得黄精发酵物。
较佳地，发酵剂由植物乳杆菌和短乳杆菌按照菌悬液体积比1:0-10混合制得。
较佳地，发酵剂按体积百分比1％-30％的接种量接入灭菌后的黄***液中，并在20-36.5℃下发酵10-80h。
较佳地，黄***液的pH为6.0±2，当发酵液pH降低至3.0-3.5表示发酵完成。
较佳地，黄***液的制备方法如下：将新鲜的黄精或者干黄精洗净，粉碎，加水，得黄***液；黄***液经灭菌处理，得灭菌后的黄***液。
较佳地，黄***液中黄精干重：水的质量比为1：3～10。
较佳地，黄精发酵物经快速预冻结后，在真空条件下冷冻干燥，粉碎，得黄精发酵物冻干粉。
较佳地，菌悬液的浓度为1×106-1×108个/mL。
本发明的目的之二是提供上述黄精发酵物的制备方法所制备得到的黄精发酵物；
本发明的目的之三是提供黄精发酵物在制备治疗2型糖尿病的食品、药品或健康产品中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明通过发酵法大幅度降低了黄精小分子糖类物质，制备得到的黄精发酵物小分子糖含量明显降低，更适宜于2型糖尿病患者服用。
本发明利用高产氨基丁酸的乳酸菌菌株对黄精进行发酵，既可以有效去除黄精中的小分子糖类，又可以保留黄精中的皂苷及黄精多糖等降糖相关活性成分；而高产氨基丁酸的乳酸菌产生的氨基丁酸等成分也有一定的改善糖尿病症状的效应，可与黄精中的活性成分协同产生抗2型糖尿病作用。
本发明制备的黄精发酵物冻干粉能够应用于制备治疗2型糖尿病的食品、药品或健康产品中，如可将黄精发酵物冻干粉制作为代餐粉、食品、药品原料等用于治疗糖尿病。
附图说明
图1为本发明黄精多糖和黄精发酵物多糖红外色谱图；
图2为本发明PS和FPS对2型糖尿病小鼠空腹血糖的影响；
图3为本发明PS和FPS对2型糖尿病小鼠空腹胰岛素水平的影响；
图4为本发明PS和FPS对2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗指数的影响；
图5为本发明PS和FPS对2型糖尿病小鼠血清糖化血红蛋白的影响。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例一：
(1)原料前处理：
将新鲜的黄精或者干黄精洗净，去除霉变及虫蛀的部分，将其粉碎，黄精干重：水为1:4加水得黄***液，调节pH至6.5。
(2)灭菌：
将黄***液用高压灭菌锅在121℃下灭菌30min。
(3)接种发酵：
将培养好的植物乳杆菌CICC 24202(Lactobacillus plantarum，简称LP)，短乳杆菌YM 1301(Lactobacillus breris，简称LB)；
菌悬液以体积比为1:1混合制得发酵剂，按10％的接种量接入黄***液中，在36.5℃下发酵24h。
(4)冷冻干燥：
将黄精发酵产物于-20℃快速冻结后，在真空度为0.05～0.1MPa的冷冻干燥机干燥24h后粉碎，得冻干粉。
(5)黄精发酵物冻干粉可以直接包装作为具有降低血糖作用的代餐产品，每人每日食用量为5～30g左右。
本实施例的发酵过程使用的微生物为国家卫计委规定的可用于食品的菌种名单里包含的菌种，所选择菌种在发酵过程中，可以快速的利用黄精粉里含有的小分子糖类，以达到降低黄精里含有的不适宜糖尿病患者食用的小分子糖类的目的；另外，所选用的菌种也可以产生一些功能性成分，产生协同作用，促进健康的效应。
实施例二：
(1)原料前处理：
将新鲜的黄精或者干黄精洗净，去除霉变及虫蛀的部分，将其粉碎，黄精干重：水为1:10加水得黄***液，调节pH至6.2。
(2)灭菌：
将黄***液用高压灭菌锅在121℃下灭菌30min。
(3)接种发酵：
将LP菌株、LB菌株菌悬液以体积比为1:1混合制得发酵剂，按10％的接种量接入黄***中，在36.5℃下发酵24h。
(4)冷冻干燥：
将黄精发酵产物于-20℃快速冻结后，在真空度为0.05～0.1MPa的冷冻干燥机干燥24h后粉碎，得冻干粉。
(5)黄精发酵物冻干粉与其他辅料预处理混合，按照常规饮料生产工艺，经调浆、稳定化处理、调味、均质、灌装、灭菌、成品的过程，制作成饮料。原料预处理后按比例混合，用水或者果汁、蜂蜜等溶解，搅拌均匀；然后加入适量乳化稳定剂处理，充分搅拌，再加入其他调味物质，形成特定的风味，然后均质，形成比较均一的、稳定的胶体溶液；最后灌装，灭菌后包装为成品，作为具有降低血糖作用的饮料使用，每人每日饮用量按黄精发酵物冻干粉计为5～30g左右。
实施例三：
(1)原料前处理：
将新鲜的黄精或者干黄精洗净，去除霉变及虫蛀的部分，将其粉碎，黄精干重：水为1:5加水得黄***液，调节pH至6.5。
(2)灭菌：
将黄***液用高压灭菌锅在121℃下灭菌30min。
(3)接种发酵：
将LP菌株、LB菌株菌悬液以体积比为1:1混合制得发酵剂，按10％的接种量接入黄***中，在36.5℃下发酵24h。
(4)冷冻干燥：
将黄精发酵产物于-20℃快速冻结后，在真空度为0.05～0.1MPa的冷冻干燥机干燥24h后粉碎，得冻干粉。
(5)黄精发酵物冻干粉与食品原料如黄精提取物、甘草提取物、亚麻籽粉等混合，并添加常规调味物质，混匀后作为具有降血糖作用的多功能代餐粉使用，每人每日饮用量按黄精发酵物冻干粉计为5～30g左右。
实施例四：
(1)原料前处理：
将新鲜的黄精或者干黄精洗净，去除霉变及虫蛀的部分，将其粉碎，黄精干重：水为1:4加水得黄***液，调节pH至6.5。
(2)灭菌：
将黄***液用高压灭菌锅在121℃下灭菌30min。
