CN110256436A

CN110256436A - 作为Trk激酶抑制剂的嘌呤类化合物

Info

Publication number: CN110256436A
Application number: CN201910566305.1A
Authority: CN
Inventors: 范为正; 杨加举; 范文华; 刘彦; 唐春雷
Original assignee: Nanjing Lei Zheng Medicine Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Lei Zheng Medicine Technology Co Ltd
Priority date: 2019-06-27
Filing date: 2019-06-27
Publication date: 2019-09-20
Anticipated expiration: 2039-06-27
Also published as: CN110256436B

Abstract

本发明公开了作为Trk激酶抑制剂的嘌呤类化合物，属于化学医药领域。本发明嘌呤类化合物如通式(I)所示，具有良好Trk家族蛋白酪氨酸激酶抑制活性，可用于治疗哺乳动物的癌症、疼痛、炎症、神经变性疾病、克氏锥虫感染或溶骨性疾病，应用前景广阔。

Description

作为Trk激酶抑制剂的嘌呤类化合物

技术领域

本发明属于化学医药领域，具体涉及作为Trk激酶抑制剂的嘌呤类化合物。

背景技术

恶性肿瘤的发生是由一系列基因异常导致的，包括抑癌基因的失活和原癌基因的活化。癌细胞生长旺盛，呈现相对无止境地生长，与人体正常的代谢不相协调，严重的影响了人体各器官的正常功能，破坏了人体正常的组织结构，是严重危及人类生命健康的疾病。目前小分子激酶抑制剂作为潜在的癌症疗法，它的发展是一个让人感兴趣的领域，突变和某些Trk的基因融合以及它们控制的相对应的部位与不受控制的肿瘤发生和增殖有关。

原肌球蛋白相关激酶(tropomyosin-related kinase，Trk)是一类神经生长因子受体，其家族有高度同源性的原肌球蛋白相关激酶A(tropomyosin-related kinase A，TrkA)、原肌球蛋白相关激酶B(TrkB)、原肌球蛋白相关激酶C(TrkC)组成，分别由NTRK1、NTRK2和NTRK3编码。神经营养因子中有(i)可激活TrkA的神经生长因子(NGF)，(ii)可激活TrkB的脑源性神经营养因子(BDNF)及NT-4/5，及(iii)可激活TrkC的NT3。Trk广泛表现于神经元组织中且与神经元细胞的维持、信号传导及存活有关。

Trk癌基因最初是在结肠癌中被发现的，其中细胞骨架蛋白原肌球蛋白被融合到一个未知的催化活性激酶区域。进一步的研究发现，该激酶作为一个单通受体酪氨酸激酶表达在发展中的中枢神经***，所以该激酶被称为原肌球蛋白受体激酶。Trk激酶都有一个同源保守的结构区域，该结构区域从N末端到C末端，分别包括5个细胞外结构域、1个跨膜结构域和1个细胞内的激酶结构域。在Trk的胞外区域，有一个亮氨酸富集区，两个半胱氨酸富集区，和两个类似免疫球蛋白结构的区域，这些区域对所有的配体识别和结合来说都是必不可少。不同于典型的RTKs受体，Trk胞内域非常的小，在激酶域前有大约70个氨基酸，在激酶域后有15个氨基酸。

Trks二聚体响应配体结合的方式类似于RTK超家族。在与配体结合后，Trks通过快速磷酸化激酶活化回路自身磷酸化每个单体。这些磷酸化活动增强了激酶的催化活性。为了生成适配器蛋白的结合位点，在近膜区域中的NPXY功能域(TrkA激酶Y490氨基酸位点)和羧基端的YLDIG功能域(TrkA激酶Y785位点)被磷酸化。这些磷酸化事件为SRC同源域2(SRCHomology Domain 2,SH2)和包含蛋白质的酪氨酸结合域(Phosphotyrosine bindingdomain,PTB)创建对接位点，如SHC和磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)。结合后，SHC和PLC通过TRK催化磷酸化激活。

SHC是第一个被确认与磷酸化NPXY功能域的Trk关联的适配器蛋白，这导致AKT和RAS通过典型途径激活。在SHC被激活后，生长因子受体结合蛋白2(GRB2)能够同时与鸟嘌呤核苷酸交换因子(son of sevenless,SOS)、SHC结合形成SHC-GRB2-SOS复合物，SOS与受体或受体底物蛋白上的酪氨酸磷酸化位点结合导致细胞质蛋白SOS向膜转位，并在RAS附近形成高难度富集的SOS，SOS与RAS-GDP结合，促使GTP取代RAS上的GDP，激活RAS。RAS被激活后以GTP关联的形式激活了MAP激酶系列，包括RAF、MEK和ERK的激活。ERK一旦被激活，将继续激活其下游许多位于胞浆和核内的靶蛋白，参与细胞生长、生存和增殖。

AKT又称蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)，其PII结构域能与脂质产物PIP2和PIP3发生高亲和力结合，导致AKT从胞质转移到细胞膜并发生构象改变，从而在丝氨酸/苏氨酸位点发生磷酸化被激活。AKT激活导致细胞存活和通过Trk受体介导存活表型的增殖基因的表达增强。

Trk家族的基因突变已在许多癌症中被报道，包括结肠癌、甲状腺癌、肺癌、卵巢癌、***癌(分泌性乳腺癌)、涎腺癌(乳腺模拟分泌癌)、胰腺癌、黑色素瘤、胆管癌、间质瘤(先天性肉瘤、软组织肉瘤、胃肠道间质瘤、炎症性肌纤维母细胞肿瘤、脑肿瘤(小儿胶质瘤、星形细胞瘤和胶质瘤))和白血病。在Trk家族中，TrkA是最常见的致肿瘤蛋白，在多种肿瘤类型中发现率大约是7.4％。而TrkC和TrkB的发现率分别为3.4％和0.4％。TrkB突变的频率小于0.5％，TrkC突变的频率小于1.0％。

当发生NTRK基因融合时，易位事件生成一个由活性Trk激酶域链接到不相关基因或融合伴侣产生的混合癌基因，触发Trk蛋白的组成性激活或过度表达。由此产生的异常表达，在有或没有跨膜领域的情况下均可能产生新的癌基因。TrkA细胞外领域的某些突变，即P203A和C345S，在实验室条件下被确认为转化，但还有待于人类肿瘤标本的鉴定结果。另一方面，NTRK1的框内缺失(ΔTrkA)和剪接变异体(TrkAIII)已在人体肿瘤样本中被功能识别和表征。在急性髓细胞白血病(AML)中确认的ΔTrkA框内缺失，包含一个截断的胞外域，可以改变上皮和成纤维细胞。在神经母细胞瘤中确定的TRKAIII剪接变异体在外显子6、7和9中有缺失，这会导致胞外域中的Ig-like C2-type I(IG-C2)和糖基化部位的丧失。TrkA激活突变从基因组重排、点突变、基因缺失或剪接变异体危及能力到调节激酶域。这表明Trk的致癌能力的一个关键属性是细胞外域的形式和/或功能的缺失。

