CN1102708A - 一种临床检验小儿骨碱性磷酸酶体外诊断试剂盒 - Google Patents
一种临床检验小儿骨碱性磷酸酶体外诊断试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1102708A CN1102708A CN 93119763 CN93119763A CN1102708A CN 1102708 A CN1102708 A CN 1102708A CN 93119763 CN93119763 CN 93119763 CN 93119763 A CN93119763 A CN 93119763A CN 1102708 A CN1102708 A CN 1102708A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- strip
- kit
- liquid
- pad
- 5mmol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种临床检验小儿骨碱性磷酸酶体
外诊断试剂盒,它是由全血干化学免疫浓缩反应装置
(试条)。样品稀释液,显色剂等组成,其优点是:简便
—用30μl全血做样品,不必分离血清;快速—取血后
在10分钟内即可查出小儿是否患有佝偻病;特异—
肝,胆碱性磷酸酶的交叉反应小于5%;稳定—试条
及配套试剂在4℃下保存期一年以上;微量—只用
30μl全血;用本发明药盒对小儿佝偻病诊断的准确
率为86.9%,高于其它方法测试该病的准确度,是目
前诊断小儿佝偻病最简便可靠的血液生化指标。
Description
本发明涉及一种临床检验小儿佝偻病体外诊断试剂盒。
小儿佝偻病是我国重点防治的小儿四大疾病之一。以往诊断此病常用X线摄像和血液生化检查。早期病人用X线摄像检查不易被发现;采用血液生化检查,不仅其可靠性较差,而且需从静脉取血,不易被家长和患儿接受。在一些条件较差的医院只能凭藉临床医生的经验诊断,容易造成误诊和漏诊。八十年代初,Rosalki等建立了凝集素亲和电泳,亲和沉淀检测骨碱性磷酸酶的方法,从而改善了其特异性。但因价格昂贵,不利于临床上推广普及。本发明旨在为临床诊断小儿佝偻病提供一种简便、快速、特异和敏感的试剂药盒。
本发明的设计是由全血干化学免疫浓缩反应装置(试条),样品稀释液,显色剂A液,显色剂B液以及一次性定量取样管,标准比色板,使用说明书组成。
一.全血干化学免疫浓缩反应装置(试条)是由血浆分离转运膜,样品处理垫,反应膜,吸附垫,保护膜,塑料基托和平衡垫组成。
图1全血干化学免疫浓缩反应装置(试条)平面俯视图
图2试条A-A′面的剖面图
图3附图2的部分放大图
图4试条中血浆分离转运膜的俯视图
图中1加样孔 2样品处理垫 3反应膜 4吸附垫 5血浆分离转运膜 6保护膜 7塑料基托 8平衡垫
图5全血干化学免疫浓缩反应装置(试条)制备工艺图
试条的基本构成材料及试条制备工艺如下(见图5)
反应膜将硝酸纤维膜(NC)经平衡处理后,印渍上含有5-7mg/mlUA-Ⅰ(圆豆凝集素同工凝集素Ⅱ)的印渍液,在4℃干燥,再经4-5%牛血清白蛋白第五部分(BSA.V)的100mmol MES缓冲液封闭4小时,PH值6.0-6.5,在18℃条件下封闭4小时,再用洗涤剂含0.9%的NaCl100mmol MES缓冲液洗涤,PH值6.0-6.5,然后在保护液中浸泡,在4℃下干燥,即成为反应膜(图3-3)。
塑料基托 由PCV硬片制成,并在其上打孔10个(图3-8)。
平衡垫 由PCV软片,单面不干胶,双面不干胶制成,并在其上打孔100个(图3-9)。
样品处理垫将K49-2滤膜浸透样品处理液,在4℃下干燥,用冲裁模具压模制成圆片(图3-2)。样品处理液的组成成分为50-100mmolMES缓冲液,1-5mmol的Mg2+,PH值6.0-6.5。
吸附垫膜材料AP20,AP15滤膜,经专用冲裁模具加工成圆片,即成为吸附垫(图3-4)。
血浆分离转运膜 由膜材料K6902号滤膜制成。设计的形状和规格可实现血浆快速分离并定向转移至处理垫(图3.4中5,6)。
保护膜锡泊包装纸,用冲裁模具打一排10个孔(图3-7)。
将上述试条的各部分按图5的顺序用市售压膜双面不干胶粘贴为一体并切割成形。
二.样品稀释液的组成:10mmol MES缓冲液,Mg2+1-5mmol,PH值6.0-6.5。
三.显色剂A液。显色剂B液:A液含二乙醇胺(DEA)800mmol,Mg2+5mmol,溴氯吲哚磷酸盐(BCIP)1.0mmol。pH10.1,B液含二乙醇胺(DEA)800mmol,Mg2+5mmol,硝基氯化四氮唑兰(NBT)1.0mmol,临用前将A液,B液等量混合。
其操作步骤是:将30μl的全血滴加在试条的加样孔中,从图1至图4可以看出,血浆和血球在分离转动膜上分离,血浆定向转运至样品处理垫上,与预先固定在垫内的处理剂发生反应,达到反应所需的条件并与反应膜接触,通过吸附垫的毛细作用,使样品分次通过反应膜。样品中的骨碱性磷酸酶和固相在反应膜上凝集素UA-Ⅰ在流动过程中发生反应。洗去其他血浆成份,加入药盒中的显色剂显色,再与标准比色板对比,半定量读出血中骨碱性磷酸酶催化浓度。正常小儿的血浆无呈色反应,佝偻病患儿依其患病程度呈不同程度的紫色反应。
本发明的优点和积极效果是:简便-用30μl全血做样品,不必分离血清,不用其他特殊仪器,快速-取血后在10分钟内即可查出小儿是否患有佝偻病,特异-肝,胆碱性磷酸酶的交叉反应小于5%。稳定-试条及配套试剂在4℃下保存期一年以上。微量-只用30μl全血,克服了婴幼儿取血不易的困难。用本发明药盒对小儿佝偻病诊断的准确率为86.9%,高于用碱性磷酸酶总活性,25羟维生素D3(75.0%),血钙(48.4%),血磷(46.9%)等方法测试该病的准确度;用本发明药盒对早期患病人的检出率达到50.3%,低于25羟维生素D3(53.1%),但高于用碱性磷酸酶总活性(42.7%)。X线摄像(25.1%)。血磷(9.1%)。血钙(6.9%)的检出率,是目前诊断小儿佝偻病最简便可靠的血液生化指标。