(3)接种发酵：
将LP菌株、LB菌株菌悬液以体积比为1:1混合制得发酵剂，按10％的接种量接入黄***中，在36.5℃下发酵24h。
(4)冷冻干燥：
将黄精发酵产物于-20℃快速冻结后，在真空度为0.05～0.1MPa的冷冻干燥机干燥24h后粉碎，得黄精发酵物冻干粉。
(5)以制备含活性成分为黄精发酵物冻干粉咀嚼片1000片为例所用原料和辅料及其质量配比如下：黄精发酵物冻干粉1435g,糊精45g，硬脂酸镁5g，阿斯巴甜15g,按制剂学片剂的常规工艺进行，每片重1.5g，每片含黄精发酵物冻干粉1.43g。用法用量：口服，每次3～6片，一日三至五次，每人每日饮用量按黄精发酵物冻干粉计为5～30g左右。
实施例五：
(1)原料前处理：
将新鲜的黄精或者干黄精洗净，去除霉变及虫蛀的部分，将其粉碎，黄精干重：水为1:4加水得黄***液，调节pH至6.5。
(2)灭菌：
将黄***液用高压灭菌锅在121℃下灭菌30min。
(3)接种发酵：
将LP菌株、LB菌株菌悬液以体积比为1:1混合制得发酵剂，按10％的接种量接入黄***中，在36.5℃下发酵24h。
(4)冷冻干燥：
将黄精发酵产物于-20℃快速冻结后，在真空度为0.05～0.1MPa的冷冻干燥机干燥24h后粉碎，得冻干粉。
(5)以制备含活性成分为黄精黄精发酵物冻干粉物面包为例所用原料和辅料及其质量配比如下：黄精发酵物冻干粉80g，蔗糖粉850g面粉，植物油50g，活性酵母20g。按照常规面包制作工艺制作面包。每人每天食用面包250g，含黄精发酵物冻干粉20g。
在如饼干、蛋糕等食品中，也可以加入黄精发酵物冻干粉，按每人每天黄精发酵物冻干粉的食用量5～30g为宜。
实施例六
(1)原料前处理：
将新鲜的黄精或者干黄精洗净，去除霉变及虫蛀的部分，将其粉碎，黄精干重：水为1:4加水得黄***液，调节pH至6.5。
(2)灭菌：
将黄***液用高压灭菌锅在121℃下灭菌30min。
(3)接种发酵：
将LP菌株按10％的接种量接入黄***中，在36.5℃下发酵24h。
(4)冷冻干燥：
将黄精发酵产物于-20℃快速冻结后，在真空度为0.05～0.1MPa的冷冻干燥机干燥24h后粉碎，得黄精发酵物冻干粉。
(5)以制备含活性成分为黄精发酵物冻干粉咀嚼片1000片为例所用原料和辅料及其质量配比如下：黄精发酵物冻干粉1435g,糊精45g，硬脂酸镁5g，阿斯巴甜15g,按制剂学片剂的常规工艺进行，每片重1.5g，每片含黄精发酵物冻干粉1.43g。用法用量：口服，每次3～6片，一日三至五次，每人每日饮用量按黄精发酵物冻干粉计为5～30g左右。
实施例七
(1)原料前处理：
将新鲜的黄精或者干黄精洗净，去除霉变及虫蛀的部分，将其粉碎，黄精干重：水为1:4加水得黄***液，调节pH至6.5。
(2)灭菌：
将黄***液按照厚度5cm均匀平铺于微波炉内部托盘上，灭菌时间为240s，灭菌功率为6 000W。
(3)接种发酵：
将LP菌株、LB菌株菌悬液以体积比为1:1混合制得发酵剂，按10％的接种量接入黄***中，在36.5℃下发酵24h。
(4)冷冻干燥：
将黄精发酵产物于-20℃快速冻结后，在真空度为0.05～0.1MPa的冷冻干燥机干燥24h后粉碎，得冻干粉。
(5)以制备含活性成分为黄精黄精发酵物冻干粉物面包为例所用原料和辅料及其质量配比如下：黄精发酵物冻干粉80g，蔗糖粉850g面粉，植物油50g，活性酵母20g。按照常规面包制作工艺制作面包。每人每天食用面包250g，含黄精发酵物冻干粉20g。
在如饼干、蛋糕等食品中，也可以加入黄精发酵物冻干粉，按每人每天黄精发酵物冻干粉的食用量5～30g为宜。
我们检测了黄精发酵前后小分子糖类、总多糖、及黄精发酵物冻干粉氨基丁酸的含量变化，证实经过发酵处理后，黄精发酵物冻干粉中的小分子糖类含量显著降低，功能因子氨基丁酸含量明显提高。药效学实验证实黄精发酵物冻干粉对2型糖尿病相关症状有明显的改善作用。相关实验如下：
一黄精发酵处理后相关主要成分的变化研究
1材料与方法
1.1实验材料
黄精购自商南县，经鉴定为百合科植物黄精(P.sibiricum Red.)的根茎。试验用菌株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum，简称LP)CICC 24202，购于中国工业微生物菌种保藏管理中心；短乳杆菌(Lactobacillus breris，简称LB)YM 1301，保存于云南省微生物研究所。
其他化学试剂均为市购普通试剂。
1.2实验方法
1.2.1黄精发酵物冻干粉的制备
干燥黄精经清洗后粉碎，以料液比1:4(m/V)的比例加入水，混合均匀后即得黄***液，调节其pH至6.0±0.5，分装后用高压蒸汽灭菌锅在121℃下灭菌20min；灭菌后的黄***液按LP：LB＝1：1(V/V)的比例接入10％的菌悬液(调整菌悬液浓度为1×108个/mL。)，拌匀后于36℃发酵60h；将发酵黄***于-20℃快速冻结后，在真空度为0.05～0.1MPa的冷冻干燥机干燥24h后粉碎，得黄精发酵物冻干粉。
1.2.2葡萄糖含量的测定
葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法，葡萄糖测定试剂盒(上海荣盛生物药业有限公司)，按照试剂盒说明书操作。分别准确称取黄精粉、黄精发酵物冻干粉各500.0mg，分别溶于10.0mL蒸馏水中，离心取上清作为待测样本。
1.2.3总还原糖含量测定