已知数种可用于癌症或疼痛的Trk激酶的小分子抑制剂(ExpertOpin.Ther.Patents,2009,19(3):305-319)。

国际专利申请WO2006115452及WO2006087538阐述了若干类据称为抑制剂或Trk激酶的小分子，其可用于治疗疼痛或癌症。

国际专利申请WO2007025540揭示了某些经取代的咪唑并[1,2-b]哒嗪，其在6位具有仲氨基或BOC-保护的哌嗪基。这些化合物是揭示为蛋白激酶C(PKC)的抑制剂。

国际专利申请WO2008052734揭示了(R)-4-(6-(2-(3-氟苯基)吡咯啶-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)苄腈，即，咪唑并[1,2b]哒嗪化合物，其在6位具有芳基-取代的杂环基团且在3位具有苄腈基团。据称该化合物适于治疗由PI3K受体、JAK-2受体及Trk受体介导的疾病。

国际专利申请WO2007013673揭示了1-苯基-3-(6-(1-苯基乙基氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)脲及N-(6-(4-羟基环己基氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)苯甲酰胺，即，咪唑并[1,2b]哒嗪化合物，其在6位具有氨基且在3位具有酰胺或脲部分。这些化合物据称为Trk抑制剂。持续需要新颖且更加有效的治疗用以减轻疼痛、尤其慢性疼痛。由于TrkA及其它Trk激酶可用作NGF驱动的生物反应的介体，故TrkA及其它Trk激酶的抑制剂可为慢性疼痛状态提供有效治疗。

美国专利公开号US20110195948记载了作为Trk抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物。

近年来，对于疗效更佳、副作用更小、代谢稳定性高、生物利用度好的Trk抑制剂存在迫切的临床需求。为了达到更好的***的目的，我们希望能够开发出新的高效低毒的Trk抑制剂。本发明将提供一种新型结构的Trk抑制剂，并发现此类结构的化合物表现出优异的效果和作用，希望为治疗癌症提供更多的药物。

发明内容

发明要解决的问题：为了克服现有技术存在的稳定性、活性等不足的问题，满足日益增长的临床需求，本发明提供一种作为Trk激酶抑制剂的新型的取代嘌呤化合物。该结构化合物药效学性能更好、代谢稳定性更高。

进一步地，本发明提供一种具有通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，药物组合物以及用途。

本发明的第一个目的是提供一种嘌呤类化合物，所述化合物为通式(I)所述化合物或其药学上可接受的盐，

其中：R₁选自(i)卤素、(1-4C)烷氧基、三氟甲基、二氟甲基、中一个或多个取代基取代的苯基；或(ii)一个或多个卤素原子取代的5原或6元芳杂环，所述芳杂环具有N和/或S；

R₂选自以下任意一种：NR_aR_b，(1-4C)羟基烷基，(1-4C烷基)、卤素取代的杂环芳基，含杂原子的环烷基；或者含氟、三氟甲基、羟基、伯氨基、烷氧基、仲氨基中一个或多个取代基取代的(3-6C)环烷基；

R_a是H或(1-6C)烷基；R_b是(1-4C)羟基烷基、杂环芳基或芳基，其中杂环芳基是5至6元杂芳环，具有1-2个独立选自N和O的环杂原子，且含有一个或多个(1-4C)烷基取代基；所述杂环芳基或芳基包含卤素、三氟甲基、羟基、氰基中的一个或多个取代基；或NR_aR_b形成具有环氮原子的4元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、羟基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基；或NR_aR_b形成5至6元杂环，所述杂环具有环氮原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子，，所述杂环包含以下的一个或多个取代基取代：羟基、卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、伯氨基、羧基；

所述(1-4C烷基)、卤素取代的杂环芳基中的杂环芳基选自具有1至3个环氮原子的5元杂芳环；或者，至少有一个氮环原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子的5至6元杂芳环；

所述含杂原子的环烷基是碳连接的4至6元氮杂环，包含(1-4C)烷基、羧基、(1-4C烷基)种的一个或多个取代基；或者(1-4C)烷基取代的吡啶酮或哒嗪环；

R₃选自H、C1-C8直链或支链烷基；X选自O、NH或NR₄；R₄选自(1-6C)烷基。

在本发明的一种实施方式中，R₂优选-NR_aR_b，或者卤素取代的杂环芳基；其中R_a是H或(1-6C)烷基；

R_a是H或(1-6C)烷基；R_b是(1-4C)羟基烷基、杂环芳基或芳基，其中杂环芳基是5至6元杂芳环，具有1-2个独立选自N和O的环杂原子，且含有一个或多个(1-4C)烷基取代基；所述杂环芳基或芳基包含卤素、三氟甲基、羟基、氰基中的一个或多个取代基；或NR_aR_b形成具有环氮原子的4元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、羟基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基；或NR_aR_b形成5至6元杂环，所述杂环具有环氮原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子，所述杂环包含以下的一个或多个取代基取代：羟基、卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、伯氨基、羧基；(1-4C烷基)、卤素取代的杂环芳基，

所述(1-4C烷基)、卤素取代的杂环芳基中的杂环芳基选自具有1至3个环氮原子的5元杂芳环；或者，至少有一个氮环原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子的5至6元杂芳环。

在本发明的一种实施方式中，R₂进一步优选-NR_aR_b；其中R_a是H或(1-6C)烷基；R_b是(1-4C)羟基烷基、杂环芳基或芳基，其中杂环芳基是5至6元杂芳环，具有1-2个独立选自N和O的环杂原子，且含有一个或多个(1-4C)烷基取代基；所述杂环芳基或芳基包含卤素、三氟甲基、羟基、氰基中的一个或多个取代基；或NR_aR_b形成具有环氮原子的4元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、羟基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基；或-NR_aR_b形成5至6元杂环，所述杂环具有环氮原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子，所述杂环包含以下的一个或多个取代基取代：羟基、卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、伯氨基、羧基。

在本发明的一种实施方式中，R₁优选取代苯基，所述取代苯基包含一个或多个卤素、-CF₃、-CHF₂取代基。

在本发明的一种实施方式中，R₁进一步优选含一个或两个的氟或氯原子取代的苯基，或含一个氟原子和-CF₃取代的苯基。

在本发明的一种实施方式中，所述NR_aR_b中R_a优选H；R_b优选含卤素、三氟甲基、羟基、氰基中的一个或多个取代基的苯基，或者所述-NR_aR_b形成具有环氮原子的4元杂环，其中所述杂环任选的地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、羟基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基，或者NR_aR_b形成5至6元杂环，具有环氮原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子，所述杂环包含以下的一个或多个取代基取代：羟基、卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基。