Claims (12)
1、一种临床检验小儿骨碱性磷酸酶体外诊断试剂盒,其特征在于它是由全血干化学免疫浓缩反应装置(试条)、样品稀释液、显色剂所组成。
2、按照权利要求1所说的试剂盒,其特征是试条系由血浆分离膜、血浆转运膜、样品处理垫、反应膜、吸附垫、保护膜、塑料基托和平衡垫组成。
3、按照权利要求2所说的试剂盒,其特征是试条的反应膜是将硝酸纤维膜(NC)经平衡处理后,印渍上含有5~7mg/mlUA-Ⅰ的印渍液,在4℃干燥,再经4~5%牛血清白蛋白第五部分(BSA·V)的100mmol MES缓冲液封闭,PH值6.0~6.5,在4℃下干燥。
4、按照权利要求2所说的试剂盒,其特征是试条的塑料基托由PCV硬片制成,并在其上打10个孔。
5、按照权利要求2所说的试剂盒,其特征是试条的平衡垫由PCV软片、单面不干胶、双面不干胶制成,并在其上打孔100个。
6、按照权利要求2所说的试剂盒,其特征是试条的样品处理垫是将K49-2滤膜浸透样品处理液,在4℃下干燥,用冲裁模具压模制成圆片,样品处理液的组成成分为50~100mmol MES缓冲液,1~5mmol的Mg2+下配制而成,PH值6.0~6.5。
7、按照权利要求2所说的试剂盒,其特征是试条的吸附垫膜材料是用AP20、AP15滤膜经专用冲裁模具加工制成圆片。
8、按照权利要求2所说的试剂盒,其特征是试条的血浆分离转运膜由膜材料K6902号滤膜制成,设计的形状和规格可实现血浆快速分离并定向转移至处理垫。
9、按照权利要求2所说的试剂盒,其特征是试条的保护膜是锡泊包装纸,用冲裁模具打一排10个孔。
10、按照权利要求2所说的试剂盒,其特征是试条的按全血干化学免疫浓缩反应装置(试条)制备工艺图,将试条的各部分顺序粘贴为一体,并切割成形。
11、按照权利要求1所说的试剂盒,其特征是样品稀释液的组成为10mmol MES缓冲液、1~5mmol的Mg2+,PH值6.0~6.5。
12、按照权利要求1所说的试剂盒,其特征是显色剂是由A液和B液组成,其中A液含二乙醇胺(DEA)800mmol,Mg2+5mmol,溴氯吲哚磷酸盐(BCIP)1.0mmol.pH10.1,B液含二乙醇胺(DEA)800mmol,Mg2+5mmol,硝酸氯化唑兰(NBT)1.0mmol,临用前将A液、B液等量混合。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 93119763 CN1102708A (zh) | 1993-11-06 | 1993-11-06 | 一种临床检验小儿骨碱性磷酸酶体外诊断试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 93119763 CN1102708A (zh) | 1993-11-06 | 1993-11-06 | 一种临床检验小儿骨碱性磷酸酶体外诊断试剂盒 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1102708A true CN1102708A (zh) | 1995-05-17 |
Family
ID=4993065
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 93119763 Pending CN1102708A (zh) | 1993-11-06 | 1993-11-06 | 一种临床检验小儿骨碱性磷酸酶体外诊断试剂盒 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1102708A (zh) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103412123A (zh) * | 2013-09-03 | 2013-11-27 | 天津朗赛生物科技有限公司 | 骨碱性磷酸酶检测试纸及其制备方法 |
CN103412120A (zh) * | 2013-09-03 | 2013-11-27 | 天津朗赛生物科技有限公司 | 人体血液中铁蛋白和骨碱性磷酸酶联合检测试纸及其制备方法 |
CN103675282A (zh) * | 2013-11-27 | 2014-03-26 | 新昌县美迪生物科技有限公司 | 骨源性碱性磷酸酶定量检测试剂盒及其用途 |
CN109295201A (zh) * | 2018-09-29 | 2019-02-01 | 中国航天员科研训练中心 | 预测失重骨丢失骨碱性磷酸酶balp下降风险的方法与dna甲基化标志物 |
-
1993
- 1993-11-06 CN CN 93119763 patent/CN1102708A/zh active Pending
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103412123A (zh) * | 2013-09-03 | 2013-11-27 | 天津朗赛生物科技有限公司 | 骨碱性磷酸酶检测试纸及其制备方法 |
CN103412120A (zh) * | 2013-09-03 | 2013-11-27 | 天津朗赛生物科技有限公司 | 人体血液中铁蛋白和骨碱性磷酸酶联合检测试纸及其制备方法 |
CN103675282A (zh) * | 2013-11-27 | 2014-03-26 | 新昌县美迪生物科技有限公司 | 骨源性碱性磷酸酶定量检测试剂盒及其用途 |
CN109295201A (zh) * | 2018-09-29 | 2019-02-01 | 中国航天员科研训练中心 | 预测失重骨丢失骨碱性磷酸酶balp下降风险的方法与dna甲基化标志物 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US6844149B2 (en) | Method, system, and apparatus for measurement and recording of blood chemistry and other physiological measurements | |
US5789255A (en) | Blood glucose strip having reduced sensitivity to hematocrit | |
Cooper | Methods for determining the amount of glucose in blood | |
US6670192B1 (en) | Apparatus for combined assay for current glucose level and intermediate or long-term glycemic control | |
US5132086A (en) | Non-instrumented cholesterol assay | |
Moore et al. | A simple automated colorimetric method for determination of N-acetyl-β-D-glucosaminidase | |
EP0200507A1 (en) | Improved enzyme immunoassay and a kit therefor | |
US5932480A (en) | Measurement method and kit for hemoglobin A1c | |
Lloyd et al. | Salivary creatinine assays as a potential screen for renal disease | |
US6444435B1 (en) | Test strip for determining dialysate composition | |
US5340539A (en) | Non-instrumented cholesterol assay | |
Eberentz-Lhomme et al. | Haemoglobinopathies: a pitfall in the assessment of glycosylated haemoglobin by ion-exchange chromatography | |
CN1102708A (zh) | 一种临床检验小儿骨碱性磷酸酶体外诊断试剂盒 | |
Devgun | Delay in centrifugation and measurement of serum constituents in normal subjects | |
Richardson | Handbook of nonpathologic variations in human blood constituents | |
Fenton et al. | A new chromogenic amylase method compared with two established methods. | |
Belton et al. | Measurement of phenylalanine in routine care of phenylketonuric children | |
CN202351241U (zh) | 唾液酒精含量测试条 | |
Hyman et al. | A rapid spot test for urinary methylmalonic acid collected on ion-exchange filter paper | |
Whitlow et al. | Potential bilirubin interference with the Technicon SMAC alkaline phosphatase activity measurement. | |
Hiroishi et al. | Differential assay of salivary and pancreatic alpha-amylase in serum and urine, with use of monoclonal antibody to human salivary amylase immobilized on bacterial cell wall. | |
CN114164253A (zh) | 一种用于尿液中草酸检测的条带显色式试纸条及其制备、使用方法与应用 | |
Sine et al. | Role of state health departments in testing proficiency of drug abuse toxicology for intrastate clinical laboratories | |
Widdop | Application of toxicological analyses in the diagnosis and management of poisoning | |
Hall et al. | llllll |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C01 | Deemed withdrawal of patent application (patent law 1993) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |