CN110420315A - 枸杞糖肽在制备治疗三高药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及药品及保健品领域,特别具体到枸杞糖肽在制备治疗三高药物中的应用,本发明的目的在于提供枸杞糖肽与药学上可接受的辅料或辅助性成分混合制成中药片剂、颗粒或混悬颗粒、丸剂、散剂或胶囊,得到用于治疗三高的药物用于达到治疗三高的目的。同时发现枸杞糖肽还可以缩小斑块和溶解血栓,活化和保护血管内皮细胞,改善和增加血管弹性等,从而全面有效的调控血压、血脂,使血液清净,血流畅通,血管收缩自由,血压平稳,从而有效防止一系列心脑血管疾病的发生。用于证明枸杞糖肽可通过自身药理性能降低血压,血脂,血糖,高度提示其在三高治疗中的重要性,并有显著疗效。
Description
技术领域
本发明属于药品及保健品领域,特别涉及到枸杞糖肽在制备治疗三高药物中的应用。
背景技术
“三高症”是指高血压、高血糖(糖尿病)和高脂血症。是现代社会所派生出来的“富贵病”,目前常规治疗“三高症”都是采用药物疗法,比如治疗“高血脂”采用洛伐他汀、非诺贝特、烟酸、考来烯胺等;虽然有很多不同类型的降脂药物,但副作用都比较大,更多患者采用节食的办法,来达到控制体重的目的,但是这种治疗方法极容易引发营养失衡,破坏身体所有器官的正常功能,是极不可取的治疗方法。也有医疗机构采用体外洗血的方法清除血脂,虽然效果明显,但危险性较大,易感染,费用高,所以患者都不会轻易接受这种手术。
降压药物更是种类繁多,大致可归纳为五大类:利尿剂、β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂(CCB)、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)和血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂(ARB);各种降压药物的作用和机理各不相同,效果千差万别,但是根本没有任何一种药物可以根治,而且都有明显的副作用。采用药物降压是以损害患者身体其他脏腑器官功能为代价的,其结果是令受损的肌体和器官雪上加霜,常规治疗“高血糖”方法是口服降糖药或注射胰岛素,降糖药物的主要作用机理是刺激胰岛细胞释放胰岛素,减少肝糖原输出,使血糖下降。各类降糖药物在降糖治疗的同时,会持续损害肝、肾和其他脏器的功能。药物的毒副作用主要表现为恶心、呕吐、消化不良、肝肾细胞毒性、过敏反应、白细胞减少等。
枸杞子作为我国的传统中药,其营养价值、医疗保健作用及在食品工业中的研究及应用日渐广泛。同时,鉴于中医药综合性疗效强且同时具有简、便、廉、安全、持久等明显优势,关于中药功效及临床应用的研究也已经成为近年来研究的热点问题。枸杞子的主要成分为枸杞多糖(LBP),而从枸杞多糖中提取的枸杞糖肽(LBGP)在近年来受到人们的青睐,备受医疗、食品营养、保健、美容等多领域的关注,相比枸杞多糖,枸杞糖肽去除了其中的无机盐及各种单糖这类无免疫活性成分,同时,枸杞糖肽具有良好的水溶性,食用后易于被人体吸收、生物利用度高,而且枸杞糖肽的药理作用约为枸杞多糖的20倍左右;经研究发现不同剂量的LBGP均有降低血及肝内TC、TG作用,且存在着明显的量效关系LBGP的抗动脉硬化及对血脂的影响作用可能与其抗氧化、调节细胞钙稳态及细胞凋亡基因等因素有关,而且,LBGP可以通过降低血浆内皮素(endothelin,ET)的含量以及通过增加血浆内降钙素基因而防止高血压的发生。
发明内容
(一)要解决的技术问题
鉴于以上所述,本发明的目的在于提供枸杞糖肽与药学上可接受的辅料或辅助性成分混合制成中药片剂、颗粒或混悬颗粒、丸剂、散剂或胶囊,得到用于治疗三高的药物用于达到治疗三高的目的。
(二)技术方案
为解决所述技术问题,本发明提供枸杞糖肽在制备治疗三高药物中的应用。
本发明提供的枸杞糖肽在制备治疗三高药物中的应用可进一步设置为,包括:所述枸杞糖肽与药学上可接受的辅料或辅助性成分混合制成各种形式的片剂、颗粒或混悬颗粒、丸剂、散剂或胶囊,得到用于治疗三高的药物。其中,上述所含的枸杞糖肽的组成应满足如下标准:糖含量≥60%,糖醛酸含量≥5%,蛋白含量20-33%,所述枸杞糖肽的状态为纯度≥90%的粉末。
