CN110178999A - 海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，属于猪养殖技术领域。海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，其在断奶仔猪日粮中的添加量为400mg/kg，所述海藻多糖中多糖的含量为30%。海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用在不影响仔猪生长性能，甚至能显著提高仔猪日增重，显著降低仔猪腹泻频率和料重比的基础上，还能够缓解仔猪因断奶导致的应激反应，促进断奶仔猪肠道结构发育、肠道免疫等效果，可以起到完全替代抗生素的作用。

Description

海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用

技术领域

本发明属于猪养殖技术领域，具体涉及海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用。

背景技术

早期断奶仔猪因环境、营养等因素改变易引发仔猪“早期断奶综合征”，出现饲料利用率低、消化功能紊乱、腹泻等症状，仔猪生长严重受阻。抗生素能够促进动物生长，降低腹泻提高抗病能力，而被广泛应用于当前养殖业。然而长期大量使用抗生素，造成的药物残留及细菌耐药性等弊端已成为当前“生态养殖”趋势下亟需解决的问题，因而逐步全面替代饲用抗生素的使用已成为必然趋势，益生菌、酸化剂等相继被研究用于替代抗生素，然而大多数替代抗生素的方案只是出于研究阶段，目前还没有完全不添加抗生素的猪日粮产品，因此开发出一种在不影响断奶仔猪生长及健康的基础上，能完全不用抗生素的猪日粮，对于实现生态养殖具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，可显著提高仔猪日增重，显著降低仔猪腹泻频率和料重比，可以起到完全替代抗生素的作用。

为实现上述目的，通过如下技术方案实现：

海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，海藻多糖在断奶仔猪日粮中的添加量为200-800mg/kg；

优选的，海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，海藻多糖在断奶仔猪日粮中的添加量为400mg/kg；

进一步所述海藻多糖中多糖的含量为30%；

海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，所述断奶仔猪日粮包括有以下质量百分比的原料：海藻多糖0.02-0.08%，膨化玉米48.42-48.48%，碎米10%，面粉8%，发酵豆粕11%，膨化大豆9.5%，进口鱼粉2.5%，乳清粉6%，磷酸氢钙0.9%，石粉1%，氯化钠0.3%，赖氨酸盐酸盐0.6%，DL-蛋氨酸0.26%，苏氨酸0.34%，氯化胆碱0.1%，预混料1%；

所述预混料为每千克日粮提供：Fe 180 mg，Mn 40mg，Zn 110 mg，Co 1.5 mg，Se 0.28mg，Cu 10 mg，VA 7000 IU，VD3 2150 IU，VE 220 mg，VK 12 mg，VB1 2.2 mg，VB2 6 mg，VB69 mg，VB12 0.024 mg ，生物素2.5 mg，叶酸0.9 mg，泛酸20 mg。

本发明使用海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中应用，可以完全替代抗生素，且有效提高断奶仔猪的生长性能，与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中应用，可显著提高仔猪日增重，显著降低仔猪腹泻频率和料重比，可以起到完全替代抗生素的作用。

2、海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中应用，能显著降低仔猪血清皮质醇含量，提高白蛋白含量，显著提高仔猪血清总抗氧化能力及SOD、GSH-Px、CAT活性和抗炎性因子IL-10含量，显著降低血清中促炎性因子IL-6、TNF-α含量，有效提升了断奶仔猪体液免疫及抗氧化、抗应激能力。

3、海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中应用，能显著提高仔猪小肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度比值；显著提高仔猪十二指肠紧密连接蛋白ZO-1、Occludin mRNA的表达以及仔猪空肠、回肠紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1 mRNA的表达；显著降低仔猪空肠促炎性因子IL-6、TNF-α mRNA表达量，有效改善了仔猪肠道结构发育和肠粘膜免疫功能，提升仔猪肠道健康水平。

4、海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中应用，能显著提高仔猪盲肠内丙酸含量及仔猪空肠中乳糖酶、麦芽糖酶活性，同时仔猪空肠粘膜SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高，有效改善仔猪肠道消化酶及抗氧化酶活性，提高仔猪对营养物质的消化利用率。

5、本发明中含有海藻多糖的断奶仔猪日粮配方科学，营养全面，完全无抗生素，可有效提高仔猪健康和生长性能。

附图说明

图1：实施例2组与对照组仔猪小肠形态结构切片图（100 X）。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径获得。

实施例1

海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，海藻多糖在断奶仔猪日粮中的添加量为200mg/kg；

所述海藻多糖中多糖的含量为30%；

海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，所述断奶仔猪日粮包括有以下质量百分比的原料：海藻多糖0.02%，膨化玉米48.48%，碎米10%，面粉8%，发酵豆粕11%，膨化大豆9.5%，进口鱼粉2.5%，乳清粉6%，磷酸氢钙0.9%，石粉1%，氯化钠0.3%，赖氨酸盐酸盐0.6%，DL-蛋氨酸0.26%，苏氨酸0.34%，氯化胆碱0.1%，预混料1%；

所述预混料为每千克日粮提供：Fe 180 mg，Mn 40mg，Zn 110 mg，Co 1.5 mg，Se 0.28mg，Cu 10 mg，VA 7000 IU，VD3 2150 IU，VE 220 mg，VK 12 mg，VB1 2.2 mg，VB2 6 mg，VB69 mg，VB12 0.024 mg ，生物素2.5 mg，叶酸0.9 mg，泛酸20 mg。

实施例2

海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，海藻多糖在断奶仔猪日粮中的添加量为400mg/kg；

所述海藻多糖中多糖的含量为30%；

海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，所述断奶仔猪日粮包括有以下质量百分比的原料：海藻多糖0.04%，膨化玉米48.46%，碎米10%，面粉8%，发酵豆粕11%，膨化大豆9.5%，进口鱼粉2.5%，乳清粉6%，磷酸氢钙0.9%，石粉1%，氯化钠0.3%，赖氨酸盐酸盐0.6%，DL-蛋氨酸0.26%，苏氨酸0.34%，氯化胆碱0.1%，预混料1%；

所述预混料为每千克日粮提供：Fe 180 mg，Mn 40mg，Zn 110 mg，Co 1.5 mg，Se 0.28mg，Cu 10 mg，VA 7000 IU，VD3 2150 IU，VE 220 mg，VK 12 mg，VB1 2.2 mg，VB2 6 mg，VB69 mg，VB12 0.024 mg ，生物素2.5 mg，叶酸0.9 mg，泛酸20 mg。

实施例3

海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，海藻多糖在断奶仔猪日粮中的添加量为800mg/kg；

所述海藻多糖中多糖的含量为30%；

海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，所述断奶仔猪日粮包括有以下质量百分比的原料：海藻多糖0.08%，膨化玉米48.42%，碎米10%，面粉8%，发酵豆粕11%，膨化大豆9.5%，进口鱼粉2.5%，乳清粉6%，磷酸氢钙0.9%，石粉1%，氯化钠0.3%，赖氨酸盐酸盐0.6%，DL-蛋氨酸0.26%，苏氨酸0.34%，氯化胆碱0.1%，预混料1%；

所述预混料为每千克日粮提供：Fe 180 mg，Mn 40mg，Zn 110 mg，Co 1.5 mg，Se 0.28mg，Cu 10 mg，VA 7000 IU，VD3 2150 IU，VE 220 mg，VK 12 mg，VB1 2.2 mg，VB2 6 mg，VB69 mg，VB12 0.024 mg ，生物素2.5 mg，叶酸0.9 mg，泛酸20 mg。

试验例1

试验在江西丰城市某猪场进行，试验选取24日龄初始体重为（6.79±0.04）kg断奶仔猪240头，随机分为4个处理组，每个处理组6个重复，每个重复10头仔猪。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮+抗生素（75 mg/kg金霉素），试验1-3组分别饲喂实施例1-3制得的日粮，试验期21 d。

饲养管理：试验期内猪只自由采食粉料并保证饮水充足。于试验开始前对猪只栏舍进行彻底消毒，试验期21 d，每天观察并记录仔猪腹泻情况，于试验第1、21 d上午8:00空腹称重，试验场地日常管理及试验猪只免疫措施均按猪场生产程序进行。

1 样品采集及处理

1.1 试验结束后，各试验组中随机挑选一头仔猪空腹前腔静脉采血10 mL，置4℃离心机3000 r/min离心10 min分离血清和血浆备用；

1.2 试验结束后，各试验组中随机挑选一头接***均体重的仔猪，禁食12 h后进行屠宰。分离出十二指肠、空肠和回肠中段。洗净肠道食糜后，置于4%多聚甲醛溶液中固定24 h，采用常规法制作石蜡切片。

1.3 试验结束后，在海藻多糖组和对照组的各重复中选取一头接***均体重的仔猪，禁食12 h后立即屠宰。分离仔猪十二指肠、空肠、回肠和盲肠，用于测定食糜pH。取盲肠中段肠管和结肠，包扎后液氮保存，后转入-80℃冰箱备用。

分离空肠和回肠，洗净肠腔，于干净台面上小心刮取肠黏膜，编号后分装在无菌冻存管中，-80℃冰箱保存。

2 测定指标及方法

2.1 生长性能

以各重复组为单位每天观察并记录总采食量。试验第1 d和第21 d清晨对试验猪进行空腹称重，以每个重复为单位做好相关记录，计算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、料重比（F/G）。

