CN1104249A - 冬虫夏草的深层发酵工艺 - Google Patents

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本发明提供冬虫夏草的无性阶段中华被毛孢的 工厂化培养发酵，发酵产物虫草菌丝体具有与野生冬 虫夏草相同的药理作用，并且人工虫草菌体的必需氨 基酸含量成倍于天然冬虫夏草。

Description

本发明是冬虫夏草的无性阶段-中华被毛孢（1987年11月3日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC  NO：M87101）的深层发酵工艺技术，工厂化生产冬虫夏草菌体。
冬虫夏草是只产于中国西南西北高原的保健滋补珍品。野生的冬虫夏草，产区局限，产量稀少，资源缺乏，价格昂贵。中华被毛孢及其完成有性阶段冬虫夏草的技术，将中华被毛孢在特定条件下，侵染人工饲养的寄主-斜脉蝠蛾幼虫，完成有性阶段，周期长，要求条件严格，成本较高。本发明的优点是：深层发酵工艺条件容易控制，周期较短，成本较低，发酵所得的冬虫夏草菌体成份与天然冬虫夏草成分类同，并可诱导产生人类需要的代谢产物，可以人为地控制菌丝体产量，以此为原料生产用于保健、延缓衰老的滋补品，用于治疗性的药物，可以最大限度的满足人们日益增加的对保健、防病、治病的需要。
以下详细叙述本发明的主要内容：
1、斜面培养：
斜面培养基：麸皮30克 蛋白胨10克 奶粉10克 蚕蛹粉3克 维生素10毫克 MgSO4·7H2O0.5克 磷酸二氢钾1克 琼脂20克 水1000毫升。
将中华被毛孢（Hirsutella sinensis yu，Liu，Guo et Fang，sp.nov）（CCTCC NO：M87101）菌株接种于斜面培养基上，在15-18℃的条件下培养30天;
2、液体培养：
液体培养基：麸皮30克 奶粉10克 蚕蛹粉汁3克 牛肉汁10克 维生素10毫克 MgSO4·7H2O0.5克 磷酸二氢钾1克 水1000毫升，PH6.5，分装三角瓶，体积为三角瓶容量的1/5，灭菌后置摇床，在18±2℃的温度下，90次/分的往复式摇床上振荡培养8天后，菌丝体即进入生长旺盛期，可以进行再扩大培养。
3、发酵生产
（1）种子罐培养
培养基：麸皮30千克  奶粉10千克  蚕蛹粉汁3千克  酵母10千克  维生素10克  水1000升  PH6.5，以5%接种量接入液体培养菌丝，在温度18±2℃，通气量1∶1（V/V/V）的条件下，连续发酵168小时。此时菌丝体生长旺盛，经镜检无细菌污染，可转入发酵罐生产。
（2）发酵罐生产
培养基：麸皮30千克 奶粉10千克 蚕蛹粉汁3千克 酵母粉10千克 维生素10克 MgSO4·7H2O0.5千克 磷酸二氢钾1千克 水1000千克。发酵条件：温度18±2℃，通气量1∶1（V/V/V），PH6.5，连续发酵7天，在发酵开始的第24小时后，每隔16小时取发酵液样，测定PH值、还原糖及氨态氮，当PH下降至5.5-5.0，还原糖1%以下，氨态氮0.1‰以下，镜检菌丝体已产生大量分生孢子梗及分生孢子时，就可出罐。
实施例1  人工虫草菌丝体与冬虫夏草成分比较
Figure 941150542_IMG1
实施例2  天然冬虫夏草和虫草菌体必需氨基酸含量的比较
浙江农业大学用日立835-50氨基酸分析仪对天然冬虫夏草和虫草菌体进行对比分析结果如下：
Figure 941150542_IMG2
＊色氨酸在水解过程中全部破坏，无法测出。
从上述结果看，必需氨基酸均成倍于天然冬虫夏草。

Claims (3)

1、中华被毛孢(Hirsutella  sinensis  yu，Liu，Guo  et  Fang，sp.nov.保藏号：CCTCC  NO：M87101)的发酵工艺，其特征是取新鲜冬虫夏草虫体(菌核)部份，去表皮，切成薄片，置下述培养基培养，或挑取子囊孢子培养，
斜面培养基：麸皮  30克  蛋白胨  10克  奶粉  10克蚕蛹粉  3克  维生素  10毫克  硫酸镁  0.5克  磷酸二氢钾  1克  琼脂  20克  水  1000毫升，PH6.5，在15-18℃的温度下培养30天；
液体培养基：麸皮  30克  奶粉  10克  蚕蛹粉汁  3克  牛肉汁  10克  维生素  3克  硫酸镁  0.5克磷酸二氢钾  1克  水  1000毫升，PH  6.5，在18±2℃的温度下，90次/分的往复式摇床上振荡培养8天后扩大培养。
2、根据权利要求1所述，中华被毛孢发酵工艺技术，其特征是种子罐发酵培养基：麸皮30克  奶粉10克  蚕蛹粉汁3克  酵母粉10克  维生素10毫克  水1000毫升  PH6.5  通气量1∶1（V/V）在18±2℃温度的条件下发酵7天后转罐，接种量5%。
3、根据权利要求1和权利要求2所述的中华被毛孢发酵技术，其特征是，发酵罐培养基：麸皮30千克  奶粉10千克  蚕蛹粉汁3千克  酵母粉10千克  维生素10克  硫酸镁0.5千克  磷酸二氢钾1千克  水1000千克  温度18±2℃  通气量1∶1（V/V）连续发酵168小时出罐。
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