本发明提供的枸杞糖肽在制备治疗三高药物中的应用可进一步设置为,是将制备获得的各种形式的片剂、颗粒或混悬颗粒、丸剂、散剂或胶囊以口服方式用药,其中按照其制药工艺所属的制药单位计,每单位中枸杞糖肽的含量为10-50mg。
本发明提供的枸杞糖肽在制备治疗三高药物作为保健食品中的应用可进一步设置为,是将制备获得的各种形式的片剂、颗粒或混悬颗粒、丸剂、散剂或胶囊以口服方式用药,其中按照其制药工艺所属的制药单位计,每单位中枸杞糖肽的含量为10-50mg。
(三)有益效果
本发明发现枸杞中所含有的枸杞糖肽具有一定的降血糖、降血脂、降血压等功效。而枸杞糖肽的高生物活性,使它要比目前临床上常用的口服多糖的免疫活性强几百倍。作为一种枸杞糖蛋白,枸杞糖肽是构成血管壁细胞的重要营养补充来源,也是心脑血管疾病的血液清洗机,对心肌细胞具有营养构建作用,对心脑血管病引发的三高症、冠心病、血管粥样硬化等疾病也有显著预防效果。枸杞糖肽可通过调节血压中枢抑制血管收缩,扩张血管,促进血液循环,清除血液中的垃圾,防止粥样斑块和血栓的形成。同时还可以缩小斑块和溶解血栓,活化和保护血管内皮细胞,改善和增加血管弹性等,从而全面有效的调控血压、血脂,使血液清净,血流畅通,血管收缩自由,血压平稳,从而有效防止一系列心脑血管疾病的发生。
枸杞糖肽不会对正常血压产生影响,而是将异常的血压调节到正常水平,所以说枸杞糖肽的降压、降脂原理更安全、作用更显著、食用更放心;枸杞糖肽可以直接和胰岛细胞结合。一方面提升胰岛素细胞活力,一方面自我构建新的胰岛细胞,促进胰岛素的分泌,能从根源上实现糖尿病的控制与康复。且枸杞糖肽是纯天然成分,无任何不良副作用。
附图说明
图1为本发明的实验二中的表1的表示图;
图2为本发明的实验三中的表2的表示图。
具体实施方式
下面结合附图和各实验,对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实验用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。以下实验中涉及的零部件、结构、机构等,如无特殊说明,则均为常规市售产品。
实验一:枸杞糖肽降血糖作用的细胞实验
1.材料及方法
1.1材料
实验对象为小鼠,其中小鼠NIT-L胰岛β细胞是由中国医学科学院基础医学研究所提供;LBGP由宁夏农科院枸杞研究所提供,其纯度为31.9%,实验过程中用到的R-P-MI1640干粉培养基、胰蛋白酶是由美国GIBCO公司提供;试验中需要的胎牛血清由杭州四季青生物工程有限公司;四氧嘧啶由本经索莱宝科技有限公司;试剂溴化二甲噻唑二苯四氮唑(MTT)购自AMRESCO公司;NO、SOD、MDA试剂盒购自南京建成生物研究所;其他仪器由实验室提供。
1.2方法
把小鼠NIT-L1胰岛β细胞接种到R-P-MI1640干粉培养基上,环境温度为37℃、空气条件为5%的CO2、饱和湿度的条件下进行培养,使用倒置显微镜随时观察细胞的生长状况,每隔2-3d进行一次换液。当细胞贴壁80%-90%后,行分瓶培养,同时取对数期的细胞,分别采用四氧嘧啶和LBGP培养液进行培养,设置试验组,空白组为两者都没有使用,对照组是只使用四氧嘧啶培养液进行培养,(试验组中低剂量为10μg·mL-1;中剂量为20μg·mL-1;高剂量为40μg·mL-1),培养时间为24h,留取同期的培养液。
1.3观察指标
采用MTT法间接测定NIT-L1胰岛β-细胞的存活率,其中检测波长为590nm,细胞存活率(%)=(OD值实验组/OD值对照组)×100%;测NO、SOD、MDA的含量是严格按照试剂盒上的说明进行。
1.4统计学方法
采用SPSS 18.0软件对采集到的数据进行分析,其中计量资料采用t检验,计数资料的比较采用χ2检验,当P<0.05时,有统计学意义。
2.结果
2.1枸杞糖肽与胰岛β细胞存活率之间的联系。对照组细胞的存活率显著低于空白组,试验组中低、中、高剂量组细胞的存活率明显要高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);随着培养液中LBGP浓度的升高,细胞的存活率逐渐上升。
2.2枸杞糖肽对四氧嘧啶诱导的胰岛β细胞中NO、SOD以及MDA含量的影响;
空白组及试验组各剂量给药组细胞中检测NO和MDA的含量结果显示明显要低于对照组,而SOD的含量明显比模型组的要高,差异有统计学意义(P<0.05);随着枸杞糖肽含量的增加,细胞中检测到的NO和MDA的含量呈逐渐下降的趋势,而SOD含量显示逐渐升高的趋势(P<0.05),具体数据见见表1。
表1胰岛β细胞中NO、SOD以及MDA含量的结果比较
3.讨论
糖尿病患者是由于患者的胰岛受到损伤导致缓则胰岛素合成量下降,出现分泌功能受到影响的原因,胰岛β细胞是人体合成和分泌胰岛素的主要器官,相比如其他组织细胞受到自由基的损伤,四氧嘧啶可以特异性地对胰岛β细胞产生毒性作用,主要是通过四氧嘧啶产生大量的自由基破坏胰岛β细胞的DNA链,使得胰岛β细胞损伤并坏死,从而胰岛素合成量下降。SOD的作用机制是催化超氧阴离子自由基的歧化反应,阻断自由基连锁反应,通过检测细胞内的含量可以反应出机体清除自由基的能力。
本次实验,对照组细胞的存活率显著低于空白组,差异明显,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),结果显示,四氧嘧啶对胰岛β细胞有一定的损伤;试验组中低、中、高剂量组细胞的存活率明显要高于模型组,随着培养液中LBGP浓度的升高,细胞的存活率逐渐上升,说明枸杞糖肽能有效提高胰岛β细胞的存活率。空白组及试验组各剂量给药组细胞中检测NO和MDA的含量结果显示明显要低于对照组,而SOD的含量明显比模型组的要高,差异明显,有统计学意义(P<0.05),随着枸杞糖肽含量的增加,细胞中检测到的NO和MDA的含量呈逐渐下降的趋势,而SOD含量显示逐渐升高的趋势(P<0.05)。结论:枸杞糖肽能提高四氧嘧啶的诱导机制使胰岛β细胞的存活率升高,有效改善细胞中的NO、SOD、MDA的浓度,达到降血糖的效果。
实验二:枸杞糖肽对高脂血症大鼠血脂代谢的影响
1.材料与方法
1.1研究对象:SD大鼠,SPF级,雄性,体重180-220g,由北京华阜康生物科技股份有限公司提供,许可证号:SCXK(京)2009-0004。基础饲料:玉米20%,豆饼25%,面粉20%,麸皮20%,鱼粉10%,食盐1%,骨粉2%,磷酸氢钙1%,多种维生素1%,高脂饲料:基础饲料79%,猪油10%,蛋黄粉10%,胆固醇1%。
1.2药物与试剂:LBGP溶液,由宁夏医科大学实验室制备;辛伐他汀片,杭州默沙东制药有限公司生产;批号:110183;固醇,北京化学试剂公司,批号:20100709;总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)试剂盒由北京中生北控生物技术股份有限公司生产。
1.3仪器设备:55P-72型低温超速离心机,日本Hitachi公司;7180型全自动生化分析仪,日本日立公司;751型分光光度计,上海第三分析仪器厂。
1.4.1动物分组与模型建立:取雄性SD大鼠50只,基础饲料适应性喂养1周后,按体重随机分为5组,每组10只,分别为空白对照组、高脂血症模型组、LBGP高、低剂量组和阳性对照组。造模方法:空白对照组喂食基础饲料,其余各组喂食高脂饲料,4周后从空白对照组和高脂血症模型组各选取5只动物,眶静脉取血,分离血清检测血脂水平,以模型组动物血清总胆固醇(TC)升高(与空白对照组比较P<0.01)为高脂血症模型建立成功。
1.4.2给药:造模成功后,LBGP高、低剂量组分别给予LBGP,3mg/kg和,1.5mg/kg,阳性对照组给予辛伐他汀2mg/kg,空白对照组和模型组给予等体积蒸馏水。连续给药4周,每周称1次体重,以调整给药剂量。
1.4.3指标测定:实验结束前大鼠禁食12h,眼眶取血,3000r/min离心,分离血清,采用酶比色法测定TC、TG、LDL-C和HDL-C水平。
1.5统计学方法:实验数据采用SPSS15.0统计软件进行分析,以表示,组间比较用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
各组大鼠血脂水平见表1(见附图1)。与空白对照组比较,高脂血症模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C均明显升高(P<0.01),而HDL-C则显著降低(P<0.01);与高脂血症模型组比较,LBGP各剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C均显著下降(P<0.05或P<0.01),而HDL-C则显著升高(P<0.05)。