总还原糖含量测定用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法.以葡萄糖为标准品，制作标准曲线；分别准确称取黄精粉、黄精发酵物冻干粉50.0mg溶于100mL蒸馏水中，离心，取上清，各取1.0mL上清液，分别加入2.0mL DNS试剂，振荡混匀，90℃水浴加热5min，然后于室温冷却20min，再向每支试管中加2.0mL蒸馏水将体积补至4.0mL，混匀。测定520nm处的吸光值。根据标准曲线计算待测样品中还原糖浓度。
1.2.4多糖含量测定
黄精发酵物冻干粉中多糖含量测定采用苯酚-硫酸法。精确称取干燥至恒重的黄精粉末和黄精发酵物冻干粉各1.00g于50mL锥形瓶中，分别加入20倍量的蒸馏水，于沸水浴中加热提取2h，重复提取3次，合并提取液后，将提取液浓缩至原体积的1/10，向滤液中加入4倍体积的95％乙醇，静置12h，离心弃去上清，下层部分再用95％乙醇反复醇沉2次，离心后所得沉淀，冷冻干燥后即为多糖部分；精确称取上述多糖各50mg，用蒸馏水溶解后定容至500mL，配成0.1mg/mL的待测液。精确吸取1.0mL待测样液于3支10mL具塞试管中，之后向各组中加1.0mL 5％苯酚溶液，轻轻振荡混匀，然后再向各组中缓慢加入5.0mL浓硫酸，充分振荡混匀，于90℃水浴20min，室温冷却30min后，测定490nm波长处的吸光值。以葡萄糖为标准品制作标准曲线，计算样品中多糖含量。
1.2.5多糖的红外色谱分析(IR)
多糖的提取方法同1.2.4(多糖部分的提取)
将黄精多糖和黄精发酵物冻干粉的黄精多糖分别自与KBr按1:100的比例置于经无水乙醇擦洗的干燥洁净玛瑙研钵中，将两者混匀，用研磨锤用力研磨至细粉状，将适量细粉状混合物置于酒精擦洗后干净的压片模具中，加压1min左右，制成透明样薄片。将压好的完整透明样薄片置于红外色谱仪样品架上，在4000-400cm-1范围内扫描，先测空白背景，再测PSP、FPSP的IR，并记录结果。
1.2.6氨基丁酸的测定--HPLC法
色谱条件如下：DiamonsilC18色谱柱，柱温30℃，规格为250mm×4.6mm，紫外检测波长254nm，进样量20μL。流动相A为甲醇，流动相B为四氢呋喃-甲醇-0.05mol/L醋酸钠(pH6.2)，比例为(5:75:420)，流速0.8mL/min，梯度洗脱。
样品制备方法：分别称取黄精粉和黄精发酵物冻干粉1.00g，加入100mL蒸馏水，超声提取30min，过滤。取滤液100μL，加入0.4mol/L的硼酸缓冲液1mL和邻苯二甲醛(OPA)衍生液200μL，混匀后，衍生化反应30min，取10μL进样测定。
标准曲线制作：以氨基丁酸(GABA)标准溶液浓度为横坐标，通过高效液相色谱法测得峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，建立回归方程。
2实验结果
2.1葡萄糖含量
表1-1发酵前后黄精中葡萄糖含量的变化(n＝3)
注：字母A、B表示两者之间经t检验，差异有极显著意义(p<0.01)表1-1可知，黄精中葡萄糖的含量由发酵前的1.04％下降到了发酵后的0.39％，数据差异有显著意义，该数据与之前预测的结果一致，说明发酵能降低黄精中葡萄糖的含量。
2.2总还原糖含量
经计算，葡萄糖标准曲线为y＝2.6434x+0.0048，R2＝0.9973；利用标准曲线计算样品中的还原糖含量，结果如表1-2。由表1-2可知，发酵前后还原糖的含量也有明显的下降，从9.47％下降到了3.83％，数据差异有显著意义；还原糖主要是由具有还原性的单糖和二糖如葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等小分子糖类组成，多糖一般不具有还原性。还原性糖含量的下降，说明发酵后黄精中的小分子糖类含量下降。
表1-2发酵前后黄精中还原糖含量的变化(n＝3)
注：字母A、B表示两者之间经t检验，差异有极显著意义(p<0.01)
2.3多糖含量
经计算，以葡萄糖为标准品，利用苯酚-硫酸法制作标准曲线的方程为y＝6.1811x+0.0443，R2＝0.9975；样品测量值代入标准曲线计算结果如表1-3所示，从表中可以看出，发酵后的黄精多糖含量高于发酵前黄精多糖的含量，差异具有显著意义(p<0.01)。黄精多糖作为黄精最主要的活性成分之一，已有大量的文献证明黄精多糖具有降血糖、降血脂等作用，发酵后的黄精多糖含量的升高可能是由于小分子糖类的消耗而使得多糖的相对含量提高，也有可能是发酵过程中菌株在代谢过程中产生了一些多糖。
表1-3发酵前后黄精中多糖含量的变化
注：字母A、B表示两者之间经t检验，差异有极显著意义(p<0.01)
2.4红外色谱分析
黄精多糖(PSP)和黄精发酵物冻干粉黄精多糖(FPSP)的红外光谱如图1所示：(波数4000cm-1-400cm-1中红外区)，PSP和FPSP在3429cm-1、1635cm-1、1394cm-1、1065cm-1处有共同的特征峰，这几个峰是多糖的特征吸收峰。在3429cm-1处的吸收峰是O-H伸缩振动的特征峰；而在1635cm-1处的中等强度的吸收峰是由C＝O伸缩振动引起的，提示两种多糖中可能还有糖醛酸；1394cm-1处的吸收峰是C-H弯曲振动的特征峰；1065cm-1处的吸收峰为多糖的特征吸收峰。
对两种多糖的红外光谱图进行对比，可以发现黄精多糖(PSP)和发酵后的黄精多糖(FPSP)吸收峰相似度较高，表明发酵前后多糖的变化较小。1600cm-1～1000cm-1处的指纹峰有细微的区别，可能是发酵过程中乳酸菌代谢产生了一些新的物质所致。