平均日采食量（ADFI）=采食量/天数

平均日增重（ADG）=（末重-初重）/试验天数

料重比（F/G）=总采食量（kg）/总增重（kg）

2.2 腹泻频率

试验期内每天定时上午8:00，下午14:00记录仔猪腹泻情况。腹泻频率计算公式如下：

腹泻频率（%）=总腹泻次数/（试验猪总数×试验天数）×100%

2.3 血液生化指标

采用迈瑞BS-420全自动生化分析仪测定血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、皮质醇（COR）、碱性磷酸酶（ALP），测定试剂盒均购自于中生北控股份有限公司。

2.4 血清抗氧化指标

采用紫外光分光光度计测定血清中总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）及丙二醛（MDA）的吸光度（OD）值，最后计算出样品指标值。以上指标均使用南京建成生物工程研究所试剂盒进行检测。

2.5 血清免疫指标

血清中的IgA、IgG、IgM，补体3（C3）、补体4（C4），细胞因子白介素6（IL-6）、白介素10（IL-10）、白介素1β（IL- 1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）采用放射免疫法测定。测定试剂盒均购自于中生北控股份有限公司。

2.6 肠道组织形态结构

取出固定好的肠道组织，经HE染色后，利用Motic Images Advanced 3.2软件，测量十二指肠、空肠、回肠绒毛高度（Villus Length，V）和隐窝深度（Crypt Depth，C），每张切片观察5个视野。计算绒毛高度/隐窝深度（V/C）。

2.6 肠道通透性

血浆中DAO和D-乳酸含量采用南京建成生物工程研究所试剂盒检测。

2.7 肠道内容物pH

取好肠样，立即用pH计测定十二指肠、空肠前段、空肠后段，回肠中段以及盲肠内容物pH值，每个肠段重复测量三次，并做好记录。

2.8 肠道挥发性脂肪酸

准确称取1 g解冻后的盲肠、结肠内容物，加入1 ml超纯水混匀，在4℃条件下15000 r/min离心15 min。转移上清液，按体积比9:1加入25%偏磷酸固定，气象色谱仪测定挥发性脂肪酸含量。

2.9 肠道消化酶活性

准确称取0.3 g的空肠黏膜样品，加入2.7 mL PBS溶液，于低温条件下研磨混匀，在4℃条件下3000 r/min离心10 min，取上清液，即得到10%的小肠黏膜匀浆液，采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定空肠蔗糖酶、乳糖酶和麦芽糖酶活性。

2.10 肠粘膜抗氧化酶活性

取10%的空肠黏膜匀浆液，采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定空肠SOD、GSH-PX、CAT活性及MDA含量。

3 数据处理与统计分析

试验数据运用Excel 2013软件初步运算后，SPSS 17.0软件进行单因素方差分析分析。各组数据以“平均值±标准误”表示，以P<0.05为显著性判断标准。

4 结果

4.1 海藻多糖对断奶仔猪生长性能和腹泻频率的影响

由表1-1可知，与对照组相比，饲粮中添加400 mg/kg（实施例2组）和800 mg/kg海藻多糖（实施例3组）均能显著提高仔猪日增重，并且显著降低仔猪料重比和腹泻频率（P<0.05）。此外，实施例2组与实施例3组仔猪的生长性能没有显著差异，考虑到经济效益等因素，故选用实施例2组与对照组作进一步研究；

表1-1 海藻多糖对断奶仔猪生长性能及腹泻频率的影响

注：同行数据肩标不同大小写字母表示差异显著（P<0.05），相同或无字母表示差异不显著（P>0.05）。

4.2 海藻多糖对断奶仔猪血液生化指标的影响

如表1-2所示，与对照组相比，实施例2组仔猪血清皮质醇含量显著降低（P<0.05），白蛋白含量有升高的趋势（P=0.052），此外碱性磷酸酶活性提高了19.40%，但差异不显著（P>0.05）；

表1-2 海藻多糖对断奶仔猪血液生化指标的影响

4.3 海藻多糖对断奶仔猪血清抗氧化指标和免疫指标的影响

由表1-3可知，与对照组相比，饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖（实施例2组）显著提高了仔猪血清总抗氧化能力（P<0.05），显著提高了SOD、GSH-Px、CAT活性（P<0.05），并且有降低丙二醛的趋势（P=0.064）。

由1-4可知，与对照组相比，400mg/kg海藻多糖组（实施例2组）仔猪血清C3、C4含量显著升高，其中C4含量增加了50%（P<0.05），促炎性因子IL-6、TNF-α水平显著降低（P<0.05）。此外，实施例2组仔猪血清抗炎性因子IL-10比对照组增加了65.6%（P<0.05），且血清IgG有升高的趋势（P=0.09），IL-1β有降低的趋势（P=0.075）；

表1-3 海藻多糖对断奶仔猪血清抗氧化指标的影响

表1-4 海藻多糖对断奶仔猪血清免疫指标的影响

4.4 海藻多糖对断奶仔猪小肠粘膜形态结构的影响

由附图可见，对照组仔猪小肠绒毛细短、稀疏，仔猪小肠绒毛粗长并且排列密集。

由表1-5可见，实施例2组仔猪小肠绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度比值显著升高（P<0.05），但两组隐窝深度无显著差异（P>0.05）；

表1-5 海藻多糖对断奶仔猪小肠绒毛形态结构的影响

4.5 海藻多糖对断奶仔猪肠道通透性的影响

由表1-6可知，与对照组相比，饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖能显著降低仔猪血浆D-乳酸含量（P<0.05），同时血浆DAO活性也降低了42.71%，但未达到显著差异（P>0.05）。

表1-6 海藻多糖对断奶仔猪肠道通透性的影响

4.6 海藻多糖对断奶仔猪肠道pH及挥发性脂肪酸的影响

如表1-7所示，与对照组相比，饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖（实施例2组）后仔猪各肠段pH值无显著变化（P>0.05）。由表1-8可知，饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖（实施例2组），仔猪盲肠内丙酸含量提高了32.41%（P<0.05），乙酸、丁酸及总酸含量分别提高了15.76%、17.95%、18.81%，但无显著差异（P>0.05）。由表1-9可知，实施例2组与对照组仔猪结肠内挥发性脂肪酸无显著差异，但实施例2组乙酸、丁酸及总酸含量分别提高了17.15%、31.55%、12.42%（P>0.05）；

表1-7 海藻多糖对断奶仔猪肠道pH的影响

表1-8 海藻多糖对断奶仔猪盲肠挥发性脂肪酸的影响

表1-9 海藻多糖对断奶仔猪结肠挥发性脂肪酸的影响

4.7 海藻多糖对断奶仔猪肠道消化酶活性的影响

由表1-10可知，相较于对照组，实施例2组仔猪空肠乳糖酶、麦芽糖酶活性显著升高（P<0.05），空肠蔗糖酶活性提高了20.44%，但未达到显著差异（P>0.05）；

表1-10 海藻多糖对断奶仔猪空肠粘膜二糖酶活性的影响

4.8 海藻多糖对断奶仔猪肠粘膜抗氧化酶的影响

如表1-11所示，实施例2组仔猪空肠粘膜SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高，且MDA含量显著降低（P<0.05）；

表1-11 海藻多糖对断奶仔猪肠粘膜抗氧化酶的影响

试验结果表明：

①与对照组相比，实施例2组和实施例3组仔猪ADG均显著提高，料重比和腹泻频率降低；

②添加400 mg/kg海藻多糖能够改善仔猪因断奶导致的应激反应；

③与对照组相比，饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖能显著提高仔猪血清抗氧化能力，并能够调控炎症因子，增强机体免疫能力；

④饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖能够改善小肠形态结构，提高小肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度比值；

⑤饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖可在一定程度上降低仔猪肠道通透性，维持小肠正常的物理屏障功能；

⑥400 mg/kg海藻多糖对断奶仔猪盲肠和结肠挥发性脂肪酸具有一定的调节作用；

⑦饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖显著提高了仔猪空肠乳糖酶、麦芽糖酶活性，表明仔猪对碳水化合物消化吸收能力增强；

⑧饲粮中添加400 mg/kg海藻多糖提高了仔猪空肠粘膜抗氧化酶活性，一定程度上缓解了因断奶导致的肠道氧化应激。

Claims (2)

1.海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，其特征在于海藻多糖在断奶仔猪日粮中的添加量为400mg/kg，所述海藻多糖中多糖的含量为30%。

2.根据权利要求1所述的海藻多糖替代抗生素在断奶仔猪日粮中的应用，其特征在于：所述断奶仔猪日粮包括有以下质量百分比的原料：海藻多糖0.04%，膨化玉米48.46%，碎米10%，面粉8%，发酵豆粕11%，膨化大豆9.5%，进口鱼粉2.5%，乳清粉6%，磷酸氢钙0.9%，石粉1%，氯化钠0.3%，赖氨酸盐酸盐0.6%，DL-蛋氨酸0.26%，苏氨酸0.34%，氯化胆碱0.1%，预混料1%；

所述预混料为每千克日粮提供：Fe 180 mg，Mn 40mg，Zn 110 mg，Co 1.5 mg，Se 0.28mg，Cu 10 mg，VA 7000 IU，VD3 2150 IU，VE 220 mg，VK 12 mg，VB1 2.2 mg，VB2 6 mg，VB69 mg，VB12 0.024 mg ，生物素2.5 mg，叶酸0.9 mg，泛酸20 mg。