实验3.枸杞糖肽对肾性高血压大鼠血管活性物质的影响
1.材料与方法
1.1建模,建立2KIC肾性高血压大鼠模型
健康雄性wistar大鼠,体重140-160g,***麻醉下行腹正中切口,无菌条件下暴露左肾冰小心钝性分离出左肾动脉,用一膨大端直径为0.2mm的发夹形银夹套在左肾动脉上造成肾动脉部分狭窄,右侧肾脏保持不变,复制两肾一夹型高血压模型(two-kidney,oneclip renal hypertension model,2KIC-RH-model)。假手术组只分离左肾动脉不套银夹,术后常规肌肉注射青霉素3天(4×104u,ip,bid),自由进食及水,饲料为纯粮饲料。
1.2分组
实验大鼠随机分为(1)假手术组(c组);(2)肾性高血压组(RH);(3)肾性高血压+枸杞糖肽组(RH+L组);(4)枸杞糖肽+肾性高血压+枸杞糖肽组(L+RH+L组)。L+RH+L组于复制模型前使用10%的LBGP(宁夏中药厂)5μl/g灌胃10天,复制模型后第二天开始(3)(4)组灌胃20-25天,剂量同前,(1)(2)组则采用同等量的蒸馏水灌胃。
各指标均采用表示。两组间比较采用t检验,多组件比较利用方差分析。
2.结果
血压的变化见表1,LBGP可防止2KIC大鼠血压升高,提前给药效果更为显著。
表1 LBGP对2KIC大鼠血压的影响(kPa)
*P<0.05;***P<0.001vsC;###P<0.001vsRH
血浆及主动脉中ET、CGRP含量的变化(表2,见附图2):RH组与其他组相比,血浆和主动脉中ET含量均显著增加,而血浆CGRP含量明显低于其他3组,主动脉中CGRP高于其他组;RH+L、L+RH+L组血浆ET较C组明显降低、而血浆CGRP明显增高,主动脉中ET及CGRP均无明显变化。表明肾性高血压血浆及主动脉中ET含量升高,LBGP可以明显降低血浆ET含量,高血压时CGRP释放障碍,LBGP可以防止这一释放障碍。
3.结论
LBGP通过降低血浆ET含量而防止高血压发生,内皮素ET是血管内皮细胞分泌的作用最强、持续最久的缩血管活性肽。从结果可以看出,ETRH大鼠血浆及主动脉组织中ET含量均高于对照组;而RH+L、L+RH+L血浆ET含量不仅明显低于RH组,也低于C组。提示ET合成和释放增高在高血压发生中有重要的作用;服用LBGP的大鼠ET含量甚至显著低于C组,表明LBGP除了可以防止主动脉中ET含量的增加,还可以降低基础条件下ET的产生。
LBGP增加血浆CGRP水平可能是防止高血压形成的有关因素。降钙素基因(CGRP)是近年来在人和哺乳动物体内发现的一种生物活性肽,它是目前已知的最强舒血管物质。目前研究证实,CGRP与受体结合激活腺苷酸环化酶,使细胞内cAMP升高,发挥其生物学作用。CGRP降低血压的机制是通过对血管的直接作用,以及CGRP对ET的生物拮抗作用。
上述实验证实,枸杞糖肽可通过自身药理性能降低血压,血脂,血糖,高度提示其在三高治疗中的重要性,且有显著疗效。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.枸杞糖肽在制备治疗三高药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的枸杞糖肽在制备治疗三高药物中的应用,其特征在于,包括:所述枸杞糖肽与药学上可接受的辅料或辅助性成分混合制成各种形式的片剂、颗粒或混悬颗粒、丸剂、散剂或胶囊,得到用于治疗三高的药物。其中,上述所含的枸杞糖肽的组成应满足如下标准:糖含量≥60%,糖醛酸含量≥5%,蛋白含量22-38%;所述枸杞糖肽的状态为纯度≥90%的粉末。
3.根据权利要求2所述的方法中制备获得的治疗三高药物的使用方法,其特征在于,是将制备获得的各种形式的片剂、颗粒或混悬颗粒、丸剂、散剂或胶囊以口服方式用药,其中按照其制药工艺所属的制药单位计,每单位中枸杞糖肽的含量为10-50mg。
4.根据权利要求2所述的方法中制备获得的治疗三高药物作为保健食品的应用方法,其特征在于,是将制备获得的各种形式的片剂、颗粒或混悬颗粒、丸剂、散剂或胶囊以口服方式用药,其中按照其制药工艺所属的制药单位计,每单位中枸杞糖肽的含量为10-50mg。
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