2.5氨基丁酸的含量
按照1.2.6方法，以GABA标准溶液浓度为横坐标，通过高效液相色谱法测得峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，建立回归方程，即为：y＝0.0803x-2.0728，R2＝0.9992。测得样品的相应峰面积代入标准曲线方程计算，得出样品中氨基丁酸的含量如下表。证实经上述两种菌株发酵后，黄精发酵物冻干粉中含有活性成分氨基丁酸。
表1-4发酵前后黄精中氨基丁酸含量的变化
3实验结论
综合以上结果可以看出，在黄精发酵的过程中，植物乳杆菌(LP)和短乳杆菌(LB)有效的降低了黄精中的葡萄糖和其他小分子糖类含量，同时黄精中与其降血糖效应相关的活性物质如多糖类成分含量有小幅升高，发酵处理后多糖相对含量提高，所以发酵处理后的黄精更适于糖尿病患者食用。由于发酵过程中产生的氨基丁酸类物质对糖尿病患者相关症状也有较好的改善效应，所以发酵后的黄精在理论上对糖尿病应该有更好的治疗效应。
二、黄精发酵物冻干粉改善2型糖尿病的药效学研究
2.1材料与方法
2.1.1实验材料
黄精购自商南县，经鉴定为百合科植物黄精(P.sibiricum Red.)的根茎。黄精发酵物冻干粉的制备同前述方法，干燥黄精经清洗后粉碎，以料液比1:4(m/V)的比例加入水，混合均匀后即得黄***，调节其pH至6.0±0.5，分装后用高压蒸汽灭菌锅在121℃下灭菌20min；灭菌后的黄***按LP：LB＝1：1(V/V)的比例接入10％的菌悬液(调整菌悬液浓度为1×108个/mL)，拌匀后于37℃发酵60h；将发酵黄***于-20℃快速冻结后，在真空度为0.05～0.1MPa的冷冻干燥机干燥24h后粉碎，得黄精发酵物冻干粉。
主要试剂：链脲佐菌素(STZ)(Sigama公司，C3H15N3O7)，盐酸二甲双胍(山东明仁福瑞达物制药股份有限公司)，小鼠胰岛素(INS)ELISA检测试剂盒(上海酶远生物)，小鼠糖化血红蛋白(GHb)ELISA检测试剂盒(上海酶远生物)，小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA检测试剂盒(上海酶远生物)，总胆固醇(T-CHO)测试盒(南京建成生物工程研究所)，甘油三酯(TG)测试盒(南京建成生物工程研究所)，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测试盒(南京建成生物工程研究所)，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测试盒(南京建成生物工程研究所)。
其他化学试剂均为市购普通试剂。
2.1.2实验动物
雄性昆明小鼠，18g±2g，购自西安交通大学医学部实验动物中心,动物生产许可证号SCXK(陕)2017-003。
2.1.3实验动物分组及处理
雄性昆明小鼠100只，体重18g±2g，饲养于动物房，洁净级，恒温22±1℃，相对湿度40％-70％，12h光照，给予标准的实验饲料和自由饮水，适应性饲养一周后开始实验。动物的分组及处理方法如表2-1所示：将小鼠随机分成2组：正常对照组(Normal Control，N.control)和造模组,正常对照组(10只)给予普通饲料，造模组(90只)给与高脂饲料(HighFat Diet，HFD)。通过高脂饲料喂养联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射破坏胰岛细胞诱导2型糖尿病小鼠模型。高脂饲料喂养4周后，禁食不禁水12h，腹腔注射70mg/kg STZ(STZ溶于0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，pH：4.4，配制成浓度为1％的溶液，现配现用。正常对照组注射相应体积的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液)，72h后以相同的剂量再次注射STZ，第二次注射STZ 72h后用血糖仪测定空腹血糖，空腹血糖＞11.1mmol/L并且在3周后空腹血糖仍＞11.1mmol/L的小鼠认为造模成功的糖尿病模型小鼠。
将造模成功的小鼠随机分成6组：模型组(Model)、阳性药组(Positive Control，P.control)、黄精组(Polygonatum Sibiricum,PS)、黄精+LP和LB混合菌冻干粉组(PS+LP+LB，LP和LB分别在MRS液体培养基中培养后，菌悬液等比例混合后冷冻干燥，制备乳酸菌冻干粉，按实验一中2.5方法测定乳酸菌冻干粉中的氨基丁酸含量后，将乳酸菌冻干粉与未发酵黄精粉混合，使得混合物中的氨基丁酸含量与黄精发酵物冻干粉中含量相当。)黄精发酵物冻干粉低剂量组(Low Dose of Fermented Polygonatum Sibiricum,FPSL)、黄精发酵物冻干粉高剂量组(High Dose of Fermented Polygonatum Sibiricum,FPSH)。
N.control组：给予普通饲料，正常饮食饮水，每日灌胃同等体积的生理盐水；
Model组：给予高脂饲料，正常饮食饮水，每日灌胃同等体积的生理盐水；
P.control组：给予高脂饲料，正常饮食饮水，每日灌胃盐酸二甲双胍150mg/kg；
PS组：给予高脂词料，正常饮食饮水，每日灌胃黄精粉0.5g/kg；
PS+LB+LP组：给予高脂词料，正常饮食饮水，每日灌胃黄精+LP和LB混合菌冻干粉0.5g/kg；
FPSL组：给予高脂词料，正常饮食饮水，每日灌胃黄精发酵物冻干粉冻干粉0.25g/kg；
FPSH组：给予高脂词料，正常饮食饮水，每日灌胃黄精发酵物冻干粉冻干粉0.5g/kg。
表2-1实验动物分组和给药情况
实验期间，每天观察动物的活泼程度、毛色、光滑程度、精神状态等，并监测小鼠的饮食饮水量、尿量和体重。连续给药4周，末次给药后小鼠禁食不禁水12h，每只小鼠称重并测定空腹血糖后于眼眶静脉丛取血，离心取血清，分装后于-20℃保存，用于后续测定。
2.2实验测试指标及方法
2.2.1动物体重检测
小鼠分别于给药前和给药结束后，禁食不禁水12h后，称量并记录其体重。
2.2.2空腹血糖检测
小鼠分别于给药前后，禁食不禁水12h后，测其空腹血糖值。
2.2.3口服葡萄糖耐量测定
小鼠处死前1周行口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test，OGTT)。试验前隔夜禁食不禁水12h，以2g/kg的剂量灌胃给与葡萄糖。血糖采血点为空腹、负荷后30min、60min和120min，以三诺稳定血糖仪测定尾静脉血血糖值。各个时间点的血糖值记为G0、G30、G60、G120，根据检测结果绘制葡萄糖耐量曲线图，并计算曲线下面积(area under thecurve，AUC)。计算公式为:AUC(mmol/L)＝(1/2×G0+G30+G60+1/2×G120)/2。
2.2.4胰岛素耐量检测
小鼠处死前3天行胰岛素耐量试验(insulin tolerance test，ITT)。试验前禁食2h，测定0min尾静脉血血糖值并立即腹腔注射0.75IU/kg胰岛素，注射后30min、60min、120min分别测定尾静脉血血糖值，各个时间点的血糖值记为G0、G30、G60、G120，根据检测结果绘制胰岛素耐量曲线图，并计算曲线下面积(AUC)。计算公式为:AUC(mmol/L)＝(1/2×G0+G30+G60+1/2×G120)/2。
2.2.5空腹胰岛素水平测定
按照试剂盒说明操作，检测小鼠血清空腹胰岛素水平的含量。依下式计算胰岛素抵抗指数：
HOMA-IR＝空腹血糖(FPG)×空腹胰岛素(FINS)/22.5
2.2.6血清糖化血红蛋白测定
按照相应的试剂盒说明操作，检测小鼠血清糖化血红蛋白的含量。
2.2.7血脂测定
血清中总胆固醇(Total Cholesterol,T-CHO)、总甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量的测定均按照试剂盒说明进行。
2.2.8胰高血糖素样肽1的测定
按照试剂盒说明操作，检测小鼠血清中胰高血糖素样肽1(GLP-1)的含量。
2.2.9数据统计处理方法
采用软件SPSS 16.0和GraphPad Prism 5分析处理数据，以平均值±标准误(Mean±SEM)的方式表达数据。组间显著性差异的分析则采用t检验，P<0.05表示统计学差异显著，P<0.01则表示统计学差异极显著。
3实验结果
3.1、FPS对2型糖尿病小鼠体重的影响
如表2-2所示，治疗前各组小鼠的体重与正常组小鼠比较均有明显下降，且差异有显著意义，治疗4周后，模型组的小鼠体重仍有所下降，其他几组给药组小鼠的体重均有所上升。另外，观察到在给药治疗的过程中，模型组小鼠活动减少，出汗增多，毛发不光滑，出汗较多，而其他给药组则比较活跃，毛发光滑，状态较好。
表2-2 FPS对2型糖尿病小鼠体重的影响(n＝10)
注：N.control：正常组；Model：模型组；P.control：阳性对照组；PS：黄精组；PS+LP+LB:黄精粉乳酸菌混合物组；FPSL：发酵黄精发酵物冻干粉低剂量组；FPSH：黄精发酵物冻干粉高剂量组；*p<0.05，**p<0.01表示与模型组相比较；#p<0.05，##p<0.01表示与正常组相比较。
3.2、FPS对2型糖尿病小鼠空腹血糖的影响
图2中N.control：正常组；Model：模型组；P.control：阳性对照组；PS：黄精组；PS+LP+LB:黄精粉乳酸菌混合物组；FPSL：黄精发酵物冻干粉低剂量组；FPSH：黄精发酵物冻干粉高剂量组；*p<0.05，**p<0.01表示与Model相比较；##p<0.01表示与N.control相比较；
如图2所示，治疗前，糖尿病小鼠的空腹血糖显著高于正常组，治疗4周后，模型组小鼠的空腹血糖较治疗前有所上升，而其余各治疗组的小鼠空腹血糖均有明显下降。与模型组相比，差异有显著性意义；黄精发酵物冻干粉高剂量组的血糖相比模型组差异有极显著意义，表明黄精发酵物冻干粉具有明显的降血糖效应，并且其治疗效果具有剂量依赖效应。与未发酵黄精组、黄精粉乳酸菌混合物组相比较，相同剂量下黄精发酵物冻干粉的空腹血糖较低，但差异无显著意义。
3.3、PS和FPS对2型糖尿病小鼠口服葡萄糖耐量的影响
如表2-3所示，2型糖尿病小鼠的口服葡萄糖耐量受损，口服葡萄糖后不能很快使血糖恢复至起始水平，给药治疗后，各给药组的糖耐量受损程度均有所缓解。其中黄精发酵物冻干粉的治疗效果具有显著意义，即黄精发酵物冻干粉高剂量组的葡萄糖曲线下面积(AUC)与模型组和未发酵黄精组之间差异均有极显著性意义(p<0.01)。此外，葡萄糖负荷后30min，各组小鼠的血糖值都达到了高峰，而到葡萄糖负荷后60min时，除模型组外，其余各治疗组血糖均有明显下降，且黄精发酵物冻干粉高剂量组与模型组和黄精组、黄精粉乳酸菌混合物组相比较均有显著性差异(p<0.05)。说明黄精发酵物冻干粉缓解2型糖尿病葡萄糖耐量受损的效果明显优于黄精。
