CN110124091A - 医用缝合线及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种医用缝合线及其制备方法,该缝合线包括缝合线本体,黏附涂层和载药层。缝合线本体浸泡在黏附剂中使其表面形成黏附涂层,再将具有黏附涂层的线浸泡在载药纳米微粒中,使黏附涂层上吸附载药纳米微粒,形成载药层,通过反复浸泡形成多层载药层。该医用缝合线可以极大提高附着在线上的载药纳米微粒的吸附力,使缝合线在使用后可以均匀的缓释药物。
Description
技术领域
本发明涉及一种医用缝合线及其制备方法,尤其涉及一种载药医用缝合线及其制备方法。
背景技术
疾病和意外事故引起的组织损伤在临床上十分常见,如何促进组织再生与修复目前仍是外科手术中常见的难题,特别是对难以愈合的组织,如肌腱组织,或糖尿病患者的组织。目前临床上主要通过增加外科缝合强度、改进缝合材料和方法等,但效果有限。有研究通过给损伤组织中注射促进愈合的基因,但由于注射的量少,容易渗漏,不能达到持续供给,同时注射的基因容易被组织中的酶降解,导致治疗效果一般。
为此,我们拟将前期发现的具有促进细胞增殖的基因负载到缓释纳米微粒,然后再将载基因纳米微粒负载到医用缝线,通过缝合来递送载基因纳米微粒来增强治疗效果。现有的载药缝合线,主要通过直接浸扎的方法将药物负载到缝线表面,但我们研究后发现,缝合组织时由于有些组织,特别是肌腱组织比较致密,缝合时缝线表面的药物很容易受到阻力而脱落,无法将药物随缝线递送到组织内,治疗效果很差,基本上没什么疗效。也有研究通过直接将药物的制备到缝线内,但这必将影响缝线的强度,特别是对有些要求一定缝合强度的组织,这种缝线很难符合要求。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提高医用缝合线的载药强度及药物的释放效果。
为了解决上述技术问题,本发明的医用缝合线,包括缝合线本体,在所述缝合线本体上覆盖有黏附涂层,在所述黏附涂层上吸附有载药层。
上述技术方案的优化方案,所述缝合线本体上覆有多层黏附涂层和载药层,所述黏附涂层和载药层依次交替设置。
上述技术方案的优化方案,所述黏附涂层为聚儿茶酚胺类化合物和/或多聚赖氨酸和/或明胶黏附剂。
上述技术方案的优化方案,所述聚儿茶酚胺类化合物为多巴胺和/或左旋多巴和/或去甲肾上腺素和/或其衍生物通过氧化自聚形成。
上述技术方案的进一步优化,所述黏附涂层可以由聚儿茶酚胺类化合物,多聚赖氨酸,明胶的不同占比组成的黏附涂层。
上述技术方案的优化方案,所述载药层,包括载药纳米微粒。
上述技术方案的优化方案,所述载药纳米微粒为载基因纳米微粒,所述基因至少包括可以促进组织愈合和/或抗菌消炎和/或抑制瘢痕粘连的基因,基因为产生蛋白,多肽或功能RNA的核苷酸序列。
上述技术方案的优化方案,所述载药层每层载基因量为0.05-50μg/cm,载基因纳米微粒层的总厚度为10纳米到100微米。
上述技术方案的优化方案,所述基因在载药纳米微粒中的含量为0.1-20wt%,载基因纳米微粒的直径为5纳米到1000纳米。
本发明的医用缝合线的制备方法,包括如下步骤:
1)、将儿茶酚胺类化合物和/或多聚赖氨酸和/或明胶溶于PH值8.0-8.9的弱碱性溶液中,溶液浓度为0.1-10mg/mL,溶解温度为4-50度,制得黏附剂溶液。
2)、将缝合线浸泡在黏附剂溶液中,浸泡时间为0.5-5小时,浸泡温度为4-50度,使缝合线上形成黏附涂层。
3)、再将缝合线放入载药纳米微粒溶液中,载药纳米微粒溶液浓度为0.1-1000mg/mL,浸泡时间为0.5-5小时,浸泡温度为4-50度,使黏附涂层上吸附载药纳米微粒。
上述制备方案中,重复步骤2和3,使缝合线上形成多层黏附涂层和载药纳米微粒层。
上述制备方案中,所述载药纳米微粒为载基因纳米微粒。
上述制备方案中,所述载药纳米微粒通过如下方法制得,
a)、将载体溶于有机溶剂,加到乳化剂中进行超声,得到初乳液。
b)、将所述初乳溶液进一步加到乳化剂中再次进行超声,得到复乳液。
c)、所述复乳液去除有机溶剂,得到纳米微粒。
d)、将纳米微粒溶于阳离子聚合物溶液,得到带正电荷的纳米微粒。
e)、将药溶液按比例加到修饰过的纳米微粒溶液中,形成载药纳米微粒。
上述制备方案中,所述有机溶剂包括氯仿和/或二氯甲烷;所述乳化剂包括聚乙二醇和/或聚乙烯醇;所述阳离子聚合物包括聚醚酰亚胺;所述载体包括聚乳酸-羟基乙酸共聚物。
上述载基因纳米微粒,其粒径范围为5纳米到1000纳米,通过差速离心,即通过不同离心力和不同离心时间,可将纳米微粒分成不同大小,粒径分布较窄的几个区间。
上述载基因纳米微粒的医用缝线的制备方法的进一步优化,将不同粒径的载基因纳米微粒负载到不同黏附层上。
上述制备方案中,所述药溶液为基因溶液,所述基因包括促进组织愈合的和/或抗菌消炎和/或抑制瘢痕粘连的各种基因。
本发明的医用缝合线具有黏附涂层,具有强力的黏附功能,可以黏附载药纳米微粒,且适用于现有的各种医用手术缝线,包括可吸收缝线和不可吸收缝线;尤其将具有促进组织愈合的基因负载到纳米微粒,然后再将载基因纳米微粒负载到黏附剂修饰的医用缝线,发现这种载纳米微粒缝线在缝合组织特别是致密的组织时,缝线表面负载的纳米微粒不受缝合阻力影响,缝合后,还是牢牢的负载在缝线表面,达到递送基因的目的。同时可以实现了基因的持续释放、增加局部基因浓度,提高了治疗效果。
附图说明
图1为一种实施方式的医用缝合线截面示意图;
图2是聚多巴胺修饰的缝合线和普通缝合线的对比图,其中A为普通缝合线,B为聚多巴胺修饰的缝合线;
图3是载基因纳米微球的电镜扫描图及粒径分布图;
图4是聚多巴胺修饰的载基因纳米微粒缝合线的电镜扫描图;
图5是载基因纳米微粒缝合线的体外释放曲线图;
图6是载BSA-FITC纳米微粒缝线在肌腱组织中荧光的分布图;
图7是载基因纳米微粒缝合线促进大鼠跟腱组织愈合的效果图;
图8是载基因纳米微粒缝合线促进鸡屈指肌腱组织愈合的效果图。
具体实施方式
参见附图1,医用缝合线,包括缝合线本体1,在所述缝合线本体1上交替覆有黏附涂层2和载药层3,所述载药层3吸附在黏附涂层2上,黏附涂层2和载药层3均可设置1至30层,优选2至18层。
所述缝合线本体1可以是外科缝合中常用的缝线,包括不可吸收缝线:单丝线,编织线、可吸收缝线。
所述黏附涂层2为聚儿茶酚胺类化合物和/或多聚赖氨酸和/或明胶黏附剂,其中聚儿茶酚胺类化合物为多巴胺和/或左旋多巴和/或去甲肾上腺素和/或其衍生物通过氧化自聚形成的,所述黏附剂可为聚儿茶酚胺类化合物和多聚赖氨酸和明胶混合物,其质量比可为(60%-90%)∶(20%-5%)∶(20%-5%),也可优选为聚多巴胺修饰的黏附涂层。
下表A是不同占比的黏附剂混合物形成的黏附涂层负载和释放率。
多巴胺∶聚赖氨酸∶明胶 | 缝线平均负载纳米微粒量(ng/cm) | 基因释放率(%) |
60∶20∶20 | 23.2 | 83.8 |
70∶15∶15 | 24.8 | 82.1 |
80∶10∶10 | 27.1 | 80.3 |
90∶05∶05 | 29.6 | 78.5 |
100∶00∶00 | 32.8 | 75.6 |
所述载药层3为载药纳米微粒层,载药纳米微粒可以是载不同基因的纳米微粒。不同的载药层3为可以载不同基因的纳米微粒。
医用缝合线的一种制备方法,包括以下步骤:
a)、将多巴胺单体溶于弱碱性的溶液中,得到多巴胺溶液;
b)、将所述多巴胺溶液来浸泡缝合线本体1,得到聚多巴胺修饰的缝合线;
c)、将聚多巴胺修饰的缝线放入载基因纳米微粒溶液中,得到聚多巴胺修饰的载基因纳米微粒缝线。
该制备方法中,首先将多巴胺溶于PH值为8.0-8.9弱碱性溶液中。其中,所述弱碱性溶液包括但不限于Tris-HCl,PBS,氨水,氢氧化钠等溶液。
该制备方法中,所述多巴胺溶液的浓度优选为0.1-8mg/mL,更优选为1-4mg/mL,具体可选择为3mg/mL;所述Tris-HCl浓度优选为0.01-1M,具体可选择为0.05M;所述Tris-HClPH值优选为8.0-8.9,具体可选择为8.5。
该制备方法中,所述多巴胺溶于Tris-HCl的温度优选为4-50度,具体可选择为25度;对溶解的时间没有特别限定,可以是多巴胺在缓冲液中完全溶解即可。
该制备方法中,所述多巴胺溶液来浸泡缝合线,浸泡的时间为1-6小时,具体可选择为2小时;浸渍的温度优选为4-50度,具体可选择为25度;所述缝线为可吸收缝合线和/或不可吸收缝线,具体可选择外科手术上常用的缝线。
该制备方法中,所述黏附剂修饰的缝合线浸入载基因纳米微粒溶液中,得到黏附剂修饰的载基因纳米微粒缝合线,缝合线浸泡载基因纳米微粒溶液的时间为1-10小时,更优选为2~5小时,具体可选择为3小时;浸泡温度优选为4-50度,具体可选择为25度;所述基因为常见的促进组织愈合,消炎抗菌和/或抑制粘连的基因,具体可选择促进愈合的过表达bFGF和/或VEGFA质粒;所述纳米微粒在缝合线上负载量为0.05-50μg/cm;所述负载方式可以多层黏附,优选为1-30层,具体可选择为5层,也可以将不同基因的纳米微粒按照需要进行交替黏附到缝合线上。
本发明提供了一种载基因纳米微粒的制备方法,包括以下步骤:
a)、将载体溶于有机溶剂,加到乳化剂中进行超声,得到初乳液;
b)、将所述初乳溶液进一步加到到乳化剂中再次进行超声,得到复乳液;
c)、所述复乳液去除有机溶剂,得到纳米微粒;
d)、将纳米微粒溶于阳离子聚合物溶液,得到带正电荷的纳米微粒;
e)、将基因溶液按比例加到修饰过的纳米微粒溶液中,形成载基因纳米微粒。
优选的,所述有机溶剂包括氯仿和/或二氯甲烷;所述乳化剂包括聚乙二醇和/或聚乙烯醇;所述阳离子聚合物包括聚醚酰亚胺;所述载体包括聚乳酸-羟基乙酸共聚物;所述基因包括促进组织愈合和/或抗菌消炎和/或抑制瘢痕粘连的各种基因。
为了验证缝合线负载基因纳米微粒的效率和体内递送情况,以及缝合线缝合到组织中,纳米微粒或基因在组织中的扩散和转染情况,本发明中制备了载EGFP质粒纳米微粒。
在本发明中,所述缓释纳米微粒载体为聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA),该共聚物由羟基乙酸单体和乳酸单体共聚而成,共聚物具有乳酸结构的重复单元和具有羟基乙酸结构的重复单元。
在本发明提供的一个实施例中,所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物的重均分子量(Mw)为30000~95000。
在本发明提供的一个实施例中,所述乳酸-羟基乙酸共聚物中具有乳酸结构的重复单元与具有羟基乙酸结构的重复单元的摩尔比为(50~90)∶(50~10),优选为(60~70)∶(40~30),具体可为65∶35。优选的,所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物的重均分子量为30000~95000。
在本发明提供的制备方法中,所述有机溶剂包括但不限于二氯甲烷和/或氯仿。
在本发明中,所述基因与载体的质量比优选为1∶(5~100),具体可选择为1∶30;所述载体和有机溶剂的质量体积比优选为(10~200)mg∶(1~10)mL,具体可选择为50mg∶1mL。
在本发明中,所述基因、载体和有机溶剂混合的温度优选为室温;本发明对混合所用的设备没有特别限定,优选本领域技术人员熟知的超声破碎仪。超声后,得到混合溶液。
得到混合溶液后,将所述混合溶液、乳化剂混合。其中,所述乳化剂包括但不限于聚乙烯醇(简称:PVA)和/或聚乙二醇。在本发明中所述聚乙烯醇的分子量优选为8000~25000000,聚乙二醇的分子量优选为4000~2500000。在本发明中,所述乳化剂与所述混合溶液中载体的质量比优选为(30~1000)∶(10~100);所述乳化剂溶液与所述混合溶液体积比优选为(1~100)mL∶(1~10)mL。在本发明中,所述混合溶液、乳化剂的混合优选在超声条件下进行;所述超声的功率优选为100~500W;所述超声的时间优选为0.5~5min。
在本发明中,除去有机溶剂的方式优选为对所述复乳液进行搅拌,从而使复乳液中的有机溶剂缓慢挥发。复乳液中的有机溶剂除净后,得到纳米微粒。在本发明中,优选对得到的纳米微粒进行水洗,从而提高纳米微粒的纯净度。在本发明提供的实施例中,所述基因在载基因缓释纳米微粒中的含量为0.1~20wt%。本发明提供的方法能够制得粒径均一、分散性好的载基因缓释纳米微粒。在本发明提供的实施例中,所述在载基因缓释纳米微粒的粒径为10~1000nm,具体可为100~500nm。在本发明提供的一个实施例中,所述载基因缓释纳米微粒缝合线为手术缝合线,所述基因在纳米微粒缝合线上负载量为0.01~10μg/cm。
在本发明提供的实施例中载基因纳米微粒,其粒径范围为5纳米到1000纳米,通过离心机差速离心,即通过不同离心力和不同离心时间,可将载基因纳米微粒分成不同大小,粒径分布较窄的几个区间。优选为260-950nm;180-420nm;110-240nm;40-100nm;5-50nm。
下表B是不同离心力和不同离心时间分离出不同的纳米微粒粒径分布区间。
上述技术方案提供的载基因缓释纳米微粒缝合线,具有良好的缓释效果。
本发明提供的上述技术方案具有如下优势之一:
1)、本发明优选聚多巴胺来修饰缝合线,聚多巴胺是由儿茶酚胺类化合物多巴胺氧化自聚形成的聚合物,具有强力的黏附能力以及良好的生物相容性。
2)、本发明选取外科手术缝合线,包括可吸收缝合线和不可吸收缝合线,修饰后的缝合线强度和缝合特性无明显改变。
3)、本发明优选PLGA为制备纳米微粒,PLGA是一种可降解的具有良好生物相容性的高分子有机化合物,无毒、具有良好的生物相容性,被广泛应用于制基因、医用工程材料和现代化工业领域。
4)、本发明载基因缓释纳米微粒可以将基因以缓释的方式释放。有效延长基因的作用时间。我们的研究显示载基因缓释纳米微粒可以持续释放基因达到1个月。
5)、本发明载基因缓释纳米微粒可避免基因易降解,失活等缺点;
6)、本发明制备方法制得的载基因缓释纳米微粒粒径较均一,分散性好。
7)、本发明制备方法制得的载基因纳米微粒缝合线,所载纳米微粒均匀分布在缝合线表面,缝合后不滑脱,缝合后一周,纳米微粒及基因可以扩散的缝合线周围组织中。
8)、本发明通过将载基因纳米微粒黏附到缝合线表面来将基因有效递送到体内组织,避免直接注射基因容易流失等确定,增加组织局部浓度,增强基因的作用时间和功能疗效。
具体实施例
制备聚多巴胺修饰的缝合线
步骤1)
称取1.21g三羟甲基氨基甲烷(Tris,Mw=121.14)加到1000mL的双蒸水中,充分溶解后用盐酸调PH值8.5左右,配置出0.01M Tris-HCl弱碱性溶液。
步骤2)
称取100mg多巴胺(Dopamine,Mw=153)加到步骤1)配置的100mL Tris-HCl溶液,充分溶解后,得到1mg/mL的多巴胺溶液,然后将手术缝合线Ethicon的PDSII,浸入到多巴胺溶液,并室温缓慢搅拌,以使多巴胺氧化自聚,约2-4小时,即在缝线表面形成一层聚多巴胺涂层,如图1所示,图2是涂有聚多巴胺涂层的PDSII缝合线与普通缝合线对比。
制备载基因纳米微粒
步骤1)
称取20mg PLGA(lactide∶glycolide=65∶35(n∶n),Mw=40000~75000)加入到2mL的二氯甲烷中得到10mg/mL的PLGA溶液;然后配置含有5μg基因纳米微粒的磷酸盐缓冲液得到基因溶液;称取75mg PVA(Mw=9000~2000000)分别加到5mL双蒸水中,制备25mg/mL的PVA溶液。
步骤2)
将步骤1)制取的PLGA溶液与基因溶液混合并用超声破碎仪超声1分钟(功率200W)产生乳状液,然后将乳状液加入步骤1)制取的25mg/mL的PVA水溶液中继续超声2分钟(功率200W),然后在搅拌器上持续搅拌24小时充分去除二氯甲烷,用离心机收集纳米微粒,用双蒸水洗涤两次(13000g离心5分钟),最后重悬到20mL双蒸水中,得到负载基因纳米微粒的纳米微粒。
通过动态光散射测定上述纳米微粒的粒径分布,结果如图2所示,图3是本发明实施例提供的纳米微粒粒径分布图,通过图2可以看出,纳米微粒的粒径分布在140~270nm。
制备聚多巴胺修饰的载基因纳米微粒的缝合线
将上述制备的聚多巴胺修饰的缝合线浸入上述制取的载基因纳米缓释微球的溶液中,室温搅拌3小时,然后双蒸水清洗3遍,晾干。通过扫描电镜检测缝合线上载纳米微粒情况,结果如图4所示,图4是载基因纳米微粒的Ethilon缝线的形态图,通过图4可以看出,Ethilon缝线表面均匀负载着纳米微粒。表明聚多巴胺修饰的缝线可以黏附纳米微粒,具有强烈的黏附性能。在本实施例中,载基因缓释纳米微粒缝线中的基因含量为0.1μg/cm。
不同离心力和不同离心时间分离出不同粒径分布区间的载基因纳米微粒。
将上述制备的载基因纳米微粒溶液通过不同离心力和不同离心时间来分离出不同大小的载基因纳米微粒,通过不同离心力和不同离心时间,可将载基因纳米微粒分成不同大小,粒径分布较窄的几个区间(260-950nm;180-420nm;110-240nm;40-100nm;5-50nm)。
载bFGF和VEGF基因纳米微粒纳米微粒缝合线的体外释放基因纳米微粒的规律
在37℃下,将实施例3制备的载bFGF和VEGF基因纳米微粒纳米微粒的Ethilon缝线加入到10mL的磷酸盐缓冲液中(0.01M,PH=7.4)缓慢搅拌,每隔1天进行取样,利用分光光度计分别测不同时间样品中的基因浓度,并绘制释放曲线,如图5所示,图5是载bFGF和VEGF基因纳米微粒缝线的体外释放曲线图。通过图5可以看出本发明提供的载bFGF和VEGF基因纳米微粒缝线具有良好的缓释效果,可以持续释放至少21天。
不同占比的黏附剂混合物形成的黏附涂层负载纳米微粒量和基因释放率。
称取1.21g三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,Mw=121.14)加到1L的双蒸水中,充分溶解后用HCl调PH值8.5左右,配置出浓度为0.01M Tris-HCl弱碱性溶液液。
称取不同质量的多巴胺,聚赖氨酸和明胶加到100mL Tris-HCl缓冲液,充分溶解后,得到1mg/mL的混合溶液,然后将手术缝合线Ethicon的5-0 Ethilon,浸入到混合溶液,并室温缓慢搅拌,约1-3小时,使黏附剂黏附到缝线上,然后将黏附剂修饰的Ethicon的5-0Ethilon缝合线浸入1mg/mL载基因纳米缓释微粒的溶液中,室温搅拌3小时,然后双蒸水清洗3遍,晾干,称取缝线重量,计算负载量(表A);将载基因缓释纳米微粒Ethibond缝线加入到10mL的磷酸盐缓冲液中(0.01M,PH=7.4)透析,检测21天的释放率(表A)。
载BSA-FITC纳米微粒缝线在组织中的分布情况
步骤1)
称取20mg PLGA(lactide∶glycolide=65∶35(n∶n),Mw=40000~75000)加入到2mL的二氯甲烷中得到10mg/mL的PLGA溶液;然后将20ug的EGFP质粒标记牛血清白蛋白(BSA-FITC)溶于100μL磷酸盐缓冲液得到BSA-FITC溶液;称取75mg PVA(Mw=9000~2000000)分别加到5mL双蒸水中,制备25mg/mL的PVA水溶液。
步骤2)
将步骤1)制取的PLGA溶液与BSA-FITC溶液混合并用超声破碎仪超声1分钟(功率200W)产生乳状液,然后将乳状液加入步骤1)制取的25mg/mL的PVA水溶液中继续超声2分钟(功率200W),然后在搅拌器上持续搅拌12小时充分去除二氯甲烷,最后用双蒸水洗涤两次(13000rpm离心5分钟),最后重悬到20mL双蒸水中,得到负载BSA-FITC的纳米微粒。
步骤3)
根据实施例1中制备聚多巴胺修饰的缝合线并浸入载BSA-FITC的纳米微粒的溶液中,室温搅拌3小时,然后双蒸水清洗3遍,晾干。得到载BSA-FITC的纳米微粒的缝合线,并用于缝合大鼠损伤跟腱,一周后,取跟腱组织进行冰冻切片,荧光显微镜观察BSA-FITC(绿色)在肌腱组织中的分布情况,如图5所示,图6是载BSA-FITC的纳米微粒的Ethilon缝合线在组织内分布情况。通过图6可以看出载BSA-FITC的纳米微粒的Ethilon缝线在组织内具有良好的扩散能力,将所载蛋白扩散到缝线周围组织。
载基因纳米微粒缝线促进大鼠损伤跟腱愈合
根据制备载成纤维细胞因子和血管内皮细胞生长因子(bFGF和VEGFA)基因纳米微粒Ethicon的5-0 Ethilon缝合线用于缝合大鼠损伤跟腱,观察其促进组织愈合情况,首先构建大鼠跟腱横断模型,清洁级SD大鼠,体质量(180±20)g。术前腹腔注射复合麻醉剂进行麻醉,无菌条件下,于大鼠右后肢行足跟纵切口,打开跟腱腱膜挑出跟腱,横向切断。随后将大鼠按照随机数字表法分为两组,每组8只:实验组:使用载基因纳米微粒纳米微粒5-0Ethilon缝合线进行缝合,对照组:使用未负载的Ethilon缝合线进行缝合,缝合方法为改良Kessler法,缝合后进行管型石膏固定1周。在术后1,2,3周进行取材,使用Instron 4411生物力学测定仪器进行手术趾肌腱断裂所需力量的生物力学测试以检测肌腱愈合强度。如图6所示,图7是载基因缓释纳米微粒Ethilon缝合线促进大鼠损伤跟腱愈合情况。通过图7可以看出载基因纳米微粒纳米微粒Ethilon缝合线能明显的促进跟腱愈合。
载基因纳米微粒纳米微粒缝线促进鸡屈肌腱愈合
根据制备载bFGF和VEGFA基因缓释纳米微粒Ethilon缝合线用于缝合鸡损伤屈肌腱,观察其促进愈合情况,首先构建鸡屈肌腱横断模型,选取来亨鸡作为实验动物,体质量3kg左右。术前肌内注射复合麻醉剂进行麻醉,俯卧位置于固定架上,鸡爪跖面向上,于大腿处用弹力绷带缠绕止血,碘伏消毒。在鸡爪的第三趾的掌面掌趾关节与近节趾间关节间行Bruner切口,切开皮肤、皮下组织后将皮瓣向两侧游离牵开,暴露并纵行切开A2滑车,切去趾浅屈肌腱,横断趾深屈肌腱。随机分为两组,每组8只,实验组:使用载bFGF和VEGFA基因纳米微粒5-0 Ethilon缝合线进行缝合,对照组:使用未负载的Ethilon缝合线进行缝合,缝合方法为改良Kessler法,最后用尼龙线间断缝合关闭切口,酒精纱布覆盖后包扎固定中趾于半屈曲位3周。在术后1,2,4,6周进行取材,使用Instron 4411生物力学测定仪器进行手术趾肌腱断裂所需力量的生物力学测试以检测肌腱愈合强度。如图7所示,图8是载基因纳米微粒纳米微粒Ethilon缝合线促进鸡损伤屈肌腱愈合情况。通过图8可以看出载基因纳米微粒纳米微粒Ethilon缝合线能明显的促进鸡屈肌腱愈合。
Claims (14)
1.医用缝合线,包括缝合线本体,其特征在于:在所述缝合线本体上覆盖有黏附涂层,在所述黏附涂层上吸附有载药层。
2.如权利要求1所述的医用缝合线,其特征在于:所述缝合线本体上覆有多层黏附涂层和载药层,所述黏附涂层和载药层依次交替设置。
3.如权利要求1或2所述的医用缝合线,其特征在于:所述黏附涂层为聚儿茶酚胺类化合物和/或多聚赖氨酸和/或明胶黏附剂。
4.如权利要求3所述的医用缝合线,其特征在于:所述聚儿茶酚胺类化合物为多巴胺和/或左旋多巴和/或去甲肾上腺素和/或其衍生物通过氧化自聚形成。
5.如权利要求1或2所述的医用缝合线,其特征在于:所述载药层,包括载药纳米微粒。
6.如权利要求5所述的医用缝合线,其特征在于:所述载药纳米微粒为载基因纳米微粒,所述基因至少包括可以促进组织愈合和/或抗菌消炎和/或抑制瘢痕粘连的基因,基因为产生蛋白,多肽或功能RNA的核苷酸序列。
7.如权利要求6所述的医用缝合线,其特征在于:所述载药层每层载基因量为0.05-50μg/cm,载药层的总厚度为10纳米到100微米。
8.如权利要求7所述的医用缝合线,其特征在于:所述基因在纳米微粒中的含量为0.1-20wt%,载基因纳米微粒的直径为5纳米到1000纳米。
9.医用缝合线的制备方法,其特征在于:
1)、将儿茶酚胺类化合物和/或多聚赖氨酸和/或明胶溶于PH值8.0-8.9的弱碱性溶液中,溶液浓度为0.1-10mg/mL,溶解温度为4-50度,制得黏附剂溶液;
2)、将缝合线浸泡在黏附剂溶液中,浸泡时间为0.5-5小时,浸泡温度为4-50度,使缝合线上形成黏附涂层;
3)、再将缝合线放入载药纳米微粒溶液中,载药纳米微粒溶液浓度为0.1-1000mg/mL,浸泡时间为0.5-5小时,浸泡温度为4-50度,使黏附涂层上吸附载药纳米微粒。
10.如权利要求9所述的医用缝合线的制备方法,其特征在于:重复步骤2和3,使缝合线上形成多层黏附涂层和载药纳米微粒层。
11.如权利要求9或10所述的医用缝合线的制备方法,其特征在于:所述载药纳米微粒为载基因纳米微粒。
12.如权利要求9或10所述的医用缝合线的制备方法,其特征在于:所述载药纳米微粒通过如下方法制得,
a)、将载体溶于有机溶剂,加到乳化剂中进行超声,得到初乳液;
b)、将所述初乳溶液进一步加到乳化剂中再次进行超声,得到复乳液;
c)、所述复乳液去除有机溶剂,得到纳米微粒;
d)、将纳米微粒溶于阳离子聚合物溶液,得到带正电荷的纳米微粒;
e)、将药溶液按比例加到修饰过的纳米微粒溶液中,形成载药纳米粒。
13.如权利要求12所述的医用缝合线的制备方法,其特征在于:所述有机溶剂包括氯仿和/或二氯甲烷;所述乳化剂包括聚乙二醇和/或聚乙烯醇;所述阳离子聚合物包括聚醚酰亚胺;所述载体包括聚乳酸-羟基乙酸共聚物。
14.如权利要求13所述的医用缝合线的制备方法,其特征在于:所述药溶液为基因溶液,所述基因包括促进组织愈合和/或抗菌消炎和/或抑制瘢痕粘连的各种基因。
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