在本发明的一种实施方式中，由NR_aR_b优选如下结构：

在本发明的一种实施方式中，R₂为(1-4C)羟基烷基时，优选-C(CH₃)₂OH和-C(CH₃)₂CH₂OH。

在本发明的一种实施方式中，R₂为(1-4C烷基)取代的杂环芳基时，所述杂环芳基具有1至3个环氮原子的5元杂芳环，或者有至少一个环氮原子且还含有N和/或S的6元杂芳环。

在本发明的一种实施方式中，R₂为(1-4C烷基)取代的1，2，4-***环或者吡啶基环、嘧啶基环、吡嗪基环、吡唑基环、咪唑基环和噻唑基环。

在本发明的一种实施方式中，所述(1-4C烷基)取代吡啶基环、嘧啶基环、吡嗪基环、吡唑基环、咪唑基环和噻唑基环表示的R₂的具体结构如下所示：

优选地，R₂为

在本发明的一种实施方式中，R₂是含杂原子的环烷基时，所述含杂原子的环烷基包括碳连接的氮杂环丁烷基、吡咯烷基和哌啶基环，含杂原子的环烷基含有一个或多个的取代基，所述取代基包括甲基、乙基、丙基、CO₂Me、CO₂Et和CO₂C(CH₃)₃。

在一种实施方式中，含杂原子的环烷基包含上述取代基中的一个或两个取代。

在本发明的某些实施方式中，R₂是含杂原子的环烷基时，所述含杂原子的环烷基包括(1-4C)烷基取代基取代的吡啶酮环或哒嗪酮环。所述(1-4C)烷基取代基为甲基或乙基。

在本发明的某些实施方式中，X选自O、NH或NCH₃、NCH₂CH₃。

为了提高化合物代谢稳定性和活性，优选地，X为NH。

在本发明的一种实施方式中，所述嘌呤类化合物包括如下所示的化合物：

在本发明的一种实施方式中，所述药学上可接受的盐包括无机盐或有机盐，所述无机盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、酸式磷酸盐中任意一种；所述有机盐包括乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、丙酮酸盐、羟乙酸盐、乙二酸盐、丙二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、以磺酸盐、苯磺酸盐、水杨酸盐中任意一种。

进一步地，式(I)的化合物或它们的盐可以溶剂合物的形式分离，且因此任何这种溶剂合物都属于本发明的范围。

通式(I)的化合物还包括仅在一种或多种同位素富集原子的存在方面不同的化合物。例如，本发明的化合物包括其中一个或多个氢原子由氘或氚取代或一个或多个碳原子由13C-或14C-富集的碳取代的化合物，其在本发明的范围内。

本发明的第二个目的是将通式(I)所示的嘌呤类化合物或其药学上可接受的盐用于制备Trk激酶抑制药物中，

其中：在通式(I)中，R₁选自(i)卤素、(1-4C)烷氧基、CF₃、CHF₂、的中一个或多个取代基取代的苯基；或(ii)一个或多个卤素原子取代的5元或6元芳杂环，其中芳杂环其具有选自N和/或S的杂环原子，包含一个或多个卤素原子取代基；

R₂选自一下任意一种：NR_aR_b，(1-4C)烷基，(1-4C)氟烷基，(1-4C)羟基烷基，(1-4C)烷基、卤素取代的杂环芳基，含杂原子的环烷基杂，或卤素、氟取代烷基、羟基、烷氧基、伯氨基、仲胺基中一种或种个取代基取代的(3-6C)环烷基；

R_a是H或(1-6C)烷基；R_b是H、(1-4C)烷基、(1-4C)羟基烷基、杂环芳基或芳基，其中杂环芳基是5至6元杂芳环，具有1-2个独立选自N和O的环杂原子，且含有一个或多个(1-4C)烷基取代基；所述杂环芳基或芳基上包含卤素、氟取代烷基、羟基、氰基中的一个或多个取代基；或NR_aR_b形成具有环氮原子的4元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、羟基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基；或NR_aR_b形成5或6元杂环，其中所述杂环具有环氮原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子，所述杂环包含以下一个或多个取代基：羟基、卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、伯氨基、羧基；

所述含杂原子的环烷基杂是碳连接的4至6元氮杂环，包含(1-4C)烷基、羧基、(1-4C烷基)种的一个或多个取代基；或者(1-4C)烷基取代的吡啶酮或哒嗪环；

R₃选自H、C1-C8直链或支链烷基；

X选自O、NH或NR₄；R₄选自(1-6C)烷基。

本发明第三个目的是提供了一种药物组合物，包括本发明上述的通式化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受载体、赋形剂或稀释剂。

在本发明的一种实施方式中，所述药物组合物可以配制为用于口服给药的固体制剂，包括，但不限于胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂等。

在本发明的一种实施方式中，所述药物组合物的固体制剂可以将本发明通式(I)化合物作为活性成分与至少一种常规惰性赋形剂或载体混合。

在本发明的一种实施方式中，所述赋形剂包括柠檬酸钠或磷酸二钙。

在本发明的一种实施方式中，所述药物组合物还包括如下成分：(1)填料或增溶剂；(2)粘合剂；(3)保湿剂；(4)崩解剂；(5)缓溶剂；(6)吸收加速剂；(7)润湿剂；(8)吸附剂；(9)润滑剂。

在本发明的一种实施方式中，所述填料或增溶剂包括淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸。所述粘合剂包括羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖、***胶。所述保湿剂包括甘油。所述崩解剂包括琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些符合硅酸盐和碳酸钠。所述缓溶剂包括石蜡。所述吸收加速剂包括季铵化合物。所述润湿剂包括鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯。所述吸附剂包括高岭土。所述润滑剂包括滑石、硬脂酸钙、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠等，或其混合物。

在本发明的一种实施方式中，所述药物组合物的固体制剂可以将本发明通式(I)化合物作为活性成分与至少一种常规惰性赋形剂或载体混合。固体剂型包括片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂。

在本发明的一种实施方式中，固体剂型为胶囊剂、片剂或丸剂，组分中也可包含缓冲剂。

在本发明的一种实施方式中，所述颗粒剂可采用包衣和壳材料，如肠溶衣和其他本领域公知的材料晶型包衣或微囊化。所述颗粒剂可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性成分的释放可以延迟的方式在消化道的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性成分也可与上述赋形剂中的一种或者多种形成微胶囊形式。

在本发明的一种实施方式中，所述药物组合物可以配制为用于口服给药的液体剂型，包括，但不限于药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆、酊剂等。

在本发明的一种实施方式中，所述液体剂型中除了作为活性成分的通式(I)化合物或其药学上可接受的盐外，可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，增溶剂和乳化剂。

所述惰性稀释剂包括水和其他溶剂。所述增溶剂和乳化剂包括乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油类，特别是棉籽油、花生油、玉米油、橄榄油、蓖麻油、芝麻油等或这些物质的混合物等。

除了这些惰性稀释剂外，本发明液体剂型也可包括常规助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料等。

所述悬浮剂包括乙氧基化十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇、和脱水山梨醇、微晶纤维素、琼脂中任意一种或多种。

在本发明的一种实施方式中，所述药物组合物可以配置为用于胃肠外注射的剂型，包括，但不限于生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，以及用于重新溶解成无菌的可注射溶液和分散液的无菌粉末。所述胃肠外注射的剂型包括适宜的载体、稀释剂、溶剂、赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

在本发明的一种实施方式中，所述药物组合物可以配置为用于局部给药的剂型，包括如软膏剂、散剂、栓剂、滴剂、喷射剂和吸入剂等。所述组合物在无菌条件下和生理上可接受的载体及任选的防腐剂、缓冲剂，和必要时可能需要的推进剂一起混合。

在本发明的一种实施方式中，所述药物组合物包括通式(I)化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分，以及药学上可接受载体、赋形剂、稀释剂。在制备药物组合物时，通常是将本发明通式(I)化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受载体、赋形剂或稀释剂混合。其中通式(I)化合物或其药学上可接受的盐的含量可以为0.01-1000mg，例如0.05-800mg、0.1-500mg、0.01-300mg、0.01-200mg、0.05-150mg、0.05-50mg等。

本发明第四个目的是提供上述嘌呤类化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗哺乳动物的癌症、疼痛、炎症、神经变性疾病、克氏锥虫感染或溶骨性疾病的药物中的用途。

优选地，其中所述的癌症包括黑色素瘤、非小细胞肺癌、甲状腺癌、急性骨髓白血病、恶性胶质瘤、星形细胞瘤与髓母细胞瘤、结肠癌、神经母细胞瘤、卵巢癌、乳腺癌、***癌、胰腺癌、多发性骨髓瘤、及大细胞神经内分泌瘤。其中所述的疼痛涉及癌症、外科手术、骨折、由肿瘤转移引起的骨痛、骨关节炎、银屑病关节炎、类风湿性关节炎、间质性膀胱炎、慢性胰腺炎、内脏痛、炎性痛、偏头痛、慢性腰背痛、膀胱疼痛综合征和神经性疼痛。其中所述的炎症包括哮喘、间质性膀胱炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病、异位性皮炎、湿疹及干癣。

通式(I)化合物或其药学上可接受的盐，通过抑制原肌球蛋白激酶(Trk)活性，用于制备治疗哺乳动物包括人的癌症、疼痛、炎症、神经变性疾病、克氏锥虫感染或溶骨性疾病的药物。向所述哺乳动物包括人施用治疗有效量的上述药物，达到治疗效果。

“治疗有效量”为个体中有效产生生物或医学应答(例如降低或抑制酶活蛋白活性，或者改善症状、减轻病况、减缓或延迟疾病进展或者预防疾病)的本发明的化合物的量。

本发明药物可给药于哺乳动物包括人，可以口服、直肠、胃肠外(静脉内、肌肉内或皮下)、局部给药(粉剂、软膏剂、滴剂)或瘤内给药。

本发明药物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的治疗剂联合给药，与其他抗肿瘤药物组合。此联合治疗可通过同时、顺序或分开使用治疗的各个组分来实现。所述治疗剂包括但不限于：作用于DNA化学结构的抗肿瘤药物，如顺铂，影响核苷酸合成的抗肿瘤药物如甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶等，影响核酸转录的抗肿瘤药物如阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素等，作用于微管蛋白合成的抗肿瘤药物如紫杉醇、长春瑞滨等，芳香化酶抑制剂如氨鲁米特、来曲唑、瑞宁德等，细胞信号通路抑制剂如表皮生长因子受体抑制剂伊马替尼(Imatinib)、吉非替尼(Gefitinib)、厄洛替尼(Erlotinib)等。抗肿瘤单抗，免疫抑制剂PD-1、PD-L1等，待组合的各成分可同时或顺序的给予，以单一制剂形式或者以不同制剂的形式给予。所述组合不仅包括本发明化合物的一种或其他活性剂的组合，而且也包括本发明化合物的两种或更多的其他活性剂的组合。

与其他相同或不同作用机制发挥作用的一种或多种其他药物组合使用。此联合治疗可通过同时、顺序或分开使用治疗的各个组分来实现。所述治疗剂包括但不限于：甾体类的***、可的松、氟替卡松；镇痛药，阿司匹林、布洛芬、吲哚美辛和类阿片。

本发明的有益效果：

本发明提供的具有通式(I)所示结构的取代嘌呤化合物，具有良好的Trk抑制活性和优异的药效学性能，代谢稳定性更高并且生产成本相对低。

附图说明

图1实施例2((S)-2-((6-(4-氟苯甲酰)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-醇)丁酮-1-醇)的核磁氢谱图。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的技术方案进行详细的描述。

在本发明中“(1-4C)烷基”是指分别为1至4个碳原子的饱和的直链或支链的单价烃基。实例包括，但不限于甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-甲基-1-丙基、2-丁基和2-甲基-2-丙基。

在本发明中“(1-4C)烷氧基”是指分别为1至4个碳原子的饱和的直链或支链的单价基团，其中该基团是在氧原子上。

在本发明中“(1-4C)羟基烷基”是指分别为1至4个碳原子的饱和的直链或支链的单价烷基团，其中1个氢原子被OH基团取代。

在本发明中使用的术语“含氟烷基”是指一个或多个氢原子被氟原子替换的烷基。氟烷基的实例包括–CHF₂、–CH₂CF₃或全氟烷基例如–CF₃或–CF₂CF₃。

在本发明中“给药”或“给予”个体化合物是指向需要治疗的个体提供本发明的化合物。

下列实施例用于说明而非限定通式(I)化合物的合成方法。温度均为摄氏度。如果没有另外说明，所有的蒸发均在减压下进行。如果没有另外说明，否则试剂是自商业供货商购得且未经进一步纯化即使用。终产物、中间体和原料的结构通过标准分析方法确认。例如NMR，使用的缩写是本领域常规缩写。

实施例1中间体的制备：

2-氯-N-(4-氟苄基)-9H-嘌呤-6-胺的制备：

结构式如下：

向茄形瓶(250mL)中加入正丁醇(50mL)和2,4-二氯嘧啶(5g，26.7mmol)，搅拌溶解，再缓慢滴加对氟苄胺(3.4g，27mmol)和三乙胺(3.4g，33.6mmol)，升温至110℃反应3h。TLC检测反应完毕，冷却至20℃，有固体析出，抽滤，用正丁醇(5mL)洗涤，烘干得到白色固体产物(5.5g，收率75％)。

2-氯-N-(4-氟苄基)-9-异丙基-9H-嘌呤-6-胺(中间体A1)的制备：

结构式如下：

在茄形瓶(250mL)中加入DMSO(10mL)和2-氯-N-(4-氟苄基)-9H-嘌呤-6-胺(2g，7.2mmol)，搅拌溶解，在18-20℃加入碳酸钾(3.5g，25.3mmol)和2-溴丙烷(2g，16.2mmol)，搅拌5h，TLC检测反应结束。加入5℃冷水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，有机层用盐水洗涤，硫酸钠干燥，减压蒸发浓缩结晶，向残余液中加入2-丙醇(5mL)搅拌10min，抽滤，得到白色固体(2g，86％)。

2-氯-N-(3-氟苄基)-9H-嘌呤-6-胺的制备：

结构式如下：

向茄形瓶(250mL)中加入正丁醇(50mL)和2,4-二氯嘧啶(5g，26.7mmol)，搅拌溶解，再缓慢滴加3-氟苄胺(3.4g，27mmol)和三乙胺(3.4g，33.6mmol)，升温至110℃反应3h。TLC检测反应完毕，冷却至20℃，有固体析出，抽滤，用正丁醇(5mL)洗涤，烘干得到白色固体产物(5.2g，收率71％)。

2-氯-N-(3-氟苄基)-9-异丙基-9H-嘌呤-6-胺(中间体A2)的制备：

结构式如下：

在茄形瓶(250mL)中加入DMSO(10mL)和2-氯-N-(3-氟苄基)-9H-嘌呤-6-胺(2g，7.2mmol)，搅拌溶解，在18-20℃加入碳酸钾(3.5g，25.3mmol)和2-溴丙烷(2g，16.2mmol)，搅拌5h，TLC检测反应结束。加入5℃冷水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，有机层用盐水洗涤，硫酸钠干燥，减压蒸发浓缩结晶，向残余液中加入2-丙醇(5mL)搅拌10min，抽滤，得到白色固体(2.1g，90％)。

2-氯-N-(4-(三氟甲基)苄基)-9H-嘌呤-6-胺的制备：

结构式如下：

向茄形瓶(250mL)中加入正丁醇(50mL)和2,4-二氯嘧啶(5g，26.7mmol)，搅拌溶解，再缓慢滴加4-(三氟甲基)苄胺(4.7g，27mmol)和三乙胺(3.4g，33.6mmol)，升温至110℃反应3h。TLC检测反应完毕，冷却至20℃，有固体析出，抽滤，用正丁醇(5mL)洗涤，烘干得到白色固体产物(6.2g，收率71％)。

2-氯-N-(4-(三氟甲基)苄基)-9-异丙基-9H-嘌呤-6-胺(中间体A3)的制备：

结构式如下：

在茄形瓶(250mL)中加入DMSO(10mL)和2-氯-N-(4-(三氟甲基)苄基)-9H-嘌呤-6-胺(2.4g，7.3mmol)，搅拌溶解，在18-20℃加入碳酸钾(3.5g，25.3mmol)和2-溴丙烷(2g，16.2mmol)，搅拌5h，TLC检测反应结束。加入5℃冷水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，有机层用盐水洗涤，硫酸钠干燥，减压蒸发浓缩结晶，向残余液中加入2-丙醇(5mL)搅拌10min，抽滤，得到白色固体(2g，74％)。

2-氯-N-(3-(三氟甲基)苄基)-9H-嘌呤-6-胺的制备：

结构式如下：

向茄形瓶(250mL)中加入正丁醇(50mL)和2,4-二氯嘧啶(5g，26.7mmol)，搅拌溶解，再缓慢滴加3-(三氟甲基)苄胺(4.7g，27mmol)和三乙胺(3.4g，33.6mmol)，升温至110℃反应3h。TLC检测反应完毕，冷却至20℃，有固体析出，抽滤，用正丁醇(5mL)洗涤，烘干得到白色固体产物(5.9g，收率67％)。2-氯-N-(3-(三氟甲基)苄基)-9-异丙基-9H-嘌呤-6-胺(中间体A4)的制备

2-氯-N-(3-(三氟甲基)苄基)-9-异丙基-9H-嘌呤-6-胺

结构式如下：

在茄形瓶(250mL)中加入DMSO(10mL)和2-氯-N-(4-(三氟甲基)苄基)-9H-嘌呤-6-胺(2.4g，7.3mmol)，搅拌溶解，在18-20℃加入碳酸钾(3.5g，25.3mmol)和2-溴丙烷(2g，16.2mmol)，搅拌5h，TLC检测反应结束。加入5℃冷水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，有机层用盐水洗涤，硫酸钠干燥，减压蒸发浓缩结晶，向残余液中加入2-丙醇(5mL)搅拌10min，抽滤，得到白色固体(2.1g，78％)。结构式如下：

实施例2(S)-2-((6-(4-氟苯甲酰)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-醇)丁酮-1-醇的制备

向茄形瓶(25mL)中加入中间体A1(1.2g，3.8mmol)和(R)-2-氨基-1-丁醇(3mL)，氮气保护，加热至160℃反应8h，TLC检测反应结束，冷却到室温，加入水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×4)萃取，有机层用50℃温水(30mL×2)洗涤，硫酸钠干燥，减压蒸除大部分溶剂。向残余液中加入乙酸乙酯(10mL)，有晶体析出，过滤得白色晶体(1g，70％)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：7.48(d,J＝2.0Hz,1H),7.36–7.29(m,2H),7.04–6.97(m,2H),6.01(s,1H),5.04(s,1H),4.89(d,J＝6.1Hz,1H),4.73(s,2H),4.60(p,J＝6.8Hz,1H),3.85-3.93(m,1H),3.82(dd,J＝10.7,2.6Hz,1H),3.63(dd,J＝10.7,7.7Hz,1H),1.85(s,1H),1.64–1.57(m,1H),1.53(d,J＝6.7Hz,6H),0.97-0.08(m,3H).

实施例3 2-((6-(4-氟苯基)氨基)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-基)氨基)-2-苯乙基1-醇的制备

除了使用DL-苯甘氨醇代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物1的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ：8.82(s,1H),8.29(s,1H),7.76(s,1H),7.32-7.43(m,3H),7.24(t,J＝7.5Hz,1H),7.11-7.19(m,2H),7.05(s,1H),6.61(d,J＝7.5Hz,0H),4.71–4.64(m,1H),4.61(d,J＝6.2Hz,2H),4.54–4.40(m,1H),3.69–3.57(m,1H),1.50(d,J＝6.8Hz,6H),1.41(d,J＝6.7Hz,2H).

实施例41-醇1-(6-(4-氟苯基)氨基)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-醇)哌啶-4-醇的制备

除了使用4-羟基哌啶代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物1的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.47(s，1H)，7.37–7.30(m，2H)，7.26(s，1H)7.01–6.93(m,2H),6.19(s,1H),4.74(d,J＝5.8Hz,2H),4.66(p,J＝6.8Hz,1H),4.42-4.52(m,2H),3.83-3.93(m,1H),3.11325(m,2H),2.14(d,J＝50.4Hz,2H),1.95–1.85(m,2H),1.54(d,J＝6.8Hz,6H).

实施例5(1-(6-((4-氟苄基)氨基)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-基)哌啶-3-基)甲醇的制备

除了使用3-羟甲基哌啶代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物1的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ：7.63(s,1H),7.22(s,1H),7.07–6.88(m,1H),6.69(s,1H),5.37(s,2H),3.72(q,J＝9.3,8.2Hz,2H),3.58(s,2H),3.36(s,1H),1.85(s,2H),1.65–1.54(m,6H),1.46(d,J＝7.0Hz,3H).

实施例6 N-(4-氟苄基)-9-异丙基-2-吗啉代-9H-嘌呤-6-胺的制备

除了使用吗啉代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物1的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：7.47(s,1H),7.35–7.29(m,2H),7.26(s,1H),7.02–6.95(m,2H),6.13(s,1H),4.75(s,2H),4.65(p,J＝6.8Hz,1H),3.70-3.84(m,8H),1.54(d,J＝6.8Hz,6H).

实施例7(S)-2-((6-((3-氟苯基)氨基)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-基)氨基)丁-1-醇的制备

向茄形瓶(25mL)中加入中间体A2(1.2g，3.8mmol)和(R)-2-氨基-1-丁醇(3mL)，氮气保护，加热至160℃反应8h，TLC检测反应结束，冷却到室温，加入水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×4)萃取，有机层用50℃温水(30mL×2)洗涤，硫酸钠干燥，减压蒸除大部分溶剂。向残余液中加入乙酸乙酯(10mL)，有晶体析出，过滤得白色晶体(0.8g，56％)。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：7.51(s,1H),7.29(dd,J＝8.0,6.0Hz,1H),7.13(d,J＝7.7Hz,1H),7.08(d,J＝9.5Hz,1H),7.00–6.91(m,1H),6.08(s,1H),4.88(d,J＝6.0Hz,1H),4.77(s,2H),4.61(p,J＝6.8Hz,1H),3.88(t,J＝7.0Hz,1H),3.82(dd,J＝10.7,2.6Hz,1H),3.62(dd,J＝10.7,7.8Hz,1H),1.75(s,2H),1.65–1.59(m,1H),1.54(d,J＝6.8Hz,6H),1.02(t,J＝7.5Hz,3H).

实施例8 2-(6-(3-氟苯基)氨基)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-基)氨基)-2-苯乙基-1-醇的制备

除了使用DL-苯甘氨醇代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物6的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ：7.81(d,J＝24.4Hz,2H),7.31(s,3H),7.22(t,J＝7.4Hz,2H),7.14(t,J＝7.3Hz,2H),7.07–6.99(m,2H),6.63(d,J＝7.5Hz,1H),4.91(d,J＝6.7Hz,1H),4.80(t,J＝5.8Hz,1H),4.71–4.59(m,1H),4.55–4.42(m,2H),3.54-3.68(m,2H),1.50(d,J＝6.7Hz,1H),1.42(d,J＝6.7Hz,6H).

实施例91-(6-(3-氟苯基)氨基)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-醇)哌啶-4-醇的制备

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ：8.45(s,1H),7.35(td,J＝7.8,5.0Hz,1H),7.16(ddt,J＝16.6,8.0,1.0Hz,2H),7.01–6.94(m,1H),6.59(t,J＝5.5Hz,1H),4.95–4.81(m,3H),4.03(ddd,J＝12.1,8.0,5.7Hz,2H),3.68–3.54(m,4H),1.90–1.70(m,4H),1.47(d,J＝6.3Hz,6H).

实施例10(1-(6-((3-氟苄基)氨基)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-基)哌啶-3-基)甲醇的制备

¹H-NMR(300MHz,CDCl₃)δ：9.31(s,1H),8.37(s,1H),7.17(d,J＝9.7Hz,1H),6.96(s,1H),5.29(s,1H),4.74(s,2H),3.71(dt,J＝24.5,7.1Hz,2H),3.54(s,2H),3.24(s,1H),2.90(s,1H),1.85(s,2H),1.59(s,6H),1.27(dt,J＝7.8,4.3Hz,3H),0.96(t,J＝7.4Hz,1H).

实施例11N-(3-氟苄基)-9-异丙基-2-***-9H-嘌呤-6-胺的制备

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ：8.44(s,1H),7.34(dd,J＝7.8,5.0Hz,1H),7.21–7.10(m,2H),7.02–6.95(m,1H),6.65(t,J＝5.5Hz,1H),4.93–4.82(m,3H),3.76–3.63(m,8H),1.46(d,J＝6.4Hz,6H).

实施例12(S)-2-((9-异丙基-6-((4-(三氟甲基)苄基)氨基)-9H-嘌呤-2-基)氨基)丁-1-醇的制备

向茄形瓶(25mL)中加入中间体A3(1.4g，3.8mmol)和(R)-2-氨基-1-丁醇(3mL)，氮气保护，加热至160℃反应8h，TLC检测反应结束，冷却到室温，加入水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×4)萃取，有机层用50℃温水(30mL×2)洗涤，硫酸钠干燥，减压蒸除大部分溶剂。向残余液中加入乙酸乙酯(10mL)，有晶体析出，过滤得白色晶体(1g，62％)。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：7.57(d,J＝8.1Hz,2H),7.47(d,J＝9.2Hz,3H),7.26(s,2H),6.24(s,1H),4.91–4.82(m,2H),4.65–4.56(m,1H),3.88–3.77(m,2H),3.61(dd,J＝10.6,7.7Hz,1H),1.93(s,1H),1.65–1.56(m,1H),1.53(d,J＝6.8Hz,6H),1.00(t,J＝7.4Hz,3H).

实施例132-(9-异丙基-6-((4-(三氟甲基)苄基)氨基)-9H-嘌呤-2-基)氨基)-2-苯乙基-1-醇的制备

除了使用DL-苯甘氨醇代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物11的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：7.71(s,1H),7.59(d,J＝8.1Hz,2H),7.56–7.43(m,3H),7.40(d,J＝8.0Hz,1H),7.37–7.31(m,1H),7.26(s,2H),6.58(s,1H),4.90(s,2H),4.75-4.76(m,1H),4.01–3.84(m,1H),1.95(s,2H),1.57(d,J＝6.8Hz,6H),1.51(d,J＝6.8Hz,1H).

实施例14(1-(9-异丙基-6-((4-(三氟甲基)苄基)氨基)-9H-嘌呤-2-基)哌啶-4-基)甲醇的制备

除了使用4-羟甲基哌啶代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物11的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ：9.00(d,J＝39.0Hz,3H),8.63(s,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,2H),7.59(d,J＝8.0Hz,2H),4.73(d,J＝16.2Hz,3H),4.59(d,J＝12.9Hz,2H),1.77(d,J＝13.9Hz,2H),1.65–1.60(m,2H),1.52(d,J＝6.8Hz,6H),1.27-1.38(m,2H),0.94(d,J＝12.1Hz,1H).

实施例159-异丙基-2-***-N-(4-(三氟甲基)苄基)-9H-嘌呤-6-胺的制备

除了使用吗啉代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物11的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：7.55(d,J＝8.1Hz,2H),7.47(d,J＝6.9Hz,2H),7.26(s,1H),6.38(s,1H),4.84(d,J＝5.8Hz,2H),4.58-4.72(m,1H),3.7-3.78(m,8H),1.53(d,J＝6.8Hz,6H).

实施例16(S)-2-((9-异丙基-6-((3-(三氟甲基)苄基)氨基)-9H-嘌呤-2-基)氨基)丁-1-醇的制备

向茄形瓶(25mL)中加入中间体A4(1.4g，3.8mmol)和(R)-2-氨基-1-丁醇(3mL)，氮气保护，加热至160℃反应8h，TLC检测反应结束，冷却到室温，加入水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×4)萃取，有机层用50℃温水(30mL×2)洗涤，硫酸钠干燥，减压蒸除大部分溶剂。向残余液中加入乙酸乙酯(10mL)，有晶体析出，过滤得白色晶体(1.2g，74％)。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：7.64(s,1H),7.53(dd,J＝10.4,8.0Hz,2H),7.47(s,1H),7.42(t,J＝7.7Hz,1H),7.27(s,1H),6.36(s,1H),4.90(d,J＝6.2Hz,1H),4.81(s,2H),4.53-4.65(m,1H),3.91–3.78(m,2H),3.62(dd,J＝10.7,7.6Hz,1H),2.12(s,1H),1.70–1.55(m,1H),1.52(d,J＝6.8Hz,6H),0.99(t,J＝7.5Hz,3H).

实施例17 2-((9-异丙基-6-((3-(三氟甲基)苄基)氨基)-9H-嘌呤-2-基)氨基)-2-苯乙基1-醇的制备

除了使用DL-苯甘氨醇代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物15的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ：7.94(s,1H),7.79(s,1H),7.69(s,1H),7.57(d,J＝7.6Hz,2H),7.50(d,J＝7.5Hz,1H),7.32(d,J＝7.4Hz,2H),7.21(t,J＝7.4Hz,2H),7.14(t,J＝7.2Hz,1H),6.65(d,J＝7.6Hz,1H),4.91(q,J＝6.9Hz,1H),4.81(t,J＝5.7Hz,1H),4.75–4.63(m,1H),4.48(dd,J＝13.5,6.8Hz,2H),3.61(q,J＝6.9,5.9Hz,2H),1.50(d,J＝6.8Hz,1H),1.42(d,J＝6.7Hz,6H).

实施例18(1-(9-异丙基-6-((3-(三氟甲基)苄基)氨基)-9H-嘌呤-2-基)哌啶-4-基)甲醇的制备

除了使用4-羟甲基哌啶代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物15的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：8.92(s,1H),8.62(s,1H),7.68(d,J＝19.4Hz,2H),7.55–7.38(m,2H),5.33(d,J＝6.7Hz,1H),4.55-4.94(m,4H),3.58–3.44(m,2H),3.07(t,J＝13.0Hz,1H),2.82(t,J＝12.7Hz,1H),1.93(d,J＝13.8Hz,1H),1.76(d,J＝11.8Hz,2H),1.69–1.50(m,6H),1.44–1.27(m,1H),1.11(d,J＝13.2Hz,1H),0.94(t,J＝7.3Hz,1H).

实施例19 9-异丙基-2-***-N-(3-(三氟甲基)苄基)-9H-嘌呤-6-胺的制备

除了使用吗啉代替(R)-2-氨基-1-丁醇以外，以与化合物15的合成方法相同的方法进行合成。结构式如下：

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：7.65(s,1H),7.55(d,J＝7.7Hz,1H),7.51(d,J＝7.1Hz,2H),7.41(t,J＝7.7Hz,1H),6.26(s,1H),4.90–4.73(m,2H),4.66(p,J＝6.8Hz,1H),3.70-3.78(m,8H),1.54(d,J＝6.8Hz,6H).

实施例20TrkA ELISA测定

a)实验材料

1)TRKa(Carna，目录号：08-186，批号：13CBS-0565G)。2)TRKb(Carna，目录号：08-187，批号：12CBS-0461Q)。3)TRKc(Carna，目录号：08-197，批号：11CBS-0047J)。4)多肽Kinase substrate22(GL Biochem，目录号：112393，批号：P180803-SL112393)。5)DMSO(Sigma，目录号：D8418-1L，批号：SHBG3288V)。6)384孔板(PerkinElmer，目录号：6007290，批号：810712)。

b)实验方法

(1)配制1×Kinase buffer。

(2)化合物的配制：受试化合物测试浓度为10000nM，单孔检测。在384孔板中稀释成100倍终浓度的100％DMSO溶液。使用分液器Echo 550向目的板OptiPlate-384F转移250mL100倍终浓度的化合物。阴性对照孔和阳性对照孔中分别加250mL的100％DMSO。

(3)用1×Kinase buffer配制2.5倍终浓度的激酶溶液。

(4)在化合物孔和阳性对照孔分别加10μL的2.5倍终浓度的激酶溶液；在阴性对照孔中加10μL的1×Kinase buffer。

(5)1000rpm离心30秒，振荡混匀后室温孵育10分钟。

(6)用1×Kinase buffer配制25/15倍终浓度的ATP和Kinase substrate18的混合溶液。

(7)加入10μL的25/15倍终浓度的ATP和底物的混合溶液，起始反应。

(8)将384孔板1000rpm离心30秒，振荡混匀后室温孵育相应时间。

(9)加入30μL终止检测液停止激酶反应，1000rpm离心30秒，振荡混匀。

(10)用Caliper EZ Reader读取转化率。

c)数据分析

(1)计算公式：

Inhibition抑制率％＝(Conversion％_max-Conversion％_sample)/(Conversion％_max-Conversion％_min)*100％

其中：Conversion％_sample是样品的转化率读数；Conversion％_min：阴性对照孔均值，代表没有酶活孔的转化率读数；Conversion％_max：阳性对照孔比值均值，代表没有化合物抑制孔的转化率读数。

(2)拟合量效曲线

以浓度的log值作为X轴，百分比抑制率为Y轴，采用分析软件GraphPad Prism 5的log(inhibitor)vs.response-Variable slope拟合量效曲线，从而得出各个化合物对酶活性的IC₅₀值。

(3)拟合公式为：Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC₅₀-X)*HillSlope

对实施例2-19制备所得的嘌呤类化合进行上述的TrkA ELISA测定，结果见表1。表1提供实施例2-19制备的嘌呤类化合物(浓度为500nM)对TrkA的抑制率。

表1实施例2-19所得的化合物的具体IC₅₀值结果

实施例	TrkA ELISA酶IC<sub>50</sub>(nM)
		2	4
3	5.5
		4	3.1
5	26
		6	10
7	4.4
		8	6
9	3.5
		10	48
11	40
		12	5
13	20
		14	52
15	30
		16	4.8
17	17
		18	53
19	46

由实施例2-19的化合物具体IC₅₀值数据可知，对于通式(I)类的化合物而言，连接基团和取代基团比如X基团、R₂基团的选择以及R₁中的取代基及其位置对于化合物的药效学性能和代谢稳定性有着重要的影响。尽管本发明通过之前的特定实施例说明，但不应将其解释为受此限制；而是本发明涵盖之前公开的一般方面。可在不背离本发明的精神和范围下进行多种修饰并具有多种实施方案。

Claims

1.一种嘌呤类化合物，其特征在于，所述化合物为通式(I)所述化合物或其药学上可接受的盐，

其中：R₁选自(i)卤素、(1-4C)烷氧基、三氟甲基、二氟甲基、中一个或多个取代基取代的苯基，或(ii)一个或多个卤素原子取代的5原或6元芳杂环，所述芳杂环具有N和/或S；

R₂选自以下任意一种：NR_aR_b，(1-4C)羟基烷基，(1-4C)烷基、卤素取代的杂环芳基，含杂原子的环烷基；或者含氟、三氟甲基、羟基、伯氨基、烷氧基、仲氨基中一个或多个取代基取代的(3-6C)环烷基；

R_a是H或(1-6C)烷基；R_b是(1-4C)羟基烷基、杂环芳基或芳基，其中杂环芳基是5至6元杂芳环，具有1-2个独立选自N和O的环杂原子，且含有一个或多个(1-4C)烷基取代基；所述杂环芳基或芳基包含卤素、三氟甲基、羟基、氰基中的一个或多个取代基；或NR_aR_b形成具有环氮原子的4元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、羟基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基；或NR_aR_b形成5至6元杂环，所述杂环具有环氮原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子，所述杂环包含以下的一个或多个取代基取代：羟基、卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、伯氨基、羧基；

所述含杂原子的环烷基是碳连接的4至6元氮杂环，包含(1-4C)烷基、羧基、(1-4C)烷基种的一个或多个取代基；或者(1-4C)烷基取代的吡啶酮或哒嗪环；

2.根据权利要求1所述的嘌呤类化合物，其特征在于，R₂为-NR_aR_b，或者卤素取代的杂环芳基；其中，R_a是H或(1-6C)烷基；R_b是(1-4C)羟基烷基、杂环芳基或芳基，其中杂环芳基是5至6元杂芳环，具有1-2个独立选自N和O的环杂原子，且含有一个或多个(1-4C)烷基取代基；所述杂环芳基或芳基包含卤素、三氟甲基、羟基、氰基中的一个或多个取代基；或NR_aR_b形成具有环氮原子的4元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、羟基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基；或NR_aR_b形成5至6元杂环，所述杂环具有环氮原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子，所述杂环包含以下的一个或多个取代基取代：羟基、卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、伯氨基、羧基；(1-4C)烷基、卤素取代的杂环芳基，

3.根据权利要求1或2所述的嘌呤类化合物，其特征在于，R₂为-NR_aR_b；其中R_a是H或(1-6C)烷基；R_b是(1-4C)羟基烷基、杂环芳基或芳基，其中杂环芳基是5至6元杂芳环，具有1-2个独立选自N和O的环杂原子，且含有一个或多个(1-4C)烷基取代基；所述杂环芳基或芳基包含卤素、三氟甲基、羟基、氰基中的一个或多个取代基；或NR_aR_b形成具有环氮原子的4元杂环，其中所述杂环任选地被独立选自以下的一种或多个取代基取代：卤素、羟基、(1-4C)烷基、(1-4C)烷氧基；或-NR_aR_b形成5至6元杂环，所述杂环具有环氮原子且还包含任选自N、O、S任意一种杂原子，所述杂环包含以下的一个或多个取代基取代：羟基、卤素、三氟甲基、(1-4C)烷基、伯氨基、羧基。

4.根据权利要求1-3任一所述的嘌呤类化合物，其特征在于，R₁为取代苯基，所述取代苯基包含一个或多个卤素、-CF₃、-CHF₂取代基。

5.根据权利要求1-4任一所述的嘌呤类化合物，其特征在于，R₁为含一个或两个的氟或氯原子取代的苯基，或含一个氟原子和-CF₃取代的苯基。

6.根据权利要求1-5任一所述的嘌呤类化合物，其特征在于，R₂为NR_aR_b时，包括如下结构：

7.根据权利要求1-6任一所述的嘌呤类化合物，其特征在于，X为O、NH或NCH₃、NCH₂CH₃。

8.通式(I)所示的嘌呤类化合物或其药学上可接受的盐在制备Trk激酶抑制药物中的应用，

9.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求8中通式(1)所示的嘌呤类化合物或其药学上可接受的盐，药学上可接受载体，赋形剂或稀释剂。

10.权利要求1-6任一所述嘌呤类化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗哺乳动物的癌症、疼痛、炎症、神经变性疾病、克氏锥虫感染或溶骨性疾病药物中的应用。