表2-3 PS和FPS对2型糖尿病小鼠OGTT、AUC的影响(n＝10)
注：N.control：正常组；Model：模型组；P.control：阳性对照组；PS：黄精组；PS+LP+LB:黄精粉乳酸菌混合物组；FPSL：黄精发酵物冻干粉低剂量组；FPSH：黄精发酵物冻干粉高剂量组；*p<0.05，**p<0.01表示与Model相比较；#p<0.05，##p<0.01表示与N.control相比较；△p<0.05，△△p<0.01表示与PS相比较；▽p<0.05，▽▽p<0.01表示与FPSH相比较。
3.4、PS和FPS对2型糖尿病小鼠胰岛素耐量的影响
2型糖尿病是以胰岛素抵抗为主要病因的糖尿病，如表2-4所示，模型组小鼠表现出了明显的胰岛素抵抗现象，即注射完胰岛素之后，其血糖值并没有明显的下降趋势，而各个治疗组小鼠在注射胰岛素30min后血糖均有明显的下降，到120min时血糖值开始回升，黄精组的血糖值回升得最明显，且其血糖值与发酵黄精低剂量组和高剂量组均有极显著差异(p<0.01)；另外，黄精发酵物冻干粉高剂量组的AUC与黄精组的差异也有显著性意义(p<0.05)。黄精组与黄精粉乳酸菌混合物组的差异无显著意义。综合来看，黄精发酵物冻干粉的疗效要优于黄精，并且其治疗效果差异具有显著性意义(p<0.05)。
表2-4 PS和FPS对2型糖尿病小鼠ITT、AUC的影响(n＝10)
注：N.control：正常组；Model：模型组；P.control：阳性对照组；PS：黄精组；PS+LP+LB:黄精粉乳酸菌混合物组；FPSL：黄精发酵物冻干粉低剂量组；FPSH：黄精发酵物冻干粉高剂量组；*p<0.05，**p<0.01表示与Model相比较；
#p<0.05，##p<0.01表示与N.control相比较；△p<0.05，△△p<0.01表示与PS相比较；▽p<0.05，▽▽p<0.01表示与FPSH相比较。
3.5、PS和FPS对2型糖尿病小鼠空腹胰岛素水平和胰岛素抵抗指数的影响
图3和图4中，N.control：正常组；Model：模型组；P.control：阳性对照组；PS：黄精组；PS+LP+LB:黄精粉乳酸菌混合物组；FPSL：黄精发酵物冻干粉低剂量组；FPSH：黄精发酵物冻干粉高剂量组；*p<0.05，**p<0.01表示与Model相比较；##p<0.01表示与N.control相比较；△p<0.05，△△p<0.01表示与PS相比较；▽▽p<0.01表示与FPSH相比较。
如图3，图4所示，2型糖尿病模型组小鼠的空腹胰岛素水平升高，胰岛素抵抗指数也显著升高，这与2型糖尿病的胰岛素抵抗相关。各治疗组均能降低2型糖尿病小鼠的空腹胰岛素水平，缓解胰岛素抵抗，其中黄精发酵物冻干粉高剂量组的效果最好，与黄精组相比，黄精发酵物冻干粉低剂量组显著性差异(p<0.05)，黄精发酵物冻干粉高剂量组在降低空腹胰岛素水平缓解胰岛素抵抗方面均具有极显著差异(p<0.01)，黄精发酵物冻干粉组与黄精组、黄精粉乳酸菌混合物组的差异也有显著意义。说明黄精发酵物冻干粉在治疗2型糖尿病患者胰岛素抵抗方面的疗效明显优于未发酵黄精及黄精粉乳酸菌混合物组。
3.6、PS和FPS对2型糖尿病小鼠糖化血红蛋白的影响
图5中N.control：正常组；Model：模型组；P.control：阳性对照组；PS：黄精组；PS+LP+LB:黄精粉乳酸菌混合物组；FPSL：黄精发酵物冻干粉低剂量组；FPSH：黄精发酵物冻干粉高剂量组；*p<0.05，**p<0.01表示与Model相比较；##p<0.01表示与N.control相比较；△△p<0.01表示与PS相比较；▽▽p<0.01表示与FPSH相比较。
如图5所示，模型组的糖化血红蛋白显著增高，各治疗组的小鼠糖化血红蛋白均显著下降，发酵后的黄精无论高剂量还是低剂量组的效果均优于未发酵的黄精组及黄精粉乳酸菌混合物组，且差异均具有极显著意义(p<0.01)。可能是发酵后，其有效成分发生了变化，糖化血红蛋白的下降说明发酵后的黄精在长期控制血糖方面的效果优于未发酵黄精。
3.7、PS和FPS对2型糖尿病小鼠血脂的影响
如表2-5所示，黄精发酵物冻干粉具有降低2型糖尿病小鼠的甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白的作用，且效果优于未发酵黄精组。在本实验中，因为使用了高脂高胆固醇饲料，2型糖尿病小鼠的甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白以及高密度脂蛋白均高于正常组，治疗组的各项指标均有下降，其中高密度脂蛋白也略有下降但仍旧高于正常组。表明黄精发酵物冻干粉具有降血脂作用。
表2-5 PS和FPS对2型糖尿病小鼠血脂的影响(n＝10)
注：N.control：正常组；Model：模型组；P.control：阳性对照组；PS：黄精组；PS+LP+LB:黄精粉乳酸菌混合物组；FPSL：黄精发酵物冻干粉低剂量组；FPSH：黄精发酵物冻干粉高剂量组；*p<0.05，**p<0.01表示与Model相比较；#p<0.05，##p<0.01表示与N.control相比较。
3.8、PS和FPS对2型糖尿病小鼠胰高血糖素样肽-1的影响
胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是机体中一种重要的肽类激素，通过抑制胰高血糖素的分泌来发挥降糖作用，即作用于胰岛α和β细胞可以减少胰高血糖素的分泌。从表2-6可以看出，模型组的GLP-1的分泌量明显降低，各治疗组的GLP-1分泌量均有所上升，其中黄精发酵物冻干粉的治疗效果最好，且与黄精组、黄精粉乳酸菌混合物组相比，黄精发酵物冻干粉高剂量组能够显著增加GLP-1的分泌(p<0.05)。
表2-6 PS和FPS对2型糖尿病小鼠血清胰高血糖素样肽1含量的影响(n＝10)
注：N.control：正常组；Model：模型组；P.control：阳性对照组；PS：黄精组；PS+LP+LB:黄精粉乳酸菌混合物组；FPSL：黄精发酵物冻干粉低剂量组；FPSH：黄精发酵物冻干粉高剂量组；**p<0.01表示与Model相比较；##p<0.01表示与N.control相比较；△p<0.05表示与PS相比较。
4、结论
综合以上结果，可以看出黄精和黄精发酵物冻干粉均能明显改善2型糖尿病小鼠的口服葡萄糖耐量受损和胰岛素抵抗，能降低2型糖尿病小鼠的空腹血糖和餐后血糖以及其血脂水平，同时也能减少附睾脂肪的蓄积。尤其从胰岛素耐量、空腹胰岛素水平、糖化血红蛋白、胰高血糖素样肽1等指标的检测结果可以看出，黄精发酵物冻干粉对2型糖尿病小鼠的治疗效果明显优于未发酵处理的黄精粉，而黄精粉乳酸菌粉混合物与未发酵黄精的在相关指标上无明显差异，治疗效应相当。
本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例，但本领域的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对实施例作出另外的变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型，而不脱离本发明的精神和范围，这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明的权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (10)
1.一种黄精发酵物的制备方法，其特征在于，选用能产生氨基丁酸的乳酸菌类益生菌作为发酵剂，将发酵剂接种至灭菌后的黄***液中发酵，得黄精发酵物。
2.如权利要求1所述的一种黄精发酵物的制备方法，其特征在于，所述发酵剂由植物乳杆菌和短乳杆菌按照菌悬液体积比1:0-10混合制得。
3.如权利要求1所述的一种黄精发酵物的制备方法，其特征在于，所述发酵剂按体积百分比1％-30％的接种量接入灭菌后的黄***液中，并在20-36.5℃下发酵10-80h。
4.如权利要求1所述的一种黄精发酵物的制备方法，其特征在于，所述黄***液的pH为6.0±2，当发酵液pH降低至3.0-3.5表示发酵完成。
5.如权利要求1所述的一种黄精发酵物的制备方法，其特征在于，所述黄***液的制备方法如下：将新鲜的黄精或者干黄精洗净，粉碎，加水，得黄***液；黄***液经灭菌处理，得灭菌后的黄***液。
6.如权利要求1所述的一种黄精发酵物的制备方法，其特征在于，所述黄***液中黄精干重：水的质量比为1：3～10。
7.如权利要求1所述的一种黄精发酵物的制备方法，其特征在于，所述黄精发酵物经快速预冻结后，在真空条件下冷冻干燥，粉碎，得黄精发酵物冻干粉。
8.如权利要求1所述的黄精发酵物的制备方法，其特征在于，所述菌悬液的浓度为1×106-1×108个/mL。
9.权利要求1-8任意一项黄精发酵物的制备方法制备得到的黄精发酵物。
10.如权利要求9所述的黄精发酵物在制备治疗2型糖尿病的食品、药品或健康产品中的应用。
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Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111437232A (zh) * | 2020-04-24 | 2020-07-24 | 中国中医科学院中药研究所 | 一种中药复方氨基酸洗发水及其制备方法 |
| CN111493273A (zh) * | 2020-05-20 | 2020-08-07 | 云南煜欣农林生物科技有限公司 | 一种滇黄精发酵液制备方法 |
| CN112773864A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-05-11 | 益生活力健康科技(厦门)有限公司 | 乳酸菌发酵技术在中药材黄精加工制作中的生产应用 |
| CN113384600A (zh) * | 2021-05-28 | 2021-09-14 | 陕西师范大学 | 一种灭活乳酸菌复合物在制备治疗和/或预防糖尿病产品中的应用 |
| CN113425762A (zh) * | 2021-07-28 | 2021-09-24 | 陕西师范大学 | 一种桑葚发酵产物及其制备方法和应用 |
| CN115006489A (zh) * | 2022-06-09 | 2022-09-06 | 山东中医药大学附属医院 | 一种具有降血压功效的发酵黄精提取物、制备方法与应用 |
| CN117256865A (zh) * | 2023-10-12 | 2023-12-22 | 上海诺德生物实业有限公司 | 一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物及其制备方法与应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106983054A (zh) * | 2017-04-25 | 2017-07-28 | 怀化学院 | 一种黄精乳酸发酵保健饮料及其制备方法 |
| CN108096453A (zh) * | 2017-12-18 | 2018-06-01 | 四川长重宝生物工程有限责任公司 | 一种复合菌种发酵黄精的制备方法 |
| CN108936155A (zh) * | 2018-06-26 | 2018-12-07 | 成都煜泉绿健科技有限公司 | 一种黄精功能性乳酸菌饮料制备方法 |
-
2019
- 2019-08-30 CN CN201910817897.XA patent/CN110448642B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106983054A (zh) * | 2017-04-25 | 2017-07-28 | 怀化学院 | 一种黄精乳酸发酵保健饮料及其制备方法 |
| CN108096453A (zh) * | 2017-12-18 | 2018-06-01 | 四川长重宝生物工程有限责任公司 | 一种复合菌种发酵黄精的制备方法 |
| CN108936155A (zh) * | 2018-06-26 | 2018-12-07 | 成都煜泉绿健科技有限公司 | 一种黄精功能性乳酸菌饮料制备方法 |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111437232A (zh) * | 2020-04-24 | 2020-07-24 | 中国中医科学院中药研究所 | 一种中药复方氨基酸洗发水及其制备方法 |
| CN111493273A (zh) * | 2020-05-20 | 2020-08-07 | 云南煜欣农林生物科技有限公司 | 一种滇黄精发酵液制备方法 |
| CN111493273B (zh) * | 2020-05-20 | 2023-08-29 | 云南煜欣农林生物科技有限公司 | 一种滇黄精发酵液制备方法 |
| CN112773864A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-05-11 | 益生活力健康科技(厦门)有限公司 | 乳酸菌发酵技术在中药材黄精加工制作中的生产应用 |
| CN113384600A (zh) * | 2021-05-28 | 2021-09-14 | 陕西师范大学 | 一种灭活乳酸菌复合物在制备治疗和/或预防糖尿病产品中的应用 |
| CN113384600B (zh) * | 2021-05-28 | 2024-04-12 | 陕西师范大学 | 一种灭活乳酸菌复合物在制备治疗和/或预防糖尿病产品中的应用 |
| CN113425762A (zh) * | 2021-07-28 | 2021-09-24 | 陕西师范大学 | 一种桑葚发酵产物及其制备方法和应用 |
| CN115006489A (zh) * | 2022-06-09 | 2022-09-06 | 山东中医药大学附属医院 | 一种具有降血压功效的发酵黄精提取物、制备方法与应用 |
| CN115006489B (zh) * | 2022-06-09 | 2024-04-30 | 山东中医药大学附属医院 | 一种具有降血压功效的发酵黄精提取物、制备方法与应用 |
| CN117256865A (zh) * | 2023-10-12 | 2023-12-22 | 上海诺德生物实业有限公司 | 一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物及其制备方法与应用 |
| CN117256865B (zh) * | 2023-10-12 | 2024-03-15 | 上海诺德生物实业有限公司 | 一种具有改善睡眠作用的茶叶茶氨酸组合物及其制备方法与应用 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Li Farong Inventor after: Li Jixia Inventor after: Gao Jingru Inventor after: Wu Zhen Inventor after: Zheng Peng Inventor after: Wang Shiqiang Inventor after: Cui Langjun Inventor after: Zhang Baoshan Inventor after: Han Meng Inventor before: Li Farong Inventor before: Li Jixia Inventor before: Gao Jingru Inventor before: Wu Zhen Inventor before: Zheng Peng Inventor before: Wang Zhiqiang Inventor before: Cui Langjun Inventor before: Zhang Baoshan Inventor before: Han Meng |
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| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |